Điều tra một số đặc điểm dịch tễ và xác định virus gây bệnh gumboro ở gà nuôi tại thái nguyên

Sự thay đổi tính kháng nguyên cũng như sự xuất hiện các chủng virus có tính gây bệnh cao trong nhiều đàn gia cầm được tiêm vaccine Dozl và cs, 2005 [16]; Yuwen và cs, 2008 [32], đã kích

CHU THỊ THÁI

Tên đề tài:

ĐIỀU TRA MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ VÀ XÁC ĐỊNH VIRUS GÂY BỆNH GUMBORO Ở GÀ NUÔI TẠI THÁI NGUYÊN

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

Hệ đào tạo: Chính quy Chuyên ngành: Chăn nuôi Thú y Khoa: Chăn nuôi Thú y

Khoá học : 2011 - 2015

Thái Nguyên, 2015

CHU THỊ THÁI

Tên đề tài:

ĐIỀU TRA MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ VÀ XÁC ĐỊNH VIRUS GÂY BỆNH GUMBORO Ở GÀ NUÔI TẠI THÁI NGUYÊN

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC

Hệ đào tạo: Chính quy Chuyên ngành: Chăn nuôi Thú y Khoa: Chăn nuôi Thú y

Lớp: K43 - CNTY Khoá học: 2011 - 2015 Giảng viên hướng dẫn : 1 GS.TS Nguyễn Quang Tuyên

2 Th.s Đỗ Bích Duệ

Thái Nguyên, 2015

LỜI CẢM ƠN

Sau khi học tập và rèn luyện tại trường, được sự phân công của khoa Chăn nuôi Thú y, Trường Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên cùng với sự đồng ý của thầy,

cô giáo hướng dẫn GS.TS Nguyễn Quang Tuyên và Th.s Đỗ Bích Duệ, em đã tiến

hành thực hiện đề tài “Điều tra một số đặc điểm dịch tễ và xác định virus gây bệnh

Gumboro ở gà nuôi tại Thái Nguyên” Dưới sự hướng dẫn, chỉ dạy tận tình cùng

với những kinh nghiệm quý báu của các thầy cô, đến nay em đã thực tập xong và hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Đại học của mình

Để hoàn thành khóa luận này, em xin chân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu

Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Ban chủ nhiệm Khoa Chăn nuôi Thú y cùng toàn thể các quý thầy cô giáo trong khoa đã tận tình hướng dẫn, giảng dạy trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu và rèn luyện ở trường

Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới các thầy cô trong Viện Khoa học Sự sống - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên đã giúp đỡ và tạo điều kiện thuận lợi cho em trong quá trình thực tập

Đặc biệt em xin chân thành cảm ơn thầy, cô giáo hướng dẫn GS.TS Nguyễn

Quang Tuyên và Th.s Đỗ Bích Duệ đã hết lòng tận tình chỉ bảo, hướng dẫn và giúp

đỡ em trong quá trình thực hiện khóa luận tốt nghiệp đại học

Qua đây em cũng xin gửi lời cảm ơn tới gia đình và bạn bè là chỗ dựa tinh thần vững chắc nhất giúp em vượt qua những khó khăn trong thời gian thực tập Trong quá trình hoàn thành khóa luận tốt nghiệp, do thời gian có hạn và kiến thức cũng như kinh nghiệm của bản thân còn hạn chế nên bài khóa luận của em không tránh khỏi những thiếu sót, em kính mong nhận được sự đóng góp ý kiến của thầy, cô giáo và các bạn để bài khóa luận được hoàn thiện hơn

Em xin chân thành cảm ơn !

Thái nguyên, tháng 6 năm 2015

Sinh viên

Chu Thị Thái

DANH MỤC CÁC BẢNG

Bảng 3.1: Các chỉ tiêu đánh giá mắc bệnh Gumboro 40

Bảng 4.1: Kết quả điều tra số lượng gà mắc bệnh Gumboro tại Thái Nguyên 41

Bảng 4.2: Tỷ lệ mắc bệnh Gumboro ở gà có tiêm vaccine và không tiêm phòng bệnh Gumboro 42

Bảng 4.3: Tỷ lệ gà mắc bệnh Gumboro ở các phương thức chăn nuôi 43

Bảng 4.4: Tỷ lệ gà mắc bệnh Gumboro ở các giống gà 44

Bảng 4.5: Tỷ lệ gà mắc bệnh Gumboro ở các lứa tuổi 44

Bảng 4.6: Triệu chứng ở gà mắc bệnh Gumboro 45

Bảng 4.7: Bệnh tích ở gà mắc bệnh Gumboro (n=170) 46

Bảng 4.8: Kết quả chẩn đoán bệnh Gumboro trên phôi trứng 48

Bảng 4.9: Kết quả phân lập virus cường độc Gumboro trên phôi trứng 49

DANH MỤC CÁC HÌNH

Hình 2.1: Cơ chế nhân lên - sinh bệnh của IBDV 14 Hình 2.2: Biểu đồ diễn biến gà chết trong quá trình phát triển bệnh Gumboro 17 Hình 3.1: Sơ đồ điều chế virus từ bệnh phẩm 38

DANH MỤC CÁC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT

vvIBDV : very virulent Infectious Bursal Disease virus

MỤC LỤC

PHẦN 1 MỞ ĐẦU 1

1.1 Đặt vấn đề 1

1.2 Mục tiêu và yêu cầu của đề tài 2

1.3 Ý nghĩa của đề tài 2

PHẦN 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

2.1 Cơ sở khoa học của đề tài 4

2.1.1 Giới thiệu chung về bệnh Gumboro 4

2.1.2 Lịch sử và địa dư bệnh 5

2.1.3 Đặc điểm sinh học của virus Gumboro 6

2.1.4 Đặc điểm dịch tễ học 10

2.1.5 Lâm sàng học bệnh Gumboro 16

2.1.6 Triệu chứng lâm sàng 18

2.1.7 Bệnh tích 19

2.1.8 Chẩn đoán bệnh 25

2.1.9 Miễn dịch học bệnh Gumboro 29

2.1.10 Điều trị và phòng bệnh Gumboro 32

2.2 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước 35

2.2.1 Tình hình nghiên cứu trong nước 35

2.2.2 Tình hình nghiên cứu thế giới 36

PHẦN 3 ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37

3.1 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu 37

3.2 Địa điểm và thời gian tiến hành 37

3.3 Nội dung nghiên cứu 37

3.4 Phương pháp nghiên cứu và các chỉ tiêu theo dõi 37

3.4.1 Phương pháp nghiên cứu tình hình dịch tễ bệnh Gumboro 37

3.4.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 38

3.4.3 Phương pháp thu thập thông tin 40

3.4.4 Phương pháp xử lý số liệu 40

PHẦN 4 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 41

4.1 Kết quả điều tra một số đặc điểm dịch tễ bệnh Gumboro tại tỉnh Thái Nguyên 41

4.1.1 Kết quả điều tra số lượng gà mắc bệnh Gumboro tại các hộ chăn nuôi 41

4.1.2 Tỷ lệ mắc bệnh Gumboro ở gà tiêm vaccine và không tiêm phòng bệnh Gumboro 42

4.1.3 Tỷ lệ gà mắc bệnh Gumboro ở các phương thức chăn nuôi 43

4.1.4 Tỷ lệ gà mắc bệnh Gumboro ở các giống gà 44

4.1.5 Tỷ lệ gà mắc bệnh Gumboro ở các lứa tuổi 44

4.1.6 Triệu chứng ở gà mắc bệnh Gumboro nuôi tại Thái Nguyên 45

4.1.7 Bệnh tích ở gà mắc bệnh Gumboro nuôi tại Thái Nguyên 46

4.2 Kết quả xác định virus gây bệnh Gumboro từ mẫu bệnh phẩm 47

4.2.1 Kết quả xác định virus Gumboro từ mẫu bệnh phẩm 47

4.2.2 Kết quả phân lập virus Gumboro trên phôi trứng 48

PHẦN 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 50

5.1 Kết luận 50

5.2 Đề nghị 51

TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC

PHẦN 1

MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề

Khi nền kinh tế phát triển thì nhu cầu về thực phẩm của con người ngày càng nâng cao, nên trong những năm gần đây ngành chăn nuôi đã có những bước tiến nhất định, đặc biệt là ngành chăn nuôi gia cầm Chăn nuôi gia cầm có một vị trí quan trọng trong nền kinh tế quốc dân, bởi nó không chỉ đáp ứng nhu cầu thực phẩm (trứng, thịt) cho người tiêu dùng mà còn cung cấp nguyên liệu cho ngành công nghiệp chế biến, cung cấp phân bón cho cây trồng…Tuy nhiên, ngành chăn nuôi nói chung và ngành chăn nuôi gia cầm nói riêng thường bị ảnh hưởng của dịch bệnh, trong đó có bệnh truyền nhiễm đặc biệt là bệnh Gumboro gây bệnh ở gà

Bệnh Gomboro hay còn gọi là bệnh viêm túi Fabricius truyền nhiễm, là một bệnh truyền nhiễm cấp tính lây lan nhanh ở gia cầm non, chủ yếu là gà và gà tây, do một loại virus gây ra, có tên gọi là virus gây viêm túi Fabricius truyền nhiễm, hay còn gọi là virus Gumboro Bệnh gây thiệt hại lớn về mặt kinh tế cho người chăn nuôi Ngày nay, bệnh Guboro xảy ra ở hầu hết các vùng chăn nuôi tập trung trên thế giới và virus Gumboro gây bệnh có nhiều biến chủng khác nhau nhưng đều thuộc

về serotype 1 và 2, trong đó serotype 1 có mức độ độc lực và tính gây bệnh cao, còn serotype 2 hầu như không có tính gây bệnh

Bệnh Gumboro có tên khoa học là Infectious Bursal Disease (IBD) do một loại virus thuộc họ Birnaviridae gây nên IBD là một bệnh truyền nhiễm gây suy giảm

miễn dịch, giảm khả năng kháng bệnh của gà lớn tạo điều kiện cho các vi khuẩn kế phát xâm nhập gây bệnh

Kể từ khi phát hiện được bệnh Gumboro cho đến nay, bệnh đã xảy ra và gây thiệt hại lớn về kinh tế đối với các nước có chăn nuôi gà công nghiệp trên thế giới Cuối những năm 1980, chủng virus độc lực rất cao (Very Virulent Strain) đã phân lập được tại Hà Lan, sau đó nhanh chóng lây lan sang châu Phi, châu Á và Nam Mỹ; tuy nhiên tại các nước như Úc, New Zealand và Mỹ không phân lập được chủng này Tổ chức thú y thế giới (OIE) năm 1992, đã chính thức công bố tên bệnh

Nhưng do virus Gumboro có nhiều biến chủng, tính tương đồng kháng nguyên thấp nên việc phòng chống bệnh chưa đạt hiệu quả cao

Tại Việt Nam bệnh phát hiện từ trước những năm 1980 và đã gây tổn thất lớn

vì khi đó chúng ta chưa có kinh nghiệm và kiến thức về bệnh Như vậy, ở nước ta bệnh đã tồn tại nhiều năm nay ở hầu hết các tỉnh, tuy đã có vaccine phòng bệnh nhưng bệnh vẫn xảy ra và gây thiệt hại đáng kể về kinh tế

Thái nguyên là một tỉnh miền núi phía Bắc có ngành chăn nuôi khá phát triển, trong đó chăn nuôi gà theo phương thức chăn nuôi bán công nghiệp và công nghiệp

đang được áp dụng rộng rãi trên địa bàn tỉnh với quy mô hộ gia đình hay trang trại

lớn ngày càng tăng Tuy nhiên tình hình dịch bệnh Gumboro diễn ra khá mạnh làm

ảnh hưởng đến năng suất và chất lượng sản phẩm vật nuôi Bệnh gây tổn thương điển hình ở túi Fabricius, làm túi bị sưng, xuất huyết và teo Túi Fabricius là cơ

quan miễn dịch dịch thể của gia cầm do đó khi bị phá hủy, gà sẽ suy giảm miễn dịch hoặc mất khả năng đáp ứng miễn dịch đối với các vaccine phòng bệnh khác và

dễ bị nhiễm các bệnh truyền nhiễm khác Bệnh do virus gây ra, lây lan nhanh và khó điều trị nếu không được chẩn đoán kịp thời

Xuất phát từ nhu cầu thực tế và để có thêm những hiểu biết về bệnh Gumboro

tại Thái Nguyên, tôi tiến hành thực hiện đề tài: “Điều tra một số đặc điểm dịch tễ

và xác định virus gây bệnh Gumboro ở gà nuôi tại Thái Nguyên”

1.2 Mục tiêu và yêu cầu của đề tài

có tiêm vaccine và không tiêm phòng bệnh Gumboro, triệu chứng và bệnh tích trên

đàn gà mắc bệnh Gumboro ở các hộ chăn nuôi nhỏ lẻ trên địa bàn tỉnh Thái

Nguyên, phân lập virus Gumboro trên phôi trứng xác định virus gây bệnh Gumboro

- Là cơ sở, căn cứ cho các nghiên cứu tiếp theo ở mức cao hơn

1.3 Ý nghĩa của đề tài

Kết quả nghiên cứu của đề tài là những thông tin khoa học góp phần nâng cao hiểu biết và làm phong phú thêm những kiến thức về đặc điểm tễ bệnh Gumboro và xác định virus gây bệnh Gumboro phân lập ở gà nuôi tại Thái Nguyên

Đóng góp một số thông tin, tư liệu mới cho khoa học

Kết quả đề tài là cơ sở khoa học để khuyến cáo người chăn nuôi nên áp dụng quy trình phòng, trị bệnh Gumboro cho gà một cách đầy đủ, nhằm hạn chế tỷ lệ và cường độ mắc bệnh Gumboro ở gà từ đó giảm thiệt hại về kinh tế do bệnh gây nên,

đồng thời góp phần nâng cao năng suất chăn nuôi, thúc đẩy ngành chăn nuôi gà nói

riêng và chăn nuôi gia súc gia cầm nói chung

PHẦN 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học của đề tài

2.1.1 Giới thiệu chung về bệnh Gumboro

Bệnh Gumboro hay còn gọi là bệnh viêm túi huyệt truyền nhiễm (Infectious Bursal Disease - IBD) là bệnh truyền nhiễm lây lan cấp tính ở gà con (3 - 6 tuần tuổi)

Nguyên nhân gây ra bệnh Gumboro là một loại virus có tên là virus gây viêm túi truyền nhiễm (IBDV) hay còn gọi là virus Gumboro Sự nhiễm IBDV có thể làm gia tăng trầm trọng mức độ nhiễm bệnh với những tác nhân gây bệnh khác và làm giảm khả năng đáp ứng miễn dịch của gia cầm

Các chủng virus Gumboro có sự tương đồng kháng nguyên với chủng virus

“cổ điển” gây bệnh dịch Gumboro trong nhiều thập kỷ và có thể gây ra các tổn thương bệnh tích đặc trưng (Eterradossi và cs, 1992) [17] Đặc biệt, các chủng IBDV có độc lực cao (vvIBDV) có khả năng “lẩn tránh” được đáp ứng miễn dịch dịch thể sinh ra sau khi kích thích bằng chủng virus “cổ điển” (không bị trung hòa bởi các kháng thể này), khi xâm nhiễm gây bệnh ở gà mẫn cảm

Các tế bào lympho trong túi Fabricius là những tế bào đích của virus Gumboro Gà ở độ tuổi 3 - 6 tuần có tính nhạy cảm cao với virus, khi túi Fabricius phát triển lớn nhất Hậu quả của IBDV gây nhiễm ở gia cầm là làm teo nhỏ các mô lympho và cuối cùng là phá hủy cấu trúc túi Fabricius làm cho cơ quan có thẩm quyền miễn dịch này mất hoàn toàn hoặc mất một phần chức năng đáp ứng miễn dịch dẫn đến suy giảm miễn dịch (immunosuppression) (Sharma và cs, 2000) [26]

Từ năm 1986 đến nay, các chủng IBDV độc lực cao đã gây ra nhiều vụ dịch lớn

ở Châu Âu, bao gồm nhiều chủng có thể gây chết tới 70% số gà nhiễm bệnh trong các đàn gà mái đẻ (Van Den Berg, 2000) [29]; (Zorman-Rojs và cs, 2003) [33]

Virus ở các dạng độc lực cổ điển, nguyên nhân gây ra nhiều dịch xảy ra trước

đây, thường gây ra tỉ lệ chết khoảng từ 1 - 50% số gà nhiễm trong đàn Ở những đàn

gà thịt thương phẩm bị nhiễm, tỉ lệ này có thể lên đến 50%, tuy nhiên ở các đàn gà trong độ tuổi 3 - 6 tuần tỉ lệ chết ít khi vượt quá 5% Người ta thấy rằng, khi thay

thế các đàn gà mái tơ Leghorn ở trong độ tuổi nhạy cảm với bệnh có thể làm gia tăng tỉ lệ chết của số gà nhiễm bệnh trong đàn lên đến 20% Trong các đàn đang ở thời kì đẻ trứng, có sự giảm sút sản lượng trứng và cả chất lượng trứng (Muller và

cs, 2003) [23]

Bên cạnh khả năng gây chết, IBDV còn khả năng gây suy giảm miễn dịch ở gà

bị nhiễm bệnh Ở các đàn gà thịt thương phẩm, sự suy giảm khả năng miễn dịch

được biểu hiện rõ rệt bởi tỷ lệ xâm nhiễm cao của các virus đường hô hấp và làm

gia tăng tỷ lệ chết do sự nhiễm trùng máu của vi khuẩn E coli (trực khuẩn ruột già)

trong suốt một phần ba cuối chu kỳ phát triển 6 - 8 tuần Vaccine sống nhược độc

có thể không phát huy tác dụng ở các đàn gà thịt và đàn gà mái tơ sau khi tiêm chủng nhằm chống lại với các bệnh đường hô hấp như bệnh viêm phế quản và bệnh Newcastle

Được phát hiện lần đầu tiên cách đây hơn 50 năm, cho đến nay bệnh Gumboro

vẫn đang là mối đe dọa nguy hiểm với ngành chăn nuôi gà ở khía cạnh suy giảm miễn dịch do virus gây ra Sự thay đổi tính kháng nguyên cũng như sự xuất hiện các chủng virus có tính gây bệnh cao trong nhiều đàn gia cầm được tiêm vaccine (Dozl

và cs, 2005) [16]; (Yuwen và cs, 2008) [32], đã kích thích nỗ lực quan tâm nghiên cứu các chủng Gumboro mới xuất hiện cả về bệnh và nguyên nhân gây bệnh

2.1.2 Lịch sử và địa dư bệnh

Virus Gumboro là loại virus thuộc họ Birnaviridae, nhóm Birnavirus, được

phát hiện đầu tiên vào năm 1957 tại vùng Gumboro (thuộc bang Delaware - Mỹ) mãi đến năm 1962 mới được Cosgrove miêu tả cặn kẽ Năm 1970, Hitchner đề nghị chính thức coi bệnh do Cosgrove phát hiện là bệnh viêm túi Fabricius truyền nhiễm (IBD) hay còn gọi là bệnh Gumboro để ghi nhớ địa danh phát hiện bệnh đầu tiên

Từ khi bệnh được phát hiện đến nay, bệnh đã lan truyền nhanh chóng và rộng rãi trên nhiều nước có nên chăn nuôi gà công nghiệp phát triển Ở Việt Nam bệnh

được phát hiện năm 1984

2.1.3 Đặc điểm sinh học của virus Gumboro

Phân loại

Virus Gumboro thuộc họ Birnaviridae, giống Avibirnavirus gây bệnh cho gà

Họ này gồm có 3 giống: giống Aqubirnavirus gây bệnh hoại tử tuyến tụy cho

cá, loài giáp xác; giống Avibirnavirus trong đó có IBDV gây bệnh cho gà; giống Entomobirnavirus trong đó có virus Drosophia X gây bệnh cho côn trùng Các virus

thuộc họ này đều đặc trưng bởi cấu tạo nhân gồm 2 đoạn ARN sợi đôi, vì vậy tên

gọi của họ virus là Birnavirus Trước đây, do hình thái và cấu trúc của virus chưa

được nghiên cứu đầy đủ nên IBDV đã từng được xếp vào họ Picornaviridae hoặc

Reoviridae (Lê Văn Năm, 2004) [13]

Hình thái, cấu trúc

Virus Gumboro có kích thước khoảng 58 - 60 nm, dạng hình khối đa diện cấu trúc đối xứng 20 mặt, phân tử khối 2.106 Dalton Trong nguyên sinh chất tế bào bị nhiễm có thể quan sát dưới kính hiển vi điện tử thấy tập hợp virus Gumboro giống như tổ ong xếp đều đặn cạnh nhau Mỗi nguyên sinh chất tế bào bị nhiễm có thể chứa một vài tập hợp IBDV

Virus Gumboro không có vỏ bọc ngoài (envelop), mà chỉ là virus dạng trần, hay còn gọi là nucleocapsid, bao gồm nhân chứa ribonucleic acid (RNA) và bao quanh hệ gen có lớp vỏ protein hay còn gọi là capsid Vỏ capsid của virus bao gồm

32 đơn vị hình thái, mà mỗi một đơn vị hình thái còn được gọi là capsomer đan chéo nhau tạo thành Mỗi capsomer được tạo thành bởi 5 loại protein cấu trúc khác nhau VP1, VP2, VP3, VP4, VP5 với khối lượng phân tử lần lượt khoảng 90kDa, 41kDa, 32kDa, 28kDa, 21kDa, trong đó VP2 và VP3 là hai loại protein chính( ví dụ serotype I có 51% VP2, 40% VP3, 3% VP1, 6% VP4), VP5 chưa rõ vai trò, có thể

đóng vai trò trong quá trình nhân lên và tái tổ hợp của virus Vì không có lớp vỏ bọc

lipit nên virus có sức đề kháng cao trong tự nhiên, không mẫn cảm với ether và chloroform Virus Gumboro được liệt kê vào hàng thứ 18 trong hệ thống phân loại

virus gây bệnh thuộc họ Birnaviridae cho người và động vật

Hệ gen của virus Gumboro chứa acid ribonucleic không giống hệ gen của nhiều loại virus khác, chúng bao gồm 2 sợ phân làm 2 đoạn riêng biệt, cả 2 phân

đoạn RNA của virus đều mang thông tin di truyền và có nhiệm vụ tổng hợp 4 loại

protein cấu trúc khác nhau, cũng như một số loại men cần thiết trong quá trình tự nhân đôi theo cơ chế bổ sung để tổng hợp ARN mới, nguyên liệu cho các virus mới Các nucleotide trong ribonucleic acid (RNA) của virus Gumboro được xếp thành đôi cuộn tròn và phân làm hai đoạn riêng biệt; đây là một đặc điểm hết sức

đặc trưng của loại virus này Đoạn nhỏ (segment B) mã hóa VP1 - là ARN

polymerase của virus Polypeptide này hiện diện trong virus nghỉ ở ngoài tế bào chủ (virion), mang bản chất của một protein tự do và protein liên kết genome (còn gọi là VPg) VPg được cố định vào đuôi 5’ sợi dương của 2 mạch trong genome (Dobos, 1993) [15] Đoạn lớn (segment A) có hai khung đọc mở (ORF) Khung lớn là một

đoạn monocistron mã hóa một tiền protein được phân cắt thành VP2, VP3, VP4

VP2 và VP3 là protein cấu trúc chính, trong đó VP2 được coi là kháng nguyên bảo

vệ (host protective antigen) đồng thời là kháng nguyên đặc hiệu type (serotype specific antigen) và chịu trách nhiệm cảm ứng tạo kháng thể trung hòa VP3 là kháng nguyên đặc hiệu nhóm (group specific antigen) của 2 serotype và chỉ được phát hiện bởi các kháng thể không trung hòa (non-neutralising antibodies) trong phản ứng chéo giữa serotype 1 và serotype 2 VP4 là protease của virus tham gia vào quá trình phân cắt polyprotein (cắt serine-lysine) Khung nhỏ sẽ mã hóa cho

protein không cấu trúc VP5, không cần thiết cho quá trình sao chép virus in vitro

nhưng lại quan trọng đối với khả năng gây bệnh của virus (Mundt và cs, 1997)[24] Theo sự phân loại mới nhất hiện nay IBDV được xếp vào nhóm virus có chứa RNA

và là thành viên đại diện đầu tiên của nhóm Avibirnavirus (Leong và cs, 2000) [21]

Căn cứ vào trọng lượng phân tử protein và nơi vật chủ để phân lập virus mà người ta chia virus Gumboro thành ít nhất type 1 ở gà, type 2 ở gà tây 3 serotype, type 3 là type phụ của type 1 trong đó serotype 1 đóng vai trò chủ yếu trong quá trình chủ yếu gây bệnh vì chúng chứa VP2 và VP3

Cho đến nay người ta coi tất cả các loại IBDV thuộc 2 serotype: 1 và 2 Hai serotype của IBDV có thể được phân biệt bằng phản ứng trung hòa virus

Những nghiên cứu sau này đã chứng minh rằng các kháng thể đơn dòng đối với VP3 được coi là đặc trưng cho cả 2 serotype và VP2 đặc hiệu có tính quyết định

độc lực của virus Trên VP2 người ta phát hiện ra có một thể cấu tạo epitope trung

hòa phụ thuộc (gián đoạn) và một thể cấu tạo epitope độc lập (liên tục) ở trên VP3 qua việc phát hiện ra kháng thể đối các epitope kể trên ở gà con khi có miễn dịch thụ động bảo hộ

Một lần nữa càng chứng tỏ VP2 là thành phần protein kháng nguyên chủ yếu của virus Loại protein này kích thích cơ thể vật chủ sinh ra kháng thể kết tủa nên

được gọi là kháng nguyên đặc hiệu nhóm (GS kháng nguyên) Loại kháng nguyên

này khi kết hợp với kháng thể đặc hiệu sẽ tạo nên phản ứng kết tủa dùng để chẩn

đoán và phát hiện bệnh Ngoài ra, có kháng nguyên kích thích cơ thể sinh ra loại

kháng thể trung hòa và được gọi là kháng nguyên đặc hiệu type (TS kháng nguyên) Khi TS kháng nguyên kết hợp với kháng thể đặc hiệu sẽ tạo ra phản ứng trung hòa làm vô hiệu hóa hoạt động của virus, do vậy người ta dùng phản ứng này vào định tính, định lượng kháng thể đặc hiệu trong việc chẩn đoán kiểm tra miễn dịch bệnh

Điều quan trọng hơn cả là trong phức hợp TS protein có một thành phần quyết định

tính gây bệnh của virus, nói cách khác TS kháng nguyên quyết định độc lực của virus theo type huyết thanh giúp con người giám định và phân biệt virus

Serotype 1 bao gồm các chủng virus cường độc Gumboro gây bệnh cho gà, tùy thuộc vào mức độ độc lực, người ta phân ra làm 4 nhóm chính: nhóm cường độc cao (very virulent group), nhóm cổ điển (classical group), nhóm biến đổi (variant group) và nhóm nhược độc (attenuated group) (Wu và cs, 2007) [30] Giữa các chủng trong cùng một serotype 1 có thể có mức độ cộng đồng kháng nguyên không

đều nhau, nhiều trường hợp chủng này chỉ cho 30% miễn dịch chéo với chủng khác

Serotype 2 bao gồm tất cả các chủng IBDV gây nhiễm và được phân lập ở gà tây Chúng không gây bệnh ở gà nhưng có thể gây nhiễm, cũng tương tự các chủng

ở type 1 không gây bệnh cho gà tây nhưng có thể tồn tại ở gà tây để lan truyền bệnh

cho gà

Hai serotype này có sự khác biệt nhau về kháng nguyên (đoạn B của hai serotype tương đồng cao nhưng mức độ tương đồng của đoạn A rất thấp), vì vậy chúng không gây miễn dịch chéo cho nhau Hơn nữa sự tương đồng về kháng nguyên giữa các biến chủng trong cùng một serotype cũng chỉ đạt khoảng 30% Hai serotype 1 và 2 chỉ có thể phân biệt bằng các phản ứng trung hòa virus mà không phân biệt được bằng các phản ứng huyết thanh học khác như kháng thể huỳnh quang hoặc miễn dịch đánh dấu enzyme (ELISA) Miễn dịch chống serotype

2 không bảo hộ được gà với serotype 1 Thử nghiệm ngược lại không thực hiện

được vì không có chủng độc lực serotype 2 nào có thể sử dụng để công cường độc

Virus có thể nuôi cấy trên phôi gà (9 - 11 ngày tuổi) bằng cách tiêm vào màng nhung niệu (chorioallantoic membrance - CAM) Virus gây chết phôi sau 3 - 5 ngày Bệnh tích đặc trưng: màng liệu sung huyết, xuất huyết, sưng dầy lên, phôi còi cọc, xuất huyết dưới da, gan xuất huyết và hoại tử, thận hoại tử, lách nhạt màu và có các điểm hoại tử

Nuôi cấy trên môi trường tế bào phôi gà, gà tây, vịt, thận thỏ, thận khỉ nhưng virus không thích ứng ngay trong lần nuôi cấy đầu tiên và phải qua vài lần cấy chuyển mù (blind passage) (các chủng phân lập từ gà: 2 - 3 lần; các chủng phân lập

từ gà tây: 3 - 10 lần) Nếu cấy chuyển tiếp đời nhiều lần trên môi trường tế bào tổ chức thì độc lực của virus giảm dần, có thể sư dụng làm giống vaccine

Nuôi cấy trên động vật: gà 3 - 6 tuẩn tuổi, bằng cách nhỏ mắt, nhỏ mũi hay nhỏ vào hậu môn Sau 2 - 3 ngày gà có các triệu chứng, bệnh tích như ngoài tự nhiên (Nguyễn Bá Hiên và cs, 2012) [5]

Virus có sức đê kháng cao trong tự nhiên, có thể sống sót trong những điều kiện chăn nuôi và khí hậu rất khác nhau Có thể sống bốn tháng trong điều kiện chăn nuôi bình thường, bị vô hoạt ở độ pH ≥ 12 và pH ≤ 2 Virus bị hủy diệt ở nhiệt

độ 56°C trong 5 giờ, 60°C trong 30 phút, 70°C virus chết nhanh chóng Các chất hóa học thong thường có thể diệt được virus như formalin 0,5% (sau 6 giờ); phenol 0,5% (sau 1 giờ); chloramin 0,5% (sau 10 phút) Trong phân rác, chất độn chuồng virus có thể tồn tại khá lâu (122 ngày), đây chính là nguồn tàng trữ virus khiến cho bệnh hay sảy ra (Nguyễn Bá Hiên và cs, 2012) [5]

2.1.4 Đặc điểm dịch tễ học

Trong tự nhiên: gà nhà và gà tây là hai loại mẫn cảm với virus Gumboro, trong

đó type 1 gây bệnh cho gà nhà và type 2 gây bệnh cho gà tây

Bệnh xảy ra quanh năm nhưng tập chung nhiều vào mùa lạnh, tỷ lệ mắc bệnh trong đàn cao có thể lên tới 100%, tỷ lệ chết từ 0 - 30% có thể >50% nếu không có biện pháp phòng trị kịp thời (Phạm Sĩ Lăng và Nguyễn Thiện, 2004) [9]

Khi mắc bệnh chúng đều có biểu hiện lâm sàng và bệnh tích điển hình của Gumboro Khi virus xâm nhập vào đúng loại gà mẫn cảm nào thì bệnh Gumboro ở

gà đó trầm trọng hơn Nói như vậy không có nghĩa virus gây bệnh Gumboro ở gà nhà không gây bệnh ở gà tây và virus gây bệnh Gumboro ở gà tây không gây bệnh cho gà nhà, mà trong thiên nhiên nhiều trường hợp khi phân lập căn nguyên gây bệnh Gumboro ở gà nhà, người ta lại tìm thấy serotype 2 ở gà tây Do vậy có thể nói

gà nhà và gà tây là hai nguồn tàng trữ tiềm tàng của 2 type virus Gumboro Người ta cũng đã phát hiện thấy IBDV ở gà Nhật và chim bồ câu sống hoang dã ở Châu Phi (Kasanga và cs, 2008) [ 19] Một số loài chim hoang dã như vịt trời, ngỗng trời, chim ác cũng có thể bị nhiễm virus Gumboro, bị bệnh và chết virus Gumboro phân lập từ những loài chim hoang dã này có thể gây bệnh trở lại cho gà mẫn cảm, gây chết tới 60% và làm teo túi Fabricius (Jeon và cs, 2008) [18]

Trong phòng thí nghiệm: khác với một số virus gây bệnh ở động vật khác là có thể gây bệnh dễ dàng trên chính động vật mẫn cảm hoặc trên một số động vật cảm thụ phòng thí nghiệm như chuột lang, chuột bạch, thỏ và một số động vật khác Với virus Gumboro, ngoài gia cầm mẫn cảm (gà 3 - 6 tuần tuổi), virus chỉ có khả năng

gây bệnh trên phôi gà hoặc môi trường tế bào xơ phôi gà mà không có khả năng gây bệnh trên các động vật cảm thụ phòng thí nghiệm

Virus Gumboro xâm nhập vào cơ thể bằng nhiều đường, chủ yếu qua đường tiêu hóa, ngoài ra còn qua đường hô hấp Có thể lây trực tiếp từ con này sang con khác hoặc lây qua thức ăn, nước uống hoặc tiếp xúc với môi trường nhiễm bệnh Trong phòng thí nghiệm có thê gây thực nghiệm bằng cách nhỏ mắt, nhỏ mũi, nhỏ hậu môn, miệng Vào những năm 1985 - 1989 tại Trung tâm nghiên cứu gia cầm Thụy Phương

- Viện Chăn nuôi quốc gia, Lê Văn Năm (2004) [13] đã quan sát thấy lứa gà cùng lứa tuổi gồm nhiều ô gà do cùng một người nuôi tại các ô chuồng khác nhau xen kẽ với các lứa gà khác nhau trong cùng một dãy chuồng, thì khi bệnh Gumboro nổ ra, thông thường nổ ra ở gà cùng một lứa tuổi, sau đó mới lan sang những ô gà bên cạnh có độ tuổi khác nhau, điều đó chứng tỏ bệnh Gumboro xảy ra và được lan truyền chủ yếu qua con đường tiếp xúc trực tiếp, qua thức ăn, nước uống…Bệnh lan

từ chuồng này sang chuồng khác là do người chăn nuôi, dụng cụ chăn nuôi, nguồn thức ăn, nước uống bị ô nhiễm Chuột bọ, chó mèo thú hoang và một số côn trùng khá đều có thể đóng vai trò lan truyền bệnh

Virus có nhiều nhất trong túi Fabricius, ngoài ra cũng có ở gan, lách, thận… Dụng cụ chăn nuôi, chất độn chuồng, thức ăn, nước uống thừa, phân… là nơi tiềm tàng mầm bệnh (Nguyễn Bá Hiên và cs, 2012) [5]

Qua con đường tiêu hóa, do thức ăn, nước uống virus xâm nhập vào hệ tiêu hóa Tại đây, chúng được các tế bào đại thực bào tiếp nhận, đồng thời tiếp xúc với

tế bào lympho B còn non là loại mẫn cảm với virus, bắt đầu thực hiện quá trình

nhân lên, quá trình này là sự nhân lên cục bộ, hay sự nhân lên sơ cấp

Chỉ sau 6 - 8 giờ, một số lượng virus Gumboro đáng kể được giải phóng và xâm nhập vào hệ tuần hoàn Đây là lần thứ nhất virus xuất hiện trong máu, nhưng người ta không gọi là sự nhiễm trùng máu vì số lượng virus không nhiều

Hệ tuần hoàn chỉ làm nhiệm vụ vận chuyển virus đi khắp cơ thể mà trước hết

là đến lách, túi Fabricius và một số cơ quan khác Thông thường 9 - 11 giờ sau khi vào hệ tiêu hóa, một số lượng lớn virus Gumboro đã có mặt trong túi Fabricius và bắt đầu tấn công các loại hình tế bào lympho B, đây là quá trình nhân lên toàn phần

hay sự nhân lên thứ cấp

Số lượng lớn virus Gumboro được giải phóng đã xâm nhập vào hệ tuần hoàn lần thứ hai, lúc này người ta coi sự có mặt của virus Gumboro trong máu là sự nhiễm trùng máu (viremia)

Khi virus xâm nhiễm không những gây tổn thương túi Fabricius, gây suy giảm khả năng tạo kháng thể, mà khi nhập vào đường huyết ồ ạt gây nên hiện tượng nhiễm trùng máu, làm gà sốt cao phải uống nhiều nước để tỏa nhiệt

Vì sốt cao, háo nước, sinh loạn khuẩn đường ruột… làm cho cơ thể mất cân bằng

vi sinh, cho nên hầu như 100% các trường hợp gà bị Gumboro đều bị bệnh thứ phát

Gà cảm nhiễm quá sớm với virus Gumboro thì rất dễ thụ cảm đối với viêm phế quản truyền nhiễm, thương hàn,…

virus Gumboro tác động gây nên hiện tượng bệnh lý đông máu, do vậy trong

hệ tuần hoàn xuất hiện các cục huyết khối, làm nghẽn mạch mao quản, chủ yếu là vùng niêm mạc túi Fabricius và ở một số nơi khác, dẫn đến hiện tượng sung huyết Khi không chịu nổi áp suất gia tăng của máu, mao mạch bị đứt gây nên hiện tượng xuất huyết

Sự xuất huyết thường gặp ở các vùng cơ đùi, cơ lườn thành tia, thành vệt dài

và có màu tím, màu hồng, đồng thời ở túi Fabricius, lách, gan cũng có thể xảy ra trường hợp tương tự

Cứ như vậy, sự sung huyết, xuất huyết từ quy mô nhỏ (từng điểm li ti) đến quy

mô lớn (vệt, mảng) và có màu sắc đa dạng từ hồng đến tím hoặc nâu đen

Một số biến đổi bệnh lý trong một số cơ quan có thể dần dần mất đi và dần hồi phục chức năng vốn có, nhưng đối với túi Fabricius sự phục hồi không xảy ra Do virus Gumboro phá hủy túi một cách trầm trọng, virus nhân lên trong tế bào lympho

B, phá hủy chúng làm giảm đáng kể số lượng tế bào này (Sharma và cs, 2000) [27]

Số lượng tế bào lympho mất đi không được bì đắp nên chức năng miễn dịch của túi bị mất một phần hoặc hoàn toàn dẫn đến sự suy giảm miễn dịch (immunosuppression)

Kết quả là hệ thống tạo miễn dịch bị tổn thương, không đủ khả năng chống lại các yếu tố gây bệnh, cũng như việc đáp ứng miễn dịch bằng vaccine làm cho sức đề kháng của cơ thể giảm sút một cách nghiêm trọng, vì thế bệnh Gumboro đã được một số tác giả gọi là “bệnh suy giảm miễn dịch”

Một số tác giả khác gọi là bệnh “SIDA” của gà Mức độ suy giảm miễn dịch phụ thuộc vào độc lực của virus, thời gian và điểm xâm nhập vào cơ thể gà (Terasaki và cs, 2008) [28]

Hình 2.1: Cơ chế nhân lên - sinh bệnh của IBDV

Trước đây, trong các tài liệu thông báo gà bị bệnh Gumboro thường ở lứa tuổi

3 - 6 tuần tuổi, ngoài lứa tuổi từ 3 - 6 tuần ở thể lâm sàng bệnh đã nổ ra ở gà 8 ngày tuổi và 96 ngày tuổi, tác giả cho biết gà Rốt Ri chuyên dụng được lai tạo từ nên gà

Ri Việt Nam và gà Rốt của Hungari có sức đề kháng tốt nhất đối với bệnh Gumboro

so với các giống khác Điều đáng chú ý trong cùng một giống gà có cùng phẩm chất

về năng suất giống thì những giống mới lai tạo có xu hướng dễ mắc bệnh Gumboro

IBDV Xâm nhập qua đường tiêu hóa

Hệ tiêu hóa

Đại thực bào, Lympho B

(virus nhân lên cục bộ)

Giải phóng Xâm nhập hệ tuần hoàn lần 1

Theo hệ tuần hoàn Túi Fabricius cùng với các quan khác (virus nhân lên mạnh, tiêu diệt lympho B, các tế bào

có thẩm quyền miễn dịch, phá hủy túi Fabricius)

Xâm nhập hệ tuần hoàn lần thứ 2

hơn các dòng được lại tạo trước Tuy nhiên tác giả chưa phát hiện ra sự khác nhau,

độ mẫn cảm đối với bệnh Gumboro giưa gà siêu thịt và siêu trứng

Cũng theo Lê Văn Năm (1996) [11] tại xã Hiệp Thuận - Đức Thọ - Sơn Tây

có một gia đình nuôi khá nhiều gà các loại cùng một lúc, trong đó cơ hơn 100 gà giống AA, hơn 300 gà giống BE và gần 200 gà Ri Việt Nam Chúng được nuôi chung cùng một dãy chuồng, ngăn cách nhau bằng liếp tre Tại thời điểm điều tra gia đình, đàn gà công nghiệp AA + BE đang bị bệnh Gumboro rất nặng, nhưng đàn

gà Ri vẫn khỏe mạnh, ăn uống bình thường Xác định đàn gà công nghiệp có độ tuổi từ

24 và 39 ngày, còn đàn gà Ri gồm nhiều lứa khác nhau từ 22 - 35 ngày Điều đó chứng

tỏ gà Ri Việt Nam có sức đề kháng khá tốt với bệnh Gumboro trong cùng một điều kiện chăn nuôi

2.1.4.6 Ảnh hưởng của tuổi gà và giới tính đối với bệnh Gumboro

Ngày nay, do căn nguyên gây bệnh Gumboro thay đổi dễ thích nghi và tồn tại nên sinh ra khá nhiều biến chủng và lưu hành rộng khắp, khiến nguy cơ gà bị nhiễm mầm bệnh này một cách dễ dàng hơn và phụ thuộc vào tính độc lực của virus gây bệnh như tuổi gà bị nhiễm mầm bệnh mà biểu hiện lâm sàng ngày càng phức tạp hơn

Nếu như trước đây gà bị bệnh thường ở thể lâm sàng là chủ yếu và gà thường

bị bệnh ở lứa tuổi từ 3 - 6 tuần, thì ngày nay thể lâm sàng có thể bị sớm hơn dưới 3 tuần tuổi gà thường bị bệnh có biên độ lớn Ngoài thể lâm sàng ra, bệnh còn khá phổ biến ở thể ẩn bệnh và gà thường bị bệnh ở dưới 3 tuần tuổi

Sau gần 15 năm nghiên cứu (1982 - 1997), Lê Văn Năm (2004) [13] kết luận không có sự khác biệt nhau về độ mẫn cảm đối với mầm bệnh, tỷ lệ mắc bệnh, tỷ lệ chết ở bệnh Gumboro gà trống và gà mái

2.1.5 Lâm sàng học bệnh Gumboro

Do sự đa dạng về các chủng virus Gumboro với các biến chủng phức tạp có

độc lực gây bệnh khác nhau đã làm cho bức tranh lâm sàng bệnh Gumboro ngày

nay khác xa với những năm trước đây Ở nước ta cũng như trên thế giới bệnh Gumboro thể hiện chủ yếu ở 2 thể lâm sàng và không lâm sàng

2.1.5.1 Thể không có biểu hiện lâm sàng (thể ẩn)

Những năm đầu của thập kỷ 90 thể ẩn bệnh trở nên khá phổ biến và là mối đe dọa nguy hiểm Bởi vì thể ẩn bệnh Gumboro chỉ nổ ra ở gà dưới 3 tuần tuổi, khi các thành phần của hệ thống miễn dịch chưa hoàn chỉnh về cấu trúc, chưa thành thục về chức năng tạo miễn dịch giúp cơ thể chống đỡ nhiều bệnh tật thì lại bị virus Gumboro tấn công phá

vỡ cấu trúc, hủy hoại khả năng đáp ứng miễn dịch, gây suy giảm miễn dịch, do đó gà không những dễ bị bệnh Gumboro mà còn dễ bị mắc những bệnh khác làm tổn thất lớn

đến kết quả chăn nuôi Với những lý do trên cho phép khẳng định thể ẩn bệnh

Gumboro nguy hiểm hơn thể lâm sàng

Đặc điểm lâm sàng thể ẩn bệnh:

- Thông thường thể không lâm sàng do những chủng cũng như biến chủng virus có độc lực thấp hoặc trung bình gây nên

- Triệu chứng bệnh thể hiện không rõ nét: gà khật khừ, mệt mỏi đột ngột, giảm

ăn, ủ rũ, tụm đống vào một góc chuồng, sốt cao, uống nhiều nước, kêu lạ, sợ hãi, một số

gà ỉa chảy phân trắng như bệnh lỵ, nếu không quan sát kỹ ta có cảm giác như gà bị gió lùa hoặc bị lạnh Thế nhưng chỉ sau 2 - 3 ngày sức khỏe đàn gà trở lại bình thường với tỷ

lệ chết không đáng kể từ 0 - 5% (nhiều trường hợp gà không chết con nào)

2.1.5.2 Thể lâm sàng

Không phụ thuộc vào mức độ độc lực của virus gây bệnh Gumboro Thể lâm sàng bệnh mang một số đặc điểm chung như sau:

- Gà bị bệnh thường ở lứa tuổi 3 - 8 tuần tuổi, song vẫn có trường hợp sau 8 tuần

- Thời gian nung bệnh rất ngắn, trong 24 giờ sau khi nhiễm mầm bệnh đã có biến đổi vi thể ở túi Fabricius và chỉ sau 2 - 3 ngày đã xuất hiện triệu chứng lâm sàng

- Bệnh xảy ra hết sức nhanh chóng, đột ngột, tỷ lệ gà ốm cao, tỷ lệ chết theo biểu đồ hình chuông, 100% số đàn gà bị bệnh đều bị bội nhiễm bởi bệnh thứ phát, nên biểu hiện lâm sàng phức tạp hơn

- Dù có hay không có sự can thiệp của bác sĩ thú y, những con gà sống sót hồi phục nhanh, chỉ sau 8 - 10 ngày kể từ khi phát bệnh gà đã khỏe hoàn toàn trở lại

Quá trình diễn biến bệnh như sau:

- Ngay sau khi virus vừa mới xâm nhập túi Fabricius gà đã có biểu hiện: cơ vùng hậu môn co bóp nhanh, mạnh không bình thường, gà có phản xạ như muốn đi ngoài như khó đi hay không thực hiện được Đây là triệu chứng đặc trưng đầu tiên giúp chúng ta phát hiện bệnh Gumboro sớm

- Sau đó không lâu gà bắt đầu có biểu hiện sốt rất cao Đó là lúc virus gây bệnh đã nhập vào đường huyết, tế bảo lympho B Tại thời điểm này chúng sinh sản rất nhanh và tằng gấp nhiều lần về số lượng IBDV, các biểu hiện của nhiễm trùng

Hình 2.2: Biểu đồ diễn biến gà chết trong quá trình phát triển bệnh Gumboro

- Cũng do sốt cao nên nhiều con nằm bẹp, bệnh tiến triển rất nhanh, chỉ sau

6 - 8 giờ kể từ con ốm đầu tiên trong đàn gà căn bản thay đổi về mặt thể trạng, trông

chúng xơ xác, xù lông run rẩy, con thì nằm ngoẹo đầu sang một bên, chúc mỏ vào cánh, yếu dần rồi chết

Số gà chết phụ thuộc vào độ độc lực của IBDV, phụ thuộc vào tình trạng sức khỏe đàn gà trước khi xảy ra bệnh, tuổi gà mắc bệnh (gà càng ít ngày tuổi thì chết càng nhiều, gà lớn tuổi thì chết ít hơn)… Lý do dẫn đến gà chết nhiều hay chết ít còn phụ thuộc vào việc chăm sóc nuôi dưỡng đàn gà Do bản chất nguyên nhân dẫn

đến cái chết của gà bị bệnh Gumboro là sốt cao và thiếu nước nên những con gà sốt

quá cao nằm bẹp dưới sàn, nếu không được chăm sóc chu đáo như nhốt riêng, bơm nước có thuốc điện giải và trừ một số bệnh thứ phát thì tỷ lệ chết rất cao Thông thường Gumboro ở thể lâm sàng gây chết 5 - 30% Song có một số chủng có thể gây chết 40 - 60 % Nếu bị bội nhiễm tỷ lệ chết có thể lên cáo tới >80% quá trình diễn biến tỷ lệ chết ở gà bị bệnh gumboro bắt đầu vào cuối ngày thứ 2 sau khi nhiễm virus và đỉnh cao vào ngày thứ 3, 4 và một phần ngày thứ 5, sau đó tỷ lệ chết giảm dần đến hết ngày thứ 8 - 10 thì kết thúc

2.1.6 Triệu chứng lâm sàng

Đối với đàn gà mẫn cảm, thời gian nung bệnh xảy ra ngắn, khoảng 2 - 3 ngày Triệu chứng đầu tiên là trong đàn gà xuất hiện một số con quay đầu tự mổ vào hậu môn Gà có biểu hiện hoảng loạn, có tiếng kêu khác thường Sau 2 - 3 ngày thấy nền chuồng ướt nhanh do gà bị ỉa chảy, gà uống nhiều nước, mất định hướng,

bỏ ăn, rúc mỏ vào cánh, có khi gục sang một bên, thích nằm, mắt lim dim mỏi mệt

và thường dồn về một góc chuồng, lông gáy dựng ngược, đầu gối khuỳnh ra, hậu môn hạ thấp xuống, toàn bộ cơ bắp rung lên, phân loãng, nhiều nước, trắng, nhớt

Gà bỏ ăn, lúc đầu nhiệt độ tăng, sau giảm và nếu không qua khỏi thì gà chết trong vòng vài ngày

Do đặc tính truyền ngang rất mạnh, virus Gumboro gây nên tỷ lệ nhiễm trong

đàn khi đạt 100% Thông thường từ ngày thứ 3 sau triệu chứng lâm sàng đầu tiên,

trong đàn bắt đầu có cá thể chết và chết ồ ạt trong vòng 5 - 7 ngày, sau đó giảm chết

rất nhanh, thường 10 - 12 ngày có thể dứt bệnh, tuy nhiên các cá thể bị bệnh qua khỏi thông thường bị tổn thương quá nặng, đặc biệt là hệ miễn dịch dẫn đến suy giảm miễn dịch (Lê Văn Năm, 2004) [13]

2.1.7 Bệnh tích

Trước đây các biến đổi bệnh tích đại thể thường tập trung ở thận tần số biến

đổi ở thận trên gà bị bệnh chiếm tỷ lệ khá cao, do đó bệnh Gumboro đã được gọi là

bệnh viêm thận truyền nhiễm Tuy nhiên ngày nay các biến đổi ở thận ít gặp hơn so với những cơ quan khác như: dạ dày tuyến, túi Fabricius, cơ… Biến đổi ở bệnh Gumboro dạng cổ điển cũng như thể lâm sàng ngày nay rất đặc trưng, cho phép chúng ta có thể dựa hoàn toàn vào đó để khẳng định bệnh, mà không cần những phương pháp trong phòng thí nghiệm khác

Biến đổi bệnh lý đại thể ở túi Fabricius:

Túi Fabricius là một trong những cơ quan trọng tâm có những biến đổi đặc trưng nhất:

Sau 72 giờ bị nhiễm bệnh, virus Gumboro có độc lực mạnh đã có thể gây bệnh với bệnh thích đại thể điển hình: túi Fabricius thường sưng rất to, có kích thước và trọng lượng gấp 2 - 3 lần bình thường Xung quanh túi có thùy thũng keo nhày vàng, có khi có bọc dịch thẩm xuất bọc quanh túi Fabricius Nếu chích hết nước, túi

lộ rõ ra, căng tròn, sưng phù Túi chuyển màu sắc từ vàng sang sang màu trắng đục

Túi dễ cấu, dễ bục, các nếp gấp múi khế sưng không rõ nét Niêm mạc sưng dầy lên làm cho dung tích khoang túi trở nên hẹp lại

Có nhiều cá thể bị bệnh Gumboro, hiện tượng viêm sưng đi kèm với hiện tượng xuất huyết và thẩm xuất dịch vào trong long túi Fabricius, niêm mạc túi có

điểm xuất huyết, đôi khi thành vệt, niêm mạc túi chuyển từ màu trắng sang màu

thâm tím, nâu đen

Túi Fabricius bắt đầu tăng về kích thước và trọng lượng trong khoảng 48 - 72 giờ sau khi nhiễm do thủy thũng và xuất huyết Kích thước túi có thể tăng gấp 2 - 3 lần so với bình thường Vào ngày thứ 4 sau nhiễm, kích thước túi vẫn còn to gấp

đôi, sau đó mới nhỏ dần lại Ngày thứ 5 sau nhiễm trọng lượng của túi bằng trọng

lượng ban đầu và sau đó bắt đầu teo đi Đến ngày thứ 8 trọng lượng túi chỉ bằng 1/3 trọng lượng ban đầu

Mổ khám:

Khi mổ khám ngay sau khi gà mới bị nhiễm bệnh, túi Fabricius đang trong quá trình sưng lên, bổ đôi túi thấy có dịch nhày màu trắng Các nếp nhăn của túi còn tương đối đồng đều và bắt đầu có một số điểm xuất huyết li ti

Mổ khám vào ngày thứ 2 túi Fabricius đã sưng to gấp rưỡi so với bình thường nằm gọn trong bao dịch nhầy Nhìn từ ngoài vào đã thấy rõ vô số điểm xuất huyết,

bổ đôi túi thấy các nếp nhăn không đều (múi sưng rất to, múi sưng nhỏ, đôi khi có

sự liền phẳng giữa các múi) xuất huyết niêm mạc bề mặt túi trông rất rõ tạo thành từng đám hoặc thành vệt

Mổ ngày thứ 3: túi Fabricius đã căng mỏng, to gấp nhiều lần so với bình thường và có nhiều chất nhày nhớt Khi bổ đôi túi không những thấy rõ những biến

đổi như ở ngày thứ 2 với mức độ bệnh tích nặng hơn, mà nhiều trường hợp thấy cả

cục máu đông màu đỏ hoặc màu đen chiếm đầy khoang túi

Mổ ngày thứ 4: túi Fabricius bắt đầu teo lại hoặc giữ nguyên độ lớn như ngày thứ 3, toàn bộ túi bơi trong bao nước thẩm xuất vàng ngà Các di chứng biến đổi từ các phản ứng viêm, chảy máu nội, xác các tế bảo niêm mạc của túi bị chết đã tạo thành một huyễn dịch đặc quánh màu vàng ngà hoặc trắng ngà

Mổ ngày thứ 5 và thứ 6: thấy rõ túi Fabricius bị teo lại Trọng lượng của túi lúc này chỉ bằng trọng lượng lúc ban đầu trước khi bị bệnh, chứ một nội chất màu trắng ngà, khô như bã đậu

Những ngày tiếp theo túi giảm nhanh về khối lượng chỉ còn 1/3 trọng lượng so với ban đầu

Những quan sát mới đây cho thấy có một số biến chủng thuộc serotype 1 khi gây bệnh chúng phá hủy túi Fabricius một cách nhanh chóng đến mức độ túi không kịp sưng lên mà bị teo đi, do vậy khi mổ khám gà bệnh trong khoảng 3 ngày đầu tiên có một số trường hợp túi Fabricius bé hơn bình thường, túi bị teo

Một số tác giả khác cho rằng: khi gà bị bệnh Gumboro trước 3 tuần tuổi, đặc biệt là ở thể không điển hình túi Fabricius cũng thường bị teo lại, đây chính là đặc

điểm bệnh tích của thể không lâm sàng

Hệ cơ:

Ngay sau khi virus xâm nhập vào đường máu chúng được tải đến hầu hết các

cơ quan trong cơ thể, nhưng chỉ khu chú lại ở túi Fabricius Tại đây chúng sinh sản rất nhanh rồi theo đường lympho trở về máu với số lượng virus gấp nhiều lần so với ban đầu Virus không tồn tại lâu trong máu mà bị vô hiệu lực do các thành phần của

hệ thống miễn dịch hoặc bị bao vây trung hòa bởi các kháng nguyên kháng thể sinh

ra do chính bản thân virus là kháng nguyên kích thích Những xác chết của virus

được phân hủy và bài xuất ra độc tố gây xuất huyết trong cơ và nhiều cơ quan khác

Vì thế khi lột da gà ra thường thấy rất rõ xuất huyết trên bề mặt cơ ở vùng đùi, ngực, mức độ xuất huyết phụ thuộc chủ yếu vào độc lực của virus gây bệnh và thời

điểm mổ khám Xuất huyết có thể ở dạng phân tán li ti, có thể thành vệt hoặc thành đám đen thẫm rất đặc trưng cho bệnh Gumboro

Gà bệnh bị mất nước nên cơ khô rất nhanh, chỉ vài phút sau khi lột da, cơ ngực của gà đã khô nhăn lại, có màu thẫm, đặc biệt có xuất huyết những đám lấm chấm hoặc thành từng vệt, có khi các vệt xuất huyết hợp lại tạo thành mảng lớn

Biến đổi ở thận và đường niệu sinh dục:

Các biến đổi ở thận và đường niệu sinh dục thường xảy ra muộn hơn so với các biến đổi ở túi Fabricius và đường ruột Khi mổ khám gà chết hoặc sắp chết (sau

2 - 3 ngày bị bệnh) thường thấy 2 đường tiết niệu chứa đầy urat trắng, thận sưng to màu nâu thẫm nổi rõ những điểm hoặc đám xuất huyết Lúc này cần phân biệt với viêm phế quản truyền nhiễm thể Uraemia Khi túi Fabricius bắt đầu teo lại thì thận cũng giảm độ sưng và trở nên nhợt nhạt hơn

Những bệnh tích ở thận chỉ gặp ở gà bị chết hoặc gà đang tiến triển

Bệnh tích đường tiêu hóa:

- Dạ dày tuyến: bị sưng dày lên do tăng sinh, trên bề mặt niêm mạc thấy viêm xuất huyết giống như ở Newcastle Xuất huyết dạ dày tuyến ở bệnh Gumboro có khi

là một dải nằm giữa diều và dạ dày tuyến, có khi là dải phân cách giữa dạ dày cơ với dạ dày tuyến giống hệt như ở bệnh Newcastle, cũng có khi xuất huyết tràn lan trên toàn bộ bề mặt niêm mạc

Để phân biệt xuất huyết dạ dày tuyến của bệnh Gumboro với các bệnh như:

Newcastle, Marek… cần phải căn cứ vào đặc điểm xuất phát nơi xuất huyết Nếu xuất huyết tràn lan trên bề mặt của dạ dày tuyến (trừ đỉnh ống tuyến), mà không phụ thuộc vào vùng xuất huyết thì đó là bệnh Gumboro

Nếu chỉ thấy xuất huyết trên đỉnh ống tuyến và cũng không phụ thuộc vào vùng xuất huyết thì đó là bệnh Newcastle

Nếu thấy xuất huyết cả đỉnh ống tuyến và mô niêm mạc giữa các ống tuyến (tràn lan) thì đó là xuất huyết thuộc bệnh ghép giữa Gumboro và Newcastle

Xuất huyết dạ dày tuyến ở bệnh Marek ít gặp ở gà dưới 2 tháng tuổi nếu có thì luôn kèm theo những biến đổi bệnh lý đặc trưng cho bệnh Marek như: dạ dày tuyến tăng sinh dày lên gấp nhiều lần

- Ruột: các biến đổi bệnh lý ở ruột của bệnh Gumboro khá đa dạng, phong phú và điển hình Ruột căng chứa nhiều nước, giai đoạn sau chứa nhiều chất nhày màu trắng đục như mủ hoặc các nội chất nhớt vàng xanh, vàng trắng, đặc biệt có viêm xuất huyết lan tràn dọc theo đường ruột đến tận hậu môn

Phụ thuộc vào bệnh thứ phát tiếp theo để có thêm những biến đổi bệnh tích

Lách:

Gà khi bị nhiễm virus Gumboro sau 2 - 3 ngày, lách sưng lên, nhưng sau đó lại giảm đi về thể tích như túi Fabricius Nhưng do sự phục hồi của lách rất nhanh nên khi mổ khám vào giai đoạn cuối của bệnh nhiều khi không thấy những biến đổi bệnh lý đặc thù

Các cơ quan còn lại như tim, gan, phổi, dạ dày cũng có bệnh tích nhưng không điển hình Đôi khi quan sát được hiện tượng xuất huyết ở niêm mạc chỗ tiếp giáp giữa dạ dày cơ và dạ dày tuyến

2.1.7.2 Bệnh tích vi thể

Bệnh tích vi thể xuất hiện sớm ở các cơ quan có cấu trúc từ tổ chức lympho và các cơ quan tạo miễn dịch như túi Fabricius, tuyến ức (thymus), lách, hạch, các mô lympho ở ruột, chỉ trong vòng vài giờ đến vài chục giờ sau khi virus cường độc Gumboro xâm nhập vào cơ thể

Biến đổi vi thể ở túi Fabricius:

Có sự tập trung của đại thực bào và các tế bào lympho trong vòng 4 - 5 giờ sau khi gây nhiễm qua đường tiêu hóa và sau 11 giờ xuất hiện những tế bào lympho bị nhiễm virus, nếu gây nhiễm trực tiếp vào túi Fabricius chỉ sau 6 giờ đã xuất hiện những tế bào lympho bị nhiễm virus

24 giờ sau khi nhiễm các tế bào lympho trong túi Fabricius đã bị thoái hóa, các

tế bào lympho ở vùng tủy của nang đã bắt đầu quá trình hoại tử Virus tấn công và phá hủy các tế bảo lympho B non và lympho B trưởng thành, nên chỉ trong thời gian rất ngắn lượng tế bào lympho B đã giảm đáng kể Trung tâm hoại bị hoại tử ngày càng tăng, các vách nang giảm dần, nang bị thu hẹp lại, có các hình tròn, chữ nhật, ô van khác nhau Các trung tâm hoại tử xuất hiện không bào (vacuole), không còn tế bào lympho hoặc chỉ còn rất ít tập trung ở vùng ngoại vi nang Thay vào các

vị trí của tế bào lympho là các tế bào heterophil, các mảnh tế bào bị phân hủy một phần, các tế bào hệ lưới nội mô Toàn bộ các nang lympho bị hủy hoại và có thể quan sát thấy các mức độ khác nhau

Vào ngày thứ 3 hoặc thứ 4, sự thủy thũng, xung huyết và tập trung của các tế bào của túi làm cho túi Fabricius sưng to Sự khám phá vai trò của các tế bào lympho T trong miễn dịch bệnh lý được gây ra bởi IBDV và sự phục hồi của những

mô bị nhiễm đã cho thấy có sự xâm nhiễm của cả tế bào lympho T (CD4+) và tế bào lympho T (CD8+) làm cho số lượng lympho T tăng tối đa vào ngày thứ 7 sau khi nhiễm (Kim và cs, 2000) [20] Các tế bào T ở trong túi Fabricius ngăn cản sự nhân lên của virus trong túi trong giai đoạn đầu của bệnh, nhưng cũng thúc đẩy quá trình phá hủy mô túi và làm chậm quá trình hồi phục của mô thông qua việc giải phóng ra các cytokine gây độc tế bào (Rautenschlein và cs, 2002) [25] Khi phản ứng viêm mất dần, túi Fabricius teo đi, các nang rỗng phát triển ở vùng tủy nang túi Có sự hoại tử và thực bà của các tế bào heterophil và tương bào (plasmocyte), có sự xơ hóa của các tế bào phân cách các nang Sự tăng sinh tế bào nền biểu mô có những

đám dịch nhầy mucin trên bề mặt

Biến đổi vi thể ở lách

Lách cũng là một cơ quan mẫn cảm đối với sự có mặt của virus trong cơ thể ngay từ khi mới bị nhiễm mầm bệnh Từ 1 - 3 ngày đầu lách bị sưng lên nhờ quá trình tăng sinh nhanh chóng của tế bào lympho Nhưng vào ngày thứ 2 - 3 do quá trình thoái hóa hoại tử dưới tác động trực tiếp của IBDV các tế bào lympho tăng sinh cũng như các nang sinh lympho (túi mầm) bị triệt tiêu làm cho lách giảm đi về khối lượng và trở lại độ lớn ban đầu Đặc biệt nổi bật là các cấu trúc vi thể của lách

được phục sinh rất nhanh, nên nếu không xét nghiệm bệnh tích vào những ngày

cuối của quá trình phát triển bệnh thì ít khi thấy sự biến đổi như trên (Lê Văn Năm, 2004) [13]

Biến đổi tuyến ức và hạch hạnh nhân

Ở các tuyến ức và hạch hạnh nhân thấy sự gia tăng nhanh chóng các tế bào

lymphocyte, nhất là vào các giai đoạn đầu khi IBDV mới xâm nhập vào cơ thể Các phản ứng viêm ít xảy ra ở đây, nên tuyến ức và hạch hạnh nhân nhanh chóng trở lại bình thường

Tuyến hardarian (Harder)

Tuyến Harder có những biến đổi thường thấy ở thể ẩn bệnh khi gà còn đang ít tuổi Đặc điểm nổi bật là số lượng bào tương thấy rất ít trong tuyến Harder do virus IBDV ngăn cản sự thâm nhập của chúng vào trong tuyến

Bệnh tích ở thận và các cơ quan khác

Trước đây, thận được coi là một trong những cơ quan có nhiều biến đổi nhất

do kết quả của sự mất nước toàn cơ thể cũng như quá trình tự nhiễm độc Nhờ có sự hồi phục nhanh của thận nên các biến đổi vi thể của thận cũng xảy ra nhanh nên khi xét nghiệm vi thể ít thấy những biến đổi bệnh tích

Gan hầu như không có biến đổi đặc biệt, ngoài hiện tượng các bạch cầu đơn nhân tăng sinh tập trung quanh các mao mạch ngoại vi (Lê Văn Năm, 2004) [13]

2.1.8 Chẩn đoán bệnh

2.1.8.1 Chẩn đoán dịch tễ học

Theo Lê Văn Năm (2004) [13] bệnh Gumboro gồm 2 thể: thể ẩn bệnh thường xảy

ra từ lúc gà 1 - 3 tuần tuổi và thể lâm sàng xảy ra từ 3 - 8 tuần tuổi với các đặc điểm lây lan trực tiếp, bệnh xảy ra nhanh, đột ngột, tỷ lệ ốm và chết cao, không phụ thuộc vao giống gà, về mùa vụ…

2.1.8.2 Chẩn đoán lâm sàng

Dựa vào các đặc điểm dịch tễ học và triệu chứng, bệnh tích như đã nêu ở trên

có thể chẩn đoán bệnh một cách dễ dàng Tuy nhiên, cần chẩn đoán phân biệt với một số bệnh như Newcastle, viêm phế quản truyền nhiễm IB…(Lê Văn Năm, 2004) [13]

2.1.8.3 Chẩn đoán virus học

Túi Fabricius và lách là những cơ quan được chọn làm bệnh phẩm được nghiền trong nước sinh lý thành huyễn dịch 1/10 hoặc nước thịt Pepton, có kháng sinh sau đó ly tâm bỏ cặn lấy nước trong ở bên trên tiêm vào phôi trứng 9 - 11 ngày tuổi hoặc nuôi cấy trên tế bào xơ phôi gà, cũng có thể tiêm truyền gây bệnh cho gà thí nghiệm (Lê Văn Năm, 2004) [13]

Chẩn đoán trên phôi trứng (phân lập virus trên phôi chứng)