Công nghệ cấy truyền phôi ở ngựa

Mong muốn cấy truyền phôi là kỹ thuật khai thác được tiềm năng di truyền tốt tốc độ, sức dẻo dai, bước chạy v.v… của những con ngựa cái không được phép sinh đẻ vì kỷ lục.. GÂY RỤNG TRỨNG

Trang 1

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC

CÔNG NGHỆ CẤY TRUYỀN PHÔI Ở NGỰA

GVHD: TS Nguyễn Hữu Đức

SVTH: Lương Kim Anh 585887

Đỗ Thị Hằng 586381 Bùi Thị Hoa 586473

Trang 2

NỘI DUNG TRÌNH BÀY

Đặt vấn đề

Nội dung

Kết Luận

A

B

C

2

Trang 3

Năm 2000, trên thế giới đã có

5398 ngựa cái được giội rửa phôi,

3139 phôi thu được có khả năng cấy

truyền và thực tế đã cấy 2830 phôi

cho ngựa cái nhận (IETS, 2001).

Năm 2000, trên thế giới đã có

5398 ngựa cái được giội rửa phôi,

3139 phôi thu được có khả năng cấy

truyền và thực tế đã cấy 2830 phôi

cho ngựa cái nhận (IETS, 2001).

3

ĐẶT VẤN ĐỀ

Một lý lẽ

nổi trội

Một lý lẽ

nổi trội

Con cho phôi có tiềm năng di truyền tốt (nhất là ngựa đua)

lại không được sinh đẻ.

Con cho phôi có tiềm năng di truyền tốt (nhất là ngựa đua)

lại không được sinh đẻ.

Mong muốn cấy truyền phôi là kỹ thuật khai thác được tiềm năng di truyền tốt (tốc độ, sức dẻo dai, bước chạy v.v…) của những con ngựa cái không được phép sinh đẻ (vì kỷ lục).

Trang 4

1 Gây rụng trứng nhiều

2.Kỹ thuật thu phôi

3 Kỹ thuật gây động duc cùng pha

4 Cấy truyền phôi

5 Các công nghệ khác

5 Các công nghệ khá c

6 Bảo quản phôi ngựa

4 NỘI DUNG

Trang 5

1 GÂY RỤNG TRỨNG NHIỀU

Gonadotropin ngoại

sinh

Gonadotropin ngoại

sinh

Phản ứng kém

5

Chất chiết tuyến yên ngựa còn thô

hoặc tinh khiết

Chất chiết tuyến yên ngựa còn thô

hoặc tinh khiết

Tiêm hai lần /ngày trong 14 ngày

vào mùa không rụng trứng của

ngựa cái Pony

Tiêm hai lần /ngày trong 14 ngày

vào mùa không rụng trứng của

ngựa cái Pony

Tiêm một lần/ ngày trong từ năm đến bảy ngày vào giai đoạn động dục hay giữa động đực

Nghiên cứu đầu tiên, năm 1974 của Douglas, Nuti, Ginther

Các phương pháp gây dụng trứng

Trang 6

Sử dụng HCG Tiêm vào ngày thứ 15-19 đã cho kết quả rõ ràng

hơn là vào những ngày 19-23 của chu kỳ động dục

Tiêm vào ngày thứ 15-19 đã cho kết quả rõ ràng hơn là vào những ngày 19-23 của chu kỳ động dục

Sử dụng một liều PGF2α vào ngày

đầu tiên tiêm chất chiết tuyến yên

với 750-1500 IU hay 2500 IU

Sử dụng một liều PGF2α vào ngày

đầu tiên tiêm chất chiết tuyến yên

với 750-1500 IU hay 2500 IU

Cho lượng trứng rụng tương ứng 2,9+_0,5 và 1,3+_0,2

6

NGHIÊN CỨU CỦA WOODS

VÀ GINTHER,1983

Trang 7

Gây rụng trứng nhiều ở ngựa cái để cho phôi bằng

FSH của ngựa tinh khiết (e-FSH)

Gây rụng trứng nhiều ở ngựa cái để cho phôi bằng

FSH của ngựa tinh khiết (e-FSH)

Thụ tinh nhân tạo cho ngựa cái với tinh tươi có phẩm chất như nhau từ nang trứng có đường kính 33mm cho đến khi rụng

trứng

Thao tác

Nghiên cứu của B.Remy và J.B.Beckers (1997),

J.F.Bruyas và cs (1997)

Nghiên cứu của B.Remy và J.B.Beckers (1997),

J.F.Bruyas và cs (1997)

Kết quả

( n=22)

Đối chứng ( n=22)

Bảng 2: Số trứng rụng và số phôi thu được trung bình ở ngựa cái.

( Remy và Bruyas, 1997 )

7

Trang 8

KỸ THUẬT THU PHÔI

Thu phôi bằng phương pháp không

mổ là tốt nhất vì ở ngựa nguy cơ nhiễm trùng sau khi mổ rất cao và

chậm hồi phục

Thu phôi bằng phương pháp không

mổ là tốt nhất vì ở ngựa nguy cơ nhiễm trùng sau khi mổ rất cao và

chậm hồi phục

8

http://baigiang.violet.vn/present/show/entry_id/222927

Dung dịch và dụng cụ giội rửa áp dụng như

ở bò

Dung dịch và dụng cụ giội rửa áp dụng như

ở bò

THỜI GIAN THU PHÔI

Ngựa bình thường

Thường là 7, 8 hoặc 9 ngày sau khi rụng trứng

Ngựa bình thường

Thường là 7, 8 hoặc 9 ngày sau khi rụng trứng

Ngựa có tiền sử viêm tử cung

Ngày thứ 6 sau rụng trứng nhằm hạn chế ảnh hưởng

của các tác nhân gây bệnh tử cung

Ngựa có tiền sử viêm tử cung

Ngày thứ 6 sau rụng trứng nhằm hạn chế ảnh hưởng

của các tác nhân gây bệnh tử cung

Trang 9

Kết quả thu phôi có thể đạt tới 80%.

Phôi ngựa ở trạng thái phôi dâu

Đi đến tử cung vào ngày thứ sáu sau khi rụng trứng (Ginther, 1979) và có đường kính xấp xỉ 100µm

Ngày thứ bảy phát triển thành phôi nang có kích thước hơn 200µm

Ngày thứ chín hơn 2mm (Douglas, 1982)

9

Trang 10

Bổ sung progesterone thông qua thức ăn

Cho ngựa ăn Altrenogest liều 0,044mg/kg trong 15 ngày Sau

đó ngựa sẽ động dục từ 2 đến 3 ngày

Bổ sung progesterone thông qua thức ăn

Cho ngựa ăn Altrenogest liều 0,044mg/kg trong 15 ngày Sau

đó ngựa sẽ động dục từ 2 đến 3 ngày

Tiêm PGF2α vào giữa chu kì động dục

Tiêm fluprostenol với liều 250µg vào ngày thứ 14 của chu kỳ, trước khi rụng trứng, ngựa còn được tiêm bổ sung HCG với liều 2000-3000 IU

Tiêm PGF2α vào giữa chu kì động dục

Tiêm fluprostenol với liều 250µg vào ngày thứ 14 của chu kỳ, trước khi rụng trứng, ngựa còn được tiêm bổ sung HCG với liều 2000-3000 IU

Kỹ thuật gây động dục đồng pha

Xác định ngựa cái động đực và rụng trứng , phải sờ khám buồng trứng hằng ngày để kết luận mức độ đồng pha và cấy phôi mới có kết quả

Việc kích thích cho ngựa cái động dục cho đến nay còn gặp nhiều khó khăn và kết quả chưa đạt được theo yêu cầu như ở một số gia súc cái khác.

10

Trang 11

CẤY TRUYỀN PHÔI

Kỹ thuật cấy phôi bằng phương pháp mổ hoặc không mổ ở ngựa được thực hiện giống như ở bò

Mổ

Không mổ

Castalberry và cs:Tỉ lệ chửa 60%

Iuniano và Squire:Tỉ lệ chửa 75%

(cấy vào ngày thứ 7 và 8)

Iuniano và Squire:Tỉ lệ chửa 75%

(cấy vào ngày thứ 7 và 8)

Imen và cs: Tỉ lệ chửa 53% (1981) Imen và cs: Tỉ lệ chửa 53% (1981)

Allen và Rowson: Tỉ lệ chửa 71% (1975)

Wade và cs Wilson Tỉ lệ chửa 60-70% (1987)

11

Trang 12

Chiều hướng nghiên cứu khai thác trứng

Sự tiến triển của nhân thành thục trong tế bào

trứng ở nang trứng trước

khi rụng

Sự tiến triển của nhân thành thục trong tế bào

trứng ở nang trứng trước

khi rụng

Kích thích nang trứng tăng trưởng

Trạng thái tế bào trứng nuôi chín và tiêm tinh trùng vào trứng

Sự phát triển của tế bào

trứng

Sự phát triển của tế bào

trứng

Hiệu quả khai thác phôi gây rụng trứng nhiều và phối giống ở ngựa đạt kết quả rất thấp so với

các loại gia súc khác

CÁC CÔNG NGHỆ KHÁC

12

Trang 13

óm trứ

ng

1

•

ngu yên sin

h c hất tr ong sạ

ch đồn

g n hất ho

ặc

có bóng tố i

Nh

óm trứ

ng

2

•

tro

ng ngu yên si

nh c hất xu

ất h iện th

ể ph

ân cực của nh ững hạ

t l ipi

t tố

i

•

⇒tỉ

lệ

% tr ứn

g t hụ ti nh ca

o n hấ t

Nhóm tr

ứng

3

•

tro

ng ngu yên si

nh c hất cò

n n hữn

g c hấm hạ

t li pit rải rác

ở giai đoạn MII( metaphase II) được tiêm tinh trùng (ICSC)

Nhóm Số lượng trứng MII được tiêm Số lượng trứng sống (%) Số lượng trứng thụ tinh (%)

M.E.Dell Aquala và cs (1977) đã nghiên cứu trạng thái tế bào trứng nuôi chín (IVM) và tiêm tinh trùng vào

trứng (ICSI) đã đạt tỷ lệ trứng thụ tinh bình quân là 38,5% ( bảng 1)

M.E.Dell Aquala và cs (1977) đã nghiên cứu trạng thái tế bào trứng nuôi chín (IVM) và tiêm tinh trùng vào

trứng (ICSI) đã đạt tỷ lệ trứng thụ tinh bình quân là 38,5% ( bảng 1)

trứng thụ tinh phải có hai tiền nhân ( pronucle ) hoặc hai thể nhiễm sắc phân cực

13

Trang 14

a.Có túi mầm ; b.Chất nhiễm sắc dày đặc ; c.Metaphase I; d.Telophase I; đ.Metaphase II

J.Bezard và cs (INRA –Pháp ,1997) đã nghiên cứu

sự tiến triển của nhân thành LH thục trong tế bào

trứng ở nang trứng trước khi rụng (≥28mm) sau

khi tiêm e- LH (chiết xuất từ tuyến yên ngựa )

sự tiến triển của nhân thành LH thục trong tế bào

trứng ở nang trứng trước khi rụng (≥28mm) sau

khi tiêm e- LH (chiết xuất từ tuyến yên ngựa )

khả năng thành thục đồng loạt khi nuôi chín trong ống nghiệm (IVM) của tế bào trứng ở những nang trứng <28mm trên

ngựa cái Pony

khả năng thành thục đồng loạt khi nuôi chín trong ống nghiệm (IVM) của tế bào trứng ở những nang trứng <28mm trên

ngựa cái Pony Bảng 3.Kết quả thu trứng từ những nang trứng sắp rụng

Cứ trung bình sáu nang trứng

ở buồng trứng sắp rụng trứng

của ngựa cái Pony cho ra

được 3,2 trứng

Cứ trung bình sáu nang trứng

ở buồng trứng sắp rụng trứng

của ngựa cái Pony cho ra

được 3,2 trứng

Trứng có lớp tế bào gờ trứng (cumulus cell) mở rộng sau khi tiêm 12 giờ và nhân của tế bào trứng chín muộn hơn (MI lúc 24 giờ ,MII lúc 35 giờ ) so với trứng có lớp tế bào gờ trứng thu nhỏ

không mở rộng

Trứng có lớp tế bào gờ trứng (cumulus cell) mở rộng sau khi tiêm 12 giờ và nhân của tế bào trứng chín muộn hơn (MI lúc 24 giờ ,MII lúc 35 giờ ) so với trứng có lớp tế bào gờ trứng thu nhỏ

không mở rộng

Kết luận

14

Trang 15

BẢO QUẢN PHÔI NGỰA

Phương pháp đông lạnh

-Sử dụng chất bảo vệ sinh học lạnh glycerin 1M

-Đồ thị hại nhiệt :

+Hạ nhiệt -6⇒tinh thể nước đá

+Hạ nhiệt -35 với v=0,3

-giải đông trong nước ấm 37, lắc đều sao cho tan nhiệt (trước khi giải đông cần kiểm tra cẩn thận các nhãn và

mũ ống để chắc chắn nắp còn chặt)

⇒Kếtquảthụthaicủaphươngphápnàyđạttỷlệ 50% -70%

vàcácphôinangđạtđượctrạngtháipháttriểntốt

15

ĐÔNG LẠNH PHÔI

Gửi phôi đến các lục điạ Bảo quản dự trữ phôi đông lạnh

Lưu giữ nghiên cứu di truyền con

cái

Lưu giữ nghiên cứu di truyền con

cái

Giảm chi phí đẻ duy trì cái nhận

phôi

Giảm chi phí đẻ duy trì cái nhận

Giảm lây truyền bệnh

Sơ đồ về lợi ích đông lạnh phôi

Trang 16

 Cấy truyền phôi ở ngựa tuy còn nhiều hạn chế và khó khăn nhưng đã có vai trò to lớn trong việc tạo ra thế hệ mới tốt hơn, có ý nghĩa cao trong đời sống kinh tế sản xuất của con người.

 Cấy truyền phôi ở ngựa đã góp phần vào việc bảo tồn và duy trì những vốn gen quý hiếm, đồng thời mở ra nhiều triển vọng mới cho ngành khoa học công nghệ nuôi cấy phôi tế bào

động vật.

KẾT LUẬN

Trang 17

Công nghệ cấy truyền phôi ở gia súc PGS.TS Hoàng Kim Giao

Nhà xuất bản Khoa Học và Kĩ Thuật 207trang.Chương 8 (t187-t190).

TÀI LIỆU THAM KHẢO

17

Trang 18

1

“Change your thoughts and you change your world”

Norman Vincent Peale

“Life is a dream for the wise, a game for the fool, a

comedy for the rich, a tragedy for the poor”

Sholom Aleichem

Trang 19

Cảm ơn Thầy và các bạn

đã chú ý lắng nghe!

Cảm ơn Thầy và các bạn

đã chú ý lắng nghe!

Định dạng
Số trang	19
Dung lượng	2,81 MB