PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH VI SINH

PHÊ DUYệT PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH VI SINH TS.. Nguyễn Tiến Dũng... 3M Tecra Elisa 3M MDS DNA detection... ĐỘ CHÍNH XÁC TƯƠNG ĐỐI RELATIVE ACCURACY... ĐỘ NHẠY TƯƠNG ĐỐI RELATIVE SENTIVITY t

PHÊ DUYệT PHƯƠNG PHÁP

PHÂN TÍCH VI SINH

TS Nguyễn Tiến Dũng

KHÁI NI M V  PH ệ ề ƯƠN G PHÁP

 Phương pháp tiêu chu n ẩ :

Ph ng pháp do các t  ch c qu c t , hi p  ươ ổ ứ ố ế ệ

h i, các t  ch c có uy tín (AOAC. ISO,  ộ ổ ứ

NMKL, ) công b  và đã đ c phê duy t,  ố ượ ệ

(đ c hi u là các ph ng pháp c a m t t   ượ ể ươ ủ ộ ổ

ch c t  2 qu c gia tr  lên) ứ ừ ố ở

Các tiêu chu n, quy chu n qu c gia do các  ẩ ẩ ố

B , Ngành công b , bao g m c  n c nh p  ộ ố ồ ả ướ ậ

kh u (TCVN, FDA…) ẩ

Ph ng pháp tiêu chu n n i b  đ c phê  ươ ẩ ộ ộ ượ duy t trong h  th ng C c QLCL NLS&TS ệ ệ ố ụ

Phương pháp không tiêu chuẩn

 Ph ng pháp m i do phòng ki m nghi m t   ươ ớ ể ệ ự nghiên c u xây d ng và đ a vào áp d ng ứ ự ư ụ

 Ph ng pháp đ c công b  trên các t p chí,  ươ ượ ố ạ tài li u khoa h c, ho c nhà s n xu t ch a  ệ ọ ặ ả ấ ư

đ ượ c chu n hoá b i t  ch c nào ẩ ở ổ ứ

 Ph ng pháp có s a đ i t  ph ng pháp tiêu  ươ ử ổ ừ ươ chu n mà ph n s a đ i có th   nh h ng  ẩ ầ ử ổ ể ả ưở

tr c ti p đ n k t qu  ki m nghi m ho c làm  ự ế ế ế ả ể ệ ặ thay đổi b n ch t ph ả ấ ươn g pháp g c ố

PHạM VI ĐÁNH GIÁ PHƯƠNG PHÁP TIÊU CHUẩN

Phương pháp định lượng:

 Độ  l p l i (Repeatability): S ặ ạ r

 Được  th c hi n trên cùng m u, l p l i n l n b i m t  ự ệ ẫ ặ ạ ầ ở ộ KNV và cùng m t  ộ đ i u ki n: môi tr ề ệ ườn g, nhi t  ệ độ , th i  ờ gian nuôi c y … ấ

 Đ   tái l p (Reproducibility): S ộ ậ R

 Được  th c hi n n m u, m i m u  ự ệ ẫ ỗ ẫ được  th c hi n phân  ự ệ tích ít nh t 2 l n l p l i trên cùng m t m u. Các m u  ấ ầ ặ ạ ộ ẫ ẫ được  th c hi n t i các th i gian khác nhau, trong các  ự ệ ạ ờ

đ i u ki n khác nhau: môi tr ề ệ ườn g, thi t b   ế ị

 Đ   ộ đúng  (trueness): k t qu  phân tích so v i m u  ế ả ớ ẫ chu n  ẩ

 Đ   không  ộ đả m b o  ả đ o

PHạM VI ĐÁNH GIÁ PHƯƠNG PHÁP TIÊU CHUẩN

 Phương pháp định tính:

 Gi i h n phát hi n (LODớ ạ ệ 50): 

 Là m t ậ độ vi sinh v t trong 01 ậ đơn v  m u ị ẫphân tích mà t i ạ đó có 50% s  m u gây ố ẫnhi m ễ được phát hi nệ

THÔNG S  K  THU T C A  ố ỹ ậ ủ

PHƯƠNG PHÁP

 Khái ni m ệ

 Đ  chính xác c a m t ph ng pháp phân tích là m c ộ ủ ộ ươ ứ

đ  th ng nh t c a các k t qu  th  riêng bi t khi quy ộ ố ấ ủ ế ả ử ệtrình th  nghi m đ c áp d ng l p đi l p l i trên cùng ử ệ ượ ụ ặ ặ ạ

m t m u nh  l y t  cùng m t m u đ ng nh t ộ ẫ ỏ ấ ừ ộ ẫ ồ ấ

Đ   ộ ĐÚNG  (TRUENESS)

 Khái ni m ệ

 Đ  đúng c a m t ph ng pháp phân tích là m c ộ ủ ộ ươ ứ

đ  sát g n c a các giá tr  tìm th y so v i ộ ầ ủ ị ấ ớ giá tr  ị

Đ   ộ ĐÚNG  (TRUENESS)

 Cách xác định độ đúng

 N u có m u chu n ho c m u gây nhi m ế ẫ ẩ ặ ẫ ễ : 

 độ  đúng PTN và độ đúng c a ph ủ ươn g pháp được t   ự tích h p và  ợ được  bi u di n b ng %  ể ễ ằ độ  l ch gi a giá  ệ ữ

tr  c a m u chu n và trung bình k t qu  thu  ị ủ ẫ ẩ ế ả được  

t  PTN khi phân tích b ng ph ừ ằ ươn g pháp c a PTN ủ

Ts

XÁC ĐịNH Độ CH M ụ

 Tùy theo m c  ụ đích  và qui mô đánh giá s  có các cách b  trí  ẽ ố thí nghi m khác nhau ệ

Đánh giá độ ch m c a ph ụ ủ ươn g pháp t i 1 PTN ạ

 Đ  l p l i ộ ặ ạ : được th c hi n trên 1 m u, t i cùng 1 KNV, ự ệ ẫ ạtrong cùng 1 đi u ki nề ệ

 Đ  tái l p ộ ậ : được th c hi n trên các m u, b i các KNV ự ệ ẫ ởkhác nhau (cùng th c hi n 1 m u); các m u khác nhau ự ệ ẫ ẫđược th c hi n trong các ự ệ đi u ki n khác nhauề ệ

2 2

)

( 1

1

x

x n

−

2 2

)

( 2

1

i i

n

 Đ  ch n l c d ộ ọ ọ ươ ng: kh  năng phát hi n nhi u ả ệ ề

nh t trong s  các đ i t ng m c tiêuấ ố ố ượ ụ

  Đ  ch n l c âm ộ ọ ọ : m c đ  can thi p c a các đ i ứ ộ ệ ủ ố

t ng khác v i VSV m c tiêu vào qui trình phân ượ ớ ụtích

Độ  CH N L C ­  CH NG VSV TRONG TH   ọ ọ ủ ử NGHI M ệ

Độ  CH N L C ­ CÁCH TH C HI N ọ ọ ự ệ

th ) ế

 Th c hi n 1 l n v i phự ệ ầ ớ ương pháp tham chi uế

B NG GHI NH N K T QU   ả ậ ế ả Độ  CH N L C ọ ọ

Ch ng th  nghi m ủ ử ệ Bi u hi n khu n l c  ể ệ ẩ ạ

khi th c hi n v i pp   ự ệ ớ tham  chi u ế

Bi u hi n khu n l c  ể ệ ẩ ạ khi th c hi n v i pp   ự ệ ớ thay thế

DI N GI I VÀ ÁP D NG K T QU ễ ả ụ ế ả

 S  d ng k t qu  đánh giá đ  b  sung vào các  ử ụ ế ả ể ổ

b ướ c c a ph ủ ươ ng pháp 

GI I H N PHÁT HI N (LOD) VÀ  ớ ạ ệ

GI I H N  ớ ạ Đị NH LƯợNG (LOQ)– PP 

Đị NH LƯợNG

 là m t ậ độ VSV m c tiêu th p nh t mà pp có th  phát ụ ấ ấ ể

hi n ệ được (không cho giá tr  ịđịnh lượng chính xác)

 T i giá tr  này kh  n ạ ị ả ă ng phát hi n chính xác là  ệ β ~50%

 là m t ậ độ VSV trong 1 đơn v  m u mà t i ị ẫ ạ đó kh  ả

năng phát hi n c a phệ ủ ương pháp là 1­ β (50% đến 

95%)

LOD = Xo + 3.3 So 

 X0: k t qu  trung bình phân tích l p l i nhi u l n t   ế ả ặ ạ ề ầ ừ m u tr ng  ẫ ắ

 So: độ l ch chu n c a  ệ ẩ ủ m u tr ng ẫ ắ   (m u có m t  ẫ ậ độ  gây nhi m th p) ễ ấ

GI I H N PHÁT HI N (LOD) VÀ  ớ ạ ệ

GI I H N  ớ ạ Đị NH LƯợNG (LOQ)– PP 

Đị NH LƯợNG

 Gi i h n  ớ ạ đị nh lượng:

  là m t ậ độ vi sinh v t th p nh t trong ậ ấ ấ đơn v  ị

m u mà phẫ ương pháp cho phép định lượng có 

độ chính xác đạt yêu c u c a PTN.ầ ủ

 Thông thường LOQ được xác định b ng công ằ

th c tứ ương  ng v i h  s  bi n ứ ớ ệ ố ế động CV ≤ 

10%

LOQ = Xo + 10 So

 Tính độ l ch chu n Sệ ẩ o t  các k t qu  nh n ừ ế ả ậ được.

 Tính Xo: n u th c hi n song song v i pp tham chi u ế ự ệ ớ ế

khác (X o  là k t qu  trung bình nhi u l n l p l i b ng  ế ả ề ầ ặ ạ ằ

PP tham chi u ế )

 Xác định tr c ti p ự ế

 Th c hi n phân tích v i các m t  ự ệ ớ ậ độ  khác nhau: 3, 10, 30, 

100 … CFU/đơn v  m u. M i n ng  ị ẫ ỗ ồ độ  nhi m l p l i 6 l n ễ ặ ạ ầ

 Xác định m t  ậ độ  nhi m có  ễ t  l  phát hi n ỉ ệ ệ  kho ng 50%/ ả đơ n 

 Là kh  năng suy đoán k t qu  phù h p v i ả ế ả ợ ớhàm l ng vi sinh v t hi n di n trong m u ượ ậ ệ ệ ẫthông qua các đ  pha loãng khác nhau.ộ

Đồ  TH  BI U DI N M I T ị ể ễ ố ƯƠN G 

QUAN GI A CÁC  ữ Đạ I LƯợNG

Gi i h n qui  ớ ạ định

Vùng dương tính  giả

XÁC Đ NH Đ  TUY N TÍNH C A PH ị ộ ế ủ ƯƠ NG 

PHÁP

 Pha loãng v i các n ng đ  khác nhauớ ồ ộ

 Không đ i di n cho t t c  các lo i m u ạ ệ ấ ả ạ ẫ

 Không xác đ nh đ c s   nh h ng c a n n m u lên k t  ị ượ ự ả ưở ủ ề ẫ ế

qu  phân tích ả

 Thông qua k t qu  c a ph ế ả ủ ươ ng pháp tham chi u ế

 Ch n các m u có m t đ  VSV m c tiêu khác nhauọ ẫ ậ ộ ụ

 Có th  ch n m u nhi m t  nhiên hay m u gây nhi m ể ọ ẫ ễ ự ẫ ễ

( u tiên l a ch n m u nhi m t  nhiên)Ư ự ọ ẫ ễ ự

 Th c hi n đ ng th i gi a ph ng pháp tham chi u và ự ệ ồ ờ ữ ươ ế

    ph ng pháp thay thươ ế

Ư u đi m:  ể

 Xác đ nh đ c s   nh h ng c a n n m u đ i v i ph ng pháp ị ượ ự ả ưở ủ ề ẫ ố ớ ươ

 Nh ượ c đi m: ể

 L  thu c vào ph ng pháp tham chi u ệ ộ ươ ế

XÁC Đ NH Đ  TUY N TÍNH C A PH ị ộ ế ủ ƯƠ NG 

PHÁP

THI T L P QUI TRÌNH XÁC Đ NH Đ   ế ậ ị ộ

TUY N TÍNH ế

 Đ i v i m i lo i m u ố ớ ỗ ạ ẫ

 Xác đ nh v i các m t đ  khác nhau bao ph  t t c  các  ị ớ ậ ộ ủ ấ ả

kho ng m t đ  VSV đích có th  hi n di n trong m u ả ậ ộ ể ệ ệ ẫ

 Thông th ng l a ch n ít nh t 5 kho ng m t đ  đ  so  ườ ự ọ ấ ả ậ ộ ể sánh.

L A CH N M U Đ  ĐÁNH  ự ọ ẫ ể GIÁ Đ  TUY N TÍNH C A  ộ ế ủ

 Ph ng pháp áp d ng cho t t c  các lo i th c ươ ụ ấ ả ạ ự

ph m: ch n 5 lo i m u (Annex B, ISO ẩ ọ ạ ẫ

16140:2003)

 Có th  s  d ng <5 lo i m u theo m c đích đánh ể ử ụ ạ ẫ ụgiá c a PTNủ

NGUYÊN T C CHUNG ắ

 Đ i v i tr ố ớ ườ ng h p s  d ng  ợ ử ụ m u chu n ẫ ẩ : 

 Bi u di n s  bi n thiên c a k t qu  theo s  m t ể ễ ự ế ủ ế ả ố ậ

đ  VSV đã bi t – hàm y(x)ộ ế

M t đ  VSV trong  ậ ộ

m u chu n   ẫ ẩ

 Đ i v i tr ố ớ ườ ng h p s  d ng  ợ ử ụ ph ươ ng pháp 

 Bi u di n s  bi n thiên c a k t qu  ph ng ể ễ ự ế ủ ế ả ươ

pháp thay th  theo k t qu  ph ng pháp tham ế ế ả ươchi u ­ hàm y(x)ế

L A CH N HÀM TUY N TÍNH ự ọ ế

 G i  ọ

 Sr(x): đ  l p l i c a ph ng pháp tham chi u ộ ặ ạ ủ ươ ế

 Sr(y): đ  l p l i c a ph ng pháp thay th ộ ặ ạ ủ ươ ế

) (

)

(

x Sr

CÁC KÝ HI U TRONG CÔNG  ệ

 i: M c đ  vi sinh v t trong m u (i=1ứ ộ ậ ẫ q)

 q: s  l ng m c đ  gây nhi m(th ng q = 5)ố ượ ứ ộ ễ ườ

 j: s  l n l p l i v i m t m c đ  gây nhi m i (j = 1 ố ầ ặ ạ ớ ộ ứ ộ ễ n)

 n: s  l n l p l i  ng v i m t m c đ  gây nhi m i ố ầ ặ ạ ứ ớ ộ ứ ộ ễ

(th ng n=5)ườ

 N: t ng s  m u đã th c hi n (N=qn)ổ ố ẫ ự ệ

CÁC CÔNG TH C TÍNH H I QUI  ứ ồ

y

y N

Vy

V V

V r

.

1 1

) (

)

( 1

i

N V

Hàm trong Excel

Tính r: dùng hàm CORREL({x};{y}) Tính Vxy: dùng hàm COVAR({x};{y})

S

S r V

V

a = =

ax y

N k

k k

x

K=1 N; N=qn

Hàm trong Excel Tính Sy:x: dùng hàm STEYX({y};{x})

GIÁ TR  T I H N C A H  S  GÓC  ị ớ ạ ủ ệ ố A

x

x

y a

V N

S S

) 1 (

GIÁ TR  T I H N C A H  S  L CH  ị ớ ạ ủ ệ ố ệ

GÓC B

x

x y b

V N

x N

S

S

)1(

trong đó: df: b c t  do (df=N­2) ậ ự

    tails=2 (h  s  m  r ng)  ệ ố ở ộ

M C CH P NH N ứ ấ ậ

 Giá tr  ch p nh n c a h  s  lack­of­fit (F) ị ấ ậ ủ ệ ố

2

)1(

)/

S

N

F y x Wy

V i v ớ num=q­2; vden= q(n­1)

Tra b ng Snedecor F­table, p(F,v ả num,vden)

Ch  s  ch p nh n ỉ ố ấ ậ p(F)≤0,05

Hàm trong Excel Tính p(t): dùng hàm FDIST(F;df1;df2;tails)

trong đó: df1=q­2; df2 = q(n­1)

    tails=2 (h  s  m  r ng)  ệ ố ở ộ

3M Tecra (Elisa) 3M MDS (DNA detection)

GI I H N PHÁT HI N 50 (LOD ớ ạ ệ 50) – 

PP ĐịNH TÍNH

 Đ nh nghĩa ị : 

 LOD 50 là m t  ậ độ  vi sinh trong 1 đơn v  m u phân tích mà t i  ị ẫ ạ đó  có  50% s  m u  ố ẫ được  phát hi n ệ

 Cách th c hi n ự ệ  (xác định LOD50 cho m u 25g)ẫ

 Chu n b  50 m u tr ng  m i m u 25gẩ ị ẫ ắ ỗ ẫ

 Chu n b  m t dãy nh  phân ch ng chu n mà t i n ng đ  ẩ ị ộ ị ủ ẩ ạ ồ ộ

đ u có m t đ  kho ng 25CFU/ml (2ầ ậ ộ ả 0, 2­1, 2­2,, 2­3, 2­4, 2­5)

 T i m i n ng đ  hút 1ml spike vào 25g m u – th c hi n 10 m u  ạ ỗ ồ ộ ẫ ự ệ ẫ cho m t n ng đ  (5 n ng đ  t ng c ng 50 m u) ộ ồ ộ ồ ộ ổ ộ ẫ

 Th c hi n phân tích m u theo qui trình ự ệ ẫ

 LOD 50: Gi i h n phát hi n c a ph ng pháp   ớ ạ ệ ủ ươ

 L: M t ậ độ  c a s  l ng t  bào đ c spike vào th p nh t mà t i đó 100% phép  ủ ố ượ ế ượ ấ ấ ạ

th  cho k t qu  d ng tính ử ế ả ươ

 d: H  s  c a n ng đ  pha loãngệ ố ủ ồ ộ

 P i:  T  l  ph n  ng d ng tính (50%  ỉ ệ ả ứ ươ ≤  Pi  ≤ 100%) đ i v i n ng đ  pha loãng th  i ố ớ ồ ộ ứ

 Um : Ướ ượ c l ng sai s  c a m ố ủ

 Um= d2∑(Pi(1­ Pi)/(n­1))

 n: S  l n l p l i đ i v i n ng đ  pha loãng th  iố ầ ặ ạ ố ớ ồ ộ ứ

Đ  Đ C HI U – PH ộ ặ ệ ƯƠ NG PHÁP Đ NH  ị

TÍNH

 Đ nh nghĩa: ị

 Đ  đ c hi u là kh  năng c a ph ng pháp thay th  cho  ộ ặ ệ ả ủ ươ ế

k t qu  phân tích âm tính   nh ng m u mà ph ng  ế ả ở ữ ẫ ươ pháp tham chi u cũng cho k t qu  âm tính ế ế ả

 Là kh  n ả ă ng phát hi n nh ng m u âm tính trong s   ệ ữ ẫ ố

nh ng m u âm tính th t ữ ẫ ậ

 Ý nghĩa:

 Đánh giá kh  năng chuyên bi t c a ph ng pháp lên  ả ệ ủ ươ

đ i t ng phân tích ố ượ

 Kh  n ả ă ng không b  nhi u b i n n m u c a ph ị ễ ở ề ẫ ủ ươn g pháp.   

ĐỘ CHÍNH XÁC TƯƠNG ĐỐI (RELATIVE ACCURACY)

ĐỘ NHẠY TƯƠNG ĐỐI (RELATIVE

SENTIVITY)

thể phát hiện được so với phương pháp

tham chiếu.

tiêu của phương pháp.

CÁCH XÁC ĐịNH CÁC THÔNG S   ố

 S  l ố ượ ng m u ẫ

 Ph ng pháp áp d ng cho t t c  các lo i th c  ươ ụ ấ ả ạ ự

ph m: ẩ  ch n ít nh t 5 lo i th c ph m khác nhauọ ấ ạ ự ẩ

 T t nh t nên ch n m u t  nhiênố ấ ọ ẫ ự

 M u gây nhi m: đi u ch nh m t đ  VSV m c ẫ ễ ề ỉ ậ ộ ụ

tiêu đ  có m t s  ít m u cho k t qu  d ng tính ể ộ ố ẫ ế ả ươ

v i 1 trong 2 ph ng phápớ ươ

CÁC B Ướ C XÁC Đ NH Đ  Đ C  ị ộ ặ

HI U ệ

 Th c hi n phân tích v i 2 ph ng pháp tham chi u  ự ệ ớ ươ ế

và PP m i ớ

 Có ít nh t 60 k t qu  phân tích cho m t lo i th c  ấ ế ả ộ ạ ự

ph m v i c  2 ph ng pháp, trong đó k t qu  âm  ẩ ớ ả ươ ế ả

tính và d ng tính t ng đ ng kho ng 50% cho m i  ươ ươ ươ ả ỗ

PP tham chiếu(+) PP tham chiếu(-)

%

100PD

PP tham chiếu(+) PP tham chiếu(-)

% 100

× +

=

NA PD

PD FP

PP tham chiếu(+) PP tham chiếu(-)

% 100

× +

=

PA ND

ND FN

PP tham chiếu(+) PP tham chiếu(-)

% 100

Đ  chính xác (AC)ộ

Gi i h n cho phép: ớ ạ AC ≥ 94% (MMC­ Canada)

n = PA + NA + ND + PD

XÁC ĐịNH Độ CH N L C – PP  ọ ọ Đị NH  TÍNH 

 Ch ng vi sinh v t : ủ ậ

 L a ch n các ch ng phong phú v  ngu n g cự ọ ủ ề ồ ố

 Ph i bi t ngu n g c c a ch ngả ế ồ ố ủ ủ

 Các ch ng đ c l a ch n ph i đ c xác đ nh đ c ủ ượ ự ọ ả ượ ị ặ

đi m sinh hóa, huy t thanh, di truy n …ể ế ề

CÁCH TH C HI N ự ệ

 Th c hi n v i ch ng thu n/d ch pha loãng ch ngự ệ ớ ủ ầ ị ủ

 M t đ  VSV trong m i l n phân tích: 10­100 l n ậ ộ ỗ ầ ầ

) (

Re

× +

%

100)

(

)()

AR

AR

ER EX

AR: k t qu  th c t   ế ả ự ế ER: k t qu  mong  ế ả đợ i

) (

AR

ER IN

%

100)

(

)()

ER

AR ref

ER EX

Đ  ch n l c âm (PP tham chi u) (EX ộ ọ ọ ế Ref)  

)

(

× +

+

=

Alt

Alt Alt

AR

ER IN

%

100 )

(

) ( )

(

× +

ER

AR

ER EX

Đ  ch n l c âm (PP thay th ) (EX ộ ọ ọ ế Alt)  

CH  TIÊU CH P NH N­PP Đ NH  ỉ ấ ậ ị TÍNH

 Đ  ch n l c t ộ ọ ọ ươ ng đ i ố

 Đ  ch n l c d ng: ộ ọ ọ ươ IN ≥  98%

 Đ  ch n l c âm:ộ ọ ọ EX ≤ 10%

(Theo MMC Canada)

ƯớC  LƯợNG Độ KHÔNG ĐảM B O  ả

Đ O

Vi n d n ệ ẫ : ISO/TS 19036:2006

Microbiology of food and animal feeding stuffs ­­  Guidelines for the estimation of measurement 

uncertainty for quantitative determinations

Xác định giới hạn tới hạn (Clim)

Trong đó SR là độ tái lập của phương pháp

2

210

lim

75 ,

1 1

05 ,

0 1

) (log

ƯớC  LƯợNG Độ KHÔNG ĐảM 

B O  ả Đ O

N u m t đ  vi sinh v t m c tiêu trong m u  ế ậ ộ ậ ụ ẫ

th p h n C ấ ơ lim (C≤Clim),  c l ng đ  không đ m  ướ ượ ộ ả

b o đo v i đ  tin c y 95% theo công th c sau: ả ớ ộ ậ ứ

U 2 R 2 0 , 18861

­ Bi u di n theo Y:  ể ễ log(10y­U, 10y+U)

­ Bi u di n theo s   ể ễ ố đế m C: cfu/g (10y­U, 10y+U)

ĐÁNH GIÁ S  KHÁC BI T GI A HAI  Ự Ệ Ữ PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH

value

 V i  ớ độ  tin c y 95% n u ậ ế :

CÁCH XÁC ĐịNH TR  S  P­VALUE ị ố

 Phân tích m t m u b ng 2 phộ ẫ ằ ương pháp khác nhau (VD: phương pháp tham chi u và phế ương pháp dùng petrifilm) t i cùng m t th i ạ ộ ờ đi m.ể

 L p l i nhi u l n v i các m u khác nhau, t i các ặ ạ ề ầ ớ ẫ ạ

th i ờ đi m khác nhau.ể

 Ghi nh n k t qu  phân tích c a các m u b ng c  ậ ế ả ủ ẫ ằ ảhai phương pháp theo b ng nhả ư sau vào ph n m m ầ ềExcel:

  M u ẫ PP tham chi u (log 10) ế PP petrifilm (log 10)

 Các giá tr  ịđầu vào c a TTESTủ

 Array 1: m ng k t qu  phân tích c a PP tham chi uả ế ả ủ ế

 Array 2: m ng k t qu  phân tích c a PP c n ả ế ả ủ ầ đánh  giá

 Tails : vùng xác định s  khác bi t so v i giá tr  trung ự ệ ớ ị bình (= 2)

 Type: Ki u so sánh – so sánh t ng cể ừ ặ p ( = 1)

PHÂN TÍCH TH NG KÊ CÁC KHÁC BI T  ố ệ

PHÁP

 S  d ng công c  Data analysis ử ụ ụ để phân tích s  ự

khác bi t gi a hai phệ ữ ương pháp

 Các d  ki n nh n ữ ệ ậ được bao g m:ồ