Nghiên cứu quy trình công nghệ trích ly β glucan từ nấm linh chi, ứng dụng cho chế biến trà túi lọc
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ TRÍCH LY βGLUCAN TỪ NẤM LINH CHI, ỨNG DỤNG CHO CHẾ BIẾN TRÀ TÚI LỌC Ngành : CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM Người hướng dẫn : ThS NGUYỄN ĐỨC TIẾN Bộ môn Nghiên cứu Phụ phẩm Môi trường Nông nghiệp - Viện Cơ điện nông nghiệp Công nghệ sau thu hoạch ThS Trần Thị Lý Bộ môn Công nghệ thực phẩm - Trường đại học Nông Lâm Thái Nguyên THÁI NGUYÊN 2013 LỜI CẢM ƠN Có kết nghiên cứu này, xin trình bày lòng biết ơn sâu sắc đến: ThS Nguyễn Đức Tiến - Trưởng Bộ môn Nghiên cứu Phụ phẩm Môi trường nông nghiệp thuộc Viện Cơ điện Nông nghiệp Công nghệ Sau thu hoạch, người trực tiếp hướng dẫn, bảo, giúp đỡ, động viên, khuyến khích tận tình chu đáo lúc khó khăn, truyền cho kiến thức kinh nghiệm quý báu để hoàn thành đề tài tốt nghiệp ThS Trần Thị Lý thầy cô giáo khác Bộ môn Công nghệ thực phẩm Khoa Công nghê sinh học Công nghệ thực phẩm - trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên giúp đỡ, hỗ trợ phương tiện nghiên cứu, kiến thức có góp ý sâu sắc thời gian thực đề tài Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến gia đình người thân bên động viên suốt thời gian học tập thực đề tài Tôi xin cảm ơn bạn bè động viên, giúp đỡ tôi, chia sẻ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập hoàn thành đề tài tốt nghiệp Một lần xin chân thành cảm ơn tất giúp đỡ quý báu Thái Nguyên , ngày Sinh viên tháng năm 2013 MỤC LỤC Phần I MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ “Sống khoẻ - không bệnh tật” niềm ước ao người thời đại Tuy nhiên, sức khỏe người tùy thuộc vào nhiều yếu tố di truyền, môi trường sống, dinh dưỡng phòng bệnh Trong dinh dưỡng để phòng ngừa bệnh tật đóng vai trò quan trọng việc bảo vệ sức khỏe Vì người ngày quan tâm tới thực phẩm không giàu dinh dưỡng mà có tác dụng thuốc để tăng cường thể lực, phòng, điều trị bệnh tật kéo dài tuổi thọ Đó thực phẩm có thành phần dinh dưỡng đặc hiệu thể, có tác dụng tăng cường đề kháng giúp thể phòng bệnh Ngày nay, xu hướng sử dụng thảo dược thiên nhiên để trị bệnh đã trở nên phổ biến, việc tìm kiếm khả trị bệnh từ loại thảo dược đã được tiến hành nhiều nước giới như: Trung Quốc, Nhật Bản, Đài Loan, Thái Lan, Malaysia… Trong nấm Linh Chi đối tượng nghiên cứu nhiều quốc gia Đặc biệt nước Châu Á, có tiềm nguồn dược liệu Tác dụng kỳ diệu nấm Linh Chi đã được chứng minh công trình nghiên cứu khoa học đại Trong nấm Linh Chi có nhiều hoạt chất sinh học quý như: Triterpenoid, Lonosterol, Ganoderans A, B, C, Lingzhi-8, Adenosine …và nguyên tố vô Đặc biệt nhà khoa học đã nghiên cứu chiết xuất được β- glucan - hoạt chất sinh học thuộc nhóm polysaccharide có nấm Linh Chi β- glucan được nghiên cứu có khả kích thích tế bào hệ miễn dịch, giảm cholesterol có tác dụng làm giảm đáng kể triệu chứng nhiễm trùng đường hô hấp như: nghẹt mũi, sổ mũi, đau họng, ho Ngoài ra, có tác dụng kích hoạt làm tăng số lượng tế bào miễn dịch thể macrophage tế bào sát thủ tự nhiên để chúng nhận biết, tiêu diệt tế bào ung thư cảnh báo cho thể biết Tại thị trường Việt Nam, nhu cầu sử dụng nấm Linh Chi làm thuốc chữa bệnh đặc biệt chế phẩm β- glucan loại nấm ngày tăng cao Tuy nhiên, thị trường, sản phẩm từ Linh Chi hầu hết nhập ngoại từ Trung Quốc, Hàn Quốc có giá thành cao, số chưa đảm bảo tiêu chuẩn vệ sinh an toàn thực phẩm Mặt khác, Việt Nam, với khí hậu nhiệt đới gió mùa, nguồn nguyên liệu cellulose dồi dào, lực lượng lao động đông đảo Điều tạo điều kiện thuận lợi cho ngành sản xuất nấm phát triển Tuy nhiên nấm Linh Chi sản xuất chủ yếu bán dạng nguyên liệu thô, giá trị kinh tế thấp, sở chế biến nấm Linh Chi hạn chế Vì vậy, việc nghiên cứu trích ly hoạt chất sinh học β- glucan tạo sản phẩm trà từ nấm Linh Chi đạt tiêu chuẩn chất lượng mang đến nhiều lợi ích to lớn Được đồng ý Bộ môn Nghiên cứu Phụ phẩm Môi trường nông nghiệp Viện Cơ điện nông nghiệp Công nghệ sau thu hoạch môn Công nghệ thực phẩm - Khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Tôi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu quy trình công nghệ trích ly β- Glucan từ nấm linh chi, ứng dụng cho chế biến trà túi lọc ” 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích Nghiên cứu xây dựng quy trình công nghệ trích ly β- Glucan từ nấm Linh Chi ứng dụng cho chế biến trà túi lọc 1.2.2 Yêu cầu - Xác định ảnh hưởng điều kiện xử lý nguyên liệu đến hiệu trích ly βglucan - Xác định thông số trình trích ly β- glucan từ nấm linh chi - Xác định được phương pháp lọc, cô dịch trích ly thu nhận chế phẩm β- glucan trích ly - Xác định được công thức phối chế để tạo sản phẩm trà túi lọc từ nấm Linh Chi - Đề xuất được quy trình sản xuất chế phẩm β- glucan xây dựng được quy trình sản xuất sản phẩm trà túi lọc có thành phần β- glucan từ nấm Linh Chi Phần II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Nấm Linh Chi 2.1.1 Nguồn gốc phân loại nấm Linh Chi * Nguồn gốc Linh Chi viết theo kiểu phiên âm Trung Hoa Lingzhi, có tên tiếng Nhật Reishi, tên khoa học Ganoderma lucidum, loại nấm thuộc họ đa khổng (polyporaceae), thường mọc thân mục Người ta gọi Linh Chi Linh Chi thảo, nhiều tác giả đã cho loại cỏ thực Linh Chi loại nấm Năm 1971, hai nhà bác học người Nhật Yukio Naoi Zenzabuno Kasai, giáo sư phân khoa nông nghiệp, trường Đại học Kyoto thành công việc gây giống người ta sản xuất được loại nấm cách quy mô Từ Linh Chi được trồng sử dụng việc bào chế không huyền thoại [5,7,14] * Phân loại Nấm Linh Chi có vị trí phân loại được thừa nhận rộng rãi [2,3] Ngành: Eumycota Ngành phụ: Basidiamyctina Lớp: Hymenomycetes Lớp phụ: Hymenomycetidae Bộ: Aphyllophorales Họ: Ganodermataceae Họ phụ: Ganodermoidae Chi: Amauroderma Linh Chi (Ganoderma) loại nấm gỗ mọc hoang thiên nhiên, có hàng trăm loài khác nhau, có nhóm lớn là: Cổ Linh Chi Linh Chi [3,4] Cổ Linh Chi (Ganoderma applanatum (Pers Past), loài nấm gỗ không cuống (hoặc cuống ngắn) có nhiều tầng (mỗi năm thụ tầng lại phát triển thêm lớp chồng lên) Mũ nấm hình quạt, màu từ nâu xám đến đen sẫm, mặt sù thô ráp Nấm cứng (cứng gỗ lim nên gọi nấm lim) Linh Chi phong phú chủng loại, ước tính toàn giới có 200 loài Linh Chi Riêng Trung Quốc có 84 loài, có 12 loài được dùng làm thuốc Xích Linh Chi, Tử Linh Chi, Hắc Linh Chi [10, 8] Theo sách thảo cương mục Lý Thời Trần (1959) đại danh y Trung Quốc đã phân loại Linh Chi theo màu sắc thành loại: - Thanh chi hay Long chi: màu xanh, vị chua, tính bình, không độc - Hồng chi, Xích chi hay Đơn chi: màu đỏ vị đắng, tính bình, không độc - Hoàng chi hay Kim chi: màu vàng, vị ngot, tính bình, không độc - Bạch chi hay Ngọc chi: màu trắng, vị cay, tính bình, không độc - Hắc chi hay Huyền chi: màu đen, vị mặn, tính bình, không độc - Tử chi hay Mộc chi: màu tím, vị ngọt, tính ôn, không độc 2.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố Nấm Linh Chi loại nấm phá gỗ, thường ký sinh gỗ lâu năm, đặc biệt thuộc Đậu (Fabales) Ngoài gặp chúng Lim, Phượng Vĩ, So Đũa số loài chết, mục sống Xoài, Mít, Mãng Cầu… Nấm thường có vùng nhiệt đới cận nhiệt đới Trong tự nhiên, nấm thường có nơi rừng rậm, ánh sáng có độ ẩm cao [6] Linh Chi có cấu tạo phần: phần cuống mũ nấm Cuống nấm biến dị lớn, từ ngắn (0,5cm), mảnh (0,2cm) dài cỡ hàng 5-10 cm dài 20-25cm Cuống đính bên đính gần tâm trình lên tán mà thành Mũ nấm dạng thận - gần tròn, xoè hình quạt nhiều dị dạng Trên mặt mũ có vân gợn đồng tâm có tia rãnh phóng xạ, màu vàng nâu, vàng cam, đỏ cam, đỏ nâu, nâu tím nâu đen, nhẵn bóng láng vecni Kích thước tán biến động từ – 30cm, dày 0,8 – 2,5cm Thịt nấm dày từ 0,4 – 1,8cm, màu vàng kem, nâu nhạt trắng Nấm mềm, dai tươi trở nên cứng nhẹ khô, hệ sợi kiểu trimitic, đầu tận sợi phình hình chuỳ, màng dày đan khít vào tạo thành lớp vỏ láng phủ mũ bao quanh cuống [8] 2.1.3 Thành phần hoạt chất sinh học nấm Linh Chi Các nghiên cứu thành phần hoá học nấm Linh Chi được tiến hành vào đầu kỷ XX, nhà khoa học nghiên cứu đến lớp vỏ láng nấm đã phát chất như: esgosterol, enzyme phenoloxidase peroxidase Theo phân tích G Bing Lin thành phần hoá học Ganoderma lucidum gồm chất: nước(12 - 13%), cellulose (54 - 56%), lignin (13 - 14%), monosaccharide (4,5 - 5%), lipid (1,9 - 2,0%), protein (0,08 - 0,12%), sterol (0,14 - 0,16%), nguyên tố vô như: Ag, Br, Ca, Fe, K, Na, Mg, Mn, Zn, Bi… Hai nguyên tố quan trọng Selenium Germanium Hiện người ta đã tìm được hoạt chất sinh học nấm Linh Chi Theo nhiều tài liệu hoạt chất được thể nhóm sau [9] Hình 2.1 Công thức phân tử hoạt chất sinh học nấm Linh Chi a Nhóm có chất proteine Nhóm bật với Lingzhi - nhà khoa học Nhật Bản tìm được chứng minh tác nhân hỗ trợ chống dị ứng phổ rộng điều hoà miễn dịch hữu hiệu Đồng thời, trì tạo kháng thể hỗ trợ chống kháng nguyên viêm gan B [20] b Nhóm nucleoside Nhóm đặc trưng dẫn xuất adenosine với tác dụng hỗ trợ thư giãn cơ, giảm đau ức chế dính kết tiểu cầu c Nhóm alcaloide Nhóm alcaloide được khảo cứu Tuy nhiên có tác dụng trợ tim rõ ràng d Nhóm Steroide Nhóm Steroide phong phú nấm Linh Chi với tác dụng chủ đạo ức chế sinh tổng hợp cholesterol lacton A, B sterol e Các hợp chất Lanostanoide có cấu trúc kiểu Triterpen Các hợp chất Lanostanoide có cấu trúc kiểu triterpen được phát ngày nhiều, năm 1986, Arisawa, M.và cộng đã xác định cấu trúc: - Ganodermenonol: 26 - hydroxy - alpha - lanosta - 7,9 (11).24 - trien - one - Ganodermadiol: alpha - lanosta - 7,9 (11).24 - trien - beta.26 - diol - Ganodermatriol: alpha - lanosta - 7,9 (11).24 - trien - beta.26,27 - triol Trong nhóm Ganodermic acid, Wang cộng đã chứng minh được hiệu lực ức chế kết tụ cầu người xác định cấu trúc phân tử Ganodermic acid S: Lanosta 7,9 (11).24 - trien - beta, 15 alpha - diacetoxy - 26 - oic acid Kết gắn đồng vị phóng xạ P- 32 Ganodermic acid hoạt hoá thuỷ phân P1P2 (đó phosphatidylinositol 4,5 - biphosphate) f Nhóm ester với axít béo không no linoleic Nhóm ester với axít béo không no linoleic được ghi nhận vào năm 1991 có hoạt tính chống ung thư Đó ergosterol mới: - Steryl ester1: Ergosta - 7.22 - dien - 3beta - yl – linoleate - Steryl ester 2: alpha alpha - epidioxyergosta - 6.22 - dien - beta - yl - linoleate Đồng thời tác giả tìm lanostanoid steroid có tác dụng ức chế tế bào ung thư [9, 10] g Nhóm Polysaccharide Có 200 loại polyssaccharide được trích ly thu nhận từ nấm linh Chi Theo Hee cộng năm 1992, đã khảo cứu BN3B - gồm polysaccharide có hoạt tính làm tăng miễn dịch Trong BN3B1 được xác định glucan (chỉ chứa glucose) BN3B3 arabinogalactan mang liên kết glycosid [14] h Các phức hợp Polysaccharide-proteine Đặc biệt phức hợp Polysaccharide-proteine có hoạt tính hỗ trợ chống khối u tăng miễn dịch đã được từ lâu Gần tác dụng tăng sinh tổng hợp IL-2 (Interleukine-2) hoạt tính DNA polymerase chuột già tuổi polysaccharit đã soi sáng thêm khả trẻ hoá, tăng tuổi thọ nấm Linh Chi [26] Hàng loạt nghiên cứu polysaccharide không tan nước tác giả Nhật Bản Trung Quốc chứng tỏ hiệu lực chống khối u rõ rệt, chí tan khối u với tỷ lệ 3/4 với loài G.applantum G Lucidum [8] Những tổng kết xác đáng vai trò sinh dược học nhóm hoạt chất được R Chang giới thiệu Hội thảo Bắc Kinh năm 1991 với báo cáo thực nghiệm tác giả Đài Loan, Trung Quốc Hoa Kỳ i Nhóm triterpennoid Đa dạng có tác dụng dược lý mạnh nhóm saponine - triterpennoids axít ganoderic Những năm 1984-1987, lần Nishitiba cộng đã chứng minh ganoderic acid C chất tự nhiên Sau Morigiwa (1986) tìm thêm ganoderic acid B Năm 2001, Masao Hattori đã trích ly thêm được 10 triterpennoid bao gồm lucidumol A B, ganoderic A, B, E, F, H, K, Y R Đa dạng có tác dụng dược lý mạnh nhóm saponine - triterpennoids - axít ganoderic Bảng 2.1 Các hoạt chất sinh học nấm Linh Chi công dụng[9] Hoạt chất Nhóm Hoạt tính dược lý Cyclooctasulfur Adenosine dẫn xuất Nucleotid Lingzhi-8 *** Ganodosteron Lanosporeric axít A Lonosterol Compounds I, II, III, IV, V Ganoderans A, B, C Beta-D- glucan BN-3B:1, 2, 3, D-6 Ganoderic axít R, S Ganoderic axít B, D, F, H, K, Y Ganoderic axíts Ganodermadiol Ganodermic axít Mf Protein Alcaloide Steroid Steroid Steroid Steroid Polysaccharide Polysaccharide Polysaccharide Polysaccharide Triterpenoid Triterpenoid Triterpenoid Triterpenoid Triterpenoid Ức chế giải phóng histamine Ức chế kết dính tiểu cầu, thư giãn cơ, giảm đau Chống dị ứng phổ rộng, điều hoà miễn dịch Trợ tim Giảm độc gan Ức chế sinh tổng hợp cholesterol Ức chế sinh tổng hợp cholesterol Ức chế sinh tổng hợp cholesterol Hạ đường huyết Chống ung thư, tăng tính miễn dịch Tăng tính miễn dịch Tăng sinh tổng hợp protein Ức chế giải phóng histamine Giảm huyết áp Ức chế sinh tổng hợp cholesterol Giảm huyết áp Ức chế sinh tổng hợp cholesterol Ganodermic axít T.O Triterpenoid Ức chế sinh tổng hợp cholesterol Lucidone A Lucidenol Ganosporelacton A Ganosporelacton B Oleic axít Triterpenoid Triterpenoid Triterpenoid Triterpenoid Triterpenoid Tăng cường chức gan Tăng cường chức gan Chống khối u Chống khối u Ức chế giải phóng histamine 10 Ảnh hưởng độ mịn nguyên liệu đến khả trích ly polysaccharide BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE KT1 28/ 5/** 7:10 PAGE anh huong cua kich thuoc VARIATE V003 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= KT$ 157455 524850E-01 ****** 0.000 * RESIDUAL 344018E-03 430023E-04 * TOTAL (CORRECTED) 11 157799 143454E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KT1 28/ 5/** 7:10 PAGE anh huong cua kich thuoc MEANS FOR EFFECT KT$ KT$ t1 t2 t3 t4 NOS 3 3 VAR02 0.847333 0.722667 0.626667 0.539000 SE(N= 3) 0.378604E-02 5%LSD 8DF 0.123459E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KT1 28/ 5/** 7:10 PAGE anh huong cua kich thuoc F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 0.68392 STANDARD DEVIATION C OF V |KT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.11977 0.65576E-02 1.0 0.0000 60 | | | | Ảnh hưởng thời gian ngâm đến khả trích ly polysaccharide BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE NGAM2 27/ 5/** 11: PAGE anh huong cua thoi gian ngam polysaccharide VARIATE V003 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NGÂM$ 263149E-01 877164E-02 262.49 0.000 * RESIDUAL 267335E-03 334169E-04 * TOTAL (CORRECTED) 11 265822E-01 241657E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NGAM2 27/ 5/** 11: PAGE anh huong cua thoi gian ngam polysaccharide MEANS FOR EFFECT NGÂM$ NGÂM$ t1 t2 t3 t4 NOS 3 3 VAR02 0.847000 0.892667 0.955000 0.960333 SE(N= 3) 0.333751E-02 5%LSD 8DF 0.108833E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NGAM2 27/ 5/** 11: PAGE anh huong cua thoi gian ngam polysaccharide F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 0.91375 STANDARD DEVIATION C OF V |NGÂM$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.49159E-010.57807E-02 0.6 0.0000 61 | | | | 3 Ảnh hưởng thời gian xử lý sóng siêu âm đến khả trích ly polysaccharide BALANCED ANOVA FOR VARIATE KQ FILE SS2 28/ 5/** 7:24 PAGE anh huong cua thoi gian xu ly song sieu am VARIATE V003 KQ LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= SS$ 161441 322881E-01 718.39 0.000 * RESIDUAL 12 539345E-03 449454E-04 * TOTAL (CORRECTED) 17 161980 952824E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE SS2 28/ 5/** 7:24 PAGE anh huong cua thoi gian xu ly song sieu am MEANS FOR EFFECT SS$ SS$ t1 t2 t3 t4 t5 t6 NOS 3 3 3 KQ 0.955000 0.992333 1.04333 1.11467 1.19433 1.20233 SE(N= 3) 0.387063E-02 5%LSD 12DF 0.119267E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE SS2 28/ 5/** 7:24 PAGE anh huong cua thoi gian xu ly song sieu am F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE KQ GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 1.0837 STANDARD DEVIATION C OF V |SS$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.97613E-010.67041E-02 0.6 0.0000 62 | | | | Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu dung môi đến khả trích ly polysaccharide BALANCED ANOVA FOR VARIATE KQ FILE NLDM2 28/ 5/** 7:44 PAGE anh huong cua ty le nguyen lieu tren dung moi VARIATE V003 KQ LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NLDM$ 260053 866843E-01 ****** 0.000 * RESIDUAL 144020E-03 180025E-04 * TOTAL (CORRECTED) 11 260197 236543E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NLDM2 28/ 5/** 7:44 PAGE anh huong cua ty le nguyen lieu tren dung moi MEANS FOR EFFECT NLDM$ NLDM$ t1 t2 t3 t4 NOS 3 3 KQ 0.871667 0.942000 1.19433 1.19967 SE(N= 3) 0.244966E-02 5%LSD 8DF 0.798810E-02 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NLDM2 28/ 5/** 7:44 PAGE anh huong cua ty le nguyen lieu tren dung moi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE KQ GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 1.0519 STANDARD DEVIATION C OF V |NLDM$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.15380 0.42429E-02 0.4 0.0000 63 | | | | Ảnh hưởng phương pháp trích ly đến khả trích ly polysaccharide BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE PP2 28/ 5/** 7:55 PAGE anh huong cua phuong phap trich ly VARIATE V003 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= PP$ 638270 319135 ****** 0.000 * RESIDUAL 106935E-02 178225E-03 * TOTAL (CORRECTED) 639339 799174E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE PP2 28/ 5/** 7:55 PAGE anh huong cua phuong phap trich ly MEANS FOR EFFECT PP$ PP$ t1 t2 t3 NOS 3 VAR02 0.696000 1.20233 1.30533 SE(N= 3) 0.770768E-02 5%LSD 6DF 0.266621E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE PP2 28/ 5/** 7:55 PAGE anh huong cua phuong phap trich ly F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 1.0679 STANDARD DEVIATION C OF V |PP$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.28270 0.13350E-01 1.3 0.0000 64 | | | | Ảnh hưởng nhiệt độ tới trình trích ly đến khả trích ly polysaccharide BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE NDTL 28/ 5/** 8:25 PAGE anh huong cua nhiet VARIATE V003 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= ND$ 263368 658419E-01 921.25 0.000 * RESIDUAL 10 714700E-03 714700E-04 * TOTAL (CORRECTED) 14 264082 188630E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NDTL 28/ 5/** 8:25 PAGE anh huong cua nhiet MEANS FOR EFFECT ND$ ND$ t1 t2 t3 t4 t5 NOS 3 3 VAR02 0.875333 0.952333 1.01367 1.19967 1.20500 SE(N= 3) 0.488091E-02 5%LSD 10DF 0.153799E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NDTL 28/ 5/** 8:25 PAGE anh huong cua nhiet F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 1.0492 STANDARD DEVIATION C OF V |ND$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.13734 0.84540E-02 0.8 0.0000 65 | | | | Ảnh hưởng thời gian trình trích ly đến khả trích ly polysaccharide BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE TG 28/ 5/** 8:33 PAGE anh huong cua thoi gian VARIATE V003 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= TG$ 566932 141733 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 536020E-03 536020E-04 * TOTAL (CORRECTED) 14 567468 405335E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TG 28/ 5/** 8:33 PAGE anh huong cua thoi gian MEANS FOR EFFECT TG$ TG$ t1 t2 t3 t4 t5 NOS 3 3 VAR02 0.852000 1.00033 1.19433 1.33933 1.35000 SE(N= 3) 0.422698E-02 5%LSD 10DF 0.133194E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TG 28/ 5/** 8:33 PAGE anh huong cua thoi gian F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 1.1472 STANDARD DEVIATION C OF V |TG$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.20133 0.73213E-02 0.6 0.0000 66 | | | | Ảnh hưởng độ mịn nguyên liệu đến hiệu trích ly β- glucan nấm Linh Chi BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE KT 27/ 5/** 23:58 PAGE anh huong cua kich thuoc nguyen lieu VARIATE V003 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= KT$ 147649E-01 492164E-02 ****** 0.000 * RESIDUAL 139995E-04 174994E-05 * TOTAL (CORRECTED) 11 147789E-01 134354E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KT 27/ 5/** 23:58 PAGE anh huong cua kich thuoc nguyen lieu MEANS FOR EFFECT KT$ KT$ t1 t2 t3 t4 NOS 3 3 VAR02 0.254000 0.216667 0.187667 0.159333 SE(N= 3) 0.763749E-03 5%LSD 8DF 0.249051E-02 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KT 27/ 5/** 23:58 PAGE anh huong cua kich thuoc nguyen lieu F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 0.20442 STANDARD DEVIATION C OF V |KT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.36654E-010.13229E-02 0.6 0.0000 67 | | | | Ảnh hưởng thời gian ngâm nguyên liệu đến hiệu trích ly β- glucan nấm Linh Chi BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE TRANG 27/ 5/** 10:57 PAGE anh huong cua thoi gian ngam VARIATE V003 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NGÂM$ 242167E-02 807223E-03 189.93 0.000 * RESIDUAL 340000E-04 425000E-05 * TOTAL (CORRECTED) 11 245567E-02 223243E-03 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TRANG 27/ 5/** 10:57 PAGE anh huong cua thoi gian ngam MEANS FOR EFFECT NGÂM$ NGÂM$ t1 t2 t3 t4 NOS 3 3 VAR02 0.254000 0.267667 0.286333 0.288667 SE(N= 3) 0.119024E-02 5%LSD 8DF 0.388125E-02 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TRANG 27/ 5/** 10:57 PAGE anh huong cua thoi gian ngam F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 0.27417 STANDARD DEVIATION C OF V |NGÂM$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.14941E-010.20616E-02 0.8 0.0000 68 | | | | 3 Ảnh hưởng thời gian xử lý song siêu đến hiệu trích ly β- glucan nấm Linh Chi BALANCED ANOVA FOR VARIATE KQ FILE SS 27/ 5/** 15:43 PAGE anh huong cua thoi gian xu ly song sieu am VARIATE V003 KQ LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= SS$ 159318E-01 318635E-02 ****** 0.000 * RESIDUAL 12 333342E-04 277785E-05 * TOTAL (CORRECTED) 17 159651E-01 939124E-03 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE SS 27/ 5/** 15:43 PAGE anh huong cua thoi gian xu ly song sieu am MEANS FOR EFFECT SS$ SS$ t1 t2 t3 t4 t5 t6 NOS 3 3 3 KQ 0.281000 0.297333 0.313333 0.334667 0.358333 0.360667 SE(N= 3) 0.962263E-03 5%LSD 12DF 0.296506E-02 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE SS 27/ 5/** 15:43 PAGE anh huong cua thoi gian xu ly song sieu am F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE KQ GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 0.32422 STANDARD DEVIATION C OF V |SS$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.30645E-010.16667E-02 0.5 0.0000 69 | | | | Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu dung môi đến hiệu thu β- glucan nấm Linh Chi BALANCED ANOVA FOR VARIATE KQ FILE NL 27/ 5/** 18:46 PAGE anh huong cua ty le nguyen lieu dung moi VARIATE V003 KQ LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL$ 232649E-01 775497E-02 ****** 0.000 * RESIDUAL 133337E-04 166671E-05 * TOTAL (CORRECTED) 11 232782E-01 211620E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NL 27/ 5/** 18:46 PAGE anh huong cua ty le nguyen lieu dung moi MEANS FOR EFFECT NL$ NL$ t1 t2 t3 t4 NOS 3 3 KQ 0.262000 0.282667 0.358333 0.360000 SE(N= 3) 0.745366E-03 5%LSD 8DF 0.243056E-02 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NL 27/ 5/** 18:46 PAGE anh huong cua ty le nguyen lieu dung moi F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE KQ GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 0.31575 STANDARD DEVIATION C OF V |NL$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.46002E-010.12910E-02 0.4 0.0000 70 | | | | Ảnh hưởng phương pháp trích ly đến hiệu thu β- glucan nấm Linh BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE PP 28/ 5/** 7:52 PAGE anh huong cua phuong phap trich ly VARIATE V003 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= PP$ 547495E-01 273748E-01 ****** 0.000 * RESIDUAL 400066E-04 666777E-05 * TOTAL (CORRECTED) 547896E-01 684869E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE PP 28/ 5/** 7:52 PAGE anh huong cua phuong phap trich ly MEANS FOR EFFECT PP$ PP$ t1 t2 t3 NOS 3 VAR02 0.208667 0.358333 0.386333 SE(N= 3) 0.149084E-02 5%LSD 6DF 0.515704E-02 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE PP 28/ 5/** 7:52 PAGE anh huong cua phuong phap trich ly F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 0.31778 STANDARD DEVIATION C OF V |PP$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.82757E-010.25822E-02 0.8 0.0000 | | | | F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE KQ GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 0.32422 STANDARD DEVIATION C OF V |SS$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.30645E-010.16667E-02 0.5 0.0000 71 | | | | Ảnh hưởng nhiệt độ trích ly đến hiệu thu β- glucan nấm Linh Chi BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE ND1 28/ 5/** 8:37 PAGE anh huong cua nhiet VARIATE V003 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= ND$ 242317E-01 605793E-02 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 500012E-04 500012E-05 * TOTAL (CORRECTED) 14 242817E-01 173441E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE ND1 28/ 5/** 8:37 PAGE anh huong cua nhiet MEANS FOR EFFECT ND$ ND$ t1 t2 t3 t4 t5 NOS 3 3 VAR02 0.260333 0.285667 0.304000 0.359667 0.361000 SE(N= 3) 0.129101E-02 5%LSD 10DF 0.406802E-02 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE ND1 28/ 5/** 8:37 PAGE anh huong cua nhiet F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 0.31413 STANDARD DEVIATION C OF V |ND$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.41646E-010.22361E-02 0.7 0.0000 72 | | | | Ảnh hưởng thời gian trích ly đến hiệu thu β- glucan nấm Linh Chi BALANCED ANOVA FOR VARIATE VAR02 FILE TG 27/ 5/** 23:21 PAGE anh huong cua thoi gian trich ly VARIATE V003 VAR02 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= TG$ 515089E-01 128772E-01 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 400060E-04 400060E-05 * TOTAL (CORRECTED) 14 515489E-01 368207E-02 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TG 27/ 5/** 23:21 PAGE anh huong cua thoi gian trich ly MEANS FOR EFFECT TG$ TG$ t1 t2 t3 t4 t5 NOS 3 3 VAR02 0.255667 0.300000 0.360333 0.402000 0.405667 SE(N= 3) 0.115479E-02 5%LSD 10DF 0.363877E-02 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TG 27/ 5/** 23:21 PAGE anh huong cua thoi gian trich ly F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE VAR02 GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 0.34473 STANDARD DEVIATION C OF V |TG$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.60680E-010.20001E-02 0.6 0.0000 | | | | Để cải thiện toàn phần LDL cholesterol, nghiên cứu tìm thấy lợi ích với beta-glucan với liều khác nhau, từ đến 15 gram ngày.Tuy nhiên, lợi ích nhìn thấy cách quán cuối cao phạm vi này, nghiên cứu thiết kế cẩn thận tìm thấy lợi ích gram ngày * Lovegrove JA, Clohessy A, Milon H, et al Liều lượng khiêm tốn beta-glucan không làm giảm nồng độ lipoprotein có khả xơ vữa Am J Clin Nutr 2000; 72:49-55 73 Chứng nhận USFDA GRAS năm 2008 an toàn cho người từ tuổi trở lên Nhiều nghiên cứu người động vật chứng minh độ an toàn Ngoài ra, beta-glucan người (trẻ em) có chế độ ăn (leavened sản phẩm bánh mì) cho hàng ngàn năm Liều dùng khuyến nghị 2,0 mg / kg / ngày dạng beta-glucan Giáo sư Rafael Fernandez-Botran, chuyên gia đầu ngành miễn dịch học, Đại Học Luisville – Mỹ đưa nghiên cứu khoa học chứng minh hiệu miễn dịch dưỡng chất có tên Beta-Glucan 1,3/1,6 74 [...]... Linh Chi trích ly - Làm sạch dịch trích ly - Thu nhận và cô dịch trích ly 3.3.4 Nghiên cứu tạo sản phẩm trà túi lọc Linh Chi từ chế phẩm nấm Linh Chi trích ly - Lựa chọn công thức phối chế cho phù hợp - Ảnh hưởng của thời gian sấy đến chất lượng sản phẩm trà túi lọc 3.3.5 Quy trình công nghệ trích ly β- glucan từ nấm Linh Chi Nguyên liệu Nấm Linh Chi Xử lý Trích ly Lọc Thu dịch Cô Chế phẩm glucan. .. quá trình trích ly + Ảnh hưởng của tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi đến hiệu quả trích ly glucan + Lựa chọn phương pháp trích ly phù hợp + Ảnh hưởng nhiệt độ trích ly đến quá trình trích ly β- glucan + Ảnh hưởng của thời gian đến khả năng trích ly β- glucan trong nấm Linh Chi + Ảnh hưởng của số lần trích ly đến khả năng chiết β- glucan trong nấm Linh Chi 23 3.3.3 Lọc, cô dịch và thu nhận chế phẩm nấm. .. có thành phần β1 5 Hình 2.5: Thực phẩm chức năng có thành phần β- ở dạng viên nén glucan ở dạng túi lọc glucan ở dạng siro 2.2 Trích ly và thu nhận β- glucan của nấm Linh Chi 2.2.1 Cơ sở khoa học duy trì và trích ly β- Gucan trong nấm Linh Chi Theo các nghiên cứu thì β- glucan trong nấm Linh Chi thuộc nhóm polysaccharide - là nhóm chất hữu cơ phổ biến và có khối lượng lớn nhất trong nấm Linh Chi Chúng... vậy, dịch chiết Linh Chi rất thuận lợi trong việc chế biến các sản phẩm đồ uống dạng cao nấm Linh Chi, trà hòa tan, trà túi lọc Linh Chi và và bổ sung vào thực phẩm dinh dưỡng, tạo dược phẩm 2.2.2 Phương pháp trích ly β- glucan trong nấm Linh Chi Hiện nay có hai phương pháp trích ly chính là: Phương pháp trích ly lỏng – lỏng và phương pháp trích ly lỏng – rắn Trích ly rắn - lỏng là quá trình tách một... 3.4.3.b - Trích ly bằng nước và khối lượng mẫu là 10g Mỗi công thức lặp lại 3 lần Dịch trích ly thu được đem lọc, đo OD để xác định glucan và polysaccharide Từ đó sẽ tìm được phương pháp trích ly tối ưu cho hiệu quả cao nhất d Ảnh hưởng của số lần trích ly đến hiệu quả tách β- glucan trong nấm Linh Chi Tiến hành trích ly nhiều lần nhằm mục đích tách triệt để hàm lượng β- glucan có trong nấm Linh Chi,. .. cặn ở dưới Từ 2 thực nghiệm trên chúng tôi lựa chọn phương pháp lọc bằng giấy lọc cho kết quả tốt hơn Song lọc bằng giấy lọc cho hiệu quả lọc rất chậm, mất nhiều thời gian Nếu ứng dụng vào sản xuất thì không cho hiệu suất khả thi được Vì vậy ở quy mô công nghiệp, sẽ sử dụng thiết bị lọc chuyên dụng 3.4.3.2 Phương pháp cô và thu nhận chế phẩm nấm Linh Chi trích ly Dịch trích ly của nấm Linh Chi sau... Lọc dịch bằng vải lọc nhiều lớp - Lọc dịch bằng giấy lọc khổ lớn, kích thước 60 x 60cm Dịch trích ly sau khi được làm sạch, sẽ được đưa vào thiết bị chuyên dụng để đuổi dung môi thu các hợp chất hòa tan 3.4.4 Nghiên cứu tạo sản phẩm trà túi lọc từ chế phẩm nấm Linh Chi 3.4.4.1 Nghiên cứu lựa chọn công thức phối chế tạo sản phẩm trà túi lọc 34 Chúng tôi dự kiến đưa ra một số thành phần sau: - Chế. .. pháp thu nhận chế phẩm β- Glucan nấm Linh Chi trích ly 3.4.3.1 Lọc dịch trích ly Trong quá trình làm các thí nghiệm, chúng tôi sử dụng 2 phương pháp lọc: lọc bằng vải lọc nhiều lớp và lọc bằng giấy lọc Chúng tôi nhận thấy: + Khi dịch được lọc bằng vải lọc nhiều lớp: cho dịch trong, đẹp màu Tuy nhiên, nếu để dịch sau một thời gian sẽ thấy một lớp cặn vẩn đục ở đáy + Khi lọc bằng giấy lọc: cho dịch trong,... trích ly: Theo mục 3.4.3a - Trích ly bằng nước nóng ở nhiệt độ 900C trong 90 phút và khối lượng mẫu là 10g Dịch thu được đem tinh chế làm sạch, đo OD để xác định β- glucan và polysaccharide Từ đó sẽ tìm ra được nhiệt độ tối ưu cho hiệu quả trích ly cao nhất c Ảnh hưởng của thời gian trích ly tới hiệu quả trích ly β- glucan trong nấm Linh Chi Thời gian trích ly có ảnh hưởng mạnh mẽ tới hiệu quả trích. .. môi: Theo mục 3.4.2a - Trích ly bằng nước nóng ở nhiệt độ 900C trong 90 phút và khối lượng mẫu là 10g Mỗi công thức lặp lại 3 lần Dịch trích ly thu được đem lọc, đo OD để xác định β- glucan và polysaccharide Từ đó sẽ tìm được phương pháp trích ly tối ưu cho hiệu quả cao nhất b Ảnh hưởng của nhiệt độ trích ly tới hiệu quả trích ly β- glucan trong nấm Linh Chi Nhiệt độ trích ly là yếu tố quan trọng ... β- Glucan từ nấm linh chi, ứng dụng cho chế biến trà túi lọc ” 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích Nghiên cứu xây dựng quy trình công nghệ trích ly β- Glucan từ nấm Linh Chi ứng dụng cho chế biến. .. sản phẩm trà túi lọc Linh Chi có hàm ẩm đạt 3,5% 4.4.4 Xây dựng quy trình sản xuất trà túi lọc Linh Chi Từ kết đưa được quy trình trích ly β- glucan từ nấm Linh Chi sau: Chế phẩm cao nấm Linh Chi... trích ly β- glucan từ nấm Linh Chi Nguyên liệu Nấm Linh Chi Xử lý Trích ly Lọc Thu dịch Cô Chế phẩm glucan nấm Linh Chi Nguyên liệu phối chế Phối chế Sản 24 phẩm trà túi lọc Bao bì Sơ đồ 3.1 Quy