Một số khâu công nghệ trong việc sản xuất vacxin

Một số khâu công nghệ việc sản xuất vacxin: • • • • • • • Phân xưởng sản xuất vacxin virus đông khô: Sản xuất vacxin virus đông khô môi trường thai trứng, phôi tế bào Chia liều: vacxin thu được, chia liều , sau đưa vào hệ thống đông khô Làm việc điều kiện vô trùng Hai máy đông khô làm việc khoảng 2h – 13h cho 10 nghìn lọ vacxin, lọ khoảng 100 liều, hệ thống điều khiển máy tính Hoàn thiện sản phẩm Kiểm nghiệm chất lượng sản phẩm vacxin virus đông khô Kiểm nghiệm mô bào sống, phôi thai(trứng), động vật ,sau đó, đặt tủ ấm (370C) để tạo điều kiện cho tổ chức sống phát triển Phân xưởng sản xuất vacxin vi trùng : Tổ môi trường: nhiệm vụ sản xuất loại môi trường nuôi cấy cho vi trùng Nguyên liệu từ thịt bò (thịt bắp)  lọc bỏ gân, mỡ, mạch máu xay nhỏ đun chin (bằng nước) Sau cho sản phẩm thịt đun chín lượng men tiêu hóa (tripsin tách từ tế bào lục giác mô tụy tạng), đun 6h môi trường lên men ( nước + acid amin) Một số loại môi trường nuôi cấy: - Môi trường thịt yếm khí: để nuôi cấy vi trùng yếm khí, vi trùng hô hấp tùy tiện (trong thành phần có bổ sung phân tử glycogen) NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH - Môi trường thạch nghiêng (thạch nấm): có thêm glucoza bổ sung glycerin - Môi trường thạch thường: gồm nước thịch thường agar - Môi tường có bổ sung formalin, muối chống nấm, để kiểm định vi trùng chết hoàn toàn hay chưa Nếu 2 - - NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH môi trường phát triển môi trường khác phải nghi ngờ - Môi trường thạch máu: thạch có bổ sung hồng cầu cừu Ngoài việc nuôi cấy vi khuẩn xác định vi khuẩn khiết vi khuẩn dung huyết.( Giúp trình kiểm định độ vô khuẩn cuả vacxin, có mặt vi khuẩn gây dung huyết, tiêm cho gia súc gây tử vong tất nhanh) • - Ngoài ra, huyết nguyên liệu nuôi cấy số vi trùng Hệ thống lên men vi trùng : nồi lên men Pecnito - - NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH • Sau sản xuất thành công môi trường, tiến hành trình lên men Hệ thống lên men vi trùng gồm nồi lên men: nồi to có dung tích 180l, nồi nhỏ có dung tích 10l, tự động hóa điều khiển thông số môi trường nuôi cấy nhờ hệ thống máy tính điện tử Công nghệ lên men lên men có sục khí.Năng suất hệ thống : từ 6h-8h cho mẻ (1 triệu liều vacxin) Ở luôn trì độ ẩm ( máy nén không khí  khô không khí đến độ ẩm W = 4%), áp suất định cho máy làm việc Tổ tiêu độc dụng cụ thiết bị thí nghiệm: Tất dụng cụ, thiết bị sau làm xong, cho vào lò hấp hấp nước nóng Hệ thồng lò hấp hai vỏ, muốn tăng nhiệt độ hấp, cần tăng áp lực nước vào Nhiệt độ cao, có hệ thống hút nhiệt Tìm hiểu quy trình kiểm nghiệm vacxin phó thương hàn lợn nhược độc Đối tượng áp dụng: Quy trình áp dụng cho việc kiểm nghiệm vacxin nhược độc chế từ chủng vi khuẩn Salmonella choleraesuis đông khô • • Quy định kỹ thuật: Lấy mẫu: Mẫu lấy theo TCVN 160-2008 “ Quy trình lấy mẫu thuốc thú y vacxin thú y để kiểm tra chất lượng” Kiểm tra khiết: Theo tiêu chuẩn 161-2008 “ Vacxin thú y- quy trình kiểm tra khiết” bao gồm: o Kiểm tra tạp nhiễm vi khuẩn o Kiểm tra tạp nhiễm nấm mốc o Kiểm tra tạp nhiễm Mycoplasma - - NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH Vacxin kiểm tra môi trường đặc biệt như: o Môi trường MacConkey agar (màu đỏ) : môi trường thích hợp cho phát triển vi khuẩn Gr (-) cho lên men lactose Thành phần : - Pepton - Lactose - Mật muối( hỗn hợp acid steroid với ion natri) - Nacl - Toluylene đỏ (thuốc nhuộm) - Agar - Nước o Môi trường KIA: màu đỏ Thành phần : peptone, lactose/glucose = 10/1,dẫn xuất cuả lưu huỳnh, chất thị đỏ phenol, sắt (2) amoni citrate o Ngoài vacxin kiểm tra ngưng kết với acriflavin ( hoạt chất kháng khuẩn) 1/500 ( phản ứng lên bông) Kiểm tra an toàn: dùng phương pháp sau đây: o Tiêm vào da cho lợn cai sữa khỏe mạnh ( kháng thể chống Salmonella choleraesuis) ,(20-30kg /con), 10 liều vacxin quy định Tất lợn phải sống khỏe mạnh phát triển bình thường sau – 10 ngày theo dõi o Tiêm vào da cho chuột lang ( 300- 350g), liều vacxin quy định Tất chuột phải sống khỏe mạnh phát bình thường sau – 10 ngày theo dõi o • • Kiểm tra hiệu lực: vacxin kiểm tra hiệu lực hai cách sau: - - NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH • • Phương pháp đếm số vi khuẩn: Đếm số khuẩn lạc đĩa thạch ( Brain heart agar: BHA) Vacxin tiêu chuẩn có số khuẩn lạc không thấp 2.5×109/1 liều vacxin Phương pháp tiêm chuột: Cho chuột lang, trọng lượng 300 – 350 kg/con, tiêm 1/5 liều vacxin ghi nhãn ( 0.5× 109 CFU), chuột sau tiêm trở thành chuột chuột miễn dịch 21 ngày sau tiêm chuột miễn dịch, ta tiêm lượng chủng thương hàn lợn cường độc với liều MLD cho hai : chuột miễn dịch chuột đối chứng Trong tuần theo dõi, chuột đối chứng phải chết hết chuột miễn dịch phải sống Ghi : MLD : liều nhỏ gây chết hết động vật thí nghiệm.( Minimum Lethal Dose) CFU : đơn vị khuẩn lạc ( Colony Forming Unit) Một số vacxin thương mại hóa: Vacxin cúm gia cầm: • Vacxin Lasota: loại vacxin nhược độc đông khô chủng Lasota dùng để phòng “bệnh toi gà” cho gà tháng tuổi Thành phần: virus Newcastle nhược độ đông khô chủng Lasota, sản suất phôi thai trứng gà Mỗi liều vacxin tối thiểu 106EID50 virus Newcastle, chất bổ trợ Cách dùng: hòa tan với nước muối sinh lý, dùng cho gà hai tháng tuổi, cho uống nhỏ mắt 6 - - NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH • Vacxin Gumboro: Vacxin nhược độc đông khô chủng 2512, sản xuất môi trường tế bào xoư phôi gà lớp Thành phần : liều vacxin chứa 103TCID50 VR, chất bổ trợ Liều lượng cách dùng: hòa tan với nước sinh lý, cho gà uống nhỏ mắt Nếu gà mẹ chưa tiêm phòng vacxin Gumboro, phòng cho gà vào lúc 5-7 ngày tuổi Sau tuần nhắc lại lần Nếu gà mẹ tiêm, sử dụng vacxin cho gà đạt lúc tuần tuổi - - NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH Vacxin phòng bệnh cho lợn: • Vacxin phó thương hàn lợn Thành phần : vi khuẩn Salmonella cholera suis, chất bổ trợ Một liều vacxin chứa 2-2,5 tỉ CFU Tiêm vào bắp thịt da, tiêm cho loại lơn lứa tuổi 1ml/1con Vacxin tụ huyết trùng lợn: vacxin vô hoạt, dạng nước để phòng bênh tụ huyết trùng cho lợn Thành phần: giống vi khuẩn tụ huyết trùng lợn Pasteurella suis eptia, túyp B, formaldehyde, keo phèn Cách dùng : tiêm da cho lơn lứa tuổi, 1ml Sauk hi tiêm tuần, vật có miễn dịch miễn dịch kéo dài tháng Nơi có dịch tụ huyết trùng xảy nên tiêm phòng hai lần, cách 3-4 tuần, tiêm cho toàm đàn Không tiêm cho lợn ốm, đẻ hay đẻ non Vacxin nhiệt thán cho trâu, bò: vacxin vô độc nha bào dạng lỏng, phòng bệnh nhiệt thán cho trâu bò Thầnh phần : nha bào vi khuẩn nhiệt thán vô độc, không giác mô, liều vacxin cho khoảng 25 triệu nha bào, chất bổ trợ glyxerin Cách dùng: tiêm da cho trâu, bò • 8 - - NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH 9 - - ... Lethal Dose) CFU : đơn vị khuẩn lạc ( Colony Forming Unit) Một số vacxin thương mại hóa: Vacxin cúm gia cầm: • Vacxin Lasota: loại vacxin nhược độc đông khô chủng Lasota dùng để phòng “bệnh toi... Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH • Vacxin Gumboro: Vacxin nhược độc đông khô chủng 2512, sản xuất môi trường tế bào xoư phôi gà lớp Thành phần : liều vacxin chứa 103TCID50 VR, chất bổ trợ... /con), 10 liều vacxin quy định Tất lợn phải sống khỏe mạnh phát triển bình thường sau – 10 ngày theo dõi o Tiêm vào da cho chuột lang ( 300- 350g), liều vacxin quy định Tất chuột phải sống khỏe mạnh