BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI
BÁO CÁO NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO VI NHÂN GIỐNG CHUỐI Giảng viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: TS NGUYỄN THỊ PHA Lý Quốc Diễn B1303646 Trần Phát Đạt B1303653 Hồ Nhã Tuấn B1303750 Trương Ngọc Vinh B1303757 Nguyễn Minh Nghĩa B1303687 IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN V KẾT LUẬN NỘI DUNG I SƠ LƯỢC Vài nét chuối: - Về mặt dinh dưỡng: chuối có giá trị cao, coi loại thực phẩm lý tưởng cho lứa tuổi So với loại trồng khác, toàn sản phẩm chuối tận dụng làm lương thực, thực phẩm cho chăn nuôi gia súc, gia cầm thức ăn cho cá… - Thị trường tiêu thụ sản phẩm chuối tươi chế biến ngày mở rộng Vì vậy, trồng chuối đem lại hiệu kinh tế cao cho người nông dân I SƠ LƯỢC Hình Chuối La Ba II ĐẶT VẤN ĐỀ Chi phí cho trình vi nhân giống chuối trình vận chuyển cao Làm giá thành giống mức cao, hạn chế phát triển nghề trồng chuối Việt Nam Làm để giải vấn đề trên? III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP - Thí nghiệm tiến hành giống chuối tiêu (Cavendish sp.), giống La Ba - Môi trường nuôi cấy gồm có: + Khoáng đa lượng MS Như sau (mg/l): KNO 1900, NH4NO3 1650, KH2PO4 170, CaCl2.2H2O 440, MgSO4.7H2O 370 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP + Chất điều hòa sinh trưởng sử dụng BA 5mg/l, L-tyrosine 100mg/l, IAA 0.5mg/l Adenine sulfate 100mg/l Vi lượng Fe-EDTA theo môi trường MS Thyamine HCl 100mg/l, m-inositol 100mg/l Nước dừa 20% pH 5.8 Đường 30gr/l Agar 8gr/l - Giai đoạn nuôi phòng chiếu sáng 2000 lux đèn huỳnh quang Thời gian chiếu sáng ngày Nhiệt độ 28 C III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Quy trình : Thí nghiệm 1: - Bước 1: Chọn lọc mẹ giám định bệnh + Chọn lọc mẹ khỏe mạnh, suất cao, chất lượng tốt, giống + Cây mẹ sau kiểm định bệnh virus kĩ thuật PCR ELISA + Các bệnh sau trồng nhà lưới để thu hồi nhân giống III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP - Bước 2: Tạo chồi ban đầu + Tách mẫu: chuối có chiều cao 0.5-1m lấy từ mẹ đầu dòng, tách lấy đỉnh sinh trưởng nằm củ + Khử trùng cồn 70% H2O2 30% + Kích thước mẫu khoảng 1.5x1.5x1.0cm, đưa vào môi trường tái sinh chồi III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP - Bước 3: Nhân chồi in vitro Khoảng 4-5 tuần sau đưa vào môi trường tái sinh, khoảng 10-12 chồi/mẫu cấy tái sinh + Tách mẫu cấy tái sinh cụm nhỏ mang 2-3 chồi, cấy sang môi trường nhân nhanh cụm chồi + Cấy chuyển sau 4-5 tuần lần Số lần cấy chuyển không lần 10 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP - Bước 5: Thí nghiệm thực cho giai đoạn cấy lớn, cấy lần cuối chuẩn bị đưa vườn ươm Cây giống có kích thước trung bình 6cm, đo lá, cấy 15 cây/bình Mỗi bình cấy mô chứa 65ml môi trường Riêng bước thực nghiệm thức Mỗi nghiệm thức gồm 30 bình 14 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP + NT1: Nhân điều kiện nhiệt độ ánh sáng tự nhiên Bình cấy để hành lang nhà plastic sử dụng ánh sáng tự nhiên (thay đổi liên tục từ 500-7000 lux), nhiệt độ dao động nhiều (29 C 8) Cây trồng điều kiện tự nhiên 20 ngày trước đưa vườn ươm + NT2: Nhân điều kiện ánh sáng đèn & nhiệt độ máy lạnh 15 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP - Bước 6: Ươm bột dừa + Số lượng: 150 cây/nghiệm thức x lần lặp lại + Sau lấy khỏi bình, rửa ngâm 10 phút dd Dithane M455gr/l Giai đoạn kéo dài khoảng tháng 16 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Hình Cây chuối lúc lấy khỏi bình cấy mô 17 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Hình Cây chuối cấy mô ươm bột dừa 18 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Thí nghiệm 2: Sử dụng tiếp tục có nguồn gốc nuôi điều kiện ánh sáng nhiệt độ tự nhiên, chia làm nghiệm thức 19 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP - NT1: + Sau tháng, nhổ lên trồng vào bầu tháng + Bầu trồng gồm bột dừa, tro trấu, phân bò đất tỉ lệ nhau.Cường độ chiếu sáng từ 25% lúc giai đoạn vườn ươm tăng dần lên 100% giai đoạn vào bầu 20 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP - NT2: Tương tự NT1 nhổ khỏi bột dừa trữ thùng xốp kín ngày trồng 21 IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Hình A, B nuôi ánh sáng đèn C, D nuôi ánh sáng tự nhiên 22 IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Kết thu từ thí nghiệm 23 IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Kết thu từ thí nghiệm 24 V KẾT LUẬN Quy trình báo cáo bước cải tiến quan trọng cho phép nhân giống quy mô công nghiệp - Cây chuối nhân giống cấy mô nuôi giai đoạn cuối điều kiện ánh sáng nhiệt độ tự nhiên trồng mau thích nghi với điều kiện vườn ươm đối chứng (cây chuối nuôi hoàn toàn phòng máy lạnh ánh sáng đèn) 25 V KẾT LUẬN - Kết cho thấy việc vận chuyển giống tháng tuổi trọng lượng tươi 2,6gr xa khả thi, cho phép chuyển giao công nghệ vườn ươm tới hộ gia đình nông dân chuyên giống, phát triển chuối cấy mô nước với chi phí thấp - cách hợp lý - Tuy nhiên, vấn đề tồn động dễ bị nhiễm nuôi cấy theo phương pháp Hạn chế nghiên cứu tiết kiệm chi phí 20 ngày cuối trình cấy mô 26 TÀI LIỆU THAM KHẢO http://doc.edu.vn/tai-lieu/de-tai-ky-thuat-nuoi-cay-in-vitro-cay-chuoi-tieu-gion g-la-ba-1988 / http://www.nongsinh.com/NHAN_GIONGi_in_Vitro_CAY_CHUOI_Cavendish.pdf 27 CẢM ƠN CÔ VÀ CÁC BẠN ĐÃ LẮNG NGHE 28 [...]... QUẢ VÀ THẢO LUẬN Hình 4 A, B cây nuôi trong ánh sáng đèn C, D cây nuôi trong ánh sáng tự nhiên 22 IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Kết quả thu được từ thí nghiệm 1 23 IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Kết quả thu được từ thí nghiệm 2 24 V KẾT LUẬN Quy trình trong bài báo cáo này là một bước cải tiến quan trọng cho phép nhân giống ở quy mô công nghiệp - Cây chuối nhân giống bằng cấy mô được nuôi giai đoạn cuối trong điều... (cây chuối nuôi hoàn toàn chỉ trong phòng máy lạnh ánh sáng đèn) 25 V KẾT LUẬN - Kết quả cho thấy vi c vận chuyển cây giống 1 tháng tuổi trọng lượng tươi 2,6gr đi xa là khả thi, cho phép chuyển giao công nghệ vườn ươm tới các hộ gia đình nông dân chuyên về giống, phát triển chuối cấy mô trên cả nước với chi phí thấp - một cách hợp lý - Tuy nhiên, vấn đề còn tồn động là cây rất dễ bị nhiễm khi nuôi cấy. .. nghiệm thực hiện cho giai đoạn cấy cây lớn, cấy lần cuối cùng chuẩn bị đưa ra vườn ươm Cây giống có kích thước trung bình 6cm, đo cả lá, cấy 15 cây/bình Mỗi bình cấy mô chứa 65ml môi trường Riêng bước này được thực hiện trên 2 nghiệm thức Mỗi nghiệm thức gồm 30 bình 14 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP + NT1: Nhân cây trong điều kiện nhiệt độ và ánh sáng tự nhiên Bình cấy để ngoài hành lang hoặc nhà... PHÁP Hình 2 Tạo protocorm cây chuối 11 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Hình 3 Nhân chồi trong phòng sáng dưới ánh sáng đèn 12 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP - Bước 4: Tái sinh cây hoàn chỉnh + Sau khi nhân đủ số lượng theo mục đích sử dụng thì tiến hành chọn các chồi có chiều cao khoảng 2-3cm, có đỉnh sinh trưởng đầy đủ đưa vào môi trường tạo rễ để tạo cây hoàn chỉnh in vitro + Môi trường tạo rễ: MS, 30g/l... ra vườn ươm + NT2: Nhân cây trong điều kiện ánh sáng đèn & nhiệt độ máy lạnh 15 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP - Bước 6: Ươm trên bột dừa + Số lượng: 150 cây/nghiệm thức x 3 lần lặp lại + Sau khi lấy cây khỏi bình, cây được rửa sạch và ngâm 10 phút trong dd Dithane M455gr/l Giai đoạn này kéo dài khoảng 1 tháng 16 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Hình 4 Cây chuối lúc lấy ra khỏi bình cấy mô 17 III NGUYÊN... kéo dài khoảng 1 tháng 16 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Hình 4 Cây chuối lúc lấy ra khỏi bình cấy mô 17 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Hình 5 Cây chuối cấy mô ươm trên bột dừa 18 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Thí nghiệm 2: Sử dụng tiếp tục cây có nguồn gốc được nuôi trong điều kiện ánh sáng và nhiệt độ tự nhiên, chia đều làm 2 nghiệm thức 19 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP - NT1: + Sau 1 tháng, nhổ cây lên... nhiễm khi nuôi cấy theo phương pháp này Hạn chế của nghiên cứu này là chỉ tiết kiệm chi phí 20 ngày cuối của quá trình cấy mô 26 TÀI LIỆU THAM KHẢO http://doc.edu.vn/tai-lieu/de-tai-ky-thuat-nuoi-cay-in-vitro-cay-chuoi-tieu-gion g-la-ba-1988 / http://www.nongsinh.com/NHAN_GIONGi_in_Vitro_CAY_CHUOI_Cavendish.pdf 27 CẢM ƠN CÔ VÀ CÁC BẠN ĐÃ LẮNG NGHE 28 ... phép nhân giống quy mô công nghiệp - Cây chuối nhân giống cấy mô nuôi giai đoạn cuối điều kiện ánh sáng nhiệt độ tự nhiên trồng mau thích nghi với điều kiện vườn ươm đối chứng (cây chuối nuôi. .. thụ sản phẩm chuối tươi chế biến ngày mở rộng Vì vậy, trồng chuối đem lại hiệu kinh tế cao cho người nông dân I SƠ LƯỢC Hình Chuối La Ba II ĐẶT VẤN ĐỀ Chi phí cho trình vi nhân giống chuối trình... Hình Cây chuối lúc lấy khỏi bình cấy mô 17 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Hình Cây chuối cấy mô ươm bột dừa 18 III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP Thí nghiệm 2: Sử dụng tiếp tục có nguồn gốc nuôi điều