ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN NGUYỄN THỊ HỒNG NHUNG NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG XẠ KHUẨN STREPTOMYCES ĐỂ SẢN XUẤT CHẾ PHẨM SINH HỌC PHÒNG TRỪ BỆNH NẤM PHẤN TRẮNG TRÊ
Trang 1ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
NGUYỄN THỊ HỒNG NHUNG
NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG XẠ KHUẨN STREPTOMYCES
ĐỂ SẢN XUẤT CHẾ PHẨM SINH HỌC PHÒNG TRỪ BỆNH NẤM PHẤN TRẮNG TRÊN CÂY ĐẬU TƯƠNG
VÀ DƯA CHUỘT
LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
Hà Nội, 2015
Trang 2ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
NGUYỄN THỊ HỒNG NHUNG
NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG XẠ KHUẨN STREPTOMYCES
ĐỂ SẢN XUẤT CHẾ PHẨM SINH HỌC PHÒNG TRỪ BỆNH NẤM PHẤN TRẮNG TRÊN CÂY ĐẬU TƯƠNG
VÀ DƯA CHUỘT
Chuyên ngành: Kỹ thuật môi trường
Mã số: 60 22 03 20 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC
Người hướng dẫn khoa học: TS Phạm Ngọc Dung
PGS.TS Đồng Kim Loan
Hà Nội, 2015
Trang 3LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi Tất cả các số liệu trên địa bàn nghiên cứu của luận văn là trung thực, chưa từng được ai công bố trong bất
kỳ luận văn nào khác và xin cam đoan rằng các thông tin trích dẫn trong luận văn đều được chỉ rõ nguồn gốc
Tôi xin cảm ơn mọi sự giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tôi thực hiện tốt luận văn này
Hà Nội, ngày 10 tháng 12 năm 2015
Học viên
Nguyễn Thị Hồng Nhung
Trang 4LỜI CẢM ƠN
Luận văn này được thực hiện tại bộ môn bệnh cây, viện Bảo vệ thực vật Để hoàn thành được luận văn này tôi đã nhận được rất nhiều sự động viên, giúp đỡ của nhiều cá nhân và tập thể
Trước hết, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Phạm Ngọc Dung và PGS.TS Đồng Kim Loan đã hướng dẫn tôi thực hiện nghiên cứu của mình
Xin cùng bày tỏ lòng biết ơn chân thành đến tập thể cán bộ bộ môn bệnh cây, viện Bảo vệ thực vật đã đem lại cho tôi những kiến thức bổ trợ, vô cùng có ích và tạo điều kiện tốt nhất giúp tôi thực hiện nghiên cứu của mình
Cũng xin gửi lời cám ơn chân thành tới, Bộ môn Công nghệ môi trường, Khoa Môi trường, Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo sau đại học - Đại học khoa học tự nhiên đã tạo điều kiện cho tôi trong quá trình học tập cũng như trong thời gian thực hiện nghiên cứu
Cuối cùng tôi xin gửi lời cám ơn đến gia đình, bạn bè, những người đã luôn bên tôi, động viên và khuyến khích tôi trong quá trình thực hiện đề tài nghiên cứu của mình
Hà Nội, ngày 10 tháng 12 năm 2015
Học viên
Nguyễn Thị Hồng Nhung
Trang 5MỤC LỤC
MỞ ĐẦU Error! Bookmark not defined
CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU Error! Bookmark not defined
1.1 Bệnh phấn trắng và tác hại của bệnh phấn trắng đối với cây trồngError! Bookmark not defined
1.1.1 Đặc điểm hình thái của nấm phấn trắng Error! Bookmark not defined
1.1.2 Tác hại của bệnh phấn trắng đối với cây đậu tương và cây dưa chuộtError! Bookmark not defined
1.2 Tình hình nghiên cứu trên thế giới Error! Bookmark not defined
1.2.1 Tình hình gây hại của bệnh phấn trắng trên cây trồngError! Bookmark not defined
1.2.2 Một số kết quả nghiên cứu về vi sinh vật đối kháng trong phòng trừ bệnhError! Bookmark not defined
1.3 Tình hình nghiên cứu trong nước Error! Bookmark not defined
1.3.1 Ý nghĩa kinh tế và tình hình gây hại của bệnh phấn trắng trên một số cây
trồng ở Việt Nam Error! Bookmark not defined
1.3.2 Một số kết quả nghiên cứu về vi sinh vật đối kháng trong phòng trừ bệnhError! Bookmark not defined
1.4 Các biện pháp phòng trừ bệnh nấm phấn trắngError! Bookmark not defined
1.5 Ưu điểm của phương pháp vi sinh vật Error! Bookmark not defined
CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨUError! Bookmark not defined
2.1 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu Error! Bookmark not defined
2.1.1 Đối tượng nghiên cứu Error! Bookmark not defined
2.1.2 Phạm vi nghiên cứu Error! Bookmark not defined
2.2 Hóa chất, dụng cụ và thiết bị thí nghiệm Error! Bookmark not defined
2.2.1 Hóa chất và nguyên liệu Error! Bookmark not defined
2.2.2 Dụng cụ và thiết bị Error! Bookmark not defined
2.3 Nội dung nghiên cứu Error! Bookmark not defined
2.3.1 Nghiên cứu sản xuất chế phẩm sinh học xạ khuẩn Streptomyces (SM19)Error! Bookmark not defined
2.3.2 Nghiên cứu thử nghiệm chế phẩm xạ khuẩn SM19 trong phòng trừ bệnh phấn
trắng trên cây đậu tương và dưa chuột Error! Bookmark not defined
2.4 Phương pháp nghiên cứu Error! Bookmark not defined
2.4.1 Phương pháp phân tích tài liệu thứ cấp Error! Bookmark not defined
2.4.2 Phương pháp khảo sát, lấy mẫu đồng ruộng và bố trí thực nghiệmError! Bookmark not defined
Trang 62.4.3 Phương pháp thực nghiệm trong phòng thí nghiệmError! Bookmark not defined
2.4.4 Nghiên cứu phương pháp bảo quản sản phẩm đã nhân sinh khối xạ khuẩnError! Bookmark not defined 2.4.5 Đánh giá khả năng phòng trừ bệnh của chế phẩm trong điều kiện nhà lướiError! Bookmark not defined 2.4.6 Đánh giá hiệu quả của chế phẩm trong phòng trừ bệnh trên đồng ruộngError! Bookmark not defined
2.5 Phương pháp tính toán và xử lý số liệu Error! Bookmark not defined
2.5.1 Phương pháp tính toán Error! Bookmark not defined
2.5.2 Phương pháp xử lý số liệu Error! Bookmark not defined
CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Error! Bookmark not defined
3.1 Kết quả nghiên cứu khả năng đối kháng của xạ khuẩn SM19 đối với nấm
phấn trắng gây hại đậu tương và dưa chuột trong phòng thí nghiệmError! Bookmark not defined
3.1.1 Xạ khuẩn đối với nấm phấn trắng gây hại đậu tươngError! Bookmark not defined
3.1.2 Xạ khuẩn đối với nấm phấn trắng gây hại dưa chuộtError! Bookmark not defined
3.2 Kết quả nghiên cứu sản xuất chế phẩm sinh học xạ khuẩn Streptomyces
SM19 Error! Bookmark not defined
3.2.1 Nghiên cứu chế phẩm dạng lỏng Error! Bookmark not defined
3.2.2 Kết quả nghiên cứu chế phẩm dạng bán xốp Error! Bookmark not defined
3.2.3 Khả năng tồn tại của xạ khuẩn SM19 trong chế phẩm sau bảo quảnError! Bookmark not defined 3.2.4 Hoàn thiện quy trình sản xuất chế phẩm đơn chủng SM19 dạng bán xốpError! Bookmark not defined
3.3 Nghiên cứu hiệu quả phòng trừ bệnh phấn trắng của chế phẩm xạ khuẩn
SM19 trong điều kiện nhà lưới Error! Bookmark not defined
3.3.1 Trên cây đậu tương Error! Bookmark not defined
3.3.2 Trên cây dưa chuột Error! Bookmark not defined
3.4 Nghiên cứu hiệu quả phòng trừ bệnh phấn trắng của chế phẩm xạ khuẩn
SM19 ngoài đồng ruộng Error! Bookmark not defined
3.4.1 Sơ lược về khu vực nghiên cứu thực nghiệm Error! Bookmark not defined
3.4.2 Ảnh hưởng của nồng độ chế phẩm đến khả năng diệt trừ bệnh phấn trắng
trong thí nghiệm diện hẹp Error! Bookmark not defined
3.4.3 Ảnh hưởng của nồng độ chế phẩm đến khả năng diệt trừ bệnh phấn trắng cho
thí nghiệm diện rộng Error! Bookmark not defined
Trang 73.4.4 Ảnh hưởng của thời điểm xử lý chế phẩm đến khả năng diệt trừ bệnh phấn
trắng cho thí nghiệm diện rộng Error! Bookmark not defined
3.4.5 Ảnh hưởng của số lần xử lý chế phẩm đến khả năng diệt trừ bệnh phấn trắng
cho thí nghiệm diện rộng Error! Bookmark not defined
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Error! Bookmark not defined TÀI LIỆU THAM KHẢO 9 PHỤ LỤC Error! Bookmark not defined
Trang 8DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT
BVTV
CT1
CT2
CT3
CT4
CT5
CSB
CV
HQ
HQPT
N
SXL
TXL
TLB
VSV
: Bảo vệ thực vật : Công thức 1
: Công thức 2 : Công thức 3 : Công thức 4 : Công thức 5 : Chỉ số bệnh : Độ biến động của thí nghiệm (%) : Hiệu quả
: Hiệu quả phòng trừ : Ngày
: Sau xử lý : Trước xử lý : Tỷ lệ bệnh : Vi sinh vật
Trang 9DANH MỤC BẢNG
Bảng 3.1 Hiệu quả phòng trừ của dòng xạ khuẩn đối kháng SM19 đối với nấm
phấn trắng trên cây đậu tương Error! Bookmark not defined
Bảng 3.2 Hiệu quả phòng trừ của dòng xạ khuẩn đối kháng SM19 đối với nấm
phấn trắng trên cây dưa chuột Error! Bookmark not defined
Bảng 3.3 Ảnh hưởng của lượng bột đậu trong môi trường nhân nuôi đến khả năng
nhân sinh khối của xạ khuẩn SM19 Error! Bookmark not defined
Bảng 3.4 Ảnh hưởng của các loại môi trường dạng lỏng nhân nuôi đến khả năng
nhân sinh khối của xạ khuẩn SM19 Error! Bookmark not defined
Bảng 3.5 Ảnh hưởng của tần số vòng lắc đến sự phát triển của xạ khuẩn SM19
Error! Bookmark not defined trong môi trường nhân sinh khối Error! Bookmark not defined
Bảng 3.6 Ảnh hưởng của thời gian lắc đến sự phát triển của xạ khuẩn SM19 trong môi
trường nhân sinh khối Error! Bookmark not defined
Bảng 3.7 Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển của xạ khuẩn SM19 trên môi
trường nhân sinh khối Error! Bookmark not defined
Bảng 3.8 Ảnh hưởng của độ pH đến sự phát triển của xạ khuẩn SM19 trên môi
trường nhân sinh khối Error! Bookmark not defined
Bảng 3.9 Ảnh hưởng của các loại môi trường nhân nuôi dạng bán xốp đến khả
năng nhân sinh khối của xạ khuẩn SM19 Error! Bookmark not defined
Bảng 3.10 Khả năng tồn tại của xạ khuẩn SM19 trong chế phẩm đơn chủng (SM19)
sau bảo quản Error! Bookmark not defined
Bảng 3.11 Hiệu quả phòng trừ của dòng SM19 đối với bệnh phấn trắng trên cây
đậu tương trong nhà lưới Error! Bookmark not defined
Bảng3.12 Hiệu quả phòng trừ của dòng SM19 đối với bệnh phấn trắng trên cây
dưa chuột trong nhà lưới Error! Bookmark not defined
Bảng 3.13 Hiệu quả của chế phẩm SM19 đối với bệnh phấn trắng trên cây dưa
chuột ở các nồng độ khác nhau (thí nghiệm diện hẹp)Error! Bookmark not defined
Trang 10Bảng 3.14 Hiệu quả của chế phẩm SM19 đối với bệnh phấn trắng trên cây đậu
tương ở các nồng độ khác nhau (thí nghiệm diện hẹp)Error! Bookmark not defined
Bảng 3.15 Hiệu quả của nồng độ chế phẩm SM19 đối với bệnh phấn trắng trên cây
đậu tương ở diện rộng Error! Bookmark not defined
Bảng 3.16 Hiệu quả của chế phẩm SM19 đối với bệnh phấn trắng trên cây đậu
tương ở các thời điểm phun khác nhau (thí nghiệm diện rộng)Error! Bookmark not defined
Bảng 3.17 Hiệu quả của số lần phun chế phẩm SM19 đối với bệnh phấn trắng trên
cây đậu tương ở diện rộng Error! Bookmark not defined
Trang 12TÀI LIỆU THAM KHẢO
A Tài liệu tiếng Việt
1 Ngô Đình Quang Bính (2005), Vi sinh vật học công nghiệp, Viện sinh thái và
tài nguyên sinh vật, Trung tâm khoa học Tự nhiên và công nghệ Quốc gia, Hà Nội, tr.53 - 71
2 Phan Thành Dũng (2004), Kỹ thuật Bảo vệ thực vật cây cao su, Nhà xuất bản
Nông nghiệp, Tp Hồ Chí Minh, trang 8-11
3 Bùi Thị Việt Hà (2006), Nghiên cứu xạ khuẩn sinh chất kháng sinh chống nấm
gây bệnh thực vật ở Việt Nam, Luận án tiến sĩ sinh học, Hà Nội
4 Trần Văn Hâu, Trần Sĩ Hiếu, Lê Thị Thanh Thủy (2008), Sản xuất xoài rải vụ
theo hướng GAP tại huyện Cao Lãnh, Tỉnh Đồng Tháp, Báo cáo hội thảo
GAP, Bình Thuận
5 Vũ Triệu Mân, Lê Lương Tề cùng nhiều tác giả khác (2007), Giáo trình Bệnh
cây nông nghiệp, Nhà xuất bản Nông nghiệp, Hà Nội
6 Dương Minh, Võ Thanh Hoàng, Lê Thanh Phong (1996), Chuyên mục cây
xoài, Nhà xuất bản Nông nghiệp, Hà Nội
7 Lê Văn Quân, Đỗ Văn Chuông, Trần Thanh Phong, Trương Quốc Luận (2008),
Kỹ thuật trồng xoài, Trung tâm khuyến nông Tiền Giang, Tiền Giang
8 Đoàn Thị Thanh, Phạm Ngọc Dung, Nguyễn Hồng Tuyên, Vũ Đình Phú, Nguyễn Thúy Hạnh (2010), “Nghiên cứu bệnh phấn trắng trên cây cao su ở
tỉnh Bình Phước, Đăk Lăk và Quảng Trị”, Tạp chí Bảo vệ thực vật, số 3 (231),
trang 27-31
9 Phạm Văn Toản (2003), Khả năng sử dụng hỗn hợp vi sinh vật làm phân bón
chức năng cho một số cây trồng nông nghiệp, công nghiệp và lâm nghiệp, Báo
cáo Hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc, Hà Nội 12/2003, 127 – 131
10 Ngô Thị Xuyên (2005), “Bệnh hại rau trồng trong nhà lưới và biện pháp phòng
trừ bằng thuốc hóa học”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật nông nghiệp, Tập 3 số 2,
trang 119-124
11 Ngô Thị Xuyên và Nguyễn Văn Đĩnh (2006), “Nghiên cứu tình hình bệnh hại
cà chua trong nhà lưới và ngoài đồng ruộng năm 2003-2005 tại Hà Nội”, Tạp
chí khoa học kỹ thuật, số 4+5/2006, Trang 88-9, Hà Nội
Trang 13B Tài liệu tiếng Anh
12 Akhtar, K.P., and Alam, S.S (2000), “Powdery mildew of mango”, Nuclear
Institute for Agriculture & Biology, Pakistan, Pakistan Journal of Biological Science 3(7): 1119 – 1122
13 Aravind, R., Kumar, A., Eapen, S.J., Ramana, K.V (2009), Endophytic
bacterial flora in root and stem tissues of black pepper (Piper nigrum L.) genotype: isolation, identification and evaluation against Phytophthora capsici, Indian Institute of Spices Research, Calicut, Kerala, India, p.1
14 Bakker, P.A.H.M., Pieterse, C.M.J., and van Loon, L.C (2007), “Induced
systemic resistance by fluorescent Pseudomonas spp”, The American
Phytopathologycal Society, Utrecht University of The Netherland, 97: p 239 –
243
15 Boesewinkel HJ (1982b), “The identity of Oidium caricae and the first recording on papaya, mountain papaya and babaco in New Zealand”, Fruits
37: 473-477
16 Chung, W., Wu, R., Hsu, C., Huang, H., and Huang, J (2011), Application of
antagonistic rhizobacteria for control of Fusarium seedling blight and basal rot of lily Australasian Plant Pathology, Vol 40, 3: 269-276
17 Diby, P and Sarma, Y.R (2006), “Antagonistic effects of metabolites of
Pseudomonas fluorescens strains on the different growth phases of Phytophthora capsici, foot rot pathogen of black pepper (Piper nigrum L.)”, Arch Phytopathol Plant Protect., 39, p 113–118
18 Hasama W, Kato T, Yoshida S (2000), “Resistance reaction of soybean
cultivars in Oita Prefecture against powdery mildew caused by Oidium sp (Erysiphe polygoni type) (in Japanese)”, Kyushu Pl Prot Res, 46:22-26
19 Galindo, J.J (1992), “Prospects for biological control of cacao”, In: Cocoa
pest and disease management in Southeast Asia and Australasia, Rome, FAO
Plant Production and Protection, p 112
20 Kyung Seok Park, Paul Diby, Kim Yong Ki, Nam Ki Woong, Lee Yong Kee,
Choi Hyo Won, Lee Sang Yeob (2008), Induced systemic Resistance by
Trang 14Bacillus vallismortis EXTN-1 suppressed bacterial wilt in tomato caused by Ralstonia solanacearum, The Korean Society of Plant Pathology, Plant
Pathology, J.23 (1)
21 Limkaisang S, Cunnington JH, Liew KW, Salleh B, Sato Y, Divarangkoon R, Fangfuk W, To-anun C, Takamatsu S, 2006 Molecular phylogenetic analyses reveal a close relationship between powdery mildew fungi on some tropical
trees and Erysiphe alphitoides, an oak powdery mildew Mycoscience 47:
327-335
22 Limkaisang S, Kom-un S, Furtado EL, Liew KW, Salleh B, Sato Y, Takamatsu S, (2005), Molecular phylogenetic and morphological analyses of
Oidium heveae, a powdery mildew of rubber tree, Mycoscience 46: 220-226
23 McCain (1994), Powdery mildew, HortScrip, Univ., Calif Coop Ext Marin
County
24 Moshe Reuveni (2001), “Activity of trifloxystrobin against powdery and
downy mildew diseases of grapevines”, Canadian Jounal of Plant Pathology,
Volum 13, issue 1, p 52 – 59
25 Motokura Yoichi, Takoda Sakuya, Fujiwara Yuji, Kobashigawa Yoshikaza,
Kimura Shigeru (2004), Occurrence of powdery mildew of orange jasmine
(Murraya paniculata) in Japan, Japan Science and Technology Agency, 2004,
Vol.; No.40; Page.113-118
26 Nofal, M.A., and Haggag, W.M (2005), Integrated management of powdery
mildew of mango in Egypt, Department of Plant Pathology, Division of Agricultural Research and Biology, National Research Center, Egypt
27 Nomura Y (1997), Taxonomical study of Erysiphaceae of Japan, Yokendo,
Tokyo
28 Shaw DE (1967), “Powdery mildew of rubber in Papua”, Papua and New
Guinea Agric J 19:140–146
29 Shin HD (2000), Erysiphaceae of Korea, Nat Inst Agric Sci Tech, Suwon,
Korea
30 Sijaonaa MER, Clewerb A, Maddisonc A and Mansfielda JW (2001),