Công nghệ sử dụng thực vật để hấp thụ Arsen trong đất được đánh giá là thích hợp nhất do các ưu điểm như: giá vận hành thấp, vận hành đơn giản và thân thiện với môi trườngPhân lập và sàng lọc các vi sinh vật có khả năng chịu nồng độ arsen tối ưu từ hệ rễ của cây dương xỉ
TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC BÁO CÁO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP PHÂN LẬP VI KHUẨN CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG CHỊU ARSEN TRONG RỄ CÂY DƯƠNG XỈ SVTH: ĐẶNG THỊ MỸ PHƯƠNG Tháng 07 năm 2015 NỘI DUNG MỞ ĐẦU a b c d Hình 1.1 (a) Nước thải công nghiệp, (b) Nước thải y tế (c) Nước thải sinh hoạt, (d) Khai thác chì MỞ ĐẦU Công nghệ sử dụng thực vật để hấp thụ Arsen đất đánh giá thích hợp ưu điểm như: giá vận hành thấp, vận hành đơn giản thân thiện với môi trường Hình 1.2 Cây dương xỉ MỞ ĐẦU Nội dung nghiên cứu VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Vật liệu nghiên cứu nghiên cứu Hình 2.1 Rễ dương xỉ VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Phân lập vi khuẩn Hình 2.2 Quy trình phân vi khuẩn từ rễ dương xỉ VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thử sinh hóa Nhuộm Gram vi khuẩn Quan sát hình dạng, cách xếp tế bào Khả di động vi khuẩn (Motility) Thử Oxydase Thử Catalase Thử Voges – Prokauer (VP) Thử Citrate VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Phản ứng PCR Hình 2.3 Sơ đồ thực quy trình phản ứng PCR KẾT QUẢ Kết phân lập sàng lọc vi khuẩn a b c Hình 3.1 Các vi khuẩn phân lập từ rễ dương xỉ địa điểm M1, M2 M3 với nồng độ Arsen 10 mM (a)M1, (b) M2, (c) M3 10 KẾT QUẢ Kết phân lập sàng lọc vi khuẩn a b c d Hình 3.2 Các vi khuẩn phân lập địa điểm M1 M3 có khả chịu nồng độ Arsen tối ưu 20mM (a)M1.1, (b) M1.2, (c) M3.1, (d) M3.2 11 KẾT QUẢ Kết phân lập sàng lọc vi khuẩn a b Hình 3.3 Các vi khuẩn phân lập địa điểm M2 có khả chịu nồng độ Arsen tối ưu 50mM (a)M2.1, (b) M2.2 12 KẾT QUẢ Kết sinh hóa vi khuẩn M2.1 M2.2 Bảng 3.1 Hình dạng tế bào vi khuẩn M2.1 M2.2 STT Mã chủng Cách bắt màu Hình dạng Cách xếp M2.1 Tím (Gram +) Trực khuẩn, hình que nhỏ ngắn, đầu tròn Đơn M2.2 Hồng (Gram -) Trực khuẩn, hình que ngắn Đơn 13 KẾT QUẢ Kết sinh hóa vi khuẩn M2.1 M2.2 Bảng 3.2 Sinh hóa vi khuẩn M2.1 M2.2 STT Mã chủng Gram Di động Catalase Oxydase VP Citrat M2.1 + + + + + - M2.2 - - + + + - 14 KẾT QUẢ Kết sinh hóa vi khuẩn M2.1 M2.2 a b Hình 3.4 Nhuộm Gram vi khuẩn (a) M2.1, (b) M2.2 15 KẾT QUẢ Kết PCR vi khuẩn M2.1 M2.2 M2.1 M2.2 Ladder 2000 bp Hình 3.5 Kết chạy PCR mẫu M2.1 M2.2 16 KẾT QUẢ Kết sau giải trình tự vi khuẩn M2.1 M2.2 + M2.1: vi khuẩn Bacillus subtilic + M2.2: vi khuẩn Moraxella osloensis (tên mới: Enhydrobacter aerosaccus) Kết kiểm tra biểu gen arsC vi khuẩn phân lập được: vi khuẩn có gen arsC 17 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Có mẫu vi khuẩn phân lập từ địa điểm ô nhiễm khác vi khuẩn phân lập địa điểm chịu Arsen tối ưu cao (50mM): + M2.1: vi khuẩn Bacillus subtilic + M2.2: vi khuẩn Moraxella osloensis Cả mẫu vi khuẩn phân lập nghiên cứu gen kháng Arsen arsC 18 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Đề nghị • Kiểm tra mẫu vi khuẩn với số gen kháng Arsen khác • Phân lập thêm vi khuẩn kháng Arsen địa điểm ô nhiễm khác • Kiểm tra khả xứ lý Arsen vi khuẩn 19 Xin chân thành cảm ơn! Trường Đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh Thầy cô Bộ Môn Công nghệ Sinh học Hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Bảo Quốc Ban hội đồng bạn theo dõ 20 HÌNH ẢNH NHÓM NGHIÊN CỨU 21 [...]... arsC của 6 vi khuẩn phân lập được: không có vi khuẩn nào có gen arsC 17 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Có 6 mẫu vi khuẩn phân lập được từ 3 địa điểm ô nhiễm khác nhau 2 vi khuẩn phân lập được ở địa điểm 2 chịu được Arsen tối ưu cao nhất (50mM): + M2.1: vi khuẩn Bacillus subtilic + M2.2: vi khuẩn Moraxella osloensis Cả 6 mẫu vi khuẩn phân lập được trong nghiên cứu này đều không có gen kháng Arsen arsC... Kết quả phân lập và sàng lọc vi khuẩn a b c d Hình 3.2 Các vi khuẩn được phân lập ở 2 địa điểm M1 và M3 có khả năng chịu được nồng độ Arsen tối ưu 20mM (a)M1.1, (b) M1.2, (c) M3.1, (d) M3.2 11 KẾT QUẢ Kết quả phân lập và sàng lọc vi khuẩn a b Hình 3.3 Các vi khuẩn được phân lập ở địa điểm M2 có khả năng chịu được nồng độ Arsen tối ưu 50mM (a)M2.1, (b) M2.2 12 KẾT QUẢ Kết quả sinh hóa của 2 vi khuẩn M2.1... khuẩn phân lập được trong nghiên cứu này đều không có gen kháng Arsen arsC 18 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Đề nghị 1 • Kiểm tra 6 mẫu vi khuẩn này với một số gen kháng Arsen khác 2 • Phân lập thêm vi khuẩn kháng Arsen ở những địa điểm ô nhiễm khác • Kiểm tra khả năng xứ lý Arsen của các vi khuẩn 3 19 Xin chân thành cảm ơn! Trường Đại học Nông Lâm thành phố Hồ Chí Minh Thầy cô Bộ Môn Công nghệ Sinh học Hướng dẫn... - + + + - 14 KẾT QUẢ Kết quả sinh hóa của 2 vi khuẩn M2.1 và M2.2 a b Hình 3.4 Nhuộm Gram vi khuẩn (a) M2.1, (b) M2.2 15 KẾT QUẢ Kết quả PCR của 2 vi khuẩn M2.1 và M2.2 M2.1 M2.2 Ladder 2000 bp Hình 3.5 Kết quả chạy PCR trên mẫu M2.1 và M2.2 16 KẾT QUẢ Kết quả sau khi giải trình tự của 2 vi khuẩn M2.1 và M2.2 + M2.1: vi khuẩn Bacillus subtilic + M2.2: vi khuẩn Moraxella osloensis (tên mới: Enhydrobacter... quả sinh hóa của 2 vi khuẩn M2.1 và M2.2 Bảng 3.1 Hình dạng tế bào vi khuẩn M2.1 và M2.2 STT Mã chủng Cách bắt màu Hình dạng Cách sắp xếp 1 M2.1 Tím (Gram +) Trực khuẩn, hình que nhỏ và ngắn, 2 đầu tròn Đơn 2 M2.2 Hồng (Gram -) Trực khuẩn, hình que ngắn Đơn 13 KẾT QUẢ Kết quả sinh hóa của 2 vi khuẩn M2.1 và M2.2 Bảng 3.2 Sinh hóa của vi khuẩn M2.1 và M2.2 STT Mã chủng Gram Di động Catalase Oxydase VP ... QUẢ Kết phân lập sàng lọc vi khuẩn a b c Hình 3.1 Các vi khuẩn phân lập từ rễ dương xỉ địa điểm M1, M2 M3 với nồng độ Arsen 10 mM (a)M1, (b) M2, (c) M3 10 KẾT QUẢ Kết phân lập sàng lọc vi khuẩn. .. Các vi khuẩn phân lập địa điểm M1 M3 có khả chịu nồng độ Arsen tối ưu 20mM (a)M1.1, (b) M1.2, (c) M3.1, (d) M3.2 11 KẾT QUẢ Kết phân lập sàng lọc vi khuẩn a b Hình 3.3 Các vi khuẩn phân lập địa... Có mẫu vi khuẩn phân lập từ địa điểm ô nhiễm khác vi khuẩn phân lập địa điểm chịu Arsen tối ưu cao (50mM): + M2.1: vi khuẩn Bacillus subtilic + M2.2: vi khuẩn Moraxella osloensis Cả mẫu vi