TÌM HIỂU VỀ NUCLEOTIT VÀ CÁC DẪN XUẤT CỦA NÓ.

Sau khi gia súc chết, có sự phân giải của ATP dưới tác động của Actomyosin:ATP (+Actomyosin)⇒ ADP + H3PO4 + QADP ⇒ AMP + H3PO4 + Q Tỷ lệ ATP mất đi phụ thuộc vào một số yếu tố trong quá trình sau khi chết , tình trạng trao đổi chất của cơ bắp là quan trọng nhất. Việc tách chiết và phân tích các nucleotide và nucleoside trong thịt có thể giúp cho sự phân loại thịt tốt hơn.

CHỦ ĐỀ: TÌM HIỂU VỀ NUCLEOTIT VÀ CÁC DẪN

XUẤT CỦA NÓ.

KÍNH CHÀO QUÝ THẦY CÔ VÀ CÁC BẠN!

NHÓM 3:

1.TRÀ THỊ MINH HẠNH

2.TRẦN THỊ BÍCH HÀ

3 LƯƠNG THỊ THU HiỀN

4 NGUYỄN THỊ HiỀN

5 NGUYỄN NGỌC HIÊN

Mục lục

A Giới thiệu:

Sự suy giảm Adenosine triphosphate (ATP) là nguyên nhân thực sự của sự khởi đầu tê cứng ở động vật.

• Sau khi gia súc chết, có sự phân giải của ATP dưới tác động của Actomyosin:

bắp là quan trọng nhất.

Việc tách chiết và phân tích các nucleotide và nucleoside trong thịt có thể giúp cho sự phân loại thịt tốt hơn

i

Adenin

Ribose

3 Nhóm photphat

B.Sự phá vỡ Nucleotide trong cơ sau khi chết

1/ Khái niệm ATP: ATP là tên viết tắt từ Ađênôsin triphôtphát, có bản chất là

nucleotide.

• Cung cấp năng lượng cần thiết để vận hành bơm Na / K của các

lớp màng

2.

• Vận hành bơm canxi vào lưới tạo cơ, và để cung cấp năng lượng

cho sự co cơ và duỗi cơ.

2/ Vai trò của ATP

3/ Sự thay đổi hàm lượng ATP ở động vật sau khi chết.

• Nhờ sự hình thành của nó từ muối photphat của axit hữu cơ thông qua axit hữu cơ kinaza

• sự thủy phân đường kỵ khí nhưng hiệu quả không cao so với hiếu khí

Ngay sau khi chết: Hàm lượng ATP ổn định.

Khi muối photphat và glycogen cạn kiệt , hoặc sự tham gia của enzim bị bất hoạt : ATP nhanh chóng giảm trong vòng vài giờ do thực hiện hàng loạt chuyển đổi.

1 glucose

2ATP

12ATP

Hiếu khí

Kỵ khí

Cơ chế chuyển đổi của ATP.

Các yếu tố ảnh hưởng đến sự phân hủy ATP

• Phụ thuộc vào trạng thái trao đổi chất của động vật trước khi giết mổ( gia súc bị stress, bị bỏ đói,….) và trong điều kiện sau khi chết ( pH và nhiệt độ, màu sắc, của thịt)

Chuẩn bị mẫu

Tách nucleotide

và nucleoside

Phân tích (phân tích sắc ký)

C Phân tích nucleotide và nucleoside

1/ Chuẩn bị mẫu

i

Đem đồng hóa bằng máy dập

đồng hóa

Tách mẫu nhỏ ra khỏi cơ

thể động vật càng nhanh

càng tốt

Đem đi làm lạnh nhanh bằng N2 lỏng

Dịch chiết.

Chiết xuất bị vô hiệu hóa

Giữ trong bể băng trong 5 phút và ly tâm một lần nữa, cứ 15.000g trong 10 phút. Dịch nổi được lọc qua màng lọc 0,2 μm và được lưu trữ trong kho đông lạnh ( ở

nhiệt độ dưới -25 ° C ; nếu có thể -80°C ) cho đến khi phân tích

Dịc

h nổ i.

Được lọc qua bông thuỷ tinh và vô hiệu hóa bằng cách thêm kali carbonate rắn vào.

Dịc

h c hiế t

Được ly tâm 15.000 g trong 20 phút ở 4 ° C

2.Thu Nucleotide và Nucleoside

Xác định bằng phương pháp sắc ký trao đổi ion cổ điển

• HPLC (sắc kí lỏng cao áp)

Gần đây, các phương pháp khác dựa

trên việc đảo pha HPLC cùng với thêm

vào tùy chọn các cặp ion đã nhận được

sự phân tách và phục hồi tốt.

Phương pháp phân tích sắc ký.

• Sử dụng gradient pha động giữa hai dung môi : đệm

phosphate ở pH 7 và methanol

Thay đổi độ pH của

pha động.

• Thực hiện bằng cách so sánh thời gian duy trì mức cao nhất và các đặc điểm quang phổ với những tiêu chuẩn của chúng

Xác định các đỉnh sắc

ký

a Sắc ký pha đảo

Biểu đồ sắc ký minh họa:

Hình 16.1 suy thoái ATP và các hợp chất có nguồn gốc của nó trong cơ sau khi chết

Hình 16.3-Sắc ký pha đảo của ATP và các hợp chất suy thoái của nó trong thịt lợn sau khi chết, lấy mẫu tại 2 h (a) và 8 h (b) sau khi chết.

Nhận xét

• Mức cao nhất tương ứng với ATP giảm đáng kể trong khi mức cao nhất tương ứng với Inosine và IMP tăng đáng kể.