Khảo sát thành phần hóa học của cao hexane của rễ cây chùm ruột (phyllanthus acidus) thu hái ở tỉnh bình thuận

TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA HÓA HỌC BỘ MÔN HÓA HỌC HỮU CƠ  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CAO HEXANE CỦA RỄ CÂY CHÙM RUỘT (PHYLLANTHUS ACIDUS) THU HÁI Ở TỈNH BÌNH THUẬN GVHD: Th.S Dương Thúc Huy SVTH: Trần Thị Huệ MSSV: K38.201.040 Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 05 năm 2016 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii DANH MỤC CÁC CHỮ KÍ HIỆU VÀ VIẾT TẮT iv DANH MỤC HÌNH ẢNH, SƠ ĐỒ, BẢNG BIỂU v LỜI MỞ ĐẦU vi CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY CHÙM RUỘT PHYLLANTHUS ACIDUS 1.1.1 Tên gọi 1.1.2 Phân bố 1.1.3 Mô tả thực vật 1.1.4 Công dụng chùm ruột y học cổ truyền 1.2 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY CHÙM RUỘT PHYLLANTHUS ACIDUS 1.3 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÂY CHÙM RUỘT PHYLLANTHUS ACIDUS 1.4 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VỀ CÂY CHÙM RUỘT PHYLLANTHUS ACIDUS TRONG NƯỚC CHƯƠNG THỰC NGHIỆM 2.1 HÓA CHẤT, THIẾT BỊ 2.1.1 Hóa chất 2.1.2 Thiết bị 2.2 LY TRÍCH VÀ CÔ LẬP CÁC HỢP CHẤT 2.2.1 Nguyên liệu 2.2.2 Điều chế loại cao 2.2.3 Cô lập hợp chất hữu cao hexane CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 10 3.1 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HÓA HỌC HỢP CHẤT T1A 10 3.2 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HÓA HỌC HỢP CHẤT CRT3A 13 CHƯƠNG KẾT LUẬN - ĐỀ XUẤT 15 4.1 KẾT LUẬN 15 4.2 ĐỀ XUẤT 15 -ii- TÀI LIỆU THAM KHẢO 16 PHỤ LỤC -iii- -iii- LỜI CẢM ƠN Bằng tất trân trọng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến với:  Thầy Dương Thúc Huy – người Thầy đầy tâm huyết nhiệt tình Thầy dạy cho em kiến thức chuyên môn với kinh nghiệm nghiên cứu quý báu mà giúp em có niềm say mê nghiên cứu khoa học suốt thời gian Thầy hướng dẫn  Tất quý Thầy Cô khoa Hóa, trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh tận tình truyền đạt kiến thức quý báu suốt thời gian em theo học hoàn thành khóa luận  Các bạn nhóm làm khóa luận K38, bạn sinh viên khóa K39 trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh tận tình cộng tác, giúp đỡ em trình nghiên cứu hoàn thành khóa luận  Và cuối xin cảm ơn gia đình – chỗ dựa vững tinh thần suốt thời gian theo học thực đề tài trường Đại học Sư phạm Thành phố Hồ Chí Minh -i- LỜI MỞ ĐẦU Việt Nam quốc gia nằm khu vực có khí hậu nhiệt đới gió mùa, thiên nhiên ưu đãi cho loài thực vật đa dạng Từ xưa, người Việt Nam biết tận dụng nguồn tài nguyên vào việc làm thuốc chữa bệnh (gọi thảo dược) Nhưng ngẫu nhiên phải nhiều thời gian người ta nhận biết loại dùng làm thuốc Ngày với phát triển nhanh chóng khoa học kĩ thuật, ngành tổng hợp hóa dược phát triển Tuy vậy, hợp chất dễ dàng tổng hợp Để đáp ứng yêu cầu đó, đồng thời tận dụng ưu đãi thiên nhiên, ngành hóa học hợp chất thiên nhiên đời phát triển mạnh mẽ Rất nhiều hợp chất tự nhiên phân lập từ cỏ ứng dụng rộng rãi để sản xuất loại thuốc chữa bệnh bảo vệ sức khỏe người Hơn nữa, việc sử dụng thuốc Nam không gây tác dụng phụ phù hợp với sức khỏe người Các nguồn tài liệu cho thấy chùm ruột loài phân bố phổ biến nước nhiệt đới gió mùa Thái Lan, Việt Nam, Ấn Độ, Malaysia,…Các hợp chất phân lập từ vỏ thân chùm ruột có hoạt tính sinh học cao chống lại tổn thương gan, làm giảm huyết áp, có tính chất kháng viêm, giảm đau, chống oxi hóa Tuy nhiên nay, rễ chùm ruột chưa nghiên cứu kĩ sâu rộng Từ điều trên, thấy cần thiết phải nghiên cứu khảo sát tiếp tục thành phần hóa học rễ chùm ruột Phyllanthus acidus Việt Nam để tìm hợp chất có hoạt tính tương tự vỏ thân chùm ruột Xuất phát từ ứng dụng y học quý giá kế thừa nghiên cứu có nên định chọn nghiên cứu đề tài: “Khảo sát thành phần hóa học cao hexane rễ chùm ruột Phyllanthus acidus, thu hái tỉnh Bình Thuận” -vi- DANH MỤC CÁC CHỮ KÍ HIỆU VÀ VIẾT TẮT Tiếng Việt Ac Acetone AcOH Acid acetic C Chloroform d Doublet Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon (13) Mũi đôi dd Doublet of doublets Mũi đôi đôi EA Ethyl Acetate 13 C-NMR Carbon Nuclear Magnetic Resonance Hằng số tương tác spin – spin J H HMBC HSQC H-NMR Me Hexane Heteronuclear Multiple Bond Coherence Heteronuclear Single Quantum Coherence Proton Nuclear Magnetic Resonance ppm Methanol Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy Part per million s Singlet NMR SKC Tương quan 1H-13C qua 2, nối Tương quan 1H-13C qua nối Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Sắc kí cột UV Ultra violet Tia cực tím δ Chemical shift Độ chuyển dịch hóa học -iv- DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH, SƠ ĐỒ, BẢNG BIỂU  HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cây chùm ruột Hình 1.2 Một số hợp chất cô lập từ Phyllanthus acidus 5,6 Hình 3.1 Cấu dạng tương quan HMBC hợp chất T1A 11 Hình 3.2 Cấu dạng hợp chất CRT3A 13 Hình 4.1 Hai hợp chất cô lập từ cao hexane rễ chùm ruột 15  SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Quá trình trích ly cô lập hợp chất từ rễ chùm ruột  BẢNG BIỂU Bảng 2.1 Sắc kí cột dịch methanol Bảng 3.1 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C-NMR, HMBC chất T1A (CDCl ) 13CNMR (CDCl ) hợp chất phyllanthol[12] 12 Bảng 3.2 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C-NMR chất CRT3A (CDCl ) 13C-NMR (CDCl ) hợp chất 𝛼𝛼 – lupene[10,20] 14 -v- Khóa luận tốt nghiệp Trần Thị Huệ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY CHÙM RUỘT PHYLLANTHUS ACIDUS 1.1.1 Tên gọi Tên thông thường: chùm ruột Tên gọi khác: tầm ruột hay tầm giuộc Thuộc họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) Tên khoa học: Phyllanthus acidus Hình 1.1 Cây chùm ruột 1.1.2 Phân bố Cây chùm ruột có nguồn gốc từ Madagasca, sau di nhập vào nhiều nước vùng châu Á, châu Phi Phân bố chủ yếu vùng nhiệt đới cận nhiệt đới Ở Việt Nam, chùm ruột trồng phổ biến miền Nam 1.1.3 Mô tả thực vật Theo Phạm Hoàng Hộ, Đỗ Tất Lợi, Đỗ Huy Bích cộng sự, chùm ruột loại nhỏ, cao 3–5 m, thân nhẵn, cành có vỏ màu xám nhạt, cành non màu lục nhạt, nhẵn; cành già màu xám có nhiều vết sẹo rụng để lại Lá chùm ruột thuộc loại kép, mọc so le, cuống dài, chét mỏng, mềm, dài 4–5 cm, rộng 18–20 mm Gốc bầu, tròn, phần đầu phiến nhọn, mặt màu xám nhạt, gân rõ hai mặt Cụm hoa mọc kẽ rụng thành xim, dài 6–15 cm, cuống mảnh có cạnh; hoa nhỏ màu đỏ, hoa hoa đực Khóa luận tốt nghiệp Trần Thị Huệ cây; hoa đực có đài răng, nhị, rời; hoa có đài, bầu ô hoa mọc thành cụm từ 4–7 hoa mấu tròn Quả chùm ruột mọng, có khía, mảnh, đường kính khoảng mm cuống dài khoảng mm Khi chín có màu vàng nhạt, vị chua, ăn được.[21 -23] 1.1.4 Công dụng chùm ruột y học cổ truyền Theo Đỗ Tất Lợi, Đỗ Huy Bích cộng sự, y học cổ truyền nước, phận khác chùm ruột dùng làm thuốc chữa bệnh da, dùng nấu nước tắm chữa lở ngứa mề đay Vỏ thân chùm ruột dùng để tiêu hạch độc, ung nhọt, tiêu đờm trừ tích phổi, dùng bôi ngoài, chữa ghẻ, loét, vết thương sứt da chảy máu; ngậm chữa đau đau họng Bột vỏ thân ngâm giấm, uống chữa bệnh trĩ Rễ vỏ chùm ruột có độc, người Malaysia dùng đun sôi, xông hít chữa ho nhức đầu; hay người dân đảo Giava dùng chữa hen suyễn (dùng lượng nhỏ) Vỏ rễ sắc đặc ngâm rượu, bôi chữa vảy nến (psoriasis) Tuy nhiên, không dùng rễ vỏ rễ dạng uống [21,22] 1.2 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY CHÙM RUỘT PHYLLANTHUS ACIDUS Các nghiên cứu chùm ruột Phyllanthus acidus cho thấy có nhiều nhóm hợp chất alkaloid, flavonoid, lactone, steroid, terpenoid, lignan tannin, lignan, triterpene, alkaloid tannin loại hợp chất phổ biến phát Một số nghiên cứu hoá thực vật chùm ruột Phyllanthus acidus thực sớm công bố cô lập triterpene phytosterol (Dekker, 1908; Ultee, 1933; Sengupta Mukhopadhyay, 1966; Pettit cộng sự, 1982).[2,18,16,14] Các hợp chất triterpene cô lập thuộc khung oleane β-amyrin (22), khung lupane lupeol (23) khung cyclopropyl-hexacyclic triterpenoid phyllanthol (24) Trong đó, hợp chất sterol chủ yếu có khung sitosterol glycoside chúng Những nghiên cứu khoảng 15 năm gần chùm ruột Phyllanthus acidus công bố cô lập nhóm hợp chất norbisabolane sesquiterpenoid, với hoạt tính sinh học chúng đa dạng (Lv J.-J cộng sự, 2014; Vongvanich cộng sự, 2000).[8,19] Năm 2000, hai hợp chất phyllanthusol A (2) B (3) cô lập, có khung Khóa luận tốt nghiệp Trần Thị Huệ KHẢO SÁT CẤU TRÚC HÓA HỌC HỢP CHẤT CRT3A 3.2 Hợp chất CRT3A cô lập từ phân đoạn H1.2.3 Hợp chất CRT3A chất bột màu trắng, tan dung môi chloroform Phổ 1H-NMR (CDCl ): phụ lục Phổ 13C-NMR (CDCl ): phụ lục 6, phụ lục  Biện luận cấu trúc CRT3A Phổ 13C-NMR hợp chất CRT3A có ba mươi tín hiệu carbon, giúp xác định hợp chất CRT3A thuộc hợp chất triterpene Phổ 1H-NMR hợp chất CRT3A xuất sáu mũi đơn tương ứng với sáu nhóm methyl có độ dịch chuyển nằm khoảng 0.8–1.07 ppm (H -23, H -24, H -25, H -26, H -27 H -28) Ngoài có nhóm methyl mũi đơn cộng hưởng vùng từ trường thấp 𝛿𝛿 H 1.68 nhóm methyl gắn với carbon sp2 –C=CR CH Trên phổ 1H-NMR xuất hai tín hiệu vùng từ trường thấp hai proton 𝛿𝛿 H R 4.69 𝛿𝛿 H 4.57 ghép với với số ghép nhỏ J = 2.5 Hz Bên cạnh phổ R 13 C- NMR có hai tín hiệu carbon vùng alkene, có tín hiệu carbon tứ cấp 𝛿𝛿 C 151.0 tín hiệu carbon 𝛿𝛿 C 109.5 Từ giúp xác định hợp chất CRT3A R R có chứa nhóm isopropenyl –C(CH )=CH Kết hợp với tài liệu tham khảo (Mahato, 1994)[10] giúp xác định hợp chất CRT3A có khung sườn lupane Từ liệu phổ kết hợp với tài liệu tham khảo,[10,20] suy hợp chất CRT3A 𝛼𝛼 – lupene 29 20 21 30 19 12 13 25 11 26 14 10 18 15 H3C 22 17 16 CH3 28 CH3 CH3 27 H3C 24 23 Hình 3.2 Cấu dạng hợp chất CRT3A 14 CH3 CH3 Khóa luận tốt nghiệp Trần Thị Huệ Bảng 3.2 Dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C-NMR chất CRT3A (CDCl ) (CDCl ) hợp chất 𝛼𝛼 – lupene.[10,20] Vị trí Hợp chất CRT3A (CDCl ) H-NMR 𝛿𝛿 H [số H; dạng mũi; J (Hz)] 13 C-NMR 𝛿𝛿 C R R C-NMR Hợp chất 𝛼𝛼 – lupene [10,20] (CDCl ) 13 C-NMR 𝛿𝛿 C R 40.1 40.3 19.4 18.7 42.2 42.1 33.3 33.2 55.1 56.3 19.4 18.7 34.3 34.3 40.9 41.0 49.9 50.5 10 37.8 37.5 11 21.2 20.8 12 25.3 25.2 13 38.3 38.0 14 43.0 42.8 15 27.6 27.4 16 35.7 35.6 17 43.1 43.0 18 48.4 48.3 19 48.1 47.9 20 151.0 150.6 21 30.0 29.9 22 39.8 40.0 23 1.03 (3H, s) 33.7 33.4 24 0.80 (3H, s) 21.6 21.6 25 0.96 (3H, s) 15.9 16.1 26 1.07 (3H, s) 16.1 16.1 27 0.93 (3H, s) 14.6 14.6 28 0.87 (3H, s) 18.2 18.0 29 4.57 (1 H, d, 2.5) 4.69 (1 H, d, 2.5) 109.5 109.2 30 1.68 (3H, s) 19.8 19.3 15 13 Khóa luận tốt nghiệp Trần Thị Huệ CHƯƠNG KẾT LUẬN – ĐỀ XUẤT KẾT LUẬN 4.1 Từ rễ chùm ruột Phyllanthus acidus thu hái tỉnh Bình Thuận, phơi khô, xay nhuyễn thu 20.0 kg mẫu Tiến hành điều chế thu cao ethanol thô (1.0 kg) Thực phương pháp sắc kí cao ethanol thô thu hai hợp chất T1A CRT3A Sử dụng phương pháp phổ nghiệm đại so sánh với tài liệu tham khảo, xác định cấu trúc hợp chất hữu sau: 30 30 29 29 20 19 25 11 26 10 HO 24 11 26 28 17 13 28 14 16 15 18 12 25 27 14 22 17 13 21 19 22 18 12 20 21 23 24 15 10 16 27 23 CRT3A T1A 𝜶𝜶 – lupene Phyllanthol Hình 4.1 Hai hợp chất cô lập từ cao hexane rễ chùm ruột 4.2 ĐỀ XUẤT Vì điều kiện thời gian vật chất không cho phép, nên phạm vi đề tài này, khảo sát phân đoạn H1 Trong thời gian tới, có điều kiện tiến hành khảo sát hợp chất cao lại Đồng thời, tiến hành thử nghiệm số hoạt tính sinh học loại cao hợp chất cô lập 16 Khóa luận tốt nghiệp Trần Thị Huệ TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tham khảo tiếng anh [1] Chongsa W., Radenahmad N., Jansakul C., “Six weeks oral gavage of a Phyllanthus acidus leaf water extract decreased visceral fat, the serum lipid profile and liver lipid accumulation in middle-aged male rats”, Journal of Ethnophramacology, 396-404, 2014 [2] Dekker S., Pharm Weekbe, 95, 1156, 1908 [3] Durham D G., Reid R G., Wangboonskul J., Daodee S., “Extraction of Phyllanthusols A and B from Phyllanthus acidus and analysis by capillary electrophoresis”, Phytochem Ana, 13, 358-362, 2002 [4] Eliel E L., Wilen S H., Mander L N., “Stereochemistry Organic Compounds”, John Wiley & Sons: New York, 716, 1994 [5] Jain N K., Singhai A K., “Protective effects of Phyllanthus acidus (L.) Skeels leaf extracts on acetaminophen and thioacetamide induced hepatic injuries in Wistar rats”, Asian Pacific Journal of Tropical Medicine, 470-474, 2011 [6] Kumar S C., Bhattacharjee C., Debnath S., Chandu A N., Kanna K K., “Remedial effect of Phyllanthus acidus against bleomycin provoked pneumopathy”, Journal of Advanced Pharmceutial Research, 2(1), 317-325, 2011 [7] Leeya Y., Mulvany M J., Queiroz E F., Marston A., Hostettmann K., Jansakul C., “Hypotensive activity of an n-butanol extract and their purified compounds from leaves of Phyllanthus acidus (L.) Skeel in rats”, European Journal of Pharmacology, 649, 301-313, 2010 [8] Lv J.-J., Yu S., Wang Y.-F., Wang D., Zhu H.-T., Cheng R.-R., Yang C.-R., Xu M., Zhang Y.-J., “Anti-hepatitus B virus norbisabolane sesquiterpenoids from Phyllanthus acidus and the establishment of their absolute configurations using theoretical calculations”, The Journal of Organic Chemistry, 79(12), 5432-5447, 2014 17 Khóa luận tốt nghiệp [9] Trần Thị Huệ Mackeen M M., Ali A M., Abdullah M A., Nasir R M., Mat N B., Razak A R., Kawazu K., “Antinematodal activity of some Malaysian plant extracts against the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus”, Pesticide Science, 51(2), 165170, 1997 [10] Mahato S B., Kundu A P., “13C NMR spectra of pentacyclic triterpenoids- A compilation and some salient features”, Phytochemistry, 37(6), 1517-1575, 1994 [11] Menlendez P A., Capriles V A., “Antibacterial properties of tropical plants from Puerto Rico”, Phytomedicine: international journal of phytotherapy and phytopharmacology, 13, 272-276, 2006 [12] Ndlebe V J., Crouch N R., Mulholland D A., “Triterpenoid from the African tree Phyllanthus polyanthus”, Phytochemistry Letters 1, 11-17, 2008 [13] Nguyen T T., Duong T H., Nguyen T A T., Bui X H., “Study on the chemical constituents of Phyllanthus acidus (Euphorbiaceae)”, Journal of Science and Technology, 52(5A), 156-161, 2014 [14] Pettit G R., Cragg G M., Gust D., Brown P., Can J Chem., 60, 939, 1982 [15] Satish S., Raghavendra M P., Raveesha K A., “Antifungal potentiality of some plant extracts against Fusarium sp.”, Archives of Phytopathology and Plant Protection , 42(7), 618-625, 2009 [16] Sengupta P., Mukhopadhyay J., “Terpenoids and related compds VII Triterpenoids of Phyllanthus acidus”, Phytochemistry, 5(3), 531-534, 1966 [17] Marisa S., Jiraporn O., Roswitha S., Supaporn P., Ana R., Andre S., Tiago G., Chaweewan J., Margarida D A., Rainer S., et al, “An extract from the medicinal plant Phyllanthus acidus and its isolated compounds induce airway chloride secretion: A potential treatment for cystic fibrosis.”, Molecular pharmacology, 71(1), 366-376, 2007 [18] Ultee A J., “The phytosterol of Phyllanthus acidus Skeels”, Pharmaceutisch Weekblad, 70, 1173-1175, 1933 18 Khóa luận tốt nghiệp [19] Trần Thị Huệ Vongvanich N., Kittakoop P., Kramyu J., Tanticharoen M., Thebtaranonth Y., “Phyllanthusols A and B, cytotoxic norbisabolane glycosides from Phyllanthus acidus skeel”, Journal of Organic Chemistry, 65(17), 5420-5423, 2000 [20] Wenkert E., Baddeley G V., Burfitt I R., Moreno L N., “Carbon – 13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy of Naturally – occurring Substances LVII Triterpenes Related to Lupane and Hopane”, Organic Magnetic Resonance, 11(7), 337-343, 1978 Tài liệu tham khảo tiếng việt [21] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đảm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Như, Nguyễn Tập, Trần Toàn, “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, tập 1, 460-461, 2004 [22] Đỗ Tất Lợi, “Những thuốc vị thuốc Việt Nam”, NXB Y học, 515-516, 2004 [23] Phạm Hoàng Hộ, “Cây cỏ Việt Nam”, II, NXB trẻ, 190, 2003 19 PHỤ LỤC Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất T1A dung môi CDCl 3.2 1.00 3.0 1.15 26 3.00 2.8 1.05 2.6 29 2.4 0.85 25 30 28 0.95 f1 (ppm) 23 3.04 2.88 3.16 3.32 3.37 0.75 2.2 24 3.21 3.205 3.195 3.183 3.172 1.141 1.003 0.962 0.941 0.929 0.897 0.875 0.863 0.858 0.767 0.747 2.169 2.0 2.043 1.8 1.6 f1 (ppm) 1.4 1.2 1.0 0.8 0.6 0.4 27 27 3.04 2.88 3.16 3.32 3.37 3.21 1.02 T1A-CDCL3-1H 1.866 1.851 1.837 1.813 1.781 1.766 1.734 1.708 1.333 1.307 1.294 1.279 1.259 1.141 1.003 0.962 0.941 0.929 0.897 0.875 0.863 0.858 0.767 0.747 3.00 0.95 0.2 0.0 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất T1A dung môi CDCl 79.36 75 70 65 60 55.72 54.03 55 18 45 f1 (ppm) 40 22 19 35 12 10 20 T1A-CDCL3-13C 50 50.13 14 30 21 17 28 13 16 24 25 42.04 40.75 38.88 38.45 38.41 37.29 37.02 35.18 32.06 31.07 29.69 29.37 28.21 27.88 27.26 15 21.29 20.70 18.12 17.96 17.87 17.59 16.03 15.28 14.20 13.32 20 30 29 11 26 25 15 23 27 10 Phụ lục Phổ HSQC hợp chất T1A dung môi CDCl 27 3.4 3.2 3.0 2.8 2.6 2.4 2.2 T1A-CDCL3-HSQC 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 f2 (ppm) 1.0 0.8 0.6 27 0.4 0.2 0.0 27 -0.2 -0.4 -0.6 80 70 60 50 40 30 20 f1 (ppm) Phụ lục Phổ HMBC hợp chất T1A dung môi CDCl 18 24 3.2 3.0 2.8 2.6 2.4 2.2 2.0 T1A-CDCL3-HMBC 1.8 1.6 1.4 1.2 f2 (ppm) 1.0 23 0.8 24 0.6 27 0.4 0.2 0.0 27 -0.2 -0.4 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 f1 (ppm) Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất CRT3A dung môi CDCl 5.0 4.8 29 4.8 1.00 4.6 29 0.92 4.4 1.00 4.2 4.6 f1 (ppm) 29 4.694 4.689 29 4.7 4.576 4.573 4.571 0.92 4.694 4.689 4.576 4.573 4.571 4.0 3.8 4.5 3.6 3.4 3.2 3.0 2.6 2.8 f1 (ppm) 2.4 3.34 2.2 2.0 1.8 CRT3A-CDCL3-1H 2.534 2.527 2.519 2.512 2.504 2.500 2.488 2.473 2.468 2.453 2.427 2.418 2.411 2.402 2.395 2.389 2.379 2.371 2.356 1.684 2.29 30 5.40 1.6 1.4 1.10 9.16 1.2 1.05 23 5.57 26 1.072 1.026 1.00 0.8 1.254 1.072 1.026 0.957 0.933 0.874 0.799 0.874 0.85 0.6 28 0.95 0.90 f1 (ppm) 0.957 0.933 27 4.60 5.36 3.76 25 1.0 9.16 5.57 4.60 5.36 3.76 3.82 0.4 0.80 24 3.82 0.799 0.75 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất CRT3A dung môi CDCl 150 20 151.051 140 130 120 110 29 109.483 100 90 80 f1 (ppm) 70 60 CRT3A-CDCL3-13C 50 55.042 49.829 48.314 48.037 40 40.124 39.765 38.314 35.668 34.316 33.710 29.979 29.852 27.575 26.797 26.618 21.616 21.189 19.800 18.161 16.123 15.933 30 20 10 Phụ lục Phổ 13C-NMR dãn rộng hợp chất CRT3A dung môi CDCl 70 65 60 55 55.042 50 18 19 49.829 48.314 48.037 45 17 14 10 13 40 f1 (ppm) 22 35 16 23 30 21 CRT3A-CDCL3-13C 43.043 40.124 39.765 38.314 35.668 34.316 33.710 15 25 12 24 29.979 29.852 27.575 26.797 26.618 25.262 11 20 30 28 15 27 25 26 21.616 21.189 19.800 18.161 16.123 15.933 14.660 10 l [...]... hưởng từ hạt nhân Bruker  Tất cả phổ NMR được ghi tại phòng Phân tích Trung tâm trường Đại học Khoa học Tự nhiên thành phố Hồ Chí Minh, số 227, Nguyễn Văn Cừ, Quận 5, thành phố Hồ Chí Minh 2.2 LY TRÍCH VÀ CÔ LẬP CÁC HỢP CHẤT 2.2.1 Nguyên liệu Rễ chùm ruột được thu hái ở tỉnh Bình Thu n vào tháng 4 năm 2014 Rễ cây được rửa sạch, loại bỏ phần sâu bệnh, chặt nhỏ, phơi khô trong bóng râm và nghiền nhỏ thành. .. (29), 4-hydroxybenzoic acid (30), hypogallic acid (31), caffeic acid (32) được cô lập từ cao n-butanol của lá cây chùm ruột (Leeya và cộng sự, 2010).[7] 1.3 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÂY CHÙM RUỘT PHYLLANTHUS ACIDUS Những nghiên cứu về hoạt tính sinh học trên cao chiết các bộ phận của cây chùm ruột Phyllanthus acidus cũng khá phổ biến, như hoạt tính kháng khuẩn (Menlendez và cộng sự, 2006),[11]... d, 2.5) 109.5 109.2 30 1.68 (3H, s) 19.8 19.3 15 13 Khóa luận tốt nghiệp Trần Thị Huệ CHƯƠNG 4 KẾT LUẬN – ĐỀ XUẤT KẾT LUẬN 4.1 Từ rễ cây chùm ruột Phyllanthus acidus được thu hái ở tỉnh Bình Thu n, phơi khô, xay nhuyễn thu được 20.0 kg mẫu Tiến hành điều chế thu được cao ethanol thô (1.0 kg) Thực hiện các phương pháp sắc kí trên cao ethanol thô thu được hai hợp chất T1A và CRT3A Sử dụng các phương... thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn của bột vỏ cây chùm ruột trên hai dòng chủng vi khuẩn là Bacillus subtilis và Klebsiella Tuy nhiên, công bố của tác giả không cho thấy bất kỳ sự xác định cấu trúc của hợp chất nào cô lập được từ vỏ thân cây chùm ruột ở Tam Kỳ, tỉnh Quảng Nam và cho đến nay, các kết quả này vẫn chưa được tìm thấy trong các báo cáo khoa học tại Việt Nam 4 Khóa luận tốt nghiệp Trần Thị Huệ... hệ dung môi n -hexane: methanol (100:0.2) thu được hợp chất T1A (Sơ đồ 2.1) Trên phân đoạn H1.2.3 thực hiện SKC silica gel và giải ly bằng hệ dung môi n -hexane: methanol (100:0.2) thu được hợp 9 chất CRT3A (Sơ đồ 2.1) Khóa luận tốt nghiệp Trần Thị Huệ Rễ chùm ruột Làm sạch, để khô, nghiền nhỏ Bột khô (20.0 kg) Đun hồi lưu trong ethanol ở 80oC trong 30 phút Bỏ phần rắn, cô quay phần dịch Cao ethanol thô... cho phép, nên trong phạm vi của đề tài này, chúng tôi chỉ khảo sát trên phân đoạn H1 Trong thời gian sắp tới, nếu có điều kiện chúng tôi sẽ tiến hành khảo sát các hợp chất trên cao còn lại Đồng thời, chúng tôi sẽ tiến hành thử nghiệm một số hoạt tính sinh học ở các loại cao và hợp chất đã cô lập được 16 Khóa luận tốt nghiệp Trần Thị Huệ TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tham khảo tiếng anh [1] Chongsa W.,... tham khảo tiếng việt [21] Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đảm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Như, Nguyễn Tập, Trần Toàn, Cây thu c và động vật làm thu c ở Việt Nam”, NXB Khoa học và Kỹ thu t, Hà Nội, tập 1, 460-461, 2004 [22] Đỗ Tất Lợi, “Những cây thu c và vị thu c Việt Nam”, NXB Y học, 515-516, 2004 [23] Phạm Hoàng Hộ, Cây. .. và cộng sự, 2000).[8,19] Các hợp chất được cô lập từ cao n-butanol của lá cây chùm ruột Phyllanthus acidus đều có khả năng làm giảm huyết áp và giãn cơ vòng ở động mạch chủ (Leeya và cộng sự, 2010).[7] 3 Khóa luận tốt nghiệp 1.4 Trần Thị Huệ TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VỀ CÂY CHÙM RUỘT PHYLLANTHUS ACIDUS TRONG NƯỚC Năm 2014, Nguyễn Thái Thế đã cô lập được các hợp chất phenylbutanoid và diphenylheptanoid, trong... trong chi Phyllanthus Các hợp chất cô lập gồm glochodinone (25), 4-[4’-(O-β-D-glucopyranosyl)phenyl-2-butanone (26), 1-[4’-(O-β-Dglucopyranosyl)phenyl]-5-[4”-(O-β-D-glucopyranosyl)phenyl]-3-pentanone (27) Năm 2015, trong tóm tắt kết quả nghiên cứu đề tài luận văn Thạc sĩ của Võ Thị Như Thảo, với đề tài : “Nghiên cứu tách chiết và xác định thành phần hóa học của vỏ thân cây chùm ruột Tam Kỳ, tỉnh Quảng Nam... so với các hợp chất được cô lập trước đây, với hợp phần tricyclo[3.1.1.1] có trong cấu trúc của chúng Ngoài ra, các hợp chất phyllanthacidoid cũng được xác định là thành phần chính có trong rễ cây chùm ruột, với hàm lượng khoảng 1 mg/g, tính trên khối lượng rễ chưa khô (Vongvanich và cộng sự, 2000).[19] Quá trình chiết xuất và phân tích hàm lượng của phyllanthacidoid A và B cũng được xác nhận bằng