đánh giá các đặc điểm nông sinh học và di truyền bằng chỉ thị dna của các dòng đậu tương đột biến

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ðỖ THỊ HỒNG ðÁNH GIÁ CÁC ðẶC ðIỂM NÔNG SINH HỌC VÀ DI TRUYỀN BẰNG CHỈ THỊ DNA CỦA CÁC DÒNG ðẬU TƯƠNG ðỘT BIẾN LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 60.42.80 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Vũ ðình Hòa HÀ NỘI - 2012 LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan ñây công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa ñược công bố công trình khác Hà Nội, ngày 26 tháng năm 2012 Tác giả luận văn ðỗ Thị Hồng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… i LỜI CẢM ƠN Sau thời gian thực tập Bộ môn Công nghệ sinh học ứng dụng, Bộ môn Công nghệ sinh học thực vật, ñược quan tâm giúp ñỡ dìu dắt tận tình thầy cô giáo, cán phòng thí nghiệm môn, cố gắng nỗ lực thân em ñã hoàn thành luận văn tốt nghiệp Với lòng chân thành em xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Vũ ðình Hòa, ñã tận tình hướng dẫn dạy dỗ em suốt trình thực tập Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới Th.S Trịnh Hồng Kiên ñã chu ñáo, tận tình hướng dẫn, giúp ñỡ tạo ñiều kiện cho em suốt thời gian thực tập Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới KS Tống Văn Hải cán phòng thí nghiệm môn Công nghệ sinh học ứng dụng, TS ðặng Xuân Nghiêm môn Công nghệ vi sinh ñã giúp ñỡ tạo ñiều kiện thuận lợi giúp em hoàn thành ñề tài thực tập tốt nghiệp Qua ñây em xin gửi lời cảm ơn ñến toàn thể phòng, ban khoa Công nghệ sinh học, gia ñình toàn thể bạn bè ñã giúp ñỡ, ñộng viên tạo ñiều kiện thuận lợi cho em suốt trình học tập thực tập tốt nghiệp EM XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN! Học Viên ðỗ Thị Hồng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… ii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục bảng v Danh mục hình vii Danh mục chữ viết tắt vii MỞ ðẦU 1.1 ðặt vấn ñề 1.2 Mục ñích yêu cầu TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Vài nét sơ lược ñậu tương 2.1.1 Nguồn gốc 2.1.2 Giá trị ñậu tương 2.2 Cơ sở khoa học ñề tài 2.2.1 Cơ sở khoa học chọn tạo giống ñậu tương ñột biến 2.2.2 Cơ sở khoa học việc ứng dụng thị phân tử ñể ñánh giá ña dạng di truyền 20 2.2.3 Một số nghiên cứu di truyền thực vật sử dụng kỹ thuật RAPD 25 2.2.4 Nghiên cứu di truyền ñậu tương sử dụng kỹ thuật RAPD 29 2.3 Tình hình sản xuất ñậu tương giới Việt Nam 31 2.3.1 Tình hình sản xuất ñậu tương giới 31 2.3.2 Tình hình sản xuất ñậu tương Việt Nam 33 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 3.1 Vật liệu nghiên cứu 36 3.1.1 Vật liệu thực vật 36 3.1.2 Hóa chất thiết bị 36 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… iii 3.1.3 Thời gian ñịa ñiểm nghiêm cứu 36 3.2 Phương pháp nghiên cứu 36 3.2.1 Quy trình áp dụng cho thí nghiệm ñồng ruộng 36 3.2.2 Thí nghiệm phòng 39 3.2.3 ðánh giá sai khác di truyền dòng 42 3.3 Phương pháp xử lý kết số liệu 45 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 46 4.1 ðánh giá ñặc ñiểm nông sinh học dòng ñậu tương ñột biến 4.1.1 ðánh giá số ñặc ñiểm nông sinh học, suất yếu tố cấu thành suất dòng ñậu tương ñột biến hệ M4 4.1.2 46 48 ðánh giá số ñặc ñiểm nông sinh học, suất yếu tố cấu thành suất dòng ñậu tương ñột biến hệ M5 56 4.2 ðánh giá hàm lượng Protein Lipid 62 4.3 ðánh giá dòng ñậu tương ñột biến dựa vào thị phân tử RAPD 65 4.3.1 Kết tách chiết DNA tổng số dòng ñậu tương 65 4.3.1 Kết thu ñược từ thị RAPD dòng ñậu tương 66 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 69 5.1 Kết luận 69 5.2 ðề nghị 70 TÀI LIỆU THAM KHẢO 71 PHỤ LỤC 77 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… iv DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 2.1 Tình hình sản xuất ñậu tương giới 2.2 Tình hình sản xuất ñậu tương nước ñứng ñầu giới 31 năm gần ñây 33 2.3 Sản xuất ñậu tương Việt Nam từ 2005 – 2011 34 3.1 Bảng pha loãng nồng ñộ dung dịch gốc 40 3.2 Xây dựng quy trình ñường chuẩn Bradford 41 3.3 Danh sách mồi RAPD ñược dùng nghiên cứu 44 3.4 Thành phần hoá chất cho phản ứng RAPD-PCR 44 3.5 Chu trình nhiệt phản ứng RAPD-PCR 45 4.1 Một số ñặc ñiểm nông sinh học dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðT12 hệ M4 4.2 Năng suất yếu tố cấu thành suất dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðT12 hệ M4 4.3 55 Năng suất yếu tố cấu thành suất của dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðVN6 hệ M4 4.7 54 Một số ñặc ñiểm nông sinh học dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống giống ðVN6 hệ M4 4.6 52 Năng suất yếu tố cấu thành suất dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðT20 hệ M4 4.5 50 Một số ñặc ñiểm nông sinh học dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðT20 hệ M4 4.4 48 56 Một số ñặc ñiểm nông sinh học dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðT12 hệ M5 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 57 v 4.8 Năng suất yếu tố cấu thành suất dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðT12 hệ M5 4.9 Một số ñặc ñiểm nông sinh học dòng ñậu tương ñột biến nguồn gốc từ giống ðT20 hệ M5 4.10 63 Hàm lượng protein lipid dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðT20 4.15 61 Hàm lượng protein lipid dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðT12 4.14 60 Năng suất yếu tố cấu thành suất dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðVN6 hệ M5 4.13 60 Một số ñặc ñiểm nông sinh học dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðVN6 hệ M5 4.12 59 Năng suất yếu tố cấu thành suất dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðT20 hệ M5 4.11 58 64 Hàm lượng protein lipid dòng ñậu tương ñột biến có nguồn gốc từ giống ðVN6 65 4.16 Nồng ñộ giá trị OD DNA từ dòng ñược tách chiết 65 4.17 Một số dòng ñậu tương triển vọng 68 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… vi DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang Hình 1: Sản xuất ñậu tương Việt nam năm gần ñây 34 Hình ðồ thị ñường chuẩn Bradford 41 Hình ðiện di sản phẩm PCR với mồi OPC05 gel agarose 3% 66 Hình ðiện di sản phẩm PCR với mồi OPL11 gel agarose 3% 67 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AICRPS The All India Coordinted Research Project on Soybean AVRDC Asia Vegetable Research Development Center AFLP Amplified Fragment Length Polymorphism ð/C ðối chứng Df Degrees of freedom DNA Deoxyribonucleic acid FAO Food and Agriculture Organization IAEA International Atomic Energy Agency IITA The International Institute of Tropical Agriculture NN&PTNT Nông nghiệp phát triển nông thôn NRCS National Research Center for Soybean NSCT Năng suất cá thể PCR Polymerase Chain Reaction SSR Simple Sequence Repeats TGST Thời gian sinh trưởng RAPD Random Amplified Polymorphic RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… viii MỞ ðẦU 1.1 ðặt vấn ñề ðậu tương (Glycine max (L) Merrill) trồng chiến lược nhiều quốc gia, ý nghĩa mặt dinh dưỡng, kinh tế mà có ý nghĩa quan trọng việc cải tạo ñộ phì sử dụng lâu bền nguồn tài nguyên ñất Trên giới lượng tiêu thụ ñậu tương mạnh ñậu tương nguồn dầu thực vật thức ăn giàu Protein (48% Protein thô) Sản phẩm ñược chế biến từ ñậu tương phong phú ðậu tương chứa hợp chất trao ñổi thứ cấp Isoflavon, saponin, axit phytic, oligosaccharit, goitrogens phytoestrogens Các sản phẩm từ ñậu tương làm giảm khả phát triển bệnh ung thư, mỡ máu bệnh tim (http://www.Soymilkmaker.com/Soyhealth.html) [47] Hiện giới ñậu tương ñứng ñầu cung cấp nguyên liệu cho ép dầu, dầu ñậu tương chiếm 50% tổng lượng dầu thực vật (Tổng cục thống kê,2010) Bên cạnh ñó ñậu tương ñược coi thành phần quan trọng hệ thống canh tác phương diện sinh thái Do có khả cố ñịnh ñạm, ñậu tương bị phụ thuộc vào phân ñạm so với loài trồng khác Hơn thế, có khả cố ñịnh nitơ cung cấp nguồn ñạm cho trồng vụ sau Vì ñậu tương trở thành trồng quan trọng luân canh trồng xen nước ta nhiều nước giới Tuy nhiên, với tình hình khí hậu trái ñất ñang biến ñổi không ngừng, nhiệt ñộ trái ñất ngày tăng cao, từ ñó dẫn ñến thiên tai (lũ lụt, hạn hán, bệnh dịch,…) gây ảnh hưởng không nhỏ ñến sinh trưởng, phát triển loại trồng nói chung ñậu tương nói riêng Nước ta nước nông nghiệp với ñặc ñiểm bật mật ñộ dân số cao vào loại Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… PHỤ LỤC Phân tích ANOVA Năng suất, số quả/cây, tỉ lệ dòng ñậu tương ñột biến hệ M4 Giống ðT12 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SQ/C FILE NSDT12 20/ 9/12 9:16 :PAGE Thi nghiem bo tri kieu RCB VARIATE V003 SQ/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 126.907 63.4533 5.00 0.013 DONG$ 15 1246.32 83.0880 6.55 0.000 * RESIDUAL 30 380.720 12.6907 * TOTAL (CORRECTED) 47 1753.95 37.3180 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC FILE NSDT12 20/ 9/12 9:16 :PAGE Thi nghiem bo tri kieu RCB VARIATE V004 TLC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 6.82666 3.41333 5.00 0.013 DONG$ 15 142.931 9.52872 13.96 0.000 * RESIDUAL 30 20.4800 682668 * TOTAL (CORRECTED) 47 170.238 3.62207 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NSCT FILE NSDT12 20/ 9/12 9:16 :PAGE Thi nghiem bo tri kieu RCB VARIATE V005 NSCT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 2.960001 480000 0.48 0.626 DONG$ 15 109.047 7.26982 7.33 0.000 * RESIDUAL 30 29.7600 992000 * TOTAL (CORRECTED) 47 139.767 2.97377 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NSDT12 20/ 9/12 9:16 :PAGE Thi nghiem bo tri kieu RCB MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 16 16 16 SQ/C 29.4500 25.5500 28.2000 TLC 94.6100 94.6100 95.4100 NSCT 10.6106 10.9106 10.6106 SE(N= 16) 0.890599 0.206559 0.248998 5%LSD 30DF 2.57213 0.596561 0.719127 MEANS FOR EFFECT DONG$ - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 82 DONG$ ÐC (1-1) (1-6) (1-7) (8-2) (10-2) (11-1) (12-2) (12-5) (14-5) (19-1) (22-1) (23-2) (26-1) (29-1) (38-3) NOS 3 3 3 3 3 3 3 3 SQ/C 26.7333 36.6333 24.1333 34.9333 26.4333 25.5333 25.2333 22.1333 26.4333 23.7333 28.5333 39.1333 28.5333 26.3333 29.9333 19.3333 TLC 94.7667 95.6667 96.7667 93.5667 96.3367 96.1967 94.9167 97.4267 95.5367 95.0767 95.8367 92.7667 91.8567 93.9467 91.1667 96.1967 NSCT 9.21000 10.2900 11.6500 10.8400 12.0100 11.7000 8.24000 12.7000 8.87000 9.00000 8.83000 13.1000 10.6500 11.9900 12.3100 9.98000 SE(N= 3) 2.05675 0.477028 0.575036 5%LSD 30DF 5.94007 1.37770 1.66075 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NSDT12 20/ 9/12 9:16 :PAGE Thi nghiem bo tri kieu RCB F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SQ/C TLC NSCT GRAND MEAN (N= 48) NO OBS 48 27.733 48 94.877 48 10.711 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 6.1088 3.5624 12.8 0.0133 1.9032 0.82624 0.9 0.0133 1.7245 0.99599 9.3 0.6264 |DONG$ | | | 0.0000 0.0000 0.0000 | | | | Giống ðVN6 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SQ/ ðVN6 29/ 9/12 16:51 :PAGE VARIATE V003 SQ/C LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 74.6667 37.3333 2.80 0.089 DONG$ 201.935 25.2419 1.89 0.132 * RESIDUAL 16 213.333 13.3333 * TOTAL (CORRECTED) 26 489.935 18.8437 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SQC/C ðVN6 29/ 9/12 16:51 :PAGE VARIATE V004 SQC/C SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 60.4800 30.2400 2.80 0.089 DONG$ 209.479 26.1849 2.42 0.063 * RESIDUAL 16 172.800 10.8000 * TOTAL (CORRECTED) 26 442.759 17.0292 BALANCED ANOVA FOR VARIATE %CHAC ðVN6 29/ 9/12 16:51 :PAGE VARIATE V005 %CHAC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 83 NL 5.64667 2.82333 2.80 0.089 DONG$ 34.5035 4.31293 4.28 0.007 * RESIDUAL 16 16.1333 1.00833 * TOTAL (CORRECTED) 26 56.2834 2.16475 BALANCED ANOVA FOR VARIATE P1000 ðVN6 29/ 9/12 16:51 :PAGE VARIATE V006 P1000 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 1.16667 583333 2.80 0.089 DONG$ 128.647 16.0808 77.19 0.000 * RESIDUAL 16 3.33333 208333 * TOTAL (CORRECTED) 26 133.147 5.12103 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NSCT ðVN6 29/ 9/12 16:51 :PAGE VARIATE V007 NSCT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 2.28667 1.14333 2.80 0.089 DONG$ 13.3053 1.66316 4.07 0.008 * RESIDUAL 16 6.53333 408333 * TOTAL (CORRECTED) 26 22.1253 850972 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS ðVN6 29/ 9/12 16:51 :PAGE MEANS FOR EFFECT NL NL SE(N= 5%LSD NOS 9 9) 16DF NL NOS 9 SQ/C 51.2311 47.2311 49.8978 SQC/C 49.4956 45.8956 48.2956 %CHAC 97.4367 96.3367 97.0700 P1000 186.567 186.067 186.400 1.21716 3.64907 1.09545 3.28416 0.334719 1.00349 0.152145 0.456134 NSCT 12.9400 12.2400 12.7067 SE(N= 9) 0.213003 5%LSD 16DF 0.638587 MEANS FOR EFFECT DONG$ DONG$ ÐC (2-24) (5-36) (3-27) (4-33) (2-25) (5-2) (1-40) (2-27) SE(N= 5%LSD NOS 3) 16DF DONG$ SQ/C 46.7000 49.9000 54.0200 51.2900 48.5000 47.6200 45.2000 48.8500 53.0000 3 3 3 3 2.10819 6.32037 NOS SQC/C 45.0500 49.1200 53.0600 49.3400 47.3000 46.3600 43.0000 47.7500 50.0800 1.89737 5.68834 %CHAC 96.4700 98.4300 98.2200 96.1900 97.5200 97.3500 94.9000 97.7500 95.7000 0.579751 1.73810 P1000 187.100 185.500 185.000 188.300 186.800 189.700 187.700 185.300 181.700 0.263523 0.790047 NSCT Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 84 ÐC (2-24) (5-36) (3-27) (4-33) (2-25) (5-2) (1-40) (2-27) 3 3 3 3 12.8000 11.2000 13.1800 12.8200 12.9500 12.9100 13.0400 13.2600 11.5000 SE(N= 3) 0.368932 5%LSD 16DF 1.10607 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE ðVN6 29/ 9/12 16:51 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SQ/C SQC/C %CHAC P1000 NSCT GRAND MEAN (N= 27) NO OBS 27 49.453 27 47.896 27 96.948 27 186.34 27 12.629 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.3409 3.6515 7.4 0.0893 4.1266 3.2863 6.9 0.0893 1.4713 1.0042 4.0 0.0893 2.2630 0.45644 2.2 0.0893 0.92248 0.63901 5.1 0.0893 |DONG$ | | | 0.1317 0.0626 0.0066 0.0000 0.0083 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 85 PHỤ LỤC Phân tích ANOVA Một số ñặc ñiểm nông sinh học dòng ñậu tương ñột biến hệ M5 Giống ðT12 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE ðT12 29/ 9/12 16:57 :PAGE VARIATE V003 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 49.0000 24.5000 2.50 0.131 DONG$ 210.025 42.0050 4.29 0.024 * RESIDUAL 10 98.0000 9.80000 * TOTAL (CORRECTED) 17 357.025 21.0015 - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 86 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SD/T FILE ðT12 29/ 9/12 16:57 :PAGE VARIATE V004 SD/T LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 5.76000 2.88000 2.50 0.131 DONG$ 6.64000 1.32800 1.15 0.395 * RESIDUAL 10 11.5200 1.15200 * TOTAL (CORRECTED) 17 23.9200 1.40706 - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 87 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SCC1 FILE ðT12 29/ 9/12 16:57 :PAGE VARIATE V005 SCC1 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 1.00000 500000 2.50 0.131 DONG$ 13.2000 2.64000 13.20 0.000 * RESIDUAL 10 2.00000 200000 * TOTAL (CORRECTED) 17 16.2000 952941 - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 88 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE ðT12 29/ 9/12 16:57 :PAGE MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 6 CCC 23.1833 26.6833 26.6833 SD/T 9.86667 11.0667 11.0667 SCC1 2.86667 3.36667 3.36667 SE(N= 6) 1.27802 0.438178 0.182574 5%LSD 10DF 4.02708 1.38071 0.575298 MEANS FOR EFFECT DONG$ DONG$ ÐC 1-1 1-6 1-7 22-1 29-1 NOS 3 3 3 CCC 21.4000 28.6000 30.5000 22.8000 27.2000 22.6000 SD/T 10.2000 11.2000 11.2000 10.0000 11.4000 10.0000 SCC1 3.20000 4.00000 2.40000 1.80000 4.20000 3.60000 SE(N= 3) 1.80739 0.619677 0.258199 5%LSD 10DF 5.69516 1.95263 0.813594 - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 89 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE ðT12 29/ 9/12 16:57 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CCC SD/T SCC1 GRAND MEAN (N= 18) NO OBS 18 25.517 18 10.667 18 3.2000 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.5827 3.1305 12.3 0.1306 1.1862 1.0733 10.1 0.1306 0.97619 0.44721 14.0 0.1306 |DONG$ | | | 0.0244 0.3953 0.0005 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 90 PHỤ LỤC Phân tích ANOVA Năng suất yếu tố cấu thành suất dòng ñậu tương ñột hệ M5 Giống ðT20 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SQ/C FILE DT20NS 20/ 9/12 9:47 :PAGE Thi nghiem bo tri kieu RCB VARIATE V003 SQ/C LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 113.013 56.5067 2.31 0.135 DONG$ 996.876 142.411 5.82 0.003 * RESIDUAL 14 342.840 24.4886 * TOTAL (CORRECTED) 23 1452.73 63.1622 - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 91 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLC FILE DT20NS 20/ 9/12 9:47 :PAGE Thi nghiem bo tri kieu RCB VARIATE V004 TLC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 88.8409 44.4204 9.98 0.002 DONG$ 38.9383 5.56262 1.25 0.341 * RESIDUAL 14 62.3392 4.45280 * TOTAL (CORRECTED) 23 190.118 8.26602 - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 92 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NSCT FILE DT20NS 20/ 9/12 9:47 :PAGE Thi nghiem bo tri kieu RCB VARIATE V005 NSCT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 1.08000 540000 0.43 0.664 DONG$ 47.7936 6.82766 5.42 0.004 * RESIDUAL 14 17.6400 1.26000 * TOTAL (CORRECTED) 23 66.5136 2.89190 - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 93 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE DT20NS 20/ 9/12 9:47 :PAGE Thi nghiem bo tri kieu RCB MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 8 SQ/C 60.2375 55.7375 55.5375 TLC 96.4875 91.8875 93.3000 NSCT 21.1200 21.5700 21.5700 SE(N= 8) 1.74959 0.746056 0.396863 5%LSD 14DF 5.30690 2.26295 1.20377 MEANS FOR EFFECT DONG$ DONG$ ÐC 1-1 2-1 3-21 4-26 5-2 28-2 32-1 NOS 3 3 3 3 SQ/C 55.0000 58.6667 62.5333 64.1000 66.0667 54.4667 49.6000 46.9333 TLC 94.0667 94.3333 93.5333 95.2000 95.2000 93.6000 94.3000 90.9000 NSCT 21.8600 20.4600 23.1000 21.5600 23.4400 20.8000 21.4600 18.6800 SE(N= 3) 2.85707 1.21830 0.648074 5%LSD 14DF 8.66613 3.69539 1.96575 - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 94 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE DT20NS 20/ 9/12 9:47 :PAGE Thi nghiem bo tri kieu RCB F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SQ/C TLC NSCT GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 57.171 24 93.892 24 21.420 STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 7.9475 4.9486 8.7 0.1347 2.8751 2.1102 4.2 0.0021 1.7006 1.1225 5.2 0.6642 |DONG$ | | | 0.0027 0.3412 0.0037 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 95 PHỤ LỤC Một số hình ảnh ñề tài Hình Tăng số lượng chét/lá kép dòng ðT12(1-7) Hình 3: Phân nhánh sớm dòng ðT12(22-1) Hình Tăng số lượng chét/lá kép dòng ðT20(2-1) Hình 4: Phân nhánh sớm dòng ðVN6(3-27) Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 96 [...]... những biến dị mong muốn, có ích Từ các giống ñậu tương ðVN6, ðT12 và ðT20 Một số dòng ñậu tương ñột biến ñã ñược tạo ra thông qua xử lí tia gamma (Vũ ðình Hòa và Nguyễn Văn Giang, 2012) Trong ñề tài này chúng tôi ðánh giá các ñặc ñiểm nông sinh học và di truyền bằng chỉ thị DNA của các dòng ñậu tương ñột biến 1.2.Mục ñích và yêu cầu 1.2.1.Mục ñích - ðánh giá và so sánh các ñặc ñiểm nông sinh học của các. .. các dòng ñậu tương ñột biến - Xác ñịnh hàm lượng protein, tổng số hàm lượng lipid của các dòng ñậu tương ñột biến - ðánh giá các biến dị ñột biến thông qua chỉ thị phân tử RAPD - Tuyển chọn ra những dòng tốt làm vật liệu cho công tác chọn tạo giống ñậu tương 1.2.2.Yêu cầu Mô tả ñược các ñặc ñiểm nông sinh học của các dòng ñậu tương ñột biến, so sánh với giống gốc Phân tích ñược một số chỉ tiêu hóa sinh: ... Lipid của các dòng ñậu tương ñột biến và so sánh với giống gốc Xác ñịnh, ñánh giá sự sai khác di truyền của các dòng ñậu tương ñột biến so với giống gốc bằng chỉ thị phân tử RAPD Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 4 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Vài nét sơ lược về cây ñậu tương ðậu tương (Glycine Max(L) Merrill) là một trong những cây trồng có từ lâu ñời ðậu tương. .. cho việc bón ñạm 2.2 Cơ sở khoa học của ñề tài 2.2.1 Cơ sở khoa học chọn tạo các giống ñậu tương ñột biến a Khái niệm và phân loại ñột biến ðột biến (mutation) là những biến ñổi di truyền hợp thành cơ sở di truyền của tính biến dị, nó là hiện tượng thường xuyên gắn liền với sự sống và tiến hoá của sinh vật Tác ñộng của các ñột biến rất ña dạng, nó có thể gây ra những biến ñổi bất kỳ tính trạng nào với... phẩn sơ cấp do kết quả tương tác của bức xạ với các ñại phân tử chưa bị biến tính của các cấu trúc sinh học, tạo ra các peoxit hữu cơ ñồng thời di n ra các phản ứng oxy hoá dẫn tới sự tạo thành các hợp chất mới và các gốc ñộc tính - Giai ñoạn 3: có tính chất sinh học là giai ñoạn phát huy tác ñộng của các phản ứng lên hoạt ñộng của các tế bào sống Tức là các biến ñổi hoá học gây nên do bức xạ dưới mức... tác nghiên cứu và khảo sát các dòng giống ñậu tương vô cùng cần thiết nó là tiền ñề quan trọng ñể chọn lọc và ñánh giá những biến ñộng di truyền có ý nghĩa trong công tác chọn tạo giống 2.2.2 Cơ sở khoa học của việc ứng dụng chỉ thị phân tử ñể ñánh giá ña dạng di truyền Chỉ thị phân tử là trình tự DNA ñặc trưng cho một cá thể Việc sử dụng chỉ thị phân tử ñã cung cấp một cơ hội mới không chỉ ñối với việc... ñột biến của tác nhân phóng xạ Theo lý thuyết của A M Kuzin cơ chế của quá trình tương tác gây ñột biến gồm ba giai ñoạn chính: - Giai ñoạn 1: Có tính chất vật lý, sự tương tác của các bức xạ tạo ra quá trình ion hoá và sự biến ñổi các hợp chất ở mức ñộ dưới phân tử và phân tử - Giai ñoạn 2: Có tính chất hoá học, ở giai ñoạn này di n ra các phản ứng tương tác của các sản phẩn sơ cấp do kết quả tương. .. văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 7 Sự phát sinh ñột biến có thể là tự phát (ñột biến tự nhiên): ðột biến xuất hiện trong tự nhiên do tác ñộng của tập hợp các yếu tố (vật lý, hoá học, …) có trong môi trường sống và do những biến loạn về trao ñổi chất trong tế bào ðột biến có thể do tác ñộng của con người (ñột biến nhân tạo): bằng cách sử dụng các tác nhân gây ñột biến như các tác nhân vật lý... giống ñậu tương nhập nội, tập ñoàn các giống ñậu tương ñịa phương, giống lai tạo, các giống ñậu tương ñột biến Cảm ứng ñột biến ở ñậu tương ñã tạo ra nguồn biến dị di truyền ñáng kể cho cả tính trạng chất lượng và tính trạng số lượng (Rarxlling và CS, 1958; Papa và cs 1961; Santos và CS, 1970; Constantin và Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 3 cs 1976; Iman... 12 dòng ñột biến có tỷ lệ nảy mầm ñạt 75-89% trong khi ñó dạng bố mẹ chỉ ñạt 41% e.Một số kết quả nghiên cứu về ñậu tương xử lý ñột biến trong và ngoài nước * Trên thế giới Cảm ứng ñột biến là một phương pháp hữu hiệu ñể tạo ra biến dị di truyền bổ sung, ñặc biệt ñối với những loại cây trồng có nền tảng di truyền hẹp như ñậu tương Cảm ứng ñột biến ở ñậu tương ñã tạo ra nguồn biến dị di Trường ðại học ... ñề tài ðánh giá ñặc ñiểm nông sinh học di truyền thị DNA dòng ñậu tương ñột biến 1.2.Mục ñích yêu cầu 1.2.1.Mục ñích - ðánh giá so sánh ñặc ñiểm nông sinh học dòng ñậu tương ñột biến - Xác ñịnh... ðánh giá sai khác di truyền dòng 42 3.3 Phương pháp xử lý kết số liệu 45 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 46 4.1 ðánh giá ñặc ñiểm nông sinh học dòng ñậu tương ñột biến 4.1.1 ðánh giá số ñặc ñiểm nông sinh học, ... kịp thời Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 37 e Theo dõi, ñánh giá ñặc ñiểm nông sinh học Các ñặc ñiểm nông sinh học ñược ñánh giá theo TCN 10 tiêu