1.Cấu tạo:• Tủ cấy vi sinh bao gồm các bộ phận sau: • Cửa tủ phía trước được thiết kế hơi nghiêng thuận tiện trong quá trình thao tác, mặt sau của buồng làm việc cũng được thiết kế hơi n
Trang 1TỦ NUÔI CẤY VI SINH
I.LỊCH SỬ:
• 1786- Muller đưa ra sự phân loại đầu tiên về vi khuẩn
•1847-1850- Semmelweis cho rằng bệnh sốt hậu sản lây truyền qua thầy thuốc
và kiến nghị dùng phương pháp vô khuẩn để phòng bệnh
•1857- Louis Pasteur (1822-1895) chứng minh quá trình lên men lactic là gây nên bởi vi sinh vật
Trang 2• 1880- Alphonse Laveran phát hiện ký sinh trùng Plasmodium gây ra bệnh
sốt rét
• 1881- Robert Koch nuôi cấy thuần khiết được vi khuẩn trên môi trường đặc chứa gelatin
• Elie Metchnikoff (1845-1916) miêu tả hiện tượng thực bào (phagocytosis)
• Triển khai nồi khử trùng cao áp (autoclave)
Trang 3• Triển khai phương pháp nhuộm Gram.
• 1887- Richard Petri phái hiện ta cách dùng hộp lồng (đĩa Petri) để nuôi cấy vi sinh vật
Từ đó kỷ thuật nuôi cấy vi sinh thông qua tủ nuôi cấy vi sinh ra đời
1923-Xuất bản lần đầu cuốn phân loại Vi khuẩn (Bergey’s Manual)
1928- Griffith khám phá ra việc biến nạp (transformation) ở vi khuẩn
Trang 4• 1046 Lederberg và Tatum khám phá ra quá trình tiếp hợp (conjugation)
ở vi khuẩn
• 1949- Enders, Weller và Robbins nuôi được virus Polio (Poliovirus) trên
mô người nuôi cấy
• 1973- Ames triển khai phương pháp vi sinh vật học để khám phá ra các yếu tố gây đột biến (mutagens)
• 1983-1984 Mulli triển khai kỹ thuật PCR (polymerase chain reaction)
Trang 5II.NGUYÊN LÝ HỌAT ĐỘNG:
Trang 6Giới thiệu chung
Trang 7Cấu tạo tủ cấy vi sinh
Cấu tạo sơ bộ tủ nuôi cấy vi sinh
Trang 81.Cấu tạo:
• Tủ cấy vi sinh bao gồm các bộ phận sau:
• Cửa tủ phía trước được thiết kế hơi nghiêng thuận tiện trong quá trình thao tác, mặt sau của buồng làm việc cũng được thiết kế hơi nghiêng để lưu lượng không khí phân phối đều khắp trong tủ
Trang 9• Các ống dẫn khí được thiết kế từ phía trên tủ đi xuống để tiết kiệm không gian trong tủ
• Bề mặt làm việc phía trong tủ được làm bằng thép không gỉ, dễ dàng vệ sinh sau khi sử dụng
Trang 10• Quạt hút tiết kiệm năng lượng và có độ ồn thấp.
• Đèn UV sát trùng chỉ họat động khi cửa trước của tủ đóng chặt Điều này giúp ngăn chặn việc đèn UV bị bật lên một cách ngẫu nhiên và có thể gây nguy hiểm cho những người không biết rõ cách sử dụng
Trang 112 Quy trình làm việc
• Tủ vi sinh bảo vệ người sử dụng, vật mẫu thí nghiệm và môi trường xung quanh Lọai tủ này thích hợp cho những công việc liên quan đến các vi trùng tác nhân được xếp vào an tòan sinh học mức độ 1,2 hoặc 3 Tủ vi sinh được dùng cho hầu hết các ứng dụng vi sinh
Trang 12hoạt động:
-Khí trong phòng được máy quạt gió hút vào tủ (dòng khí inflow) thông qua khe hút khí trước cửa tủ Dòng khí chưa được lọc này không đi thẳng vào không gian làm việc mà được hút qua khe phía dưới tủ, sau đó được đưa vào khoang chứa chất nhiễm khuẩn.
Trang 13Vai trò:
- Bảo vệ người vận hành
- Bảo vệ cho vật mẫu thí nghiệm
- Giúp tiệt trùng mẫu
- Giúp trao đổi không khí trong buồng
- Có hệ thống điều chỉnh tốc độ quạt
- Ánh sáng đủ và rõ ràng để thao tác chính xác nhờ có đèn Lamp
- Tránh ảnh hưởng cho người sử dụng và an toàn cho mẫu phẩm thí nghiệm
Trang 14Mặt cắt kỹ thuật tủ nuôi cấy vi sinh
Trang 15Đặc tính và tính năng của tủ
Đặc tính
Trang 16Tính năng
- Duy trì tốc độ dòng khí 45m/s (được đo) với độ đồng nhất ± 20% trên toàn bộ mặt lọc.
-Bộ lọc dễ dàng thay thế với công cụ thông thường.
-Không khí trong phòng đi vào từ phía trên cùng của tủ qua bộ tiền lọc( ở đây các hạt lớn được giữ lại, gia tăng tuổi thọ cho lọc chính)
-Không khí bị ép đồng đều trên toàn bộ bộ lọc HEPA cho một dòng không khí sạch đồng nhất Làm loãng và làm sạch chất gây ô nhiễm không khí từ bên trong.
Trang 17- Vận tốc bề mặt lọc 0-45m/s, đảm bảo đủ lượng khí thay đổi để duy trì sự sạch sẽ trong vùng làm việc.
- Không khí đi xuống khu vực làm việc theo một dòng chảy chiều thẳng đứng và thoát khỏi khu vực làm việc trên toàn bộ diện tích mở ra trước tủ sau khi làm chệch hướng khỏi bề mặt làm việc Lỗ ở tường phía sau được thiết kế để giảm thiểu biến động bề mặt làm việc và giảm thiểu khả năng không khí góc chết trong vùng làm việc.
Trang 18Nguyên lý hoạt động
Trang 19BỘ LỌC HEPA TRONG TỦ NUÔI CẤY
Bộ lọc HEPA bao gồm một chiếc lưới của các sợ sắp xếp ngẫu nhiên Các sợi thường bao gồm các sợi thủy tinh và có đường kính từ 0.5 đến 2.0 micromet
Sơ đồ lọc: Tấm lọc bụi sơ bộ -Lọc trung gian (túi lọc khí) -Lọc Hepa
Trang 21• Tủ cấy vi sinh được lắp một hệ thống ống dẫn hở (tùy chọn), tủ sẽ có khả năng bảo vệ người sử dụng khỏi các chất hóa học độc hại dễ bay hơi dùng với một lượng nhỏ mà thường không thể lọc được bằng tấm lọc ULPA hoặc HEPA
Trang 22- Không khí đi qua màng lọc HEPA có kích thước lỗ nhỏ hơn kích thước
của vi trùng, vi trùng giữ lại tại màng lọc Không khí vô trùng được thổi vào khoang làm việc Khí này đẩy không khí của khoang tuần hoàn qua màng lọc Việc này diễn ra liên tục trong quá trình làm việc Do vậy
khoang làm việc là hoàn toàn vô trùng
Trang 23• Trong mẫu có thể chứa các loại vi trùng lây bệnh, nhờ có thiết bị này
nhân viên làm việc không bị lây nhiễm Vi trùng gây bệnh không khuyếch tán vào môi trường không khí Các vi sinh vật ngoài môi trường không nhiễm vào mẫu.
Trang 24III.THÔNG SỐ KT TỦ CẤY:
Trang 25• - Dòng khí thổi vào vùng làm việc: từ trên xuống
- Kích thước bên ngoài : LxWxH = 1000x700x1200mm đến 1100x750x1300 mm
- Kích thước vùng làm việc bên trong: LxWxH =900x60x650mm đến 950x700x700 mm
- Thể tích buồng thao tác: 0.70m3 đến 1m3
• - Tốc độ dòng: 0.40m/s - 0.60m/s
• - Lưu lượng khí: 900m3/h – 1000 m3/h
Trang 26- Đạt các tiêu chuẩn:
Tiêu chuẩn chung: IEST-RP-CC002.2 và AS1386.5
Độ sạch không khí: ISO 14664.1, Class 4, IEST-G-CC1001, IEST-G-CC1002 và các tiêu chuẩn tương đương.
Trang 27- Loại phin lọc chính: Phin lọc ULPA hoăăc HEPA tấm kim loại bảo vệ và tấm đệm bên trong; (mỗi tủ có hệ thống lọc riêng cho dòng ra và hơi )
- Hiệu quả lọc:
Tối thiểu 99.9991% ở 0.3mm, 99.9982% ở 0.12mm, 99.9982% ở MPPS.
Thông thường 99.9998% ở 0.3mm, 99.9998% ở 0.12mm, 99.9997% ở MPPS
Trang 28- Bộ lọc thô: sợi polyester sử dụng một lần với độ lọc 85%
Trang 29- Cấu trúc bề mặt làm việc:
tấm thép không rỉ loại 304
- Công suất tiêu thụ tối đa / cường độ dòng điện:
Trang 30IV.BẢO TRÌ BẢO DƯỠNG:
Trang 31Thường xuyên hút bụi , lau chùi các mặt bên trong và bên ngòai tủThường xuyên kiễm tra lưu lượng gió trong tủ
Thay định kỳ màng lọc HEPA theo đúng hướng dẫn
Thay định kỳ đèn UV trong tủ theo đúng hướng dẫn
Kiểm tra định kỳ độ bụi, độ vô khuẩn không khí bên trong tủ