Khả năng sản xuất và đa hình gen PRKAG3 của lợn Lũng Pù và lợn Bản (TT)

1 MỞ ĐẦU TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Lợn Lũng Pù lợn Bản (lợn Bản Hòa Bình) giống lợn địa có nhiều tiềm để khai thác phát triển chúng có tầm vóc trung bình, khả sản xuất so với giống lợn địa khác, số lượng tương đối nhiều, đặc điểm ngoại hình tương đối đồng đặc biệt hai giống lợn chịu điều kiện sống khắc nghiệt vùng núi đá cao, dinh dưỡng Đã có số nghiên cứu riêng lẻ đối tượng lợn Lũng Pù lợn Bản, nhiên, nghiên cứu nói dừng lại việc đánh giá nguồn gốc, đặc điểm ngoại hình số tính trạng sản xuất chúng mà chưa có nghiên cứu đánh giá cách có hệ thống tiềm di truyền tính trạng sản xuất, đặc biệt việc nghiên cứu mối quan hệ giá trị kiểu hình với kiểu gen tính trạng chất lượng thịt hai giống lợn Từ thực tế trên, việc đánh giá cách đầy đủ, có hệ thống đặc điểm ngoại hình khả sản xuất, kết hợp với nghiên cứu đa hình gen PRKAG3 xác định ảnh hưởng gen đến chất lượng thịt giống lợn Lũng Pù lợn Bản cần thiết nhằm đưa định hướng chọn lọc, sử dụng nguồn gen hai giống lợn có hiệu góp phần tăng cường bền vững hệ thống sản xuất chăn nuôi lợn Vì vậy, tiến hành đề tài “Khả sản xuất đa hình gen PRKAG3 lợn Lũng Pù lợn Bản” MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI Đánh giá đặc điểm ngoại hình, khả sản xuất ảnh hưởng đa hình gen PRKAG3 đến chất lượng thịt lợn Lũng Pù lợn Bản nhằm phục vụ cho công tác giống định hướng phát triển hai giống lợn Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI 3.1 Ý nghĩa khoa học - Đề tài công trình khoa học nghiên cứu cách tương đối có hệ thống từ đặc điểm ngoại hình, khả sinh sản, sinh trưởng đến suất chất lượng thịt giống lợn Lũng Pù lợn Bản 2 - Đây công trình khoa học nghiên cứu xác định đa hình gen PRKAG3 bước đầu nhận định ảnh hưởng đến số tiêu chất lượng thịt (màu sắc thịt) giống lợn Lũng Pù lợn Bản - Kết nghiên cứu đề tài luận án sử dụng làm tài liệu tham khảo có giá trị công tác giảng dạy, nghiên cứu nguồn gen lợn địa 3.2 Ý nghĩa thực tiễn - Kết nghiên cứu đề tài sở cho việc định hướng chọn lọc nâng cao chất lượng giống lợn Lũng Pù lợn Bản - Các kết nghiên cứu tiêu suất, sở khoa học để hoàn thiện quy trình chăm sóc nuôi dưỡng giống lợn điều kiện chăn nuôi nông hộ vùng núi cao TÍNH MỚI CỦA ĐỀ TÀI - Đề tài đánh giá tương đối đầy đủ có hệ thống từ đặc điểm ngoại hình màu sắc lông da, khả sinh sản, sinh trưởng đến suất thân thịt chất lượng thịt lợn Lũng Pù lợn Bản - Xác định đa hình gen PRKAG3 bao gồm đa hình G52S/HphI, T30N/StyI, V199I/BsaHI, R200Q/BsrBI giống lợn Lũng Pù Bản - Bước đầu đánh giá ảnh hưởng đa hình gen PRKAG3 đến chất lượng thịt lợn Bản: đa hình T30N/StyI G52S/HphI ảnh hưởng đến tiêu độ sáng đa hình T30N/StyI ảnh hưởng đến độ vàng thịt CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đặc điểm ngoại hình giống lợn địa Các giống lợn địa Việt Nam phong phú phân bố khắp vùng đất nước, vùng có giống với nét đặc trưng riêng Nhiều nghiên cứu cho biết Việt Nam có khoảng 26 giống lợn địa (Tạ Thị Bích Duyên cs., 2013; Nguyễn Văn Đức, 2012) Đã có số nghiên cứu lợn Lũng Pù (Nguyễn Văn Đức, 2005; Nguyễn Văn Đức cs., 2008; Nguyễn Văn Đức cs., 2012; Trịnh Quang Phong cs., 2009; Trịnh Quang Phong cs., 2011) nghiên cứu lợn Bản (Quách Văn Thông, 2009; Vũ Đình Tôn Phan Đăng Thắng, 2009) 1.2 Năng suất sinh sản giống lợn địa Phần lớn giống lợn địa có tuổi động dục lần đầu sớm, suất sinh sản thấp (5 – con/lứa) số lứa đẻ/nái/năm từ 1,1 – 1,5 lứa Tuy nhiên, có giống Móng Cái có khả sinh sản cao (10 – 15 con/lứa), năm đẻ từ 1,5 – lứa (Phan Xuân Hảo Ngọc Văn Thanh, 2010; Từ Quang Hiển cs., 2004; Nguyễn Mạnh Cường cs., 2010; Hồ Trung Thông cs., 2011) Một số nghiên cứu khả sinh sản lợn Lũng Pù như: (Vũ Ngọc Sơn cs., 2009; Nguyễn Văn Đức cs., 2008; Trịnh Quang Phong cs., 2011; Trinh Quang Phong cs., 2012; Nguyễn Văn Đức cs., 2010) số nghiên cứu lợn Bản (Vũ Đình Tôn Phan Đăng Thắng, 2009; Vũ Đình Tôn cs., 2012; Quách Văn Thông, 2009) 1.3 Khả sinh trưởng, suất chất lượng thịt giống lợn địa Trong năm gần đây, có nhiều nghiên cứu khả sinh trưởng, cho thịt chất lượng thịt giống lợn địa công bố Nguyễn Ngọc Phục cs., 2010; Phan Xuân Hảo Ngọc Văn Thanh, 2009; Trần Thanh Vân Đinh Thu Hà, 2005; Lê Đình Cường cs., 2004; Hồ Trung Thông cs., 2011; v.v cho biết khẳng sinh trưởng, cho thịt giống lợn địa không cao Cũng có số nghiên cứu khả sinh trưởng, cho thịt lợn Lũng Pù (Vũ Ngọc Sơn cs., 2009; Nguyễn Văn Đức cs., 2008; Trịnh Quang Phong, 2011; Nguyễn Văn Đức cs., 2008) nghiên cứu lợn Bản (Vũ Đình Tôn Phan Đăng Thắng, 2009; Quách Văn Thông, 2009) công bố, nhiên nghiên cứu không đầy đủ mà khả sinh trưởng, cho thịt đặc biệt đánh giá chất lượng thịt hậu chưa nghiên cứu Vì vậy, nghiên cứu việc tiến hành đánh giá khả sinh sản, đánh giá đầy đủ có hệ thống tiêu khả sinh trưởng, suất chất lượng thịt giống lợn đực thiến lợn 4 1.4 Gen liên quan đến chất lượng thịt lợn Ở Việt Nam, từ trước đến có số nghiên cứu xác định thị phân tử ADN vật nuôi kỹ thuật di truyền phân tử nhằm tìm thị ADN có mối liên quan với tính trạng sản xuất hữu ích (Lê Minh Sắt, 1997; Đinh Văn Chỉnh cs., 1999; Nguyễn Ngọc Tuân Trần Thị Dân, 2005; Đỗ Võ Anh Khoa cs., 2010) Một số nghiên cứu gen liên quan đến suất chất lượng thịt giống lợn địa tổ hợp lai nội x ngoại tác giả nước công bố (Nguyễn Văn Hậu cs., 2000; Lê Thị Thúy cs., 2004; Nguyễn Văn Cường cs., 2003) Gen PRKAG3 đánh giá có vai trò ảnh hưởng đến chất lượng thịt lợn nhiều giống lợn ngoại (Ciobanu cs., 2001; Milan cs., 2000; Anna Grandlund cs., 2011; Meadus cs., 2002; Škrlep cs., 2009) số giống lợn địa Trung Quốc (Lu-Sheng Huang cs., 2004), gen chưa nghiên cứu giống lợn Việt Nam Vì vậy, tiến hành nghiên cứu đa hình gen PRKAG3 giống lợn Lũng Pù lợn Bản để xác định mức độ ảnh hưởng đa hình gen đến chất lượng thịt CHƯƠNG II ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu - Đánh giá đặc điểm ngoại hình 303 cá thể lợn Lũng Pù, 277 cá thể lợn Bản hệ bố mẹ hệ Đánh giá khẳ sinh sản 218 ổ đẻ lợn Lũng Pù 213 ổ đẻ lợn Bản - Đánh giá khả sinh trưởng (37 lợn Lũng Pù, 38 lợn Bản), khả cho thịt chất lượng thịt (30 lợn LP 29 lợn Bản) - Xác định đa hình gen PRKAG3 150 cá thể lợn Lũng Pù 150 cá thể lợn Bản - Lợn Lũng Pù nuôi xã Lũng Pù huyện Mèo Vạc tỉnh Hà Giang, lợn Bản nuôi xã Phú Cường huyện Tân Lạc, tỉnh Hòa Bình - Đề tài nghiên cứu từ 01/2012 đến 06/2015 5 2.2 Nội dung nghiên cứu 2.1.1 Xác định đặc điểm ngoại hình, khả sản xuất lợn Lũng Pù lợn Bản - Đặc điểm màu sắc lông, da lợn Lũng Pù lợn Bản - Năng suất sinh sản lợn Lũng Pù lợn Bản - Khả sinh trưởng lợn Lũng Pù lợn Bản - Năng suất thân thịt chất lượng thịt lợn Lũng Pù lợn Bản 2.1.2 Xác định đa hình gen PRKAG3 lợn Lũng Pù, lợn Bản ảnh hưởng gen đến chất lượng thịt lợn Bản - Xác định đa hình gen PRKAG3 lợn Lũng Pù lợn Bản - Xác định ảnh hưởng đa hình gen PRKAG3 đến chất lượng thịt lợn Bản 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Đặc điểm ngoại hình, khả sản xuất lợn Lũng Pù lợn Bản 2.3.1.1 Đặc điểm ngoại hình lợn Lũng Pù lợn Bản Nghiên cứu đặc điểm ngoại hình tập trung vào đánh giá đặc điểm màu sắc lông, da lợn Lũng Pù lợn Bản tiêu chí: Lũng Pù: (i) toàn thân màu đen, (ii) toàn thân màu đen có điểm trắng (bốn khuỷu đến móng, trán chóp đuôi) (iii) toàn thân màu đen có loang trắng bụng; Đối với lợn Bản: (i) toàn thân màu đen, (ii) toàn thân màu đen có móng chân màu trắng (iii) toàn thân màu đen có loang trắng bụng 2.3.1.2 Năng suất sinh sản lợn Lũng Pù lợn Bản - Chọn giống 40 lợn hậu bị lợn đực hậu bị Các cá thể lợn đực, lợn chọn quan hệ huyết thống với Khối lượng trung bình lợn chọn 20 kg/con - Mỗi giống bố trí thí nghiệm 10 hộ nông dân (4 con/hộ) với điều kiện chăn nuôi tương đồng Số lợn nái 40 con/giống ghép đôi giao phối luân phiên với đực giống từ lứa đến lứa Áp dụng Tiêu chuẩn Việt Nam – TCVN 1547 – 2007 tiêu chuẩn, phần ăn cho lợn thí nghiệm - Theo dõi đàn lợn thí nghiệm nông hộ phương pháp đặt sổ ghi chép hàng ngày 6 2.3.1.3 Khả sinh trưởng lợn Lũng Pù lợn Bản - Lợn sau chọn làm thí nghiệm bấm thẻ tai cân khối lượng để đưa vào nuôi dưỡng Thí nghiệm lặp lại lần, tỷ lệ đực thiến 1:1 - Chế độ nuôi dưỡng: Sử dụng thức ăn sẵn có địa phương để phối trộn theo Tiêu chuẩn Việt Nam – TCVN 1547 – 2007 tiêu chuẩn, phần ăn cho lợn địa - Theo dõi khả sinh trưởng đàn lợn thịt từ tháng tuổi lợn đạt tháng tuổi việc cân khối lượng ghi chép hàng tháng 2.3.1.4 Năng suất chất lượng thịt lợn Lũng Pù lợn Bản a) Năng suất thịt: - Chọn lợn mổ khảo sát: Lợn mổ khảo sát chọn từ đàn lợn khảo sát sinh trưởng với tỷ lệ đực, 1:1 - Mổ khảo sát theo phương pháp cổ điển, sử dụng nửa trái lợn để phân tách thịt, mỡ, xương, da cân phần theo Tiêu chuẩn Việt Nam (TCVN 3899-1984) b) Chất lượng thịt - Mẫu thăn lấy sau giết thịt vị trí xương sườn 13 – 14, bảo quản hộp đá vận chuyển phòng thí nghiệm Cơ thăn cắt thành mẫu với độ dày từ cm, mẫu bảo quản 4oC để phân tích tiêu chất lượng thịt - Giá trị pH45, pH24, màu sắc thịt, tỷ lệ nước bảo quản, chế biến xác định theo phương pháp Warner cs (1997) độ dai (mềm) thịt theo phương pháp Channon cs (2003) 2.3.2 Đa hình gen PRKAG3 lợn Lũng Pù, lợn Bản ảnh hưởng đa hình gen đến chất lượng thịt lợn Bản 2.3.2.1 Xác định đa hình gen PRKAG3 giải trình tự - Tách chiết ADN tổng số từ mẫu mô tai thực theo quy trình kít tách ADN hãng Bioneer (Hàn Quốc) - Xác định đa hình đoạn gen PRKAG3 nghiên cứu phương pháp PCR-RFLP: - Giải trình tự gen PRKAG3 phương pháp giải trình tự trực tiếp Sanger máy sequencer ABI3130 7 - Phân tích trình tự gen PRKAG3 phần mềm chuyên dụng Bioedit v7.2.5 Phòng Thí nghiệm trọng điểm Tế bào động vật – Viện Chăn nuôi 2.3.2.2 Xác định ảnh hưởng đa hình gen PRKAG3 đến chất lượng thịt lợn Bản Sau xác định đa hình kiểu gen PRKAG3, cá thể lợn mang kiểu gen đặc trưng đánh dấu, nuôi theo dõi đến tháng tuôi tiến hành mổ khảo sát để đánh giá mối liên quan kiểu gen với chất lượng thịt 2.4 XỬ LÝ SỐ LIỆU Số liệu phân tích thống kê phần mềm SAS 9.0 (2002), để tính toán tham số thống kê LSM, SE, LSMeans với so sánh cặp pdiff hiệu chỉnh phương pháp Tukey với mô hình phân tích sau: Yijkl = µ + Bi + Lj + Nk + Ɛijkl Trong đó: Yijkl : Giá trị thu tiêu cần tính µ : Trung bình quần thể Bi : Ảnh hưởng bố (iLũng Pù =từ đến 4; iBản = từ đến 4) Lj : Ảnh hưởng lứa đẻ thứ j (j = từ đến 6) Nk : Ảnh hưởng năm thứ k (k = từ 2012 đến 2015) Ɛijkl: Sai số ngẫu nhiên CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 ĐẶC ĐIỂM NGOẠI HÌNH, KHẢ NĂNG SẢN XUẤT CỦA LỢN LŨNG PÙ VÀ LỢN BẢN 3.1.1 Đặc điểm ngoại hình lợn Lũng Pù lợn Bản Lợn Lũng Pù có đặc trưng bật toàn thân màu đen với điểm trắng chiếm tỷ lệ cao 65,68%, hệ bố mẹ chiếm tỷ lệ 75,00%, cao hệ (64,09%) sai khác ý nghĩa thống kê (P[...]... dai của thịt lợn Lũng Pù (60,66 N) thấp hơn lợn Bản (61,48 N), hay nói cách khác là thịt của lợn Lũng Pù mềm hợn thịt lợn Bản 3.2 ĐA HÌNH GEN PRKAG3 Ở LỢN LŨNG PÙ, LỢN BẢN VÀ ẢNH HƯỞNG CỦA NÓ ĐẾN CHẤT LƯỢNG THỊT LỢN BẢN 3.2.1 Đa hình gen PRKAG3 3.2.1.1 Nhân đặc hiệu vùng exon 1 và exon 3 gen PRKAG3 Khuếch đại thành công hai đoạn gen PRKAG3 vùng exon 1 và exon 3 với các kích thước tương ứng là 270 bp và. .. và tần số alen của các đa hình gen PRKAG3 3.2.2.1 Đối với lợn Lũng Pù Kết quả phân tích tần số alen và tần số kiểu gen tại các điểm đa hình vùng exon 1 và exon 3 gen PRKAG3 của giống lợn Lũng Pù được thể hiện ở bảng 14 20 Bảng 14: Tần số kiểu gen và tần số alen của các đa hình gen PRKAG3 ở lợn Lũng Pù Đa hình G52S/HphI (n=150) T30N/StyI (n=150) V199I/BsaHI (n=150) R200Q/BsrBI (n=150) Tần số kiểu gen. .. giống lợn nghiên cứu Đa hình tại vị trí G52S và T30N của gen PRKAG3 ở giống lợn Lũng Pù và Bản phù hợp với nghiên cứu của Lu-Sheng Huang và cs (2004) cũng tìm thấy 9/21 giống lợn bản địa của Trung Quốc b) Đa hình vùng exon 3 gen PRKAG3 (V199I/BsaHI và R200Q/BsrBI) Phân tích đa hình V199I vùng exon 3 gen PRKAG3 ở giống lợn Bản và lợn Lũng Pù, chúng tôi phát hiện được 2 alen V và I (Hình 15), tuy nhiên... với đa hình G52S/HphI chỉ xuất hiện alen G, đa hình T30N/StyI chỉ xuất hiện alen T, đa hình V199I/BsaHI chỉ xuất hiện alen V và đa hình R200Q/BrsBI chỉ xuất hiện alen R Do vậy tại mỗi đa hình thì tần số của kiểu gen và tần số của alen đều bằng 1 Kết quả nghiên cứu này cho thấy tính đa hình của gen PRKAG3 không được thể hiển tại 4 điểm đa hình trong quần thể lợn Lũng Pù 3.2.2.2 Đối với lợn Bản a) Đa hình. .. Khoảng cách lứa đẻ của lợn Lũng Pù là 186,72 ngày và lợn Bản là 179,38 ngày Số lứa đẻ/nái/năm của lợn Lũng Pù và lợn Bản đạt khá cao và lần lượt là 1,96 và 2,04 lứa - Năng suất sinh sản của lợn Lũng Pù theo lứa đẻ: Khả năng sinh sản của lợn Lũng Pù (Hình 1) từ lứa 1 đến lứa 6 cho thấy: số con sơ sinh/ổ đạt thấp nhất ở lứa 1, tăng nhanh ở lứa 2, đạt cao nhất ở lứa 4 và bắt đầu giảm ở lứa 5 và 6 Tương tự,... các giống lợn khác nhau CHƯƠNG IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận 4.1.1 Đặc điểm ngoại hình, khả năng sản xuất và chất lượng thịt của lợn Lũng Pù và lợn Bản - Đặc trưng nổi bật của lợn Lũng Pù là toàn thân màu đen có 6 điểm trắng và lợn Bản với đặc trưng toàn thân màu đen có 4 móng chân màu trắng đề chiếm tỷ lệ cao trong quần thể của từng giống - Năng suất sinh sản của lợn Lũng Pù và lợn Bản chịu ảnh... PRKAG 3 ở lợn Lũng Pù, lợn Bản và ảnh hưởng của gen này đến chất lượng thịt lợn Bản - Đã nhân PCR thành công và đặc hiệu các đoạn gen PRKAG3 trên hai vùng exon 1 và exon 3 - Sử dụng phương pháp PCR-RFLP đã xác định được tính đa hình vùng exon 1 và exon 3 gen PRKAG3 (G52S/HphI, T30N/StyI, V199I/BsaHI và R200Q/BsrBI) ở lợn Lũng Pù và lợn Bản Ở lợn Lũng Pù không thể hiện tính đa hình ở các đoạn gen nghiên... lứa 1 đến lứa 2, đạt cao ở lứa 3 và lứa 4, bắt đầu giảm ở lứa 5, lứa 6 3.1.3 Khả năng sinh trưởng, năng suất và chất lượng thịt của lợn Lũng Pù và lợn Bản 3.1.3.1 Khối lượng và tăng khối lượng của lợn Lũng Pù và lợn Bản qua các tháng tuổi a) Khối lượng của lợn Lũng Pù qua các tháng tuổi Khối lượng của lợn Lũng Pù lúc 2 tháng tuổi đạt 6,99 kg, khối lượng lợn đực thiến và lợn cái sai khác không có ý nghĩa... 3.1.3.2 Năng suất thân thịt của lợn Lũng Pù và lợn Bản Kết quả khảo sát năng suất thân thịt của lợn Lũng Pù được trình bày ở bảng 10 Khối lượng giết thịt ở 8 tháng tuổi của lợn Lũng Pù là 44,71 kg, lợn có tỷ lệ móc hàm là 74,28%; tỷ lệ thịt xẻ là 62,16%; tỷ lệ nạc là 38,80 Tỷ lệ nạc giữa lợn đực thiến và lợn cái sai khác không có ý nghĩa thống kê (P>0,05) Bảng 10: Năng suất thân thịt của lợn Lũng Pù Chỉ... lượng thịt của lợn Lũng Pù và lợn Bản Kết quả bảng 12 cho thấy, độ pH45 thịt thăn của lợn Lũng Pù có sự sai khác (P