khảo sát khả năng đối kháng của xạ khuẩn đối với nấm colletotrichum spp. gây bệnh thán thư hại gấc trong điều kiện phõng thí nghiệm và nhà lưới

TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG HOÀNG TRỌNG NAM KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI NẤM COLLETOTRICHUM SPP. GÂY BỆNH THÁN THƢ HẠI GẤC TRONG ĐIỀU KIỆN PHÕNG THÍ NGHIỆM VÀ NHÀ LƢỚI Luận văn tốt nghiệp Đại học Ngành: BẢO VỆ THỰC VẬT Cần Thơ, 2013 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG Luận văn tốt nghiệp Đại học Ngành: BẢO VỆ THỰC VẬT Tên đề tài : KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI NẤM COLLETOTRICHUM SPP. GÂY BỆNH THÁN THƢ HẠI GẤC TRONG ĐIỀU KIỆN PHÕNG THÍ NGHIỆM VÀ NHÀ LƢỚI Giáo viên hướng dẫn: TS. Lê Minh Tƣờng Sinh viên thực hiện: Hoàng Trọng Nam MSSV: 3103638 Lớp: BVTV K36 Cần Thơ, 2013 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN BẢO VỆ THỰC VẬT Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ ngành Bảo Vệ Thực Vật với tên đề tài: “KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI NẤM COLLETOTRICHUM SPP. GÂY BỆNH THÁN THƢ HẠI GẤC TRONG ĐIỀU KIỆN PHÕNG THÍ NGHIỆM VÀ NHÀ LƢỚI” Do sinh viên Hoàng Trọng Nam thực đề nạp Kính trình lên hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp Cần Thơ, ngày . tháng . năm 2013 Cán hƣớng dẫn TS. Lê Minh Tƣờng i TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN BẢO VỆ THỰC VẬT Hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp chấp nhận luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ ngành Bảo Vệ Thực Vật với tên đề tài: “KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI NẤM COLLETOTRICHUM SPP. GÂY BỆNH THÁN THƢ HẠI GẤC TRONG ĐIỀU KIỆN PHÕNG THÍ NGHIỆM VÀ NHÀ LƢỚI” Do sinh viên Hoàng Trọng Nam thực bảo vệ trƣớc hội đồng. Ý kiến hội đồng chấm luận văn tốt nghiệp: . . . . . Luận văn tốt nghiệp đƣợc hội đồng đánh giá mức: . DUYỆT KHOA Cần Thơ, ngày … tháng … năm 2013 Chủ tịch hội đồng ii LƢỢC SỬ CÁ NHÂN Họ tên: Hoàng Trọng Nam. Ngày sinh: 02/02/1992 Nơi sinh: Tân Châu, An Giang. Họ tên Cha: Hoàng Trọng Thanh Họ tên Mẹ: Võ Thị Sâm Địa Chỉ: Tổ 4, Ấp 5, xã Vĩnh Xƣơng, Tân Châu, An Giang Quá trình học tập: 1998-2003: học tập trƣờng tiểu học “C” Vĩnh Xƣơng, Tân Châu , An Giang. 2003-2007: học tập trƣờng THCS Vĩnh Xƣơng, Tân Châu, An Giang. 2007-2010: học tập trƣờng THPT Vĩnh Xƣơng, Tân Châu, An Giang 2010-2014: Sinh viên trƣờng Đại Học Cần Thơ, ngành Bảo Vệ Thực Vật khóa 36, khoa Nông Nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng. iii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu thân. Các số liệu, kết trình bày luận văn tốt nghiệp trung thực chƣa đƣợc công bố công trình nghiên cứu trƣớc Ngƣời thực Hoàng Trọng Nam iv LỜI CẢM TẠ Để có đƣợc kết nhƣ ngày hôm nay, xin gửi lòng thành kính biết ơn Cha, mẹ! suốt đời tận tụy nghiệp tƣơng lai con. Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy Lê Minh Tƣờng, giảng viên hƣớng dẫn đề tài luận văn tốt nghiệp tận tình hƣớng dẫn, động viên cho em lời khuyên chân tình, sâu sắc suốt thời gian học tập thực đề tài. Xin cảm ơn ban lãnh đạo trƣờng Đại Học Cần Thơ; ban chủ nhiệm khoa nông nghiệp Sinh học Ứng Dụng, môn Bảo Vệ Thực Vật tạo nhiều điều kiện để em hoàn thành luận văn này. Xin chân thành cảm ơn thầy Lê Văn Vàng (cố vấn học tập) quý thầy, cô trƣờng Đại Học Cần Thơ dạy dỗ truyền đạt kiến thức cho em thời gian học tập trƣờng. Chân thành biết ơn chị Nguyễn Thị Mỹ Linh, anh Lý Văn Giang tất anh, chị môn Bảo Vệ Thực Vật tạo điều kiện cho em hoàn thành tốt thí nghiệm. Cảm ơn bạn lớp BVTV K36 giúp đỡ trình thực đề tài. Xin chân thành cảm ơn!!! Hoàng Trọng Nam v Hoàng Trọng Nam, 2013. “Khảo sát khả đối kháng xạ khuẩn nấm Colletotrichum spp. gây bệnh thán thƣ hại gấc điều kiện phòng thí nghiệm nhà lƣới”. Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ Bảo Vệ ThựcVật, Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng, Trƣờng Đại Học Cần Thơ. Cán hƣớng dẫn Tiến sĩ Lê Minh Tƣờng. TÓM LƢỢC Đề tài đƣợc thực phòng thí nghiệm bệnh cây, Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng, Trƣờng Đại Học Cần Thơ từ tháng 1/2013 đến tháng 11/2013. Mục đích nhằm tìm chủng xạ khuẩn nhƣ phƣơng pháp xử lý cho hiệu phòng trị bệnh thán thƣ cao nhất. Thí nghiệm 1: Phân lập đánh giá khả đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Colletotrichum spp. gây bệnh thán thƣ gấc điều kiện phòng thí nghiệm. Kết phân lập đƣợc 120 chủng xạ khuẩn vƣờn trồng gấc tỉnh Cần Thơ An Giang Tiền Giang. Hầu hết chủng xạ khuẩn phân lập đƣợc có đa dạng hình thái nhƣ hình dạng khuẩn lạc, màu sắc khuẩn ty khí sinh, màu sắc khuẩn ty chất, sắc tố khuếch tán môi trƣờng. Qua thí nghiệm đánh giá nhanh có 36 chủng tổng số 120 chủng thể khả đối kháng với nấm Colletotrichum spp. (chiếm 30%). Tiếp tục đánh giá khả đối kháng 36 chủng xạ khuẩn với lần lặp lại. Kết cho thấy chủng xạ khuẩn có khả đối kháng với nấm Colletotrichum spp. Trong có chủng xạ khuẩn NCT_TG4 GCT_TG9 thể khả đối kháng cao nấm Colletotrichum spp. với bán kính vòng vô khuẩn lần lƣợt 6,2 mm 4,4 mm NSKC. Thí nghiệm 2: đánh giá hiệu phòng trừ bệnh thán thƣ trái Gấc nấm Colletotrichum spp. gây chủng xạ khuẩn điều kiện in vivo. Kết thí nghiệm cho thấy, chủng xạ khuẩn cho hiệu giảm bệnh, NCT_TG4 có hiệu ức chế bệnh thán thƣ gấc nấm Colletotrichum spp. tốt hơn. Ở ba thời điểm xử lí trƣớc, sau trƣớc+sau cho hiệu giảm bệnh, thời điểm xử lí trƣớc trƣớc+sau cho hiệu giảm bệnh tốt so với thời điểm xử lí sau, phân tích tƣơng tác thời điểm xử lí xạ khuẩn ta thấy chủng NCT_TG4 thời điểm xử lí trƣớc cho hiệu ức chế bệnh thán thƣ tốt so với thời điểm xử lí lại, chủng GCT_TG9 thời điểm xử lí trƣớc+sau có hiệu giảm bệnh tốt so với thời điểm xử lí lại. Thí nghiệm 3: Đánh giá khả phân giải cellulose chủng xạ khuẩn phân lập từ vƣờn gấc. Kết cho thấy chủng xạ khuẩn NCT_TG3, NCT_TG4, NCT_TG18, GCT_TG9 BCT_TG4 có khả tiết enzyme vi cellulase môi trƣờng CMC. Nhìn chung, xạ khuẩn phân giải cellulose nhiều mức độ khác nhau. Trong đó, chủng NCT_TG3 có bán kính vòng phân giải cellulose mạnh với bán kính phân giải trung bình 10,94 mm, chủng xạ khuẩn NCT_TG3, BCT_TG4 NCT_TG18 với bán phân giải cellulose trung bình khoảng 6,78 – 7,33 mm, cuối GCT_TG9 có bán kính vòng phân giải cellulose trung bình 3,94 mm. Từ khóa: Xạ khuẩn, Colletotrichum spp., phân giải cellulose, đối kháng vii MỤC LỤC Nội dung Trang TÓM LƢỢC . vi MỤC LỤC viii DANH MỤC BẢNG x DANH MỤC HÌNH . xi ĐẶT VẤN ĐỀ . CHƢƠNG 1: LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU . 1.1 GIỚI THIỆU SƠ LƢỢC VỀ GẤC . 1.1.1.Nguồn gốc phân bố Gấc 1.1.2. Đặc tính thực vật học 1.2 BỆNH THÁN THƢ HẠI GẤC DO NẤM COLLETOTRICHUM SPP. . ………………………………………………………………………………………………2 1.2.1 Triệu chứng 1.2.2. Tác nhân . 1.2.3. Đặc điểm phát triển phát sinh bệnh . 1.2.4. Biện pháp quản lí bệnh thán thƣ 1.3 PHÒNG TRỪ SINH HỌC BỆNH CÂY . 1.3.1. Khái niệm phòng trừ sinh học bệnh . 1.3.2. Vai trò vi sinh vật đối kháng . 1.4 GIỚI THIỆU VỀ XẠ KHUẨN . 1.4.1. Phân bố xạ khuẩn tự nhiên . 1.4.2. Đặc điểm xạ khuẩn 1.4.2.1 Hình thái kích thước xạ khuẩn 1.4.2.2 Cấu tạo xạ khuẩn . 1.4.2.3 Hình thái khuẩn lạc . 1.4.2.4 Hình thái khuẩn Ty 1.4.2.5 Hình thành bào tử 1.5.2.5 Ảnh hưởng điều kiện môi trường lên sinh trưởng xạ khuẩn . 1.5.2.6 Vai trò xạ khuẩn 1.5 NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ VIỆC SỬ DỤNG XẠ KHUẨN ĐỐI KHÁNG TRONG PHÒNG TRỊ SINH HỌC BỆNH CÂY . 12 1.5.1. Những nghiên cứu nƣớc .12 1.5.2. Nghiên cứu Thế Giới 13 viii Khi so sánh đƣờng kính vết bệnh trung bình thời điểm xử lí cho thấy thời điểm xử lí trƣớc, sau trƣớc+sau cho thấy hiệu ức chế bệnh thán thƣ trái Gấc, thời điểm xử lí trƣớc (hình 3.2) trƣớc+sau (hình 3.3) có đƣờng kính vết bệnh tƣơng ứng 17,62 mm 16,6 mm có hiệu tốt khác biệt có ý nghĩa so với thời điểm xử lí sau (hình 3.4) có đƣờng kính vết bệnh 20,1 mm. Khi phân tích tƣơng tác thời điểm xử lí xạ khuẩn ta thấy xạ khuẩn NCT_TG4 thời điểm xử lí trƣớc (hình 3.2b) có đƣờng kính vết bệnh 5,29 mm cho hiệu cao khác biệt có ý nghĩa so với thời điểm xử lí trƣớc+sau sau có đƣờng kính vết bệnh lần lƣợt 10,71 mm 12,89 mm. Đối với chủng xạ khuẩn GCT_TG9 thời điểm xử lí trƣớc+sau (hình 3.3b) có đƣờng kính vết bệnh 13,43 mm cho hiệu ức chế bệnh thán thƣ tốt khác biệt có ý nghĩa so với thời điểm xử lí sau trƣớc có đƣờng kính vết bệnh lần lƣợt 21,75 mm 21,89 mm. Bảng 3.5 Đƣờng kính vết bệnh (mm) trái tất nghiệm thức NSKCB Đƣờng kính vết bệnh (mm) qua thời điểm NSKCB TĐXL (B) XK (A) Trƣớc Trƣớc+sau Sau TB (A) NCT_TG4 GCT_TG9 5,29 b 21,89 a 25,67 a 17,62 B 10,71 a 13,43 b 25,67 a 16,6 B 12,89 a 21,75 a 25,67 a 20,1 A 9,63 C 19,02 B 25,67 A ĐC TB (B) Mức ý nghĩa CV (%) F(A)*, F(B)*, F(AxB)* 12,57 Ghi chú: Các số trung bình bảng theo sau nhiều chữ giống không khác biệt qua phép kiểm định Ducan*: khác biệt mức ý nghĩa 5% NSKCB: ngày sau chủng bệnh  Thời điểm NSKCB Từ kết bảng 3.6, so sánh đƣờng kính vết bệnh trung bình nghiệm thức cho thấy thời điểm NSKCB, nghiệm thức xạ khuẩn NCT_TG4 GCT_TG9 cho thấy đƣợc hiệu ức chế bệnh thán thƣ trái gấc nấm Collectotrichum spp. có đƣờng kính vết bệnh nhỏ đối chứng. Trong đó, xạ khuẩn NCT_TG4 trì khả ức chế mạnh bênh thán thứ có đƣờng kính vết bệnh 13,98 mm khác biệt có ý nghĩa so với xạ khuẩn GCT_TG9 đối chứng có đƣờng kính vết bệnh tƣơng ứng 28,14 mm 41,7 mm. Khi so sánh đƣờng kính vết bệnh trung bình thời điểm xử lí cho thấy thời điểm xử lí trƣớc, sau trƣớc+sau hiệu quả, thời điểm xử lí trƣớc trƣớc+sau có đƣờng kính vết bệnh tƣơng ứng 25,47 mm 28 mm có 31 hiệu giảm bệnh tốt khác biệt có ý nghĩa so với thời điểm xử lí sau có đƣờng kính vết bệnh 30,36 mm. Khi phân tích thời điểm xử lí xạ khuẩn ta thấy xạ khuẩn NCT_TG4 thời điểm xử lí trƣớc có đƣờng kính vết bệnh 7,96 mm cho hiệu cao khác biệt co ý nghĩa so với thời điểm xử lí trƣớc+sau sau có đƣờng kính vết bệnh lần lƣợt 15,97 mm 18,02 mm. Đối với chủng xạ khuẩn GCT_TG9 thời điểm xử lí trƣớc+sau thời điểm xử lí trƣớc có đƣờng kính vết bệnh lần lƣợt 26,29 mm 26,75 mm cho hiệu giảm bệnh tốt khác biệt có ý nghĩa so với thời điểm xử lí sau có đƣờng kính vết bệnh 31,37 mm. Bảng 3.6 Đƣờng kính vết bệnh (mm) trái tất nghiệm thức NSKCB TĐXL (B) XK (A) NCT_TG4 GCT_TG9 ĐC TB (B) Mức ý nghĩa CV (%) Đƣờng kính vết bệnh (mm) qua thời điểm NSKCB Trƣớc Trƣớc+sau Sau TB (A) 7,96 b 26,75 b 41,7 a 25,47 C 15,97 a 18,02 a 26,29 b 31,37 a 41,7 a 41,7 a 28 B 30,36 A * * F(A) , F(B) , F(AxB)* 9,27 13,98 C 28,14 B 41,7 A Ghi chú: Các số trung bình bảng theo sau nhiều chữ giống không khác biệt qua phép kiểm định Ducan*: khác biệt mức ý nghĩa 5% NSKCB: ngày sau chủng bệnh Nhìn chung, qua thời điểm 2, 4, NSKCB, chủng xạ khuẩn NCT_TG4 GCT_TG9 thể hiệu phòng trị bệnh thán thƣ trái gấc nấm Colletotrichum spp. gây qua thời điểm xử lí trƣớc, sau trƣớc+sau. Trong đó, thời điểm xử lí trƣớc xử lí trƣớc+sau thể hiệu ức chế bệnh thán thƣ tốt so với thời điểm xử lí sau. Chủng xạ khuẩn NCT_TG4 thể hiệu phòng trị bệnh thán thƣ trái Gấc nấm Colletotrichum spp. gây qua thời điểm xử lí trƣớc tốt so với thời điểm xử lí trƣớc+sau sau. Xạ khuẩn GCT_TG9 thể hiệu hiệu thời điểm xử lí trƣớc+sau tốt thời điểm xử lí sau trƣớc. Kết phù hợp với nghiên cứu Tô Huỳnh Nhƣ (2012) phun trƣớc phun trƣớc+sau chủng xạ khuẩn 4RM, 21RM, 54RM, 55RM, 58RM cho hiệu phòng trị bệnh thán thƣ ớt nấm Colletotrichum ST2 tốt biện pháp phun sau. Theo Agrios (2005), đối kháng trực hình thức nhƣ: ký sinh trực tiếp tiết enzyme phân giải giết chết mầm bệnh, tiết kháng sinh gây tác động trực tiếp lên mầm bệnh, cạnh tranh nguồn thức ăn với mầm bệnh. Kết đề tài phù hợp với nghiên cứu Shimizu ctv. (2009) phun xạ khuẩn đối kháng (MBCu-56) lên dƣa chuột vào thời điểm ngày trƣớc chủng bệnh với nấm Colletotrichum orbiculare thấy hiệu giảm 32 bệnh lần lƣợt 72%, 79% 93% tƣơng ứng với mật số huyền phù xạ khuẩn 107, 108 109 cfu/ml. Điều chứng tỏ chủng xạ khuẩn MBCu-56 có khả tác động trực tiếp để tiêu diệt tác nhân gây bệnh C.orbiculare nên có hiệu phòng trị bệnh. Ở thời điểm xử lí xạ khuẩn sau cho hiệu chậm thấp so với thời điểm xử lí khác việc khống chế bệnh thán thƣ gấc nấm Colletotrichum spp. điều kiện in vivo. Trong trƣờng hợp lí giải rằng, thời điểm xử lí xạ khuẩn sau lây bệnh nhân tạo lên trái ngày thời gian bào tử nấm Colletotrichum spp. bắt đầu chiếm đƣợc ƣu không gian sống, dinh dƣỡng hay mật số. Sau đó, chủng xạ khuẩn đƣợc đƣa vào nên xạ khuẩn bị ƣu cạnh tranh, sau xâm nhiễm, mầm bệnh sử dụng nguồn dƣỡng liệu từ mô kí chủ để sống, tiếp tục tăng trƣởng phát triển. Mặc dù chủng xạ khuẩn khảo sát thí nghiệm có khả đối kháng với nấm Colletotrichum spp. nhƣng xử lí xạ khuẩn sau nên không đủ mạnh không gian định vị hay mật số để khống chế mầm bệnh. b. Xạ khuẩn GCT_TG9 a. Xạ khuẩn NCT_TG4 c. Đối chứng Hình 3.2: Triệu chứng bệnh thán thƣ Gấc nghiệm thức xử lí trƣớc thời điểm NSKCB 33 b. Xạ khuẩn GCT_TG9 a. Xạ khuẩn NCT_TG4 c. Đối chứng Hình 3.3: Triệu chứng bệnh thán thƣ Gấc nghiệm thức xử lí trƣớc+sau thời điểm NSKCB a. Xạ khuẩn NCT_TG4 b. Xạ khuẩn GCT_TG9 c. Đối chứng Hình 3.4: triệu chứng bệnh thán thƣ Gấc nghiệm thức xử lí sau thời điểm NSKCB 34 3.3 Khả phân giải cellulose chủng xạ khuẩn môi trƣờng CMC 1% điều kiện phòng thí nghiệm Khả phân giải cellulose chủng xạ khuẩn khảo sát đƣợc trình bày bảng 3.7. Ở thời điểm NSKC, chủng NCT_TG3 (hình 3.5) có bán kính phân giải cellulose cao với bán kính phân giải cellulose 6,67 mm, khác biệt ý nghĩa so với tất chủng lại, chủng NCT_TG4 NCT_TG18 với bán kính phân giải cellulose từ 4,42 – 4,25 mm khác biệt ý nghĩa so với chủng xạ khuẩn BCT_TG4 GCT_TG9 có bán kính phân giải cellulose lần lƣợt 2,83 mm 2,58 mm. Ở thời điểm NSKC, chủng xạ khuẩn NCT_TG3 trì khả phân giải cellulose cao với bán kính phân giải 11,08 mm, khác biệt ý nghĩa so với tất chủng lại. Kế đến chủng xạ khuẩn NCT_TG3, BCT_TG4 NCT_TG18 với bán phân giải celluose khoảng 7,5 – 8,08 mm khác biệt ý nghĩa so với chủng GCT_TG9 với bán kính phân giải từ 3,75 mm. Ở thời điểm NSKC, chủng xạ khuẩn NCT_TG3 (hình 3.6) cho thấy khả phân giải cellulose mạnh có bán kính phân giải cellulose cao từ 15,08 mm khác biệt ý nghĩa so với chủng lại, chủng xạ khuẩn BCT_TG4, NCT_TG18 NCT_TG4 với bán kính vòng phân giải khoảng 9,5 – 10 mm khác biệt ý nghĩa so với chủng GCT_TG9 có bán kính phân giải cellulose 5,5 mm. Tóm lại, khả phân giải cellulose chủng xạ khuẩn NCT_TG3, NCT_TG4, NCT_TG18 BCT_TG4 với bán kính phân giải trung bình từ 6,7810,94 mm. Trong chủng xạ khuẩn NCT_TG3 có bán kính phân giải cellulose cao với bán kính phân giải trung bình 10,97 mm khác biệt ý nghĩa thống kê so với chủng GCT_TG9. Tuy nhiên, không khác biệt ý nghĩa so với chủng NCT_TG4, NCT_TG18 BCT_TG4. Nhìn chung, bán kính phân giải cellulose chủng xạ khuẩn tăng dần lên theo thời gian. Mặt khác, phân giải cellulose chủng xạ khuẩn giai đoạn từ ngày đến ngày có tốc độ phân giải cao giai đoạn từ ngày đến ngày thể qua bán kính vòng chất CMC bị phân giải. Điều phù hợp với nghiên cứu Đinh Ngọc Trúc, (2011) Jaradat ctv., (2008), mức hoạt động cao cellulase đƣợc quan sát điều kiện tối ƣu ngày sau cấy. Tƣơng tự nghiên cứu gần Đinh Ngọc Trúc (2013), chủng xạ khuẩn đƣợc phân lập từ ruộng trồng lúa tỉnh Hậu Giang có khả tiết enzyme cellulase. Tƣơng tự nhƣ nghiên cứu Huỳnh Thƣ ctv. (2009), hầu hết dòng phân lập từ vƣờn quốc gia Nam Cát Tiên Bến Tre có hoạt tính enzyme thủy 35 phân số biopolymer nhƣ: cellulase, amylase, protease, chitinase, pectinase, mannanase. 200 chủng xạ khuẩn đƣợc khảo sát thể khả ức chế phát triển khuẩn ty nấm Phytophthora. Trong đó, có 13 chủng sản xuất β-1, 3, β-1, β-1,6-glucanases. Các enzym thủy phân glucans từ vách tế bào nấm Phytophthora, enzyme củng có khả phân giải glucan khác nhƣ cellulose, laminarin, pustulan, vách tế bào nấm men (Trích dẫn từ Valois ctv., 1996). Bảng 3.7 Bán kính vòng phân giải cellulose (mm) xạ khuẩn môi trƣờng CMC 1% qua 3, ngày sau nuôi cấy BCT_TG4 NCT_TG18 NCT-TG3 NCT_TG4 GCT_TG9 Bán kính vòng phân giải cellulose (mm) qua thời điểm 3NSKC 5NSKC 7NSKC Trung bình 2,83 c 8,0 b 9,5 b 6,78 AB 4,25 b 7,5 b 10,0 b 7,25 AB 6,67 a 11,08 a 15,08 a 10,94 A 4,42 b 8,08 b 9,5 b 7,33 AB 2,58 c 3,75 c 5,5 c 3,94 B Mức ý nghĩa (%) * * * * CV (%) 13,6 7,55 5,78 42,42 Chủng xạ khuẩn Ghi chú: Trong cột, số có chữ số theo sau khác biệt không ý nghĩa qua kiểm định Duncan mức ý nghĩa %. NSKC: ngày sau cấy 36 Hình 3.5 Bán kính vòng chất bị phân giải chủng xạ khuẩn môi trƣờng CMC thời điểm NSKC Hình 3.6 Bán kính vòng chất bị phân giải chủng xạ khuẩn môi trƣờng CMC thời điểm NSKC 37 CHƢƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 KẾT LUẬN Có 120 chủng xạ khuẩn đƣợc phân lập tỉnh An Giang, Cần Thơ, Tiền Giang. Đánh giá khả đối kháng nhanh 120 chủng xạ khuẩn nấm Colletotrichum spp. ghi nhận 36 chủng thể hiệu đối kháng chiếm 30%. Trong số 36 chủng có khả đối kháng có chủng thể đối kháng cao với nấm Colletotrichum spp. NCT_TG4 GCT_TG9 thời điểm ngày với bán kính vòng vô khuẩn lần lƣợt 6,2 mm 4,4 mm. Đánh giá hiệu phòng trị bệnh thán thƣ nấm Colletotrichum spp. gây hại gấc chủng xạ khuẩn NCT_TG4 GCT_TG9 với thời điểm xử lý trƣớc, sau, trƣớc+sau. Kết ghi nhận đƣợc: chủng xạ khuẩn NCT_TG4 thể hiệu giảm bệnh thán thƣ tốt thời điểm trƣớc với đƣờng kính vết bệnh 7,46 mm NSKCB, xạ khuẩn GCT_TG9 thể hiệu giảm bệnh thán thƣ tốt thời điểm xử lí trƣớc+sau với đƣờng kính vết bệnh NSKCB 26,29 cm. Tất chủng xạ khuẩn có khả phân giải cellulose. Trong chủng NCT_TG3 có khả phân giải cao nhất. 4.2 ĐỀ NGHỊ: Nghiên cứu số chế đối kháng chủng xạ khuẩn NCT_TG4 GCT_TG9. Khảo sát hiệu phòng trị bệnh thán thƣ gấc chủng xạ khuẩn NCT_TG4 GCT_TG9 điều kiện nhà lƣới đồng. 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO AGRIOS, G.N, 2005. Plant Pathology. 5th edition. San Diego, California. Academic Press. 922p. Alexopoulos, C. J. (1941), Studies in antibiosis between bacteria and fungi. II. Species of Actinomyces inhibiting the growth of Colletotrichum gloeosporoides Penz. in culture. Ohio Journal Sciences 41: 425 - 430. Aqualon, R., (1999). Physical and chemical properties – sodium carboxymethylcellulose. Hercules Incorporated. Bharathi R., R. Vivekananthan, S. Harish, A. Ramanathan and R. Samiyappan (2004), “Foliar application of P lan grown-promoting rhizobacteria increases antifungal compound in pea (Pisum sativum) against Erysiphe pisi”, Micobiology 35(3), 129-134. Bonjar, G. H. S., Zamanian S., Aghighi, S., Rashid Farrokhi, P., Mahdavi, M. J. and Saadoun I. (2006). “Antimicrobial activity of Iranian Streptomyces coralus strains 63 against Ralstonia solanacearum”, Journal of Biological Science 6(1): 127 – 129. Bùi Thị Hà, (2008). Nghiên cứu xạ khuẩn thuộc chi Streptomyces sinh chất kháng sinh chống nấm gây bệnh chè Thái Nguyên. Luận văn thạc sĩ sinh học. Đại học Thái Nguyên. Cao Ngọc Điệp Nguyễn Văn Thành, 2009. Giáo trình nấm học. Viện Nghiên Cứu Phát Priển Công Nghệ Sinh Học. Trƣờng Đại Học Cần Thơ Cho J. J. (1986), Winter Disease of Lettuce, Comodity fact sheet le-4(a) vegetable, Hawaii cooperative extension service, Hawaii institute of tropical agriculture and Human resources university of Hawaii at Manoa, 1-4. Cook, R. J. and K. P. Baker (1983). The nature and practice of biological control of plant pathologens, APS Press, The American Phytopathological Society, St. paul, Minnesota, 539 pages. Đặng Thị Kim Uyên, (2010). Khảo sát môi trường nuôi cấy hiệu xạ khuẩn Streptomyces sp. chủng SOFRI đối kháng với bệnh nấm Fusarium solani chanh volka (Citrus volkarmeriana). Luận văn Cao học chuyên ngành Bảo vệ thực vật. Đại học Cần Thơ. Đào Thị Lƣơng, Phạm Văn Ty, Trịnh Thành Trung Nguyễn Thị Anh Đào (2005). Nghiên cứu đặc điểm sinh học xạ khuẩn kháng Pseudomonas solanacearum gây héo trồng. Trung tâm công nghệ Sinh học, Đại học Quốc Gia Hà Nội. Đinh Ngọc Trúc (2011). Khảo sát khả tiết enzyme cellulase, chitinase protease chủng xạ khuẩn (Actinomycetes) điều kiện phòng thí nghiệm. Luận văn tốt nghiệp kĩ sƣ Bảo Vệ Thực Vật. Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng. Đại học Cần Thơ. Đỗ Tất Lợi (1999). Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học NXB Thời Đại. Đỗ Tất Lợi (2003). Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học NXB Thời Đại, tr. 885887. Đỗ Thu Hà (2004). Nghiên cứu xạ khuẩn sinh chất kháng sinh chống nấm phân lập từ đất Quảng Nam - Đà Nẵng. Luận án tiến sĩ Sinh Học, Hà Nội. 115 trang. Đỗ Thu Hà. (2005). Nghiên cứu xạ khuẩn sinh kháng sinh chống nấm phân lập từ đất Quảng Nam – Đà Nẵng. Khoa Sinh-Môi Trƣờng trƣờng Đại học Sƣ Phạm – Đại học Đà Nẵng. Ezziyyani, M., Requena, M. E., Egea, C. and Candele, M. E. (2007), Biological control of Phytophthora root rot of pepper using Trichoderma harzianum and Streptomyces rochei in combination, Journal of Phytopathology 155: 342 – 349. 39 Fernando, G. D., Nekkeeran, S. and Yang, Y. (2005). “Biosynthesis of antibiotics by PGPR and its relation in biocontrol of plant diseases”, In: Z. A. Siddiqui: P GPR: Biocontrol and Biofertilization, 2006 Springer, The Netherlands, 67 – 109. Getha K., and S. Vikineswary (2002), “Antagonistic effect of Streptomyces violaceusniger strain G10 on Fusarium oxysporum sp. Cubense race 4: Indirect evidence for role of antibiosis in the antagonistic process”, Journal Microbiology Biotechnology 28, 303 – 310. Hasegawa S., Meguro A., Shimizu M., Nishimura T. and Kunoh H., (2006). “Endophytic Actinomycetes and Their Interactions with Host P lants”. Actinomycetologica 20: 72– 81. Havenga, W., Jager, ES De, Korsten, L. (1999). Factors affecting biocontrol efficacy of Bacillus subtilis against Colletotrichum gloeosporioides. Department of Microbiology and Plant Pathology, University of Pretoria. Hobbs, G., Frazer, C.M., Gardner, D. C. J., Cullum, J. A., and Oliver, S.G., (1989). Appl Microbio Biotechool 31: 272 – 277. Holt J. G., N.R. Krieg, P. H. A. Sneath, J. T. Stale and S. T. Williams (1994). Bergeys manual of determinative bacteriogy, 9th edition, Wiilliams and Wilkins, Baltimore, 787 pages. Huỳnh Thƣ, Bùi Nguyệt Minh Tuyền Đinh Minh Hiệp. (2009). Phân lập xạ khuẩn khảo sát hoạt tính số enzyme thủy phân Streptomyces spp. Trƣờng Đại học Nông Lâm TPHCM. Jae Joo. G., (2005). Purification and characterization of an extracellular chitinase from the antifungal biocontrol agent Streptomyces halstedii. Biotechnology Letters 27: 1483–1486 Jaradat, Z., Dawagreh, A., Ababneh, Q., and Saadoun, I., (2008). Influence of Culture Conditions on Cellulase Production by Streptomyces sp. (Strain J2). Jordan Journal of Biological Sciences (4): 141- 146. Lê Ngọc Trúc Linh. (2011). Phân lập xạ khuẩn đất trồng rau màu tỉnh Đồng Bằng Sông Cửu Long nghiên cứu loại môi trường thích hợp sinh bào tử. Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ Bảo Vệ Thực Vật. Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật. Khoa Nông Nghiệp Và Sinh Học Ứng Dụng. Trƣờng Đại Học Cần Thơ. Lê Thị Bích. (2011). “Đánh giá khả đối kháng xạ khuẩn nấm Fusarium oxysporum f.sp. niveum điều kiện phòng thí nghiệm”. Luận văn tốt nghiệp kỹ sƣ Bảo Vệ Thực Vật. Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật. Khoa Nông Nghiệp Và Sinh Học Ứng Dụng. Trƣờng Đại Học Cần Thơ. Lê Xuân Phƣơng (2008). Vi sinh vật học môi trường. Đại Học Bách Khoa Đà Nẵng. Lee, E. J., Kyo Yeol Hwang, Hoi-Seon Lee, Namhyun Chung (2011). Characterization of a new Streptomyces sp. A1022 as a potential biocontrol agent. Journal of the Korean Society for Applied Biological Chemistry 54(3): 488-493. Lu C.G., Liu W.C., Qiu J.Y., Wang H.M., Liu T. and Liu D.W., (2008). “Identification of an antifungal metabolite produced by a potential biocontrol actinomyces strain A01”. Brazilian Journal of Microbiology 39: 701-707. Mai Thị Phƣơng Anh (1999). Kỹ thuật tròng số loại rau cao cấp, NXB Nông Nghiệp, Hà Nội, 155 trang. Meguro A, Y. Ohmura, S. Hasegawa, M. Shimizu, T. Nishimura and H. Kunoh (2006), “An endophytic actinomycete, Streptomyces sp. MBR-52, that accelerates emergence and elongation of plant adventitious roots”, Actinomycetologica 20, 1-9. Neergaard, E.de., (1997). Methods in Botanical Histopathology. Danish Government instilute of seed pathology for developing countries . Denmark. 216p 40 Ngô Đình Quang Bính (2005), vi sinh vật học công nghiệp, Viện sinh thái tài nguyên sinh vật, trung tâm khoa học tự nhiên vàcông nghệ Quốc gia, Hà Nội, tr. 53 – 71. Ngullie M., L. Daiho and D.N. Upadhyay (2010), “Biological management of fruit rot in the world hottest chilli (Capsicum chinense Jacq)”, Journal of plant protection research 50(3), 269273. Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến, Phạm Văn Ty, (2002). Vi sinh vật học. Nhà xuất Giáo Dục. Hà Nội. trang 39 – 41. Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Nữ Kim Thảo. Các nhóm vi khuẩn chủ yếu. http://vietsciences.free.fr/khaocuu/nguyenlandung/phanloaixakhua n01.htm. 15/ 02/ 2006. Nguyễn Quỳnh Uyển, Vũ Thị Phƣơng, Phan Thị Hà, Nguyễn Huỳnh Minh Quyên Trần Quốc Việt. (2010). “Bƣớc đầu nghiên cứu số tính chất CMCase ngoại bào đƣợc sinh tổng hợp từ chủng xạ khuẩn A-2026”. Tạp chí Khoa học Đại học Quốc Gia Hà Nội. Khoa học Tự nhiên Công nghệ 26: 64-69. Nguyễn Thanh Giàu Nguyễn Trung Long (2009). Nghiên cứu biện pháp áp dụng vi khuẩn vùng rễ Pseudomonas fluorescens 23 1-1 để phòng trị bệnh đốm chảy nhựa thân (Didymella bryoniae) điều kiện đồng. Luật văn tốt nghiệp kỷ sƣ ngành Bảo vệ thực vật. Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng. Trƣờng Đại học Cần Thơ. Nguyễn Thị Nghiêm Nguyễn Thị Quế Phƣơng, 2003. Xác định nhóm loài khả gây hại nấm Colletotrichum spp. gây bệnh thán thư trái ớt. Tạp chí khoa học Đại Học Cần Thơ chuyên ngành Bảo Vệ Thực Vật. Trang 20-21 Nguyễn Thị Thùy Linh (2011). Phòng trị bệnh đốm ớt (Xanthomonas campestris pv. vesicatoria) xạ khuẩn điều kiện in vitro nhà lưới. Luận văn tốt nghiệp kỷ sƣ Bảo vệ thực vật. Bộ môn Bảo vệ thực vật. Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng. Trƣờng Đại học Cần Thơ. Nguyễn Xuân Thành, Nuyễn Bá Hiên, Hoàng Hải Vũ Thị Hoan, (2006). Giáo trình vi sinh vật công nghiệp. Nhà xuất Giáo dục. Ningthoujam, D. S., Kshetri, P., Sanasam S. and Nimaichand, S., (2009). Screening, Identification of Best Producers and Optimization of Extracellular Proteases from Moderately Halophilic Alkalithermotolerant Indigenous Actinomycetes.World Applied Sciences Journal (7): 907916 Phạm Văn Kim (2000), Các nguyên lí bệnh hại trồng, Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng, trƣờng Đại học Cần Thơ, 185 trang. Phạm Văn Kim (2006). Phòng trị sinh học bệnh trồng. Khoa Nông Nghiệp Sinh Học Ứng Dụng, trƣờng Đại học Cần Thơ, 185 trang. rapagdee B., Kuekulvong C. and Mongkolsuk S., (2008). “Antifungal Potential of Extracellular Metabolites Produced by Streptomyces hygroscopicus against Phytopathogenic Fungi”. Int J Biol Sci 4: 330-337. Prescott, Harley, and Klein’s, (2008). Microbiology. New York. pp 589 – 593. Raspberry Root Rot. Applied and Environmental Microbiology 62 (5):1630–1635. Roberst P. D, K, L. pernezny and T.A Kucharek (2009), Anrhracnose cause by Colletotrichum sp.on pepper, Plant pathology Department, Florida Cooperative Extension Service, Institute of Food and Agriculture Sciences, University of Florida, 178 pages. Shanmugaiah, V., Mathivanan, N., Balasubramanian, N. and P.T. Manoharan., (2008). Optimization of cultural conditions for production of chitinase by Bacillus laterosporous MML2270 isolated from rice rhizosphere soil. African Journal of Biotechnology (15): 2562 - 2568. 41 Sharma H., and Parihar L., (2010). “Antifungal activity of extracts obtained from actinomycetes. Journal of Yeast and Fungal Research” 1(10): 197 – 200. Sharma P. D. (2006), Plant pathology, Alpha Science International Ltd., Oxford United Kingdom, Printed in India, 478 pages. Shimizu, M., Yazawa, S., and Yusuke, U., (2009). A promising strain of endophytic Streptomyces sp. for biological control of cucumber anthracnose. J Gen Plant Pathol 75:27–36. Shurtleff, M. C. and Averre III, C. W. (1997). The plant disease clinic and field diagnosis of abiotic diseases. APS press. The American P hytopathological Soceity. St. Paul, Minnesata. 245p. Streptomyces clavuligerus strain mit-1. Brazilian Journal of Microbiology 38:766-772. Streptomyces Strains, Escherichia coli, and Bacillus subtilis. Applied and Environmental Microbiolog. 61 (2): 487–494. Sutton, B. C. (1980). The Coelomycetes (Fungi imperfecti with pycnidia acervuli and stromata), Commonweath Mycological Institute, Kew, UK, 523 - 527. Tan H. M., Cao, L. X., He, Z. F., Su, G. J., Lin, B. and Zhou, S. N. (2006). “Insolation of endophytic actinomycetes from different cultivars of tomato and their activities againts Ralstonia solanacearum in vitro”, World J Microbiol Biotechnol 22, 1275 – 1280. Tô Huỳnh Nhƣ (2012). Đánh giá khả đối kháng hiệu phòng trị xạ khuẩn chủng nấm Colletotrichum sp. ST2 gây bệnh thán thư giống ớt sừng. Luận văn thạc sĩ Bảo vệ Thực vât. Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng. Đại học Cần Thơ. Trần Đức Ba, Lê Phƣớc Hùng, Đỗ Thanh Thủy Trần Thu Hà (2006), Lạnh đông rau xuất khẩu, NXB ĐH Quốc gia, Tp.HCM, tr. 195-215. Trần Khắc Thi, (2000). Kỹ thuật trồng rau sạch, NXB Nông nghiệp, Hà Nội. Valois, D., Fayad, K., Barasubiye, T., Garon, M., ´ C., Brzezinski, R. and C. Beaulieu., (1996). Dery, Võ Hoài Bắc, Lê Hƣơng Thuỷ, Lê Thị Lan Oanh, (2010). Sàng lọc chủng vi sinh vật sinh cellulase sử dụng thủy phân bã thải agar. Viện nghiên cứu thủy sản. http://rimf.org.vn/bantin/tapchi_newsdetail.asp?TapChiID=36&muctin_id=2&news_id=255 Võ Văn Chi (2004), Từ điển thực vật thong dụng – tập 2, NXB Khoa học kỹ thuật, Hà Nộ, tr. 1737. Vũ Triệu Mân (2007a), Giáo trình bệnh chuyên khoa, Trƣờng đại học Nông Nghiệp I, Hà Nội, 233 trang. Vũ Triệu Mân (2007b), Giáo trình bệnh chuyên khoa, Trƣờng đại học Nông Nghiệp I, Hà Nội, 164 trang. Vũ Triệu Mân Lê Lƣơng Tề, (1998). Giáo trình bệnh nông nghiệp. Nhà xuất Nông nghiệp. Hà Nội 42 PHỤ CHƢƠNG Phụ bảng 1: Kết phân tích ANOVA khả đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Collectotrichum spp. thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng CV = 20,05% Độ tự 35 144 179 Tổng bình Trung bình phƣơng bình phƣơng 245,750 7,021 41,700 0,290 287,450 F Prob. 24,247 0,0000 Phụ bảng 2: Kết phân tích ANOVA khả đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Collectotrichum spp. thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng CV = 25,97% Độ tự 35 144 179 Tổng bình Trung bình phƣơng bình phƣơng 348,478 9,985 25,200 0,175 374,678 F Prob. 57,058 0,0000 Phụ bảng 3: Kết phân tích ANOVA về khả đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Collectotrichum spp. thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng CV = 29,93% Độ tự Tổng bình Trung bình phƣơng bình phƣơng 35 144 179 153,381 10,628 164,009 4,382 0,074 F Prob. 59,377 0,0000 Phụ bảng 4: Kết phân tích ANOVA hiệu suất đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Collectotrichum spp. thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng CV = 15,73% Độ tự 35 144 179 Tổng bình Trung bình phƣơng bình phƣơng 1,825 0,052 0,341 0,002 2,166 F Prob. 22,048 0,0000 Phụ bảng 5: Kết phân tích ANOVA hiệu suất đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Collectotrichum spp. thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng CV = 12,29% Độ tự Tổng bình Trung bình phƣơng bình phƣơng 35 144 179 2,720 0,762 3,482 0,078 0,005 F P 14,690 0,0000 Phụ bảng 6: Kết phân tích ANOVA hiệu suất đối kháng chủng xạ khuẩn nấm Collectotrichum spp. thời điểm ngày sau cấy Nguồn biến động Độ tự Nghiệm thức Sai số Tổng CV = 10,69% 35 144 179 Tổng bình Trung bình phƣơng bình phƣơng 4,884 0,140 0,835 0,006 5,719 F P 24,066 0,0000 Phụ bảng : Phân tích phƣơng sai hiệu phòng trị bệnh thán thƣ chủng xạ khuẩn NCT_TG4, GCT_TG9 đối chứng (A) thông qua ba thời điểm xử lý trƣớc, sau, trƣớc+sau (B) nấm Colletotrichum spp. thời điểm NSKCB Nguồn biến động Độ tự (A) (B) (AxB) Sai số Tổng CV = 13,95% 2 27 35 Tổng bình phƣơng 111,433 14,203 71,430 64,770 261,836 Trung bình bình phƣơng 55,716 7,102 17,857 2,399 Ftính Giá trị P 23.2260 2.9604 7.4441 0,0000 0.0688 0.0004 Phụ bảng : Phân tích phƣơng sai hiệu phòng trị bệnh thán thƣ chủng xạ khuẩn NCT_TG4, GCT_TG9 đối chứng (A) thông qua ba thời điểm xử lý trƣớc, sau, trƣớc+sau (B) nấm Colletotrichum spp. thời điểm NSKCB Nguồn biến động (A) (B) (AxB) Sai số Tổng CV = 12,5% Độ tự 2 27 35 Tổng bình phƣơng 1559,213 77,802 232,136 139,794 2008,945 Trung bình bình phƣơng 779,607 38,901 58,034 5,178 Ftính Giá trị P 150,5747 7,5134 11,2088 0,0000 0,0025 0,0000 Phụ bảng : Phân tích phƣơng sai hiệu phòng trị bệnh thán thƣ chủng xạ khuẩn NCT_TG4, GCT_TG9 đối chứng (A) thông qua ba thời điểm xử lý trƣớc, sau, trƣớc+sau (B) nấm Colletotrichum spp. thời điểm NSKCB Nguồn biến động (A) (B) (AxB) Sai số Tổng CV = 9,27% Độ tự 2 27 35 Tổng bình phƣơng 4610,261 143,707 145,454 181,218 5080,640 Trung bình bình phƣơng 2305,131 71,854 36,364 6,712 Ftính Giá trị P 343,4461 10,7056 5,4179 0,0000 0,0004 0,0025 Phụ bảng 10: Kết phân tích ANOVA khả phân giải cellulose chủng xạ khuẩn môi trƣờng CMC 1% thời điểm ngày sau nuôi cấy Nguồn biến động Độ tự Nghiệm thức Sai số Tổng 25 29 Tổng bình Trung bình phƣơng bình phƣơng 63,617 15,904 7,958 0,318 71,575 F P 49,961 0,0000 CV = 13,6% Phụ bảng 11: Kết phân tích ANOVA khả phân giải cellulose chủng xạ khuẩn môi trƣờng CMC 1% thời điểm ngày sau nuôi cấy Nguồn biến động Độ tự Nghiệm thức Sai số Tổng 25 29 Tổng bình Trung bình phƣơng bình phƣơng 163,950 40,988 8,417 0,337 172,367 F P 121,745 0,0000 CV = 7,55% Phụ bảng 12: Kết phân tích ANOVA khả phân giải cellulose chủng xạ khuẩn môi trƣờng CMC 1% thời điểm ngày sau nuôi cấy Nguồn biến động Độ tự Nghiệm thức Sai số Tổng 25 29 CV = 7,55% Tổng bình Trung bình phƣơng bình phƣơng 279,333 69,833 8,208 0,328 287,542 F P 212,698 0,0000 Phụ bảng 13: Kết phân tích ANOVA trung bình khả phân giải cellulose chủng xạ khuẩn môi trƣờng CMC 1% thời điểm 3, 5, ngày sau nuôi cấy Nguồn biến động Nghiệm thức Sai số Tổng CV = 42,42% Độ tự 10 14 Tổng bình Trung bình phƣơng bình phƣơng 74,417 18,604 94,565 9,457 168,982 F P 1,967 0,1757 [...]... kháng với chủng nấm Colletotrichum spp gây bệnh thán thƣ hại gấc trong điều kiện phòng thí nghiệm Gồm 2 thí nghiệm − Thí nghiệm 1a: đánh giá nhanh khả năng đối kháng nhanh của các chủng xạ khuẩn đối với nấm Colletotrichum spp Trong điều kiện phòng thí nghiệm đƣợc thực hiện với không lặp lại − Thí nghiệm 1b: đánh giá khả năng đối kháng của các chủng xạ khuẩn đƣợc chọn lọc ở thí nghiệm 1a với nấm Colletotrichum. .. vi khuẩn đã khử trùng vít bào tử xạ khuẩn chà lên đĩa chứa môi trƣờng MS Dùng đũa cấy vi khuẩn đã khử trùng vít một khuẩn lạc và cấy vào ống nghiệm chứa môi trƣờng MS đổ mặt nghiêng 2.2.2 Thí nghiệm 1: Đánh giá khả năng đối kháng của các chủng xạ khuẩn với nấm Colletotrichum spp gây bệnh thán thƣ hại Gấc trong điều kiện phòng thí nghiệm Mục tiêu thí nghiệm Nhằm tìm ra chủng xạ khuẩn có khả năng đối kháng. .. trừ bệnh thán thƣ trên trái Gấc do nấm Colletotrichum spp gây ra bằng xạ khuẩn trong điều kiện phòng thí nghiệm 18 2.2.4 Thí nghiệm 3: Đánh giá khả năng phân giải cellulose của các chủng xạ khuẩn có triển vọng 19 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 21 3.1 Phân lập và đánh giá khả năng đối kháng của những chủng xạ khuẩn đối với nấm Colletotrichum spp trong điều kiện phòng thí nghiệm ... Bính, 2005) Vì thế đề tài Khảo sát khả năng đối kháng của xạ khuẩn đối với nấm Colletotrichum spp gây bệnh thán thƣ hại gấc trong điều kiện phòng thí nghiệm và nhà lƣới” nhằm mục tiêu tìm ra chủng xạ khuẩn cũng nhƣ thời điểm xử lý cho hiệu quả phòng trị bệnh thán thƣ cao nhất 1 CHƢƠNG 1: LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 1.1 GIỚI THIỆU SƠ LƢỢC VỀ GẤC 1.1.1 Nguồn gốc và phân bố cây Gấc Gấc tên khoa học là Momordica... lập xạ khuẩn trên vƣờn trồng gấc tại 3 tỉnh An Giang, Cần Thơ, Tiền Giang 21 3.1.2 Khả năng đối kháng của những chủng xạ khuẩn đối với nấm Colletotrichum spp trong điều kiện phòng thí nghiệm 24 3.2 Hiệu quả phỏng trừ bệnh trên trái gấc do nấm Colletotrichum spp gây ra bằng xạ khuẩn trong điều kiện in vivo 29 3.3 Khả năng phân giải cellulose của 5 chủng xạ khuẩn. .. TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP 15 2.1 PHƢƠNG TIỆN 15 2.1.1.Trang thiết bị và vật liệu dùng trong thí nghiệm 15 2.2 PHƢƠNG PHÁP 17 2.2.1 Phân lập xạ khuẩn 17 2.2.2 Thí nghiệm 1: Đánh giá khả năng đối kháng của các chủng xạ khuẩn với nấm Colletotrichum spp gây bệnh thán thƣ hại Gấc trong điều kiện phòng thí nghiệm 17 2.2.3 Thí nghiệm 2: Đánh giá hiệu quả phòng trừ bệnh. .. khi phân lập và tuyển chọn đƣợc 2 chủng xạ khuẩn thuộc chi Streptomyces là Đ1 và R1 có hoạt tính kháng nấm mạnh nhất trong tổng số 30 chủng có khả năng kháng nấm Hai chủng Đ1 và R1 có khả năng ức chế đƣợc cả 2 chủng nấm gây bệnh trên chè là CT - 2E và CT - 5X Theo nghiên cứu của Lê Thị Bích (2011) đánh giá khả năng đối kháng của xạ khuẩn đối với nấm Fusarium oxysporum f.sp niveum trong điều kiện in vitro... 2.2.4 Thí nghiệm 3: Đánh giá khả năng phân giải cellulose của các chủng xạ khuẩn có triển vọng  Mục đích Khảo sát khả năng đối kháng của các chủng xạ khuẩn có triển vọng trong quản lí bệnh thán thƣ hại Gấc thông qua cơ chế tiết ra enzyme cellolase Thí nghiệm đƣợc bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với 6 lần lặp lại Mỗi chủng xạ khuẩn đƣợc xem là một nghiệm thức 19  Tiến hành Chuẩn bị nguồn xạ khuẩn: xạ khuẩn. .. Gần đây, xạ khuẩn (Actinomycetes) đƣợc xem là tác nhân có triển vọng trong việc quản lí một số bệnh hại thực vật Các nghiên cứu cho thấy chủng xạ khuẩn Streptomyces sp có khả năng đối kháng với nấm Colletotrichum orbiclare gây bệnh thán thƣ trên ớt và có tiềm năng mạnh mẽ cho việc kiểm soát bệnh thán thƣ trên dƣa leo (Shimizu và ctv., 2008) Xạ khuẩn có khả năng chống lại Fusarium oxysporum gây bệnh thối... số lƣợng xạ khuẩn trong đất cũng thay đổi theo thời gian trong năm Một trong những đặc tính quan trọng nhất của xạ khuẩn là khả năng hình thành chất kháng sinh, 60 – 70% xạ khuẩn đƣợc phân lập từ đất có khả năng sinh chất kháng sinh (Bùi Thị Hà, 2008) 1.4.2 Đặc điểm xạ khuẩn 1.4.2.1 Hình thái và kích thư c của xạ khuẩn Xạ khuẩn là vi khuẩn Gram dƣơng, thƣờng có tỉ lệ GC trong AND cao hơn 55% Trong số . Bảo Vệ Thực Vật với tên đề tài: “KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI NẤM COLLETOTRICHUM SPP. GÂY BỆNH THÁN THƢ HẠI GẤC TRONG ĐIỀU KIỆN PHÕNG THÍ NGHIỆM VÀ NHÀ LƢỚI” Do. THỰC VẬT Tên đề tài: KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI NẤM COLLETOTRICHUM SPP. GÂY BỆNH THÁN THƢ HẠI GẤC TRONG ĐIỀU KIỆN PHÕNG THÍ NGHIỆM VÀ NHÀ LƢỚI Giáo viên. HOÀNG TRỌNG NAM KHẢO SÁT KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG CỦA XẠ KHUẨN ĐỐI VỚI NẤM COLLETOTRICHUM SPP. GÂY BỆNH THÁN THƢ HẠI GẤC TRONG ĐIỀU KIỆN PHÕNG THÍ NGHIỆM VÀ NHÀ LƢỚI Luận văn