Nghiên cứu định lượng viên nén artesunat

B Y T TRNG I HC Dc H NI o ú 03 NGUYN TRNG TUYN NGHIấN CU NH LNG VIấN NẫN ARTESUNAT (KHểA LUN TT NGHIP D c s I HC 1999 - 2004) Ngi hng dn : ThS. Nguyn ỡnh Luyn Ni thc hin : Phũng thớ nghim GMP Trng i hc Dc H Ni Thi gian thc hin: - 5/2004 H NI, 5-2004 M V d M Q l (J) rỳ itiớ ili ith lỷ t Ufaoỏ Lut tụt ngjùiốp t t, tũ i ft ttlifU l tớ/ ii Aut ớiLp tó ớiu bỏu CJLUL exớe tới eo gỡ/l trỳ n bờ m ớt en q ii h lờ p ntựn ầJt'iùốiiq ( he nộn Hir Qti. ớỡhiui dip, HI, ti deitv MII t ltig kớnh trng (1 bat n ớiiớ e li: ầ J h j. ( ỡl tt n < )èJtJt J lt t n Q tới tõ u tỡnh hi/õng dn o giỳp, từ ein t i tven ớxớ trin h thte hiit kh a h i tt tt y . ầJời ổ iit chn th n h cỏm tr eỏe th eố ớèỏỳ tveit ớj bờ m ụn eờTớ ihiAp, ^Deý ext etớ hố CAL ptt th itqh ln i ( ,/ỡtrp o ỏe tlr cờ g/lỳ ivỳttq ớrit ớtó to iu kờt r giỳp, từ ti èrii quới trỡnh tha hin. Uhỳiớ Ut. @ul oớớU t i dein i Li eiớ it ehóL thnh lỏ i ttxl ihói L han h tối, ni ti nớUi ớtó iun t it txtAi t i irtớ Ut quỏ trỡn h lie tớLp o tha hiờn kho/i LuAn. Sinh mu Qiiti ầji'ựtuj ầJtuyặ JfL CH GII CH VIT TT . DHA : Dihydro artemisinin. HPLC : Sc ký lng hiu nng cao. KST : Ký sinh trựng. SKLM : Sc ký lp mng. TCYTTG : T chc Y t th gii. MC LC T VN . . PHN 1: TNG QUAN 1.1.i cng v artemisinin v dn cht .3 1.1.1.Cụng thc cu to ca artemisinin v dn ch t 1.1.2. 1.2. a cng v artesunat Mt s phng phỏp nh lng artemisinin v dn cht .6 1.2.1. nh lng bng phng phỏp SK L M . 1.2.2. Phng phỏp acid-base 1.2.3. Phng phỏp o quang ph hp th vựng t ngoi .7 1.2.4. Phng phỏp o quang ph vựng kh kin . 1.2.5. Phng phỏp sc ký lng hiu nng cao s dng detecter u v .8 1.2.6. Phng phỏp sc ký lng hiu nng cao s dng detecter in hoỏ.9 1.2.7. Cỏc phng phỏp khỏc .9 1.3. i cng v phng phỏp sc ký lng hiu nng cao v phng phỏp o ph hp th vựng t ngoi . 10 1.3.1. Phng phỏp sc ký lng hiu nng c a o 10 1.3.2. Phng phỏp nh lng bng o ph hp th vựng t ngoi 16 PHN 2: THC NGHIM V KấT qu . 19 2.1. Trang thit b, nguyờn liu v hoỏ cht .; . 19 2.1.1. Mỏy múc, dng c 19 2.1.2. Nguyờn liu, hoỏ cht 19 2.2. Phng phỏp thc nghim . . 20 2.2.1. X lý kt qu phõn tớch . 20 2.2.2. Phng phỏp sc ký lng hiu nng c a o . 20 2.2.3. Phng phỏp o quang ph vựng t ngoi . . 30 2.2.4. So sỏnh kt qu nh lng cỏc mu thuc artesunat trờn bng hai phng phỏp: sc ký lng hiu nng cao v o quang ph t ngoi vựng kh kin . 38 2.3. ngh phng phỏp nh lng 41 2.3.1. Phng phỏp sc ký lng hiu nng cao vi detecter u v . -__41 2.3.2. Phng phỏp o quang ph vựng t ngoi . . 41 PHN 3: KT LUN V XUT . 43 TI LIU THAM KHO T VN St rột l bnh xó hi KST Plasmodium gõy qua vt ch trung gian l mui Anopheles. Bnh st rột phỏt trin mnh cỏc vựng khớ hu núng m nh chõu , chõu Phi v chõu M la tinh. Bnh lu hnh a phng v cú th phỏt trin thnh dch vi t l ngi mc bnh ln v t l t vong cao. Theo thng kờ ca TCYTTG nm 1997 cú trờn 100 quc gia nm vựng st rột lu hnh, ú cú Vit Nam. Hn 40% dõn s th gii cú nguy c mc bnh st rột ú hng nm cú t 300 500 triu ngi mc v cú 1,5 - 1,7 triu ngi cht vỡ cn bnh ny [2], [12]. Vit Nam, theo thng kờ ca Vin st rột, riờng nm 2000 c nc xy v dch st rột vi 293016 ngi mc bnh st rột, ú cú 1161 ngi b st rột ỏc tớnh, s ngi t vong st rột l 148 ngi [3]. Hu ht cỏc loi thuc dựng iu tr st rột t trc n ó b KST khỏng thuc nh: Quinin, Primaquin, Cloroquin, Mefloquin, Fansidar . Chớnh vỡ vy vic nghiờn cu tỡm thuc mi cú hiu qu iu tr cao, trỏnh s khỏng thuc ca KST st rột l mt nhim v quan trng ngn nga cn bnh xó hi ny [2], [12]. T nhng nm 70 ca th k XX, cỏc nh khoa hc Trung Quc ó chit xut c t lỏ cõy Thanh cao hoa vng (Artemisia annua L., Asteraceae) hot cht l artemisinin cú tỏc dng iu tr bnh st rột, t hiu qu iu tr cao k c st rột th nóo. Tuy nhiờn t l tỏi phỏt sau dựng cũn cao nờn tỏc dng iu tr ca artemisinin phn no b hn ch. nõng cao tỏc dng chng st rột ca artemisinin t u thp k 80 ca th k 20, cỏc nh khoa hc ó tip tc nghiờn cu v bỏn tng hp thnh cụng mt s dn cht mi t artemisinin nh artesunat, artemether, arteether . cú tỏc dng iu tr tt hn cht gc ct st nhanh, ng thi cú th s dng di nhiu dng. Artesunat l mt dn cht ca artemisinin c s dng nhiu nht hin iu tr st rột c v ngoi nc di dng thuc viờn v thuc tiờm. Artesunat l mt ch phm mi cn phi tip tc nghiờn cu thờm. Trong ú vic nh lng artesunat cng l mt nhng cn phi quan tõm hn na. Gúp phn vo quỏ trỡnh nghiờn cu, chỳng tụi tin hnh thc hin ti Nghiờn cu nh lng viờn nộn artesunat vi mc tiờu c th nh sau: > nh lng viờn nộn artesunat bng phng phỏp o quang ph vựng t ngoi. > nh lng viờn nộn artesunat bng phng phỏp HPLC vi detecter uv theo dc in quc t. > So sỏnh hai phng phỏp xõy dng phng phỏp nh lng viờn nộn artesunat cho phự hp. PHN 1: TNG QUAN 1.1.i cng v artemisinin v dn cht 1.1.1.Cụng thc cu to ca artemisinin v dn cht - Artemisinin l sn phm chit t cõy Thanh cao hoa vng (Artemisia annua L., Asteraceae) cú cng thc cu to nh sau: Artemisinin T artemisinin cỏc nh khoa hc ó nghiờn cu v bỏn tng hp c mt s dn cht sau: CH H Dihydro artemisinin Artemether. R=H R = CH3 Arteether. R=c^5 H OR R = C O C H Ê H 2COOH : Artesunat CH, 1.1.2. cng v artesunat 1.1.2.1. Tớnh cht hoỏ hc Tớnh cht: Artesunat cú dng tinh th hoc bt kt tinh trng, ớt tan nc, tan tt ethanol, aceton, cloroớorm v dung dch kim loóng [23]. Cụng thc phõn t: C19H28Og Trng lng phõn t: 384,43. Nhit núng chy: tnc = - 135c. Nng sut quay cc: [a] pc = + 2,5 n + 3,5 (dung dch lOmg/ml dichloroethane R) [23]. Tờn khoa hc: (3R,5aS,6R,8aS,9R,10S,12R,12aR) - Decahydro-3, 6, trimethyl - 3,12 - epoxy - 12H - pyrano [4,3-j] - 1,2 - benzodioxepin 10 - ol, hydrogen succinat [23]. 1.1.2.2. Bỏn tng hp artesunat Bỏn tng hp artesunat qua giai on [10]: - Kh hoỏ artemisinin thnh DHA. - Ester hoỏ DHA vi anhydrid succinic (hoc acid succinic) thnh artesunat. Giai on 1: Cú nhiu tỏc nhõn kh hoỏ nhng kh hoỏ artemisinin thnh DHA ch cú mt tỏc nhõn c hiu l natri borohydrid. Da trờn nghiờn cu ca Klayman v Brossi, TS. Hu Ngh v cng s ó nghiờn cu v a mt phng phỏp kh artemisinin v DHA vi hiu sut t 93 - 96% v gim ỏng k lng cht kh v dung mụi s dng cho phn ng kh hoỏ. Phn ng kh hoỏ s dng dung mụi l methanol v nhit thp (0-5 C) [10]. DHA Artemisinin Giai oan 2: bỏn tng hp artesunat t DHA cú th theo phng phỏp sau: Phng phỏp 1: Dihydroartemisinin c ester hoỏ thnh artesunat cho tỏc dng vi anhydrid succinic hoc succinyl chlorid vi xỳc tỏc l piridin v 4-dimethyl aminopyridin (DMAP) [1]. Phng phỏp 2: Dihydroartemisinin c ester hoỏ thnh artesunat bng cỏch cho tỏc dng vi acid succinic, xỳc tỏc l - dimethyl aminopyridin (DMAP) v dicyclohexylcacbodiimid (DCC) [1]. Trong ú phng phỏp cho hiu sut cao hn. Phng trỡnh phn ng nh sau: Dihydroartemisinin 1.1.2.3. Artesunat Tỏc dng dc lý Dc ng hc: Sau ung, artesunat c hp thu t 24 - 64% v chuyn hoỏ nhanh thnh DHA, thi gian bỏn thi ca artesunat l khong 41 phỳt. Nng artesunat mỏu rt thp ụi di mc phỏt hin c. thi ca artesunat l 191 240 ml/phỳt/kg [19]. Thi gian bỏn thi ca natri artesunat tiờm tnh mch rt ngn khong 2,7 phỳt, ca DHA l 40 phỳt. Khi tiờm bp thỡ cỏc tr s ny l 29 phỳt vi artesunat v ca DHA l 95 phỳt [17]. Ch nh: Thc hiờn ln nh lng, kt qu c ghi bng 2.10. 2.2.3.4. Kho sỏt tớnh ỳng ca phng phỏp xỏc nh tớnh ỳng ca phng phỏp chỳng tụi tn hnh nh lng bng phng phỏp thờm chun. Cỏch thc tin hnh c thc hin nh sau: Dung dch th: Cõn 20 viờn, tớnh lng trung bỡnh viờn, nghin thnh bt mn. Cõn mt lng bt viờn tng ng khong 100 mg artesunat, cho vo bỡnh nh mc 100 ml. Thờm 70 ml ethanol 90 vo bỡnh nh mc, siờu õm cho tan ht, b sung ethanol 90 cho va n vch v lc u. Lc nhanh dung dch trờn qua giy lc, b 10 ml dch lc u. Ly chớnh xỏc ml dch lc trờn cho ln lt vo cỏc bỡnh nh mc 50 ml c ỏnh s ln lt t n 6. Cõn chớnh xỏc 2,5 mg artesunat chun cho vo ln lt cỏc bỡnh nh mc c ỏnh s t n 6, thờm dung dch NaOH 0,1 N cho va n vch v lc u. Tin hnh thu phõn cỏc dung dch trờn nhit 50 c 60 phỳt. Lm ngui nhanh bng nc lnh. o hp th ca cỏc dung dch trờn vũng 20 phỳt bc súng 289 lnm cc o dy cm. Mu trng l dung dch NaOH 0,1 N c x lý cựng iu kin. Kt qu c ghi bng 2.11. 2.2.3.5. nh lng mt s mu viờn nộn artesunat cỏc xớ nghip nc sn xut Pha mu dung dch th v dung dch chun nh mc 2.2.3.3. Tin hnh thu phõn cỏc dung dch trờn nhit 50 lc 60 phỳt. Lm ngui nhanh bng nc lnh. o hp th ca cỏc dung dch trờn vũng 20 phỳt bc súng 289 nm cc o dy cm. Mu trng l NaOH 0,1 N c x lý cựng iu kin. 32 Thc hin ln nh lng i vi mi mu th, kt qu c ghi bng tng ng (t bng 2.12 n bng 2.15). 2.2.3.6. Kt qu Kho sỏt khong tuyn tớnh ca phng phỏp: Bng 2.9: S ph thuc ca hp th vo nng. dung dch. Nng artesunat 0,025 0,05 0,1 0,2 0,4 0,8 0,1776 0,3356 0,6675 1,2329 2,4660 4,9327 (mg/ml) hp th (D) Nng (mg/ml) Hỡnh 2.3 : th biu din s ph thuc ca hp th vo nng . T th trờn ta thy: - Phng trỡnh hi quy v mi tng quan gia hp th ca dung dch v nng dung dch: y = 6,121 lx + 0,0286 - H s tng quan: R2 = 0,9999. Kt lun: v - H s tng quan ca ng hi quy gn bng 1. - Tt c cỏc giỏ tr o u nm trờn ng hi quy hoc phõn b ng u v hai phớa ca ng hi quy. Vy: Phộp o l tuyn tớnh khong nng t 0,025 n 0,8 mg/ml. 33 Kho sỏt lp li ca phng phỏp: Bng 2.10. Kho sỏt lp li ca phng phỏp. STT Lng bt hp th Hm lng Hm lrg Cỏc s liu cõn Mt (Di) % viờn viờn thng kờ (C%) Xi(mg/v) (mg) 702,6 0,6634 100,79 50,39 X = 49,98 702,4 0,6588 100,12 50,06 c % = 99,96 701,6 0,6512 99,08 49,54 ụ = 0,37 702,6 0,6614 100,49 50,12 701,9 0,6529 99,31 49,65 Mc= 130,4 (mg); Dc = 0,6540; m = 50 (mg/v); RSD%= 0,74 x=49,98 0,46 Mv = 270 (mg); H = 99,15% t(0> ; ) = 2,78; = 0,46. 95 T kt qu bng 2.10 ta cú: - Giỏ tr trung bỡnh: X = 49,98. - lch chun: = 0,37. - Khong tin cy ca giỏ tr trung bỡnh: = 0,46. => X = 49,98 0,46. - lch chun tng i: RSD% = 0,74 < 2%. Vy phng phỏp cú lp li cao vi mc tin cy p = 0,95. Kho sỏt tớnh ỳng ca phng phỏp: Bng 2.11. Kho sỏt tớnh ỳng ca phng phỏp. ST Lng Lng hp th Lng T l thu T artesunat cú artesunat thờm (Di) artesunat tỡm hi X(%) sn (mg) vo (mg) 0,1 0,051 0,7832 0,0503 98,62 0,1 0,052 0,7953 0,0523 100,57 0,1 0,051 0,7918 0,0520 101,96 0,1 0,053 0,7931 0,0522 98,49 0,1 0,054 0,8036 0,0543 100,56 Dc = 0,5209; li (mg) x% = 100,04; t( , ; ) = 2,78; V ụ = 1,47; RSD% = 1,47 = 1,83; x% = 100,04 1,83%. Qua kt qu bng 2.11 trờn cho thy: - Giỏ tr trung bỡnh: X = 100,04%. - lch chun: =1,47. - lch chun tng i: RSD% = 1,47. S khỏc gia lng thờm vo v lng tỡm li l khụng cú ý ngha thng kờ vi mc tin cy p = 0,95. Vy phng phỏp cho kt qu ỳng. Kt lun: Vi tớnh ỳng, tớnh chớnh xỏc cao v vi s tuyn tớnh cht ch gia hp th ca dung dch vi nng artesunat khong ó kho sỏt cho thy phng phỏp ny cú th ỏp dng nh lng viờn nộn artesunat. 35 Kt qu nh lng mt s mu viờn nộn artesunat cỏc c s nc sn xut. * Mu ca cụng t c phn dc phm Traphaco: Bng 2.12: Kt qu nh lng mu ca cụng ty Traphaco. Lng bt hp th Hm lng Hm lng Cỏc s liu cõn Mt (mg) (Di) % viờn (C%) viờn Xi(mg/v) thng kờ 696,5 0,6731 99,02 49,51 X = 49,78 696,4 0,6719 98,86 49,43 STT c % = 99,56 s, 696,5 0,6747 99,25 49,63 696,8 0,6878 101,14 50,57 696,7 0,6768 99,53 49,78 ụ = 0,46 RSD% - 0,92 x=49,78 0,57 Mc= 130,2 (mg); Dc = 0,6753; m = 50 (mg/v); Mv = 268 (mg); H = 99,15% t( , ; ) = 2,78; = 0,57. * Mu ca xớ nghip dc phm 120 (Apharma): Bng 2.13: Kt qu nh lng mu ca xớ nghip 120. STT Hm lng Hm lng Lng bt hp cõn Mt (mg) th (D) 785,2 0,6884 99,71 49,86 785,5 0,6936 100,43 50,22 785,0 0,6813 98,72 49,36 785,3 0,6892 99,82 49,91 785,6 0,7013 101,54 50,77 Cỏc s liu % viờn (C%) viờn Xi(mg/v) thng kờ X = 50,02 c %= 100,04 s = 0,52 RSD% = 1,04 x=50,02 0,65 Mc= 130,5 (mg); Dc = 0,6871; Mv = 302 (mg); H = 99,15% m = 50 (mg/v); t(0;95;4) = 2,78; = 0,65'. 36 * Mu ca cụng ty c phn hoỏ dc phm M ekophar: Bng 2.14: Kt qu nh lng mu ca cụng ty Mekopha. Lng bt hp Hm lng Hm lng Cỏc s liu cõn M (mg) th (Di) % viờn (C%) viờn x,(mg/v) thng kờ 871,1 0,6729 98,90 49,45 X = 49,69 871,4 0,6782 99,65 49,83 c % = 99,37 871,6 0,6823 100,23 50,12 s = 0,30 871,2 0,6759 99,33 49,67 RSD% = 0,60 870,9 0,6715 98,72 49,36 STT Mc= 130,0 (mg); Dc = 0,6745; m = 50 (mg/v); x=49,69 0,37 Mv = 335 (mg); H = 99,15% t(0>95;4) = 2,78; e = 0,37. * Mu ca cụng ty Dc khoa: Bng 2.15: Kt qu nh lng mu ca cng ty Dc khoa. Lng bt hp STT cõn Mt (mg) th (D) 702,5 0,6940 99,28 50,09 X = 50,04 702,4 0,6939 99,27 50,09 c % = 99,60 702,5 0,6885 98,78 49,69 = 0,20 702,7 0,6858 100,41 50,21 Hm lng Hm lng % viờn (C%) viờn Xj (mg/v) Cỏc s liu thng kờ RSD% - 0,39 x=50,04 0,25 702,6 0,6948 100,28 Mc= 130,2 (mg); Dc = 0,6874; m = 50 (mg/v); 50,14 Mv = 270 (mg); H = 99,15% t( , ; ) = 2,78; = 0,25, 37 Kt lun: Theo quy nh ca Dc in quc t (2003), hm lng artesunat phi t c nng nm khong 90% - 110% so vi hm lng ghi trờn nhón. Cn c vo kt qu nh lng trờn, cú th kt lun cỏc mu thuc cỏc xớ nghip trờn sn xut u t tiờu chun theo quy nh ca Dc in v c s dng iu tr st rột. 2.2.4. So sỏnh kt qu nh lng cỏc mu thuc artesunat trờn bng hai phng phỏp: Sc ký lng hiu nng cao v o quang ph t ngoi vựng kh kin 2.2.4.1.Nguyờn tc so sỏnh [9] So sỏnh chớnh xỏc: Dựng tiờu chun F (So sỏnh F vi F0): F = |4 (8[> s2) Trong ú : Đ : lch chun ca phng phỏp 1. v : lch chun ca phng phỏp 2. Tra bng tỡm F0 vi a = 0,05; Nu F < F0, s sai khỏc v chớnh xỏc l khụng cú ý nghathng kờ. Nu F > F0, thỡ hai phng phỏp cú chớnh xỏc khỏc cú ý ngha. So sỏnh hai giỏ tr trung bỡnh: So sỏnh hiu X ^-X ^ vi e v s2 c tớnh theo cụng thc: e i = ta, n-Ss. Trong ú: tan : xỡ : Giỏ tr trung bỡnh ca phng phỏp 1. X2 : Giỏ tr trung bỡnh ca phng phỏp 2. tra bng vi a = , ; n = 1 + n - . Sụ c tớnh theo cụng thc: 38 n + n2-2 X ' 1-----1----1 ' vni n2> Nu Xj - x < Si thỡ cú ngha l X, v X2 phự hp vi ngha l cựng i din cho mt giỏ tr thc. v Nu X, - X > Si thỡ cú ngha l X, v X khụng phự hp (cú th mt hai giỏ tr hoc c hai cú sai s). .2 .4 .2 .S0 sỏnh chớnh xỏc v hai giỏ tr trung bỡnh ca hai phng phỏp i vi cỏc mu c th Mu ca Traphaco: Si = 0,53; 2= 0,46; x > 49,45; x ; = 49,78; a = 0,05; n1 = n2 = 5; F0 = 6,39; t(095;9) = 2,26; s = 0,16; = 0,36; Ta cú: F = 1,33 = 0,33 Kt lun: F < F0 tc l hai phng phỏp cú chớnh xỏc nh vi tin cy p = 0,95. x , - x 2< ngha l giỏ tr trung bỡnh ca hai phng phỏp khỏc khụng cú ý ngha thng kờ mc tin cy p = 0,95. Mu ca Mekopha: l = 0,42; s2= 0,30; a = 0,05; = 49,74; xĂ = 49,69; n1 = n2 = 5; F0 = 6,39; t(095.9) = 2,26; Ta cú: F = 1,96 X^-XT = ,0 39 s5 = 0,23; ! = 0,52; Kt lun: F < F0 tc l hai phng phỏp cú chớnh xỏc nh vi tin cy p = 0,95. X, - X < 0! ngha l giỏ tr trung bỡnh ca hai phng phỏp khỏc khụng cú ý ngha thng kờ mc tin cy p = 0,95. Mu ca xớ nghip 120: ễ! = 0,69; 2= 0,52; x ; = 49,73; xĂ = 50,02; a = 0,05; ĩ! = n2 = 5; F0 = 6,39; t(095;9) = 2,26; s6 = 0,39; Sj = 0,88; Ta cú: F = 1,76 XĂ"-XĂ| = ,2 Kt lun: F < F0 tc l hai phng phỏp cú chớnh xỏc nh vi V . tin cy p = 0,95. X, - X , < S ngha l giỏ tr trung bỡnh ca hai phng phỏp khỏc khụng cú ý ngha thng kờ mc tin cy p = 0,95. Mu ca cụng ty Dc khoa: ụi = 0,30; ụ2= 0,20; x ; = 49,99; x ; = 50,04; a =0,05; n1= n2 = 5; F0 = 6,39; t(095.9) = 2,26; Sụ = 0,16; Si = 0,36; Ta cú: F = 2,25 x , - x = 0,05 Kt lun: F [...]... nhau giữa lượng thêm vào và lượng tìm lại là không có ý nghĩa thống kê với mức tin cậy p = 0,95 Vậy phương pháp cho kết quả đúng Kết luận: Với tính đúng, tính chính xác cao và với sự tuyến tính chặt chẽ giữa diện tích píc thu được với nồng độ artesunat trong khoảng đã khảo sát cho thấy phương pháp này có thể áp dụng để định lượng viên nén artesunat • Kết quả định lượng một số mẫu viên nén artesunat. .. 2.2.2.8.Kết quả • Kết quả định lượng artesunat chuẩn thứ cấp: 24 Bảng 2.1 Kết quả định lượng artesunat chuẩn thứ cấp Khối lượng bột Diện tich píc Hàm lượng đã cân rrii(mg) Si artesunat c% 1 150,1 1361684 99,20 2 150,2 1361081 99,09 3 150,4 1364268 99,19 4 150,3 1363087 99,17 5 150,2 1361493 99,12 mc 150,0 1352547 c %= 99,15% STT Với kết quả định lượng c % = 99,15%, chúng tôi đã chọn artesunat do trường Đại... nêu trong mục 2.2.2.2 Lượng artesunat (X) trong một viên được tính theo công thức: x = St-Cc -Mv xH Sc.Mi 25 Trong đó : s, Sc : diện tích píc của dung dịch thử : diện tích píc của dung dịch chuẩn Cc : nồng độ của dung dịch artesunat chuẩn (mg/ml) Mị : khối lượng bột viên đã cân (mg) Mv : khối lượng trung bình viên (mg) H : Hàm lượng % của artesunat chuẩn Thực hiện 5 lần định lượng, kết quả được ghi... đã nêu ở mục 2.2.2.2 Thực hiện 5 lần định lượng, kết quả được ghi ở bảng 2.4 2.2.2.7 Định lượng một s ố mẫu viên nén artesunat do cấc cơ sở trong nước sản xuất Pha dung dịch chuẩn và dung dịch thử như trong mục 2.2.2.5 Tiến hành chạy sắc ký các dung dịch trên trong cùng điều kiện đã nêu ở mục 2.2.2.2 Thực hiện 5 lần định lượng đối với mỗi mẫu thử, kết quả định lượng được ghi trong các bảng (từ bảng... trong cùng điều kiện với các dung dịch trên Nồng độ artesunat có trong 1 viên được tính theo công thức: c% = Trong đó Dt Mc — xH D c Mt m Dt Độ hấp thụ của dung dịch thử Dc Độ hấp thụ của dung dịch chuẩn m; Khối lượng trung bình viên (mg) m Hàm lượng của viên (mg/v) Mt Khối lượng bột đã cân (mg) Mc Khối lượng artesunat chuẩn đã cân (mg) H Hàm lượng artesunat chuẩn 31 v ... nén artesunat • Kết quả định lượng một số mẫu viên nén artesunat do các cơ sở trong nước sản xuất 27 * Viên nén artesunat do công ty Traphaco sản xuất: Bảng 2.5: Kết quả định lượng mẫu của công ty Traphaco sản xuất Lượng bột Diện tích Hàm lượng Hàm lượng % Các số liệu cân M; (mg) píc Si viên Xj (mg/v) viên (C%) thống kê 1 668,5 2229732 49,61 99,22 ' 2 670,0 2261091 50,12 100,24 c % '= 98,90 3 663,5 2196079... = 2,78; 8 = 0,66 0 9 5 4 * Viên nén artesunat do công ty Mekopha sản xuất: v Lượng bột Diện tích Hàm lượng Hàm lượng % Các số liệu cân M; (mg) píc s, viên X; (mg/v) viên (C%) thống kê 1 536,0 2271951 49,89 99,78 X = 49,74 2 536,8 2262437 49,45 98,90 c% = 99,49 3 533,5 2228699 49,17 98,34 4 536,1 2279693 50,06 100,12 5 533,6 2273119 50,15 o o u > o Bảng 2.6: Kết quả định lượng mẫu của công ty Mekopha... 0,42 RSD% = 0,84 x=49,89 ± 0,52 Mv = 268 (mg); H = 99,15% Cc= 4,02 (mg/ml); t(095;4) = 2,78; 8 = 0,52 > 28 * Viên nén Artesunat xí nghiệp 120 sản xuất: Bảng 2.7: Kết quả định lượng mẫu của xí nghiệp 120 Lượng bột Diện tích Hàm lượng Hàm lượng Các số liệu cân Mị (mg) píc S; viên Xi (mg/y) % viên (C%) thống kê 1 603,0 2132588 48,66 98,32 X = 49,73 2 604,8 2201288 50,02 100,04 3 608,8 2208831 49,78 99,56... 2188989; m = 50 (mg/v); 50,56 101,12 Mv = 302 (mg); H = 99,15% Cc= 4,02 (mg/ml); t(0,95;4) = 2,78; 8 = 0,86 * Viên nén Artesunat do công ty Dược khoa sản xuất: Bảng 2.8: Kết quả định lượng mẫu của công ty Dược khoa Lượng bột Diện tích Hàm lượng Hàm lượng % Các số liệu cân Mị (mg) píc Si viên Xi (mg/v) viên (C%) thống kê 1 536,1 2111103 49,58 99,16 X = 49,99 2 543,9 2162031 49,84 99,68 c % = 99,98 3 536,3... khí để định lượng artemisinin và dẫn chất - Có thể định lượng artemisinin và dẫn chất của nó bằng phương pháp iod, phương pháp cực phổ, phương pháp cực phổ dao động Từ các phương pháp định lượng trên, sau khi phân tích và dựa vào các phương tiện hiện có chúng tôi đã chọn phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao với detecter u v và phương pháp đo độ hấp thụ vùng tử ngoại để tiến hành nghiên cứu định lượng . tài Nghiên cứu định lượng viên nén artesunat với mục tiêu cụ thể như sau: > Định lượng viên nén artesunat bằng phương pháp đo quang phổ vùng tử ngoại. > Định lượng viên nén artesunat bằng. tục nghiên cứu thêm. Trong đó việc định lượng artesunat cũng là một trong những vấn đề cần phải quan tâm hơn nữa. Góp phần vào quá trình nghiên cứu, chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài Nghiên. BỘ Y TẾ ■ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI ĩ o ó 03 NGUYỄN TRỌNG TUYẾN NGHIÊN CỨU ĐỊNH LƯỢNG ■ ■ VIÊN NÉN ARTESUNAT (KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược sĩ ĐẠI HỌC 1999 - 2004) Người hướng dẫn :