bài giảng về họ vi khuẩn đường ruột Enterobacteriaceae

I - Khái niệm Là một họ lớn  Gồm nhiều giống trực khuẩn Gram –  Sống trong ống tiêu hoá của người và động vật  Gây bệnh hoặc không và có các đặc tính sau:... + Salmonella không lên m

Lờ i cảm ơn

Xin chân thành cảm ơn PGS.TS Nguyễn Bá Hiên, Trưởng bộ môn Vi sinh vật – Truyền

nhiễm, Khoa Thú y, Đại học Nông nghiệp Hà Nội đã dày công biên soạn bộ bài giảng này!

Họ vi khuẩn đường ruột

(Enterobacteriaceae)

I - Khái niệm

 Là một họ lớn

 Gồm nhiều giống trực khuẩn Gram –

 Sống trong ống tiêu hoá của người và động vật

 Gây bệnh hoặc không và có các đặc tính sau:

 Hiếu khí hoặc hiếu khí tuỳ tiện

 Mọc được trong các môi trường dinh dưỡng

Phân loại VK đường ru t

 Theo cách phân loại của Bergey,

2 Tộc Erwinieae: Có giống Erwinia ký sinh ở thực vật

3 Tộc Serrateae: Có giống Serratia không gây bệnh

4 Tộc proteae: có các giống

+ Proteus+ Monganella + Providencia

5 Tộc salmonellae: có hai giống

+ Salmonella gây bệnh cho người và ĐV.

+ Shigella gây bệnh lỵ trực trùng ở người.

Hiện nay theo GR Carter: A.W Roberts họ vi

khuẩn đườn ruột gồm có 28 giống.

Giống Salmonella

Đại cương :

Salmonella là vi khuẩn đường ruột có những đặc điểm:

 Không lên men đường lactoza, lên men sinh hơi đường glucoza.

 Không sinh indol, H2S dương tính.

 Di động mạnh do có lông ở xung quanh thân.

Giống Salmonella gồm 2247serotyp,chia làm 34 nhóm

Đa số sống hoại sinh trong ống tiêu hoá

Một số sống ngoài tự nhiên

Một số gây bệnh cho người và động vật

Với người :

- Salmonella typhi gây bênh thương hàn

- Sal paratyphi A,B,C gây bệnh phó thương hàn

Với động vật :

- Bệnh phó thương hàn cho lợn :

+ Sal.choleraesuis chủng kunzendorf (cấp tính)+ Sal typhisuis chủng Voldagsen (mạn tính)

- Bệnh sảy thai ở ngựa : Sal abortus equi

- Bệnh sảy thai ở cừu :Sal ovis

- Bệnh thương hàn gà : Sal pullorum gallinarum

Phần lớn các loài Salmonella gây bệnh đều có thể gây ngộ độc thức ăn:

Hình thái Salmonella

- Hình gậy ngắn,hai đầu tròn

- kích thước 0,4-0,6 x 1-3 µm

- Không hình thành nha bào và giáp mô

- Đa số các loài Salmonella đều có khả năng di động mạnh do có lông ở xung quanh thân

(trừ Sal.pullorum gallinarum)

- Bắt màu Gram âm (màu đỏ)

Trực khuẩn Salmonella

Salmonella (KHV điện tử )

 Nuôi cấy

Là vi khuẩn sống hiếu khí,hiếu khí tuỳ tiện,dễ nuôi cấy, pH = 7,6 ; t = 37oC (từ 6 – 420C)

Môi trườn nước thịt:

Cấy vi khuẩn sau vài giờ đã đục,18h đục đều,đáy ống nghiệm có cặn, mặt môi trường có màng

mỏng, có mùi thối

Môi truờn thạch thườn :

Khuẩn lạc dạng S, tròn trong sáng, nhẵn bóng, hơi lồi lên ở giữa

Đường kính khuẩn lạc =1-1,5mm

Khuẩn lạc Salmonella

Môi trường XLD(Trái),Mac Con key(Phải)B illian green(Trên),

mật, đỏ trung tính,lục sáng,natrithiosunphat, lactoza…)

- Môi trường MacConkey :hình thành khuẩn lạc không màu

- Môi trường EMB: Môi trường có màu đỏ hồng.

+ Salmonella không lên men lactoza ,không làm thay đổi pH của

môi trường, khuẩn lạc có màu hồng + E.coli khuẩn lạc có màu đen tím ,có dung quang vàng

- Môi trường Kligler

(Môi trường có màu

đỏ)

- Môi trường

Gasser Agar (Môi

trường màu xanh)

Salmonella và E.coli

Trên môi trường Kl gler

MacConkey agar: E.coli is lactose positive and the colonies turn pink, Salmonella is lactose negative

and the colonies are colourless

Cấu tạo kháng nguyên

 Trong phản ứng huyết thanh chẩn đoán, Salmonella thường

có phản ứng chéo,vì cấu trúc KN phức tạp

Vi khuẩn có 3 loại kháng nguyên: O, H, K.

 Kháng nguyên O :

 Bao gồm 65 yếu tố

 1 Salmonella có thể có một hoặc nhiều trong số các yếu tố đó

 Mỗi yếu tố được kí hiệu bằng chữ số La Mã hay A Rập

 Do có sự khác nhau về cấu trúc KN :O ,Sal được chia làm 34 nhóm: A, B, C, C1,C2, D1,D2 Z, 49 ,50.

 Mỗi nhóm vi khuẩn có KN O cấu tạo bởi một số thành phần nhất định bao gồm :

- Yếu tố đặc hiệu, đặc trưng cho một nhóm,chỉ các loài trong nhóm đó mới có

- Yếu tố không đặc hiệu,có thể chung cho một vài loài

- IV, XII, XXVII  yếu tố IV là đặc hiệu

Kháng nguyên H : Có hai pha

 Pha đặc hiệu gồm 28 loại, kí hiệu bằng chữ la tinh thường : a b,c d…

 Pha 2 không đặc hiệu,gồm 6 loại kí hiệu bằng số thường : 1,2,3,4,5,6.

Kháng nguyên K : Gọi là KN Vi (Virulence) , chỉ có ở Sal.typhi và

Sal paratyphi gây ra hiện tượng ngưng kết chậm.

Có thể biểu thị các loài Salmonella bằng công thức KN

- Sal.typhi A: : I, II, XII, a

- Sal.pullorumgallinarum : I, IX, XII

- Sal cholerae suis : VI, VII, c,1,5.

 Ngoại độc tố :

- Độc tố đường ruột ,

- Siderphores

- Cytotoxin

Khả nă g gây bệnh

 Salmonella gây bệnh đường ruột cho người , gia súc và gia cầm gọi là bệnh thương hàn và phó thương hàn.

 Bình thường có thể thấy trong ruột của động vật khoẻ

 Vi khuẩn chỉ gây bệnh khi sức đề kháng của con vật

Sức đề kháng

 Đề kháng yếu với nhiệt độ, đun sôi chết sau 5’,

nhưng trong nước đá có thể sống 3 tháng

 Trong nước thường tồn tại một tuần

- Sal.cholerae suis chủng Kunzendorp và Sal

typhisuis chủng Vondagsen gây ra

- Vi khuẩn tác động chủ yếu đến bộ máy tiêu hoá gây viêm dạ dày ,ruột ,có mụn loét ở ruột già,lách sưng to và dai

 Đăc tính sinh hoc của vi khuẩn

 Vi khuẩn phân lập ở lợn con lần đầu vào năm 1885 (Salmon và Smith ).

 Đặc tính nuôi cấy:

- Trên thạch thường

 Sau cấy 24h, rồi mang ra để ở 25-30 độ C, 1-2 ngày , sẽ thấy khuẩn lạc hình thành một bờ chất dính lầy nhầy xung quanh , thỉnh thoảng xuất hiện khuẩn lạc dạng R

- Chuyển hoá đường:

 Lên men sinh hơi Glucose,Galactose, Levulo,manit, mantoza

 Không lên men đường Lactose

 Indol, VP, MR (-)

 H2S +.

 KN: VI VII : c-1 ,5.

 Khả năng gâ bệnh:

 Trong tự nhiên :

 Vi khuẩn theo thức ăn nước uống vào đường tiêu hoá

 Binh thường chúng sống trong đó mà không gây bệnh.,chỉ xâm nhập vào máu và phủ tạng để gây bệnh khi sức đề kháng của con vật sút kém.

 Bệnh thường ở lợn con từ 2-4 tháng tuổi, ở thể cấp tính con vật sốt, ỉa chảy phân vàng, mùi tanh thối dính vào kheo ,đuôi.

 Bệnh tích :

- Xác gầy,mõm , đỉnh tai xuất huyết  tím xanh

- Lách sưng to và dai như cao su

- Gan tụ máu hoại tử

- Niêm mạc dạ dày ruột viêm đỏ,tụ máu và có các nốt loét lan tràn

ở ruột già.

Lợn lớn,thường mắc ở thể mạn tính.

 Trong phòng thí nghiệm gây bệnh cho chuột bạch và thỏ.

BỆNH PHÓ THƯƠNG HÀN LỢN

* Dùng chuột nhắt sơ sinh thử độc tố đườ g ruột chịu nhiệt (st) của salmonella

- Bên trái: dương tính, sưng tấy ở ruột

- Bên phải: đối chứng, ruột bình thườ g

BỆNH PHÓ THƯƠNG HÀN LỢN

Lợn mắc bệnh còi cọc, chậm lớn, gầy mòn đi ỉa chả liên miên

Tụ máu tai và mõm

Tím ở đỉnh tai và mõm

Tím tai, mõm và chân

BỆNH PHÓ THƯƠNG HÀN LỢN

Phân tiêu chảy có màu vàng ở lợn bị bệnh

Loét ở ruột già (PTH )

Chẩn đoán phó thương hàn lợn

Chẩn đoán :

- Bệnh phẩm là máu, phủ tạng, tuỷ xương hoặc phân

- Cấy vào Muller Koffman chuyển SS, chọn khuẩn lạc màu trắng cấy sang thạch máu, giữ giống và làm các bước xét nghiệm tiếp: + Làm tiêu bản  kiểm tra hình thái trên KHV

+ Nuôi cấy vi khuẩn trên môi trường thích hợp

Phòng và trị bệnh phó thương hàn lợn

 Phòng bằng vệ sinh :

 Nuôi dưỡng tốt ,định kỳ vệ sinh, tiêu độc khu vực

chuồng nuôi và xung quanh

 Khi dịch xaỷ ra phải cách ly con ốm để điều trị ,con bị nặng nên giết huỷ.

 Không bán chạy lợn ốm,mổ thịt lợn bừa bãi.

 Xử lý xác chết ,chất bài xuất,phân rác độn chuồng lợn ốm.

 Chuồng lợn ốm phải được tiêu độc kĩ.

 Lợn nái mắc bệnh,khi phát hiện không điều trị mà giết

mổ để tránh lây lan.

Phòng bệnh bằng vac xin :

+ Vacxin vô hoạt có formol và keo phèn:

- Liều 1ml/con, tiêm dưới da

- Sau 2- 3 tuần tiêm nhắc lại, liều 2ml/conMiễn dịch 6 tháng

+ Vacxin nhược độc đông khô :

Pha vacxin với nước sinh lý sao cho một liều tiêm là 1ml/con, tiêm dưới da

Tiêm cho lợn con 20 ngày tuổi

Chỉ điều trị khi cần thiết vì lợn thường còi cọc sau khi khỏi bệnh.

Trực khuẩn thương hàn gà Sal.pullorum gallinarum

 Khái niệm về bệnh (Typhus avium)

 Là một bệnh truyền nhiễm của gà

 Gây ra bởi trực khuẩn Sal.pullorum gallinarum

 Thường gây bệnh cấp tính ở gà con(bệnh Bạch lỵ) và mạn tính ở gà lớn.

 Đặc điểm chủ yếu của bệnh : gây viêm, hoại tử niêm mạc đường tiêu hoá và các cơ quan phủ tạng.

 Bệnh có khắp nơi và gây thiệt hại cho nghề chăn nuôi gia cầm.

- Thạch máu : phát triển tốt ,không dung huyết.

- Nước thịt : gây đục nhẹ,có cặn trắng ở đáy.

+ Sinh hoá:

Các phản ứng: MR, VP, Indol

-H2S +.

+ Cấu trúc kháng nguyên :

nhóm D : I, IX, XII (XII1, XII2, XII3)

 Sức đề kháng:

- VK sống lâu trong phân gà (3 tháng)

- Trong đất và nền chuồng ẩm, tồn tại 2 năm

- VK đề kháng kém với nhiệt độ: Đun sôi vi khuẩn chết/ sau 1 phút

- Chất sát trùng diệt vi khuẩn nhanh chóng: formon 1%/sau 5 phút, thuốc tím/ sau 20 phút

 Khả năng gây bệnh:

 Trong tự nhiên :

Gà và gà tây là vật chủ quan trọng,gà mẫn cảm hơn gà tây.

Ngoài ra,vịt, chim cút , chim sẻ,gà lôi…cũng mắc bệnh.

Vi khuẩn truyền từ gà mẹ nhiễm khuẩn sang con qua trứng:

- Gà mẹ bị bệnh tỷ lệ đẻ giảm

- Trứng có phôi khi ấp tỷ lệ chết phôi cao

- Phôi có thể chết ngạt hoặc Gà con nở ra bị mắc bệnh: gà đi tả phân trắng ,nhão cuối cùng bại huyết mà chết,tỷ lệ chết có thể tới 90%.

Bệnh thương hàn ở gà con:

bụng to, hậu môn dính bết phân màu trắng

Triệu chứng, bệnh tích gà bị Salmonellosis

Trứng méo mó, dị hình, không có vỏ vôi

Bệnh tích gà bị thương hàn

-Gan sưng có những điểm hoại tử nổi trên bề mặt

- Lách sưng có những đám những hoại tử

- Phổi có những đám hoại tử to nhỏ không đều

Bệnh tích gà bị thương hàn

Ruột già có nhiều đám hoại tử màu trắng xám

Buồng trứng bị thoái hoá, trứng non không phát triển, có quả chuyển sang màu nâu sẫm

Viêm buồng trứng, một số quả bị thoái hoá, bên

trong chứa chất không màu, đặc

Chẩn đoán thương hàn gà

 Chẩn đoán VK học.( giống chẩn đoán chung )

 Chẩn đoán huyết thanh học:

 Dùng phản ứng ngưng kết để phát hiện gà mắc bệnh hoặc mang

trùng để loại thải.

 ở các đàn gà giống nên tiến hành kiểm tra khi gà được 5-6 tháng tuổi.

 Có thể dùng 4 phản ứng:

+ Ngưng kết trong ống nghiệm TA(Tubo Agglutination test ).

+Ngưng kết toàn huyết WB (whole blood test).

+Ngưng kết huyết thanh nhanhRS (Rapid serum test ).

+Vi ngưng kết (MA :Micro Agglutination Test) Trong đó,RS hay được ứng dụng :

Tiến hành :

- Dùng KN chuẩn: là các chủng Sal.pullorum

- KT nghi : huyết thanh của gà nghi bệnh.

Cũng có thể dùng phản ứng ELISA.

Phòng bệnh thương hàn gà

 Thường xuyên vệ sinh chuồng trại, dụng cụ, máy âp nở.

 Trứng giống phải nhập từ những đàn sạch bệnh

 Định kỳ kiểm tra bằng phản ứng huyết thanh phát hiện

và loại thải gà có phản ứng dương tính.

 Dùng kháng sinh định kỳ để phòng

 Khi bệnh xảy ra, nên loại bỏ hoặc tiêu diệt gà bệnh

 Kháng sinh thường dùng là: Neomycin, Amoxycilin,

Enrofloxacin, Norfloxacin…

Giống Escherichia Trực khuẩn ruột già (E coli)

 Từ ruột E.coli theo phân ra đất ,nước

 Tim chỉ số E.coli trong nước cho phép ta kết luận nước đó có

bị nhiễm phân hay không, là cơ sở để nói rằng nước đó tốt

hay xấu (nước tốt có Coli index = 3 VK/100 ml)

 E coli là loài VK sống cộng sinh ở đường tiêu hoá , nhưng có thể là VK gây ra nhiều bệnh ở đường ruột và các cơ quan khác Vi khuẩn có 3 loại KN : O , H, K

 Hiện nay người ta đã xác định E.coli có khoảng:

- 170 serotyp KN: O.

- 89 serotyp KN: K

- 56 serotyp KN: H

 E coli có loại gây bệnh, có loại không gây bệnh

 Tất cả các dạng được gọi là coliform

 Loại E coli gây bệnh phải có các yếu tố gây bệnh :

- Độc tố

- Yếu tố bám dính

- Yếu tố gây dung huyết …

Đại cương

 Người ta gọi Colibacillosis là bệnh đường ruột của động vật non do E.coli gây ra.

 Nếu phân loại E.coli theo cơ chế gây bệnh,chúng gồm:

 ETEC( Entero toxigenic E.coli)gây tiêu chảy ở bò ,lợn

 EIEC (Entero invasive E.coli) gây tiêu chảy ở người.

 EA EC ( Entero aggregative E.coli )gây bệnh ở người.

- Phần lớn di động do có lông ở xung quanh thân

- VK không có nha bào,có thể hình thành giáp mô

- Bắt màu gram âm

E coli

Khuẩn lạc và vi khuẩn E coli

E Coli dưới KHV điện tử

 Môi trường nước thịt:

Vi khuẩn phát triển tốt , môi trường rất đục, có cặn lắng ở đáy ống,

có mùi thối của phân.

 Thạch thườn :

Sau cấy 24h,K L dạng S, tròn ướt không trong suốt, màu tro trắng, hơi lồi, r = 2- 3mm.

Không mọc trên môi trường Muller Koffman, lục malasit.

Môi trường Endo, Macconkey và SS: khuẩn lạc có màu đỏ.

Môi trường EMB : khuẩn lạc màu tím đen, có dung quang vàng Môi trường Kligler: Khuẩn lạc có màu vàng.

 Môi trường thạch máu :

Vi khuẩn phát triển tốt ,một số chủng gây bệnh gây dung huyết.

 nc

Nuôi cấy

Đặc tính sinh hoá

 Phản ứng lên men đườn :

 VK lên men sinh hơi đường Fructoza,Glucoza, Levuloza, Galactoza, manit, lactoza

 Tất cả các chủng E.coli đều lên men, sinh hơi Lactoza, đây là đặc điểm quan trọng phân biệt E.coli với Sal

Bao gồm 3 loại L,A, B

Dựa vào KN : O E.coli được chia làm nhiều nhóm

Căn cứ vào KN O, K, H, E.coli lại chia làm nhiều typ, mỗi typ đều được ghi thứ tự các yếu tố KN O, K , H

Ví dụ: O111: K4: H2 ; O139: K85 …

kn

Khả nă g gây bệnh

 E.coli có thể từ bên ngoài theo thức ăn nước uống vào cơ thể

 Và E.coli có sẵn trong đường ruột của động vật

 Chỉ gây bệnh khi sức đề kháng của con vật giảm sút

 Mỗi loài động vật thường có một số typ E.coli gây bệnh

 Các typ này duy trì một thời gian trong một cơ

sở chăn nuôi sẽ được thay thế bằng một typ khác.

Bệnh ở bê:

- Colibacillosis của bê mới đẻ từ 2-12 ngày thường do các typ

E coli sau:

O78B O35B5 O86B7 O9A O26B6 O35B4 O137 Bệnh thể hiện :

- Sốt cao

- Đi tháo dạ phân vàng đặc sệt,chua sau chuyển sang trắng xám hôi thối,dính máu.

- O8, O136, O14, O149, O157 gây tiêu chảy ở lợn con

từ 4 tuần tuổi đến sau cai sữa.

- O138, O139K82 , O141, O85 và một vài serotyp

khác gây ra bệnh phù thũng ở lợn, các chủng này thường có độc tố ruột , khả năng gây dung huyết và

có chất gây phù (Edema disease principle).

Lợn con bị bệnh ỉa phân trắng

Bệnh ở gia cầm:

 Thường do các Týp: O1, O2, O78…

 Gia cầm chết đột ngột, gầy yếu, ỉa chảy, phân xanh lá cây rất hôi thối,viêm kết mạc mắt,viêm mũi và khí quản, viêm khớp

 Bệnh tích: Viêm ngoại tâm mạc, viêm gan, ruột, viêm bao dịch hoàn, túi khí…

 Bệnh ở người:

 Đặc biệt là trẻ em (dưới 1 tuổi, còn đang bú ):

 Thường do các týp: O111 B4, O55 B5, O128 b12…

 Vi khuẩn gây viêm dạ dày ,túi mật , bàng quang, não và sinh dục, đôi khi nhiẽm khuẩn huyết trầm trọng

 Trong phòng thí nghiệm

Có thể gây bệnh cho thỏ và chuột bạch

BỆNH DO VI KHUẨN E COLI

Lợn sơ sinh bị chết do ỉa chảy, xác chết gầy, còi cọc

SỮA KHÔNG TIÊU TRONG DẠ DÀY LỢN BỊ NHIỄM E.COLI GÂY ỈA CHẢY

LỢN BỆNH PHÙ ĐẦU

BỊ PHÙ QUANH HỐC MẮT, MẮT SƯNG CÓ MÀU ĐỎ THẪM

LỢN BỊ BỆNH PHÙ ĐẦU DO E.COLI

ĐẦU SƯNG PHÙ THŨNG, MẮT HÍP, MÁ PHỊ

LỢN BỊ BỆNH PHÙ ĐẦU DO E COLI

( Ở LỢN SAU CAI SỮA – DẠ DẦY PHỒNG TO CHỨA THỨC ĂN KHÔNG TIÊU,XUNG HUYẾT,

RUỘT NON SINH HƠI, XUẤT HUYẾT CÓ THỂ NHÌN THẤY TỪ BÊN NGOÀI )

PHỦ TẠNG CỦA LỢN SAU CAI SỮA BỊ CHẾT DO NHIỄM E.COLI

DẠ DẦY PHỒNG TO CHỨA THỨC ĂN KHÔNG TIÊU, XUNG HUYẾT, RUỘT NON SINH HƠI,

XUẤT HUYẾT CÓ THỂ NHIN THẤY TỪ BÊN NGOÀI

DẠ DÀY LỢN BỊ CHẾT DO NHIỄM E.COLI GÂY PHÙ ĐẦU

THÀNH DẠ DẦY PHÙ THŨNG, KHI CẮT THẤY DỊCH NHẦY CHẨY RA

DẠ DÀY LỢN BỊ CHẾT DO NHIỄM E.COLI GÂY PHÙ ĐẦU

DẠ DẦY PHÙ THŨNG, KHI CẮT THẤY DỊCH NHẦY CHẨY RA

LỢN BỊ E.COLI PHÙ ĐẦU

MÀNG TREO RUỘT Ở KẾT TRÀNG BỊ PHÙ THŨNG

BỆNH VIÊM VÚ DO E.COLI

LỢN BỊ NHIỄM E.COLI DẪN ĐẾN VIÊM VÚ THỂ CẤP TÍNH,

CÓ THỂ BỊ HOẠI THƯ

BẦU VÚ CỦA LỢN MẸ BỊ VIÊM DO NHIỄM E.COLI

MẶT CẮT BẦU VÚ BỊ VIÊM CỦA LỢN MẸ

DO NHIỄM E.COLI