TUYỂN CHỌN một số CHỦNG VI SINH vật có KHẢ NĂNG PHẢN NITRATE CAO PHÂN lập từ các đầm NUÔI tôm VEN BIỂN đồ sơn

Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 trờng đại học hải phòng viện sinh nông họ tên: Vũ THị VâN ANH Ngày sinh: 05/04/1993 Lớp: Kỹ s nuôi trồng Thuỷ sản Khoá K12 TUYểN CHọN MộT Số CHủNG VI SINH VậT Có KHả NĂNG PHảN NITRATE CAO PHâN LậP Từ CáC ĐầM NUÔI TÔM VEN BIểN Đồ SƠN Chuyên ngành: Nuôi trồng thuỷ sản Hải Phòng, năm 2015 i Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 trờng đại học hải phòng viện sinh nông họ tên: Vũ THị VâN ANH Ngày sinh: 05/04/1993 Lớp: Kỹ s nuôi trồng Thuỷ sản Khoá K12 TUYểN CHọN MộT Số CHủNG VI SINH VậT Có KHả NĂNG PHảN NITRATE CAO PHâN LậP Từ CáC ĐầM NUÔI TÔM VEN BIểN Đồ SƠN Chuyên ngành: Nuôi trồng thuỷ sản Ngời hớng dẫn khoa học: TS Đào Thị ánh Tuyết Hải Phòng, năm 2015 LI CM N Trc tiờn, em mun gi li cm n sõu sc nht n Tin s Mnh Ho, Ts o Th nh Tuyt nhng ngi ó tn tỡnh hng dn em sut quỏ trỡnh thc hin khúa lun tt nghip Em xin by t li cm n sõu sc n nhng thy cụ giỏo ó ging dy em bn nm qua, nhng kin thc m em nhn c trờn ging ng i hc s l hnh trang giỳp em vng bc tng lai ii Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 Em cng mun gi li cm n n cỏc anh ch v ti Trm nghiờn cu bin Sn ó giỳp v cho em nhng li khuyờn b ớch v chuyờn mụn quỏ trỡnh nghiờn cu Cui cựng, em mun gi li cm n sõu sc n tt c bn bố, v c bit l cha m v anh trai, nhng ngi luụn kp thi ng viờn v giỳp em vt qua nhng khú khn cuc sng Hi Phũng, ngy 28 thỏng nm 2015 Sinh viờn V Th Võn Anh iii Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 MC LC DANH M TVI T vii C T T PH 3: PH NG PHP NGHIấN C 20 N U 3.1 I T NG, A V TH GIAN NGHIấN C 20 I M I U 3.1.1 i tng nghiờn cu .20 DANH M TVI T 57 C T T iv Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 DANH MC BNG Bng 2.1: Din tớch mt nc, sn lng nuụi tụm nc mn l Bng 2.3 Mt s c im chn lc ca cỏc i din in hỡnh thuc .12 nhúm phn nitrate húa [8] 12 Bng 4.1: Cỏc yu t thy lý ti khu vc thu mu 31 Bng 54.2 Cỏc yu t thy húa ti khu vc thu mu 31 Bng 4.3 c im hỡnh thỏi khun lc ca 15 chng thu c 32 .35 Bng 4.5 Bin ng hm lng N-NO3- mụi trng nuụi cy .35 Bng 4.6 c im khun lc v t bo ca cỏc chng vi khun c chn 37 Bng 4.7 Nng NO3- cũn li mụi trng nuụi cy ti cỏc mui khỏc ca chng CR 15.01 .40 Bng4.8 Nng NO3- cũn li mụi trng nuụi cy ti cỏc mui khỏc ca chng B 15.04 .40 Bng 4.9 Nng NO3- cũn li mụi trng nuụi cy ti cỏc mui khỏc ca chng CR 15.001 .42 Bng 4.10 Nng NO3- cũn li mụi trng nuụi cy .44 ti cỏc nhit khỏc ca chng B 15.04 44 Bng 4.11 Nng NO3- cũn li mụi trng nuụi cy .45 ti cỏc nhit khỏc ca chng CR 15.01 45 Bng 4.12 Nng NO3- cũn li mụi trng nuụi cy .45 ti cỏc nhit khỏc ca chng CR 15.001 45 Bng 4.13 Nng NO3- cũn li mụi trng nuụi cy ti cỏc pH khỏc ca chng B15.04 46 Bng 4.14 Nng NO3- cũn li mụi trng nuụi cy .47 ti cỏc nhit khỏc ca chng CR 15.01 47 Bng 4.15 Nng NO3- cũn li mụi trng nuụi cy .48 ti cỏc pH nhit khỏc ca chng CR 15.001 48 v Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 DANH MC HèNH Hỡnh 2.1 Giỏ tr sn xut thy sn t hot ng NTTS qua cỏc nm Hỡnh 2.2: Chu trỡnh chuyn húa nit nc .8 Hỡnh3.13 Quy trỡnh thc nghim nghiờn cu vi khun phn nitrate húa 22 Hỡnh 4.1 Hin vi t bo ca chng Bacillus 38 Hỡnh 4.2 Hin vi t bo chng B 15.04 .39 Hỡnh 4.3 Hin vi t bo chng CR 15.001 39 Hỡnh 4.4 Tng quan gi tc chuyn húa nitrate v mui ca cỏc chng sinh vt nghiờn cu .43 vi Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 DANH MC T VIT TT COD Nhu cu tiờu hao ụxy hoỏ hc L1 Ln L2 Ln TB Trung bỡnh NTTS Nuụi trng thu sn N Nitrogen TAN Total ammonia nitrogen-Ammonia tng s vii Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 PHN 1: M U 1.1 Lí DO LA CHN TI Vit Nam l mt nc giỏp bin vi ng b bin di hn 3260 km vi nhiu vng vnh, m phỏ ven bin, rt thun li cho vic NTTS Trong nhng nm gn õy, ngnh nuụi trng v ỏnh bt thy hi sn phỏt trin rt mnh m v úng gúp vo s tng trng kinh t ca t nc Theo bỏo cỏo thỏng 12/2012 ca b Nụng nghip v Phỏt trin Nụng thụn, sn lng nuụi trng thy sn c nm 2012 c t 3112 nghỡn tn, tng 6,2% so vi cựng k nm 2011 vi ngnh nuụi trng ch yu l cỏ tra v tụmNhiu nm qua, ngh nuụi tụm nc ta phỏt trin rt mnh khụng nhng v qui mụ m v s a dng húa cỏc mụ hỡnh nuụi, din tớch nuụi ngy cng m rng thỡ ngi nuụi phi i u vi nhng tr ngi mi, ú l ụ nhiờm mụi trng v dch bnh Trong quỏ trỡnh nuụi trng, ti cỏc m nuụi thy sn nc l, cỏc cht ụ nhiờm vụ c thng c tớch ly vi hm lng cao phõn hy ngun thc n d tha v cú bi tit trc tip t tụm, chỳng gõy ụ nhiờm mụi trng v gõy bnh cho sinh vt nuụi Do vy, vic nghiờn cu a cỏc gii phỏp nhm kim soỏt nng cỏc cht ụ nhiờm nit vụ c khụng chi l iu kin tiờn quyt nh hng n nng sut v sn lng nuụi trng m gúp phn gim thiu tỏc ng tiờu cc ca ngun nc thi thy sn n ngun sinh thỏi ven bin Trong lnh vc sn xut, cú c ngun nc ỏp ng c yờu cu sn xut ging, ngi ta dựng cỏc loi húa cht nh: Chlorine, thuc tớm x lý, nhiờn vic s dng húa cht x lý nc s khụng trỏnh tỡnh trng ụ nhiờm mụi trng, hn na vic s dng húa cht s lm nh hng n h vi sinh vt mụi trng nc Vỡ vy, xu hng hin nhiu ni s dng cỏc vi sinh vt hu ớch nhm ci thin cht lng nc v hn ch c cỏc nhúm vi khun gõy bnh h thng Cỏc nhúm vi sinh vt cú kh nng t lm sch ngy cng c Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 nghiờn cu nhiu, Nu cỏc k thut s dng vi sinh vt chuyn NH 4+ thnh NO3-, NO2- ó t c nhiu thnh tu ỏng k thỡ vic chuyn húa nhng sn phm c hi ú thnh N quỏ trỡnh phn nitrate húa gp nhiu khú khn Chớnh vỡ lý ú em tin hnh nghiờn cu ti Tuyờn chon mụt sụ chung vi sinh võt co kh nng phn nitrate cao phõn lõp t cac õm nuụi tụm ven biờn ụ Sn 1.2 MC TIấU V NễI DUNG CA TI 1.2.1 MC TIấU TI Tuyn chn mt s chng vi khun bn a cú kh nng nitrate húa cao c phõn lp t cỏc khu vc nuụi tụm ven bin Sn- Hi Phong 1.2.2 NễI DUNG CA TI - Phõn lp, tuyn chn mt s chng vi sinh vtphn nitrate húa cao t cỏc m nuụi tụm ven bin Sn Hi Phong - Nhn dng vi khun cú kh nng phn nitrate cao ó c phõn lp - ỏnh giỏ hot tớnh x lý cht ụ nhiờm nit NO3- m nuụi nc l ven bin ca vi khun phn nitrate húa cỏc iu kin sinh thỏi khỏc Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 PHN 2: TNG QUAN 2.1 TNG QUAN V HOT ễNG NUễI TRNG THY SN 2.1.1 Hot ng nuụi trng thy sn Vit Nam Vit Nam thuc nc cú ng b bin ln cỏc quc gia giỏp bin v cú truyn thng lõu i vic ỏnh bt v nuụi trng thy hi sn(NTTS) Truyn thng ny bt u t vic nuụi cỏ ao nc tnh c hỡnh thnh vic o ao, ly t lm nh, qua nhiu th ki NTTS c phỏt trin, cho ti c lp, phong tro ao cỏ Bỏc H Chớnh t cỏc vic lm t nhiờn cú tớnh truyn thng ó thỳc y ngnh NTTS ngy cng phỏt trin mnh m Cho n nay, õu cú mt nc l ú ngi dõn trin khai hot ng NTTS, c bit, vựng ng bng Nam b v ven bin Trung cú hot ng ny phỏt trin nht.Ngy nay, hot ng NTTS gúp phn khụng nh vo xúa gim nghốo v phỏt trin kinh t t nc Theo bỏo cỏo thng kờ thỏng 12/2012 ca tng cc thng kờ, tng giỏ tr NTTS chim hn 5% GDP ca c nc Ngnh NTTS ngy cng phỏt trin, giỏ tr sn xut ngy cng tng Giỏ tr sn xut thy sn ca ngnh NTTS t nm 2003 ti nm 2012 c th hin biu sau : Hỡnh 2.1 Gia tr sn xut thuy sn t hot ụng NTTS qua cac nm SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 Hiu sut x lý N-NO3 (%) Báo cáo đồ án tốt nghiệp mui () Hỡnh Tng quan gi tục ụ chuyờn hoa nitrate v ụ muụi cua cac chung sinh võt nghiờn cu Hỡnh 4.4 Tng quan gi tục ụ chuyờn hoa nitrate v ụ muụi cua cac chung sinh võt nghiờn cu Da vo kt qu trờn cho thy xu hng chuyn húa nitrate v nng NO3- li mụi trng nuụi cy ca ba chng em vo th nghim, ta thy ti cỏc mui khỏc nhau, tc kh nitrate l khỏc v cú s khỏc gia cỏc chng vi khun ti tng mui mui ti u ca mi chng hiu sut chuyn húa t giỏ tr cao nht cng khỏc nhau: i vi chng CR 15.01 mui ti u ca chỳng l 20 ú chng CR 15.001 cú khong mui ti u l 10 -20 v B 15.04 l 20 30 3.2.2 Hot tớnh phn nitrat húa iu kin nhit khỏc Trong bỡnh cha 100ml dung dch mụi trng nuụi cy cha mg/l NO3-, nuụi nhit 5C, 25C (nhit phong), 30C v 35C (trong t nuụi), nuụi cy tnh Sau 20 gi, xỏc nh hot tớnh chuyn húa NO 3- ca 43 Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 chng ny Hot tớnh phn nitrat húa c xỏc nh theo hm lng NO 3- mt i mụi trng nuụi cy Bng 4.10 Nụng ụ NO3- cũn li mụi trng nuụi cy NO3- cũn li (mg/l) ti cac nhit ụ khac cua chung B 15.04 Chng B 15.04 L2 L3 TB 0,964 0,950 0,959 0,958 25 0,007 0,006 0,006 0,006 30 NO3- cũn li (mg/l) L1 0.005 0,004 0,005 0,005 35 0,899 0,890 0,887 0,892 Nhit (oC) i vi chng B 15.04, nng NO 3- ti nhit 5oC cao nht v thp nht nhit 30oC Ti ngng nhit khong 25 30C thỡ tc chuyn húa t ti a, hiu sut chuyn húa nitrate t 99,5% 44 Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 Bng 4.11 Nụng ụ NO3- cũn li mụi trng nuụi cy NO3- cũn li (mg/l) ti cac nhit ụ khac cua chung CR 15.01 Nhit L1 Chng CR 15.01 L2 L3 TB (oC) 0,974 0,006 0.002 0,970 0,005 0,003 0,969 0,005 0,002 0,971 0,005 0,002 35 0,721 0,727 0,725 0,724 NO3- cũn li (mg/l) 25 30 i vi chng CR 15.01, nng NO 3- cao nht nhit 5oC, thp nht nhit 30oC Hiu sut chuyn húa nitrate ti a ti nhit 30 oC vo khong 99.8%, ti 25oC l 99,5% Bng 4.12 Nụng ụ NO3- cũn li mụi trng nuụi cy NO3- cũn li ti cac nhit ụ khac cua chung CR 15.001 Nhit L1 Chng CR 15.001 L2 L3 TB (oC) 0,761 0,759 45 0,760 0,760 SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 (mg/l) NO3- cũn li (mg/l) Báo cáo đồ án tốt nghiệp 25 30 0,051 0,020 0,055 0,023 0,052 0,021 0,053 0,021 35 0,940 0,950 0,946 0,945 T bng trờn cho kt qu, nng NO 3- cao nht ti nhit 35oC v thp nht nhit 30oC Tc chuyn húa tng mnh t khong t 30C, sau ú chm li Hiu sut chuyn húa cao nht ti 30 oC khong 97%, ti nhit 25oC l 93% T kt qu thớ nghim cho thy nhit cng tng thỡ tc phn nitrate húa cng tng, mi chng khỏc cú hiu sut chuyn húa nitrate khỏc Ngoi ra, vi mi chng ti mc nhit khỏc thỡ hiu sut chuyn húa cng khỏc Ngng nhit t 25 30C l ngng nhit m c chng cú kh nng kh nitrate cao nht 4.3.3 Hot tớnh phn nitrate húa iu kin pH khỏc Chng vi khun c nuụi cy iu kin k khớ Trong cỏc bỡnh cha 100ml dung dch mụi trng nuụi cy cha mg/l NO 3- ti cỏc pH l 5, 7, nuụi cy ti nhit 25C Hot tớnh phn nitrate húa c xỏc nh theo hm lng NO3- mt i mụi trng nuụi cy sau 20 gi Bng 4.13 Nụng ụ NO3- cũn li mụi trng nuụi cy ti cac pH khac cua chung B15.04 46 pH L1 0,878 0,002 0.037 SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 Chng B 15.04 L2 L3 0,880 0,003 0,038 0,882 0,004 0,039 TB 0,879 0,003 0,039 NO3- cũn li (mg/l) NO3- cũn li (mg/l) Báo cáo đồ án tốt nghiệp i vi chng B 15.04, nng NO3- li cao nht pH v thp nht ti pH Ti pH ti u l 7, hiu sut chuyn húa t 99% Bng 4.14 Nụng ụ NO3- cũn li mụi trng nuụi cy NO3- cũn li (mg ti cac nhit ụ khac cua chung CR 15.01 pH L1 0,761 0,015 0.05 Chng CR 15.01 L2 L3 0,759 0,014 0,03 47 0,763 0,016 0,06 TB 0,761 0,015 0,05 SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 NO3- cũn li (mg/l) /l) Báo cáo đồ án tốt nghiệp i vi chng CR 15.01, tc chuyn húa tng mnh ti pH t Nng NO3- cao nht tiaih pH = v thp nht ti pH = Ti pH ti u l 7, hiu sut chuyn húa t 98%, ti pH = hiu sut l 95% Bng 4.15 Nụng ụ NO3- cũn li mụi trng nuụi cy pH L1 0,92 0,281 0.421 Chng CR 15.001 L2 L3 0,91 0,279 0,419 NO3- cũn li (mg/l) NO3- cũn li (mg/l) ti cac pH nhit ụ khac cua chung CR 15.001 48 0,90 0,283 0,423 TB 0,91 0,281 0,421 Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 T bng trờn cho kt qu thy nng NO 3- li cao nht ti pH = v thp nht ti pH = i vi chng CR 15.001, pH ti u l 7, ti pH ny tc chuyn húa t giỏ tr cao nht, hiu sut chuyn húa nitrate t 70% Kt qu thớ nghim trờn cho thy, ti pH thp thỡ tc chuyn húa rt thp Khi pH tng thỡ tc chuyn húa nitrate tng dn ti mc cc i v cú xu hng gim nh Khong pH ti u ca c chng nghiờn cu tc kh nitrate cao nht l 8, kt qu ny phự hp vi cỏc kt qu nghiờn cu trc ú ca cỏc nh khoa hc 4.4 Tho lun Qua cỏc thớ nghim xỏc nh tim nng phn nitrate húa ca cỏc chng vi khun tham gia nghiờn cu cỏc iu kin sinh thỏi khỏc nh nhit , pH, mui, cho thy: Cỏc chng vi khun nghiờn cu cú th phỏt trin tt mụi trng cú mui t 10 20 tng ng vi khu vc nuụi trng nc l v nc mn ven bin nc ta Kt qu ny phự hp vi cỏc nghiờn cu trc ó c tin hnh Trong ú, chng B15.04 x lý nitrate tt mụi trng nc l, chng CR15.01 v CR15.001 cú kh nng x lý nitrate tt mụi trng nc mn ven bin C loi vi khun a vo nghiờn cu u cú kh nng phn nitrate húa iu kin nhit t 40C, mc nhit ti u l 20 30C Cỏc nghiờn cu trc ú cng a mc nhit ti u ny i vi thi tit Bc, thng cú nhng t rột m, rột hi ú nờn cn chỳ ý iu chinh nhit cỏc h thng x lý nc thi cú s dng vi khun phn nitrate húa Chng CR15.001 cú kh nng chuyn húa tt nitrate iu kin khớ hu nng núng, hố Vit Nam C chng nghiờn cu u phỏt trin tt mụi trng kim vi pH ti u ca quỏ trỡnh phn nitrate húa ca chng ri vo khong t 49 Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 KT LUN V KIN KHUYN NGH KT LUN X lý nitrate nc thi khụng phi l phn chớnh cỏc giai on x lý nc thi Tuy nhiờn, i nc thi t m ao nuụi trng thy sn thỡ x lý nitrate úng vai tro quan trng.Vic ỏp dng cỏc vi khun phn nitrat húa x nc thi m ao nuụi giỳp hn ch tỡnh trng phỳ dng, cõn bng hm lng nitrat nc ao m, cõn bng h sinh thỏi ao m Phõn lp, tuyn chn t mu thu ti Cng Rc - Sn (Hi Phong) v ti n B ( Sn) c chng cú hot tớnh phn nitrate húa cao v s b chi c lp phõn loi ca cỏc chng vi khun ny ng thi nghiờn cu c tim nng ca cỏc chng vi khun ti mt s iu kin sinh thỏi nh nhit , pH, mui v xột c hot lc ca cỏc chng vi khun nghiờn cu trng thỏi c nh trờn giỏ th Cỏc kt qu t c bao gm: - Phõn lp c chng cú kh nng phn nitrat húa v chi chng cú hot tớnh ny cao nht l B15.04, CR 15.01, CR 15.001 thuc cỏc chi Pseudomonas, Bacillus, Paracoccus - Cỏc chng vi khun nghiờn cu cú tim nng x lý nitrat tt iu kin mui cao (10 20) ng vi nc l, nc mn ven bin, pH t -8 v nhit khong t 25 30C Trờn cỏc c s trờn cn tip tc nghiờn cu c im sinh trng ca cỏc ging vi khun ó la chn v nghiờn cu tim nng phn nitrate húa cỏc iu kin sinh thỏi khỏc, to iu kin cho vic hỡnh thnh ch phm x lý nitrate nc v ng dng vic x lý nitrate trờn cỏc ao m thc t KIN KHUYN NGH Trờn cỏc c s trờn cn tip tc nghiờn cu c im sinh trng ca cỏc ging vi khun ó la chn v nghiờn cu tim nng phn nitrate húa cỏc iu kin sinh thỏi khỏc , to iu kin cho vic hỡnh thnh ch phm x 50 Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 lý nitrate nc v ng dng vic x lý nitrate trờn cỏc ao m thc t Cỏc kt lun v kh nng chuyn húa nitrate cỏc iu kin nhit , pH khỏc l c s ỏp dng vo quỏ trỡnh to ch phm x lý nitrat v ỏp dng cỏc cụng trỡnh x lý nc thi ao m nuụi thy sn iu kin khớ hu Vit Nam Hin sinh hc phõn t phỏt trin mnh, nghiờn cu trờn chi da vo c im hỡnh thỏi nờn cha th phõn loi n chi loi ca vi sinh vt, vỡ vy cn a sinh hc phõn t nh dng loi Cn tin hnh thờm nhiu nghiờn cu khỏc tỡm iu kin ti u ca cỏc vi sinh vt bn a, t ú ng dng vo thc t l s dng trc tip theo ch phm sinh hc 51 Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 TI LIU THAM KHO Ting Vit Nguyờn Lõn Dng, Nguyờn ng c, ng Hng Miờn, Nguyờn Vnh Phc, Nguyờn ỡnh Quyn, Nguyờn Phựng Tin, Phm Vn T (1976), Cac phng phap nghiờn cu vi sinh võt hoc, 2, NXB Khoa hc v k thut, Tr 21 30 Nguyờn Thnh t (1990), Thc tõp vi sinh, Nh xut bn giỏo dc, Tr 27 34, 103 112 V Th Minh c (2001), Thc tõp vi sinh võt, NXB i hc quc gia H Ni Tr 37 38, 107 108 Mnh Ho (2009), Cac phng phap nghiờn cu vi sinh võt biờn, ti c s cp Vin, Vin Ti nguyờn Mụi trng bin, Hi Phong Lờ Vn Khoa (1995), Mụi trng v ụ nhim, NXB Giỏo dc, tr 49 105 ng ỡnh Kim (1999), Cụng ngh sinh hoc vi to, NXB khoa hc v k thut Nguyờn Vn T (2009), Giao trỡnh nuụi trụng thuy sn Hong Th Yn (2002), Phõn lõp, tuyờn chon, nghiờn cu vi khun phn nitrat hoa ng dng vo cụng ngh x lý nc ngõm b nhim nit liờn kt ,Lun thc s khoa hc Vi sinh vt hc, Trng i hc khoa hc t nhiờn, i hc quc gia H Ni Tr.13 18 Nguyờn Mnh Cng Phng phap x lý, bo qun v phõn tớch cac thụng sụ N-NH4, N-NO2-, N-NO3-, P-PO43- nc biờn ven b Vin Ti nguyờn mụi trng bin 10 Bỏo cỏo kt qu thc hin k hoch 12 thỏng nm 2013 (http://www.mard.gov.vn/Lists/appsp01_statistic/Attachments/75/Baocao_12 _2013.pdf) 11 Kt qu sn xut thu sn nm 2012 ( http://www.fistenet.gov.vn/thong-tin-huu-ich/thong-tin-thong-ke/thongke-1/bao-cao-nam-2012-dang-webl.pdf) 12 Trang thụng tin in t 52 Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 (http://www.ird.fr/ecostproject/lib/exe/fetch.php? id=master_and_phd_dissertations&cache=cache&media=deliverables:thesis_ duong_vinh_hao_submitted_to_ecost_22_sep_2011.pdf) Ting Anh 1213 Anua (2011), Nitrogen Reduction in Wastewater Treatment (2011),UK 1314 Bruce E.Rittmann, Perry L McCarty (2001), Environmental Biotechnology: Principles and Applications, McGraw Hill Company, New York, pp 497 525 1415 Havry, W.S.,Paul J.V., Vanderman J.L (1994), A laboratory manual of microbiology, Feman H Company Oxford England, pp.109 111 1516 WPL (2013), Utility and Industrial Equipment: Submerged Aerated Filter (2013), Hampshire PO7 7UX United Kingdom 53 Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 PH LC Ph lc Mt s thuc th thng dựng 1.Thuục th Diphenylamin xac nh NO3 -[4] Thuc th Diphenylamin cú th mua loi cú sn trờn th trng hoc pha ch theo cụng thc sau: Diphenylamin 1.0 g H2SO4 100 ml Nc ct lớt Ly gam diphenylamin hoa vi 100ml H2SO4 m c, sau ú ly 100 ml nc ct cho vo bỡnh ong nh mc lớt, cho tip ml dung dch diphenylamin va chun b trờn v rút tht cn thn H 2SO4 ti vch nh mc Khuy trn bng que khuy thy tinh Sau dung dch ngui, b sung thờm axit ti vch nh mc ri khuy li Dung dch ny bn vng, cú th lõu Dung dch chun b cú mu xanh nht Dung dch Lugol nhuụm tiờu bn n gin Iot tinh th 1.0 g KI 2.0 g Nc ct 300 ml Nghin hai húa cht ny ci s, thờm nc t t v tip tc nghin cho n iot tan ht Cng cú th hoa KI vo mt ớt nc, sau ú cho thờm It, lc u cho tan ht, b sung nc ct cho 300 ml .3 Dung dch lc Malachit nhuụm bo t Lc Malachit 5.0 g Nc ct 100 ml Hoa lc Malachit vo nc, qua ờm Lc qua lp giy lc loi b cỏc tinh th hoa tan Dung dch Safranin Safranin 0.25 g 54 Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 Cn 95 10 ml Nc ct 90 ml Hoa Safranin vo cn sau ú b sung nc Dung dch tớm kt tinh nhuụm Gram Chun b dung dch Dung dch bao gm: Tớm kt tinh 2.0 g Etylic 95% 20 ml Dung dch bao gm: Nc ct 80 ml Amonium oxalat 0.8 g Trn dung dch vi nhau, lc u cho tớm kt tinh tan ht lng 24 gi, lc vi lp giy lc trc dựng Cỏc vt bn tớm kt tinh cú th sch bng cn 95% nhum n cn pha loóng dung dch ny ẵ .6.Thuục th Kovac xac nh indol Para dimetylaminobenaldehit 5g Isoamyl alcohol 75 ml Hoa tan bng cỏch un núng bn nc núng ti 50C Sau ú khuy nh Chỳ ý s dng gng tay, kớnh bo h v thc hin t ht húa hc 7.Thuục cn mu Iodin mordant It 0.33 g KI 0.67 g Nc ct 100 ml Nghin hai húa cht ny ci s, thờm nc t t v tip tc nghin cho n iot tan ht Cng cú th hoa KI vo mt ớt nc, sau ú cho thờm It, lc u cho tan ht, b sung nc ct cho 300 ml Bo qun l cú mu, lõu mu nht dn khụng cú giỏ tr s dng Ph lc Cỏc mụi trng Mụi trng nuụi cy, phõn lõp, gi giụng vi khun phn nitrat hoa Pepton 5.0 g 55 Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 NaCl 5.0 g Cao nm men 2.0 g Cao tht 1.0 g NaNO3 2.6 g Thch 15 g Nc ct lớt Nc lớt Mụi trng xac nh hot tớnh cua vi khun phn nitrat hoa Dung dch KNO3 100 mg/L NaCl 10.0 g Glucozo 1.0 g Dung dch mui khoỏng Vinogradski 50.0 ml Nc ct lớt Ph lc Mt s hỡnh nh o pH ngoi hin trng 56 Báo cáo đồ án tốt nghiệp SV: Vũ Thị Vân Anh - Lớp KSNTTSK12 MC LC DANH M TVI T vii C T T PH 3: PH NG PHP NGHIấN C 20 N U 3.1 I T NG, A V TH GIAN NGHIấN C 20 I M I U 3.1.1 i tng nghiờn cu .20 DANH M TVI T 57 C T T DANH MC T VIT TT COD Nhu cu tiờu hao ụxy hoỏ hc L1 Ln L2 Ln TB Trung bỡnh NTTS Nuụi trng thu sn N Nitrogen TAN Total ammonia nitrogen-Ammonia tng s 57