báo cáo dự án cây thông đỏ và Taxotere

BO CO V PHNG PHP TCH CHIT, BN TNG HP HOT CHT TAXOTERE Cể TRONG L CY THễNG VIT NAM V KH NNG SN XUT THUC IU TR UNG TH T HOT CHT TAXOTERE I THễNG TIN CHUNG V cõy Thụng Vit Nam Cõy Thụng khụng phi l loi cõy c hu ch cú Vit Nam m phõn b ri rỏc t chõu M, chõu u sang chõu Loi Thụng mc vựng Lõm ng, Vit Nam (Qun th th nht nm nỳi Voi, tri trờn din tớch chng 10ha, vi 60 cõy Qun th th hai nm nhng thung lng thuc a phn Phỏt Chi, thuc xó Xuõn Trng, giỏp ranh gia huyn n Dng vi thnh ph Lt, vi 200 cõy, trờn din tớch khong 50ha) c chng minh l cú giỏ tr cao hn Thụng cỏc vựng khỏc Vit Nam vỡ ch s tớch ly hot cht cao hn Theo TS Trn Khỏnh Vin, hm lng hot cht tớch ly cõy Thụng ti Vit Nam tng ng vi cõy Thụng Phỏp loi ang c hóng dc phm Sanofi Aventis dựng bo ch Taxotere Th nghim 10 mu Thụng Lõm ng chit tỏch c taxol lm nguyờn liu bo ch thuc cha tr bnh ung th, ú cú mt mu chit tỏch c hot cht 10deacetyl baceatin III chuyn húa taxol cao nht th gii Phõn vin Sinh hc Lt ó nghiờn cu thnh cụng nhiu chng trỡnh liờn quan n cõy Thụng nh: nhõn ging hu tớnh, vụ tớnh; nuụi cy t bo v nuụi cy t bo Thụng di dng bioreactor (tm gi l lc ln) mụi trng lng to ngun nguyờn liu chit tỏch taxol mt cỏch nhanh chúng v vi s lng ln Cho n nay, ó hon ton lm ch vc nhõn ging bng phng phỏp vụ tớnh giõm hom Vic trng, nghiờn cu iu kin sinh thỏi cho cõy phỏt trin cng ó c Trung tõm Nghiờn cu lõm sinh Lõm ng thc hin vi quy mụ 5ha; Cụng ty c phn Y Dc phm VIMEDIMEX hin ang trng, khai thỏc trờn tng din tớch ti Lõm ng Theo kt qu ca ti cp Nh nc hon thnh nm 2010, chit xut th 0,5kg 10 - DB III v 10g taxol lm nguyờn liu iu ch thuc cha tr ung th, hm lng tin cht 10-DB III tng hp taxol ca Thụng Lõm ng cao gp nhiu ln so vi loi Thụng ang c dựng lm nguyờn liu sn xut thuc cha ung th trờn th gii l Taxus brevifolia v Taxus baccata V sn xut thuc cú ngun gc t Taxol v Taxotere Hin nay, húa tr, dc phm c s dng nhiu v hiu qu nht iu tr ung th bung trng, ung th vỳ, ung th phi l: Taxol (c phỏt trin t phõn t Paclitaxel hot húa ca cụng ty Bristol Myers Squibb - M) v Taxotere (c phỏt trin t phõn t Docetaxel hot húa ca cụng ty Sanofi Aventis Phỏp) C hai hot cht ny u c chit xut t v v lỏ cõy Thụng Cỏc taxanes cú ngun gc t Thụng n c cụng nhn l thuc iu tr ung th cú doanh s ln nht v cú tng trng tt trờn th gii gm cú paclitaxel (Taxol) v docetaxel (Taxotere) - Paclitaxel u tiờn c phõn lp t v cõy Thụng vo nm 1960 t loi Thụng Bawcx M Taxus brevifolia, sau ú c hóng dc phm Bristol-MyersSquibb (BMS) thng mi húa lm thuc iu tr ung th vi tờn bit dc l Taxol đ - Docetaxel l dn xut bỏn tng hp ca paclitaxel chit c t lỏ cõy Thụng chõu u Taxus baccata, thng mi húa bi hóng dc Sanofi di tờn Taxotere đ, s ht hn bn quyn nm 2013 Hin nay, thuc ny c s dng rng rói iu tr nhiu bnh ung th nh: ung th phi, ung th vỳ, ung th tin lit tuyn, Kaposis sarcoma, ung th ng tiờu húa, ung th bng quang v mt s dng ung th khỏc Theo cỏc chuyờn gia v dc, hai loi thuc ny cũn c s dng nhiu nm ti Trong nhng nm gn õy cú nhiu nghiờn cu nhm tỡm cỏc dn xut ca cỏc thuc trờn (taxane th h 2) hoc cỏc thuc cú cựng c ch tỏc dng nhng khụng cú ngun gc t taxane (Halaven, Ixempra, Vinflunine) nhm gia tng tớnh chn lc, hiu qu, d hp thu, gim c tớnh, gim tớnh khỏng thuc ca t bo ung th Ngoi ra, hng nghiờn cu tỡm cỏc dng bo ch mi cho dc cht trờn hn ch tỏc dng ph ca thuc cng c trin khai Trong thp k gn õy, ớt nht taxane mi ó c a vo th nghim lõm sng, hn nhng thuc mi cú th ci tin c t dc cht quan trng trờn nh: Jevtana, Abraxane, Tesetaxel, Opaxio, EndoTAG, Larotaxel, Genexol-PM, Taxoprexin, BMS-184476 Dng bo ch nano gn paclitaxel 130-nm vi albumin (nab-paclitaxel, bit dc Abraxaneđ), cng ó c FDA phờ chun nm 2005 iu tr ung th ng hụ hp, ung th vỳ giai on mun v nm 2010 ó c FDA phờ chun iu tr ung th tin lit tuyn di cn, khụng ỏp ng hormone ó khỏng vi iu tr trc ú vi docetaxel Nhu cu th trng Theo c tớnh ca T chc Y t th gii (WHO), hng nm trờn th gii cú khong 11 triu ngi mc mi bnh ung th v triu ngi cht ung th D bỏo vo nm 2015 mi nm th gii s cú 15 triu ngi mi mc bnh ung th v triu ngi cht ung th, ú 2/3 l cỏc nc ang phỏt trin khu vc chõu Thỏi Bỡnh Dng, ung th l mt nguyờn nhõn chớnh gõy t vong ngi T l cht ung th lờn ti 100/100.000 dõn c, Trung Quc, Nht Bn, Hn Quc v Singapore Ch tớnh riờng Trung Quc, mi nm ung th ó cp i sinh mng ca khong 1,3 triu ngi Vit Nam, theo s liu thng kờ qua ghi nhn ung th ti H Ni, TP H Chớ Minh v mt s tnh, c tớnh mi nm nc ta cú khong 150.000 bnh nhõn ung th mi mc v 75.000 ngi cht vỡ ung th, s ny cú xu hng ngy cng gia tng D bỏo ti nm 2020 mi nm Vit Nam cú khong 200.000 trng hp mi mc v 100.000 trng hp cht ung th Ch tớnh riờng Bnh vin Ung bu TPHCM, nm 2006, s tin chi mua cỏc bit dc t Paclitaxel v Docetaxel ó lờn ti 19 t ng Vi giỏ thuc Taxol v Taxotere hin rt cao so vi mc thu nhp ca ngi dõn hin thỡ hng sn xut thuc generic l cn thit nht l Vit Nam cú li th v vựng trng nguyờn liu l cõy Thụng 3.1 Paclitaxel (Taxol) Mt liu iu tr cn n 3g paclitaxel/bnh nhõn Vi 10 triu bnh nhõn ung th mc mi mi nm trờn th gii, c tớnh cn khong tn taxol Theo bỏo cỏo ca Bnh vin K, hin Vit Nam cú hn 2.000.000 bnh nhõn ung th cỏc loi Vi ph iu tr rng, paclitaxel cú th c ch nh cho khong 20% bnh nhõn ung th, tc l khong 400.000 ngi, nh vy cn khong 800 1.200 kg taxol/nm Hin hng nm Vit Nam phi nhp khu ti hn 30 triu USD tin thuc iu tr ung th, ú c tớnh doanh s t Taxol khong gn triu USD, ỏp ng khong 30% nhu cu iu tr Nu t ch c sn xut, gim giỏ thnh s cú thờm nhiu bnh nhõn cú nhu cu c tip cn vi thuc iu tr Cựng vi s h tr v c ch chớnh sỏch tiờu th sn phm, sau kt thỳc d ỏn cú th chim c khong 50% th phn sn phm cựng loi ti th trng nc v cú th xut khu sang s nc lõn cn, nh vy chỳng ta cn khong 400-600 kg taxol/nm 3.2 Docetaxel (Taxotere) Th phn 10 thuc iu tr ung th cú doanh s hng u ti Phỏp Docetaxel Doanh s ton cu ca Taxotere hin khong t USD/nm Ti Phỏp, docetaxel chim 11,5% th phn thuc iu tr ung th v ch sau nhúm cỏc thuc cú ngun gc sinh hc Giỏ thnh ti Vit Nam ca Taxotere khỏ t, mt l Taxotere 20mg cú giỏ khong 3.000.000 ng Vit Nam Mt bnh nhõn mun cha bnh phi s dng t 600 - 1000mg, tc khong 150.000.000 ng Vit Nam Hin nay, taxol, taxotere ó ht hn bo h c quyn Vic sn xut hai thuc generic t Thụng ang l nhu cu c t i vi nhiu nc, ú cú nc ta Mun sn xut thuc generic paclitaxel, docetaxel cn lng nguyờn liu ln t cõy Thụng v nh mỏy chit xut quy mụ khụng nh Cỏc nh khoa hc Vit Nam ó tỏch chit thnh cụng cht 10deacetyl baccatin III (10- DAB III) (mt hp cht quan trng tng hp paclitaxel, docetaxel) t cõy Thụng , t ú ó bỏn tng hp c paclitaxel v c bit l docetaxel cú hot tớnh mnh gp ln paclitaxel nhng li ớt c Li th cnh tranh trin khai d ỏn ti Vit Nam l hm lng 10- DAB III cú lỏ ca loi Thụng Taxus wallichiana (Thụng Hymalaya) Lõm ng cao hn so vi nhiu loi Thụng khỏc trờn th gii hin ang c s dng sn xut thuc iu tr ung th t Thụng Cỏc nghiờn cu cú liờn quan sn xut paclitaxel, docetaxel ti Vit Nam 4.1 Phỏt trin vựng nguyờn liu v ging: T nm 2002 n nay, mt s ti nghiờn cu v cõy Thụng ó c trin khai ti Vit Nam nh sau: (1) Nghiờn cu sinh lý, sinh thỏi v k thut trng cõy Thụng (Taxus wallchiana Zucc.) ti Lõm ng nhm to ngun nguyờn liu lm thuc chng ung th (2003 - 2005) ti cp B Y t ó nghim thu 2005 (2) Nghiờn cu khai thỏc v phỏt trin ngun gen mt s cõy thuc c trng Tõy Nguyờn nhm to vựng dc liu phc v sn xut cụng nghip dc ti cp B Y t ó nghim thu vi mt s kt qu chớnh nh sau: ó xõy dng c s d liu phc v bo tn cõy Thụng T wallichiana, a c quy trỡnh nhõn ging bng cnh hom vi t l r >90%, xõy dng tiờu chun ging cp c s v tiờu chun nguyờn liu lỏ Thụng ; quy trỡnh c bn nuụi trng Thụng t nng sut t 12 16 tn lỏ ti/ha/nm (khong tn khụ/ha/nm), hm lng 10-DAB III t trung bỡnh 0,21% v paclitaxel t 0,0067% Bc u ó phỏt trin c mt din tớch trng Thụng khong (3) Khai thỏc v phỏt trin ngun gen Thụng (Taxus wallichiana Zucc.) ti Lõm ng lm nguyờn liu sn xut thuc iu tr ung th Nhim v khai thỏc v phỏt trin ngun gen cp nh nc b Khoa hc v Cụng ngh qun lý ang c trin khai vi mc tiờu to ngun ging Thụng cú hm lng 10-DAB III v paclitaxel cao quy mụ phỏt trin vựng trng din tớch ln nhm cung cp nguyờn liu cht lng cao, n nh cho quỏ trỡnh sn xut thuc t Thụng 4.2 Nghiờn cu cụng ngh chit xut, bỏn tng hp nguyờn liu v bo ch thuc paclitaxel, docetaxel (1) Nghiờn cu qui trỡnh cụng ngh tỏch chit hot cht sinh hc t cõy Thụng v cõy da cn Vit Nam to ngun nguyờn liu sn xut thuc ung th v xut khu ti thuc Chng trỡnh KC.10/06-10, ó nghim thu nm 2010 Kt qu bc u ó cú c cụng ngh chit tỏch 10-DAB III quy mụ phũng thớ nghim t hiu sut 0,04 0,07% (tng ng 0,4 0,7kg 10-DAB III/1 tn lỏ khụ) Tuy nhiờn, so vi hm lng tuyt i ca 10-DAB III lỏ Thụng (Taxus wallichiana Zucc.) ti Lõm ng l 0,21% thỡ hiu sut thu hi ca qui trỡnh cũn thp ch t t 20 30%, hin hiu sut chit 10-DAB III ca th gii vo khong 1kg/tn tng ng hiu sut thu hi 70 80% Vi li th v hm lng 10DAB III t nhiờn cao, cú th hy vng ci thin cụng ngh chit xut nõng hiu sut chit t t 1kg 1,2kg/tn tng ng hiu sut thu hi t 60% (2) Nghiờn cu quy trỡnh cụng ngh chit tỏch v tinh ch cỏc hp cht taxoid t cõy Thụng Vit Nam v quy trỡnh chuyn hoỏ chỳng thnh taxol v taxotere dựng iu tr ung th ti cp Vin Hn lõm KH&CN Vit Nam, ó nghim thu nm 2005 Bc u ó to qui trỡnh cụng ngh bỏn tng hp paclitaxel v docetaxel qui mụ 100g/m t hiu sut qui trỡnh 60% Trờn c s cỏc kt qu nghiờn cu ny, cú th nh hng nõng cp thnh qui trỡnh cụng ngh bỏn tng hp qui mụ 1kg/m cú tớnh n cỏc iu kin sn xut cụng nghip (3) Nghiờn cu bo ch thuc tiờm paclitaxel qui mụ pilot ti thuc Chng trỡnh KC.10/11-15, ang c trin khai (4) Nghiờn cu bo ch thuc tiờm Liposome Paclitaxel iu tr ung th ti thuc Chng trỡnh KC.10/11-15, ang c xột duyt Do paclitaxel v docetaxel cú nhiu im tng ng v tớnh cht húa hc v dc lý, kt qu ca ti cng s l c s khoa hc quan trng trin khai nghiờn cu bo ch thuc tiờm docetaxel qui mụ cụng nghip Cỏc kt qu nghiờn cu trờn l tin quan trng, lm tin cú th trin khai d ỏn Chng trỡnh Cụng ngh sn xut: S 1: Nguyờn liu khụ (lỏ, v thõn) c nghin thnh bt cú kớch thc 0,5-1 mm Chit vi methanol, nhit phũng, cú khuy, lng dung mụi gp ln dc liu Pha loóng dch chit methano bng nc, nng methanol cũn 10-30% Lc, loi b khụng tan, ly dch lc Cụ thu hi dung mụi di ỏp sut gim Dch chit nc cũn li c chit vi ethyl acetat Dch chit c base húa bng Na2CO3 n pH=8 Cụ thu hi dung mụi di ỏp sut gim, thu c 10-DAB III Tinh ch 10-DAB III bng cỏch kt tinh li vi acetonnitrile S 2: V, lỏ Thụng ó c phi khụ v xay nh Chit vi methanol, nhit phũng, cú khuy trn Dch chit c cụ thu hi di ỏp sut gim Dch chit cn ó c cụ c hũa vo acetone, khuy u 1-2 h nhit phũng Lc cỏc cht rn khụng tan, cụ dch lc ỏp sut gim Dch sau cụ c hũa vo dung dch aceton/nc (t l 2:8 w/w) Ta khụng tan dch trờn c lc cú cha nhiu taxol Dch chit aceton/nc c chit lng lng vi toluen loi kộm phõn cc hn 10-DABIII Dch chit aceton/nc c chit vi diclometan.Lm khan dch diclometan bng Na2SO4 Cụ di ỏp sut gim dch diclometan, lm khan thu c 10-DAB III Tinh ch 10DAB III bng cỏch kt tinh li acetone nitrile Ch yu bng phng phỏp bỏn tng hp t tin cht 10-deaxetyl bacatin III t cõy Thụng Lt lm nguyờn liu tng hp taxol v taxotere Tng hp 10deaxetyl bacatin III ch yu ỏp dng mt s s nguyờn lý sau: II THIT K D N hon thin cụng ngh v sn xut thuc iu tr ung th t dc cht c chit xut t cõy Thụng Vit Nam, xut xõy dng v thc hin d ỏn: Hon thin cụng ngh chit xut 10-deacetyl baccatin III t Thụng (Taxus wallichiana), bỏn tng hp nguyờn liu paclitaxel, docetaxel v sn xut thuc iu tr ung th quy mụ pilot v cụng nghip Thuc Chng trỡnh i mi cụng ngh quc gia n nm 2020 Thi gian thc hin: 05 nm (2014-2018), ú: - Giai on nghiờn cu hon thin cụng ngh, sn xut th nghim: 02 nm (2014-2015) - Giai on sn xut th sn phm thuc v th nghim thuc: 03 nm (20152017) - Giai on a vo sn xut cụng nghip: 02 nm (2017-2018) - M rng vựng trng nguyờn liu: 03 nm (2015-2018) nh hng mc tiờu: 1.1 Mc tiờu v khoa hc cụng ngh: - Nõng cp, hon thin c cụng ngh chit tỏch, tinh ch 10-DAB III t lỏ Thụng qui mụ pilot (1000kg lỏ/m) cú hiu sut thu hi 10-DAB III cao trờn 60% tng ng 1,2kg/tn lỏ khụ, n nh, t tiờu chun nguyờn liu tng hp docetaxel - Hon thin c cụng ngh chit tỏch v tinh ch paclitaxel nh l ph phm ca quỏ trỡnh chit tỏch v tinh ch 10-DAB III - Nõng cp v hon thin c cụng ngh bỏn tng hp docetaxel, paclitaxel qui mụ pilot (1kg/m) i t 10-DAB III thiờn nhiờn v mch nhỏnh l dn xut tertbutyloxycarbonyl ca (2R,3S)-phenylisoserin, t hiu sut chung > 60% - Hon thin c quy trỡnh bo ch a vo sn xut mt s dng bo ch tiờn tin ca docetaxel v paclitaxel qui mụ pilot v cụng nghip to thuc iu tr ung th phc v th trng nc, hng ti xut khu - Hỡnh thnh c vựng trng Thụng ngn ngy trờn din tớch 300 500 ha, cú kh nng khai thỏc liờn tc sau 36 thỏng, cho lỏ cú hm lng hot cht cao v n nh t ớt nht 0,2% 10-DAB III, cú giỏ tr kinh t, lm nguyờn liu cho cụng ngh chit tỏch 10-DAB III v paclitaxel 1.2 Mc tiờu kinh t - xó hi: - Hon thin, lm ch cụng ngh ton din iu kin Vit Nam t vựng trng, chit tỏch bỏn thnh phm n qui trỡnh sn xut docetaxel, t c cỏc tiờu chun dc dng quc t (USP hoc EP) - Cung cp docetaxel nguyờn liu t tiờu chun dc in M (USP) hoc chõu u (EP) cho cụng nghip bo ch thuc ung th taxotere generic - H giỏ thnh v/hoc to ngun cung di thuc taxotere generic nc phc v nhu cu iu tr v nh hng xut khu - nh hng phỏt trin cõy Thụng ngn ngy nh mt cõy cụng nghip, to cụng n vic lm v nõng cao thu nhp ca nụng dõn ti cỏc vựng trng - o to cỏn b nghiờn cu trin khai v Húa dc, hỡnh thnh nhúm nghiờn cu trin khai liờn ngnh, cú s tham gia ca nh khoa hc, doanh nghip, c quan qun lý cht lng, c quan qun lý nh nc, chuyờn gia quc t, lm hỡnh mu cho cỏc d ỏn nghiờn cu trin khai qui mụ ln tng lai Ni dung thc hin ch yu: 2.1 Trờn c s cỏc kt qu ó cú, phỏt trin, m rng vựng trng dc liu Thụng lờn 300 500 ha, ng thi to lp ngun cõy ging cht lng cao m bo cung ng cho vựng trng 2.2 Nghiờn cu hon thin cụng ngh chit tỏch, tinh ch 10-DAB III, taxol t lỏ Thụng qui mụ pilot (1000kg lỏ/m) cú hiu sut thu hi 10-DAB III cao trờn 60%, n nh, t tiờu chun nguyờn liu tng hp docetaxel Cỏc phng phỏp chit xut hin cho nng sut tng i thp, tn thi gian, v s dng mt lng ln dung mụi t tin v c hi vi mụi trng Vỡ vy, nghiờn cu hon thin phng phỏp trung vo cỏc ni dung sau õy: (1) Tng cng hiu sut chit xut (2) Gim thi gian chit xut (3) Gim lng dung mụi c s dng chit tỏch, tinh ch Nghiờn cu s dng nhng loi dung mụi d kim r tin nh nc, aceton, (4) Cụng ngh chit tỏch v tinh ch paclitaxel nh l ph phm ca quỏ trỡnh chit tỏch v tinh ch 10-DAB III (5) Nghiờn cu thu hi, tỏi s dng dung mụi, gim lng cht thi c hi phỏt sinh qui trỡnh nhm mc ớch bo v mụi trng T ú nõng cp, hon thin qui trỡnh qui mụ cụng nghip 2.3 Nghiờn cu cụng ngh bỏn tng hp docetaxel qui mụ pilot (1kg/m) i t 10-DAB III thiờn nhiờn v mch nhỏnh l dn xut tert-butyloxycarbonyl ca (2R,3S)phenylisoserin, t hiu sut chung > 60% 2.4 Nghiờn cu cụng ngh bỏn tng hp paclitaxel qui mụ pilot (1kg/m) i t 10-DAB III thiờn nhiờn, t hiu sut chung > 60% 2.5 Nghiờn cu n nh, c tớnh cp, c bỏn trng din v tiờu chun húa nguyờn liu phự hp vi cụng ngh bo ch thuc ca docetaxel v paclitaxel generic 2.6 Nghiờn cu dng bo ch tiờn tin, phự hp vi tiờu chun quc t trin khai sn xut th qui mụ pilot v cụng nghip 2.7 ỏnh giỏ cht lng ca ch phm theo cỏc tiờu chun hin hnh ca M hoc chõu u 2.8 Th tỏc dng tng ng sinh hc ca sn phm so vi cỏc nguyờn liu ang lu hnh 2.9 Lp h s xin giy phộp lu hnh ca B Y T D kin sn phm: - Qui trỡnh chit tỏch v tinh ch 10-DAB III, taxol qui mụ 1000kg lỏ/m, hiu sut thu hi 10-DAB III trờn 60% (tng ng vi M v cỏc nc EU) - Qui trỡnh bỏn tng hp docetaxel, paclitaxel qui mụ pilot (1kg/m) i t 10DAB III thiờn nhiờn v mch nhỏnh l dn xut tert-butyloxycarbonyl ca (2R,3S)phenylisoserin, t hiu sut chung > 60% - Dõy chuyn thit b chit tỏch, tinh ch v bỏn tng hp phự hp qui mụ - D liu n nh, c tớnh cp, c bỏn trng din v tiờu chun nguyờn liu ca docetaxel, tng t tiờu chun USP hoc EP - Dng bo ch thớch hp cho sn phm - D liu th tng ng sinh hc ca ch phm so vi cỏc sn phm ang lu hnh - Giy phộp lu hnh sn phm ca B Y T - Vựng nguyờn liu Thụng 300 500 ti Lõm ng Kh nng v a ch ỏp dng: - Nguyờn liu docetaxel v paclitaxel s c ỏp dng ti cỏc nh mỏy dc phm nc nh Dc Bỡnh nh, Domesco, BV Pharma sn phm thuc docetaxel v paclitaxel generic - Ch phm thuc docetaxel v paclitaxel s c cung cp cho h thng thuc danh mc bo him y t ti cỏc bnh vin U bu ton quc - Vựng nguyờn liu s c thng mi húa v chuyn giao cho cụng ty Vimedimex II qun lý v khai thỏc Cỏc bờn tham gia thc hin d ỏn Cú s phi hp gia cỏc bờn: - n v nghiờn cu: Vin Húa hc v mt s n v thuc Vin Hn lõm Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam; Vin Húa hc cỏc hp cht thiờn nhiờn CH Phỏp (Institut de Chimie des Substances Naturelles, CNRS France), õy l Vin nghiờn cỳu phỏt minh Taxotere v ng s hu bn quyn v Taxotere vi cụng ty Sanofi Aventis Phỏp1 - Doanh nghip dc v T chc phi hp: Cụng ty c phn Y dc phm Vimedimex; Cụng ty c phn BV Pharma; Cụng ty Dc TTBYT Bỡnh nh; Vin Kim nghim Thuc Trung ng D kin kinh phớ thc hin d ỏn: Tng kinh phớ: 65 t ng, ú: - Kinh phớ t ngun ngõn sỏch nh nc thuc Chng trỡnh: 40 t ng - Kinh phớ t ngun khỏc: 10 t ng - Kinh phớ t a phng, h tr phỏt trin vựng trng nguyờn liu: 15 t ng Tớnh n thi im hin nay, tng s kinh phớ nh nc u t cho cỏc nhim v KH&CN liờn quan n ny ó vt qua s 20 t ng, nhiờn, Vit Nam cha sn xut c thuc chng ung th cú ngun gc t taxotere v tng hp c taxotere tinh ch t cht lng tng ng trờn th trng quc t, hiu xut chit xut, tng hp taxotere thp Nu d ỏn c chp thun s to iu kin hon thin cụng ngh v sn xut thuc iu tr ung th t dc cht c chit xut t cõy Thụng Vit Nam D ỏn s cú nhiu bờn cựng tham gia (nghiờn cu hon thin cụng ngh, sn xut th, kim nghim c tớnh dc cht, phỏt trin vựng nguyờn liu, bỏn tng hp v sn xut thuc), mi bờn thc hin d ỏn n v ú ng ký v u t i ng thc hin d ỏn Cỏc t chc qun lý, iu phi d ỏn gm: Ban Ch nhim Chng trỡnh; Cc ng dng v Phỏt trin cụng ngh; Qu i mi cụng ngh quc gia; B Y t; Vin Hn lõm KHCN Vit Nam v y ban nhõn dõn tnh Lõm ng Ph lc bỏo cỏo: Thụng (Taxus spp Taxaceae) l cõy xanh sinh trng chm vi lp tht qu mu vi cỏc loi c nghiờn cu nhiu nh T baccata, T brevifolia, T canadensis v T cuspidata Cỏc loi thuc chi Taxus cha cỏc taxanes thuc nhúm diterpenoids l ngun vt liu quan trng cho cụng nghip sn xut cỏc thuc iu tr TS Ngụ Quc Anh, Vin Húa hc Vin Hn lõm KHCN Vit Nam l nghiờn cu sinh v thc sinh khoa hc ti Vin Húa hc cỏc hp cht thiờn nhiờn CH Phỏp Vin ny cng s h tr d ỏn s dng bn quyn phỏt minh Taxotere (VIII) t nguyờn liu u l benzandehyde v p-anisidine Phn ng s dng dung mụi l EtOH, c thc hin thi gian l - h nhit 25 C, hiu sut phn ng t c khỏ cao l 85% Tip theo l phn ng úng vũng to lactam (V) vi vic s dng tỏc nhõn l acetyl chloacetic dung mụi DCM, tỏc nhõn base húa l Et3N, hiu sut ca phn ng ny l 90% õy l phn ng tng hp bt i nờn ngoi vic to sn phm trờn cũn thu c sn phm ph ca quỏ trỡnh tng hp bt i tng ng Hiu sut phn ng thu c rt cao, iu ny cú vai trũ quan trng thc hin quy mụ ln Trong bc tip theo, vic thy phõn nhúm -C6H4OMe to amin bc cho vũng lactam vi tỏc nhõn kh húa l Ce(NH4)NO3 ó t c hiu sut 92% Giai on thay th nhúm -AcO khung lactam bng nhúm Et3Si sau ú vi tỏc nhõn Silan húa l TES, mụi trng pirolidine ó c thc hin vi hiu sut phn ng t 90%, tip theo l giai on benzoyl húa vo nhúm Et3Si bng vic s dng tỏc nhõn l benzoylcloride mụi trng Et3N Tip ú, giai on m vũng lactam v gn vo sn phm Baccatin III (II) ó c bo v nhúm -OH v trớ s bng Et3Si vi tỏc nhõn kim húa n-BuLi mụi trng THF, thu c hiu sut khỏ cao 98% im hn ch õy l tỏc gi ó dựng tỏc nhõn kim húa khỏ t n-BuLi, ú khú cú th s dng quy mụ ln mc dự hiu sut phn ng thu c rt cao Bc cui cựng l quỏ trỡnh loi b nhúm bo v bng tỏc nhõn acid húa HF dung mụi piridin giỳp chuyn húa gn nh hon ton thnh sn phm paclitaxel vi hiu sut t 98-100 % Nh vy theo quy trỡnh ny thỡ hiu sut ca tng phn ng u t trờn 80% Khú khn nht nhng li rt phc ca quy trỡnh ny l phn ng tng hp to hp cht (V) Do õy l phn ng tng hp bt i nờn vic to cỏc ng phõn cis () v trans () l iu khú trỏnh ng phõn ny khỏ nhy cm vi iu kin Vit Nam v vic phi tri qua nhiu giai on tng hp tip ú s rt khú khn cú th gi nguyờn cu hỡnh mong mun Theo sỏng ch US 5760251 [27], paclitaxel c tng hp t mch nhỏnh v baccatin Trong quy trỡnh ny, mch nhỏnh c tng hp qua rt nhiu giai 53 on, cú mt s giai on hiu sut phn ng khụng cao, nguyờn liu u khỏ t tin õy cng l nguyờn nhõn lm cho quy trỡnh cú giỏ thnh cao Phng phỏp tng hp paclitaxel i t 10-DAB v mch nhỏnh l cỏc dn xut ca oxazoline c nhiu tỏc gi s dng cỏc sỏng ch WO 9945001, WO 0073293 ) Phỏt trin theo phng phỏp ny, Gaetan Caron v cng s ó tng hp paclitaxel t nguyờn liu u l 10-DAB vi mch nhỏnh Hu ht cỏc giai on tng hp u cho hiu sut khỏ, nht l nhng giai on cui ca quy trỡnh tng hp Theo F Gueritte-Voegelein v cng s, giai on u tng hp baccatin III s dng tỏc nhõn Silan húa l Et3SiCl mụi trng piridin ó thu c hiu sut khỏ cao l 86% [31] Mc dự cụng thc 10-DAB cú bn nhúm - OH, nhiờn vic s dng tỏc nhõn cú tớnh chn lc trờn lm tng hiu sut ca phn ng l mt iu quan trng vic ỏp dng tng hp quy mụ ln Giai on tip theo l axyl húa vo v trớ -OH s 10 ca khung taxane, vi tỏc nhõn acyl húa l CH 3-COCl mụi trng piridin cng thu c hiu sut khỏ cao l 86% Giai on tip theo ca quy trỡnh tng hp l thc hin phn ng este húa gia sn phm thu c (III) sau bo v nhúm -OH, vi tỏc nhõn acid l (4S,5R)-3(tert-butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic mụi trng base l DMAP, xỳc tỏc thc hin quỏ trỡnh l DCC, phn ng c thc hin o nhit 80 C thi gian h ó thu c hiu sut rt cao l 99% õy l giai on quan trng ca quy trỡnh tng hp ú vic nõng cao hiu sut l iu rt cn thit, õy vi cỏc tỏc nhõn trờn gn nh phn ng chuyn húa sang sn phm (IV), iu ny rt quan trng thc hin quy trỡnh quy mụ ln Giai on m vũng to amin sau ú mụi trng acid hu c l HCOOH, o thi gian phn ng h nhit 20 C ó t c hiu sut 80% Vic s dng cỏc tỏc nhõn trờn ó lm tng hiu sut ca phn ng lờn khỏ cao, ng thi thc hin iu kin nhit 20 C cng khỏ thun li iu kin Vit Nam Tip theo ca quy trỡnh tng hp l vic thc hin phn ng benzoyl húa vo v trớ amin va c to vi tỏc nhõn l benzoyl clorid dung mụi l AcOEt/H2O, tỏc nhõn baz húa l NaHCO 3, iu kin 20 C t hiu sut 87% õy l giai on quan trng nht, quyt nh n giỏ thnh ca sn phm thc hin quy mụ ln, hn na vic nõng cao hiu sut s lm gim c 54 lng cht cú sn phm, gim c quy trỡnh tinh ch, ú gim c chi phớ sn xut, h giỏ thnh ca sn phm l iu rt cn thit hin Nh vy nu tớnh bt u t giai on l 10-DAB thỡ giai on tng hp paclitaxel phi i qua bc, vi hiu sut ton b quy trỡnh l 50,9%, õy cng l mt kt qu rt kh quan nu a vo sn xut quy mụ ln Trong sỏng ch WO 2010/062239 A1 [32], paclitaxel c tng hp t 10-DAB vi mch nhỏnh c tng hp theo mt ng hon ton mi Mch nhỏnh c tng hp theo phn ng manich gia mt imine v mt aldehyde vi xỳc tỏc hu c bt i, ú xỳc tỏc hu c bt i em li sn phm vi tinh khit quang hc v hiu sut phn ng cao Mch nhỏnh c tng hp theo phn ng Mannich gia N(phenylmethylene)benzamide v -benzyloxyacetaldehyde vi xỳc tỏc l mt trung tõm bt i (R)-proline to thnh 2-benzyl-oxy-3-benzoylamino-3- phenylpropanal vi hiu sut 68% Giai on tip theo l quỏ trỡnh oxy húa to thnh (2R,3S)- phenylisoserine vi hiu sut cao 82% Nh vy, hiu sut quỏ trỡnh tng hp mch nhỏnh l 55,76% Bỏn tng hp docetaxel ó cú nhiu cụng trỡnh nghiờn cu v phng phỏp tng hp docetaxel ó c cụng b Trong ú ỏng chỳ ý nht v cú tớnh kh thi sn xut l phng phỏp bỏn tng hp docetaxel t 10-DAB v mch nhỏnh Chuyn húa 10-DAB thnh cỏc dn xut docetaxel ũi hi s ester húa nhúm OH C13 vi mch nhỏnh Tuy nhiờn 10-DAB li l mt polyol ú cỏc nhúm OH cú kh nng phn ng rt khỏc mt iu kin nht nh, vỡ vy phi chuyn húa thnh cỏc dn xut bo v cỏc nhúm OH v trớ C-7 v C-10, trc ghộp vi mch nhỏnh ti v trớ C-13 Senilh l ngi u tiờn a c s so sỏnh v kh nng phn ng ca nhúm OH 10-DAB vi anhydride acetic dung mụi pyridin l C(7)-OH > C(10)-OH > C(13)-OH > C(1)-OH [33] Alice M Kanazawa v cng s [34] ó cụng b phng phỏp tng hp docetaxel cú tinh khit quang hc cao Phng phỏp tng hp mch nhỏnh 55 t hiu sut khỏ nhiờn cỏc phn ng phi thc hin iu kin nhit o -78 C, phn ng hydrogen húa phc tp, hiu sut thp, mt s nguyờn liu quỏ trỡnh tng hp khỏ c thự, mch nhỏnh khụng thụng dng nờn giỏ thnh cao Trong sỏng ch US 5688977 A [35], docetaxel cng c tng hp qua giai on nhng mch nhỏnh c tng hp t (2R,3S)3-phenylisoserine v benzylchlorofomate Theo sỏng ch US7550608 B2 [36] (S 12), quỏ trỡnh tng hp docetaxel c thc hin qua giai on chớnh Quy trỡnh tng hp ũi hi mt s húa cht dung mụi phc tp, cng nh cỏc iu kin phn ng khc nghit Con ng ny tng hp docetaxel tri qua ớt giai on, hiu sut cao Tuy nhiờn phi tuõn th iu kin khc o nhit v nhit (-35 C) v mt s húa cht c thự, t tin, mch nhỏnh cng cú giỏ thnh rt cao, tỏc nhõn bo v l cỏc dn xut ca silan nhng khụng thụng dng Sỏng ch EP 2161260A1 [37] khụng a phng phỏp tng hp mch nhỏnh Taxotere, m mch nhỏnh c s dng õy l 2-(2, 4dimethoxyphenyl)-3-(2-nitrobenzenesulfenyl)-4(S)-phenyl-5(R) - oxazolidine carboxylic acid Hai nhúm hydroxy 10-DAB c bo v bng trichloro acetyl chloride Cỏc phn ng c tin hnh vi iu kin n gin, cú th ỏp dng quy mụ ln, nhiờn nguyờn liu u khụng t tng hp c, õy l nguyờn liu t tin nờn khú cú kh thi ỏp dng ti nc ta Pawel Dziedzic ó cụng b trờn Tetrahedron letters [38] phng phỏp iu ch docetaxel t N-Boc imine v -oxyaldehyde vi xỳc tỏc hu c l (R)- proline cú chn lc quang hc cao Phn ng to mch nhỏnh gm giai on vi hiu sut cao Phng phỏp tng hp cỏc hp cht bt i s dng xỳc tỏc hu c ang l mt nhng xu hng hin i vi nhiu u im: chn lc quang hc cao, gim sn phm ng phõn khụng mong mun nờn cú ý ngha rt ln vi mụi trng Trong nhng nm gn õy cú rt nhiu cụng trỡnh v lnh vc ny ó c cụng b vi nhng ng dng to ln vic tng hp cỏc hp cht bt i cú hot tớnh sinh hc Tuy nhiờn chỳng tụi ang gp mt s khú khn tng hp mch nhỏnh theo ng ny C th l phn ng Mannich s dng xỳc tỏc hu c rt khú kim soỏt Qua tham kho cỏc nghiờn cu trờn th gii, chỳng tụi nhn thy phng phỏp tng 56 hp paclitaxel cng nh docetaxel cho hiu sut cao, húa cht thụng dng, khụng t tin v iu kin phn ng khụng quỏ kht khe, d tip cn iu kin ca Vit Nam l este húa 10-DAB vi cỏc dn xut oxazolidine tng t nh phng phỏp ca Bombardelli Ezio [39] Tuy nhiờn, mch nhỏnh l cỏc dn xut oxazolidine nh: (4S,5R)-3-(tert-butoxycarbonyl)-2-(4- methoxyphenyl)-4-phenyloxazolidine5-carboxylic acid hoc (4S,5R)-3-(tert- butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4- phenyloxazolidine-5-carboxylic acid c cụng b nhiu hn v c thng mi húa rng rói hn õy s l cỏc mch nhỏnh c chỳng tụi hng ti ti ny d) V bo ch paclitaxel v docetaxel [39-43] Dc cht docetaxel l cht rt khú tan nc, tan ch khong 6-7 àg/mL nờn cỏc ch phm hin lu hnh trờn th trng hin nh Taxotere phi dựng cht trung gian ho tan nh Polysorbat 80, Ester ether ethylen oxyde, Glycofurol 75, Cremophor EL 35 v cn (khong 5-13%) ho tan Mt s cụng trỡnh nghiờn cu khỏc s dng cht to phc beta-cyclodextrine hay beta- hydroxypropyl cyclodextrin tng ho tan cho DCT Ch phm Taxotere ca cụng ty Sanofi-Aventis cú cha 13% cn tuyt i v Tween 80 c s dng lm thuc i chiu cho vic nghiờn cu bo ch ca ti ny Qua phn tng quan v tỡnh hỡnh nghiờn cu ngoi nc ó trỡnh by trờn, cú th thy chng ng khỏm phỏ, phỏt trin, ng dng ca paclitaxel v docetaxel ó tri qua thi gian rt di, tn kộm rt nhiu kinh phớ vi s úng gúp cụng sc ca mt lng ln cỏc nh khoa hc thuc nhiu chuyờn ngnh khỏc Vin Húa hc Vin Hn Lõm KH&CN Vit Nam ó cú hp tỏc nghiờn cu khoa hc vi Vin Húa hc cỏc hp cht t nhiờn Trung tõm nghiờn cu khoa hc quc gia Cng hũa Phỏp (ICSN - CNRS) vo nhng nm 1990-2000 õy chớnh l ni nhúm nghiờn cu ca Giỏo s Potier, ngi phõn lp c docetaxel ln u tiờn t Thụng chõu u (Taxus baccata) vo nm 1986 Sau ú nhúm ó tip tc phỏt trin vic bỏn tng hp thnh cụng v th nghim a vo iu tr cho bnh nhõn Vin Húa hc cng ó thc hin thnh cụng quy mụ phũng thớ nghim ti Nghiờn cu quy trỡnh cụng ngh chit tỏch v tinh ch cỏc hp cht taxoid t cõy thụng Vit Nam v quy trỡnh chuyn hoỏ chỳng thnh taxol v taxotere dựng iu tr ung th 57 vo nm 2005 nhúm nghiờn cu ca GS.TSKH Trn Vn Sung thc hin Sau ú Ngụ Quc Anh ó thc hin lun ỏn tin s v tng hp mt s dn xut ca taxol ti Universitộ Paris Sud 11 Cng hũa Phỏp, di s hng dn ca GS Franỗoise Guộritte, ngi u tiờn nghiờn cu tng hp cỏc dn xut taxol Kt qu ca lun ỏn ó c ng ti trờn cỏc SCI cú ch s trớch dn cao [44] Nhúm tỏc gi ó tin hnh nghiờn cu tng hp thnh cụng mch nhỏnh ca taxotere t trans-glycid ester v gn mch nhỏnh thu c vo hp cht 10- DAB Mch nhỏnh c tng hp t trans-glycid ester tri qua giai on nh S 15, nhiờn quy trỡnh tng hp mch nhỏnh cú mt s im hn ch l nguyờn liu du i t trans-glycid ester khụng phi l nguyờn liu thụng dng r tin, d kim Mt s giai on nhúm tỏc gi khụng cụng b hiu sut, c bit giai on cui l giai on tỏch ng phõn quang hc thu c ng phõn mong mun cú tỏc dng mnh thỡ hiu sut t 40%, cha thy tỏc gi a thu hi chuyn húa ng phõn khụng mong mun Do ú tớnh kh thi ỏp dng quy mụ ln l cha tớnh toỏn c Mch nhỏnh tng hp c s c tin hnh ghộp mch vi 10-DAB ó c bo v, sau mt s giai on thu c docetaxel Tuy nhiờn, quỏ trỡnh tng hp paclitaxel v docetaxel cn n nguyờn liu u quan trng l 10-DAB, mt tin cht chit xut t lỏ Thụng Thi im ú, mc dự Vit Nam cú Thụng nhng tr lng khụng nhiu nờn ti tm dng mc chng t nng lc ca cỏc nh khoa hc Vit Nam cú th tip nhn c quy trỡnh tng hp trờn t cỏc nh khoa hc Phỏp Thy c nhu cu v giỏ tr ca Thụng , cỏc nh khoa hc lõm nghip bt u thu thp, ỏnh giỏ, nghiờn cu nhõn trng i tng ny Vit Nam Qua nghiờn cu hai loi Thụng Taxus wallichiana (Thụng Hymalaya) Lõm ng v Taxus chinensis (Thụng Trung Quc) Mai Chõu-Hũa Bỡnh, ó khng nh v chn lc c mt s dũng Thụng ca loi Taxus wallichiana ti Lõm ng cú hm lng 10DAB cao, thm hn mt s loi Thụng ang c th gii s dng [45-48] Trờn c s ú, B Y t ó giao cho TS Vng Chớ Hựng thc hin cỏc ti Nghiờn cu sinh lý, sinh thỏi v k thut trng cõy thụng (Taxus wallchiana Zucc.) ti Lõm ng nhm to ngun nguyờn liu lm thuc chng ung th (nghim thu nm 2005) v Nghiờn cu khai thỏc v phỏt trin ngun gen mt s cõy thuc c trng Tõy 58 Nguyờn nhm to vựng dc liu phc v sn xut cụng nghip dc (nghim thu nm 2011) [49] Kt qu chớnh sau thc hin cỏc ti nh sau: ó chn lc c cỏc dũng Thụng t t nhiờn theo hng cha hm lng 10-DAB v paclitacxel cao, a c quy trỡnh nhõn ging bng cnh hom vi t l r > 90%, xõy dng tiờu chun ging cp c s v tiờu chun nguyờn liu lỏ Thụng quy mụ thớ nghim a c quy trỡnh c bn nuụi trng thụng t nng sut t 12 16 tn lỏ ti/ha/nm (khong tn khụ/ha/nm), hm lng 10-DAB t 0,21% v paclitaxel t 0,0067% K tip thnh cụng trờn, nhm phỏt trin tip nghiờn cu, B Khoa hc v Cụng ngh ó giao TS Vng Chớ Hựng tip tc trin khai nhim v cp nh nc Khai thỏc v phỏt trin ngun gen Thụng (Taxus wallichiana Zucc.) ti Lõm ng lm nguyờn liu sn xut thuc iu tr ung th vi mc tiờu to ging Thụng cht lng cao phc v vic phỏt trin vựng nguyờn liu cho cụng nghip dc Song song vi hng nghiờn cu to nguyờn liu, cỏc hng nghiờn cu nhm chit xut hot cht t Thụng cng ó c B Khoa hc v Cụng ngh chỳ ý quan tõm Bt u t nhim v Nghiờn cu qui trỡnh cụng ngh tỏch chit hot cht sinh hc t cõy thụng v cõy da cn Vit Nam to ngun nguyờn liu sn xut thuc ung th v xut khu thuc Chng trỡnh KH&CN trng im cp nh nc (ó nghim thu nm 2010), PGS.TS Trn Cụng Lun ó xõy dng c cỏc quy trỡnh chit xut 10-DAB v paclitaxel t nhiờn cng nh bỏn tng hp paclitaxel quy mụ phũng thớ nghim [50] Bc u ó xõy dng c cụng ngh chit tỏch 10-DAB t lỏ Thụng quy mụ 25 kg lỏ/m t hiu sut 0,04 0,07% (tng ng 0,4 0,7 kg 10-DAB/1 tn lỏ khụ) Tuy nhiờn, so vi hm lng tuyt i ca 10-DAB lỏ Thụng (Taxus wallichiana Zucc.) ti Lõm ng khong 0,2% thỡ hiu sut thu hi ca qui trỡnh cũn thp ch t t 20 30%, hin hiu sut chit 10-DAB ca th gii vo khong 1kg/tn tng ng hiu sut thu hi 70 80% Vi li th v hm lng 10-DAB t nhiờn cao, cú th hy vng ci thin cụng ngh chit xut a hiu sut chit t t 1,2 kg/tn tng ng hiu sut thu hi t 60% [51-52] Quy trỡnh chit tỏch gm cỏc bc: chit ngm kit truyn thng, tỏch bng sc ký ct silicagel pha o Trong quỏ trỡnh tỏch chit 10-DAB t nguyờn liu Thụng cũn cú th tỏch chit c c paclitaxel cỏc phõn on cũn li, ú s lm tng hiu qu kinh t ca cụng ngh chit tỏch v paclitaxel t nhiờn c thu nhn cú giỏ tr kinh t cao gp 2-3 ln so vi paclitaxel bỏn tng hp v tng hp Vic s dng 59 iu tr cho bnh nhõn ung th cng s an ton hn Cỏc tỏc gi ca ti trờn cng ó cụng b cỏc quy trỡnh bỏn tng hp thnh cụng paclitaxel v docetaxel, mc dự cũn nhiu hn ch v ng tng hp v hiu sut Paclitaxel ó c tng hp t 10-DAB chit tỏch t lỏ thụng Lõm ng vi hiu sut tng cng l 36,64% Cỏc bc chớnh ca quy trỡnh nh sau: - Tng hp mch nhỏnh gm phn ng vi hiu sut ln lt l 98%, 61%, 52%, 79%, 62%, nờn hiu sut ca ton quỏ trỡnh l 15,22%; - Tng hp 7-triethylsilylbaccatin gm hai phn ng vi hiu sut l 87% v 78%, nờn hiu sut tng cng ca giai on ny t 67,86%; - Tng hp paclitaxel t mch nhỏnh v 7-triethylsilylbaccatin vi hiu sut 54% Tip theo ú, vic tng hp docetaxel li c thc hin vi nguyờn liu u l paclitaxel gm bc chớnh nh sau : - Tng hp 10-deacetyl paclitaxel vi hiu sut 95%; - Tng hp 2,7,10-tri(triethylsilyl)paclitaxel cú hiu sut 75%; - Tng hp N-debenzoyl-10-deacetyl paclitaxel vi hiu sut thp 10%; - Tng hp docetaxel vi hiu sut 23% Nh vy, qua giai on, quỏ trỡnh tng hp docetaxel t paclitaxel cú hiu sut ton quỏ trỡnh ch l 0,95 x 0,75 x 0,10 x 0,23 = 1,6% Nu tớnh ton b quy trỡnh t 10DAB thỡ ng ny rt phc tp, tn kộm thi gian v kinh phớ, hiu sut rt thp Trong ú, palitaxel trờn th trng cú giỏ rt cao nờn quỏ trỡnh tng hp docetaxel t palitaxel vi hiu sut ton quỏ trỡnh 1,6% l khụng cú hiu qu kinh t, khụng kh thi trin khai sn xut thnh phm ti Nghiờn cu bo ch thuc tiờm paclitaxel qui mụ pilot thuc chng trỡnh KH&CN trng im cp nh nc hin ang c B Khoa hc v Cụng ngh giao cho PGS.TS Lờ Minh Trớ thc hin vi mc tiờu xõy dng c quy trỡnh bo ch thuc tiờm paclitaxel quy mụ 1.000 l/m [54] Nh vy, hin cỏc giai on ca ton b quỏ trỡnh sn xut thuc iu tr ung th t Thụng ó c cỏc nh khoa hc Vit Nam tip cn v cú kinh nghim trin khai, ngoi tr giai on quan trng nht l bỏn tng hp paclitaxel v docetaxel t 10-DAB, 60 chỳng ta cha cú nhiu iu kin nghiờn cu nhiu Trờn c s ú, Vin Húa hc, n v u ngnh lnh vc tng hp húa hc cng nh l n v u tiờn ó tip cn c vi cụng ngh bỏn tng hp paclitaxel v docetaxel t cỏc nh khoa hc Phỏp mong mun gii quyt khõu bỏn tng hp cng nh hp cỏc nh khoa hc a ngnh, giu kinh nghim nht tng giai on ca Vit Nam xõy dng c quỏ trỡnh tng th nhm sn xut thuc paclitaxel v docetaxel t Thụng Vit Nam Trong quỏ trỡnh nghiờn cu bỏn tng hp, Vin Húa hc s tip tc nhn c s giỳp , hp tỏc ca ISCN-CNRS, n v hin ang phỏt trin v khụng ngng ci tin vic nghiờn cu tng hp docetaxel v cỏc dn xut th h mi Mt s cỏn b tham gia thc hin ti ny cng ó cú iu kin c hp tỏc, lm vic trc tip vi cỏc nh khoa hc Phỏp thuc nhúm nghiờn cu docetaxel v dn xut ca ISCN-CNRS khuụn kh thc hin lun ỏn nghiờn cu sinh cng nh sau tin s Nhúm nghiờn cu ny hin ang chu trỏch nhim v mng khoa hc cho vic phỏt trin cỏc sn phm t docetaxel v dn xut ca Cụng ty Dc Sanofi-Aventis, ch s hu sn phm Taxoteređ a) V trng trt Cỏc nghiờn cu nc trc õy ó tip cn cỏc nghiờn cu trờn th gii, c th húa iu kin Vit Nam cng nh trờn i tng ngun gen c th ca Vit Nam xõy dng s b cỏc quy trỡnh chn lc ging, nhõn ging v d tho quy trỡnh trng trt Tuy nhiờn, nng sut thu hoch cũn ang dao ng khong 3-5 tn/ha, hm lng 10-DAB dao ng khong 0,08-0,21% Vi cỏc thỏch thc ca vic chun húa sn xut ln, c bit sn xut mt hng ũi hi yờu cu cao, nghiờm ngt nh thuc, cỏc quy trỡnh ny u cn c nghiờn cu chun húa v tuõn th cỏc quy nh theo hng dn GACP-WHO nhm cỏc mc tiờu sau: - Nõng cao nng sut thu hoch lỏ Thụng v hm lng 10-DAB lỏ Thụng ; - n nh nng sut v cht lng ca lỏ Thụng nhm phỏt trin vựng nguyờn liu ng u trờn din tớch canh tỏc ln (nng sut 4-5 tn/ha, hm lng 10-DAB 0,15%); - Tuõn th cỏc quy nh nghiờm ngt ca ngnh cú y d liu ỏp ng vic 61 sn xut thuc cho th trng nc cng nh hng ti xut khu b) V chit tỏch 10-DAB v paclitaxel t nhiờn Qua nghiờn cu tng quan trờn th gii cng nh phỏt trin tip cỏc kt qu nghiờn cu ó t c nc, quy trỡnh d kin trin khai ti ny nh sau: - Chit hi lu tun hon liờn tc nhm nõng cao hiu sut chit so vi phng phỏp chit ngm kit truyn thng trc õy S dng EtOH lm dung mụi chit thay th cho MeOH gim bt nguy c an ton lao ng - Kt hp k thut sc ký ct pha o vi pha tnh l nha diaion HP-20, pha ng l nc v MeOH vi t l thớch hp cho tng phõn on tỏch Vic s dng k thut sc ký ct pha o vi nha diaion HP-20 thay th cho sillica gel pha o lm cho cụng ngh d s dng, n gin, phự hp v gim c 1/3 giỏ thit k cụng ngh chit tỏch v giỏ thnh sn phm iu kin cụng ngh ca Vit Nam hin Cỏc bc cn nghiờn cu ca quy trỡnh d kin nh sau: - Dc liu t tiờu chun c xay, rõy n kớch thc thớch hp, a vo thit b chit, chit hi lu vi cn ethanol 50 96% cn, nhit , thi gian chit ti u m bo hiu sut chit tt v kinh t nht s c xỏc nh quỏ trỡnh nghiờn cu - Dch chit c cụ di ỏp sut gim n dng cao lng cú t trng xỏc nh (dng siro), chit bng CH2Cl2 - Ct thu hi CH2Cl2 ti t trng xỏc nh, cao thu c a lờn ct nha diaion HP-20, gii vi pha ng gradient H2O/MeOH - Thu hi cỏc phõn on thớch hp, kt tinh thu 10-DAB v paclitaxel Dch sau kt tinh ct thu hi dung mụi, tip tc tỏch bng ct silicagel tn thu sn phm Quy trỡnh c minh túm tt hỡnh sau 62 Bt nguyờn liu Chit hon lu vi cn Dch chit cn 96% Cụ gim ỏp thu hi cn 96% Cao chit cn (dng siro) Hũa nc, lc CH2Cl2 Cao CH2Cl2 SK ct Diaion HP-20 Nc MeOH 10% MeOH 60% Kt tinh 10-DAB bng acetonitril MeOH 100% CH2Cl2 Cao MeOH SK ct silica gel pha thng 63 d) V bo ch paclitaxel v docetaxel Trong nc hin nhu cu iu tr ung th bng thuc docetaxel khỏ cao nhng thc t cha cú cụng ty no ca Vit Nam sn xut Giỏ nhp khu Taxotere hin quỏ cao so vi thu nhp ca Vit Nam (khong triu ng/l 20mg) khin cho nhiu bnh nhõn khụng cú iu kin tip cn vi iu tr Quy trỡnh bo ch thuc tiờm docetaxel tng i kh thi vi iu kin nghiờn cu nc Thờm vo ú, vic t ch c ngun nguyờn liu húa dc cng s gúp phn sn xut thnh cụng thuc ny vi giỏ thnh cú th chp nhn c Vit Nam giỳp m rng th trng cng nh to iu kin cho nhiu bnh nhõn c iu tr 64 Ph lc: I NNG LC CA T CHC CH TRè Thụng tin chung Vin Húa hc trc thuc Vin Hn lõm Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam c thnh lp ngy 16/9/1978 1.1.V t chc Vin Hoỏ hc cú 21 phũng nghiờn cu, 01 phũng thớ nghim, 01 phũng Qun lý tng hp v 01 Trung tõm nghiờn cu xut sc liờn ngnh v lnh vc cỏc hp cht thiờn nhiờn gia Vit Nam v Vng Quc Anh 1.2 V nhõn s Vin Hoỏ hc hin cú 125 cỏn b viờn chc biờn ch; 102 cỏn b H di hn Trong tng s biờn ch cú: 01 GS.TSKH; 02 GS.TS; 17 PGS; 40 TS; 24 ThS; 33 c nhõn v k s; 01 cao ng v 07 cụng nhõn k thut lm vic thng xuyờn ti n v 1.3 V c s h tng v trang thit b Ngoi cỏc thit b u tay trang b cho cỏc phũng thớ nghim, Vin Hoỏ hc hin cú mt h thng cỏc thit b khoa hc hin i v tng i ng b C th l: thit b cng hng t ht nhõn phõn gii cao 500MHz; thit b ph phõn gii cao (FT/ICR - MS); thit b nhit vi sai TA-50; thit b quang ph hp th nguyờn t ASS 3300; thit b sc ký lng ph (LC-MS) Agilent 1100; thit b sc ký khớ ph phõn gii cao (GC-MS), mỏy quang ph hng ngoi FTIR; thit b phõn tớch ph tng tr v mt s thit b sc ký chuyờn dng Thnh tớch t c Vin Húa hc l mt nhng Vin nghiờn cu chuyờn ngnh hng u thuc Vin Hn lõm Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam Vin Húa hc ó v ang tham gia ch trỡ thc hin nhiu ti nghiờn cu thuc cỏc Chng trỡnh trng im cp Nh nc, ti thuc qu Nafosted, cỏc ti nghiờn cu khoa hc cp B Hng nm Vin cụng b khong 50 cụng trỡnh trờn cỏc Quc t cú uy tớn (SCI v SCI-E) v trờn mt trm cụng trỡnh ng cỏc nc Sau õy l mt s thnh tớch ni bt ca Vin ba nm (2010 - 2012): Hng nghiờn cu khoa hc phc v v chm súc sc khe cng ng - Vin ó trung nghiờn cu phỏt hin nhiu hp cht cú hot tớnh sinh hc t ngun ti nguyờn sinh vt Vit Nam - ó nghiờn cu chit tỏch c artemisinin t cõy hao hoa vng cha bnh st rột ó xõy dng c quy trỡnh chit tỏch vi hng tn nguyờn liu ó chit c hng trm kg artemisinin chuyn cho B Y t lm thuc chng st rột - ó tng hp c cỏc dn cht ca artemisinin cha st rột tỏi phỏt nh DHA, Etyl ờte, Metyl ờte 65 - ó chit tỏch c 10-deaxetyl bacatin III t cõy thụng Lt lm nguyờn liu tng hp taxol v taxotere l thuc chng ung th ang c s dng rt hiu qu hin - ó chit tỏch c vinblastin v vincristin t cõy Da cn mc hoang Vit Nam lm thuc cha ung th T cht cú hm lng ln cõy Da cn l vindolin v catharantin ó tng hp c dn cht ca vinblastin cha ung th - T cõy hi ó xõy dng qui trỡnh hiu qu chit tỏch axit sikimic v ó tng hp thnh cụng oseltamivir phosphat i t axit sikimic lm thuc chng cỳm gia cm - ó nghiờn cu phỏt trin bi thuc cai nghiờn ma tỳy c truyn thnh ch phm Heantos cai nghin ma tỳy Sn phm ó c b Y t cp s ng ký lu hnh nm 2012 - Tham gia vo chng trỡnh nghiờn cu KHCN phỏt trin cụng nghip Húa dc, Vin ó v ang ch trỡ thc hin thnh cụng cỏc ti: + Xõy dng qui trỡnh tng hp stavudin lm thuc cha HIV + Xõy dng qui trỡnh tng hp glibenclimit v metformin lm thuc cha bnh tiu ng Typ II + Xõy dng qui trỡnh tng hp mt s thuc khỏng sinh th h II nhúm quinolon + Nghiờn cu tng hp cỏc thuc chng ung th (Taxol, Taxotere) + Xõy dng qui trỡnh tng hp thuc chng viờm, gim au celecoxib + Nghiờn cu ch to vt liu hydroxyapatite dng bt nano v dng xp ng dng y sinh hc II CC T CHC PHI HP T chc 1: Vin Húa Sinh Bin Tờn c quan ch qun: Vin Hn lõm Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam in thoi: (04) 3791.7053 Fax: (04) 3791.7054 a ch: Nh A20 - S 18 Hong Quc Vit, Cu Giy, H Ni H v tờn th trng t chc: GS.TS Chõu Vn Minh T chc 2: Trung tõm nghiờn cu trng v ch bin cõy thuc Lt Tờn c quan ch qun: Cụng ty c phn Y Dc phm Vimedimex UBND TP H Chớ Minh in thoi: Fax: a ch: 18 Hong Vn Th, TP Lt T chc 3: Trung tõm Sõm v Dc liu TP H Chớ Minh Tờn c quan ch qun: Vin Dc liu B Y t 66 in thoi: Fax: a ch: 41 inh Tiờn Hong, Qun 1, TP H Chớ Minh T chc 4: Trng i hc Y Dc TP H Chớ Minh Tờn c quan ch qun: B Y t in thoi: Fax: a ch: 217 Hng Bng, Qun 5, TP H Chớ Minh 67 [...]... khong 6-7 àg/mL nờn cỏc ch phm hin lu hnh trờn th trng hin nay nh Taxotere phi dựng cht trung gian ho tan nh Polysorbat 80, Ester ether ethylen oxyde, Glycofurol 75, Cremophor EL 35 v cn (khong 5-13%) ho tan Mt s cụng trỡnh nghiờn cu khỏc s dng cht to phc beta-cyclodextrine hay beta- hydroxypropyl cyclodextrin tng ho tan cho DCT Ch phm Taxotere ca cụng ty Sanofi-Aventis cú cha 13% cn tuyt i v Tween... taxoid khỏc trong Thụng , c bn quy trỡnh túm tt nh sau: (1) s dng dung mụi chit hot cht khi nguyờn liu ban u, (2) loi cỏc tp cht cũn trong dch chit bng phng phỏp húa hc: lc phõn on, dựng tỏc nhõn loi mu, cht nhy (3) dựng phng phỏp sc ký ct vi nguyờn liu silica gel pha thun hay pha o thu nhn taxoid tinh sch 51 c) V bỏn tng hp paclitaxel v docetaxel Bỏn tng hp paclitaxel Theo kt qu u tiờn ca vic bỏn... gn vo sn phm Baccatin III (II) ó c bo v nhúm -OH v trớ s 7 bng Et3Si vi tỏc nhõn kim húa n-BuLi trong mụi trng THF, thu c hiu sut khỏ cao 98% im hn ch õy l tỏc gi ó dựng tỏc nhõn kim húa khỏ t n-BuLi, do ú khú cú th s dng quy mụ ln mc dự hiu sut phn ng thu c rt cao Bc cui cựng l quỏ trỡnh loi b nhúm bo v bng tỏc nhõn acid húa HF trong dung mụi piridin giỳp chuyn húa gn nh hon ton thnh sn phm paclitaxel... chớnh l docetaxel Bit đ dc ca docetaxel l Taxotere c hóng dc phm Rhone- Poulenc Rorer SA (hin nay l Sanofi Aventis) bt u th nghim lõm sng pha I vo nm 1990 [14], sau ú c phờ chun a vo iu tr ung th vỳ giai on tin trin vo nm 1995 ti Nam Phi v ti M vo nm 1996, sau ú l ch nh iu tr ung th phi khụng t bo nh (NSCLC) nm 1999 [15] Docetaxel đ đ Hin nay, hai thuc Taxol v Taxotere c s dng rng rói iu tr nhiu bnh... nhõn Vin Húa hc cng ó thc hin thnh cụng quy mụ phũng thớ nghim ti Nghiờn cu quy trỡnh cụng ngh chit tỏch v tinh ch cỏc hp cht taxoid t cõy thụng Vit Nam v quy trỡnh chuyn hoỏ chỳng thnh taxol v taxotere dựng iu tr ung th 57 vo nm 2005 do nhúm nghiờn cu ca GS.TSKH Trn Vn Sung thc hin Sau ú Ngụ Quc Anh ó thc hin lun ỏn tin s v tng hp mt s dn xut ca taxol ti Universitộ Paris Sud 11 Cng hũa Phỏp, di... v nhit (-35 C) v mt s húa cht c thự, t tin, mch nhỏnh cng cú giỏ thnh rt cao, tỏc nhõn bo v l cỏc dn xut ca silan nhng khụng thụng dng Sỏng ch EP 2161260A1 [37] khụng a ra phng phỏp tng hp mch nhỏnh Taxotere, m mch nhỏnh c s dng õy l 2-(2, 4dimethoxyphenyl)-3-(2-nitrobenzenesulfenyl)-4(S)-phenyl-5(R) - oxazolidine carboxylic acid Hai nhúm hydroxy trong 10-DAB c bo v bng trichloro acetyl chloride... Taxotere c s dng rng rói iu tr nhiu bnh ung th nh: ung th phi, ung th vỳ, ung th tin lit tuyn, Kaposis sarcoma, đ ung th ng tiờu húa, ung th bng quang v mt s dng ung th khỏc Taxol ó đ ht hn bo h bn quyn v Taxotere s ht hn bo h bn quyn trong nm 2013 nờn vic nghiờn cu sn xut cỏc thuc generic cha hai dc cht paclitaxel v docetaxel l mi quan tõm ca nhiu nc trờn th gii Ngoi ra, trong nhng nm gn õy cú nhiu nghiờn... l nhng giai on cui ca quy trỡnh tng hp Theo F Gueritte-Voegelein v cng s, giai on u tng hp baccatin III s dng tỏc nhõn Silan húa l Et3SiCl trong mụi trng piridin ó thu c hiu sut khỏ cao l 86% [31] Mc dự trong cụng thc 10-DAB cú bn nhúm - OH, tuy nhiờn vic s dng tỏc nhõn cú tớnh chn lc trờn lm tng hiu sut ca phn ng l mt iu quan trng trong vic ỏp dng tng hp quy mụ ln Giai on tip theo l axyl húa vo v... GS Franỗoise Guộritte, ngi u tiờn nghiờn cu tng hp cỏc dn xut taxol Kt qu ca lun ỏn ó c ng ti trờn cỏc tp chớ SCI cú ch s trớch dn cao [44] Nhúm tỏc gi ó tin hnh nghiờn cu tng hp thnh cụng mch nhỏnh ca taxotere t trans-glycid ester v gn mch nhỏnh thu c vo hp cht 10- DAB Mch nhỏnh c tng hp t trans-glycid ester tri qua 6 giai on nh trong S 15, tuy nhiờn trong quy trỡnh tng hp mch nhỏnh cú mt s im hn ch... hnh ghộp mch vi 10-DAB ó c bo v, sau mt s giai on thu c docetaxel Tuy nhiờn, quỏ trỡnh tng hp paclitaxel v docetaxel cn n nguyờn liu u quan trng l 10-DAB, mt tin cht chit xut t lỏ Thụng Thi im ú, mc dự Vit Nam cú Thụng nhng tr lng khụng nhiu nờn ti tm dng mc chng t nng lc ca cỏc nh khoa hc Vit Nam cú th tip nhn c quy trỡnh tng hp trờn t cỏc nh khoa hc Phỏp Thy c nhu cu v giỏ tr ca Thụng , cỏc ... nc v cú th xut khu sang s nc lõn cn, nh vy chỳng ta cn khong 400-600 kg taxol/nm 3.2 Docetaxel (Taxotere) Th phn 10 thuc iu tr ung th cú doanh s hng u ti Phỏp Docetaxel Doanh s ton cu ca Taxotere... 0,5-1 mm Chit vi methanol, nhit phũng, cú khuy, lng dung mụi gp ln dc liu Pha loóng dch chit methano bng nc, nng methanol cũn 10-30% Lc, loi b khụng tan, ly dch lc Cụ thu hi dung mụi di ỏp sut... (Institut de Chimie des Substances Naturelles, CNRS France), õy l Vin nghiờn cỳu phỏt minh Taxotere v ng s hu bn quyn v Taxotere vi cụng ty Sanofi Aventis Phỏp1 - Doanh nghip dc v T chc phi hp: