TỔNG QUAN về BỆNH đầu ĐEN DO HISTOMONAS MELEAGRIDIS TRÊN gà

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH *************** BÙI HỮU DŨNG TỔNG QUAN VỀ BỆNH ĐẦU ĐEN DO HISTOMONAS MELEAGRIDIS TRÊN GÀ ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN THẠC SỸ THÚ Y Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 9/2014 MỤC LỤC DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT SC: Subcutaneous Injection IP: Intraperitoneal Injection H meleagridis: .Histomonas meleagridis DANH SÁCH CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 1.1 Vòng đời H meleagridis gia cầm TỔNG QUAN TÀI LIỆU Giới thiệu bệnh Bệnh Histomonas bệnh ký sinh trùng truyền nhiễm nguy hiểm gà gà tây loại đơn bào Histomonas meleagridis gây (Histomoniasis) Bệnh có bệnh tích đặc trưng: Viêm hoại tử tạo mủ manh tràng gan, thể trạng xấu, da vùng đầu mào tích thâm đen nên từ bệnh có tên bệnh đầu đen Cũng biến đổi đặc trưng tập trung song hành gan ruột bệnh lại có tính lây lan nhanh, nên bệnh có tên bệnh viêm hoại tử ruột – gan Ở Việt Nam biến đổi đặc trưng giai đoạn cuối bệnh tạo kén manh tràng nên người chăn nuôi thường gọi bệnh kén ruột Trên giới thiệt hại kinh tế bệnh khó để xác định Bệnh nguy hiểm gà thiệt hại chết dự đoán cao gà tây tần số xảy số lượng loài chim liên quan đến bệnh (AAA, 1986) Các chuồng gà bị nhiễm mầm bệnh nghiêm trọng trứng giun Heterakis gây làm lây truyền bệnh từ đàn sang đàn khác Bệnh gây nhiều thiệt hại thường chẩn đoán sai, nhầm sang bệnh cầu trùng, viêm ruột hoại tử Mặc khác, phát bệnh thường dùng thuốc không đa số loại kháng sinh thị trường không trị bệnh Lịch sử bệnh Bệnh Histomonas bệnh toàn giới loài cầm, gây ký sinh trùng đơn bào gọi Histomonas meleagridis Bệnh lần phát Rhode Island (Mỹ) vào năm 1893 cho biết bệnh thể nhẹ xảy gà thường dẫn đến vấn đề quản lý Bệnh báo cáo khắp lục địa sớm tìm thấy nhiều nước khác Bệnh nghiêm trọng gà tây, tỷ lệ tử vong cao gần 100% đàn báo cáo gần bệnh ảnh hưởng đến gà Sự phát triển thuốc chống Histomonas năm 1960 dẫn đến suy giảm tỷ lệ chết gà tây bệnh đầu đen Không may mắn cho người chăn nuôi gia cầm, loại thuốc phát triển để chống bệnh đầu đen cuối lại bị cấm (Mcdougald, 2005) Năm 1920, Tyzzer lần mô tả tượng bệnh gà tây loại đơn bào gây với biểu bất thường da vùng đầu có màu xanh tím sau nhanh chóng trở nên thâm đen ông đặt tên Bệnh đầu đen Bệnh nhanh chóng tác giả khác quan sát thấy Bắc Mỹ, Tây Âu hàng loạt nước khác Nam Mỹ, Nhật Bản Ở Đông Âu, Mincheva thông báo bệnh có mặt Bungari vào năm 1950 Ngày bệnh có mặt khắp năm châu, nước có ngành chăn nuôi gà tây gà ta theo lối tập trung chăn thả Ở Đức, Các ổ dịch xảy gà vào năm 2005 gà đạt 17 tuần tuổi Ổ dịch thứ xảy năm 2009 gà tuần tuổi Tỷ lệ tử vong tăng đến 26 – 65 % vòng vài ngày điều trị với hợp chất khác nhau.Trong hai trường hợp H meleagridis thuộc kiểu gen A phát chưa phát nguồn lây nhiễm rõ ràng Ở Việt Nam bệnh phát vào tháng năm 2010 Lê Văn Năm cộng phát Ông cho trang trại chăn nuôi gà thịt bị ô nhiễm nặng với giun kim mà biết đến vectơ sinh học truyền bệnh chuyển sang chăn nuôi gà tây Căn nguyên Histomonas meleagridis loại đơn bào yếm khí, đa hình thái: hình trùng roi (4 roi), hình Amip hình lưới) Histomonas với hình Amip có kích thước -30µm, thể hình roi Histomonas có kích thước từ 20 -30 µm, bé Histomonas hình lưới: -10 µm Trong dạng hình thái hình roi phổ biến dễ nhận biết chúng có nhân (1 nhân to nhân nhỏ) từ nhân to mọc roi tồn giai đoạn khác biệt: Các loại ký sinh giai đoạn “nắm giữ’’ khu vực ngoại biên thương tổn, kích cỡ – 17 µm, di động kiểu amíp xuất hình thành cuống giả Giai đoạn ‘’sinh dưỡng’’, trung roi có kích thước lớn (12 – 21 µm), bó vào cụm không bào để tạo thành mô Giai đoạn thứ thể thương tổn tăng bạch cầu nhỏ hình thức tái tạo lại Histomonas chuyển động theo hai phương thức xoắn vặn theo kiểu sóng Chu trình sinh học phát triển Histomonas meleagridis sau: mô tổ chức ký chủ (gà ta gà tây), Histomonas sinh sản theo phương thức tự nhân đôi tế bào gan, manh tràng sinh sản mạnh giai đoạn thể lưới Tuy nhiên, làm để Histomonas meleagridis thâm nhập ký sinh vào trứng giun kim tiếp tục phát triển chưa nghiên cứu kỹ chưa có giải pháp thoả đáng chế Khi khỏi ký chủ, thể hình roi thể Amip chúng sống 24h, thể lưới, chúng tồn 150 tuần trứng giun kim Heterakis gallinae theo phân gà thải (Farr, 1961) Điều kiện khô nhiệt độ thấp giúp cho Histomonas tồn lâu môi trường thiên nhiên thể Histomonas nuôi cấy môi trường nhân tạo , yếm khí * Vòng đời Histomonas meleagridis Sự tồn sinh vật với giun kim Heterakis gallinarum số loại giun đất thường thấy đất nuôi gia súc gia cầm, Gibbs (1962) trình bày thể nhỏ tìm thấy kính hiển vi Lee (1969) quan sát loại hình nhỏ 3µm vi chép phát Histomonas phát triển từ trứng Heterakis vitro (Ruff M D Hansen M F 1970) Cơ chế lây nhiễm Histomonas trứng chưa xác định Springer cộng (1969) phát giun đực nhỏ lấy từ gà chứa Histomonas sống Giun có khả truyền Histomonas trứng Heterakis trưởng thành có khả truyền Những giun bị nhiễm Histomonas giao hợp làm cho sinh vật đơn bào vào trứng trước hình thành lớp vỏ Những giun đất đóng vai trò vận chuyển trứng Heterakis nở đó, giun nhỏ tồn mô giun đất Do đó, giun đất thực thể để thu gom tập trung trứng Heterakis từ môi trường sân chơi nuôi gà Sơ đồ 1.1 Vòng đời H meleagridis gia cầm Mặc dù gà tây bị nhiễm trực tiếp ăn phải Histomonas sống phân thú, chất khó tồn Histomonas nên chuyện khó xảy Histomonas tồn bên thể vật chủ qúa vài phút không trứng Heterakis giun đất bảo vệ Đường truyền lây Bệnh lây qua đường tiêu hóa (qua thức ăn, nước uống bị nhiễm trứng giun có chứa Histomonas) Khi gia cầm ăn phải trứng giun có chứa Histomonas, chúng công vào manh tràng mô manh tràng Khi bệnh tiến triển, manh tràng có mùi hôi xuất màu vàng Trong lòng manh tràng chứa hợp chất lỏng tế bào chết máu Sau đó, vi sinh vật đơn bào theo máu vào gan phá huỷ gan tạo nên vùng hoại tử (tế bào chết) Đôi H meleagridis công vào quan khác thận, phổi, tim não Blackhead giết chết gà bệnh thường bị bội nhiễm số vi khuẩn thứ cấp E Coli, Bacillus subtilis, Clostridium… gây bệnh nhiễm trùng thứ cấp gây chết nhiều gà (Mc Dougald, 2005) Mặt khác chúng tiếp tục xâm nhập vào trứng giun cư trú manh tràng theo phân Những gia cầm khác ăn phải tiếp tục phát bệnh Lây nhiễm qua giun đất: Khi trứng giun kim thể gà nhiễm Histomonas thải môi trường chuồng ở, đất Giun đất ăn phải, gà lại ăn giun đất mầm bệnh phát (trường hợp gà thả rong bị nhiễm cao) Ở số ổ dịch khác xảy gà người ta không tìm thấy trứng giun manh tràng, có lẽ có cách truyền bệnh khác mà ta chưa phát Một số gia cầm bị lây nhiễm trực tiếp đàn thông qua nguồn nước bị nhiễm bệnh (Hu cs., 2004; Mc Dougald Fuller, 2005) Khi gia cầm ăn trực tiếp H meleagridis, thí nghiệm đề nghị chúng khả sống sót qua dày – đặc biệt dày tuyến - acid dày tiết Vì thế, Histomonas lây truyền qua đường miệng (Hu cs 2004) Tuy nhiên, cho gà nhịn ăn khoảng giờ, thiếu acid hệ dày ruột làm cho môi trường trở nên trung tính điều cho phép Histomonas sống sót qua đường miệng ( McDougald, 2005) Sự phát sinh phát dịch bệnh * Các vật chủ thí nghiệm tự nhiên Một số lượng lớn chim thuộc gà phát vật chủ chứa Histomonas meleagridis Gà tây, gà rừng (chukar) gà Gô cổ khoang bị bệnh Histomoniasis nặng nhất; gà dò, công, gà Nhật, chim cút trắng, chim trĩ mắc bệnh dạng nhẹ * Sinh vật truyền bệnh Vai trò làm sinh vật truyền bệnh cho Histomonas giun kim Heterakis quan trọng chúng động vật ký sinh loài chim thuộc gà chúng bảo vệ Histomonas trứng trình truyền từ chim sang chim khác Gà giò sinh vật truyền bệnh chủ yếu Tuy nhiên, với tốc độ sinh trưởng cao gà giò thay đổi việc quản lý sản lượng gia cầm chim lấy thịt, tầm quan trọng loài việc lan truyền Histomonas meleagridis bị giảm xuống Gà chọi, chim trĩ chim cút trắng tự nhiên sinh vật truyền bệnh Ngoài ra, giun đất, động vật chân đốt bao gồm: bướm, châu chấu, mọt gỗ dế tác nhân học gây bệnh * Thời kỳ ủ bệnh Bệnh đầu đen xảy Histomonas gây xâm nhập qua thành ruột, sinh sôi nảy nở, vào máu cuối sống ký sinh tế bào gan tế bào niêm mạc ruột thừa Các dấu hiệu Histomonosis xuất hịên rõ ràng từ 7-12 ngày thường xảy 11 ngày sau nhiễm bệnh Thời gian ủ bệnh tương tự theo cách nhiễm bệnh tự nhiên, tức truyền qua trứng Heterakis chứa Histomonas Trên thực nghiệm, thương tổn phát sau gà tây nhiễm qua lỗ huyệt cách cấy Histomonas trước khoảng ngày so với nhiễm bệnh qua trứng Heterakis 10 Đặc điểm dịch tễ * Mầm bệnh Về mặt dịch tễ học Histomonas thể nguyên vẹn vai trò truyền bệnh sức đề kháng chúng kém, khỏi thể vật chủ thời gian ngắn bị chết Mặc dù nhiễm bệnh tự nhiên xaỷ số loài gia cầm, gà tây coi vật chủ dễ nhiễm bệnh Gà dễ bị nhiễm bệnh, dạng bệnh nhẹ Gà từ 4-6 tuần tuổi gà tây từ 3-12 tuần tuổi có nguy nhiễm bệnh cao Hệ vi khuẩn đóng vai trò tạo Histomonas meleagridis phát triển bệnh Các thương tổn Histomonosis gây gà tây tạo điều kiện cho Clostridium perfringens E coli Việc tách Histononas meleagridis (H meleagridis) ống nghiệm thường làm mầm bệnh kế phát Các chủng cụ thể H meleagridis với mầm bệnh khác chưa mô tả kỹ * Đặc điểm dịch tễ Bệnh Histomonas meleagridis thường xuyên nổ gia đình sở nuôi gà ta chung với gà tây Bệnh thấy thuỷ cầm gà hoang dã, nhiên chúng lại vật mang trùng phổ biến lây bệnh cho gà ta gà tây Bệnh thường thấy gà tây từ tuần đến 2-3 tháng tuổi, gà ta chậm chút: từ tuần đến -4 tháng tuổi Một yếu tố quan trọng để Histomonas tồn phát tán mạnh môi trường thiên nhiên chúng thường ký sinh trứng giun kim Heterakis, mà nuôi gà thương phẩm làm giống 100% gà bị nhiễm loại giun Bởi gà ta gà tây bị nhiễm Histomonas chủ yếu qua đường ăn uống có trứng 11 giun kim Heterakis gallinae Nói cách khác trứng giun kim vật ký chủ trung gian nguồn bệnh chủ yếu bệnh Bệnh Histomonas thường dịch địa phương Bệnh phát thành dịch phải tùy thuộc vào tương quan vật chủ tác nhân gây bệnh Trong điều kiện định phụ thuộc vào vùng địa lý có vật chủ trung gian giun kim loại giun đất khác Histomonas công gây bệnh Vì vậy, thời gian ủ bệnh khác từ – 12 ngày kéo dài vài tháng Bệnh bùng phát mạnh vào tháng nóng ẩm: cuối xuân, hè, hè thu Trong gà lớn tuổi (gà già, gà đẻ) bệnh thường xảy cuối thu mùa đông Điều kiện vệ sinh kém, giun đất côn trùng yếu tố truyền lây bệnh Tỷ lệ tử vong tỷ lệ mắc Tỷ lệ tử vong tỷ lệ mắc phụ thuộc nhiều vào cách thức, liều lượng tiếp xúc vật chủ tương ứng với tác nhân gây bệnh Ở bệnh tự nhiên, tỷ lệ tử vong thường đạt đỉnh điểm sau 17 ngày sau giảm xuống sau tuần Farmer Stepheson (1949) cho biết: số gà tây tiếp xúc với khu vực lây nhiễm gà dò có tỉ lệ bệnh 80% tỉ lệ tử vong 70% Qua gây thực nghiệm, tỉ lệ tử vong gà tây lên tơí 100% Mặc dù nhìn chung tỉ lệ tử vong Histononas gà dò thấp, nhiên tỉ lệ tử vong Histomonas bệnh tự nhiên vượt 30% Đôi người ta phát loại Histomonas có tính độc hại cao gà dò gây chết cao gà 70% Cơ chế sinh bệnh Histomonas xâm nhập chủ yếu qua đường miệng nhanh chóng bám vào dày ruột, phần manh tràng Tại đây, chúng bắt đầu sinh sản theo hình thức nhân đôi Hàng triệu tế bào manh tràng, dày bị phá hủy thời gian ngắn Histomonas gây ổ loét hoại tử sau viêm phúc mạc cấp Histomonas xâm nhập vào máu thông qua vết loét đến quan khác, đặc biệt gan Tại chúng gây ổ viêm hoại tử phá huỷ cấu trúc chức gan làm cho thể trạng gà nhanh chóng sa sút 12 Các ổ viêm loét manh tràng gan tạo điều kiện thuận lợi cho nhiều loại vi khuẩn gây bệnh nhiễm trùng thứ phát khác, đặc biệt E.coli, C perfringen, Coccidia… khiến cho gà kiệt sức chết nhanh Sự miễn dịch Đáp ứng miễn dịch thành công phần việc kiểm soát Histomonas báo cáo khác tùy thuộc vào tác động Đáp ứng miễn dịch gà tây sử dụng vaccine sống nhược độc cần tuần để phát triển Hầu hết, người chăn nuôi kết luận rằng, đáp ứng miễn dịch gia cầm chống lại mầm bệnh sử dụng vi sinh vật sống không thực tế Các vi sinh vật bị giết chết tạo miễn dịch tiêm SC IP tác dụng bảo vệ (Robert B Beckstead, 2014) Miễn dịch chủ động: Sự miễn dịch phát sinh gà tây theo tự nhiên tiêm phòng không đủ để bảo vệ chống lại Histomonas (Nele, Ellen ons, Maarten Bruno, 2008) Từ gà tây bị chết bệnh , tất công tác liên quan đến miễn dịch gà tây dựa vào việc tiêm phòng dịch Miễn dịch bị động: Các nỗ lực để tạo đáp ứng miễn dịch bị động cách tiêm kháng thể vào màng bụng cho gà không thành công, mức độ bảo vệ quan sát thấy (Nele, Ellen ons, Maarten Bruno, 2008) Khi gà tây nhận đáp ứng miễn dịch bị động chúng chết u mô bệnh tích đường ruột điển hình phát triển 10 Triệu chứng lâm sàng Theo Lê văn Năm (2010), thời kỳ ủ bệnh thường kéo dài từ - tuần phụ thuộc nhiều vào nhiễm trùng thứ phát Bệnh thể thể cấp tính mãn tính, bệnh xảy thể cấp a/ Thể cấp cấp tính Các triệu chứng lâm sàng bệnh thể cấp dội thường thấy gà -4 tháng tuổi 13 Bệnh xảy đột ngột, gà ủ rũ rúc đầu vào cánh, đứng dạng rộng chân, sã cánh, xù lông, bỏ ăn, sốt cao 43 - 44 °C, tiêu chảy phân vàng lẫn bọt, phân vàng xanh, vàng trắng lẫn máu Da mép, da vùng đầu, mào, tích nhanh chóng có màu xám xanh chuyển sang xanh đen, nhìn thấy rõ gà tây, từ bệnh có tên bệnh đầu đen Gần cuối giai đoạn ốm thân nhiệt gà giảm mạnh xuống mức bình thường (39 – 38 °C) nên gà cảm thấy lạnh Vì vậy, gà bệnh tìm nơi có ánh nắng mặt trời lò sưởi để sưởi ấm, mắt nhắm nghiền, đứng im không cử động Bệnh kéo dài 10 -20 ngày nên gà gầy, chúng chết suy nhược thể Tỷ lệ chết cao 80-95% (nếu không điều trị kịp thời) Gà nhiễm trùng thể nhẹ nghiêm trọng gây tỷ lệ tử vong cao Phân gà màu lưu huỳnh kết hợp với máu thải Đôi bệnh lý gà gần giống bệnh cầu trùng b/ Thể mãn tính Thể mãn tính thường thấy gà ta, gà tây lớn tuổi với xuất triệu chứng đặc trưng mô tả phần thể cấp tính, cường độ biểu yếu quan sát thấy thể trạng đàn gà lúc tốt, lúc xấu Lúc đầu gà phân loãng, phân sống sau chuyển sang sệt màu cafe vàng xanh lẫn máu, sau – ngày mắc bệnh, phân nhầy lẫn nhiều máu hơn, chí máu tươi khó đông giống máu cá chết, sau phân đóng thành thỏi rắn có màu gạch non, xung quanh bãi phân toàn nước, lúc chết phân lại loãng nhầy, lờ lờ trắng đục nước sữa loãng Bệnh kéo dài 2-3 tuần gà bị chết suy nhược tự nhiễm độc 11 Bệnh tích 11.1 Bệnh tích đại thể Bệnh tích bệnh Histomonas tập trung chủ yếu manh tràng gan 14 a/ Các biến đổi manh tràng Các biến đổi manh tràng xảy bên hai bên với biểu đặc trưng như: Lúc đầu phồng to, dài hơn, sau thành manh tràng dày lên rắn Màu sắc, độ đàn hồi độ trơn bóng manh tràng bị thay đổi Bề mặt bên manh tràng trở nên sần sùi, có màu vàng xám, thành manh tràng tăng sinh dầy lên rắn Khi bổ đôi manh tràng ta thấy chất chứa có màu trắng vàng xanh trắng nâu thẩm xuất chứa Fibrin đóng quánh tế bào khác bị cazein hoá, người chăn nuôi gọi bệnh kén ruột Trong thành ruột cắt ngang có đám bã đậu trắng, thành ruột dầy lên nhiều lần làm lỗ ruột bé hẹp lại Niêm mạc manh tràng bị viêm loét nặng, chí bị thủng chảy chất chứa vào xoang bụng gây viêm phúc mạc nặng gà chết đột tử nhiều trường hợp manh tràng dính chặt với manh tràng dính vào quan nội tạng phúc mạc bụng b/ Các biến đổi gan Gan sưng to cực đại, gấp 2-3 lần bình thường, mềm nhũn nhìn thấy nhiều ổ viêm xuất huyết hoại tử bề mặt gan làm cho gan lúc đầu có màu lổ đổ hình hoa cúc Về sau ổ viêm loét hoại tử có màu trắng xám vàng trắng xám đỏ, đặc lõm Chúng có hình tròn, rìa mép ổ viêm có hình cưa.Với độ lớn khác nhau, chủ yếu to từ -2 cm, cắt đôi ổ loét ta thấy chúng có hình nón chứa đầy chất chứa đặc quánh Nếu lấy chất chứa xung quanh ổ loét để xét nghiệm ta thấy chúng gồm tế bào bạch cầu, đại thực bào, đơn bào ký sinh trùng Histomonas sống 15 11.2 Bệnh tích vi thể Sự xâm chiếm cư trú Histomonas vào thành ruột dẫn đến chứng xung huyết tăng bạch cầu trung tính, với kết nối phản ứng giũa vi khuẩn, Histomonas Heterakis (Reid, 1967) Một số lượng lớn tế bào bạch huyết đại thực bào xâm nhập qua mô khoảng thời gian số lượng tế bào Heterophile tăng lên Một số lượng lớn tế bào bạch huyết đại thực bào xâm nhập qua mô khoảng thời gian 5-6 ngày sau nhiễm số lượng bạch cầu trung tính tăng lên, với số lượng lớn Histomonas nằm sâu lớp biểu bì niêm mạc ruột Lõi ban đầu hình dạng định màu đỏ nhẹ khoảng sau 12 ngày xuất khô, vàng lớp vỏ phần tiết dịch Khoảng 12 – 16 ngày tế bào khổng lồ xuất mô ruột Các chất hoại tử đông lại xâm chiếm u mô mở rộng Khoảng từ 17 – 21 ngày u mô hết dần mô, hầu hết tập trung gần lớp vỏ thành dịch Số lượng lớn tế bào khổng lồ xuất u hạt phồng lên thành ruột Các chấn thương vi chép sớm nhìn thấy gan khoảng 6-7 ngày sau nhiễm bao gồm cụm bạch cầu trung tính, lympho bạch cầu đơn nhân gần mạch máu Sau khoảng 10-14 ngày, chấn thương lan rộng, chúng gặp số chỗ Các lympho mở rộng kèm theo xâm nhập đại thực bào bạch cầu trung tính có với số lượng vừa phải Từ 14-21 ngày, tỷ lệ chết hoại tăng đáng kể, dẫn đến khu vực lớn bao gồm mô lưới mảnh tế bào Nếu diễn phục hồi, tế bào lympho giữ lại khu vực xơ hoá tế bào gan phát triển 12 Chẩn đoán bệnh chẩn đoán phân biệt Chẩn đoán dựa vào dịch tễ học, triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể điển hình bệnh đầu đen kết hợp với chẩn đoán bệnh tích vi thể Sự có mặt triệu chứng đủ để chẩn đoán sở bệnh Tuy nhiên cần phải tiến hành xét nghiệm phòg thí nghiệm để khẳng định bệnh 16 Có nhiều phương pháp phòng thí nghiệm để chẩn đoán Histomonas, bao gồm: phân lập (Drbohlav, 1924; Dwyer, 1970), kính hiển vi điện tử (Schuster, 1968), test huỳnh quang gián tiếp (Augustine Lund, 1970), ELISA (Heijden, Stegeman Landman, 2009), PCR (Huber et al., 2005), lai giống chỗ (Liebhart et al., 2006) kiểu gen (Van der Heijden cs, 2006) (trích dẫn Heijden Landman, 2007) *Sử dụng kính hiển vi: Khi nghi gà bị bệnh đầu đen cần tiến hành sau: Lấy phân gà ốm nghi bị bệnh sống chất chứa ổ viêm loét gan làm dung dịch để soi kính hiển vi theo tỉ lệ 1:1, nhỏ dung dịch lên phiến kính (có thể phủ vật kính) hơ nóng 400C đèn cồn soi kính hiển vi, ta thấy rõ Histononas hình roi sống Việc xác nhận u mô cần tiến hành cẩn thận, chúng dễ thấy xác định mạch máu ruột, nhiên u mô tổ chức chấn thương lại hình roi khó để phân biệt với đại thực bào tế bào nấm men Vấn đề đơn giản để cấy u mô vào bình thuỷ tinh công cụ hỗ trợ chẩn đoán, sử dụng biến thể Dwyer Nếu mẫu bệnh phẩm tiến hành lấy từ gà chết ( trước thể không nóng nữa), test xác tới 75% Trung bình khoảng 85 % dung dịch muối cân Hank, 5% chiết xuất phôi gà (CEE, Gibco), 10% huyết ngựa cừu điều chỉnh độ pH = 7,2 Một lượng nhỏ 10-20 mg bột gạo bổ sung vào, sau ống bịt kín, ấp 40oC qua đêm theo dõi kính hiển vi soi ngược sinh học.Các mẻ nuôi cấy đạt theo cách trì cách nuôi cấy cấp hai 2-3 ngày lần, nhiên chúng trở nên không sinh bệnh 6-8 tuần (tltk?) Tuy nhiên theo nghiên cứu Heijden Landman (2007), phương pháp phân lập Histomonas cải biến từ phương pháp Dwyer cách: phân lập Histomonas meleagridis môi trường nitrogen lỏng, phương pháp Dwyer tăng thêm bột gạo (0.8% thay cho 0.096%) không cần bổ sung thêm chiết xuất phôi gà 17 chứng minh tốt so với phương pháp Dwyer chuẩn với mật độ Histomonas cao gấp lần ( 106.3 so với 105.8 Histomonas/ml) đến 10 lần ( 106.7 so với 105.8 Histomonas/ml) sau resuscitation subculturing Mặt khác, nghiên cứu chứng minh rằng, huyết ngựa thành phần cần thiết để phân lập Histomonas phát triển Histomonas * Chẩn đoán mô bệnh học: thường dùng hematoxylin, eoxin, axit pe-riô-đíc Việc chuẩn bị tế bào học cẩn thận làm từ phòng thí nghiệm sử dụng picroformol đồng thuốc màu bạc-protein * Xác định kháng thể chống Histomonas dựa vào test ELISA: kháng thể đơn dòng (Mabs) phát triển để chống lại chất trích protein từ Histomonas meleagridis Mabs xác định xác hình thái học Histomonas meleagrisdis mô gan gà tây Sau gắn kết với horseradish peroxidase, Mabs tốt lựa chọn để làm conjugate cho test ELISA Hơn nữa, test ELISA xác định kháng thể kháng Histomonas phản ứng chéo với protozoan Tetrachitomonas gallinarum (Heijden, Stegeman Landman, 2009) * Chẩn đoán phân biệt với số bệnh khác Bệnh cầu trùng Ruột thừa bị cầu trùng Eimeria tenella số trường hợp có biến đổi giống biến đổi bệnh Histomonas gây Nhìn từ vào qua thành ruột bệnh cầu trùng ta thấy rõ nốt đỏ xen lẫn điểm trắng bổ đôi ruột thấy chất chứa bị lẫn máu toàn máu đông, chí máu tươi, chất chứa Histomonas gây lúc đầu chứa nhiều sau lẫn máu khó đông giống cầu trùng, giai đoạn cuối tạo thành kén đông đặc, gạt lớp phủ niêm mạc ta thấy niêm mạc ruột bị viêm hoại tử nặng, thành ruột thừa dầy rắn * Chẩn đoán phân biệt với gà bị Newcastle 18 Gà bị Newcastle sốt cao 43-43,50C, uống nước nhiều, rối loạn tiêu hoá trầm trọng, thức ăn diều không tiêu, nhão lên men Khi cầm chân gà dốc ngược từ mỏ chảy thứ nước chua khắm Bệnh kéo dài vài ngày gà ỉa chảy, phân lúc đầu xanh, có bọt sau chuyển sang loãng, trắng xám có nhiều urat Gà khó thở trầm trọng, mũi thường chảy nhớt màu trắng xám đỏ nhạt làm cho gà hay vẩy mỏ Bệnh nặng gà không thở mũi mà phải há mồm, vươn cổ để thở làm mào yếm ứ máu, tím bầm Cuối ổ dịch gà xuất triệu chứng thần kinh Đi vòng tròn, giật lùi xiêu vẹo đầu, cổ co giật bị nghẹo, mổ không trúng thức ăn Bệnh tích: Niêm mạc đường tiêu hoá phủ lớp chất nhờn màu trắng xám vàng nhạt có xuất huyết điểm Niêm mạc dày tuyến xuất huyết rõ, nốt xuất huyết lấm tròn đầu đinh ghim trùng với lỗ đổ đường tiêu hoá Niêm mạc ruột non, ruột già, van hồi manh tràng hậu môn xuất huyết nặng * Với bệnh Trichomonas Các triệu chứng biến đôỉ bệnh lý Trichomonas gây số trường hợp giống với bệnh đầu đen Điểm khác bệnh Trichomonas gây ta thấy biến đổi ruột thừa, kèm theo biến đổi 1/3 cuối ruột non Các biến đổi ổ viêm hoại tử bề mặt gan có kích thước nhỏ lồi lên khỏi bề mặt gan giống ổ lao gà, ổ viêm loét hoại tử bệnh đầu đen lại bị lõm trũng (tâm cuả ổ viêm loét bệnh đầu đen bị lõm xuống) * Với bệnh lao gà Các ổ lao (viêm loét hoại tử) quan sát không gan mà thấy lách, ruột tuỷ xương Bệnh lao gà quan sát thấy gà lớn tuổi, không thấy gà gà dò Ở bệnh lao gà biến đổi tạo kén ruột thừa bệnh đầu đen 13 Phòng trị bệnh * Phòng bệnh 19 Môi trường bị ô nhiễm Heterakid galine xem tác nhân truyền lây Histomanas, vậy, biện pháp triển khai để phòng bệnh phần lớn theo hướng làm giảm loại trừ trứng Việc chăn nuôi xoay vòng không xem biện pháp phòng bệnh hiệu tuổi thọ dài trứng giun kim Hạn chế bớt tồn trứng giun kim cách tạo khoảng nắng chiếu khô thoáng nhờ tác dụng xạ mặt trời khô thoáng giúp cho tác dụng tối đa Một số trường hợp, khử trùng tẩy uế có tác dụng tiêu diệt trứng giun, chưa có nhiều số liệu liên quan đến biện pháp Công tác quản lý khó đủ mạnh để kìm chế bệnh mức thấp đàn gà tây nuôi thịt Ngoài nên dùng thuốc tím sunfat đồng để tiêu diệt trứng giun kim dùng vôi bột để tiêu diệt giun kim giun đất môi trường Ngoài ra, số sản phẩm có chiết xuất từ tỏi, gừng, quế, chanh, hương thảo sử dụng cho gia cầm ăn có tác dụng phòng bệnh (Duffy cs, 2004; Van der Heijden Landman, 2008 – trích dẫn Koen De Gussem, 2013) * Trị bệnh Trước có loại thuốc hoá dược đăng ký sử dụng Mỹ, bao gồm hai chất chứa arsen, hai loại thuộc nhóm nitroimidazole nitrofuran, nhiên quy định gần loại bỏ loại thuốc hữu ích (nitroimidazole) khỏi thị trường Đối với việc sử dụng loại thuốc để phòng ngừa, nitarsone có tác dụng, nhiên chất arsen nói chung không đủ mạnh để điều trị bệnh đầu đen xảy lúc với vi khuẩn nêu Các nitroimidazole ( Ronidazol, ipronidazole romidazole) có hiệu qủa cao phòng ngừa điều trị gà nhà gà tây.Các loại thuốc quan trọng sử dụng nhiều nước furazolidone sử dụng để điều trị bệnh đầu đen Hiện chưa có thông báo dấu hiệu hay kháng thuốc Histomonas Gần số tác giả cho dùng Doxycillin sunfamonomethazin có tác dụng tốt Histomonas 20 TÀI LIỆU THAM KHẢO AAAP committee on Disease Reporting, 1986 Summary of commercial poultry disease reports Avian Dis 31, p926 – 987 Farmer R.K., and J Stepheson, 1949 InfectioÐ enterohepatitis (blackhead) in turkeys: Acomparative study of methodis of infection Jcomp Pathol 59, p119 – 126 Farr, M., 1961 Further observations on survival of the protozoan parasite, Htiomonas meleagridis, and eggs of poultry nematodes in feces of infected birds Cornell Veterinarian 51, p3-13 Gibbs, B J., 1962 The occurrence of the protozoan parsite Histomonas meleagridis in the aduit and eggs or the cecal worm Heterakis gallinae J.Protozool 59, p 877 – 884 Heijden H.M.J.F Landman W.J.M Stegeman J.A, 2009 Development and validation of a blocking ELISA for the detection of antibodies against Histomonas meleagridis in chickens and turkeys Veterinary Parasitology Heijden H.M.J.F Landman W.J.M, 2007 Improved culture of Histomonas meleagridis in a modification of Dwyer medium Avian Diseases, 51, p986-988 Koen De Gussem, 2013 Diagnosis, Prophylaxis, Treatment - Research developments Representing the european animal health industry Lee, D L., 1969 The structure and development of Histomonas meleagridis in the female reproductive tract of its host Heterakis gallinae Parasitologry 59, p877 – 884 McDougald, L.R., 2005 Blackhead Disease (Histomoniasis) in Poultry: A Critical Review Avian Diseases Vol 49, p 462–476 10 McDougal, L.R., and Hansen M.F., 1969 Serum protein changes in chichkÐn subsequent to infection with Histomonas meleagridis Avian Dis 3: 673 – 677 11 McDougald, L.R., 2005 Blackhead Disease (Histomoniasis) in Poultry: A Critical Review Avian Diseases Vol 49, p462–476 12 Nele Bleyen, Ellen ons, Maaten De Gussem Bruno M Goddeeris, 2008 Passive immunization against Histomonas meleagridis does not protect turkeys from an experimental infection Avian pathology 38 13 Ruff M D L R Mc®ougl, and Hansen M F., 1970 Isolation of Histomonas meleagridis from embryonated eggs of the Heterakis gallinarum J Protozool 17, p10 – 11 21 14 Reid, WM., 1967 Etiology and dissemination of the blackhead disease syndrome in turkeys and chickens Exp Darasitol 21, p 249 – 275 15 Robert B Beckstead, 2014 Overview of Histomoniasis in Poultry September 3rd 2014 < http://www.merckmanuals.com/vet/poultry/histomoniasis/overview_of_histomo niasis_in_poultry.html> 16 Springer W.T J Johnson and Reid W M., 1969 Transmission of Histomoniasis with male Heterakis gallinarum (Nematoda) Parasitology 59, p 401 – 405 22