THỐC MỠ HYDROCORTISON ACETAT Unguentum hydrocortisoni acetatas Là thuốc mỡ dùng ngoài, để bôi da có chứa hydrocortison acetat Chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu chuyên luận “Thuốc dùng da niêm mạc”( Phụ lục 1.12 ) yêu cầu sau : Hàm lượng hydrocortison acetat, C23H32O6 , từ 90,0 đến 110% so với hàm lượng ghi nhãn Định tính A Trong phần Định lượng, sắc ký đồ thu dung dịch thử phải cho pic có thời gian lưu tương ứng với thời gian lưu pic hydrocortison acetat sắc ký đồ thu dung dịch chuẩn B phưong pháp sắc ký lớp mỏng ( Phụ lục 5.4 ): Bản mỏng : Silica gel G Dung môi khai triển : Dichloromethan - ether - methanol - nước ( 77:15:8:1,2 ) Đối với thuốc mỡ có chứa 0,5% (kl/kl) hydrocortison acetat Dung dịch thử : Phân tán lượng chế phẩm có chứa 25 mg hydrocortison acetat ml hexan (TT) nóng, làm nguội,chiết với 10 ml methanol 90,0% lọc Dung dịch đối chiếu: Sử dụng hỗn hợp đồng thể tích dung dịch thử dung dịch có chứa 0,25% hydrocortison acetat chuẩn methanol (TT) Đối với thuốc mỡ có chứa 0,5% (kl/kl) 0,5% (kl/kl) hydrocortison acetat Dung dịch thử : Phân tán lượng chế phẩm có chứa mg hydrocortison acetat ml hexan nóng, làm nguội, chiết với 10 ml methanol 90,0% lọc Dung dịch đối chiếu : Sử dụng hỗn hợp đồng thể tích dung dịch thử dung dịch có chứa 0,05% hydrocortison acetat chuẩn methanol (TT) Cách tiến hành : Chấm riêng biệt µl dung dịch lên mỏng Triển khai sắc ký đến dung môi khoảng 15 cm, lấy mỏng ra, để khô không khí Phun thuốc thử màu dung dịch xanh tetrazolium (TT) Vết sắc ký đồ thu với dung dịch thử phải phù hợp vị trí màu sắc với vết sắc ký đồ thu với dung dịch đối chiếu Phép thử có giá trị sắc ký đồ thu với dung dịch đối chiếu cho vết chồng lên dung dịch thử dung dịch đối chiếu Định lượng Phương pháp sắc ký lỏng ( phụ lục 5.3 ) Tiến hành phương pháp sắc ký lỏng ( phụ lục 5.3) Pha động : Methanol 50% Thuốc mỡ có chứa 0,5% (KL/KL) Hydrocortison acetat Dung dịch chuẩn nội : Dung dịch Betamethason 0,5% methanol (TT) Dung dịch chuẩn: Hoà tan 25 mg hydrocortison acetat chuẩn 45 ml methanol (TT) thêm ml dung dịch chuẩn nội thêm nước vừa đủ 100 ml Dung dịch thử : Phân tán lượng chế phẩm có chứa khoảng 25 mg hydrocortison acetat 100 ml hexan (TT) nóng, để nguội chiết với 20 ml hỗn hợp chuẩn bị cách trộn thể tích methanol (TT) thể tích dung dịch natri clorid 15,0% Tiếp tục chiết lần nữa, lần 10 ml với dung môi chiết Gộp dịch chiết, thêm ml methanol(TT) thêm nước vừa đủ tới 100 ml Trộn lọc qua phễu lọc thuỷ tinh (Whatman GF/C phù hợp ) Thuốc mỡ có chứa 0,5% (kl/kl) 0,5% (kl/kl)hydrocortison acetat Dung dịch chuẩn: Hoà tan mg hydrocortison acetat chuẩn 45 ml methanol (TT) thêm ml dung dịch chuẩn nội betamethason 0,110% methanol (TT) thêm nước vừa đủ 100 ml Dung dịch thử: Chuẩn bị dung dịch thử theo cách trên, sử dụng lượng chế phẩm có chứa mg Hydrocortison acetat Trong trường hợp chuẩn bị dung dịch thứ cách dung dịch thử thêm ml dung dịch chuẩn nội thay cho ml methanol trước thêm nước tới vừa đủ 100 ml Điều kiện sắc ký : Cột thép không gỉ (10 cm x 5mm ) nhồi pha tĩnh C (5µm) (Spherisorb ODS thích hợp) Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 240 nm Tốc độ dòng 2ml /phút Thể tích tiêm: 20 µL Cách tiến hành: Tiến hành sắc ký dung dịch Tính hàm lượng hydrocortison acetat, C 23H32O6, có chế phẩm dựa vào diện tich pic thu từ sắc ký đồ dung dịch thử, dung dịch chuẩn hàm lượng C 23H32O6 hydrocortison acetat chuẩn Bảo quản Bảo quản bao bì kín , để nơi mát tránh ánh sáng Loại thuốc Corticosteroid Hàm lượng thường dùng 0,25%, 1%, 2,5%