Nghiên cứu phân lập các hợp chất lignan từ cây bục bạc (mallotus paniculatus)

TRNG I HC S PHM H NI KHOA HểA HC -o0o - TH THANH MAI NGHIấN CU PHN LP CC HP CHT LIGNAN T CY BC BC (MALLOTUS PANICULATUS) KHểA LUN TT NGHIP I HC Chuyờn nghnh: Húa hu c Ngi hng dn khoa hc TS Nguyễn Hoài Nam H NI - 201 LI CM N Khúa lun tt nghip ny c hon thnh ti phũng Dc liu Bin, Vin Húa sinh bin-Vin Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam Sau mt thi gian mit mi nghiờn cu cựng vi s giỳp ca cỏc thy cụ giỏo v cỏc bn sinh viờn, khúa lun ca em ó c hon thnh Em xin by t lũng bit n sõu sc ti TS Nguyn Hoi Nam v cỏc anh ch Vin Húa sinh bin - Vin khoa hc v Cụng ngh Vit Nam ó nhit tỡnh hng dn em sut quỏ trỡnh thc hin khúa lun tt nghip ny Em xin chõn thnh cm n s giỳp quý bỏu v tn tỡnh ca thy giỏo TS Nguyn Vn Bng, cỏc thy cụ khoa húa hc Trng H S Phm H Ni 2, ó giỳp , dy bo em quỏ trỡnh hc tp, nghiờn cu v thc hin khúa lun õy l u tiờn em lm quen vi cụng tỏc nghiờn cu nờn khúa lun ca em khụng trỏnh nhng thiu sút Em rt mong nhn c s úng gúp ý kin ca cỏc thy cụ v cỏc bn khúa lun ca em c hon thin hn Xin trõn trng cm n ! H Ni Ngy 10 thỏng nm 2011 Sinh Viờn Th Thanh Mai ii Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc LI CAM OAN Tụi xin cam oan kt qu khúa lun Nghiờn cu phõn lp thnh phn Lignan t cõy Bc Bc l cụng trỡnh nghiờn cu ca tụi thc hin, khụng chộp bt k mt khúa lun no ó bo v trc õy Sinh viờn Th Thanh Mai iii Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc MC LC M U CHNG 1: TNG QUAN 1.1 Tng quan v cõy Bc Bc 1.1.1 Thc vt hc 1.1.2 Phõn b, sinh thỏi 1.1.3 Cụng dng 1.1.4 Thnh phn húa hc 1.2 Vi nột v hp cht lignan 1.2.1 i cng v phõn loi 1.2.2 Cỏc dn xut quan trng ca Lignan 1.2.3 Tng hp Lignan 1.3 Cỏc phng phỏp chit mu thc vt 10 1.3.1 Chn dung mụi chit 12 1.3.2.Quỏ trỡnh chit 13 1.4 Cỏc phng phỏp sc kớ phõn lp cỏc hp cht hu c 14 1.4.1 C s ca phng phỏp sc kớ 14 1.4.2 C s ca phng phỏp sc kớ 15 1.4.3 Phõn loi cỏc phng phỏp sc kớ 15 1.4.3.1 Sc kớ ct(CC 15 1.4.3.2 Sc kớ lp mng 17 1.5 Mt s phng phỏp húa lý xỏc nh cu trỳc ca cỏc hp cht hu 1.5.1 Ph hng ngoi 17 1.5.2 Ph lng (Mass Spectroscopy, MS) 18 1.5.3 Ph cng hng t ht nhõn (Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy, NMR) 19 iv Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc 18 1.5.3.1 Ph 1H-NMR 19 1.5.3.2 Ph 13C-NMR 20 1.5.3.3 Ph DEPT 20 1.5.3.4 Ph 2D-NMR 20 Chng 2: I TNG V PHNG PHP NGHIấN CU 22 2.1 Mu thc vt 22 2.2 Phung phỏp phõn lp cỏc hp cht 22 2.2.1 Sc kớ lp mng (TLC) 22 2.2.2 Sc kớ lp mng iu ch 22 2.2.3 sc kớ ct (CC) 22 2.3 Phng phỏp xỏc nh cu trỳc húa hc ca hp cht 23 2.3.1 im núng chy MP 23 2.3.2 Ph lng (ESI-MS) 23 2.3.3 Ph cng hng t ht nhõn 23 CHNG 3: THC NGHIM V KT QU 24 3.1 X lý mu thc vt 24 3.2 Phõn lp cỏc hp cht 24 3.3 Hng s hp lớ v s liu ph ca cỏc hp cht phõn lp c 27 3.4 Th hot tớnh khỏng sinh 27 CHNG 4: THO LUN 28 4.1 Xỏc nh cu trỳc húa hc ca hp cht 28 4.2 Kết đánh giá hoạt tính kháng sinh 35 KT LUN 36 TI LIU THAM KHO 37 v Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc DANH MC NHNG CH VIT TT cacbon-13-Nuclear Ph cng hng t ht Magnetic Resonance nhõn cacbon 13 Spectroscopy [ ]D Specific Optical Botation quay cc proton Magnetic Resonance Ph cng hng t ht 2D - NMR Spectroscopy nhõn proton TWO-Dimensional NMR Ph cng hng t ht nhõn chiu CC clolumm chromatography DEPT Distortion less Enhacemant By Polarisation Trafer EI MS Electron Impact Mass Spectrometry Ph lng va chm Fast Atom Bomb bradment Mass Spectronmetry ) Ph lng bn phỏ FAB MS HMBC HMQC IR Heteronuclear Multiple Bond Connectivily Heteronuclear Multiple Quantum Coherence In Frared Spectroscopy ME Sc kớ ct electron nguyờn t nhanh Ph hng ngoi Nhúm Metyl MS In Frared Spectroscopy Ph lng NOESY Nucler Over hauser Effect Spectroscopy Thin Layer Chromatography Chemical Shiff Sc kớ lp mng TLC vi Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc Correlation Spectroscopy EIS MS Electron Spray Ionization Mass Spectranetry Ph lng phu mự in t vii Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc DANH MC CC HèNH NH V BNG BIU Hỡnh 1.1 Cõy Bc bc - Mallotus paniculatus Hỡnh 3.2.1 S chit phõn on dch chit MeOH ca M.Paniculatus 25 Hỡnh 3.2.2 S chit phõn lp cỏc hp cht t M.paniculatus 25 Hỡnh 4.1.a Ph 1H-NMR ca hp cht 28 Hỡnh 4.1.b Cu trỳc húa hc ca 28 Hỡnh 4.1.c Ph 13C-NMR Ca 30 Hỡnh 4.1.d Ph DEPT ca 31 Hỡnh 4.1.e Ph HSQC ca 32 Hỡnh 4.1.f Cỏc tng tỏc HMBC v COSY chớnh ca 32 Hỡnh 4.1.g Ph H-H COSY ca 33 Hỡnh 4.1.h Ph HMBC MS ca 34 Hỡnh 4.1.i Ph lng ESI MS ca 34 Bng 4.1 29 Kt qu ph NMR ca viii Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc M U Cỏc sn phm t ngun gc thiờn nhiờn hay ngun ti nguyờn sinh hc ngy cng c ngi quan tõm, s dng rng rói cỏc ngnh kinh t quc dõn bi c tớnh ớt c, d hp th, khụng lm tn hi n mụi sinh v c bit nu s dng hp lý chỳng ta cú th lm phong phỳ thờm v s lng v cht lng phc v ngi Cỏc hp cht thiờn nhiờn cú hot tớnh sinh hc c s dng lm thuc cha bnh cho ngi, vt nuụi, thuc bo v thc vt, cht kớch thớch, iu hũa sinh trng ng, thc vt v lm nguyờn liu cho cụng nghip thc phm, húa m phm Theo cỏc ti liu cụng b hin cú khong 60% n 70% cỏc loi thuc cha bnh ang c lu hnh hoc giai on th nghim lõm sng cú ngun gc t thiờn nhiờn Nc Vit Nam chỳng ta nm khu vc khớ hu nhit i giú mựa, núng m, lng ma ln, ú l iu kin vụ cựng thun li cho s phỏt trin ca cỏc loi sinh vt Do ú nc ta cú ngun ti nguyờn sinh vt rt a dng v phong phỳ c bit l ti nguyờn rng Rng Vit Nam cú thm thc vt phong phỳ vo loi bc nht trờn Th Gii vi khong 12.000 loi ú 4.000 loi c nhõn dõn s dng lm tho dc cựng cỏc mc ớch khỏc phc v i sng ngi ú l ngun ti nguyờn dc liu vụ cựng quý giỏ v l tin cho s phỏt trin ngnh húa hc cỏc hp cht thiờn nhiờn nc ta phc v ngi i sng lao ng v sn xut Cựng vi b dy hn 4.000 nm lch s, ngnh ụng y ca nc ta ó thu c nhng thnh tu rc r: Nhng phng thuc t cõy c, ng vt c ng dng hiu qu v lu truyn n Cựng vi s phỏt trin ca Khoa hc Cụng ngh núi chung v Y hc núi riờn, Y hc c truyn cng vi Y hc hin i ó v ang cú nhng úng gúp to ln, gúp phn vo vic phũng, cha Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc bnh v lm tng tui th cho ngi Vn t hin l lm nh th no khai thỏc v s dng hp lý ngun ti nguyờn thiờn nhiờn em li hiu qu cho xó hi Ngy vi s h tr ca mỏy múc hin i coa th giỳp ngi phõn lp c rt nhiu cỏc hp cht cú hot tớnh sinh hc r thiờn nhiờn, cựng vi s a dng ca thiờn nhiờn Vit Nam hn s l ni tỡm rt nhiu cỏc hp cht cú hot tớnh sinh hc gúp phn quan trng vic tỡm cỏc phng thuc cha cỏc cn bnh him nghốo hin Cỏc hp cht lignan cú rt nhiu vai trũ cuc sng v cú rt nhiu cõy thc vt ú cú Cõy Bc Bc Chớnh vỡ ly trờn em ó chn ti Nghiờn cu phõn lp cỏc hp cht lignan t cõy Bc Bc Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc CHNG 2: I TNG V PHNG PHP NGHIấN CU 2.1 Mu thc vt Cõy Bc Bc c thu hỏi vo thỏng 02 nm 2011 ti Tam o, Vnh Phỳc Mu cõy c GS.TS Nguyn Ngha Thỡn, i hc Khoa hc T nhiờni hc Quc gia H Ni giỏm nh Mu tiờu bn c lu gi Phũng tiờu bn Vin Sinh thỏi v Ti nguyờn Sinh vt, Vin Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam 2.2 Phng phỏp phõn lp cỏc hp cht 2.2.1 Sc kớ lp mng (TLC.) Sc kớ lp mng c thc hin trờn bn mng sn DC-Alufolien 60 F254 (Marck 1,05715), RP18 F254S (Merck) Phỏt hin bng ốn t ngoi hai bc súng 254nm v 368nm hoc dựng thuc th l dung dch H2SO4 10% c phun u trờn bn mng, sy khụ ri h núng trờn bp in t t ti xut hin mu 2.2.2 Sc kớ lp mng iu ch Sc kớ lp mng iu ch c thc hin trờn bn mng sn silicagel 60G F254 (Merck, kớ hiu l 105875), phỏt hin cht bng ốn t ngoi hai bc súng 254nm v 368nm, hoc ct rỡa bn mng phun thuc th l dung dch l H2SO4 10%, h núng phỏt hin vt cht, ghộp li bn mng nh c xỏc nh vựng cht, sau ú co lp silicagel cú cht, gii hp ph bng dung mụi thớch hp 2.2.3 Sc kớ ct (CC) Sc kớ ct c tin hnh vi cht hp ph l silicagel pha thng v pha o Silicagel pha thng cú kớch thc ht l 0,040-0,063 mm (240-430 mesh) Silicagel pha o ODS hoc YMC (30-50m, Fujisilisa Chemical Ltd.) 22 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc 2.3 Phng phỏp xỏc nh cu trỳc húa hc ca cỏc hp cht 2.3.1 im núng chy (Mp) im núng chy c o trờn mỏy Kofler micro-hotstage ca Vin Húa hc 2.3.2 Ph lng (ESI-MS) Ph lng phun mự in t (Electron Spray Ionization Mass Spectra) c o trờn mỏy AGILENT 1100 LC-MSD Trap ca Vin Húa Hc, Vin khoa hc v cụng ngh Vit Nam 2.3.3 Ph cng hng t ht nhõn Ph cng hng t ht nhõn (NMR): 1H-NMR (500 MHz) v 13 C- NMR (125MHz) c o trờn mỏy Bruker AM500 FT-NMR Spectrorneter, Vin Húa Hc, Vin khoa hc v cụng ngh Vit Nam 23 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc CHNG 3: THC NGHIM V KT QU 3.1 X lý mu thc vt Mẫu Mallotus paniculatus sau thu tiến hành bảo quản v lưu giữ phòng lưu giữ mẫu Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật để đảm bảo mẫu không bị hỏng tiêu bản, tiện cho việc tra cứu, tìm thông tin sau Mẫu Mallotus paniculatus sấy khô phơi khô Cân lượng mẫu thu xay mẫu (Tuỳ theo loại mẫu thực vật: lá, thân rễ sử dụng thiết bị xay nghiền mẫu khác nhau) Lựa chọn dung môi chiết mẫu, nghiên cứu dung môi MeOH lựa chọn làm dung môi chiết Mẫu thực vật tiến hành chiết dung môi lựa chọn bước thiết bị chiết siêu âm (Ultrasonic 2010, 950W) nhiệt độ 40-50oC, thời gian chiết lần tối thiểu 60 phút Dịch chiết lọc qua giấy lọc (Whatman, d=240nm, No 1) gộp lại tiến hành cất loại dung môi áp suất giảm nhiệt độ 50oC thu dịch cô MeOH Cách đánh số ký hiệu mẫu thô: Ký hiệu mẫu thô = Ký hiệu mẫu+ ký hiệu dung môi Trong đó: Dung môi MeOH (Ký hiệu 00); Dung môi n-Hexan (01); Dung môi Clorofom (Ký hiệu 02); Dung môi Butanol (Ký hiệu 03) Cân dịch chiết tính lượng cặn dịch chiết phần trăm hiệu suất Bảo quản mẫu lọ đựng cặn dịch chiết (theo tiêu chuẩn bảo quản mẫu) để phục vụ sàng lọc hoạt tính lưu trữ lâu dài 3.2 Phân lập hợp chất Cành bục bạc M paniculatus (1,0 kg) chiết ba lần với MeOH máy siêu âm nhiệt độ 40-50oC vòng 20 phút Dịch chiết sau cô đặc máy cất quay với áp suất giảm để thu 80 g cặn chiết MeOH Cặn MeOH hòa vào nước phân lớp với 24 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc Hexan, CHCl3 để thu dịch cô hexan (13 g), CHCl3 (25 g) dịch nước (25 g) Cn chit MeOH (80 g) - B sung nc - B sung n-Hexane n-Hexane: H2O (1/1) Dịch chiết n-Hexane (13g) EtOAc: H2O (1/1) Dịch chiết EtOAc (25g) Cặn nước (25 g) Hỡnh 3.2.1 S chit phõn on dch chit MeOH ca M.paniculatus Cn chit EtOAc (25g) - Chay gradient - CHCl3-MeOH - T l: 30:1 n 1:1 ML3A (2.0g) ML3B (8,0g) ML3C (5.0g) ML3D (10.0g) - YMC RP-18 - MeOH-H2O - T l: 3:1 ML3C-1 (10 mg) (10 mg) Hỡnh 3.2.2 S chit phõn lp cỏc hp cht t M.paniculatus 25 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc Cặn chiết EtOAc tiến hành sắc ký cột silica gel với hệ dung môi gradient CHCl3-MeOH (từ 30:1 đến 1:1) thu phân đoạn ML3A (26,5 g), ML3B (13,4 g), ML3C, ML3D ML3E (24,0 g) Phân đoạn ML3C cho qua cột sắc ký YMC RP-18 hệ dung môi rửa giải MeOH-H2O (3:1) thu nhóm chất ML3C-1 hợp chất thu hợp chất (10 mg), chất dạng dầu không màu 3.3 Hng s vt lý v s liu ph ca cỏc hp cht phõn lp c Chất dạng dầu không màu; ESI-MS m/z: 341 [M+H-H2O]+, công thức phân tử: C20H22O6, M = 358 H-NMR (500 MHz, CDCl3) (ppm): 3,10 (2H, m, H-1 H-5), 4,73 (2H, d, J = 5,0Hz, H-2 H-6), 4,24 (2H, dd, J = 9,5, 7,0 Hz, Ha-4 Ha-8), 3,88 (2H, dd, J = 9,5, 4,0 Hz, Hb-4 Hb-8), 6,89 (2H, d, J = 1,5 Hz, H-2' H-2''), 6,88 (2H, d, J = 8,0 Hz, H-5' H-5''), 6,82 (2H, dd, J = 8,0, 1,5 Hz, H6' H-6'') 3,90 (6H, s, 3'-OCH3 3''-OCH3) 13 C-NMR (125MHz, CDCl3) (ppm): 54,20 (d, C-1 C-5) 85,90 (d, C-2 C-6), 71,70 (d, C-4 C-8), 132,97 (s, C-1' C-1''), 108,63 (d, C-2' C-2''), 146,72 (s, C-3' C-3''), 145,27 (s, C-4' C-4''), 114,29 (d, C-5' C-5''), 118,99 (d, C-6' C-6''), 55,99 (q, 3'-OCH3 3''-OCH3) 3.4 Thử hoạt tính kháng sinh Đánh giá hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định dòng: Vi khuẩn: Vi khuẩn Gr(-) Vi khuẩn Gr(+); Nấm: nấm mốc nấm men Bước đánh giá tiến hành qua hai gia đoạn: Giai đoạn 1: Sàng lọc sơ Giai đoạn 2: Các chất có biểu dương tính bước sơ pha loãng theo thang nồng độ thấp dần, từ 5-10 thang nồng độ để tính giá trị nồng độ tối thiểu (MIC) mà vi sinh vật bị ức chế phát triển gần hoàn toàn 26 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc CHNG KT QU V THO LUN 4.1 Xác định cấu trúc hợp chất Hợp chất nhận dạng chất dầu không màu Phổ 1H-NMR xuất cụm tín hiệu vòng thơm bị ba vị trí với hệ tương tác ABX 6,83 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz), 6,89 (d, J = 8,0 Hz), 6,90 (d, J = 1,5 Hz) Ngoài có nhóm oximetin 4,75 (d, J = 4,0 Hz), oximetilen 4,27 (dd, J = 6,5, 9,0 Hz)/3,88 (dd, J = 10,5, 3,0 Hz) nhóm metoxi 3,91 (s) Hình 4.1.a Phổ 1H-NMR H3CO OH 3' 4' 2' 1' H H3CO 2" 3" 4" 1" 5' 6' O H O 6" 5" HO Hình 4.1.b Cấu trúc hoá học Bảng 4.1 Kết phổ NMR 27 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc C C# C a,c H b,c (J, Hz) HMBC (H C) 1, 54,2 54,16 3,11 (m) C-2, 4, 1' 2, 85,9 85,79 4,75 (d, 4,0) C-1, 5, 8, 1', 2', 6' 4, 71,7 71,66 4,27 (dd, 6,5, 9,0) C-1, 3,88 (dd, 3,0, 10,5) C-1, 1', 1'' 132,9 132,91 - 2', 2'' 108,7 108,65 6,90 (d, 1,5) 3', 3'' 146,7 146,73 - 4', 4'' 145,3 145,26 - 5', 5'' 114,3 114,30 6,89 (d, 8,0) C-1', 3', 4', 6' 6', 6'' 118,9 118,96 6,83 (dd, 1,5, 8,0) C-2, 1', 2', 4' 3',3''-OCH3 56,0 55,96 3,91 (s) C-3' a C-2, 1', 3', 4', 6' 125 MHz, b 500 MHz, c CDCl3, #C pinoresinol79 Hình 4.1.c Phổ 13C-NMR 28 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc Trên phổ 13C-NMR xuất 10 tín hiệu cacbon, có tín hiệu vòng thơm bị vị trí 108,65 (CH), 114,30 (CH), 118,96 (CH), 132,91 (C), 145,26 (C), 146,73 (C), bốn tín hiệu lại gồm có 55,96 (metoxi), 54,16 (metin), 85,88 (oximetin) 71,66 (oximetilen) Hình 4.1.d Phổ DEPT 29 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc Hình 4.1.e Phổ HSQC OCH OH O H H3CO H O COSY HMBC HO Hình 4.1.f Các tương tác HMBC COSY Bằng phổ HSQC số liệu phổ cacbon gán với số liệu proton tương ứng đưa bảng IV.1 Ngoài vòng thơm bị vị trí 30 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc phân tích nêu trên, tồn mảnh cấu trúc CH(O)-CH-CH2(O)- xác định thông qua phổ H-H COSY (Hình IV.1.f) Hình 4.1.g Phổ H-H COSY Như vậy, công thức phân tử theo tính toán C10H11O3 Tuy nhiên đo phổ khối lượng ESI-MS hợp chất lại xuất píc ion m/z 341 [M+H-H2O]+ tương ứng với công thức phân tử C20H22O6 Kết cho thấy phân tử đối xứng trục bậc hoàn toàn phù hợp với phổ kết NMR 31 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc Hình 4.1.h Phổ HMBC Hình 4.1.i Phổ ESI-MS Để kiểm tra đánh giá nêu phổ HMBC thực Trên phổ này, tương tác HMBC proton metoxi với C-3', H-2 với C-1', C-2' C-6', H-1 với C-2, C-1' chứng tỏ cấu trúc hợp chất hình V.3.1.f Thêm vào đó, trùng khớp số liệu phổ NMR 32 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc với pinoresinol chứng minh cấu trúc hóa học hợp chất (+)2,6bis (4'-hydroxy-3'-metoxi-phenyl)-3,7-dioxabicyclo [3,3,0] octan hay gọi pinoresinol[8] 4.2 Kết đánh giá hoạt tính kháng sinh Nồng độ ức chế tối thiểu(MIC: g/ml) Tên Vi khuẩnGr(-) Vi khuẩnGr(+) mẫu E.coli P.aeru B.subti S.aureu Asp.nig F.oxy Hợp (-) (-) (-) Nấm mốc s er (-) 12,5 (-) Nấm men S.cere C.albic 12,5 (-) chất Căn kết đánh giá hoạt tính kháng sinh cho thấy hợp chất thể khả kháng chủng nấm mốc chủng nấm men 33 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc Kết luận Bng cỏc phng phỏp sc ký kt hp, 01 hợp chất lignan ó c phõn lp t dch chit EtOAc ca lỏ cõy Mallotus paniculatus Cu trỳc ca cỏc hp cht ny c xỏc nh nh vo cỏc phng phỏp ph hin i nh ph cng hng t ht nhõn mt chiu (1H-NMR, 13CNMR, DEPT 135 v DEPT 90), hai chiu (HSQC, HMBC), Ph lng phun mự in t (ESI) Kt qu th hot tớnh khỏng sinh cho thy hp cht ny khỏng mt chng nm mc v mt chng nm men õy l ln u tiờn hp cht ny c phõn lp t cõy Mallotus paniculatus 34 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc TI LIU THAM KHO Huy Bớch, ng Quang Trung, Bựi Xuõn Chng, Nguyn Thng Dong, Trung m, Phm Vn Hin, V Ngc L, Phm Duy Mai, Phm Kim Món, on Th Nhu, Nguyn Tp v Trn Ton Cõy thuc v ng vt lm thuc Vit Nam, Nh xut bn Khoa hc v K thut H Ni, II, trang 130-133 (2004) GSTS Ló ỡnh Mi (ch biờn), TS Trn Minh Hi, TS Dng c Huyn, TS Trn Huy Thỏi, TS Ninh Khc Bn Ti nguyờn thc vt Vit Nam Nhng cõy cú cha cỏc hp cht cú hot tớnh sinh hc Nh xut bn nụng nghip 2005 Trn Quc Sn - Trn Th Tu Danh phỏp hp cht hu c, Nh xut bn Giỏo dc (2008) Vừ Vn Chi T in cõy thuc Vit Nam, Nh xut bn Y hc (1997) Phm Hong H Cõy c Vit Nam, Nh xut bn tr, (1999) PGS TS Thỏi Doón Tnh C s húa hc hu c, 1, Nh xut bn Khoa hc v K thut o ỡnh Thc Mt s phng phỏp ph ng dng húa hc, Nh xut bn i hc Quc gia H Ni (2007) B Vermes, O Seligmann, H Wagner, Synthesis of Biologically active tetrahydro-furofuranlignan-(Syringin, Pinoresinol)- monosaccarit and bis-glucosides, Phytochemistry, 30, 9, 3087-3089 35 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc 36 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc [...]... CHCl3-MeOH (từ 30:1 đến 1:1) thu được các phân đoạn ML3A (26,5 g), ML3B (13,4 g), ML3C, ML3D và ML3E (24,0 g) Phân đoạn ML3C được cho qua cột sắc ký YMC RP-18 hệ dung môi rửa giải MeOH-H2O (3:1) thu được nhóm chất ML3C-1 và hợp chất thu được hợp chất 1 (10 mg), chất dạng dầu không màu 3.3 Hng s vt lý v s liu ph ca cỏc hp cht phõn lp c Chất dạng dầu không màu; ESI-MS m/z: 341 [M+H-H2O]+, công thức phân tử:... gi l Lignan ( Lignane, Lignans ) Nu 2 nhúm liờn kt vi nhau bi cỏc liờn kt khỏc, chng hn 3 3 thay cho 8 8 ta c Neolignan 5 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc 3,3 - Neolignan Nu to mt vũng b sung gia 2 nhúm gi l cyclolignan 2,7- Cyclolignan Hai nhúm liờn kt vi nhau bng cỏc liờn kt 8 8 v mt nguyờn t O c epoxylignan 7,7 - epoxylignan Tng t cú oxyneolignan: 6 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc 8,4 oxyneolignan... trữ lâu dài 3.2 Phân lập các hợp chất Cành và lá của cây bục bạc M paniculatus (1,0 kg) được chiết ba lần với MeOH trên máy siêu âm ở nhiệt độ 40-50oC trong vòng 20 phút Dịch chiết sau đó được cô đặc bằng máy cất quay với áp suất giảm để thu được 80 g cặn chiết MeOH Cặn MeOH được hòa vào nước và phân lớp lần lượt với 24 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc Hexan, CHCl3 để thu được các dịch cô hexan (13 g),... cm, có gai nạc, thưa và dài Hạt tròn Hỡnh 1.1.Cõy Bc Bc (Mallotus paniculatus) 3 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc 1.1.2 Sinh thái và phân bố Cây ưa sáng, có biên độ sinh thái rộng, mọc trong rừng thường xanh hay các thảm cây bụi, trên đất sa phiến thạch ở nơi rừng bị khai phá hoặc sau nương rẫy, trên độ cao 100-1000 m ở Việt Nam: Cây phổ biến khắp các khu vực miền núi và trung du trên cả 3 miền Bắc, Trung... v hp cht Lignan: 1.2.1 i cng v phõn loi Lignan l mt nhúm cỏc sn phm t nhiờn cú ngun gc t cỏc dn xut ca cỏc cinamic acid, cinamyl alcohol, propenylbenzene v llylbenzene cú liờn quan n s chuyn húa sinh cỏc phenyl alanine Cu trỳc ca Lignan c chia thnh cỏc n v hp thnh m ngi ta phõn bit: Lignan 2 n v Secquineolignan 3 n v Dineolignan 4 n v Sesterneolignan 5 n v Lignan do 2 n v hp thnh Nm 1961, Freudenberg... 1.1 Tng quan v Mallotus paniculatus 1.1.1 Thc vt hc Chi ba bét (Mallotus) là một chi khá lớn, gồm khoảng 150 loài, phân bố tại các khu vực từ ấn Độ, Sri Lanka đến Thái Lan, Lào, Campuchia, Việt Nam và khắp vùng Malesian Về phía Nam, chúng phân bố tới miền Đông Fiji, miền Bắc và Đông Australia Lên phía Bắc, có thể bắt gặp khá nhiều loài phân bố tại Trung Quốc, Triều Tiên và Nhật Bản Rất nhiều loài Mallotus... DNA polymerase v RANESE Lignan pinoresinol v laricresnol l thnh phn quan trng trong thc n n kiờng ca bnh nhõn tiu ng ụng y Trung Quc s dng lignan iu tr viờm gan v bo v gan Da trờn hot tớnh oxy húa mnh, khoa hc ó tỡm ra nhiu húa cht ngun gc lignan a dng, cng sinh vi nhiu loi virut to hng phỏt trin mi trong Y hc 1.2.2 Cỏc dn xut quan trng ca Lignan Trong cỏc dn xut quan trng ca Lignan cú cỏc loi dn xut... tính kháng sinh Đánh giá hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định trên các dòng: Vi khuẩn: Vi khuẩn Gr(-) và Vi khuẩn Gr(+); Nấm: nấm mốc và nấm men Bước đánh giá được tiến hành qua hai gia đoạn: Giai đoạn 1: Sàng lọc sơ bộ Giai đoạn 2: Các chất có biểu hiện dương tính ở bước sơ bộ này được pha loãng theo các thang nồng độ thấp dần, từ 5-10 thang nồng độ để tính giá trị nồng độ tối thiểu (MIC) mà ở đó... để tính giá trị nồng độ tối thiểu (MIC) mà ở đó vi sinh vật bị ức chế phát triển gần như hoàn toàn 26 Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc CHNG 4 KT QU V THO LUN 4.1 Xác định cấu trúc hợp chất 1 Hợp chất 1 nhận được dưới dạng chất dầu không màu Phổ 1H-NMR của 1 xuất hiện cụm tín hiệu của vòng thơm bị thế ba vị trí với hệ tương tác ABX tại 6,83 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz), 6,89 (d, J = 8,0 Hz), 6,90 (d, J = 1,5... K33B Khoa Húa Hc 8,4 oxyneolignan Lignan c tỡm thy ch yu t r, lúi, cnh, lỏ, qu, nha cỏc cõy ht trn, ht kớn Theo cỏc nghiờn cu khoa hc, lignan l cht phytoestrogens cú tim nng chng ung th ( cancer ) bung trng, tuyn tin lit, vỳ, t cung; Lignan chit sut khoai tõy kớch thớch h min dch, tỏc ng to ln ti bo mũn si tỳi mt ( theo bỏc s Wilkin Son bnh vin Sowthompton Anh ), Lignan cú tỏc dng ngn chn chu k APM ... sinh cỏc phenyl alanine Cu trỳc ca Lignan c chia thnh cỏc n v hp thnh m ngi ta phõn bit: Lignan n v Secquineolignan n v Dineolignan n v Sesterneolignan n v Lignan n v hp thnh Nm 1961, Freudenberg... Lignan ( Lignane, Lignans ) Nu nhúm liờn kt vi bi cỏc liờn kt khỏc, chng hn thay cho ta c Neolignan Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc 3,3 - Neolignan Nu to mt vũng b sung gia nhúm gi l cyclolignan... cyclolignan 2,7- Cyclolignan Hai nhúm liờn kt vi bng cỏc liờn kt v mt nguyờn t O c epoxylignan 7,7 - epoxylignan Tng t cú oxyneolignan: Th Thanh Mai K33B Khoa Húa Hc 8,4 oxyneolignan Lignan c tỡm