1. Gen, mã di truyền và quá trình nhân đôi của ADN a. Gen Khái niệm: Gen là một đoạn của phân tử ADN mang thông tin mã hóa một chuỗi pôlipeptit hay một phân tử ARN. b. Mã di truyền Định nghĩa: Là trình tự sắp xếp của các nuclêôtit trong gen qui định trình tự sắp xếp của các axit amin trong prôtêin. Các đặc điểm của mã di truyền + Được đọc liên tục từ 1 điểm xác định theo từng bộ ba + Có tính đặc hiệu. + Có tính thoái hóa. + Có tính phổ biến. Giải thích được mã di truyền là mã bộ ba Tên và chức năng của bộ ba mở đầu và các bộ ba kết thúc. c. Quá trình nhân đôi ADN Diễn biến chính của cơ chế nhân đôi ADN ở sinh vật nhân sơ + Bước 1: Tháo xoắn phân tử ADN + Bước 2: Tổng hợp các mạch ADN mới + Bước 3: Hai phân tử ADN được tạo thành.
SINH HỌC 12 BÀI GIẢNG ÔN TẬP - SINH 12 Chủ biên tập: Duy Khoa Sách dùng cho học sinh luyện thi đại học môn sinh học sinh viên học sinh học đại cương Luyện thi đại học 2013-SINH HỌC PHẦN I: LÝ THUYẾT DI TRUYỀN HỌC Chương CƠ CHẾ DI TRUYỀN VÀ BIẾN DỊ * Kiến thức cần nắm Gen, mã di truyền trình nhân đôi ADN a Gen - Khái niệm: Gen đoạn phân tử ADN mang thông tin mã hóa chuỗi pôlipeptit hay phân tử ARN b Mã di truyền - Định nghĩa: Là trình tự xếp nuclêôtit gen qui định trình tự xếp axit amin prôtêin - Các đặc điểm mã di truyền + Được đọc liên tục từ điểm xác định theo ba + Có tính đặc hiệu + Có tính thoái hóa + Có tính phổ biến * - Giải thích mã di truyền mã ba - Tên chức ba mở đầu ba kết thúc c Quá trình nhân đôi ADN - Diễn biến chế nhân đôi ADN sinh vật nhân sơ + Bước 1: Tháo xoắn phân tử ADN + Bước 2: Tổng hợp mạch ADN + Bước 3: Hai phân tử ADN tạo thành - Các nguyên tắc nhân đôi ADN: bổ sung bán bảo tồn * - Quá trình nhân đôi ADN sinh vật nhân thực + Thời điểm: Diễn pha S kì trung gian + Cơ chế: Giống với trình nhân đôi ADN sinh vật nhân sơ + Quá trình nhân đôi diễn nhiều điểm khởi đầu phân tử (có nhiều đơn vị nhân đôi), có nhiều loại enzim tham gia Phiên mã dịch mã a Phiên mã - Cơ chế phiên mã + Diễn qua bước: mở đầu, kéo dài kết thúc + Ở sinh vật nhân sơ: mARN sau phiên mã sử dụng trực tiếp làm khuôn để tổng hợp prôtêin; sinh vật nhân thực, mARN sau phiên mã chỉnh sửa tạo ARN trưởng thành * - Thời điểm, vị trí xảy trình phiên mã b Dịch mã - Cơ chế: Gồm giai đoạn + Hoạt hóa axit amin + Tổng hợp chuỗi pôlipepetit Mở đầu Kéo dài Kết thúc Tóm lại: chế tượng di truyền cấp độ phân tử thể theo sơ đồ sau: nhân đôi ADN phiên mã ARN dịch mã prôtêin → tính trạng Điều hòa hoạt động gen - Cấu trúc opêron Lac Luyện thi đại học 2013-SINH HỌC + Vùng khởi động (P): Nơi mARN pôlimeraza bám vào khởi động phiên mã + Vùng vận hành (O): Nơi prôtêin ức chế bám vào, ngăn cản phiên mã + Cụm gen cấu trúc (Z, Y, A): mã hóa enzim phân giải đường lactôzơ Đột biến gen a Khái niệm: Là biến đổi cấu trúc gen, liên quan tới cặp nuclêôtit xảy điểm phan tử ADN b Ba dạng đột biến điểm * Phân loại đột biến tự nhiên đột biến nhân tạo c Nguyên nhân: Do tác động tác nhân hóa học, vật lí, sinh học rối loạn sinh lí, hóa sinh tế bào đến trình nhân đôi ADN d Cơ chế phát sinh chung: - Tác nhân gây đột biến gây sai sót trình nhân đôi ADN * - Đột biến điểm thường xảy mạch dạng tiền đột biến, qua lần nhân đôi tạo thành đột biến: Gen → tiền đột biến gen → đột biến gen * - Đột biến gen phụ thuộc vào loại tác nhân, cường độ, liều lượng, thời điểm tác động cấu trúc gen - Ví dụ chế phát sinh + Do kết cặp không nhân đôi ADN: G – X → G – T → A – T + Do tác động 5BU: A – T → A – 5BU → G – 5BU → G – X e Hậu - Biến đổi dãy nuclêôtit gen cấu trúc → biến đôi dãy nuclêôtit mARN → biến đổi dãy axit amin chuỗi pôlỉpeptit tương ứng → thay đổi cấu trúc prôtêin → có trhể làm thay đổi đột ngột, gián đoạn số tính trạng cá thể quần thể + Hậu cụ thể dạng - Phần lớn đột biến điểm vô hại, số có lợi, số có hại Mức độ có lợi hay có hại phụ thuộc vào tổ hợp gen điều kiện môi trường f Ý nghĩa *g Cơ chế biểu Cấu trúc nhiễm sắc thể a Ở sinh vật nhân sơ: NST phân tử ADN kép, vòng, không liên kết với prôtêin b Ở sinh vật nhân thực - Cấu trúc hiển vi + Ở kì trình phân bào: NST gồm crômatit… , NST có hình que, … đường kính: … + Mỗi loài có NST đặc trung số lượng, hình thái, cấu trúc - Cấu trúc siêu hiển vi: + Thành phần cấu tạo + Nuclêôxôm → sợi (11nm) → sợi nhiễm sắc (25 - 30nm) → ống siêu xoắn (300nm) → crômatit kì (700nm) * Sự biến đổi hình thái NST qua kì phân bào Đột biến cấu trúc NST a Nguyên nhân b Cơ chế chung: Các tác nhân gây đột biến tác động đến trình tiếp hợp, trao đổi chéo, … trực tiếp gây đứt gãy NST Đột biến cấu trúc NST làm thay đổi số lượng, trình tự gen, làm thay đổi hình dạng NST c Các dạng đột biến cấu trúc NST: Mất đoạn, lặp đoạn, đảo đoạn, chuyển đoạn Ở dạng: nêu khái niệm, chế, hậu (có ví dụ), ý nghĩa Đột biến số lượng NST a Nguyên nhân b Các dạng đột biến số lượng NST Luyện thi đại học 2013-SINH HỌC - Đột biến lệch bội + Khái niệm + Các dạng + Cơ chế phát sinh chung, trình bày sơ đồ phát sinh thể lệch bội + Hậu + Vai trò - Đột biến đa bội + Khái niệm + Các dạng + Cơ chế phát sinh chung, trình bày sơ đồ phát sinh thể tự đa bội (thể 3n, 4n) thể dị đa bội (thể song nhị bội) + Hậu + Vai trò Chương II: TÍNH QUI LUẬT CỦA HIỆN TƯỢNG DI TRUYỀN QUI LUẬT PHÂN LY I Phương pháp nghiên cứu di truyền Menden: - Quy trình thí nghiệm: - Giải thích kết (hình thành giả thuyết): - Kiểm định giả thuyết: II Hình thành học thuyết khoa học: Giả thuyết Menden: Chứng minh giả thuyết: Nội dung quy luật phân ly: Mỗi tính trạng cặp alen quy định, có nguồn gốc từ bố, có nguồn gốc từ mẹ Các alen bố mẹ tồn tế bào thể cách riêng rẽ, không hòa trộn vào Khi hình thành giao tử, thành viên cặp alen phân ly đồng giao tử, nên 50% số giao tử chứa alen 50% giao tử chứa alen Mỗi tính trạng quy định cặp alen Do phân ly đồng cặp alen giảm phân nên giao tử chứa alen cặp III Cơ sở tế bào học quy luật phân ly: Trong tế bào lưỡng bội, NST tồn thành cặp tương đồng, nên gen tồn theo cặp gen tương ứng cặp NST tương đồng (vị trí gen NST gọi lôcut) Khi giảm phân, phân ly đồng cặp NST tương đồng dẫn đến phân ly đồng cặp gen tương ứng giao tử QUY LUẬT PHÂN LY ĐỘC LẬP I Thí nghiệm lai hai cặp tính trạng: TN: Nội dung quy luật phân ly độc lập: Các cặp nhân tố di truyền quy định tính trạng khác phân ly độc lập trình hình thành giao tử II Cơ sở tế bào học quy luật phân ly độc lập: Sự phân ly độc lập cặp NST khác giảm phân dẫn đến phân ly độc lập cặp alen giao tử; tổ hợp ngẫu nhiên giao tử thụ tinh tạo tổ hợp gen khác Giải thích: - Nếu ký hiệu A: alen quy định hạt vàng a: alen quy định hạt xanh B: alen quy định hạt trơn b: alen quy định hạt nhăn P: AABB (hạt vàng, trơn) x aabb (hạt xanh, nhăn) Luyện thi đại học 2013-SINH HỌC F1: AaBb (100% hạt vàng, trơn) GF1: AB, Ab, aB, ab F2: SGK III Ý nghĩa quy luật Menden: Khi biết tính trạng di truyền theo quy luật Menden tiên đoán trước kết lai Giải thích đa dạng giới sinh vật (tạo vô số biến dị tổ hợp) IV Điều kiện nghiệm phân ly độc lập: Các cặp gen quy định cặp tính trạng khác phải nằm cặp NST tương đồng khác V Công thức tổng quát: (giải thích hướng dẫn h/s cách ứng dụng giải tập) TƯƠNG TÁC GEN VÀ TÁC ĐỘNG ĐA HIỆU CỦA GEN I Tương tác gen: - Khái niệm: Tương tác gen tác động qua lại gen trình hình thành KH - Thực chất: gen tế bào không tương tác trực tiếp với mà có sản phẩm chúng tác động qua lại với để tạo nên KH - Các kiểu tương tác: + tương tác alen thuộc gen (đã học quy luật Menden) + tương tác alen thuộc lôcut gen khác (tương tác gen không alen), gồm kiểu tương tác: Tương tác bổ sung: TN: P Hoa trắng x Hoa trắng F1 100% hoa trắng F2 hoa đỏ: hoa trắng G thích: - F2 có 16 tổ hợp F1: dị hợp tử cặp gen nằm cặp NST tương đồng khác Mà F2: không cho tỉ lệ KH 9: 3: 3: mà cho KH màu hoa cặp gen quy định - Hoa đỏ: có mặt gen trội A, B Hoa trắng: có mặt gen trội gen trội SĐL: Dòng hoa trắng (Aabb) x Dòng hoa trắng (aaBB) F1: AaBb (hoa đỏ ) x AaBb (hoa đỏ ) F2: 9A - B - (đỏ): 3A - bb (trắng) : 3aaB - (trắng) : 1aabb (trắng) Tương tác cộng gộp: - KN: Khi alen trội thuộc nhiều lôcut gen tương tác với theo kiểu alen trội (bất kể thuộc lôcut nào) làm tăng biểu KH lên chút Ví dụ: Màu da người gen (A, B, C) nằm cặp NST tương đồng khác chi phối - Phần lớn tính trạng số lượng (năng suất) nhiều gen quy định tương tác theo kiểu cộng gộp quy định (sản lượng thóc, sản lượng trứng gia cầm… tính trạng màu da, chiều cao người bị chi phối tác động cộng gộp nhiều gen không alen (GV nêu thêm tương tác át chế) II Tác động đa hiệu gen: KN: Một gen tác động đến biểu nhiều tính trạng khác Gen đa hiệu sở để giải thích tượng biến dị tương quan Khi gen đa hiệu bị đột biến đồng thời kéo theo biến dị số tính trạng mà chi phối VD: LIÊN KẾT GEN VÀ HOÁN VỊ GEN: Luyện thi đại học 2013-SINH HỌC I LIÊN KẾT GEN: TN: Giải thích Viết sơ đồ lai: Kết luận: Các gen nằm NST tạo thành nhóm gen liên kết có xu hướng di truyền Số nhóm gen liên kết loài thường số lượng NST NST đơn bội II HOÁN VỊ GEN: Thí nghiệm Moocgan tượng hoán vị gen: ♀ F1 thân xám, cánh dài X ♂ đen, cụt Fa 495 thân xám, cánh dài ; 944 đen, cụt 206 thân xám, cánh cụt; 185 đen, dài Cơ sở tế bào học tượng hoán vị gen: - Gen quy định màu thân kích thước cánh nằm NST - Trong giảm phân tạo giao tử xảy tiếp hợp (kỳ đầu I giảm phân) dẫn đến trao đổi đoạn NST cromatit cặp tương đồng (đoạn trao đổi chứa gen trên) hoán vị gen - Tần số hoán vị gen (f%) = tổng tỷ lệ % giao tử sinh hoán vị - Tần số hoán vị gen (f%) 0% 50% (f%50%) - Các gen gần NST f % nhỏ ngược lại f % lớn Kết luận: - Trong trình giảm phân, NST tương đồng trao đổi đoạn cho dẫn đến hoán vị gen, làm xuất tổ hợp gen - Tần số hoán vị gen dùng làm thước đo khoảng cách tương đối gen Tần số hoán vị gen dao động từ 0% 50 % Ý nghĩa tượng liên kết gen hoán vị gen: a Ý nghĩa tượng liên kết gen: - Các gen NST di truyền nên trì ổn định loài - Thuận lợi cho công tác chọn giống b Ý nghĩa tượng hoán vị gen: - Do tượng hoán vị gen tạo nhiều loại giao tử hình thành nhiều tổ hợp gen tạo nguồn nguyên liệu biến dị di truyền cho trình tiến hoá công tác chọn giống - Căn vào tần số hoán vị gen trình tự gen NST (xây dựng đồ gen) - Quy ước 1% hoán vị gen = cM (centimoocgan) (Bản đồ di truyền) DI TRUYỀN LIÊN KẾT VỚI GIỚI TÍNH VÀ DI TRUYỀN NGOÀI NHÂN I Di truyền liên kết với giới tính: Một tính trạng gọi di truyền liên kết với giới tính di truyền gắn với giới tính NST giới tính chế tế bào học xác định giới tính NST: a) NST giới tính: b) Một số số kiểu NST giới tính: + Dạng XX XY - ♀ XX, ♂ XY: Người, lớp thú, ruồi giấm - ♂ XX, ♀ XY: Chim, bướm + Dạng XX XO: Châu chấu ♀ XX, ♂ XO c Một số chế xác định giới tính: Luyện thi đại học 2013-SINH HỌC - Cơ chế xác định giới tính: phân ly cặp NST giới tính giảm phân hình thành giao tử tỉ lệ đực loài có phân hoá giới tính thường xấp xỉ 1: Di truyền liên kết với giới tính: a Gen NST X: di truyền chéo - Thí nghiệm: (SGK) - Giải thích: (SGK) b Gen NST Y: di truyền thẳng (Lưu ý trường hợp gen quy định tính trạng liên kết với NST giới tính vùng tương đồng ) c) Ý nghĩa di truyền liên kết với giới tính: (SGK) II Di truyền nhân: Ví dụ: (cây hoa phấn Mirabilis jalapa) - Lai thuận: ♀ đốm X ♂ xanh thu F1 100% đốm - Lai nghịch: ♀ xanh X ♂ đốm thu F1 100% xanh Giải thích: - Khi thụ tinh giao tử đực truyền nhân mà không truyền tế bào chất cho trứng - Các gen nằm tế bào chất ( ty thể lục lạp) mẹ truyền cho qua tế bào chất trứng - Sự phân ly kiểu hình đời tính trạng gen nằm tế bào chất quy định phức tạp - Con lai có kiểu hình giống mẹ: thụ tinh, giao tử đực truyền nhân mà không truyền tế bào chất cho trứng Do vậy, gen nằm tế bào chất (trong ty thể lục lạp) mẹ truyền cho qua tế bào chất trứng * Kết luận: có hệ thống di truyền di truyền nhân di truyền nhân (di truyền theo dòng mẹ) ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG LÊN SỰ BIỂU HIỆN CỦA GEN I Mối quan hệ gen tính trạng: - Gen (ADN )mARN Pôlipeptit Prôtêin tính trạng II Mối quan hệ kiểu gen, môi trường kiểu hình: Ví dụ: Ở hoa anh thảo: KG AA (đỏ): đem trồng đỏ t/c mt 350c hoa trắng, hệ sau hoa trắng trồng 200c lại cho hoa đỏ Trong hoa trắng có KG aa đem trồng mt 350c hay 200c cho hoa màu trắng Kết luận: - Bố mẹ không truyền đạt cho tính trạng hình thành sẵn, mà truyền đạt KG - KG quy định khả phản ứng thể trước môi trường - KH kết tác động qua lại KG MT IV Mức phản ứng: Khái niệm Tập hợp kiểu hình KG tương ứng với môi trường khác gọi mức phản ứng KG Đặc điểm: - Mức phản ứng gen quy định, KG gen có mức phản ứng riêng - Có loại mức phản ứng: mức phản ứng rộng mức phản ứng hẹp, mức phản ứng rộng sinh vật dễ thích nghi - Di truyền KG quy định Luyện thi đại học 2013-SINH HỌC - Thay đổi theo loại tính trạng PP xác định mức phản ứng Để xác định mức phản ứng 1KG cần phải tạo cá thể SV có KG , với sinh sản sinh dưỡng xác đinh mức phản ứng cách cắt đồng loạt cành đem trồng theo dõi đặc điểm chúng Sự mềm dẻo kiểu hình - Hiện tượng KG thay đổi KH trước điều kiện MT khác gọi mềm dẻo KH (hay gọi thường biến) - Nguyên nhân: Do tự điều chỉnh sinh lí giúp sv thích nghi với thay đổi MT - Biểu hiện: Mức độ mềm dẻo kiểu hình phụ thuộc vào KG - Mỗi KG điều chỉnh kiểu hình phạm vi định * Đặc điểm: Có tính đồng loạt, theo hướng xác định, tương ứng với điều kiện môi trường Lưu ý: - Tính trạng có HSDT thấp tính trạng có mức phản ứng rộng; thường tính trạng số lượng (năng suất, sản lượng trứng ) - Tính trạng có hệ số di truyền cao tính trạng có mức phản ứng hẹp thường tính trạng chất lượng (Tỷ lệ protein sữa hay gạo ) Chương III: DI TRUYỀN HỌC QUẦN THỂ CẤU TRÚC DI TRUYỀN CỦA QUẦN THỂ I Khái niệm đặc trung qu n thể: - Quần thể tập hợp cá thể loài, sống khoảng không gian xác định, vào thời điểm xác định có khả sinh hệ hữu thụ - Mỗi quần thể có vốn gen đặc trung, thể qua thông số tần số alen thành phần kiểu gen: T n số alen = số lượng alen tổng số alen gen quần thể thời điểm xác định T n số iểu gen qu n thể = số cá thể có kiểu gen tổng số cá thể có quần thể * T n số alen xác định công thức: Quần thể hệ xuất phát có kiểu gen AA, Aa, aa gọi h tỉ lệ kiểu gen AA, d tỉ lệ kiểu gen Aa, r tỉ lệ kiểu gen aa Gọi PA tần số alen A, qa tần số alen a thì: PA d h qa r h Chú : Tùy theo hình thức sinh sản loài mà đặc trung vốn gen yếu tố làm biến đổi vốn gen quần thể loài có khác II u n thể tự phối - Quần thể thực vật tự thụ phấn, động vật lưỡng tính tự thụ tinh - Đối với loài động vật, tượng cá thể có quan hệ huyết thống giao phối với gọi giao phối gần Công thức tổng quát cho tần số kiểu gen hệ thứ n quần thể tự thụ phấn là: Thế hệ P Kiểu gen AA Kiểu gen Aa 100% Kiểu gen aa Luyện thi đại học 2013-SINH HỌC F1 F2 F3 Fn 25% = Tần 50% = số 1 KG AA = Tần số KG n ( )/2 25% = 1 Aa = 2 Tần sốKG n 1 n aa = (1 )/2 ết luận: Thành phần kiểu gen quần thể tự thụ phấn qua hệ thay đổi theo hướng t ng n t n số iểu gen đ ng hợp t giảm n t n số iểu gen ị hợp t III Qu n thể giao phối ngẫu nhiên: Qu n thể ngẫu phối: - Quần thể gọi ngẫu phối cá thể quần thể lựa chọn bạn tình để giao phối cách hoàn toàn ngẫu nhiên Đặc điểm di truyền quần thể ngẫu phối: - Đa hình: trình giao phối nguyên nhân làm cho quần thể đa hình KG dẫn đến đa hình KH - Các cá thể quần thể giống nét bản, khác nhiều chi tiết (Trong QT ngẫu phối cá thể có kiểu gen khác kết đôi với cách ngẫu nhiên tạo nên lượng biến dị di truyền lớn QT làm nguồn nguyên liệu cho tiến hoá chọn giống) - Duy trì đa dạng di truyền quần thể Định luật Hacđi Vanbec Theo Định luật Hacđi Vanbec thành phần kiểu gen, tần số alen quần thể giao phối trì không đổi từ hệ sang hệ khác điều kiện định p2 AA + 2pqAa +q2 aa = Điều kiện nghiệm đúng: - Quần thể phải có kích thước lớn - Các cá thể quần thể phải có sức sống khả sinh sản (ko có chọn lọc tự nhiên ) - Không xảy đột biến, có tần số đột biến thuận tần số đột biến nghịch - Quần thể phải cách ly với quần thể khác (không có di - nhập gen quần thể) Ý nghĩa định luật Hacđi Vanbec: Định luật Hacđi Vanbec không giải thích ổn định qua thời gian quần thể tự nhiên mà cho phép xác định tần số alen, kiểu gen quần thể Nếu biết quần thể trạng thái cân từ tần số cá thể có KH lặn, tính tần số alen lặn, alen trội tần số loại KG quần thể VD: Một quần thể bò có 64% bò lông vàng Tính thành phần KG quần thể này, biết lông vàng lặn, lông đen trội Ta có q2 = 64% q = 0, p+q = p = - 0, = 0,2 Thành phần KG quần thể là: 0,04 AA + 0,32 Aa + 0,64 aa Chương IV ỨNG DỤNG DI TRUYỀN HỌC Luyện thi đại học 2013-SINH HỌC I Kiến thức c n nắm Nguồn vật liệu để chọn giống: Biến dị tổ hợp Đột biến ADN tái tổ hợp Chọn giống vật nuôi tr ng dựa ngu n biến dị tổ hợp a Tạo giống thuần: Các bước - Tạo dòng chủng có kiểu gen khác - Lai giống để tạo tổ hợp gen khác - Chọn lọc tổ hợp gen mong muốn - Những tổ hợp gen mong muốn cho tự thụ phấn giao phối gần để tạo dòng b Tạo giống có ưu lai cao - Khái niệm ưu lai - Cơ sở di truyền ưu lai - Qui trình tạo giống có ưu lai cao + Tạo dòng chủng có kiểu gen khác + Lai dòng chủng để tạo tổ hợp gen khác (lai khác dòng đơn, lai khác dòng kép, lai thuận nghịch) + Chọn lọc tổ hợp có ưu lai cao Tạo giống phương pháp gây đột biến - Các bước + Xử lí mẫu vật tác nhân đột biến thích hợp + Chọn lọc thể đột biến có kiểu hình mong muốn + Tạo dòng chủng * Phân tích bước qui trình * - Các thành tựu tạo giống gây đột biến Việt nam Tạo giống công nghệ gen - Khái niệm công nghệ gen - Qui trình + Tạo ADN tái tổ hợp: Các bước tạo ADN tái tổ hợp + Chuyển ADN tái tổ hợp vào tế bào nhận + Phân lập dòng tế bào chứa ADN tái tổ hợp Phương pháp tải nạp phương pháp sử dụng tế bào gốc - Ứng dụng công nghệ gen: Các thành tựu tạo giống động – thực – vi sinh vật Tạo giống công nghệ tế bào *a Khái niệm công nghệ tế bào b Công nghệ tế bào thực vật - Lai tế bào sinh dưỡng + Loại bỏ thành tế bào trước ki đem lai → tế bào trần + Đưa dòng tế bào trần loài vào môi trường đặc biệt để chúng dung hợp với tạo tế bào lai + Đưa tế bào lai vào nuôi cấy môi trường đặc biệt để chúng phân chia tái sinh thành lai khác loài - Nuôi cấy hạt phấn noãn chưa thụ tinh + Hạt phấn noãn chưa thụ tinh nuôi cấy ống nghiệm để phát triển thành đơn bội + Chọn lọc dòng tế bào đơn bội có đặc tính mong muốn + dòng tế bào chọn đưpợc nuôi ống nghiệm với hóa chất đặc biệt → phát triển thành mô đơn bội → xử lí hóa chất gây đa bội để tạo lưỡng bội hoàn chỉnh * - Nuôi cấy tế bào invitro tạo mô sẹo * - Tạo giống chọn dòng tế bào xôma có biến dị