Nghiên cứu sinh khả dụng và tương đương sinh học viên nang theophylin tác dụng kéo dài

MUC LUC Phn 1: TONG QUAN 1.1 Thiột kộ nghiờn cỹu dõnh giõ sinh khõ dung v tuong duong sinh h o c 1.1.1 Khõi niờm 1.1.2 Cõc y eu to dnh hiùụng õởn thiet ke nghiờn cỷu sinh khõ dung v tticfng õuang sinh hoc .1 1.1.3 Nhỹng chu y thiet ke nghiờn cỷu sinh khõ dung v tuong duong sinh hoc 1.2 Quy dinh cỹa FDA vộ dõnh giõ sinh khõ dung v tirong duong sinh hoc .3 1.2.1 Thiet kởnghiờn c ỷ u 1.2.2 NgUdi tinh nguyờn 1.2.3 Thõi diộm lõy m õu 1.2.4 Chởpham so sõnh 1.2.5 Tham dinh phuong phõp phõn tich hm luỗfng duỗfc chat dich sinh hoc 1.3 Ap dung mụ hinh khụng ngõn nghiờn cuti duoc dụng h o c 1.4 Tuong quan in vitro-in vivo 11 1.4.1 Chợ tiờu in vitro .11 1.4.2 Chợ tiờu in vivo 12 1.4.3 Tuong quan in vitro-in vivo 12 1.5 Theophylin v chờ pham theophylin tõc dung kộo di 13 1.5.1 Theophylin 13 1.5.2 Chờ pham theophylin tõc dung kộo di 16 Phn 2: THUC NGHIấM V KẫT QU .18 2.1 Nguyờn võt lieu v phuong phõp thuc nghiờm 18 2.7.7 Nguyờn võt lieu 18 2.7.2 Phuc/ngphõp thuc nghiờm 19 2.2 Ket quõ thuc nghiờm v nhõn xột 22 2.2.7 Xõy dung v thõm dinh phuong phõp dinh luỗfng theophylin nuục bot 22 2.2.2 Dinh luỗfng nụng dụ theophylin nuục bot ngui tợnh nguyờn nghiờn cỷu lieu don 28 2.2.3 Cõc thụng sụ'duoc dụng hoc cỹa mõu R ,T, .32 2.2.4 Dõnh giõ mỷc dụ tuong duong sinh hoc giỹa viờn theophylin tõc dung kộo di v Euphylline L A 34 2.2.5 T inh toõn toc dụ hdp thu theo phuong phõp giai tich chõp duoc toi Uu hoõ thụng qua tõi tich chõp (WLS Reconvolution) 39 2.2.6 Nghiờn cỷu tuong quan in vitro-in vivo cỹa viờn theophylin tõc dung kộo di 40 2.3 Bn luõn 43 2.3.1 Vờ viờc dựng nụng dụ theophylin nuục bot dộ nghiờn cỷu sinh khõ dung v tuong duong sinh hoc .43 2.3.2 Vờ xõy dung v tham dinh phuong phõp dinh luong theophylin nuục bot .44 2.3.3 Vờ toc dụ hdp thu v thựi gian luu trỷ trung bợnh (MRT) 44 2.3.4.VS van dộ tuong duong sinh hoc 44 Phn 3: KẫT LUN V DE XUAT 45 Cõc k hiờu viet tõt FDA : Food and Drug Administration Ca quan qun l thuục v thuc phõm M HPLC : High performance liquid chromatography Sõc k long hiờu nõng cao NTN : Ngirụri tinh nguyờn TDKD : Tac dung kộo di TDSH : Tirong dirong sinh hoc SKD : Sinh khõ dung DAT VAN DE Hen phộ quõn l mot bờnh viờm phộ quõn mõn tmh, cụ nhỷng co tht dot ngụt gõy nguy hiởm cho tmh mang ngirụi bờnh Theophylin l mot thuoc duoc dựng lõu diờu tri hen phộ quõn Ngy nay, co rat nhiộu thuoc mai ddi v quan diởm diờu tri hen cụ nhiờu thay doi, xong theophylin võn dụng vai tro quan trong cõc phõc diờu tri hen tmh hiờu quõ v giõ thnh Tuy nhiờn, theophylin cụ khoõng diờu tri hep ( - |ig/ml), m cõc dang thuoc quy uục sỹ dung thợ nụng dụ duoc chat mõu dao dụng nhiờu, lm hiờu quõ diờu tri khụng on dinh v khụng an ton; dụ 7, theophylin tac dung kộo di duoc khuyờn dựng O nuục ta, nhỹng nghiờn curu vờ theophylin tõc dung kộo di võn chua dy dỷ v viờc sir dung han chộ Cho dộn chua cụ chộ phm no duoc cõc don vi sõn xuõ't nuục dng k sõn xuõt, luu hnh De gụp phn phõt triờn mot dang bo chộ mụi - theophylin tõc dung kộo di nuục ta, chỹng tụi thuc hiờn dờ ti Nghiờn cỹu sinh khõ dung v tuang õuang sinh hoc viờn nang theophylin tõc dung kộo di vụi mot sụ mue tiờu sau: Tiờ'p tue nghiờn cỷu dõnh giõ su tuang õuang sinh hoc cỹa viờn nang theophylin tõc dung kộo di dõ bo chờ vụi viờn Euphylline LA Tiờp tue dõnh giõ moi tuang quan giợta toc dụ giõi phụng in vitro v toc dụ hõp thu in vivo cỹa theophylin tự viờn nang theophylin tõc dung kộo di dõ bo chev viờn Euphylline LA PHAN : TONG QUAN 1.1 THIET Kấ NGHIấN CtJtJ DNH GI SINH KH DUNG V TITONG DlTONG SINH HOC 1.1.1 Khõi niờm - Sinh khõ dung l khõ nõng dc tnrng cho quõ trợnh sinh duoc hoc cỷa dang thuục, no phn õnh toc dụ v mỹc dụ hdp thu cỹa duỗfc chat cụn nguyờn hoat tmh tir dang bo chộ vo hờ tun hon [6, 9, 15] - Tuong duong sinh hoc: hai chộ pham duoc coi l tuong duong sinh hoc nờu giỷa chỹng khụng co su khõc cụ nghợa vờ toc dụ v mue dụ xuõt hiờn cỷa duoc chõ't, chat chuyởn hụa cụ hoat tmh hoc nhỷng chat thay thộ tai dich tõc dung duoc dựng vụi liờu nhu duoti nhỷng diờu kiờn nhu mot nghiờn cỹu duoc thiột kộ mot cõch thich hop [15] 1.1.2 Cõc yộu to õnh huong dộn thiột kộ nghiờn cỷu sinh khõ dung v tuong duong sinh hoc [29] a Su dao õụng cõc thụng sụ duac dựng hoc tựng cõ thờ v giỹa cõc cõ thờ Khụng cụ cõ thộ no hon ton giụng vờ dõp ỹ'ng thuục Trong cựng mot cõ thở thi cõc thụng sụ duoc dụng hoc cỹng khõc tiùng thụi diởm chiu õnh huụng cỹa nhiờu yộu tụ: enzym, pH nuục tiởu, Diờu ny õnh huong dộn thiột kộ nghiờn cuu SKD v TDSH; dc biờt dụi vụi thuục chuyởn hoõ nhiờu qua gan b Dụng hoc Michaelis-Menten Dụi vụi thuục tuõn theo dụng hoc thõi trir khụng tuyộn tmh thi sir dung dụng hoc Michaelis-Menten dở xõc dinh SKD cỷa thuục c Sinh khõ dung cỹa chat chuyộn hoõ Khi chat chuyởn hoõ l chõ't cụ hoat tmh thù phõi dõnh giõ SKD v TDSH thụng qua nghiờn ciru sinh khõ dung cỹa chat chuyởn hoõ d Cõc dang thuoc qui uục v dang giõi phong cụ kiờrn soõt Mụi dang thuoc khõc dụi hụi mot phuong phõp thiột kộ nghiờn ciru SKD v TDSH phự hop e Mụi quan hờ nong dụ thuoc mõu v dõp ỷng lõm sng Nộu chộ phm cụ toc dụ v mite dụ hõp thu vo vụng tuõn hon nhu thù chỹng cụ khõ nõng cao sờ tuang duang vờ hiờu quõ diờu tri Nhung nộu chộ phm cụ SKD khõc thù dụ an ton v hiờu quõ diờu tri cụ thở khõc ùt hoõc rõ't nhiờu Diờu ny phu thuục vo mụi quan hờ tu nhiờn giỹa nụng dụ thuục v dõp ỹng cỹa ca thở 1.1.3 Nhung chu thiột kộ nghiờn cthi sinh khõ dung v tuang duang sinh hoc [29] a Lua chon thiột k ộ dan lieu hay da lieu Dụi vụi dang thuục tõc dung kộo di, sỹ dung thiột kộ da liờu l thợch hap han - Thiột kộ da liờu nờn thuc hiờn trờn bờnh nhõn Nguac lai, thiột kộ dan liờu duac thuc hiờn trờn NTN khoố manh - Dở giõm dao dụng cựng cõ thở, khõo sõt ln dua thuục sau phõi dõm bõo khụng bi õnh huang cỹa ln truục Diờu ny phõi dõc biờt chu thiột kộ da liờu vù cn giai doan thõi trự di han - Dở giõm dao dụng giỹa cõc cõ thở, cn chon nguụi cụ thụng sụ dụng hoc gn nhu nhau, sỹ dung thiột kộ cn sụ luong cõ thở toi thiởu -Phõi phõt hiờn su bõo ho duoc dụng hoc nghiờn ciru trang thõi on dinh thiột kộ da liờu b Thuc hiờn nghiờn cỷu trờn nguựi tợnh nguyờn khoờ manh hay bờnh nhõn Vi bờnh nhõn l doi tuong diờu tri nờn nghiờn cỷu trờn bờnh nhõn sở phõn õnh dung hiờu quõ dieu tri han Tuy nhiờn, sai so 1cm nờn bờnh nhõn chợ duoc nghiờn cỹu thiột kộ da liờu NTN khoố manh l nhụm nguựi cụ tinh trang sỹ'c khoờ on dinh, dụ trõnh duoc õnh huong cỹa van dờ thuục dựng kốm v tinh trang bờnh c Dinh luong chat me hay chat chuyởn hoõ Khi dõnh giõ TDSH, cõn nghiờn cỹu su chuyởn hoõ cỹa thuục co thở v cõn quan tõm dinh luong cõ chõt me v chat chuyởn hoõ cụ hoat tmh dở thu duoc kột quõ chmh xõc d Lua chon sỹ dung phuong phõp thụng kờ de dõnh giõ tuong duong sinh Do cụ su dao dụng tựng cõ thở v giỷa cõc cõ thở quõ trinh nghiờn cỹu nờn kột quõ thuc nghiờm phõi duoc phõn tich bng cõc test thụng kờ thich hop 1.2 QUI DINH CĩA FDA VE DNH GI SINH KH DUNG V Tl/ONG DlTONG SINH HOC Co quan quõn l thuục v thuc pham M dõ dua nhỷng qui dinh vờ tiộn hnh thuc nghiờm nghiờn cỷu tuong duong sinh hoc in vivo, tiờu chuõn cụng nhõn cõc kột quõ nghiờn cỷu, cõc nguyờn tõc xõc dinh tuong duong sinh hoc Sau dõy l mot sụ nụi dung chmh: 1.2.1 Thiột kờ nghiờn cỷu [10,17] a Nghiờn cỷu don lieu 1) Thuc hiờn trờn nguụi tinh nguyờn khụe manh 2) Chộ phõm thỹ v chộ phõm so sõnh duac dira vo ca thộ NTN lue dụi 3) Thiột kộ thi nghiờm duac su dung l thiột kộ chộo co uu, nhuac diộm sau: *t* ĩu diộm [10] + Chmh xõc han (sai so timg cõ thộ nhụ han sai so giỷa cõc cõ thộ) + L mot dang cỹa ụ vuụng la tinh Nụi chung dờ diởn dat bng hùnh õnh han + Kinh tộ han Nhuỗfc diộm [10] + Ton nhiờu thi gian han + Nộu sot mot vi so lieu thợ sai so lõn han + Khụng dõnh giõ duac õnh huụng cỹa su tuang tõc giỹa cõc nguụn biộn thiờn dộn dai luang nghiờn cỹu 4) De han chộ sai so, chia nhụm phõi dõm bõo tmh ngõu nhiờn 5) Thi gian lõy mõu phõi bao gụm giai doan thõi trir: Thụi gian lõy mõu phõi 1cm han lõn thi gian ban thõi 6) Thi diởm lõy mõu phõi dõm bõo: a) Xõc dinh dõy dỷ cõc giai doan tõng,giõm cỹa dungcong nụng dụ- thi gian (ợt nhõt phõi co diởm pha hõp thu, diởm khoõng nụng dụ Cmax, diởm doan cuụi pha thõi trự) b) Xõc dinh duac chmh xõc Cmax c) Xõc dinh duoc chmh xõc AUC 7) Thi gian giỷa hai lõn dua thuục vo ca thở phõi lụn han lõn thi gian bõn thõi b Nghiờn cỷu õa liờu - Duoc sir dung : 1) Hai chộ phõm cụ su khõc vờ toc dụ hõp thu, nhung giụng vờ mue dụ hõp thu 2) Cụ su dao dụng lụn vờ SKD giỹa cõc cõ thở 3) Nụng dụ thuục mõu nghiờn cỹu don liởu quõ thõp 4) Khi chờ phõm nghiờn cỷu l dang bo chờ' giõi phụng cụ kiởm soõt 5) Khi thuục tuõn theo dụng hoc khụng tuyờn tmh - FDA cỹng cụ nhỹng qui dinh riờng cho thiột kộ nghiờn cỷu da liờu 1.2.2 Nguụi tợnh nguyờn Nguụi tùnh nguyờn nghiờn cỷu TDSH l nguụi truụng thnh, khụe manh Trong tỷng trucmg hop eu thở cụ thở cụ qui dinh riờng Mue dich chmh lua chon nguụi tinh nguyờn l giõm toi da su khõc vờ duoc dụng hoc giỹa cõc cõ thở [17, 29] 1.2.3 Thụi diởm lõy mõu Trong thiột kộ chộo, thụng thuụng lõy 10 - 15 mõu, thụi diởm lõy mõu phõi lua chon phự hop cho thở hiờn duoc dõy dỷ quõ trinh hõp thu, phõn bụ, thõi trir [10, 17] 1.2.4 Chờ' phõm so sõnh Truục hột chon chộ phõm so sõnh l thuục phõt minh (thuục gục) nộu cụ thở Tu tựng diờu kiờn cụ thở chon chộ phõm so sõnh l chộ phõm dõ duoc cụng nhõn vờ an ton v hiờu quõ diờu tri, cụ uy tin tự lõu trờn thi truụng v dõ cụ dõy dỷ thụng tin lõm sng [10, 17] 1.2.5 Thõm dinh phircmg phõp phõn tợch hm liùong diroc chat dich sinh hoc [17] Mot qui trinh phõn tợch bi õnh huụng bai rat nhiờu yộu tụ De dam bõo dụ tin cõy cho kột quõ phõn tợch thi phõi thõm dinh phuong phõp phõn tợch a Dụ on dinh Chat phõn tfch phõi duoc nghiờn cuti xem cụ bi biộn doi khụng thụi gian bõo quõn mõu (thuụng -20C), qua quõ trinh kich thợch lm tan bõng v thi gian lm thi nghiờm t phụng Nghiờn cuti dụ on dinh bng cõch so sõnh nụng dụ cỹa mõu truục v sau quõ trợnh bõo quõn b Duựng chuan > Duụng chuan biởu diờn moi quan hờ giỷa diờn tợch pic v nụng dụ thuục dich sinh hoc Pha cõc mõu dich sinh hoc khoõng khõo sõt, bao gụm - mõu pha cõc nụng dụ khoõng khõo sõt dụ cụ giụi han dinh luong thõp nhõt * Giụi han dinh luỗfng thõp nhõt : L nụng dụ thõp nhõt thoõ mõn : + Dõp ỹng pic tai giụi han dinh luong thõp nhõt > lõn so sõnh vụi dõp ỹng pic tuong ỹng mõu trõng (nộu cụ) + Pic cỹa chat phõn tợch tai giụi han dinh luong thõp nhõt phõi xõc dinh, phõn biờt, tõi hiờn vụi dụ chmh xõc 20% v dụ dỹng 80 - 120% > Duụng chuan chỹ'ng tụ duoc quan hờ tuyộn tmh ợt nhõt 2/3 sụ diởm (khụng kở diởm 0) phõi thoõ mõn: + Tai giụi han dinh luong thõp nhõt, dụ lờch < 20% + Tai cõc nụng dụ khõc giụi han dinh luỗfng thõp nhõt, dụ lờch < 15% c Tinh chon loc cỹa phuang phõp L khõ nõng phõn biờt v dinh luong chõt cõn phõn tợch cụ mõt cõc chõt khõc mõu Il- Nhõn xột: Bng trờn cho thõ'y sai khõc giCra nong dụ thuc v nong dụ dinh luong duoc 0,1 |j.g/ml nhụ hon 20%, cõc nong dụ khõc dờu nhụ hon 15% (tho mõn quy dinh cỹa FDA) [17] Nhu võy, phuong phõp dinh luong sỹ dung dõm bo tmh dung dinh luong theophylin nuục bot Mõt khõc, tai nong dụ 0,1 |ug/ml: - Co dõp ỹng pic cỹa theophylin, mõu trõng khụng co pic - Pic theophylin xõc dinh, phõn biờt, tõi hiờn, cụ hờ sụ bien thiờn (CV) nghiờn CĩU dụ chrnh xõc v dụ dung dốu nhụ hon 20% => Chon giõ tri giụi han dinh luong thõp nhõ't l 0,1 (ig/ml (thoõ mõn quy dinh cỹa FDA) [17], 2.2.2 Dinh luong nong dụ theophylin nuục bot nguụi tinh nguyờn nghiờn ciru liờu don nguụi tinh nguyờn duoc bụ tri thi nghiờm vụi qui trinh lõy mõu, xỹ l v dinh luong nhu dõ mụ tõ phõn trờn Mõu dinh luong hng ngy luụn duoc song song so sõnh vụi mõu chuõn Mõu chuõn cụ hm luong 10 |ug/ml pha nuục cõt duoc xỹ l v dinh luong theo cựng mot qui trinh Kởt quõ dinh luong nong dụ theophylin nuục bot nguụi tinh nguyờn duoc trinh by cõc bng 5, 6, 28 Bng Nụng dụ theophylin nuục bot ngirụi tinh nguyờn uụng mõu R Thụi diởm Nụng dụ theophylin nuục bot (ng/ml) Trung bợnh SD 0,00 0,00 0,00 0,06 0,26 0,26 0,16 0,68 0,12 0,53 0,66 0,51 0,41 1,05 0,70 0,98 1,16 0,63 2,98 1,22 3,20 1,50 1,97 2,13 0,79 3,54 3,11 1,76 3,49 3,26 2,68 2,97 0,67 2,00 3,57 4,21 2,79 4,12 4,20 3,02 3,65 0,63 3,00 4,18 4,50 3,54 5,36 4,93 3,56 4,34 0,73 4,00 3,11 5,03 2,61 4,91 5,20 4,32 4,20 1,09 6,00 2,68 4,27 2,09 3,25 3,20 3,68 3,19 0,76 8,00 2,02 3,17 1,59 2,92 2,13 2,98 2,47 0,64 12,00 1,66 2,18 0,77 2,03 1,50 2,65 1,80 0,65 16,00 1,25 1,62 0,72 1,72 1,37 1,73 1,40 0,39 24,00 0,62 0,57 0,91 0,80 0,86 0,65 0,30 28,00 0,58 0,29 0,42 0,42 0,53 0,45 0,11 32,00 0,46 0,13 0,31 0,24 0,28 0,14 (h) 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,25 0,42 0,32 0,06 0,43 0,50 1,14 1,35 0,14 0,75 1,81 2,03 1,00 1,91 1,50 0,11 - - - 29 Bng Nong dụ theophylin nuục bot nguụi tinh nguyờn uụng mõu T Thụi diộm Nong dụ theophylin nuục bot (ng/ml) Trung bợnh SD 0,00 0,00 0,00 0,10 0,52 0,15 0,18 0,58 0,61 0,93 0,66 0,33 0,63 1,72 0,85 1,12 1,22 0,40 2,59 1,24 2,90 1,72 1,82 2,04 0,56 3,37 3,05 1,68 3,17 3,79 2,36 2,90 0,69 2,00 3,64 3,56 2,50 3,40 4,21 2,98 3,38 0,54 3,00 3,99 4,23 3,65 3,58 5,03 3,53 4,00 0,52 4,00 4,40 5,16 3,33 5,47 4,60 4,43 4,56 0,68 6,00 3,03 4,05 2,33 3,75 2,86 3,92 3,32 0,63 8,00 2,39 3,18 2,10 2,31 2,14 3,06 2,53 0,43 12,00 1,88 2,36 1,01 2,25 1,70 2,87 2,01 0,58 16,00 1,35 1,53 0,78 2,02 1,62 1,96 1,54 0,41 24,00 0,86 0,62 0,30 0,93 0,86 1,07 0,77 0,25 28,00 0,54 0,31 0,63 0,30 0,68 0,49 0,16 32,00 0,40 0,19 0,24 0,34 0,29 0,08 (h) 0,00 0,00 0,00 0,25 0,12 0,50 0,00 0,00 0,00 0,16 0,00 0,00 0,29 1,23 0,34 0,75 1,33 1,67 1,00 1,96 1,50 - - - Cụ thộ nhõn xột sa bụ rang: Cõc kởt quõ trờn cho thõy cụ su dao dụng vờ hõp thu giợra cõc cõ thở dụi vụi cõ mõu T v R Nong dụ theophylin nuục bot dinh luong duoc mõu T v mõu R gõn nhu nhau, mõu T hoi cao hon mõu R v thụi gian xuõ't hiờn nong dụ eue dai cỹng gõn nhu 30 Bng Nụng dụ theophylin nuục bot nguụi tinh nguyờn uụng mõu O Thụi diởm Nụng dụ theophylin nuục bot (pg/ml) Trung bợnh SD (h) 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,25 8,36 7,41 4,61 2,25 2,30 6,74 5,28 2,64 0,50 5,23 5,31 4,03 5,39 5,02 5,36 5,05 0,52 0,75 4,01 4,23 3,65 1,60 3,12 4,32 3,49 1,02 1,00 3,52 3,50 3,04 1,35 2,86 3,21 2,91 0,81 1,50 2,56 2,66 2,16 1,29 2,52 2,15 2,22 0,50 2,00 1,92 1,86 1,26 1,12 1,98 1,76 1,65 0,37 3,00 0,83 1,03 0,76 1,10 1,32 1,43 1,08 0,26 4,00 0,56 0,53 0,73 0,92 1,03 1,04 0,80 0,23 6,00 0,43 0,31 0,66 0,73 0,82 0,64 0,60 0,19 8,00 0,25 0,21 0,43 0,38 0,65 0,36 0,38 0,16 12,00 0,18 0,13 0,20 0,16 0,32 0,24 0,21 0,07 16,00 0,09 0,10 0,10 0,19 0,13 0,12 0,04 - Theophylin duoc hõp thu tự dung dich ( mõu O ) nhanh hỹn mõu T v R rat nhiờu, cụ thộ nụi tự nhỹng thụi diộm ban dau Nụng dụ theophylin nuục bot dinh luong duoc cho thõy mỷc dụ hõp thu giỷa cõc cõ thộ khõc khõ nhiờu => Diờu ny cng chỷng tụ theophylin l mot chõt cụ dõc tmh duoc dụng hoc rat phỷc tap v phu thuục nhiờu vo cõ thộ 31 t (h) Hợnh Dụ thi nụng dụ theophylin nufục bot cỹa nguụi tợnh nguyờn 2.2.3 Cõc thụng sụ duoc dụng hoc cỹa mõu R, T, O Tmh toõn cõc thụng sụ duoc dụng hoc cỷa mõu R, T v O dira vo su bien thiờn nụng dụ theophylin nuục bot cỷa mụi nguụi tinh nguyờn, vụi su tro giỹp cỹa phõn mốm WinNonlin Kột quõ duoc trinh by bõng 8: 32 Bõng Mot sụ thụng sụ duoc dụng hoc cỹa cõc mõu R, T, O trờn nguụi tinh nguyờn Thụng sụ Mõu Nguụi tinh nguyờn Trung binh SD R 3,00 4,00 3,00 3,00 4,00 4,00 3,50 0,55 T 4,00 4,00 3,00 4,00 3,00 4,00 3,67 0,52 O 0,25 0,25 0,25 0,50 0,50 0,25 0,96 1,50 R 4,18 5,03 3,54 5,36 5,20 4,32 4,60 0,70 T 4,40 5,16 3,65 5,47 5,03 4,43 4,69 0,66 O 8,36 7,41 4,61 5,39 5,02 6,74 5,87 1,63 R 0,06 0,16 0,16 0,09 0,10 0,12 0,12 0,04 T 0,08 0,13 0,12 0,10 0,13 0,11 0,11 0,02 O 0,15 0,11 0,19 0,23 0,15 0,15 0,15 0,05 R 11,19 4,46 4,22 7,32 7,24 5,82 6,71 2,56 T 8,89 5,25 5,95 7,13 5,44 6,54 6,53 1,35 O 4,78 6,24 3,68 3,07 4,61 4,65 4,82 1,37 R 54,39 61,05 28,60 64,57 55,64 62,25 54,42 13,24 T 58,39 60,94 35,44 66,43 55,30 68,69 57,53 11,91 O 13,25 12,90 12,24 10,43 15,76 15,12 22,21 22,84 R 842,67 600,42 235,15 786,60 669,29 749,02 647,19 219,30 T 805,82 631,89 349,10 871,19 619,45 897,59 695,84 206,74 O 51,08 53,29 55,01 46,73 92,18 69,35 199,31 342,48 R 15,49 9,84 8,22 12,18 12,03 12,03 11,63 2,46 T 13,80 10,37 9,85 13,12 11,20 13,07 11,90 1,64 O Trong dụ: 3,86 4,13 4,50 4,48 5,85 4,59 5,98 3,54 Tinax(h) c^ m a x W m l) M h'1) T1/2(h) AUC g.ml *.h) AUMC (l^g.ml *.h2) MRT(h) R: mõu R( viờn nang Euphylline L.A 200 mg) T: mõu T ( viờn nang theophylin tõc dung kộo di 200 mg dõ bo chộ ) O: mõu O (dung dich theophylin nuục chỷa 100 mg theophylin pha 100 ml nuục cõt) 33 * Nhõn xột sa bụ : Kột quõ trờn cho thõy mõu T v mõu R cụ thụi gian dat nụng dụ eue dai Tmax, vụi giõ tri nụng dụ eue dai v thụi gian luu tru trung binh gõn nhu nhau; mõu T chợ hỹi cao hon mõu R Nhu võy, cụ thộ nhõn xột so bụ mõu T v mõu R cụ toc dụ hõp thu gõn nhu 2.2.4 Dõnh giõ mỷc dụ tiùong dirong sinh hoc giỷa viờn theophylin tõc dung kộo di v Euphylline L.A Dộ xõc dinh mire dụ tuong duong sinh hoc cỹa mõu thỹ T so vụi mõu chuõn R chỹng tụi tiờ'n hnh so sõnh cõc thụng sụ duoc dụng hoc (dõ chuyộn dang logarit) sau: - Diờn tich duụi duụng cong AUC - Nụng dụ eue dai Cmax - Thụi gian luu trỹ trung binh MRT Trong dụ khoõng tin cõy cỹa sai khõc giỷa hai giõ tri trung binh (CI) dõ chuyộn dang logarit duoc tmh toõn dira vo sai sụ binh phuong trung binh phộp phõn tich phuong sai cỹa thiột kộ chộo dụi cõn bng, vụi dụ tin cõy 90%, sụ nguụi tham gia thi nghiờm n=6; giõ tri t(0,01;4)=2,132 a Ket quõ phõn tich phuong sai v khoõng tin cõy cỹa ty le AUC cho mõu T v R Bng Phõn tich phuong sai vụi bien phu thuục l ln AUC Nguụn bien thiờn Tong cụng Nhụm NTN Mõu Giai doan Sai so Bõc tu 11 1 Tong bợnh phuong 0,7708 0,2003 0,5398 0,0136 0,0022 0,0150 34 Trung bợnh bợnh phuong 0,2003 0,1349 0,0136 0,0022 0,0037 F P 1,4841 0,2901 36,0636 0,0021 3,6432 0,1289 0,5918 0,4846 Nhõn xột: - PNh6m> 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỹa cõc nhụm NTN (hay trinh tu thỹ thuoc) dởn InAUC khụng cụ nghla thụng kờ - P ntn < 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỹa nhỹ'ng NTN dởn InAUC cụ nghla thụng kờ - PMõu > 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỹa mõu T v mõu R dởn InAUC khụng cụ nghợa thụng kờ - PGiai doan > 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỹa cõc giai doan thỹ thuục dởn InAUC khụng cụ nghợa thụng kờ * Ta cụ thở tmh khoõng tin cõy cỷa t le AUC cỹa mõu T v mõu R : (lnAUCR)trungb'inh= 3,963 (lnAUCp )trungbinh= 4,031 Hiờu: (lnAUCR)trung^-(lnA U C r )trungbtah=-0,068 S2= 0,015; f=4; N=6 Khoõng tin cõy 90% cỹa hiờu trờn: CI (lnAUCR- lnAUCR) =-0,068 t(0,10;4).(S2,2/N)1/2 = -0,068 2,132.(0,015,2/6)1/2 = (-0,143; 0,008) ln0,80 =-0,2231; lnl,25 =0,2231 AUC ALJC j Nhu võy, khoõng tin cõy 90% cỷa hiờu lnAUCR- InAUCp (=ln ) nm khoõng (ln 0,80;ln 1,25) => Mỹc dụ hõp thu cỹa chở phõm T l tuong duong vụi chở phõm R 35 b Kột quõ phõn tợch phuong sai v khoõng tin cõy cỹa ty lờ Cmax cho mõu T v R Dira trờn cõc so lieu Cmax chuyởn sang dang lnCmax, thuc hiờn phõn tich phuong sai doi vụi bien phu thuục l lnCmax v tmh toõn tuong tu trờn, thu duoc kột quõ sau dõy: Bõng 10 Phõn tợch phuong sai voi bien phu thuục l lnCmax Nguụn bien thiờn Tong cong Nhụm NTN Mõu Giai doan Sai sụ Bõc tu 11 1 Tong binh phuong 0,2355 0,0622 0,1704 0,0011 0,0006 0,0012 Trung binh binh phuong F P 0,0622 0,0426 0,0011 0,0006 0,0003 1,4604 142,6639 3,7961 2,1706 0,2934 0,0001 0,1232 0,2147 Nhõn xột: - PNh6m> 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa sU khõc giỷa cõc nhụm NTN (hay trinh tu thỹ thuục) dộn lnCmax khụng cụ nghùa thụng kờ - P ntn < 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỷa nhỷng NTN dộn lnCmax cụ nghùa thụng kờ - PMõu > 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỷa mõu T v mõu R dộn lnCmax khụng cụ nghùa thụng kờ - PGiai doan> 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỷa cõc giai doan thỹ thuục dộn lnCmax khụng cụ nghùa thụng kờ * Khoõng tin cõy 90% cỹa hiờu CI(lnCmaxR-lnCmaxT) = (-0,04070; 0,00183) ln0,80 =-0,2231; lnl,25 =0,2231 36 c Nhir võy khoõng tin cõy 90% cỹa hiờu lnCmaxR-lnCmaxT (= ln max* ) nõm ^maxT khoõng (ln 0,80; ln 1,25) =>Nụng dụ eue dai dat duoc dựng chộ phõm T l tuong duong dựng chộ phõm R c Kột quõ phõn tich phuong sai v khoõng tin cõy cỹa ty le MRT cho mõu T vR Chuyộn cõc sụ lieu MRT sang lnMRT, thuc hiờn phõn tich phuong sai v tmh toõn kột quõ ta duoc bng sau: Bng 11 Phõn tich phuong sai voi bien phu thuục l lnMRT Nguụn bien thiờn Bõc tu Tong bợnh Trung bợnh phuong binh phuong F P 11 0,3344 Nhụm 0,0353 0,0353 0,5301 0,5069 NTN 0,2661 0,0665 9,0126 0,0279 Mõu 0,0034 0,0034 0,4642 0,5331 Giai doan 0,0001 0,0001 0,0121 0,9176 Sai sụ 0,0295 0,0074 Tong cụng Nhõn xột: - PNhụm> 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỷa cõc nhụm NTN (hay trinh tu thỹ thuục) dộn lnMRT khụng cụ y nghùa thụng kờ - P ntn < 0,05 chỹng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỷa nhỹng NTN dộn lnMRT cụ y nghùa thụng kờ - PMõu > 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỷa mõu T v mõu R dộn lnMRT khụng cụ nghùa thụng kờ - PGiai doan > 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỷa cõc giai doan thỹ thuục dộn lnMRT khụng cụ nghùa thụng kờ * Khoõng tin cõy 90% cỹa hiờu CI(lnMRTR-lnMRTT) =(-0,13954; 0,07195) 37 In0,80 =-0,2231; lnl,25 =0,2231 Nhu võy, khoõng tin cõy 90% cỹa hiờu lnMRTR-lnMRTT (= ln MRTt ) nm khoõng (ln 0,80; ln 1,25) =>Thoi gian luu trỷ trung binh cỹa phõn tỹ duoc chõt dựng chở phm T l tuong duong dựng mõu R > Nhõn xột chung vờ dõnh giõ mỷc dụ tuang õuang sinh hoc giỹa viờn theophylin bo chờ duoc v Euphylline L.A - PNh6m > 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỷa su khõc giỹa cõc nhụm NTN (hay trinh tu thỹ thuục) dởn InAUC, lnCmax, lnMRT khụng cụ nghợa thụng kờ Diờu ny xõc nhõn trinh tu thỹ thuục khụng õnh huụng dởn kởt quõ thi nghiờm, dụng thụi cỹng cho thõy su lua chon NTN phõn nhụm dõm bõo tmh ngõu nhiờn v quy trinh lõy mõu v dinh luong l nhu - PNTN < 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỹa cõc NTN dởn InAUC, lnCmax, lnMRT, cụ nghợa thụng kờ Diờu ny cho thõy su dao dụng cõc thụng sụ duoc dụng hoc giỹa cõc cõ thở l rat lụn Cụ thở khõng dinh theophylin l mot duoc chõt cụ dõc tmh duoc dụng hoc rõt phỷc tap v phu thuục nhiờu vo cõ thở - PGiai doan> 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỹa cõc giai doan thỹ thuục dởn InAUC, lnCmax, lnMRT khụng cụ nghợa thụng kờ Diờu ny cho thõy kởt quõ nghiờn cỷu giai doan thỹ thuục lõn sau khụng bi õnh huụng cỹa giai doan thỹ thuục ln truục, cụ thở cõc phõn tỹ thuục lõn truục dõ duoc thõi trự hởt - PMõu > 0,05 chỷng tụ su õnh huụng cỹa su khõc giỹa cõc mõu T v mõu R dởn InAUC, lnCmax, lnMRT khụng cụ nghợa thụng kờ Diờu ny cho thõy mõu R v mõu T tuong duong vờ bo chở 38 Theo tiờu chuan dõnh giõ tuong duong sinh hoc cỹa co quan quõn l thuục v thuc phõm M (FDA), nộu khoõng tin cõy 90% cỹa cõc t so AUC, Cmax, MRT nm khoõng (0,80; 1,25) thi hai chộ phõm dụ tuong duong sinh hoc Vụi kột quõ tmh duoc trờn thi cụ thở so bụ kột luõn hai chộ phõm l mõu T v mõu R cụ tuong duong sinh hoc 2.2.5 Tinh toõn toc dụ hõp thu theo phuong phõp giõi tich chõp duoc toi iru hoõ thụng qua tõi tich chõp (WLS Reconvolution) Sỹ dung phn mờm KinBes dở tmh toõn toc dụ hõp thu cỹa mõu T v R theo phuong phõp WLS Reconvolution cụ dung dich O lm dụi chiộu Kột quõ thu duoc bõng 13: Bõng 13 T lờ hõp thu theophylin theo thụi gian cỹa mõu T v R (So vụi tong luong theophylin duoc hõp thu uụng dung dich chtra 200 mg theophylin) Thụi diởm (h) 0,25 0,50 R Trung binh 0,0290 0,0670 T SD 0,0288 0,0321 Trung binh 0,0305 0,0854 SD 0,0296 0,0542 0,1600 0,1048 0,1582 0,75 1,00 0,1641 0,3005 0,1080 0,2106 1,50 2,00 0,4197 0,6183 0,1819 0,3027 0,4177 0,5663 0,2432 3,00 4,00 6,00 8,00 12,00 16,00 0,9121 1,1025 1,2701 1,3830 1,5909 1,7616 0,4270 0,4484 0,3655 0,3761 0,4729 0,5364 0,8241 1,1014 1,2780 1,3916 1,6515 1,8404 0,2753 0,3869 0,3065 0,2642 0,3952 0,4752 24,00 1,8965 0,6109 2,0047 0,5343 28,00 1,9179 0,6062 2,0384 Q,5566 32,00 1,9324 0,6023 2,0573 0,5754 39 0,2805 0,2016 t(h) Hùnh T lờ theophylin hõp thu so voi mõu O theo thụi gian tir mõu R v mõu T *Nhõn xột: Tir cõc kột quõ trờn cho thõy: mõu T cụ toc dụ v mire dụ hõp thu gõn giụng mõu R Cõc thụng sụ duoc dụng hoc trờn cỹng cho kột quõ phự hop vụi kột quõ tmh toõn dõy Nhu võy, cụ thộ so bụ kột luõn viờn theophylin tõc dung kộo di bo chộ duoc cụ toc dụ v mỷc dụ hõp thu tuong duong mõu R 2.2.6 Nghiờn cuti tuong quan in vitro-in vivo cỹa viờn theophylin tõc dung kộo di Tuong quan in vitro-in vivo duoc thiột lõp dua trờn mụi tuong quan giỷa mỷc dụ giõi phụng theophylin thu duoc tự trac nghiờm ho tan in vitro v mỷc dụ hõp thu in vivo tmh theo phuong phõp WLS Reconvolution Mỷc dụ giõi phụng thộ hiờn qua phõn trõm theophylin dỹoe giõi phụng theo thụi gian ễ dõy, xột khoõng thụi gian tự dộn giụ, l khoõng thụi gian ho tan chỷ 40 yeu v hõp thu chỹ yởu tự bõt du thuc hiờn thi nghiờm Kởt quõ nghiờn cựu duoc trinh by bng 14 v hinh 5,6 Bng 14 T lờ hõp thu in vivo v phõn trõm giõi phong in vitro cỹa theophylin tự mõu R v T T lờ hõp thu Thcri diởm (h) Phõn trõm giõi phong % giõi phong SD T lờ hõp thu SD R T R T R T R T 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,25 0,0290 0,0305 0,0288 0,0296 1,44 1,91 0,69 1,91 0,50 0,0670 0,0854 0,0321 0,0542 4,42 5,97 0,72 1,81 1,00 0,3005 0,2805 0,2106 0,1582 11,69 15,99 2,12 3,24 2,00 0,6183 0,5663 0,3027 0,2432 25,41 29,87 2,19 4,08 3,00 0,9121 0,8241 0,4270 0,2753 38,50 41,22 2,18 4,89 4,00 1,1025 1,1014 0,4484 0,3869 50,41 50,10 3,18 5,59 6,00 1,2701 1,2780 0,3655 0,3065 66,59 64,97 2,28 5,81 8,00 1,3830 1,3916 0,3761 0,2642 77,51 75,59 2,09 5,07 41 80.00 100.00 % giai phụng Hợnh Tuong quan giợùa luong theophylin giai phụng in vitro v lircmg theophylin hap thu in vivo tỷ mõu R % giai phụng Hùnh Tuong quan giỷa luong theophylin giai phụng in vitro v luong theophylin hõp thu in vivo tỷ mõu T 42 [...]... viờn nang theophylin tõc dung kộo di bo chờ' duoc giõi phong duoc chõt khoõng 12 giụ, toc dụ giõi phong theophylin tuong dụi hang dinh theo thụi gian Khõo sõt duoc lm vụi chờ' phõm dụi chiởu l viờn nang Euphylline L.A cụ cựng hm luong, hai phờ' phm ny cụ dụ thi giõi phong theophylin tuong tu nhau, so bụ kờ't luõn l cụ tuong duong vờ sinh khõ dung in vitro Nghiờn cựu sinh khõ dung v tuong duong sinh. .. Eudragit L v S, acid stearic, triacetin 16 Theo-KD: dang viờn nộn theophylin TDKD, l sõn phõm cựa mot so nh nghiờn cựu trong nuục, dang diroc thỹ nghiờm lõm sng mot so bờnh viờn, v dõ diroc dõnh giõ sinh khõ dung v cụ tirong du'o'ng sinh hoc vụi chở phõm Theostat Viờn nang theophylin tõc dung kộo di: dang viờn nang duoc bo chờ tự pellet theophylin tõc dung kộo di, do Bụ mon Bo chở truụng Dai hoc Duoc... bng diờn tich pic Tự t le diờn tich pic cỹa theophylin v theobromin, tmh duoc nong dụ theophylin trong nuục bot Tự dụ tinh duoc mot sụ thụng sụ duoc dụng hoc co bõn cỷa tựng mõu trờn tựng cõ e Phuong phõp xõc dinh cõc thụng sụ duoc dụng hoc Cõc thụng sụ duoc dụng hoc cõn xõc dinh l: Tmax: Thụi gian dat nong dụ theophylin eue dai trong nuục bot Cmax : Nong dụ theophylin eue dai trong nuục bot Tmaxv Cmax... bõo quõn mõu sinh hoc c Nguựi tinh nguyờn 6 nguụi tinh nguyờn, 3 nam, 3 nỹ, khoố manh, khụng hỹt thuục lõ, khụng cụ tiờn sir di ỹng thuục, tuoi tự 18-24, cõn nõng 45-56 kg 18 2.1.2 Phuong phõp thuc nghiờm a P huan g phõp bụ tri thi nghiờm theo mot thiột k ộ chộo dụi dộ dõnh giõ sinh khõ dung v tuong duong sinh hoc Dộ lm co sụ cho viờc dõnh giõ sinh khõ dung v tuong duang sinh hoc cỷa viờn theophylin. .. duong sinh hoc cho viờn nang theophylin tõc dung kộo di dang diroc sỹ dung thuc hiờn Khoõ luõn ny dụng gụp mot phõn nhụ trong buục du nghiờn cựu sinh khõ dung cỷa viờn theophylin tõc dung kộo di, cụ sỹ dung viờn Euphylline L.A lm chờ' phõm dụi chiờ'u PHAN 2 : THtfC NGHIấM V KET QUA 2.1 NGUYấN VT LIEU V PHUONG PHP THUC NGHIấM 2.2.1 Nguyờn võt lieu a Hụa chat - nguyờn võt lieu Theophylin monohydrat (Trung... Han dựng: 9/2004 6 ngu'ụi tinh nguyờn chia lm hai nhụm vụi 3 giai doan thu nhu sau: Giai doan 1 2 3 1 R T O 2 T R O Nhom R: viờn nang Euphylline L.A 200 mg T: viờn nang theophylin tõc dung kộo di 200 mg bo chờ' duoc O: dung dich uụng theophylin trong nuục chỷa 100 mg theophylin pha trong 100 ml Yờu eau doi vụi nguụi tinh nguyờn: truục thụi gian thỹ nghiờm mot tuõn khụng duoc uụng bõt k mot loai... thnh sõn pham cỹa thuục 1.5 THEOPHYLIN V CHẫ PHAM THEOPHYLIN TC DUNG KẫO DI 1.5.1 Theophylin Theophylin l mot dõn xuõt xanthin duoc tim thõy tự nõm 1883 v dõ duoc sỹ dung chỹ yộu trong diờu tri hen phộ quõn tự 50 nõm nay a Tinh chõt ly-hoõ hoc[l,12] Cụng thỷc cõu tao: O h 3c - n H I N ) -h 2o I ch3 Khoi luỗfng phõn tự- dang khan 180,2 ; dang monohydrat 198,2 Nguon goc: Theophylin duoc chiột xuõt... pham dụi chiộu (mõu R) cỹng duoc tmh toõn Nộu khoõng tin cõy 90% CI ny nõm trong khoõng (0,8; 1,25) thi thụng sụ duoc dụng hoc dang so sõnh cỹa chộ phõm thỹ l tuong duong vụi chộ phõm dụi chiộu hay l cụ tuong duong sinh hoc giỷa hai chộ phõm: viờn nang theophylin tõc dung kộo di v viờn nang Euphylline L.A g Phuong phõp nghiờn cỷu tuong quan in vitro-in vivo Dở dõnh giõ xem cụ su tuong quan in vitro-in... 0,13 0,12 0,04 - Theophylin duoc hõp thu tự dung dich ( mõu O ) nhanh hỹn mõu T v R rat nhiờu, cụ thộ nụi ngay tự nhỹng thụi diộm ban dau Nụng dụ theophylin trong nuục bot dinh luong duoc cho thõy mỷc dụ hõp thu giỷa cõc cõ thộ khõc nhau khõ nhiờu => Diờu ny cng chỷng tụ theophylin l mot chõt cụ dõc tmh duoc dụng hoc rat phỷc tap v phu thuục nhiờu vo cõ thộ 31 t (h) Hợnh 3 Dụ thi nụng dụ theophylin trong... 1,3-dimethyl xanthin Hoc 1,3-dimethyl purin-2,6[3H,lH]dion Tinh chõt: Theophylin l bot kột tinh trõng, khụng mựi, khụ tan trong nuục (1/125), ethanol (1/80), trong cõc dung mụi hỹu co, dở tan trong dung dich acid vụ co, hydroxyd kim loai kiờm, amoniac b Phuong phõp dinh luong theophylin trong dich sinh hoc [12, 26,18] Mot sụ phuong phõp dinh luong theophylin duoc sir dung: - Phuong phõp quang phộ tỹ ngoai - ... dung v tuong duong sinh hoc cho viờn nang theophylin tõc dung kộo di dang diroc sỹ dung thuc hiờn Khoõ luõn ny dụng gụp mot phõn nhụ buục du nghiờn cựu sinh khõ dung cỷa viờn theophylin tõc dung... theophylin tự viờn nang theophylin tõc dung kộo di dõ bo chev viờn Euphylline LA PHAN : TONG QUAN 1.1 THIET Kấ NGHIấN CtJtJ DNH GI SINH KH DUNG V TITONG DlTONG SINH HOC 1.1.1 Khõi niờm - Sinh khõ dung... phn phõt triờn mot dang bo chộ mụi - theophylin tõc dung kộo di nuục ta, chỹng tụi thuc hiờn dờ ti Nghiờn cỹu sinh khõ dung v tuang õuang sinh hoc viờn nang theophylin tõc dung kộo di vụi mot