Phương pháp định loại nấm sợi

Phương pháp định loại nấm sợi Phương pháp định loại nấm sợi Bởi: Nguyễn Lân Dũng PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LOẠI NẤM SỢI Yêu cầu: - Có chủng nấm sợi thật khiết (không lẫn tạp nấm vi sinh vật khác) - Các chủng cần định loại phải nuôi cấy môi trường, nhiệt độ, thời gian nuôi cấy theo quy định khoá phân loại đối vối chi nấm mốc Quy trình định loại chủng nấm sợi: Quan sát đặc điểm phân loại chủng nấm sợi cần định loại Quan sát đặc điểm khuẩn lạc thạch - Hình dáng - Kích thước (đường kính, chiều dày) - Dạng mặt (nhung mượt, mịn, len xốp, dạng hạt, lồi lõm, có khía hay không…) - Màu sắc khuẩn lạc mặt mặt - Dạng mép khuẩn lạc (mỏng, dày, phẳng, nhăn nheo…) - Giọt tiết có (nhiều, ít, màu sắc) - Mùi khuẩn lạc (có, không mùi) - Sắc tố hoà tan (màu môi trường xung quanh khuẩn lạc) có 1/3 Phương pháp định loại nấm sợi - Các cấu trúc khác: bó sợi, bó giá (Synnematous or sporodochial conidiomata) cấu trúc mang bào tử trần (Fruit body - conidiomata) đĩa giá (acervuli) túi giá (Pycnidia), đệm nấm (Stroma), hạch nấm (sclerotia) vv Quan sát đặc điểm vi học - Sợi nấm: (hyphae) có vách ngăn, vách ngăn, có mấu - Bào tử trần(conidia): kiểu phát sinh bào tử trần (ở nấm bất toàn), hình dạng, kích thước, màu sắc, bề mặt (nhẵn, có gai, gồ ghề) cách xếp đơn độc chuỗi gốc non (basipetal) chuỗi gốc già (acropetal) khối cầu vv… - Bộ máy mang bào tử (spore apparatus): nang bào tử nang bào tử nhỏ (nếu có) (Sporangia & Sporangiola) hình dáng, kích thước, màu sắc, bề mặt nang, cuống nang, nhánh (nhánh mọc vòng, mọc cách, hợp trục vv…); bào tử nang ( hình dạng, kích thước, bề mặt, …) nấm tiếp hợp - Bộ máy mang bào tử trần (conidiogenous apparatus): giá bào tử trần (conidiophore) - kích thước, đường kính, chiều dài, bề mặt (nhẵn, có gai, có nốt sần, vv…) màu sắc, có vách ngang không, có cấu trúc đặc biệt tế bào chân (foot cell) sợi cứng (setae) tăng trưởng gốc có dạng hình thái đặc biệt bó giá, đệm giá Các nhánh (của bào tử trần) số lượng nhánh, kích thước bề mặt, màu sắc, cách xếp (đối xứng, không đối xứng sát tẽ rộng, vị trí dọc giá bào tử trần tập trung giá)vv… - Tế bào sinh bào tử trần (conidiogenous cell) Kiểu tế bào sinh bào tử trần (thể bình, dạng có khuyên đỉnh, dạng sinh bào tử trần đồng thời, dạng (dạng bình- phialo type; dạng phân đốt, Annello type) Dạng sinh bào tử trần không đồng thời (Aleurio- type), bào tử đính kiểu nảy chồi (Blasto - type), dạng sinh bào tử trần qua lỗ để lại sẹo (Poro - type) vv hình dạng, kích thước, màu sắc, cách xếp (đơn dộc thành cụm, thành vòng), vị trí (trên sợi nấm, dọc theo giá bào tử trần, nhánh đính giá) vv… - Thể túi (ascocarp) cleistothecium, cần khảo sát vị trí, số lượng, hình dạng, kích thước, màu sắc, bề mặt thể quả, quan sát túi bào tử (ascus) bào tử túi (ascospore) hình dạng, kích thước bề mặt Tiến hành định loại Căn vào kết quan sát đầy đủ, xác đặc điểm khuẩn lạc đặc điểm vi học tiến hành xác định tên loài (hoặc thứ có) chủng nấm mốc sau: 2/3 Phương pháp định loại nấm sợi - Dùng khoá phân loại nhóm phân loại bậc cao (ngành, ngành phụ, lớp, bộ, họ, chi) để xác định xem nấm mốc thuộc chi nấm mốc Tiếp theo dùng khoá phân loại chi để xác định đến loài (thứ) cách so sánh tất đặc điểm quan sát chủng nấm mốc với đặc điểm tương ứng loài khoá phân loại Nếu đặc điểm so sánh phù hợp với đặc điểm loài mô tả khoá, ta xác định tên loài chủng nấm mốc cần định loại - Nếu có chủng nấm mẫu loài (hoặc thứ) vừa xác định tiến hành so sánh đặc điểm hình thái khuẩn lạc, đặc điểm vi học chủng mẫu với đặc điểm tương ứng chủng cần định loại Nếu đặc điểm chủng phù hợp với khẳng định chắn loài (hoặc thứ) chủng nấm mốc cần định loại - Nếu có chủng nấm mẫu loài (hoặc thứ) vừa xác định tiến hành so sánh đặc điểm hình thái khuẩn lạc, đặc điểm vi học chủng mẫu với đặc điểm tương ứng chủng cần định loại Nếu đặc điểm chủng phù hợp với khẳng định chắn loài (hoặc thứ) chủng nấm mốc cần định loại 3/3 ... định loại Căn vào kết quan sát đầy đủ, xác đặc điểm khuẩn lạc đặc điểm vi học tiến hành xác định tên loài (hoặc thứ có) chủng nấm mốc sau: 2/3 Phương pháp định loại nấm sợi - Dùng khoá phân loại. . .Phương pháp định loại nấm sợi - Các cấu trúc khác: bó sợi, bó giá (Synnematous or sporodochial conidiomata) cấu trúc mang bào... sát chủng nấm mốc với đặc điểm tương ứng loài khoá phân loại Nếu đặc điểm so sánh phù hợp với đặc điểm loài mô tả khoá, ta xác định tên loài chủng nấm mốc cần định loại - Nếu có chủng nấm mẫu loài