Hướng dẫn nghiên cứu bệnh vi khuẩn thực vật v p izrainxki; hà minh trung, nguyễn văn hành dịch pdf

HNG DN NGHấN CU, BNH V KHUN THC VT V p IZRAINXKI Giỏo s, tin s sinh vt hc (Ch biờn) H MINH TRUNG, NGUYN VN HNH dch NG HNG DT hiu ớnh Nh xut bn Nụng nghip H Ni Nh xut bn Mớr Maxcva đ I.ũ'i gii thiu Bnh vi khun thc vt l nhúm bnh rt ph bin v ó gõy nhiu tỏc hi cho ngh trng trt ú- nhiu nc trờn th gii Lch s nụng nghip ó ghi li cỏc trn dch bnh loột cam chanh vi khun Xanthomonas citri, dch bnh vi khun cõy dõu tm Bacterium mori V V Cỏc bnh thụi vi khun cỏi bp, c chua v cỏc loi rau cỳ khỏc ó gõy nhiu rc roi cho vic bỏo quỏn, phõn phoi v chuyờn ch rau quỏ " nc ta, nhng nm 1970 1975, bnh bc lỏ lỳa vi khun Xanthomonas oryzae ó gõy nhiu thit hi nghiờm trng cho mt s ging lỳa mi, c bit l ging lỳa NN8 cy v Bnh ph biờn & hu khp cỏc ncri trng lỳa, nhng gõy hi nng cỏc tớnh ng bng ven bin nhng ni ny, ging lỳa NN8 l mt nhng giụng cú tim nng cho nng sut cao v ó t c nhng nng sut 60 70 t/ha v lỳa xuõn nhiu ni, nhng v tỏc hi cỳa vi khun gõy bnh bc lỏ nờn r nhiu hp tỏc xó nụng nghip thuc cỏc tnh H Nam Ninh v Thỏi Bỡnh, nng suót chl cũn li trờn di 20 t/ha Bnh loột cam chanh cng ó gõy nhiu tr ngi cho vic phỏt trin loi cõy n qu quý ny v lm cho vic xut cam chanh gp khú khn ụi vi mt sụ loi cõy trng, nht l cỏc loi cõy trng cn nh cỏc loi u , rau, khoai tõy, bụng, thuc lỏ v v iu kin khớ hu nhit i ỏm ca nc ta, cỏc loi vi khun l nguyờn nhõn ch yờu gõy cỏc hin tng thoi gc, thi r, hộo cõy, cht r , lm cho cõy cht nhiu khụng m bo mt v nh hng rt ln n nng suõt Trong cỏc loi bnh gõy hộo, thụi cht cõy trng, mt sụ loi vi khuỏn thng phỏt trin chung vi nhiu loi nóm nờn thng tỏc hi rt ln v rt nguy him v quỏ trỡnh din bin cỳa bnh xy nhanh, bin phỏp phũng tr khú m bỏo hiu qu tt Tỡnh hỡnh gõy hi ca cỏc loi vi khun nh ó nờu cho thy vic ph biờn nhng hiu bit v vi khun, v bnh vi khun thc vt cng nh vic nõng cao kiờn thc cho cỏn b v ngi trc tip sn xuõt cú nhng bin phỏp phự hp, cú hiu qu nhm ngn nga tỏc hi cỳa cỏc loi bnh cõy, vi khun gõy l mt yờu cu bc thit Cho n nay, cỏc loi bnh vi khun thc vt ớt nhiu ó c cp n mt sụ ti liu v sỏch bỏo tiờng Vit xut bn nc, nhng ti liu cũn phõn tỏn v quỏ ớt i Vỡ vy, vic cho dch v in cun sỏch ôHng dn nghiờn cu bnh vi khun thc vtằ, mt ti liu tng ụi c bỏn v y ỳ v nhúm bnh hi ny, cú ý ngha quan trng vic khc phc nhng thiu sút v ti liu cỳa chỳng ta lỳc ny Ni dung cun sỏch trung vo cỏc chỳ yờu sau õy: Gii thiu v xỏc nh v trớ phõn loi ca cỏc loi vi khun gõy bnh hi cõy Phc v ni dung ny, sỏch dnh cho-ng: ôPhõn loi vi khun gõy bnh hi cõyằ v ôH vi sinh vt biu sinhằ Núi v quỏ trỡnh nhim bnh Trong phn ny sỏch gii quyt mt s võn cú liờn quan n cỏc hin tng cng sinh, ký sinh, cỏc mi quan h gia vi khun gõy bnh v cõy, cỏc tỏc ng v nh hng ca cỏc iu kin ngoi cỏnh n quỏ trỡnh nhim bnh i sõu vo c im ca mi quan h gia cỏc loi vi khun gõy bnh cõy v cỏc cõy ký ch Sỏch trỡnh by tng i chi tit v cỏc hot ng men ca vi khun gõy bnh, c bit l men phõn hy pectin v xenlulo, i sõu vo cỏc cht khỏng sinh cỏc phitonxit, v khớ ca cõy dựng chừng vi khun Gii thiu cỏc phng phỏp, cỏc thao tỏc, quy tc v cỏc chl tiờu cn tuõn th v ỏp dng quỏ trỡnh nghiờn cu cỏc loi vi khun gõy bnh cõy Cựng vi nhng ti liu khỏc v bnh cõy ó c xuót bỏn, cuụn sỏch ny chc chn s gúp thờm ti liu cỏn b bỏo v thc vt, cỏn b trng trt v nhng ngi hot ng nụng nghip cỏc lnh vc sn xut, nghiờn cu khoa hc v o to cỏn b cú thờm diu kin nõng cao trinh , rốn luyn k thut tay ngh, gii quyt mt cỏch khoa hc cỏc ca bnh vi khun hi cõy Nhng ngi dch ó cú nhiu c gng din t nhng khỏi nim v ni dung khoa hc mt cỏch tng oi chớnh xỏc v hp lý Tuy nhiờn khụng th trỏnh nhng thiờu sút nht nh vic trinh by nhng ý kin ca tỏc gi qua quỏ trỡnh phiờn dch Xin trõn trng gii thiu vi bn c G iỏo s n g Hng D t Li núi u Tp sỏch ny trỡnh by nhng c bỏn cỳa khoa hc bnh cõy v cỏc bnh vi khun hi cõy Trong lỳc biờn son, cỏc tỏc giỏ ó a vo sỏch nhng chng mi cha cú ln xut bn th nhõt v th hai: tớnh chong chu cỳa vi khun gõy bnh cõy i vi khỏng sinh, sinh húa dch thc vt, ngha ca cỏc axit nucleic bnh vi khun ca cõy, nuụi cõy mụ cõy ú l nhng chớnh cụng tỏc nghiờn cu bnh cõy hin Sỏch dnh cho cỏc k s nụng nghip, sinh viờn, nghiờn cu sinh v cỏc nh nghiờn cu bnh vi khun ca cõy trng Sỏch c biờn son t nhng cụng trỡnh nghiờn cu ca cỏc tỏc gi Nga v nc ngoi v cỏc lnh vc vi khun gõy bnh cõy Cỏc nh biờn son u l nhng ngi trc tip nghiờn cu bnh vi khun Ti liu gii thiu vi c gi v nghiờn cu bnh v vi khun gõy bnh, chn oỏn v lõy bnh nhõn to cho cõy trng Cỏc vi khun c gi theo tờn mi nht da theo nhng kt quỏ nghiờn cu ton din v chỳng Vớ d, tờn loi jPseudomonas v Xanthomonas khụng nhng ch cho khỏi nim v c tớnh ca loi m cũn cho phộp nm c nhng c tớnh ch yu ca nhng vi khun ú Mt sụ vi khun nhót l mt so mi phỏt hin khụng c a vo h phõn loi mi nhõt, cú l vỡ chỳng cha c nghiờn cu y Cỏc vi khun gõy khụi u cho cõy chiờm mt v trớ c bit T nm 1952, cỏc tỏc giỏ ó trinh by quan im ca mỡnh khụng thng nhót vi bỏn giỏm nh Bergey Theo chỳng tụi, khụng cn tỏch cỏc vi khun ú vo loi c bit Agrobacterium, v B tumefaciens v B rhizogenes khụng khỏc my vi cỏc vi khun loi Rhizobium Do ú gi chỳng l Rh tumefaciens v Rh rhizogenes cú l ỳng hn Da vo cỏc c tớnh vi khun chỳng tụi cng ngh i tờn vi khun B Steward E F Smith thnh Shigella steward (E F Smith) (Izrainxki, 1960) Cỏc tỏc gi ca sỏch ny cũn gp khú khn cỏ vic xỏc nh c tớnh sinh húa ca vi khun v lp bỏng, vỡ c tớnh ú khụng n nh cỏc chng vi khun Thờm vo ú, cỏc nh nghiờn cu, tin hnh thớ nghim khụng cựng mt thi gian, nờn ỏnh giỏ khỏc cỏc c tớnh sinh húa ca nhiu vi khun Xuõt phỏt t ú, chỳng tụi ó s dng cỏc kt quỏ thớ nghim cỳa mỡnh v tham khỏo ti liu ca Elliott (1961) Di õy l tờn cỏc chuyờn gia ó tham gia vit cỏc phn sỏch: Tin s sinh vt hc V p Izrainxki ôPhõn loi vi khun gõy bnh cõyằ, ôHc thuyt v nhim bnhằ, ôMin dchằ Tin s sinh vt hc V p 1/rainxki v X N Skliaro ôPhng phỏp huyờt nghiờn cu vi khun gõy bnh cõyằ Tin s sinh vt hc K I Bentiucụva ôLch s nghiờn cu bnh vi khun thc vt Liờn Xụằ, ôCỏc chõt khỏng sinh v phitonxitằ Tin s sinh vt hc L V Metlitxki v phú tin s sinh vt hc o L Ozexcừpxkaia ôSinh húa dch thc vt vi bnh truyn nhimằ Tin s sinh vt hc Metlixki v phú tin s sinh vt hc N p Korableva ôCỏc axit nucleic v vai trũ ca chỳng bnh vi khunằ Phú tin s sinh vt hc Starighina ôH vi sinh vt biu sinhằ Phú tiờn s sinh vt hc N A Shishelova ôMen ca vi khun bnh cõy phõn hy chõt pectin v xenluloằ Phú tin s sinh vt hc N X Nụvicụva ôBacteriophag chng vi khuỏn gõy bnh cõyằ Phú tin s sinh vt hc N D Buianụva ôTớnh chng chu ca vi khuỏn bnh cõy i vi khỏng sinhằ Cỏc phú tin s sinh vt hc L p Starighina, z, Kh Pesina v z X Actemieva ôCỏc phng phỏp nghiờn cu vi khuỏn bnh cõyằ Phú tin s sinh vt hc X D Tatarinova ôC s nghiờn cu huyờt vi khunằ Lch sir nghiờn cu bnh vi khun thrc vt i ằ ô r Liờn Xụ Bnh vi khun hi cõy ó v ang l mt nhng cap bỏch nht ca bo v Thc vt M s Vụrụnin l ngi u tiờn phỏt hin nụt sõn vi khun gõy trờn u Lupin T ú ó hỡnh thnh quan im v khỏ nng kớ sinh mụ thc vt cỳa vi khun Tuy nhiờn, nc Nga trc Cỏch mng cú mt sụ nh cụng trỡnh nghiờn cu v vi khun Chỳng mang tớnh cht tn mn v khụng cú h thng " õy cú th nờu lờn cụng trỡnh ca I Trgiờbinxki v bnh c ci ng, ca A A Pụtepnhia v bnh da chut v cỳa I L Xecbinp v cỏc bnh vi khun thc vt khỏc Sau Cỏch mng thỏng 10 t 1920 n 1930 cỏc ti liu v bnh vi khun hi cõy ó tng lờn rừ rt cỏ v s lng cng nh phm vi nghiờn cu Mt sụ cụng trỡnh nghiờn cu u tiờn ca V p Izrainxki, G K Buagvis, V I Vzụrụp, L Kụkhanpxkaia, A A Popụva ó c xut bỏn T nm 1930, cựng vi vic thnh lp cỏc Vin v mng li Trm, Tri thớ nghim vic nghiờn cu bnh vi khuỏn c y mnh hn v trung vo bnh giỏc ban bụng, cỏc vi khun thuừc lỏ, thuc lo (M X Miller, L KụKhanụpxkaia, E X Kvachnina, V I Vzụpụp v D I Tvecxkaia); bnh m mt cua (K I Bentiucụva, o p Lờbờeva, B A Xamosvetova, M N Medish, N X Nụvicụva) Bnh vi khun hi bụng c bt u nghiờn cu t nm 1903 (Sreder) Nm 1963 v 1964 ó xut bn cỏc chuyờn kho v bnh giỏc ban ca A A Babai v G I Lagazidze Cỏc nh bnh cõy M I Shtutre, V I Vzụrp, V p Izrainxki, V p Muraviep, K I Bentiucụva, X p Morotkopxki ó thc hin nhiu cụng trỡnh iu tra, giỏm nh v phũng tr bnh c ci ng A N Kletretụp E F Berezova v M F Saptrencụva ó xỏc nh c vi khun Bac Maocrans l nguyờn nhõn gõy bnh kit sc lanh, v xõy dng c nhng bin phỏp phũng chụng bnh Trong cỏc bnh vi khun cõy lng thc, bnh hi lỳa mỡ, nht l bnh m en c trung nghiờn cu nhiu hn c (A A Iatrepxki, 1925; R M Galatrian, V p Izrainxki; T V Trixtoxecụva; V A Agarkp, 1950) V K Zajurilo (1935), R M Galatrian (1935, 19397 1947), V B Enken (1939,1949), z X Actemieva (1938), K Bentiucụva ó tin hnh nghiờn cu bnh vi khun u cụve v u H Lan Cỏc nh bnh cõy cỳa Vin vi sinh vt v Virut hc Ucraina v Vin nghiờn cu cõy cú du ó phỏt hin v giỏm nh cỏc bnh vi khun hi u tng I p Javoroncụva, M N Roighina, p A Pờtrova, A A Babaina, A p Pờtroxiana, v K I Bentiucụva ó nghiờn cu bnh vi khun hi nhúm cõy u lõu nm Cỏc bnh vi khun hi c chn nuụi cha c nghiờn cu nhiu Xin dón õy mt sụ cụng trỡnh ca K I Bentiucụva v E A Bacalinxkaia v bnh thi thõn; ca N A Shishelụvaia v M G Prixiaghina (1960) v bnh c xu ng; N A Kabankina v bnh cao lng o D Bờlụva, M V Kiriencụ, L V Rojalin, K I Bentiucụva, N G Khlụtni, M X unhin, Sh M Muxaep, V p Izrainxkii, z X Actimieva, E A Oxnhixkaia, K N Iatxnhina ó cú nhiờu cụng trỡnh nghiờn cu nhúm bnh vi khun khoai tõy v c chua F I Gocienkụ, M V Gorlenkụ, L p Starighina, N A Shishelụva, N p Javorụncụva ó tin hnh cỏc nghiờn cu bnh vi khun bp cỏi v da chut Trong s cỏc bnh vi khun hi cõy n qu, bnh gõy u bu r c trung nghiờn cu nhiu nht, V p Izrainxki l ngi u tiờn ó phõn lp c B tumefaciens gõy bnh ny A A Potepnhia, L Xecbinp, p N avp, B V Vờrờsaghin ó nghiờn cu vi khun hi lờ v tỏo V I Vzụrp, I L Xecbinụp, A K Panụxian, R o Miazabekian ó giỏm nh cỏc bnh vi khun hi m, mn v anh o V p Izrainxki, G V Trixtoxecụva F V Khờtagurụva v Iu I Snõye ó nghiờn cu nhiu mt v Ps Citriputeale hi cam chanh A K Vaxincụva ó xut bỏn mt tỏc phm v bnh cht hộo sm ca cỏc cõy n qu ht cng Cho n vic nghiờn cu bnh vi khuõn thc vt ó tr thnh mt chuyờn ngnh nghiờn cu bỏo v thc vt Hng lot vi khun gõy bnh cõy ó c phỏt hin v giỏm nh Tp hp c nhiu c im bnh lý, c tớnh sinh hc v sinh thỏi ca bnh Trờn c s ú ó xõy dng c hng lot cỏc bin phỏp phũng tr bnh hiu qu cao Phõn loi vi khun gõy bnh cõv Cỏc nh nghiờn cu ó da vo nhiu c im phõn loi xỏc nh vi khun l mt b phn ca gii thc vt, nõm v tỏo l nhng sinh vt cú h hng gn gi nht vi chỳng So sỏnh vi cỏc i biu khỏc ca gii thc vt v ng vt, vi khun c xp riờng thnh b, h v loi mun hn Cú rt nhiu lý gii thớch iu ny, õy nờu nhng lý chnh Vi khun l nhng sinh vt d bin i nht so vi cỏc th sng khỏc, ng thi tớnh bin i ny ph thuc vo iu kin ngoi cnh nhiu hn thc vt v ng vt Ngoi ra, t thi Past v Coch chỳng ta mi nhn c nhng phng phỏp khoa hc nghiờn cu vi khun Tuy nhiờn, c sau ó cú nhng phng phỏp ny, ngi ta cng ó thy rừ l h thụng mt cỏch chớnh xỏc th vi khun khụng cú nhng c im m cỏc nh thc vt hc hoc ng vt hc thng s dng phõn loi thc vt bc cao v ng vt Nhc im ny th hin rừ nht únhng c im hnh thỏi bờn ngoi cỳa vi khuỏn, phn ln gii hn mt s dng cu khuỏn, trc khun, phy khun v xon khun Sinh sỏn hu tớnh l mt c im quan trng phõn loi thc vt v ne vt cng khụng cú vi khuỏn, ú ó gõy tr ngi nhiu cho vic nghiờn cu cỏc võn phõn loi chỳng Nhng lý k trờn cng nh nhng khú khn s nờu sau ny ó cỏn tr vic tỡm hiu v trớ phõn loi cỳa vi khuỏn gia cỏc vi sinh vt khỏc v xỏc nh cỏc nhúm phõn loi ni b chỳng Mt thi gian di, cụng tỏc phõn loi, cỏc nh nghiờn cu hu nh ch s dng nhng c im hỡnh thỏi, hỡnh dng v ln cỳa t bo, cú hoc khụng cú nha bo v bo t, hỡnh dng, ln v v trớ ca chỳng t bo, c im cỳa lụng roi, s cú mt ca cỏc ht d nhim, hin tng bt mu vi cỏc thuc nhum phõn húa (theo gram, giỏm nh tớnh chu ng axit v mt sừ phng phỏp khỏc), hỡnh dng cỏc khun lc trờn cỏc mụi trng khỏc V V Sau ny ó bt u s dng cỏc c im v sớnh lý, sinh húa nh : quan h ca vi khun vi oxi v nhit , s hỡnh thnh cỏc sc tụ, lm lúng gờlatin, to thnh axit v sinh hi vi cỏc loi ng, biờn húa sa quỏ trỡnh sinh tr-ng ca vi khun, s hỡnh thnh cỏc cht indol, hydro sunfua v amoniac, kh nitrat thnh nitrit hoc nit t Tuy nhiờn tt cỏ cỏc c im k trờn, nht l c im hnh thỏi, thng khụng th tin cy xỏc nh phõn loi cỏc nhúm Trong nghiờn cu c tớnh ca s hỡnh thnh lụng roi, vin s V N Sapụsnhicụp ó nờu mt cõu hi hon ton hp lý, ôCỏi gỡ l bc nht kh nng di ng hay khụng di ngằ Vin s ó ly vi khuỏn axờtic lm vớ d Loi khuõn ny cũn non chuyn ng c, nhng gi thỡ mõt kh nng ny, V N Sapụsnhicụp gi s rng tin húa cỳa vi khun cng cú th phỏt trin theo hng ny hoc hng khỏc V hlnh dng ca tờ bo cng vy, cú th núi mt cỏch tng i rng cỏc cu khun cú th xut thõn t trc khun, hoc ngc li trc khun t cu khun, kh nng hỡnh thnh bo t mt loi vi khun cng khụng n nh, cỏc c im sinh lý cng khụng th luụn luụn l ch da chc chn cho vic phõn loi vi khun Vớ d Azotobacter cú th c nh nit ca khớ quyn, nhng mt s vi sinh vt khỏc cng cú kh nng ny, chng hn vi khuan Cloư stridium pasterianum hoc tỏo xanh phõn loi vi khun c chinh xỏc, d nhiờn phi s dng c im hỡnh thỏi v sinh lý cỳa chỳng xỏc nh loi v phõn bit chớnh xỏc vi khun, cỏc nh nghiờn cu ngh mt sụ phng phỏp nh: phng phỏp huyt thanh, thc khun th, v gn õy nht l phng phỏp khỏng sinh (N A Kraxinnhicp) Tt cỏ nhng phng phỏp k trờn cng ch cú giỏ tr tng ụi Phng phỏp huyt khụng th s dng mi trng hp, vỡ nhiu vi khun cựng mt loi nh E carotovora v E phytophtora, nhng li cú nhng dng hỡnh huyờt khụng ng nht (Stapp v cỏc tỏc giỏ khỏc) Phng phỏp thc khun th cng khụng th l phng phỏp tng hp, cú nhng vi khun khỏc loi nhng li cú cựng mt thc khun th chung, vớ d Ps xanthochlora, Ps phaseolicola, Ps hold, Ps mori, Ps citriputeale, v V Mt s vi khun khỏc, V d Escherichia coli, cú th cú nhiu thc khun th cho nhiu chỳng cựng mt loi Hn thờ na, nhng cụng trỡnh nghiờn cu gn õy nht ó xỏc nh rng hu ht mi trng hp, mt loi thc khun th u cú th cú nhiu chựng, phõn bit vi theo mc hũa tan i vi cựng mt chng thuc mt loi vi khun Trong cỏc chng thc khun th k trờn li cú mt sụ cú kh nng hũa tan mt vi chỳng ny nhng li khụng hũa tan cỏc chỳng khỏc cỳa cựng mt loi vi khun (Stolp) Phng phỏp cỳa Kraxinnhicụp cng khụng th s dng mi trng hp Vớ d, theo nghiờn cu ca L p Starighina (1956) s hỡnh thnh vnh vụ trựng i vi Ps fluorescens ph thuc s lng cacbon d tr b sung mụi trng (cỏc hp cht cacbua), pH cỳa mụi trng v s lng vi khun thớ nghim cy ria hoc cóy vch Cú khi, mt phc hp no ú ca nhng diu kin trờn (nht l pH ca mụi trng v s lng vi khun) vi khun s tỏc ng theo cỏch khỏng sinh i vi bỏn thõn v to nờn mt vnh vụ trựng Trong sỏch v ó cú y ti liu chng minh rng mt sụ iu kin, vi khun cú th to nờn vnh vụ trựng, thm tỏc ng lờn nhng chỳng riờng cỳa Bac subtilis (Taubeneck, 1953) Trong nhng trng hp k trờn, ngi ta ó phõn tỏch c t vi khun mt s chót cú hot tớnh nh khỏng sinh (hnh thnh vnh vụ trựng) i vi nhng chỳng thõn thớch cựng loi 12 Chat colisin ca Escherichia coli (Francois v cỏc tỏc gi khỏc, 1952), chat piosianin ca Ps pyocyaneum (Francois, 1954) chõt megasin ca B megatheư rium (Ivanovich v Levix, 1954) Cú th, cỏc cht k trờn khụng hon ton ỳng vi quan nim v cht khỏng sinh, nhng thc t khụng thay i, vỡ du chỳng cng cỏn tr giỏm nh loi theo phng phỏp Kraxinnhicp Vi lý trờn, phng phỏp khỏng sinh khụng th l bin phỏp tng hp xỏc nh loi cỳa vi sinh vt mi trng hp Nh vy l phỏi cụng nhn rng, hóu ht cỏc h thụng phõn loi vi khun hin cú ch l qui c tng ụi v cũn xa vi phõn loi t nhiờn, mt h thừng da trờn c s- phỏt trin tin húa v c s dng cho cỏc i tng thc vt v ng vt D nhiờn, iu ny ph thuc vo s nghiờn cu cha dy v vi khun, vo c im hnh thỏi v nht l c im sinh lý cỳa chỳng y cng l lý giỏi thớch ti li cú nhiu h thng phõn loi ụi vi vi khun õy nờu mt sụ h thong chớnh: Migula, Lehmann v Neumann, Smith, Bergey, Kraxinnhicụp v Tesitra Tờn gi vi khun Theo h thụng phõn loi thc vt v ng vt ca Linn, vi khun c gi bng mt tờn kộp, ting th nht chl tờn loi, tiờng th hai tờn loi, tng trng cho c tớnh cỳa vi khun (cỏc c im sinh lý v v ), vớ d Bac denitrificans ụi vi cỏc vi khun gõy bnh thc vt, tờn loi thng mang tờn cõy b vi khun ký sinh, vi d Xanthomonas citri, hoc th hin nhng bin i vi khun gõy cho cõy, vớ d B tumefaciens * ụi ngi ta cũn dựng tờn a d ni phỏt hin thõy vi khun nh tờn loi, vớ d c michiganense Núi chung, vi khun c gi tờn theo cỏc h thừng ó c cụng nhn Chỳng c hp nhõt thnh mt lp v chia thnh cỏc b, b phõn thnh cỏc h, h chia cỏc chi ** hoc nhỏnh, ri n loi v loi ụi mt loi li phõn nhiu chng (varietas) v nụi vi tờn loi bng mt danh t th ba: vớ d chng X phaseoli var fuscans hoc chỳng Ps medicaginis var phaseolica, V V Trong mụ t cỏc b, h v loi, chỳng tụi chi gii hn phm vi cú liờn quan n vi khun gõy bnh thc vt Do tõt cỏ cỏc vi khun ú u l trc khun nờn cỏc h thụng v bỏng phõn loi, chỳng tụi gii thiu dng ny v khụng nhc n cỏc cu khun, xon khuỏn, spirochaeta, cng nh cỏc h v loi khỏc khụng cú liờn quan n vi khun gõy bnh thc vt cú th hỡnh dung c th nhng h thong phõn loi c bn nhớit quỏ trỡnh phỏt trin lch s ca chỳng, chỳng tụi xin dn bỏng phõn loi Elliott (1943) ó c sa i (bng 1) Trong h thụng Migula ch cú h Bacteriaceae thuc b Eubacttria l cú liờn quan n bnh cõy H ny phõn loi: Bacterium Ehrenberg T bo ngn hoc di, khụng di ng * Tumor u bu, facio lm ra, gõy nờn (tiờng latin) ** Chi c bú qua mt sụ h Brooks, Nain v Rivodes ó khụng hon ton ỳng chia tat c cỏc vi khuỏn gõy bnh c h nghiờn cu, thnh nhúm * Vi khun vi sc tụ vng: Xanthomonas campestris, X malvacearum, X pruni, X phaseoli, X phaseoli varr sojense, X hyacinthi, B stewarti, Erw trancheiphila, Erw lathyri, Cor michiganense, Cor flaccumfaciens Rọt d thy rng tõt c cỏc vi khun c nờu trờn vi khun lc mu vng v c hp mt cỏch nhõn to chl da vo cú c hiu mu sc cỳa khun lc, mc dự thc t chỳng thuc v cỏc loi khỏc (xanthomonas, Corynebacterium, Erwinia) Vi khun hunh quang: Ps fluorescens (cỏc chng khỏc nhau), Ps delphinii, Ps lachrymans, Ps angulatum, Ps tabacum, Ps mori, Ps syringae, Ps atrofaciens, Ps talaasi, Ps barked, Ps coronafaciens Vi khun vi sc tụ trng: Erw phytophthora, Erw solaniisapra, Erw atroseptica, Erw melanogena, Erw amylovora, V V Ngi ta nhn thy cỏc thớ nghim ngng kt chộo, mt s cỏc vi khun trờn õy ch cho phn ng dng vi cỏc chng cựng mt ca nhúm k trờn Trong nhúm vi khuỏn mu vng huyt ca X malvacearum cho phn ng ngng kt dng vi cỏc vi khun: X phaseoli, X phaseoli var sojense, X pelargnii, X vitians Trong nhúm ny cỏc vi khuỏn X prumi, Erw tracheiphila, X hyavinthi, Erw lathyri, B steward, c michiganense, c flaccumfaciens c tỏch cỏc vi khun khỏc v phng din huyt iu ú cng phự hp vi c tớnh sinh húa, khuỏn lc ca cỏc vi khun ú, bi vi vi khun sau cng nhum gram-dng, cỏc vi khun khỏc li u nhum gram-õm Hin chỳng ta ó bit chỳng thuc mt nhúm vi khun hon ton khỏc c bit Cor michiganense hon ton khụng cho ngng kt & bõt c nng pha loóng no cỏ vi huyt ca chỳng Hon ton d hiu l khụng phi tt c cỏc loi vi khun thuc cựng mt nhúm u ng nht v mt huyt thanh, búi v nhng vi khun ú thuc v nhiu loi khỏc Nhiu nh nghiờn cu Sharp, Link, Taliafero, Elrod v Braun ó xỏc nh rng, ni b loi Xanthomonas cũn cú nhiu nhúm ph nh hn, cú nhng c tớnh khỏng nguyờn gn H ó phỏt hin c loi Xanthomonas nhúm vi khun cú nhng c im huyt khỏc nhau: 1) X transluscens, 2) X vasculorum, 3) X phaseoli v 4) X campestris Theo ý kiờn ca cỏc nh nghiờn cu, Sệ lng cỏc nhúm ngng kt gp nhiu nht l nhúm th hai, nhúm hunh quang Theo quan nim hin thỡ iu ny rt d hiu, vỡ nhúm ny hp nhng vi khun ng nht v cng thuc loi Pseudomonas Huyờt ca Ps tabacum ngng kt cỏc vi khuỏn Ps delphinli, Ps mori, * iu ny khụng hon ton ỳng, nhng du s phõn chia cng cú mt vi giỏ tr lch s vic tm hiu mi quan h tng h v phõn loi cỏc vi khun gõy bnh cõy Ps coronafaciens, Ps viridilividum, Ps atrofaciens, Ps lachrymans, Ps angulatum, Ps aptatum, Ps tabacum Huyt ca Ps syringae cho phn ng vi Ps atrofaciens, nhng huyờt cỳa Ps atrofaciens khụng cho ngng kt vi Ps syringae Nh vy l mc du mt sụ nghiờn cu u tiờn v huyt hc khụng cú kt quỏ, nhng chỳng cng cho thy rng nhiu vi khun gõy bnh cõy khụng phỏi l tỏch bit v c lp ụi vi v cú th hp chỳng vo thnh cỏc nhúm khụng nhng theo cỏc c tớnh hỡnh thỏi v sinh lý, m theo cỏ c tớnh huyt na Sau ny ó tiờn hnh hng lot nhng cụng trỡnh nghiờn cu song song v cỏc c tớnh sinh húa v huyt cỳa cỏc vi khun gõy bnh cõy v ó xỏc nh c rng mt sụ bn chỳng, chng hn nh Ps syringae, Ps citriputeale v Ps prunicole rt ging (Rosen v Bleeker, 1933) Ngi ta cng chng minh c quan h h hng v huyt ca Ps tabacum v Ps angulatum, gõy bnh bng dp v m gúc lỏ thuc lỏ (Stap, 1930) z X Artemieva (1938) ó xỏc nh rng vi khun gõy bnh dõu tm Ps mori v Ps phaseolicola, vi khun gõy bnh u vng Ps puerariae hon ton giụng v mt huyt hc Nờu so sỏnh cỏc c tớnh sinh húa cỳa chỳng thỡ cú th thy rng chỳng giụng v cú nhiu dng trung gian V p Izrainxki v G V Trixtoxecụva (1938, 1939) thy rng huyờt cỳa Ps atrofaciens khụng nhng ngng kt vi khuỏn ny m cũn ngng kt cỏ Ps Xanthochlora, cũn cỏc vi khun hunh quang khỏc (Ps mori v Ps hold) li khỏc hai loi vi khun trờn v mt huyt Nm 1936, N X Nụvicova xỏc nh rng Ps tabacum cú hai loi hỡnh huyt V sau, ngi ta ó bt u ng dng mt cỏch cú kờt qu huyt a giỏ i vi cỏc chng khỏc cỳa Ps atrofaciens phỏt hin vi khun ú trờn cỏc ht b bnh vi khun en phụi (Galachian, 1944) Nh vy l ó xỏc nh c khỏ nng ng dng thc t ca phng phỏp nghiờn cu huyt chn oỏn bnh vi khuỏn Trong nm 1938 V p Izrainxki v G V Trixtosecụva ó xỏc nh s tng t v huyt gia Ps citriputeale, Ps mori v Ps tabacum Quan h h hng cỳa cỏc vi khun gõy bnh hi cõy nhúm hunh quang cũn c mt nhõn t na xỏc nh, ú l bacteriophag chung cỳa a s i din nhúm vi khun ny Nhng ngy cỏc cụng trỡnh nghiờn cu ca Stolp (1961) v cỏc nh khoa hc khỏc li cho thy rng cỏc i biu vi khun hunh quang cú cỏc bacteriophag khỏc nhau, v chỳng thng c phõn bit vi bng chun Tuy vy cng phi lu ý rng cỏc vi khun hunh quang gõy bnh hi cõy khụng phi l mt nhúm hon ton ng nht v chỡ cú mt sụ cú phn ng nhúm õy cng nờn nhc n mt thớ nghim khụng thnh cụng ca M V Goclenko v M A Trumaepxkaia (1959) vỡ xỏc nh quan h h hng huyt ca cỏc vi khun hunh quang (Ps citriputeale, Ps syringae) vi vi khun B tumefaciens, V V gõy bnh ung th Cỏc tỏc gi ny quờn rng cỏc vi khun hunh quang cng nh vi khun B tumefaciens u cú mt s nhúm huyt khỏc v ú khụng th no xỏc nh quan h h hng huyt ca chỳng c V p Izrainxki v M G Prixiagina (1962) ó chng minh mt cỏch chc chn l khụng cú mt vi khun hunh quang no cho phn ng vi huyt ca B tumeớaciens v ngc li, khụng cú trng hp no B tumefaciens cho phn ng vi huyt ca vi khuỏn hnh quang Da vo cỏc cụng trỡnh nghiờn cu ca mỡnh Lovrekobits v C.T.V ó kt lun rng, cú th chia tt c vi khun hunh quang, ký sinh trờn cõy n qu, lm nhúm theo quan h huyt cỳa chỳng Hin X N Scliar ang nghiờn cu khong 300 chng vi khun hunh quang gõy bnh cõy n quỏ, v thy rng mun cú huyt a giỏ thi cn cú chng ca cỏc vi khun ú (trong so 300) Huyt cỳa chng ny cú th ng dng lm huyt a giỏ xỏc nh tt cỏ cỏc vi khun hunh quang ký sinh trờn cõy n qu (Scliar, 1968) Trong ng dng phng phỏp huyt oi vi nhúm vi khun th ba, ngi ta ó phỏt hin rng Env phytophthora v Erw atroseptica cng nh cỏc vi khun khỏc gõy bnh hi khoai tõy u khỏc v mt huyt thanh, mc dõu cỏc loi ny cú nhng c tớnh sinh húa rt gn Nhng v sau Stapp ó phỏt hin rng cỏc vi khun ú cú th chia thnh nhúm huyt thanh, ú s khỏc bit tng chng nh c tht ú c gii thớch bi sũ lng ln cỏc nhúm ca nhng vi khuỏn ny Theo cỏc nghiờn cu cỳa Rosen v Bleeker (1938) sụ cỏc vi khun thuc nhúm th ba Erw amylovora l mt nhúm riờng bit v l mt chỳng ng nht v mt huyt Trc õy Howart (1929) cng ó thy rng c tớnh huyt ca chng Erw amylovora, phõn lp & M v Srilanca u ging Nhng kt qu ú sau ny c Elrod v Stern (1941, 1942) xỏc nhn cỏc nghiờn cu cựa h Cỏc tỏc giỏ ó khng nh rng nhng chng Erw amylovora phõn lp ' nhiu ni khỏc u rõt ng nht v mt huyờt thanh, mc dự cỏc c tớnh sinh húa v khun lc cỳa chỳng hi khỏc Tớnh ụng nht huyt ú khụng nhng thõy cỏc khỏng nguyờn lụng ca nhng vi khun ú m cũn thõy c nhng khỏng nguyờn chõt nguyờn sinh, th hin cỏc phn ng bụ trớ vi cỏc khun lc c un núng ti 100c Cỏc khỏng nguyờn lụng (H-khỏng nguyờn) yu chu nhit, cũn khỏng nguyờn nguyờn sinh (khỏng nguyờn cht nguyờn sinh 0) chu ng c nhit Cỏc nh khoa hc ny khụng nhng tiờn hnh nghiờn cu huyt vi cỏc vi khuỏn song v cht, m cũn nghiờn cu cỏ vi cỏc khỏng nguyờn c phõn lp t vi khun di dng polysaccarit Nhng nghiờn cu v khỏng nguyờn dng polysaccarit tiờn hnh theo phng phỏp kt ta S ng nht nh vy cỳa nhiu chng khỏc ca Erw amylovora c cỏc tỏc giỏ gii thớch bng tớnh gõy bnh chuyờn húa ca nhng vi khun ú Erw phytopthore v Erw carotovora cng thuc loi ny Song cỏc vi khun ny u a thc, ú v mt huyt chỳng khụng ng nht Cỏc tỏc gi cũn 252 cho l quan im ny c xỏc nhn chc chn hn na qua s kin sau õy: cỏc vi khun khỏc cng thuc loi ny nh Ervv tracheiphila v Erw salicis (cú kh nng gõy bnh ụi vi cõy liu Salix sp.), cựng chuyờn húa ụi vi cỏc cõy ký chỳ, nhng v mt huyt khỏc vi Erw amylovora, cng nh khỏc ln Nhng theo chỳng tụi khụng nờn coi giỏi thớch ú cú mt giỏ tr chung, vỡ cú rt nhiu trng hp, cỏc vi khun ging theo cỏc c im sinh húa, hnh thỏi v huyt hc, nhng li cú nhng cõy ký chỳ hon ton khỏc nhau, vớ d Ps phaseolicola v Ps mori, V V Ngoi tớnh chuyờn húa ca Erw amylovora tht cng khụng phi l ln lm, vi cỏc vi khun ú cú th lõy bnh nhõn to khụng nhng cú cỏc cõy thuc h hoa hng (Rosaceae) m c cho cỏc cõy thuc nhng h khỏc Mt vi cụng trỡnh nghiờn cu v huyờt hc cỳa vi khun thuc loi Corynebacterium c cụng b thi gian gón õy Rosenthal v Coxch (1954) thõy rng Cor poinsettiae, Cor sepedonicum dừng nhót v phỏn ng ngng kt ni b loi Ngoi Cor poinsettiae v Cor flaccumfaciens giụng v phỏn ng ngng kt, nhng Cor sepedonicum v Cor tumescens khỏc v khỏc vi tt cỏ cỏc loi Corynebacterium cũn li Nm 1964, s Muxaep v V p Izrainxki nghiờn cu cỏc chỳng Cor sepedonicum cú ngun gục khỏc bng phn ng ngng kt v kt tỳa ó thy rng: Cỏc chng phõn lp Liờn Xụ u cho phn ng ngng kt dng vi huyt ca vi khun phõn lp Liờn Xụ, nhng mc ngng kt khỏc Cng huyt ú ó khụng cho phn ng vi cỏc chỳng Cor sepedonicum nhn c t ngoi quc Tt c cỏc chng ngoi quc u cho phỏn ng ngng kờt dng vi huyờt ca vi khun ly t Canada, nhng huyt ny khụng cho phn ng vi tt c cỏc chng phõn lp t Liờn Xụ, phỏn ng k'ờt ta cú phm vi tỏc ng rng ln hn, nhng mc li rt gii hn Nh vy l vi khun Cor sepedonicum khỏc v mt huyờt v muụn chn oỏn phi c huyt a giỏ Cỏc cụng trỡnh nghiờn cu ca Soda v Cleverolon (1960) cho thõy cỏc vi khun sc t vng ly t nhiu loi khỏc (Corynebacterium, Flavobacterium v Xanthomonas) u thuc nhúm khỏc Nm 1959, Mushin, Naylo v Lahovary ó nghiờn cu v mt huyt 119 chng thuc nhiu loi vi khuõn gõy bnh cõy khỏc v tỡm thy rng: Cor flaccumfaciens v Cor michiganense v mt huyt rọt khỏc v khỏc c vi 10 chng Corynebacterium khỏc, k cỏ Cor diptheriae mitis Nhng cỏc chng khỏc ca Cor michiganense v Cor flaccumfaciens u giụng ni b tng loi ó nghiờn cu chng ca B tumefaciens (2 chỳng nhn t Anh v mt chng nhn t Canada) Chỳng u cú cỏc khỏng nguyờn khỏc v khụng cho phn ng ngng kt chộo Erw aroideae, Erw atroseptica v Erw Carotovora cho phn ng ngng kt nhúm vi - nhiu nng huyt khỏc nhng nng rt m c (19 20) huyờt cỳa cỏc vi khun ny cú th cho phn ng ngng kt vi c mt sụ (khụng phi tt c) i din ca vi khun ng rut (paracolon) Nhng cỏc chỳng khỏc thuc loi Erwinia li ngng kt yu vi huyt ca X carotae v khụng cho phn ng chộo Loi Pseudomonas cho phn ng nhúm v cú phn ng khỏc vi cỏc i din cỏc loi ny Cỏc chng phõn lp t mt cõy vớ d cỏc chựng Ps syringae phõn lp t mt cõy hoa linh lan, hoc cỏc chng Ps medicagines var phaseolicola phõn lp t cõy u vng, cho phỏn ng ngng kt chộo rừ rng nht Cũn cỏc i din khỏc ca Pseudomonas, vớ d Ps solanacearum, Ps barkeri (phõn lp t cõy n qu), ng bit lp v khụng cho phn ng vi mt chng Pseudomonas no Huyt ca nhiu loi v chỳng khỏc ca loi xanthomonas, cho phn ng nhúm ln vi nhiu hn cỏ Da trờn nhng ti liu ó trinh by cú hai c r a : Mt l cú th da vo s ging v mt huyờt xp vi khun vo mt loi c khụng, mc du cỏc c tớnh sinh húa v gõy bnh ca chỳng khụng ging nhau, v ngc li, nu vi khuỏn cú c tớnh sinh húa v gõy bnh rt ging nhau, nhng khỏc v mt huyt thanh, thi cú phỏi tỏch thnh loi khụng? Hai l cú th ng dng phng phỏp huyờt chn oỏn vi khuõn thc t sn xut khụng, nu gi s Ps citriputeale v Ps tabacum, cng nh Ps phaseolicola v Ps tabacum cú th ngng kt bng cựng mt huyờt thanh? Hay núi cỏch khỏc, lm the no xỏc nh cỏc vi khun chỳng cựng cho mt phn ng? í kiốn cỳa cỏc nh nghiờn cu v th nht thng khụng thụng nht Stapp ngi thuc phỏi phng phỏp huyt ó hon ton ỳng, cho rng ngoi phn ng ngng kt phi chỳ ý cỏ n phn ng kt tỳa, vỡ chớnh phn ng ny mi l phng thc giỏm nh tinh vi hn c Theo ý kiờn Stapp ôNu phn ng kt ta dng thỡ s giỏm nh loi s hon ton c xỏc nhn, c cú nhng khỏc bit no ú v mt sinh lý v khun lcằ Ngc li Stevens ó da vo nghiờn cu vi khun nt sn kờt lun rng khụng th dựng phng phỏp huyt giỏm nh vi khun Tt nhiờn chỳng ta khụng th cụng nhn nhng quan im cc oan, v c Stapp v sau cng ó rỳt lui phn no nguyờn tc khúó u ca mỡnh ễng phỏt biu rng: ôNờu cỏc khỏo nghim huyt khụng bỏo m hon ton tớnh giong ca vi khun c giỏm nh, th phỏi hp cỏc vi khun gõy nhng triu chng bnh lý giong trờn cựng mt cõy ký ch, vo mt tờn gi chungằ Bng cỏch ú, ụng ngh hp cỏc vi khun gõy bnh hi khoai tõy vo mt nhúm ln chung mang tờn l Erwinia phytophthora, mc du theo kt quỏ nghiờn cu ca ụng nhúm ny cú nhúm huyt khỏc Chỳng ta cng thy nhng trng hp gn tng t cỏc cụng trỡnh Mc New (1940), Braun v Me New ó phõn tớch 15 chng khỏc cỳa B stewarti, cú gõy bnh v ngun gc khỏc Kt quỏ cho thõy khụng cú mt s tng quan chc chn no gia cỏc c tớnh huyt thanh, c tớnh hỡnh thỏi khuõn lc v sinh lý ca chỳng Cng khụng cú mt s tng xng no gia cỏc c im huyt v v trớ phõn lp cng nh gõy bnh Vớ d cỏc chng nhn t Mehicụ cng khụng khỏc g vi cỏc chỳng nhn t ni khỏc hoc cỏc chng cú gõy bnh khỏc Mt s chỳng hon ton khụng cho ngng kờt vi huyt ca cỏc chng khỏc ụi cỏc chỳng cỳa mt sụ vi khun cho ngng kt vi huyt ca mt chng khỏc, song huyt cỳa cỏc chỳng th nht li khụng cho phn ng vi vi khuõn ca chỳng th hai Do ú Me New cú xu hng cho rng phng phỏp huyt khụng ng dng c cho vic chn oỏn vi khun gõy bnh hi cõy Nhng theo ý kiốn chỳng tụi kt lun ú quỏ vi vng v mt chiu Tỏc gi ó nghiờn cu phỏn ng ngng kt ca B steward, song cỏc vi khun ny li khụng di ng v khụng cú lụng roi Chỳng ta bit rng phỏn ng ngng kt cú liờn quan - mc khỏ ln vi cỏc yu t gõy ngng kt cú lụng roi, cũn phỏn ng kt ta li cú liờn quan vi khỏng nguyờn nguyờn sinh c trng cho cht nguyờn sinh tờ bo Do ú, theo chỳng tụi, Me New ó chn khụng ỳng kiu phỏn ng huyt Mt khỏc, s lng phn ng nhiu, cng khụng th coi cụng trỡnh nghiờn cu ó kt thỳc, vỡ tỏc giỏ ó khụng tin hnh c nhng thớ nghim vi phn ng ngng kt, cú th da vo ú m chia B steward thnh mt vi chng phõn bit theo huyờt Chỳng tụi ó nờu trng hp nhúm Erw phytophtora c Stapp chia thnh chng cú c tớnh huyờt khỏc Cỏc chỳng khỏc theo thuyt ng vt Do ú mt kt lun c l B steward cũn phi c tip tc nghiờn cu thờm bng phỏn ng kt tỳa Nh vy, xỏc nh cỏc vi khun thuc mt hoc hai loi khỏc khụng nờn ch da vo mt c tớnh no ú, m phi theo phc hp nhiu c tớnh, ng thi phi chỳ ý n c im cỏ th ca vi khun c nghiờn cu, cũn chn oỏn thỡ cn phi cú huyt a giỏ Gii ỏp vón th hai d dng hn chỳt ớt Trong thc t d nhiờn bao gi ngi ta cng nm c vi khuỏn gõy bnh ny c phõn lp t cõy no Vớ d, nu vi khun phõn lp t cõy dõu tm cho phn ng dng vi huyt ca Ps mori v huyt ca Ps phaseolicola, thỡ tt nhiờn vi khun phõn lp ú s c xỏc nh l Ps mori ch khụng khụng phi l Ps phaseolicola hoc Ps tabacum chỳng u cú c tớnh huyt giụng vi vi khun c giỏm nh Nh vy l chỳng ta chi cú th chn oỏn bng huyt cỏc vi khun gõy bnh mt gii hn cõy ký ch Vn sau cựng ny cú quan h nhiu n vic phõn lp vi khun gõy bnh hi cõy t, trng hp khụng xỏc nh c chỳng xut x t cõy no z G Petshina (1944) phõn lp c t t nhiu loi vi khun gõy bnh hi cõy u Mt s bn chỳng cú c tớnh huyt ging vi cỏc vi khun gõy bnh cõy ó bit (Ps xanthochlora) Nh ó núi, khỏng nguyờn ca vi khun, cng nh khỏng nguyờn ca cỏc sinh vt khỏc, l mt hn hp nhiu khỏng nguyờn v ú s khụng ly lm l cỏc nh nghiờn cu phỏt hin thy cỏc chng cú huyt khỏc mt nhúm k trờn Theo ý kin chỳng tụi, ụi vi vi khun gõy bnh cõy khụng nhng ch cn kốt lun v phn ng huyt õm hay dng, m cũn cn phi nm sõu hn cõu to cỳa khỏng nguyờn vi khun c nghiờn cu v bng cỏch so sỏnh nhng khỏng nguyờn chuyờn húa v khụng chuyờn húa xỏc nh mc quan h h hng ca cỏc nhúm vi khun khỏc Phng phỏp huyt c mụ t nh õy tt nhiờn s thỳc y cụng tỏc chn oỏn c nhanh chúng song cng nh i vi cỏc bnh virut, phng phỏp chn oỏn ny cũn cú trin vng v nhanh chúng hn na nu nh nú khụng cn phi phõn lp vi khun t cõy bnh Mu5n phõn tớch nhanh chúng cn s dng nhng khỏng nguyờn cú cõy b bnh c to thnh s cú mt ca cỏc vi sinh vt gõy bnh Tng t vi bnh virut hi cõy chỳng tụi xõy dng mt s cho bnh vi khun n giỏn i nhiu S phn ng gia huyt thanh, dch i vi vi khun gõy bnh cõy v dch chit t cõy b bnh Dch chit Huyt Dch chit tựcõy b bnh Huyt thanh, dch vi vi khun gõy bnh Khỏng nguyờn th c vt Khỏng th gi Khỏng nguyờn vi khun Huyt bỡnh th n g (cỏc chỏt protein, kt ta nhng Khỏng th gi) Trong dch chit ca cõy khe v cõy b bnh cú khỏng nguyờn c trng cho loi cõy ú Cũn dch chit ca cõy b bnh vi khun cú khỏng nguyờn cõy khe cng khỏng nguyờn vi khun Nhng c dch chit ca cõy khe cũn cú nhng chõt no ú, cú th cho kt ta vi huyt bỡnh thng Cỏc nh nghiờn cu gi chỳng l nhng khỏng th * gi Chỳng khụng chuyờn húa v phn ng chỳng gõy thng c gi l phn ng tr- ngi Rt d thy l cỏc chót ú cng to kt ta liờn kt dch chit ca cõy khe vi khỏng huyt vi khuỏn gõy bnh hi cõy Cỏc mi tờn trờn s ch cỏc cht kt ta liờn kt dch chit v huyt Chn oỏn bnh vi khun n gin hn nhiu so vi bnh virut Khụng cn phi ch khỏng huyt bng tiờm chựng dch chit ca cõy b bnh v x lý nú bng khỏng nguyờn ca cõy khe t c mc ớch ny chl cn dựng khỏng huyt ụi vi nhng vi sinh vt gõy bnh nhõt nh v s dng nú gõy phn ng kt ta vi dch cõy b bnh v cõy khũe S cú mt ca khỏng nguyờn cõy khe dch chit khụng ngn cn phn ng, vỡ khụng cú khỏng th ca chng huyt vi khun dch Nhng thớ nghim u tiờn v hng ny ó c V p Izrainxki v G V Trixtoxecụva tin hnh Trong a s trng hp cỏc thớ nghim u cú kt * Tờn gi ny khụng ỳng, bi vỡ khỏng th chl cú th huyt ng vt, nhng thut ng ó c trỡ khoa hc 256 qu khỏ quan Cỏc nh khoa hc ó b trớ thớ nghim trờn cỏc cõy cam quớt b lõy nhim Ps citriputeale, trờn cõy linh lan b lõy nhim cỏc chng Ps syrigae, phõn lp t medidago Trong mi trng hp u cú th phõn bit cõy bnh vi cõy khe bng phn ng kờt tỳa V sau ó thit k mt phng phỏp xỏc nh vi khun khụng cn phõn lp vi sinh vt cho cỏc tỏc nhõn gõy bnh sau õy: Ps citriputeale, Ps phaseolicole, Cor michiganense, V V (Izrainxki, Artemieva, Stepunina, Xtruminxkaia, 1939 1941; Izrainxki, Scliar, Oclụva, 1964; Scliar, 1967) Cũn i vi cỏc khỏng th giỏ k trờn th phn ln cỏc trng hp huyt bỡnh thng khụng cho kt ta vi dch chit ca cõy khúe mnh, nhng cỏc thớ nghim khỏc, ó nhn c nhng phỏn ng, khụng chuyờn hn, c gi l ôphn ng tr- ngiằ vi cỏc khỏng th gi Phõn ng ny khc phc c nh x lý dch chit cỳa cõy bnh (cõy c nghiờn cu) bng huyt ca th bỡnh thng khụng dch v cho phn ng tip theo gia dch chit cõy bnh ó c hõp ph nh vy vi huyt thanh, dch vi mt loi vi sinh vt gõy bnh no ú Mi ln phỏi t phn ng dừi chng vi huyt binh thng Tipograf (1941) vi phng phỏp gn tng t ó chn oỏn cú kt qu bnh thụi vũng khoai tõy Trong thi gian gn õy V p Izrainxki v X N Scliar ó thit k phng phỏp huyờt chn oỏn cỏc bnh vi khun cựa cõy n quỏ khụng cn phõn lp vi sinh vt gõy bnh Dch chit c ch bng cỏch un núng mt mnh cõy b bnh nc sinh lý nhit 100c 20 30 phỳt Khỏng th giỏ, cho phỏn ng khụng chuyờn vi huyt dch v ú ngy trang s phỏt hin khỏng nguyờn ca vi sinh vt gõy bnh c kh qua kt ta bng huyt bỡnh thng ó xỏc nh c rng s lng khỏng th gi biờn ng theo tng loi cõy n qu v theo thi v Trong nhiu trng hp, nhng khụng phi bao gi cng vy, cỏc cõy n qu ht cng cha khỏng th gi nhiu hn so vi cõy n qu ht mm Hm lng khỏng th gi cũn ph thuc vo tui cõy n qu cng nh cỏc b phn ca cõy Hm lng ca chỳng khụng ỏng k lỏ v qu Thờm 0,2 ml huyt bỡnh thng i vi cõy n qu mm, v 0,4 ml i vi cõy ht cng l kt ta hon ton khỏng th gi 1ml dch chit Dch chit, sau ó c tinh lc nh vy v c ly tõm, c dựng t phn ng kt ta vũng ụng nghim v kt tỳa gen vi huyt dch Bng phng phỏp ny cú th phỏt hin c khỏng nguyờn vi khuỏn gõy bnh, kim dch, chỏy rp cõy n quỏ (Erw amylovora) nhng qu lờ xanh c nhim bnh nhõn to, v khỏng nguyờn ca vi khun gõy bnh ung th hoc gõy cht tng ỏm t bo (Ps syringae) cõy b bnh t nhiờn Nh ó núi & trờn, Erw amylovora ng nht v mt huyt khụng ph thuc vo phõn b a lý, ú cú th dựng huyt n giỏ xỏc nh chỳng Cũn ụi vi Ps syringae l loi vi sinh vt gõy bnh vi tớnh chõt 257 khỏng nguyờn khụng ng nht, thỡ phỏi dựng huyt a giỏ Loi huyt ú c ch to ti phõn vin vi sinh vt nụng nghip Maxcva v cú th s dng chn oỏn bnh ung th hoc hoi t cõy n qu, khụng cn phõn lp vi khun gõy bnh Da trờn nhng ý kin ó phỏt trin cú th khng nh l rt nhiu lý thuyt v thc tin ó c gii quyờt bng phng phỏp huyờt thanh, phng phỏp ú ngy cng c ng dng cụng tỏc thc tin ca cỏc nh nghiờn cu vi sinh v bnh lý thc vt Mc lc Li gii thiu Li núi u Lch sỳ* nghiờn cu bnh vi khun thc vt - Liờn X ụ Phõn loi vi khun gõy bnh c õ y H vi sinh vt biu sinh Hc thuyt v s- nhim bnh Quan h tng h gia thc vt v ký sinh Cng sinh v ký sin h S xõm nhp cỳa ký sinh vo thc vt, men v c t gõy bnh ca nõm v vi khun gõy bnh c õ y Phng thc xõm nhp vo cõy cỳa vi khun gõy bnh v s truyn lan cỳa chỳng m ụ ng thỏi phỏt trin ca bnh vi khun Tớnh chuyờn húa ca vi khun gõy bnh cõ y S lng vi khun cn thit lõy bnh cho c õ y í ngha cỳa cỏc cht kớch thớch sinh trng i vi vi khun bnh cõy nh h-ng ca ngoi cỏnh n thi k bnh ca vi khuõn gõy bnh cõy Xỏc nh vi khun gõy bnh Cỏc ngun bnh truyn nhim v cỏc phng thc lõy lan ca bnh vi khun nh húmg ca ngoi cnh n bnh thc v t Min dch Min dch t nhiờn hay bm sin h Min dch to c Sinh húa dch thc vt i vi bnh truyn nhim Cỏc cht c ca ký sin h Men ngoi tit ca ký sin h Thnh phn húa hc cỳa cõy dch thc v t Cỏc cht khỏng sinh v vai trũ cỳa chỳng dch thc v t Vai trũ protein dch thc v t Vai trũ chuyn húa nng lng dch thc v t Phn ng chõn thng ca thc v t Phn ng cht tng ỏm tờ bo v vai trũ ca h thừng polyphenol-polyphenoloxyaza dch thc v t Axit nucleic v ý ngha ca chỳng vi bnh vi khun Cỏc men phõn hy pectin v xenlulo ca vi khun gõy bnh cõ y Chõt khỏng sinh v phitonxit c im cỳa khỏng sinh, bn chõt v c tớnh cỳa chỳng Khỏng sinh v phitonxit cụng tỏc phũng chụng vi sinh vt gõy bnh 11 20 26 28 30 35 39 42 43 45 47 48 50 51 52 58 60 60 71 98 98 102 104 105 109 111 118 120 125 131 151 152 159 259 Khỏng sinh v bnh vi khun thc v t 162 Cỏc chlt khỏng sinh l nhõn t chng bnh vi khun ca c õ y 173 Cỏc phng phỏp nghiờn cu hot lc ca khỏng sin h Phng phỏp nghiờn cu tớnh cht chng vi khun ca dch cõy ti Bacteriophag ca vi khun gõy bnh c õ y 184 Tớnh chũng chu cỳa vi khun gõy bnh cõy ụi vi khỏng sinh 194 Cỏc phng phỏp nghiờn cu vi khun gõy bnh c õ y Cỏc phng phỏp vụ trự n g Pha chờ cỏc mụi trng dinh d n g K thut cy truyn vi khuỏn trờn mụi trng dinh d n g Nghiờn cu c im hỡnh th ỏ i Xỏc nh tớnh cht sinh lý v c im khun lc ca vi khuỏn Phõn lp vi khuỏn gõy bnh cõy t ht, qu v cỏc b phn khỏc cỳa cõy Kim tra tớnh gõy bnh trờn c õ y Nhum mụ cõy theo G m Nhng thuừc th phỏn ng cn thit nht nghiờn cu vi khun C s- nghiờn cu huyốt hc vi khun Phỏn ng ngng k t Phn ng kt t a Phng phỏp huyt nghiờn cu vi khun gõy bnh cõ y 260 176 181 200 200 202 213 214 220 224 229 230 233 236 238 245 249 V p IZRAINXKI (chỳ biờn) H N G DN N G H I ấ N cu B N H VI K H U N T H C VT Nh xuót bn ôMirằ Maxcva Liờn Xụ Nh xut bỏn ôNụng nghip)) H Ni Vit Nam Bn dch cựa Nh xut bn ôNụng nghipằ Biờn tp: Phm Thỳy Lan Biờn khoa hc: Lờ Trung Tin (theo nguyờn bỏn tiờng Nga) In tai Liờn Xụ Sũ lng in 10.000 bỏn ó xut bn: A M Ganelin s tay th in trộ nụng nghip, 1983 N L Burenin, G N Kotova s tay nuụi ong, 1984 A T Sarin Thõm canh sn xut lỳa, 1985 S xut bn: A X Krugilin c im sinh hc v nng sut cõy trng c ti nc G p Melekhin, N Ia Gridin Sinh lý gia cm N A Xtovich C hc t V p Izrainxki Hng dn nghiờn cu bnh vi khun thc vt Nh xut bn Mir v Nh xuõt bỏn Nụng nghip chõn thnh cm n bn c gúp ý kin v ni dung, v dch thut v cỏch trỡnh by cun sỏch ny cng nh xut mi yờu cu khỏc a ch NH XUT BN MIR NH XUT BN NễNG NGHIP 11 Rigixki Pereuloc, Kim Liờn, ụng a Maxcva 110 GSP Liờn Xụ H ni Vit Nam NH XUT BN MIR Nh xut bn Mir xut bn cỏc loi sỏch khoa hc v k thut Liờn Xụ bng 20 th ting trờn th gii, gm cú sỏch giỏo khoa cho cỏc trng i hc, sỏch v cỏc mụn khoa hc t nhiờn, y hc v nụng nghip, cng nh sỏch v khoa hc vin tmg v khoa hc ph biờn Tỏc gi cỏc sỏch Nh xut bn Mir xuõt bn l nhng nh khoa hc v cỏc chuyờn gia Xụ vit dn u mi lnh vc khoa hc v k thut, ú cú hom 40 vin s v vin s thụng tn Vin hn lõm khoa hc Liờn Xụ Sỏch c nhng ngi dch cú trỡnh nghip v cao dch t nguyờn bn ting Nga Sỏch Nh xut bn Mir xut bn tiờng nc ngoi c Tng cụng ty ôMezknhigaằ xuọt khu Cỏc bn cú th mua hoc t mua cỏc ca hng cú bỏn sỏch ca Nh xut bn Mir ti Vit Nam