BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI

BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI BÁO cáo NUÔI cấy mô tế bào VI NHÂN GIỐNG CHUỐI

BÁO CÁO NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO

VI NHÂN GIỐNG CHUỐI

Giảng viên hướng dẫn:

NỘI DUNG

I SƠ LƯỢC

II ĐẶT VẤN ĐỀ

III VẬT LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

V KẾT LUẬN

I SƠ LƯỢC

Vài nét về cây chuối:

- Về mặt dinh dưỡng: quả chuối có giá trị rất cao, được coi là loại thực phẩm lý tưởng cho mọi lứa tuổi So với các loại cây trồng khác, toàn bộ sản phẩm của cây chuối đều có thể tận dụng làm lương thực, thực phẩm cho chăn nuôi gia súc, gia cầm và thức ăn cho cá…

- Thị trường tiêu thụ sản phẩm chuối tươi và chế biến đang ngày càng được mở rộng Vì vậy, trồng chuối sẽ đem lại hiệu quả kinh tế khá cao cho

I SƠ LƯỢC

II ĐẶT VẤN ĐỀ

Chi phí cho quá trình vi nhân giống chuối cũng như quá trình vận chuyển cây con còn khá cao Làm giá thành cây giống ở mức cao, hạn chế sự phát triển của nghề trồng chuối ở Việt Nam

Làm thế nào để giải

quyết vấn đề trên?

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

- Thí nghiệm được tiến hành trên giống chuối tiêu

(Cavendish sp.), giống La Ba.

- Môi trường nuôi cấy gồm có:

+ Khoáng đa lượng MS Như sau (mg/l): KNO3

1900, NH4NO3 1650, KH2PO4 170, CaCl2.2H2O

440, MgSO4.7H2O 370

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

+ Chất điều hòa sinh trưởng được sử dụng là BA

5mg/l, L-tyrosine 100mg/l, IAA 0.5mg/l và

Adenine sulfate 100mg/l Vi lượng và Fe-EDTA

theo môi trường MS Thyamine HCl 100mg/l,

m-inositol 100mg/l Nước dừa 20% pH 5.8

Đường 30gr/l Agar 8gr/l

- Giai đoạn nuôi trong phòng được chiếu sáng

2000 lux bằng đèn huỳnh quang Thời gian chiếu

sáng 8 giờ mỗi ngày Nhiệt độ 280C 3

 

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

Quy trình :

Thí nghiệm 1:

- Bước 1: Chọn lọc cây mẹ và giám định bệnh

+ Chọn lọc cây mẹ khỏe mạnh, năng suất cao, chất

lượng quả tốt, đúng giống

+ Cây mẹ sau đó được kiểm định các bệnh do

virus bằng các kĩ thuật PCR và ELISA

+ Các cây sạch bệnh sau đó được trồng trong nhà

lưới để thu hồi nhân giống

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

- Bước 2: Tạo chồi ban đầu

+ Tách mẫu: cây chuối con có chiều cao 0.5-1m

lấy từ cây mẹ đầu dòng, tách lấy đỉnh sinh trưởng

nằm giữa củ

+ Khử trùng bằng cồn 70% hoặc H2O2 30%

+ Kích thước mẫu khoảng 1.5x1.5x1.0cm, được

đưa vào môi trường tái sinh chồi

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

- Bước 3: Nhân chồi in vitro

Khoảng 4-5 tuần sau khi được đưa vào môi

trường tái sinh, khoảng 10-12 chồi/mẫu cấy sẽ

được tái sinh

+ Tách mẫu cấy đã được tái sinh ra từng cụm nhỏ

mang 2-3 chồi, cấy sang môi trường nhân nhanh

cụm chồi

+ Cấy chuyển sau 4-5 tuần 1 lần Số lần cấy

chuyển không quá 6 lần

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

Hình 2 Tạo protocorm cây chuối

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

Hình 3 Nhân chồi trong phòng sáng dưới ánh

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

- Bước 4: Tái sinh cây hoàn chỉnh

+ Sau khi nhân đủ số lượng theo mục đích sử

dụng thì tiến hành chọn các chồi có chiều cao

khoảng 2-3cm, có đỉnh sinh trưởng đầy đủ đưa

vào môi trường tạo rễ để tạo cây hoàn chỉnh in

vitro

+ Môi trường tạo rễ: MS, 30g/l sucrose, than hoạt

tính, 10-15% nước dừa

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

- Bước 5: Thí nghiệm thực hiện cho giai đoạn cấy

cây lớn, cấy lần cuối cùng chuẩn bị đưa ra vườn

ươm Cây giống có kích thước trung bình 6cm, đo

cả lá, cấy 15 cây/bình Mỗi bình cấy mô chứa

65ml môi trường Riêng bước này được thực hiện

trên 2 nghiệm thức Mỗi nghiệm thức gồm 30

bình

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

+ NT1: Nhân cây trong điều kiện nhiệt độ và ánh

sáng tự nhiên

Bình cấy để ngoài hành lang hoặc nhà plastic sử

dụng ánh sáng tự nhiên (thay đổi liên tục từ

500-7000 lux), nhiệt độ dao động nhiều (290C 8) Cây

được trồng trong điều kiện tự nhiên ít nhất 20

ngày trước khi đưa ra vườn ươm

+ NT2: Nhân cây trong điều kiện ánh sáng đèn &

nhiệt độ máy lạnh

 

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

- Bước 6: Ươm trên bột dừa

+ Số lượng: 150 cây/nghiệm thức x 3 lần lặp lại

+ Sau khi lấy cây khỏi bình, cây được rửa sạch và

ngâm 10 phút trong dd Dithane M-455gr/l Giai

đoạn này kéo dài khoảng 1 tháng

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

Hình 4 Cây chuối lúc lấy ra khỏi bình cấy mô

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

Hình 5 Cây chuối cấy mô ươm trên bột dừa

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

Thí nghiệm 2:

Sử dụng tiếp tục cây có nguồn gốc được nuôi

trong điều kiện ánh sáng và nhiệt độ tự nhiên, chia

đều làm 2 nghiệm thức

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

III NGUYÊN LIỆU & PHƯƠNG PHÁP

- NT2:

Tương tự NT1 nhưng khi cây được nhổ khỏi bột

dừa thì chúng ta trữ cây trong thùng xốp kín 2

ngày rồi mới trồng

IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

Hình 4 A, B cây nuôi trong ánh sáng đèn

IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

Kết quả thu được từ thí nghiệm 1

IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

Kết quả thu được từ thí nghiệm 2

V KẾT LUẬN

Quy trình trong bài báo cáo này là một bước cải

tiến quan trọng cho phép nhân giống ở quy mô

công nghiệp

- Cây chuối nhân giống bằng cấy mô được nuôi

giai đoạn cuối trong điều kiện ánh sáng và nhiệt

độ tự nhiên khi trồng ra mau thích nghi với điều

kiện vườn ươm hơn là cây đối chứng (cây chuối

nuôi hoàn toàn chỉ trong phòng máy lạnh ánh sáng

đèn)

V KẾT LUẬN

- Kết quả cho thấy việc vận chuyển cây giống 1

tháng tuổi trọng lượng tươi 2,6gr đi xa là khả thi,

cho phép chuyển giao công nghệ vườn ươm tới

các hộ gia đình nông dân chuyên về giống, phát

triển chuối cấy mô trên cả nước với chi phí thấp -

một cách hợp lý

- Tuy nhiên, vấn đề còn tồn động là cây rất dễ bị

nhiễm khi nuôi cấy theo phương pháp này Hạn

TÀI LIỆU THAM KHẢO

CẢM ƠN CÔ VÀ CÁC BẠN

ĐÃ LẮNG NGHE