Sự nhiễm nấm mốc và aflatoxin tự nhiên trên một số giống ngô, lạc trồng ở một số tỉnh và khả năng phòng trừ bằng các chủng Aspergillus aflavus không sinh độc tố

http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN PH N I: U tv nđ : 1.1 L OBO OK S CO M PH N M ng th c, th c ph m, đ c bi t nơng s n nh thóc, g o, ngơ, khoai, s n, đ u, đ l c ngu n n ng l Vì th vi c nghiên c u đ nâng cao ch t l ng ni s ng lồi ng ng nơng s n m t v n đ đ t ch c qu c t c ng nh c quan khoa h c v l gi i đ c bi t quan tâm Vi c nâng cao ch t l b o qu n gìn gi giá tr dinh d i c ng th c th c ph m c a th ng nơng s n bao g m k thu t ng c a chúng, ng n ch n ch t đ c h i nhi m nơng s n đ ng th i ch bi n chúng thành nh ng th c ph m có giá tr dinh d N ng cao c ta n c nhi t đ i có khí h u nóng m, u ki n thu n l i cho n m m c phát tri n Do ho t đ ng h t s c m nh m c a vi sinh v t có h i gây t n th t l n cho nơng s n giai đo n sau thu ho ch, t n th t gây nên n m m c chi m m t ph n đáng k Ngồi vi c gây t n th t v l ng cho nơng s n n m m c sinh đ c t đ c bi t nguy hi m v i s c kho ng i đ ng v t kinh t N m m c phát tri n l nh ng s d ng ch t dinh d chúng ti t đ c t ng th c khơng ng c a h t: Protein, glucid, lipit vitamin, c t aflatoxin Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus Aspergillus moninus t o đ c t nguy hi m nh t th gây t n th li u l KIL nhi m nơng s n, gây đ c cho ng ng i gia súc, nh gây tác d ng c p tính, ng gan (ung th gan…), gây qi thai, gây đ t bi n, …th m chí v i ng cao có th d n t i t vong Trên th gi i hi n nay, vi c nghiên c u m c đ nhi m n m m c đ c t n m l ng ng th c, th c ph m v n đ quan tr ng nh m b o v s c kho i đ ng v t kinh t Do v y, có r t nhi u cơng trình nghiên c u v m c đ nhi m n m m c đ c t m c, bi n pháp phòng tr đ c t m c http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN l ng th c, th c ph m Gi i h n v m c nhi m aflatoxin m t nh ng tiêu chu n c a an tồn v sinh th c ph m n c ta hi n nay, cơng tác v sinh an tồn l c ý T nh ng n m 1970 Nguy n KIL OBO OKS CO M nh ng ti n b rõ r t ngày đ ng th c, th c ph m có Phùng Ti n c ng s [17] nghiên c u m c nhi m n m m c thóc b o qu n l l c… ng th c mi n B c Vi t Nam m t s l ng th c nh : kho u, đ , ng H ng Miên [16] c ng nghiên c u s nhi m n m m c aflatoxin l c Nguy n Thu Châu c ng s – 1996 [1] nghiên c u tình hình nhi m đ c t n m ngơ: aflatox n, fumonixin, Ochotoxin A, deoxynivalenol nivalenol…và bi n pháp phòng tr Nh ng k t qu nghiên c u c a PGS.TS: Nguy n Thu Châu cho th y ngơ Vi t Nam nhi m nhi u lo i mycotoxin, aflatoxin nhi m m c đ cao Nguy n Th Thanh Trà c ng kh o sát s nhi m n m m c Aspergillus flavus aflatoxin m t s gi ng ngơ lai ngơ đ a ph ng vùng Gia Lâm, Hà N i ph c n tìm hi u thêm v m c nhi m n m m c aflatoxin m t s gi ng ngơ bi n pháp phòng tr , chúng tơi ti n hành nghiên c u đ tài: “S nhi m n m m c aflatoxin t nhiên m t s gi ng ngơ, l c tr ng m t s t nh kh n ng phòng tr ch ng Aspergillus aflavus khơng sinh đ c t ” b ng http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 1.2 M c tiêu n i dung nghiên c u: 1.2.1 M c tiêu nghiên c u: c s nhi m n m m c t nhiên hàm l KIL OBO OKS CO M + Xác đ nh đ m t s gi ng ngơ, l c ng aflatoxin m t s t nh + Th m dò kh n ng phòng ch ng aflatoxin b ng ch ng Aspergillus flavus khơng sinh đ c t 1.2.2 N i dung nghiên c u: + Kh o sát s nhi m n m m c m t s m u ngơ l c + Xác đ nh hàm l m t s t nh ng aflatoxin m t s m u ngơ + Phân l p phân lo i ch ng Aspergillus flavus + Ni c y ch ng Aspergillus flavus phân l p đ ki m tra kh n ng sinh aflatoxin + Th nghi m ph ng pháp phòng ch ng aflatoxin b ng ch ng Aspergillus flavus lo i n m khác khơng sinh đ c t PH N II: T NG QUAN TÀI LI U http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 2.1 H n m m c l ng th c: Theo Christensen [22] có hai h n m m c l ng th c: H n m m c ngồi đ ng h n m m c b o qu n KIL OBO OKS CO M 2.1.1 H n m m c ngồi đ ng: Trong l ho ch nh ng tr ng th c phát tri n c h t đ ngồi đ ng hay sau thu c đ p tu t b n m m c xâm nh p Có m t s ngo i l nh ph n l n ngơ đ c b o qu n d ng b p l u đ ngồi tr i, u ki n nh v y có th nhi m n m m c ngồi đ ng hay n m m c ngồi đ ng th ng có m t ti p t c phát tri n Tu t ng lo i ng c c, vùng đ a lý c trú, th i ti t mà n m m c phát tri n nhi u hay Các lo i lúa mì, lúa g o, đ i m ch, ki u m ch, ngơ th nhi m lo i n m ngồi đ ng nh Alternaria, ng Cladosporium, Helminthosporium, Furarium T t c n m m c ngồi đ ng đòi h i đ m tr ng thái cân b ng v i đ c c giàu tinh b t, 20%-21% đ mt m cao h t đ phát tri n ng đ i 90% hay h n n a ( h t ng m, tr ng l ng m c b n) u ki n cho n m phát tri n Các n m m c ngồi đ ng có th s ng qua nhi u n m nh ng ch t t t ng đ i nhanh ng đ i 70%, h t có đ m h t khơ, tr ng thái cân b ng v i đ m h t ng c c giàu tinh b t, u có ngh a đ m 14% Nh ng b ng chúng g n nh t cho th y r ng s ph i h p đ nc ađ m, nhi t đ th i gian b o qu n, có th h n ch hồn tồn n m ngồi đ ng qu n h t đ i m ch gi ng mà khơng b nhi m n m m c b o Tóm l i, n m m c ngồi đ ng có th l tr ng c a h t Thơng th nh h ng đ n b ngồi ch t ng, t n th t gây nên n m m c ngồi đ ng x y c thu ho ch có th phát hi n b ng ph ng pháp giám đ nh thơng th khơng ti p t c t ng lên q trình b o qu n 2.1.2 H n m m c b o qu n: ng, http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Theo Christensen [22] n m m c b o qu n g m m i hai lồi Aspergillus, có n m lồi ph bi n M t s lồi Penicillium, lồi riêng l c a Sporendonema m t s lồi n m men c ng có th có b ng v i đ h t l ng th c có đ KIL OBO OKS CO M Nh ng lồi có kh n ng phát tri n mt ng đ i 70% - 90% giai đo n a s n m th ng m cân ngun li u giàu ch t h u c vơ c , đ c bi t rau qu th i r a, s n ph m th c ph m Chúng xu t hi n t t c h t l kh p m i n i th gi i nhi m ng th c h t gi ng Các n m m c b o qu n phát tri n nhanh h t kho ng 300 – 320C t c đ phát tri n c a chúng gi m nhi t đ gi m M t vài ch ng c a nhóm A.glaucus phát tri n ch m đ nhi t đ 100-15 0C M t vài lồi Penicillium u c u m cao h n M t vài lồi Aspergillus đ kháng v i khơ c n, có th phát tri n vài đ d 2.2 ic i m đóng b ng ng v đ c t n m: c t n m g i mycotoxin nhóm h p ch t có c u trúc đa d ng, có kh i l ng phân t nh , đ c t o b ng trao đ i ch t th c p c a n m m c gây ng đ c v i đ ng v t có vú, cá gia c m [37] S sinh tr ng phát tri n c a ph thu c r t nhi u vào u ki n sinh thái (Morrau 1974) [15] Nh ng u ki n vùng sinh thái, khí h u nhi t đ , đ l ng n m c a khơng khí, c có c ch t… S s n sinh đ c t n m m c k t qu c a tác đ ng qua l i c a ki u gen (genotype) u ki n phát tri n c a chúng (Scheoedes Ashworth) c t n m s n ph m ph ti t q trình chuy n hố Q trình trao đ ch t g m giai đo n: trao đ i ch t s c p trao đ i ch t th c p Q trình trao đ i ch t s c p đ c hi u ph n ng t o thành ch t c n thi t đ m b o s s ng s phát tri n c a t bào trao đ i ch t th c p q trình t o thành ch t mà vai trò sinh lý c a chúng ch a đ c rõ, ch a th t c n thi t cho s t n t i c a t bào Q trình trao đ i ch t s c p c a t bào c n b n gi ng th h th ng s ng, nh ng q trình trao đ i ch t http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN th c p ph thu c ch t ch vào đ c tính c a m i lồi, m i ch ng n m m c Thơng th ng q trình th ng x y vào cu i giai đo n phát tri n c a t bào n m m c Các đ c t n m m c đ c t ng h p t nhi u đ ng chuy n KIL OBO OKS CO M hố khác nhau, c th nh sau: + D n xu t c a đ ng glucoza + D n xu t c a axitamin + D n xu t c a polyxetoacid + D n xu t c a terpenteichthecen + Các d n xu t c a mevelonat k t h p v i axitamin Cho đ n nay, 300 lo i đ c t n m đ c phát hi n nghiên c u M t lo i đ c t có th nhi u lồi n m khác s n sinh m t lồi n m có th đ ng th i s n sinh nhi u lo i đ c t mycotoxin có th c ph m tồn th c ph m đ i u đáng ý có 20 lo i m c đ nghiêm tr ng th ng liên quan đ n an c t o b i n m chi n m: Aspergillus, Penicillium, Furarium, Alternaria Claviceps Các đ c t c a Aspergillus: Aflatoxin (B1, B2, G1, G2, M1, M2), sterimatocystin, axit cyclopianzoic Các đ c t toxin c a Fusarium: deoxynivalenol, nivalenol, zearalenon, T-2 Các đ c t c a Penicillium: Patulin, ochratoxin A, citrinin, penitrem A, axit cyclopianzoic toxin, diacetocyscirpenol, fumonisin moniliformin Các đ c t alternarion c a Alternaria: axit tenuazoic, alternarion, methyl ether Các đ c t c a Claviceps: Các alkaloit Ergot [21] M c dù đ c tính c a nh ng lồi n m l n nh t đ nh đ nh ng kh n ng gây đ c cho ng ch a đ c bi t t i t lâu, i t s n ph m đ c c a n m m c c th a nh n, cho đ n n m 1850, s liên quan gi a vi c n ph i http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN lúa m ch đen nhi m Claviceps purpurea đ c tính lâm sàng c a b nh Ergot đ c phát hi n V n đ đ t n m m c khác nh h c ti p t c b ng báo cáo v đ c ng đ n ng i nh xác đ nh h i ch ng liên KIL OBO OKS CO M quan đ n vi c n ph i bánh mì nhi m Furarium graminearum, s nh n bi t b nh n m m c Stachybotris nh ng nghiên c u liên quan đ n b nh gi m b ch c u đ c t th c ph m (ATA), s n ph i h t l ng th c đ qua mùa đơng nhi m Fusarium poae Fuarium sporotrichioides n c Nga chi n tranh th gi i l n th hai Nh ng s li u có giá tr v mycotoxin b nh mycotoxin thu nh n t l nh v c thú y h c Các nghiên c u đ ng v t th c nghi m cho th y đ c tính c a mycotoxin r t l n H u h t s n ph m th c v t có th c ch t cho s phát tri n c a n m m c s t o mycotoxin ti p theo Vì th t o kh n ng khơng nh ng cho s nhi m tr c ti p mà ngu n mang mycotoxin vào s a th t 2.3 c t aflatoxin: Trong s mycotoxin Aflatoxin đ c t đ đ đ c nghiên c u đ y đ nh t v m i ph c phát hi n s m nh t ng di n [28] Aflatoxin th ng c t o b i hai lồi n m quen bi t Aspergillus flavus Aspergillus parasiticus http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 2.3.1 Tính ch t hố lý: Các Aflatoxin g m h p ch t c a nhóm bis-furanocoumarin, s n ph m trao đ i ch t t o b i n m Aspergillus flavus Aspergillus parasiticus, đ B n ch t đ ng nhi m s n ph m th c v t KIL OBO OKS CO M tên B1, B2, G1, G2 Các Aflatoxin th cđ t c phân bi t c s màu phát quang c a chúng B ch vi t t t c a Blue (màu xanh n c bi n) ch G ch vi t t t c a Green (màu xanh cây) Aflatoxin B1, B2 s a bò đ c chuy n hố đ c g i aflatoxin M1 aflatoxin M2 (M m t ch vi t t t c a Milk) Trong b n lo i aflatoxin aflatoxin B1 th ng đ B2 G2 t n t i c tìm th y n ng đ cao nh t, ti p theo G1, n ng đ th p h n Cơng th c c u t o c a m t s aflatoxin trao đ i ch t liên quan đ n aflatoxin B1 G1 aflatoxin B2 G2 d n xu t c a dihydro c a h p ch t m Các aflatoxin M1và M2 ch t trao đ i hydroxylat hố c a B1, B2 ph i theo th t , chúng có cơng th c c u t o nh sau: O O O O O O OCH3 O O Aflatoxin B1 O O O O O OH OCH3 O O O OCH3 O Aflatoxin M2 O O O O O Aflatoxin M1 O OCH3 Aflatoxin B2 O OH O O O O OCH3 Aflatoxin G1 O O O OCH3 Aflatoxin G2 O http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN Các aflatoxin phát quang m nh d cho phép phát hi n h p ch t t t c ph s c kí b n m ng) Nó cung c p m c b n v m t th c hành cho ng pháp hố lý cho vi c phát hi n đ nh l aflatoxin M1 0,02mg/l có th đ Các aflatoxin đ c hồ tan dung mơi phân c c nh dimethylsulfoit (dung mơi th ng đ nh cs ng ti n vi c áp d ng aflatoxin vào đ ng v t th c nghi m) Tính tan c a aflatoxin n Aflatoxin tinh t r t b n v ng khơng khí Tuy nhiên t c c tím ng N ng đ c phát hi n s a l ng clorofom metanol đ c bi t d ng nh ph i u n ng đ c c kì th p (0,5 ng hay th p h n KIL OBO OKS CO M m t v t i ánh sáng c c tím sóng dài c dao đ ng t 10-20mg/l nhi t đ cao, đ ng đ i khơng b n đ d c làm nóng i khơng khí d phi n s c kí b n m ng, đ c bi t hồ tan i tia dung mơi có đ phân c c cao Các aflatoxin dung mơi clorofom benzen b n v ng nhi u n m n u đ b phá hu d c gi ch t i l nh Các aflatoxin ho c khơng i u ki n n u bình th nhiên l c rang gi m đ c bi t l ng làm nóng trùng Tuy ng aflatoxin có th b phá hu hồn tồn b ng vi c x lý m nh b ng amoniac hay hypochlorit Claude Moneau c ng s sau: [15] nghiên c u tính ch t c a aflatoxin đ a nh ng k t qu B ng 1: Tính ch t hố lý c a aflatoxin AFLATOXIN B1 B2 G1 G2 CÁC I M NĨNG CH Y HU NH QUANG * ** 268- 269 265- 270 252- 266 Xanh lam 268- 289 305- 309 280- 283 Xanh lam 244- 246 247- 250 246- 247 Xanh l c 229- 231 237- 240 Xanh l c http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 299 Xanh tím M2 293 Tím KIL OBO OKS CO M M1 Ghi chú: * K t qu c a Joun send ** K t qu c a Stub bjield S có m t c a vòng lacton vi c thu phân mơi tr phân t aflatoxin làm chúng nh y c m v i ng ki m, đ c tính quan tr ng b t kì q trình ch bi n th c ph m q trình x lý ki m làm gi m hàm l ng aflatoxin c a s n ph m, m c d u s có m t c a protein, pH th i gian x lý có th thay đ i k t qu Tuy nhiên n u x lý ki m nh vi c axit hố s làm ph n ng ng 2.3.2 Các ph 2.3.2.1 Các ph Ph c tr l i đ t o aflatoxin ban đ u [51] ng pháp phân tích: ng pháp sinh h c: ng pháp th sinh h c dùng v t m t ngày tu i đ xác đ nh s có m t c a aflatoxin nghi ng th c ph m Ph v i li u 0,1 - 0,2 g aflatoxin B1 đ ch t đ ng pháp th bào thai gà c áp d ng vào màng tr ng V n t c gây c ghi l i th i gian 23 ngày c y vào tr ng M t vài ph th sinh h c khác đ ng pháp c tri n khai nh dùng vi khu n, tơm bi n đ th Nh ng mơ t chi ti t có th tìm th y báo cáo Goldlatt Ciegler c ng s [34] 2.3.2.2 Ph ng pháp hố h c: M c dù quy trình ln ln thay đ i, nh ng b c c b n v n gi ngun, bao g m: chi t xu t, lo i tr m , làm s ch, phân tích đ nh l S ph i h p k thu t chi t xu t l ng s c ký d n đ n ph ngày đ c s d ng r ng rãi nh t đ (Contamination Branch) c a Eppley [30] Ph c bi t nh ph ng ng pháp ng pháp CB ng pháp BF (Best Foods) nhanh kinh t h n, nh ng làm s ch h n c ng đ c tri n khai Vi c đ nh tính http://kilobooks.com KIL OBO OKS CO M THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN B ng 6: M t s đ c m phân lo i A.flavus A.parasiticus phân l p ngơ đ c tr ng nh t 22 m u phân l p b ng STT Ch ng A flavus Th bình Khu n l c A paraciticus K(cm) Màu s c 01 Ch ng A flavus BH2 1-2 hàng 02 Ch ng A flavus NN1 1-2 hàng 7,1 03 Ch ng A flavus NN2 1-2 hàng ,5 04 Ch ng A flavus YT6 1-2 hàng 6,5 05 Ch ng A flavus VT3 1-2 hàng 5,6 06 Ch ng A flavus YT5 1-2 hàng 6,9 07 Ch ng A flavus GL7 1-2 hàng 6,4 08 Ch ng A flavus L3 1-2 hàng 6,8 Bào t tr n Hình d ng Xanh Hình c u vàng có gai nh Xanh Hình c u vàng có gai Xanh nâu Hình c u có gai Xanh Hình c u vàng hay g n c u Xanh Hình c u hay g n c u Xanh h i Hình c u nâu Xanh h i Hình c u vàng Xanh Hình c u vàng hay g n c u B ng đ nh giá K(àm) Hình d ng Cu ng sinh bào t K(àm) Hình K(àm) d ng 10 11 4–6 Hình c u có 25,5 – S n xùi 200 – 400 gai nh 36,5 2,5 – Hình c u có 30 – 40 Xù 380 – 720 4,5 gai nh – 4,8 Hình c u có 25 – 35 Xù 400 – 600 gai nh 3–4 Hình c u có 36,5 – S n xùi 300 – 550 gai nh 40 2,5 – Hình c u có 36,5 gai nh 40 – 5,5 Hình c u có 25 – 65 gai nh Hình c u có 40 – 50 gai nh Hình c u có 36 – 60 gai nh 3,5 – 3,7 – – Xù 250 – 500 Xù 350 – 500 Xù 600 – 1000 Xù 400 – 750 http://kilobooks.com KIL OBO OKS CO M THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 09 Ch ng A flavus DC1 1-2 hàng 6,8 Xanh vàng 10 Ch ng A flavus CS1 1-2 hàng 5,8 11 Ch ng A flavus ngơ 1-2 hàng h nh p Xanh vàng Xanh vàng Hình c hay g c u Hình c hay chu Hình c hay chu u 3–5 n Hình c u có 19 – 45 gai nh Xù 300 – 450 u – 5,5 Hình c u có 25 – 60 gai nh Hình c u có 30 – 65 gai nh Xù 250 – 600 Xù 400 – 650 u 2,5 – http://kilobooks.com KIL OBO OKS CO M THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN nh 8: Hình thái khu n l c Aspergillus flavus CBH2 nh 9: Hình thái khu n l c Aspergillus parasiticus YT10 4.4 Kh n ng t o đ t aflatoxin c a m t s ch ng A.flavus A.paraciticus n ch n http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN K t qu b ng cho th y, 2/11 ch ng A.flavus A.paraciticus (chi m 18% s m u phân tích) có kh n ng t o aflatoxin v i s n l ng kho ng 100-331ppb, trung bình 216 ppb, 9/11 ch ng A.flavus A.paraciticus khơng KIL OBO OKS CO M có kh n ng t o aflatoxin (82% s m u phân tích) So sánh k t qu v i k t qu c a Nguy n H Nguy n Th H ng Trà-1995 [16] ch ng A.flavus A.paraciticus mà ng Trà phân tích c ng nh k t qu c a Kawashima c ng s [39] phân l p t ngơ Theo Kawashima c ng s (1990) kh n ng t o đ c t aflatoxin c a ch ng A.flavus phân l p t ngơ Thái Lan dao đ ng t 2461 ng/g đ n 32446 ng/g K t qu khác bi t cho phép k t lu n: y u t sinh thái nh nhi t đ , đ m, vùng đ t ã đóng vai trò quan tr ng vi c xu t hi n ch ng A.flavus A.paraciticus sinh đ c t khơng sinh đ c t B ng 7: Kh A.paraciticus n ng t o đ c t aflatoxin TÊN CH NG A.FLAVUS I M TT VÀ A.PARACITICUS Ch ng A.flavus CBH2 Ch ng A.flavus NN1 H NNI KPH Ch ng A.flavus YT6 Ngh An KPH Ch ng A.flavus NN2 H NNI 331 Ch ng A.flavus CS1 Ngh An KPH Ch ng A.flavusYT5 Ngh An KPH Ch ng A.flavus GL Hà N i KPH Ch ng A.flavus DC1 Ngh An KPH Ch ng A.flavus VT3 Ngh An KPH 10 Ch ng A.flavus L3 Ngh An KPH 11 Ch ng A.flavus h n h p M c Châu KPH THU HO CH ng Nai ch ng A.flavus S NL S Ghi chú: KPH : khơng phát hi n đ A m t s NG AFLATOXIN B1(PPB) 100 c 4.5 Tác d ng gi m đ c t aflatoxin ngơ b ng s d ng m t s lồi n m có tính ch t đ i kháng v i aflavus có kh n ng t o aflatoxin : http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 4.5.1 Kh n ng gi m s n l ng aflatoxin b ng ch ng A.flavus, A.paraciticus Tricoderma khơng có kh n ng t o đ c t : Vi c s d ng ch ng n m khơng có h i cho ng i mà l i có kh t KIL OBO OKS CO M n ng gi m t ođ c t ho c c ch hồn tồn vi c t o đ c t bi n pháp lý ng Bi n pháp phòng tr n m m c đ c b ng ch ng đ i kháng c n c vào nh ng đ c m di truy n h c (trao đ i ch t, t phân đơi nhân, đ t bi n, ti t enzym có tác d ng thu phân ) Các ch ng n m m c có tác d ng đ i kháng c n đ m b o tính an tồn th c ph m khơng đ c h i v i ng i Do đ gi m đ c t A.flavus aflatoxin ngơ, chúng tơi l y ch ng A.paraciticus khơng t o đ c t ch ng Tricoderma làm đ i t ng thí nghi m B ng : Hi u qu gi m đ c t aflatoxin ngơ b ng ch ng A flavus khơng có kh n ng sinh đ c t : S TT S NL CƠNG TH C THÍ NGHI M i ch ng A.flavus NN2 NG HI U QU AFLATOXIN GI M (PPB) AFLATOXIN (%) 331 A.flavus GL + A.flavus NN 98 A.flavus NN1+ A.flavus NN 14 95 A.flavus YT6 + A.flavus NN2 59 82 A.flavus YT5 + A.flavus NN2 59 82 A.flavus CS1 + A.flavus NN2 59 82 A.flavus DC1 + A.flavus NN2 85 74 A.flavus h n h p (M c Châu) 89 73 + A.flavus NN2 A.flavus L3 + A.flavus NN2 100 70 Ch ng tricoderma +A.flavus 237 28 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN NN2 A.flavus VT3 + A.flavus NN2 K t qu 330 KIL OBO OKS CO M 10 b ng cho th y, vi c ni c y ph i h p lồi A.flavus khơng sinh đ c t v i A.flavus sinh đ c t làm gi m s n l ng afalatoxin m t cách đáng k t 331ppb xu ng 5ppb đ n100ppb t c hi u qu gi m s n l ng aflatoxin đ t 70-98% Trong s ch ng kh o sát có hai ch ng A flavus khơng sinh đ c t phân l p t ngơ GLvà NN1 có tác d ng c ch s phát tri n c a n m s n sinh aflatoxin q trinh t o aflatoxin c a n m A flavus sinh đ c t , đ t hi u qu gi m s n l ng aflatoxin cao nh t theo th t 98% 95% 4.5.2 nh h l ng c a s l ng n m khơng có kh n ng sinh đ c t đ n hàm ng aflatoxin ngơ : B ng 9: Hi u qu gi m đ c t aflatoxin c ch t ngơ b ng ch ng A flavus GL khơng có kh n ng sinh t o đ c t KHU N L C HÀM L C D NG NI (PPB) C Y (KL/ML) TR C LÝ 7,2.10 3000 x 7,2.10 3000 x 7,2.106 3000 S K t qu v is NG AFLATOXIN B1 HI U QU C T (%) X SAU X LÝ 1410 355 254 53 89 92 B ng cho th y, hi u qu gi m đ c t aflatoxin t ng t l thu n bào t A.flavus khơng sinh đ c t cho vào mơi tr ppb aflatoxin GI M ng c ch t ch a 3000 i u ch ng t lu n m c a Petter Cotty đ n, tác gi ch ng minh r ng ch ng khơng sinh đ c t aflatoxin có m t lo i enzym có kh n ng phân hu aflatoxin ch ng A flavus t o mơi tr ng ni c y http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN T t c nh ng v n đ c n đ c làm sáng t th i gian t i có ý ngh a quan tr ng vi c kìm ch kh đ c t aflatoxin s n ph m b nhi m KIL OBO OKS CO M M c dù hi u qu kh aflatoxin B1 ch a đ t đ n m c t đ i, nh ng có tác d ng kh đ c t b ng cách s d ng m t s lồi n m có tính đ i kháng v i aflavus có kh n ng t o aflatoxin đ c ch ng minh có k t qu c th http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN PH N V: K T LU N VÀ KI N NGH 5.1 K t lu n: Ng An, th tr KIL OBO OKS CO M M c đ nhi m n m m c m u ngơ l y Gia Lâm- Hà N i.20/21 m u ngơ ng Ng An b nhiêm m c (chi m 95% s m u phân tích) có t l nhi m m c t 10% đ n 100% trung bình 69% 10/11 m u ngơ thu th p t i th tr ng Ng An, ng Nai th tr ng Hà N i nhi m m c (chi m 95% s m u phân tích) có t l nhi m m c t 10% đ n 100% m c nhi m trung bình 50% M c đ nhi m n m 19 m u l c thu th p Ngh An ng Nai 100% v i t l nhi m m c t 2% đ n 100%, m c nhi m trung bình 34% Các lồi n m nhi m ngơ Aspergillus flavus, Aspergillus niger penicillium Trên l c lo i nâm Aspergillus flavus, mucor s m c khác 4/11 m u ngơ (25% s m u phân tích) đ nhi m aflatoxin v i hàm l ng t 25ppb đ n 36 ppb Phân l p đ c 22 ch ng Aspergillus flavus Aspergillus parasiticus, s p x p thành 11 ch ng có đ c m khu n l c, c u trúc vi h c khác 9/11 ch ng Aspergillus flavus Aspergillus phân l p khơng sinh đ c t , l i ch ng sinh đ c v i hàm l ng 100ppb 331ppb Các ch ng Aspergillus flavus khơng sinh đ t aflatoxin có kh n ng gi m s n l ng c a ch ng Aspergillus flavus sinh đ c t t 331 xu ng 5ppb d n 100ppb N m khơng có kh n ng sinh đ c t có kh n ng gi m hàm l ng aflatoxin ngơ nhi m đ c t 5.2 ngh Vi c phát hi n m t t l cao ngơ tr c thu ho ch nhi m m c, đ c bi t Aspergillus cho ta th y cơng tác s ch ngơ (t h t, làm khơ, đóng gói) có ý ngh a r t quan tr ng Vì theo k t qu nghiên c u c a nhi u n c, n u ngơ khơng k p làm khơ sau đ n ngày đ c t n m s t ng lên nhanh chóng Vì v y http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN c n gi i thi u cho bà nơng dân ph ng pháp s y thu n l i thu ho ch ngơ, c ng nh vi c b o qu n ngơ, l c sau thu ho ch Vi c s d ng mơt s lo i n m có tính đ i kháng v i có kh n ng t o c nghiên c u thêm đ có th ng d ng vào th c ti n phòng tr KIL OBO OKS CO M đ ct c nđ aflatoxin nơng s n b ng ph ng pháp sinh h c http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN TÀI LI U THAM KH O I/- Ti ng vi t: Nguy n Thu Châu, Lê H u Hi u , Tr ng(1997) Nghiên c u m c đ nhi m m c sinh đ c KIL OBO OKS CO M Xn D ng Lê V n Tr ng Thanh Bình, Cao V n Hùng, V t ngơ - bi n pháp phòng tr K t qu nghiên c u khoa h c nơng nghi p 1994-1995, XB Nơng Nghi p B nơng nghi p pháp tri n nơng thơn, trang 200-2003 2.Nguy n Thu Châu(1996) Nghiên c u m c đ nhi m n m m c sinh đ c t Mycotoxin) ngơ, g o Vi t Nam bi n pháp phòng tr Lu n án phó ti n s khoa h c sinh h c B giáo d c đào t o , Tr 138 ng i h c khoa h c t nhiên tr 3.Nguy n Thu Châu, Lê Dỗn Diên, Nguy n Hồ Bình, Nguy n M Hà, V Xn Diên (1995) M c đ nhi m aflatoxin m t s t nh Vi t Nam S d ng cơng ngh sinh h c đ b o qu n, ch bi n nơng s n thu ho ch XB Nơng nghi p 4.Nguy n Lân D ng (1983) M t s s n ph m c a vi n m c t c a vi n m- Nhà xu t b n Khoa h c k thu t 2: trang 82- 83 u Ng c Hào (1995) Th c n nhi m n m gây ch t v t t i trung tâm v t gi ng i Xun- t p chí ch n ni s (5)/1995 trang 47 –48 u Ng c Hào, Nguy n Th Thu n(1994), nghiên c u ng d ng m t vài bi n pháp sinh h c, hố h c phòng ch ng n m m c cho ngơ khơ l c s d ng làm th c n cho gia súc-T p chí khoa h c k thu t thú y, t p I, s u Ng c Hào(6/1993)k t qu nghiên c u ph ng pháp s c kí l p m ng xác đ nh aflatoxin th c n gia súc gia c m T p chí nơng nghi p cơng ngh th c ph m, trang 228- 230 u Ng c Hào(1993), S d ng h p ch t Amin NaHSO làm gi m ho t tính aflatoxin B1 ngơ h t khơ d u l c b nhi m n m m c K t qu nghiên c u khoa h c khoa ch n ni thú y u Ng c Hào(1992), Th c n nhi m n m m c đ c t aflatoxin c a chúng đ i v i gà cơng nghi p- T p chí nơng nghi p cơng ngh 9,trang345-348 th c ph m, http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 10 đ u Ng c Hào, Nguy n Th Thu n , Tú Khánh- m t s lồi n m m c c phát hi n th c n gia c m Cơng trình nghiên c u khoa h c Vi n thú y Qu c gia, 1990-1991 ph u Ng c Hào(1986) Nghiên c u phát hi n đ c tính n m m c b ng KIL OBO OKS CO M 11 ng pháp vi sinh v t h c- T p chí khoa h c k thu t thú y 6,9-14 12 Th H o- Nghiên c u s nh h ng c a aflatoxin ch t ch ng aflatoxin đ i v i ch n ni gà cơng nghi p t i Trung tâm ch n ni gia c m Th y Ph ng- Vi n ch n ni- Lu n án th c s nơng nghi p-Vi n khoa h c k thu t nơng nghi p-1995 13.Lê H u Hi u, Nguy n Th Lâm, Nguy n Thu Châu(1995) Xác đ nh thành ph n gi ng n m m c sinh đ c t aflatoxin ngơ h t sau thu ho ch K t qu nghiên c u đ tài khoa h c c p Nghành B nơng nghi p pháp tri n nơng thơn- Vi n cơng ngh sau thu ho ch 14 Ph ng H ng Miên(1982) N m m c m t s s n ph m cơng nơng nghi p ng pháp kh bi n pháp phòng ch ng 15.B n d ch c a (1980) 16.Nguy n Th H ng H ng Miên, NXB khoa h c k thu t: Moreau Claude ng Trà(1996) Nghiên c u m c đ nhi m n m m c kh n ng t o aflatoxin ngơ c nhân sinh h c, Tr m t s t nh mi n B c Vi t nam- lu n án t t ngi p ng đ i ho c khoa h c t nhiên - i h c Qu c gia Hà n i 17.Nguy n Th Thanh Trà(1998), kh o sát s nhi m n m Aspergillus aflatoxin m t s gi ng ngơ lai ngơ đ a ph ng vùng Gia Lâm –Hà N i vùng ph c n-Lu n án t t nghi p chun ngành b o qu n ch bi n, Tr ng i Nơng nghi p I -Hà n i 18.Nguy n Phùng Ti n(1983), N m mơc m t s s n ph m th c ph m- lu n án Phó ti n S y h c, Vi n sinh h c d ch t Hà N i 19.Tiêu chu n Vi t nam 5617-1991 Ph ng pháp xác đ nh aflatoxin 20.Nguy n Th H ng Hà, nghiên c u m c đ nhi m n m m c ngơ t nh kh n ng phòng ch ng ng c c m ts http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 21.Nguy n Thu Châu c ng s , Ki m sốt aflatoxin ngơ l c có s d ng biên pháp x lý thích ng II/ Ti ng anh: KIL OBO OKS CO M 1.AOAC(1990), Official methods of analysis Carnaghan, R.B.A Hartlay, R.D., and Okelly, J.Toxicity va fluorescence properties of the aflatoxin Nature(lond), 200:1101 2.Christensen Clyde, M.Kaufmann Henry(1969) Grain Storage, Mineapolis, University of Minesota Press 3.Coker R.D Jewers k.Jones B.D 1988: The treatment of the aflatoxin contamination Tropical Science 30:125-136.1985 4.Coker R.D Jewers k.Jones B.D- the destruction of aflatoxin by ammonia:practical possibilities Tropical Science 41:89-13 5.Coker R.D Jewers k.Jones B.D(1998) , aflatoxin control and detoxinfication Tropical Science 41:89-13 6.Dian-Sheng Wang, Yoshitsugu Sugiura,Yoshio Veno, Pravitr buddhanont and Maitue Suttafit(1993), A linuted survey for the nature occurrence of fumonisin in Thailand, Thai j.Toxicolony 42-43 7.Donald and Pieter (1994)- the contamination of A.flavus in maize in the preharvest stage Symposium of toxic microogarnism in the US 8.De long, H., Beerthus, R.K Vles, R.O., Barret, CB., and Ord, W.O.(1962), investigation of the factor in groundnut meal responsible for Turkey disease Biochem Biophys Acta, 65:548-551 9.Doronina, O and Makshimenko, k., (1984)-Analytical methods of detection, identification, aquatitive determination of aflatoxin in foodstuff and fodder, FAO/ UNEP / USSR International training course “Training activities on food contamination control and monitoring with special reference to mycotoxin” Moscow http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN KIL OBO OKS CO M M CL C PH N I: PH N M 1.1 U t v n đ : 1.2.M c tiêu n i dung nghiên c u: 1.2.1.M c tiêu nghiên c u: 1.2.2.N i dung nghiên c u: PH N II: T NG QUAN TÀI LI U 2.1 H n m m c l ng th c: 2.1.1 H n m m c ngồi đ ng: 2.1.2 H n m m c b o qu n: 2.2 ic ng v đ c t n m: 2.3 c t aflatoxin: 2.3.1 Tính ch t hố lý: 2.3.2 Các ph ng pháp phân tích: 10 2.3.2.1 Các ph 2.3.2.2 Ph ng pháp sinh h c: 10 ng pháp hố h c: 10 2.3.3 S t o aflatoxin n m m c: 11 2.3.4 S nhi m aflatoxin ng c c ngồi đ ng: 12 2.3.5 S nhi m aflatoxin th c ph m: 12 2.3.6 c tính c a aflatoxin 13 2.3.6.1 Tác đ ng lên t bào: 13 2.3.6.2 Tác đ ng lên đ ng v t: 14 2.3.6.3 Tác đ ng ng i 18 2.3.7 Gi i h n aflatoxin cho phép s d ng: 20 2.4 V n đ kh nhi m mycotoxin: 20 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 2.4.1 V n đ phòng ng a: 20 2.4.2 Gi m hàm l ng aflatoxin b ng ph ng pháp sinh h c: 21 2.4.3 Bi n pháp phân tách v t lý: 22 ng pháp kh đ c t b ng hố ch t: 23 KIL OBO OKS CO M 2.4.5 Các ph PH N III: 27 V T LI U VÀ CÁC PH NG PHÁP NGHIÊN C U 27 3.1 V t li u: 27 3.1.1 it ng nghiên c u: 27 3.1.2 Các mơi tr 3.1.3 Mơi tr ng PDA: 27 ng Czapex – Dox (g/l): 27 3.1.4 Các hóa ch t dùng cho phân tích đ c t aflatoxin B1 28 3.2 Ph ng pháp: 29 3.2.1 Ph ng pháp l y m u cho phân tích đ c t aflatoxin: 29 3.2.2 Ph ng pháp xác đ nh m c đ nhi m n m m c bên h t ngơ; l c 29 3.2.3 Ph ng pháp làm tiêu b n soi n m m c: 30 3.2.4 Phân lo i lồi n m m c: 30 3.2.5 Ph ng pháp phân tích aflatoxin: 30 3.2.6 Quy tr nh nu i c y n m m c Aspergillus flavus cho vi c nghiên c u kh n ng t o aflatoxin: 34 3.2.7 Th m d kh n ng gi m aflatoxin b ng ch ng aflavus khơng t o đ c t : 35 PH N III: 37 K T QU VÀ TH O LU N 37 4.1 M c đ nhi m n m m c m t s m u ngơ: 37 4.2 Hàm l ng aflatoxin B1 c a ngơ m t s t nh 44 4.3.1 Ch ng A.flavus CBH2 50 4,3,2, Ch ng A.flavus NN1 ( i h c Nơng nghi p I) 51 4.3.3 Ch ng A.flavus NN2( i h c Nơng nghi p 1) 51 4.3.4 Ch ng A.flavus YT6 51 4.3.5 Ch ng A.parasiticus VT3 52 http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 4.3.6 Ch ng A flavus YT5 52 4.3.7 Ch ng A.flavus GL 52 4.3.8 Ch ng A.flavus L3 52 KIL OBO OKS CO M 4.3.9 Ch ng A.flavus CDC1 53 4.3.10 Ch ng A.flavus CS1 53 4.3.11 Ch ng A.flavus h n h p (Ngơ h n h p M c Châu) 53 4.5 Tác d ng gi m đ c t aflatoxin ngơ b ng s d ng m t s lồi n m có tính ch t đ i kháng v i aflavus có kh n ng t o aflatoxin : 58 4.5.1 Kh n ng gi m s n l ng aflatoxin b ng ch ng A.flavus, A.paraciticus Tricoderma khơng có kh n ng t o đ c t : 59 4.5.2 nh h l ng c a s l ng n m khơng có kh n ng sinh đ c t đ n hàm ng aflatoxin ngơ : 60 PH N V: 62 K T LU N VÀ KI N NGH 62 5.1 K t lu n: 62 5.2 ngh 62 TÀI LI U THAM KH O 64 L IC M N Error! Bookmark not defined [...]... tr hay phá hu các aflatoxin trong các s n ph m b nhi m Ph ng pháp gi i quy t t t nh t đ ki m ch aflatoxin là phòng ng a Tuy nhiên s nhi m aflatoxin đơi khi là khơng th tránh đ ng a th t b i, nh ng ph ng pháp khác ph i đ c, và n u s phòng c xem xét t i Các k thu t dùng đ kh aflatoxin trong các m t hàng khác nhau bao g m lo i tr b ng ph ng pháp v t lý hay sinh h c và hố h c 2.4.1 V n đ phòng ng a: thu... n m Aspergillus flavus s n sinh aflatoxin và KIL OBO OKS CO M q trình t ng h p aflatoxin S c ng sinh c a các lồi n m khác (Aspegillus flavus, Aspergillus niger, Tricoderma, Rhizotonia … khơng sinh đ c t ) c ng kìm hãm s phát tri n và kh n ng t o đ c t c a n m m c Aspergillus flavus [38] Các gi i pháp v di truy n h c đã nghiên c u các ch ng đ kháng thí nghi m và ngồi đ ng cho th y s khác nhau l n các. .. Geotrichum Tuy nhiên ch a có s li u v vi c nghiên c u m c nhi m các mycotoxin trên ngơ trong cơng trình nghiên c u này u Ng c Hào và các c ng s [7;9] đã nghiên c u m c nhi m n m m c và aflatoxin trên ngơ c a các t nh S n La và Thanh Hố K t qu phân tích c a 24 m u ngơ h t và 24 m u ngơ b t cho th y các m u này đã nhi m A.flavus v i t n s cao, t 50-80% Các lồi khác nh A.glacus, A.fumigatus và A.candidus... A trong vi c ng n ch n aflatoxin trên ng c c và các lo i h t Các nhà khoa h c Nh t B n đã tìm ra m t s ch ng B.subtilis có kh n ng c ch s phát tri n c a n m Aspergillus flavus s n sinh aflatoxin và q http://kilobooks.com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN trình t ng h p aflatoxin c a chúng Các nhà khoa h c ch ng vi khu n và 7 ch ng n m men đ Thái Lan c ng tìm ra 32 c phân l p t ngơ và đ t tr ng ngơ có ho... TRỰC TUYẾN và đ nh l ng các aflatoxin có th th c hi n b ng k thu t s c kí b n m ng, s c kí l ng hi u cao n ng (HPLC) và ELISA 2.3.3 S t o aflatoxin do các n m m c: n ng t o aflatoxin th ng đ c th y hai ch ng c a hai lồi KIL OBO OKS CO M Kh Aspergillus flavus Link và A.parasiticus speare Trong nh ng n m g n đây ng i ta đã phát hi n kh n ng t o aflatoxin A.nomimus Các ch ng t o ra aflatoxin c a Aspergillus. .. n nơng nghi p v s nhi m Aspergillus s n sinh aflatoxin Th m chí nh ng ph ng pháp nơng nghi p ti n b đã cho th y m t th c ti n là s nhi m Aspergillus s n sinh aflatoxin trong l c c KIL OBO OKS CO M khơng th tránh đ m c đ th p là 2.4.2 Gi m hàm l ng aflatoxin b ng ph ng pháp sinh h c: Nhi u hố ch t có th phá hu aflatoxin tinh khi t hay aflatoxin trong các ngun li u t nhi m t nhiên nh : chlorin, ozon,... đo n các t bào đ ng v t và th c v t (Ong,1975) Aflatoxin gây đ t bi n gen các vi khu n nghiên c u, khi ho t hố b ng các ch ph m Microsom t gan chu t và t gan ng i(Wong và Hsiter, 1976) Tuy nhiên khơng quan sát th y tác d ng gây đ t bi n chu t cái b nhi m aflatoxin theo đ ng b ng v i li u 5mg/Kg th tr ng (Leonard và CS, 1975) 2.3.6.3 Tác đ ng ng i Nhi u nghiên c u v các vùng dân c gi i cho th y: Các. .. aflatoxin Các cơn trùng gây th ng t n cho h t c ng là y u t đ i v i s nhi m Aspergillus flavus S gây th ng t n cho cơn trùng cho ngơ ngồi đ ng c ng có th đi kèm ho c ti p theo s nhi m Aspergillus flavus và s t o aflatoxin tr ho ch Aflatoxin c ng nhi m n ng trên bơng lúa m ch n c thu [51] 2.3.5 S nhi m aflatoxin trong th c ph m: M c d u các aflatoxin đã đ nh ng h u h t s nhi m t p trung c tìm th y các. .. con ng đ i và th c ph m c x lý, đơi khi c n ph i tho mãn m t s u c u khác, ch ng h n v i Stretoroccus lactis đòi h i ni trên mơi tr ng dinh d ng đ c bi t, nên khơng thích h p đ i v i vi c x lý trên ng c c và th c ph m G n đây các nhà khoa h c đã tìm th y m t s ch ng B.subtilis s n sinh iturin A Iturin A có kh n ng c ch r t m nh m s phát tri n c a các n m s n sinh aflatoxin và q trình t ng h p aflatoxin. .. gây ung th c a các aflatoxin đã đ và đ c IARC đánh giá l i [50] c Wogan nghiên c u [51] m c đ t bào vi c cho u ng aflatoxin v i li u khác nhau đã nhanh chóng c ch rõ ràng enzym AND và ARN polymeraza gan, các đáp ng t ng t đã đ c quan sát vi c ni c y các t bào ng i và đ ng v t Q trình sinh t ng h p protein c ng b h ng, đ c bi t trong đi u ki n khi mà q trình sinh t ng h p ch u nh h trình sinh t ng h p ...http:/ /kilobooks. com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN l ng th c, th c ph m Gi i h n v m c nhi m aflatoxin m... l c tr ng m t s t nh kh n ng phòng tr ch ng Aspergillus aflavus khơng sinh đ c t ” b ng http:/ /kilobooks. com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 1.2 M c tiêu n i dung nghiên c u: 1.2.1 M c tiêu nghiên... ng ch ng Aspergillus flavus lo i n m khác khơng sinh đ c t PH N II: T NG QUAN TÀI LI U http:/ /kilobooks. com THƯ VIỆN ĐIỆN TỬ TRỰC TUYẾN 2.1 H n m m c l ng th c: Theo Christensen [22] có hai