so sánh phương pháp điều chế và ảnh hưởng của keratin thủy phân lên các dạng tóc hư tổn

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC TIÊN TIẾN SO SÁNH PHƢƠNG PHÁP ĐIỀU CHẾ VÀ ẢNH HƢỞNG CỦA KERATIN THỦY PHÂN LÊN CÁC DẠNG TÓC HƢ TỔN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN TS. BÙI THỊ MINH DIỆU SINH VIÊN THỰC HIỆN TRẦN MINH TRANG MSSV: 2102406 LỚP: CNSHTT K36 Cần Thơ, Tháng 11/2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC TIÊN TIẾN SO SÁNH PHƢƠNG PHÁP ĐIỀU CHẾ VÀ ẢNH HƢỞNG CỦA KERATIN THỦY PHÂN LÊN CÁC DẠNG TÓC HƢ TỔN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN TS. BÙI THỊ MINH DIỆU SINH VIÊN THỰC HIỆN TRẦN MINH TRANG MSSV: 2102406 LỚP: CNSHTT K36 Cần Thơ, Tháng 11/2014 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƢỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN Bùi Thị Minh Diệu Trần Minh Trang DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày tháng năm 2014 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG LỜI CẢM TẠ Trong suốt trình thực luận văn tốt nghiệp, cố gắng, nỗ lực thân, nhận giúp đỡ động viên từ nhiều phía. Tôi xin gửi lời cám ơn chân thành đến: Ban Lãnh đạo, quý Thầy, Cô – Viện Nghiên cứu & Phát triển Công nghệ Sinh học tận tình giảng dạy truyền đạt kiến thức, hỗ trợ sở vật chất, trang thiết bị tạo điều kiện thuận lợi suốt trình học tập thực luận văn. Cô Huỳnh Hương Liên, Thầy Trần Sỹ Nam, đặc biệt TS. Bùi Thị Minh Diệu - giáo viên hướng dẫn cô Trần Thị Xuân Mai - cố vấn học tập khóa 36 tận tình dẫn giúp đỡ suốt trình thực luận văn. Các bạn khóa, anh chị bạn làm việc phòng thí nghiệm Sinh học Phân tử Thực vật, phòng thí nghiệm Protein & enzyme tạo điều kiện trang thiết bị chia sẻ kinh nghiệm cho tôi. Cô Thảo – chủ tiệm tóc, bạn: Nguyệt, Như, Thuyền hỗ trợ việc tìm xử lý mẫu tóc. Cuối cùng, vô biết ơn giúp đỡ, động viên gia đình tinh thần vật chất để hoàn thành khóa học, đề tài luận văn tốt nghiệp. Kính chúc quý Thầy Cô, Anh Chị bạn dồi sức khỏe thành công sống. Xin trân trọng cảm ơn!. Cần Thơ, ngày tháng năm 2014 Sinh viên thực Trần Minh Trang Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT TÓM LƢỢC Một lượng lớn chất thải lông từ ngành công nghiệp chế biến thịt gia súc, gia cầm gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến môi trường. Vì vậy, việc xử lý tái sử dụng chất thải từ lông cách hiệu vấn đề cấp bách cần giải quyết. Đã có nhiều nghiên cứu việc thủy phân lông tạo thành keratin thủy phân, protein hòa tan quan trọng để bổ sung vào thức ăn chăn nuôi. Bên cạnh đó, ứng dụng keratin thủy phân vào sản phẩm chăm sóc da, tóc quan tâm nghiên cứu. Đề tài ” So sánh phương pháp điều chế ảnh hưởng keratin thủy phân lên dạng tóc hư tổn” nghiên cứu để so sánh khả phân hủy bột lông tạo keratin thủy phân vi khuẩn (2 dòng vi khuẩn Bacillus megaterium VL2, Bacillus cereus K13) enzyme bromelain; đồng thời so sánh ảnh hưởng keratin thủy phân lên hồi phục dạng tóc hư tổn (tóc duỗi, tóc nhuộm, tóc uốn, tóc cháy). Kết đề tài cho thấy khả phân hủy hàm lượng keratin thủy phân tạo từ phân hủy dòng vi khuẩn Bacillus megaterium VL2 ngày đạt cao (71,85%; 112,404 mg) khác biệt so với enzyme bromelain (46,76%; 71,485 mg). Kết khảo sát ảnh hưởng keratin thủy phân lên dạng tóc hư tổn cho thấy tóc duỗi, tóc nhuộm tóc cháy có phục hồi rõ rệt ngâm keratin thủy phân vi khuẩn so với đối chứng (-); không khác biệt nhiều so với đối chứng (+). Khi ngâm mẫu tóc với keratin thủy phân enzyme bromelain tóc phục hồi. Tuy nhiên, với mẫu tóc bình thường mẫu tóc uốn khác biệt nhiều so với đối chứng (-). Như vậy, keratin thủy phân tạo từ chất thải lông bị phân hủy vi khuẩn có tiềm ứng dụng sản phẩm chăm sóc tóc hư tổn. Từ khóa: enzyme, keratin thủy phân, tóc hư tổn, vi khuẩn Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến i Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT MỤC LỤC PHẦN KÝ DUYỆT LỜI CẢM TẠ . TÓM LƢỢC i MỤC LỤC . ii DANH SÁCH BẢNG iv DANH SÁCH HÌNH v TỪ VIẾT TẮT vi CHƢƠNG I. GIỚI THIỆU .1 1.1. Đặt vấn đề .1 1.2. Mục tiêu đề tài .1 CHƢƠNG II. LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU .2 2.1. Sơ lược chất thải chứa keratin 2.2. Tổng quan keratin .3 2.3. Vi sinh vật phân hủy keratin .5 2.4. Cấu trúc tóc .8 2.5. Sơ lược keratin thủy phân dưỡng tóc .9 2.6. Một số nghiên cứu keratin thủy phân .9 CHƢƠNG III. PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 3.1. Phương tiện .13 3.1.1. Thiết bị dụng cụ thí nghiệm…………………………………………….13 3.1.2. Vật liệu thí nghiệm……………………………………………………… .13 3.1.3. Hóa chất……………………………………………………………………14 3.1.4. Địa điểm thí nghiệm……………………………………………………….15 3.1.5. Thời gian thực hiện……………………………………………………… .15 3.2. Phương pháp nghiên cứu .15 3.2.1. Thu mẫu chuẩn bị mẫu vi khuẩn giống…………………………………15 3.2.2. Chuẩn bị chất……………………………………………………… ….16 3.2.3. Điều chế keratin thủy phân từ vi khuẩn phân giải keratin…………………16 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến ii Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT 3.2.4. Điều chế keratin thủy phân phương pháp sinh hóa………………… 18 3.2.5. Khảo sát khả hồi phục tóc hư tổn bổ sung keratin thủy phân.18 3.2.6. Chỉ tiêu theo dõi………………………………………………………….20 2.2.7. Phương pháp xử lý số liệu…………………………………………………23 CHƢƠNG IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .24 4.1. Điều chế keratin thủy phân từ vi khuẩn phân giải keratin 24 4.1.1. Khảo sát khả phân hủy chất vi khuẩn hàm lượng protein hòa tan sinh ra…………………………………………………………………………24 4.1.2. Định tính acid amin chứa lưu huỳnh keratin thủy phân thô từ vi khuẩn phân giải keratin………………………………………………………… .28 4.2. Điều chế keratin thủy phân phương pháp sinh hóa 29 4.2.1. Khả phân hủy chất enzyme hàm lượng protein hòa tan sinh ra………………………………………………………………………………….29 4.2.2. Định tính acid amin chứa lưu huỳnh keratin thủy phân thô từ enzyme……………………………………………………………………………30 4.3. Khảo sát khả hồi phục tóc hư tổn bổ sung keratin thủy phân 30 4.3.1. Đánh giá cảm quan……………………………………………………… .31 4.3.2. Độ ẩm tóc…………………………………………………………… .35 4.3.3. Cấu trúc tóc……………………………………………………………38 CHƢƠNG V. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .40 5.1. Kết luận .40 5.2. Đề nghị 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO .41 PHỤ LỤC . Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến iii Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT DANH SÁCH BẢNG Bảng 1. Nguồn gốc số chủng vi khuẩn phân hủy lông Bảng 2. Thành phần hóa chất môi trường đặc .14 Bảng 3. Thành phần hóa chất môi trường lỏng 14 Bảng 4. Thành phần hóa chất môi trường tăng sinh khối 15 Bảng 5. Xây dựng đường chuẩn bradford. 21 Bảng 6. Khả phân hủy loại chất dòng vi khuẩn hàm lượng protein hòa tan sinh sau ngày nuôi cấy. 24 Bảng 7. Khả phân hủy hàm lượng protein hòa tan sinh cho bromelain phân hủy bột lông gà. 29 Bảng 8. Đánh giá cảm quan độ bóng tóc. .31 Bảng 9. Đánh giá cảm quan màu sắc tóc. .32 Bảng 10. Đánh giá cảm quan độ suông mềm mượt tóc. 34 Bảng 11. Độ ẩm tóc ngâm mẫu tóc vào keratin thủy phân. .36 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến iv Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT DANH SÁCH HÌNH Hình 1. Cấu trúc keratin. .3 Hình 2. Mô hình α-keratin, β-keratin cầu nối disulfide. Hình 3. Cấu trúc tóc Hình 4. Biểu đồ ảnh hưởng tương tác chủng vi khuẩn chất đến tỉ lệ phân hủy. .26 Hình 5. Biểu đồ ảnh hưởng tương tác chủng vi khuẩn chất đến hàm lượng protein hòa tan sinh ra. 27 Hình 6. Dung dịch keratin thủy phân từ vi khuẩn trước sau phản ứng folia 28 Hình 7. Dung dịch keratin thủy phân từ enzyme trước sau phản ứng folia .30 Hình 8. Biểu đồ ảnh hưởng tương tác mẫu tóc keratin thủy phân đến độ ẩm tóc. .37 Hình 9. Cấu trúc tóc chụp sem 39 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến v Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT TỪ VIẾT TẮT - SEM: Scanning Electron Microscope - CV: Coefficient of Variation Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến vi Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT Phụ lục 2. Các số liệu thí nghiệm Phụ lục 2.1. Kết điều chế keratin thủy phân từ vi khuẩn phân giải keratin Bảng 12. Kết hiệu suất phân hủy theo tƣơng tác chủng vi khuẩn chất sau ngày nuôi cấy Hiệu suất phân hủy (%) TT Cơ chất Vi khuẩn Lần Lần Lần Trung bình Đ/C K13 T 0.79 1.85 1.45 1.36 Đ/C K13 LH 2.05 2.24 2.31 2.20 Đ/C K13 LG 2.14 1.89 2.02 1.99 Đ/C VL2 T 1.17 1.73 1.63 1.51 Đ/C VL2 LH 2.77 3.83 3.46 3.35 Đ/C VL2 LG 3.05 2.29 2.74 2.69 K13 T 20.69 23.08 26.17 23.31 K13 LH 60.27 64.40 69.38 64.68 K13 LG 62.50 56.13 59.80 59.48 10 VL2 T 27.56 24.56 22.27 24.80 11 VL2 LH 57.18 56.01 55.85 56.35 12 VL2 LG 71.49 71.94 72.12 71.85 Bảng 13. Kết hàm lƣợng protein hòa tan theo tƣơng tác chủng vi khuẩn chất TT Vi khuẩn Hàm lượng OD Cơ protein hòa tan chất L1 L2 L3 Trung bình (mg) Đ/C K13 T 1.107 1.068 1.074 1.083 4.484 Đ/C K13 T 1.095 1.083 1.061 1.080 3.799 Đ/C K13 T 1.088 1.072 1.096 1.085 4.505 Đ/C K13 LH 1.100 1.062 1.091 1.084 5.114 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Trung bình 4.263 5.338 Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT Đ/C K13 LH 1.071 1.095 1.104 1.090 5.218 Đ/C K13 LH 1.118 1.096 1.076 1.097 5.681 Đ/C K13 LG 1.073 1.085 1.101 1.086 4.911 Đ/C K13 LG 1.100 1.060 1.084 1.081 4.604 Đ/C K13 LG 1.108 1.073 1.092 1.091 5.030 10 Đ/C VL2 T 1.057 1.096 1.104 1.086 4.433 11 Đ/C VL2 T 1.110 1.063 1.085 1.086 4.722 12 Đ/C VL2 T 1.069 1.095 1.099 1.088 4.292 13 Đ/C VL2 LH 1.089 1.093 1.146 1.109 6.728 14 Đ/C VL2 LH 1.097 1.109 1.149 1.118 7.304 15 Đ/C VL2 LH 1.102 1.117 1.105 1.108 7.580 16 Đ/C VL2 LG 1.130 1.045 1.157 1.111 7.319 17 Đ/C VL2 LG 1.108 1.096 1.091 1.098 6.228 18 Đ/C VL2 LG 1.072 1.107 1.144 1.108 7.470 19 K13 T 1.581 1.631 1.629 1.614 57.089 20 K13 T 1.551 1.547 1.447 1.515 51.354 21 K13 T 1.579 1.558 1.567 1.568 51.452 22 K13 LH 1.675 1.640 1.715 1.677 110.479 23 K13 LH 1.418 1.451 1.391 1.420 87.150 24 K13 LH 1.582 1.463 1.520 1.522 100.056 25 K13 LG 1.506 1.445 1.463 1.471 89.672 26 K13 LG 1.532 1.498 1.509 1.513 100.274 27 K13 LG 1.535 1.501 1.539 1.525 92.520 28 VL2 T 1.752 1.732 1.745 1.743 62.452 29 VL2 T 1.470 1.599 1.577 1.549 52.813 30 VL2 T 1.667 1.606 1.482 1.585 57.716 31 VL2 LH 1.526 1.517 1.444 1.496 83.097 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến 4.848 4.482 7.204 7.006 53.299 99.228 94.155 57.660 84.363 Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT 32 VL2 LH 1.469 1.508 1.483 1.487 79.573 33 VL2 LH 1.604 1.548 1.492 1.548 90.419 34 VL2 LG 1.614 1.672 1.595 1.627 114.332 35 VL2 LG 1.574 1.660 1.685 1.640 107.899 36 VL2 LG 1.537 1.655 1.590 1.594 114.980 112.404 Phụ lục 2.2. Kết điều chế keratin thủy phân phƣơng pháp sinh hóa. Bảng 14. Kết hiệu suất phân hủy bromelain bột lông gia cầm Hiệu suất phân hủy (%) TT Mẫu Lần Lần Lần Trung bình Đối chứng 8.32 10.54 9.43 9.43 Mẫu 46.92 44.75 48.62 46.76 Bảng 15. Kết hàm lƣợng protein sinh cho bromelain phân hủy bột lông gia cầm TT Mẫu OD Hàm lượng protein L1 L2 L3 Trung bình hòa tan (mg) Đ/C 1.550 1.625 1.688 1.621 38.952 Đ/C 1.652 1.652 1.668 1.657 41.438 Đ/C 1.683 1.590 1.668 1.647 40.731 Mẫu 1.597 1.488 1.558 1.548 67.869 Mẫu 1.545 1.513 1.679 1.579 72.157 Mẫu 1.573 1.578 1.688 1.613 76.809 Enzyme 1.363 1.330 1.367 1.353 0.794 Trung bình 40.374 72.278 0.794 Phụ lục 2.3. Kết khảo sát khả hồi phục tóc hƣ tổn bổ sung keratin thủy phân. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT Bảng 16. Kết đánh giá cảm quan độ bóng tóc. Đơn vị: phiếu Mẫu tóc Duỗi Duỗi Duỗi Duỗi Nhuộm Nhuộm Nhuộm Nhuộm Uốn Keratin thủy phân ĐC Từ Vi khuẩn Lặp lại Rất bóng Khá bóng Ít bóng Không bóng 12 12 16 13 19 10 12 12 16 11 13 14 19 26 18 17 23 18 16 18 19 16 15 12 13 12 13 14 14 11 15 18 23 Từ enzyme Thương mại ĐC Từ Vi khuẩn Từ enzyme Thương mại ĐC Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Uốn Uốn Uốn Cháy Cháy Cháy Cháy Bình thường Bình thường Từ Vi khuẩn Từ enzyme Thương mại ĐC Từ Vi khuẩn Từ enzyme Thương mại ĐC Từ Vi khuẩn Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Trường ĐHCT 10 17 11 17 15 11 15 12 10 18 15 14 18 12 15 17 10 15 17 12 14 21 19 10 14 15 10 17 12 11 17 19 14 10 12 15 13 14 10 17 12 20 Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Bình thường Bình thường Từ enzyme Thương mại Trường ĐHCT 14 15 14 15 15 12 12 10 16 13 15 15 11 16 13 Bảng 17. Kết đánh giá cảm quan màu sắc tóc. Đơn vị: phiếu Mẫu tóc Duỗi Duỗi Duỗi Duỗi Nhuộm Nhuộm Keratin thủy phân ĐC Từ Vi khuẩn Từ enzyme Thương mại ĐC Từ Vi khuẩn Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Lặp lại Rất đen Khá đen Hơi vàng Vàng cháy 19 10 17 13 14 29 19 26 13 18 20 19 14 19 27 22 23 19 11 Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Nhuộm Nhuộm Uốn Uốn Uốn Uốn Cháy Cháy Cháy Từ enzyme Thương mại ĐC Từ Vi khuẩn Từ enzyme Thương mại ĐC Từ Vi khuẩn Từ enzyme Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Trường ĐHCT 18 12 16 14 20 20 21 14 15 17 13 11 17 11 19 16 13 19 11 17 10 15 14 21 11 13 20 20 10 16 12 20 19 16 10 21 23 17 21 24 Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Cháy Bình thường Bình thường Bình thường Bình thường Thương mại ĐC Từ Vi khuẩn Từ enzyme Thương mại Trường ĐHCT 12 12 17 24 18 18 10 18 17 10 11 16 11 17 12 14 18 21 11 15 10 18 21 15 14 11 17 Bảng 18. Kết đánh giá cảm quan độ suông mềm mƣợt tóc. Đơn vị: phiếu Mẫu tóc Duỗi Duỗi Rất suông Khá suông mềm mềm mượt mượt Keratin thủy Lặp phân lại ĐC Từ Vi khuẩn Ít suông Không suông mềm mượt mềm mượt 18 11 15 10 13 13 17 11 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Duỗi Duỗi Nhuộm Nhuộm Nhuộm Nhuộm Uốn Uốn Uốn Từ enzyme Thương mại ĐC Từ Vi khuẩn Từ enzyme Thương mại ĐC Từ Vi khuẩn Từ enzyme Trường ĐHCT 10 14 16 17 10 21 16 13 24 18 19 23 20 18 15 13 11 16 11 16 13 15 17 12 17 12 19 11 18 10 16 21 17 12 17 16 12 10 17 23 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Uốn Cháy Cháy Cháy Cháy Bình thường Bình thường Bình thường Bình thường Thương mại ĐC Từ Vi khuẩn Từ enzyme Thương mại ĐC Từ Vi khuẩn Từ enzyme Thương mại Trường ĐHCT 12 16 14 15 17 14 12 10 11 15 17 13 15 12 15 10 17 11 12 13 14 17 11 19 14 12 12 10 14 22 13 13 14 15 19 10 16 12 15 19 15 13 15 14 18 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT 11 17 20 Bảng 19. Kết độ ẩm tóc theo tƣơng tác mẫu tóc keratin thủy phân. TT Keratin thủy phân Độ ẩm (%) Mẫu tóc Lần Lần Lần Trung bình ĐC Duỗi 3.53 3.80 4.14 3.82 ĐC Nhuộm 4.17 4.49 3.53 4.06 ĐC Uốn 3.10 3.28 4.09 3.49 ĐC Cháy 3.90 3.77 4.04 3.90 ĐC Bình thường 8.18 8.28 9.21 8.56 từ Vi khuẩn Duỗi 6.92 7.23 6.44 6.86 từ Vi khuẩn Nhuộm 7.76 7.34 7.92 7.67 từ Vi khuẩn Uốn 5.46 4.61 5.59 5.22 từ Vi khuẩn Cháy 7.07 6.23 6.30 6.53 10 từ Vi khuẩn Bình thường 10.08 9.56 9.84 9.83 11 từ enzyme Duỗi 2.98 3.76 4.01 3.58 12 từ enzyme Nhuộm 3.77 3.59 4.31 3.89 13 từ enzyme Uốn 3.66 3.54 4.05 3.75 14 từ enzyme Cháy 3.68 3.14 4.41 3.74 15 từ enzyme Bình thường 7.76 8.34 7.25 7.78 16 thương mại Duỗi 7.88 6.96 8.12 7.65 17 thương mại Nhuộm 7.64 8.18 7.29 7.70 18 thương mại Uốn 6.05 5.17 5.43 5.55 19 thương mại Cháy 7.58 6.68 6.99 7.08 20 thương mại Bình thường 10.38 10.46 9.06 9.97 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT Phụ lục 3. Kết phân tích thống kê Phụ lục 3.1. Kết thống kê điều chế keratin thủy phân từ vi khuẩn phân giải keratin. a. Kết phân tích ảnh hƣởng tƣơng tác chủng vi khuẩn chất đến hiệu suất phân hủy General Linear Model: Tỉ lệ phân hủy versus Vi khuẩn, Cơ Chất Factor Vi khuẩn Cơ Chất Type fixed fixed Levels Values ĐC K13, ĐC VL2, K13, VL2 LG, LH, T Analysis of Variance for Tỉ lệ phân hủy, using Adjusted SS for Tests Source Vi khuẩn Cơ Chất Vi khuẩn*Cơ Chất Error Total S = 1.98105 DF 24 35 Seq SS 20656.8 3259.7 3242.8 94.2 27253.5 R-Sq = 99.65% Adj SS 20656.8 3259.7 3242.8 94.2 Adj MS 6885.6 1629.8 540.5 3.9 F 1754.49 415.29 137.72 P 0.000 0.000 0.000 R-Sq(adj) = 99.50% Least Squares Means for Tỉ lệ phân hủy Vi khuẩn ĐC K13 ĐC VL2 K13 VL2 Cơ Chất LG LH T Vi khuẩn*Cơ Chất ĐC K13 LG ĐC K13 LH ĐC K13 T ĐC VL2 LG ĐC VL2 LH ĐC VL2 T K13 LG K13 LH K13 T VL2 LG VL2 LH VL2 T Mean 1.860 2.519 49.158 50.998 SE Mean 0.6604 0.6604 0.6604 0.6604 34.009 31.646 12.746 0.5719 0.5719 0.5719 2.017 2.200 1.363 2.693 3.353 1.510 59.477 64.683 23.313 71.850 56.347 24.797 1.1438 1.1438 1.1438 1.1438 1.1438 1.1438 1.1438 1.1438 1.1438 1.1438 1.1438 1.1438 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Vi khuẩn VL2 K13 ĐC VL2 ĐC K13 N 9 9 Mean 51.0 49.2 2.5 1.9 Grouping A A B B Means that not share a letter are significantly different. Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Cơ Chất LG LH T N 12 12 12 Mean 34.0 31.6 12.7 Trường ĐHCT Grouping A B C Means that not share a letter are significantly different. Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Vi khuẩn VL2 K13 K13 VL2 VL2 K13 ĐC VL2 ĐC VL2 ĐC K13 ĐC K13 ĐC VL2 ĐC K13 Cơ Chất LG LH LG LH T T LH LG LH LG T T N 3 3 3 3 3 3 Mean 71.9 64.7 59.5 56.3 24.8 23.3 3.4 2.7 2.2 2.0 1.5 1.4 Grouping A B B C C D D E E E E E E Means that not share a letter are significantly different. b. Kết phân tích ảnh hƣởng tƣơng tác chủng vi khuẩn chất đến hàm lƣợng protein hòa tan General Linear Model: protein tổng versus Vi khuẩn, Cơ chất Factor Vi khuẩn Cơ chất Type fixed fixed Levels Values ĐC K13, ĐC VL2, K13, VL2 LG, LH, T Analysis of Variance for protein tổng, using Adjusted SS for Tests Source Vi khuẩn Cơ chất Vi khuẩn*Cơ chất Error Total S = 4.54259 DF 24 35 Seq SS 54787.6 4020.3 4295.9 495.2 63599.1 R-Sq = 99.22% Adj SS 54787.6 4020.3 4295.9 495.2 Adj MS 18262.5 2010.2 716.0 20.6 F 885.02 97.41 34.70 P 0.000 0.000 0.000 R-Sq(adj) = 98.86% Least Squares Means for protein tổng Vi khuẩn ĐC K13 ĐC VL2 K13 VL2 Cơ chất LG LH T Vi khuẩn*Cơ chất ĐC K13 LG ĐC K13 LH ĐC K13 T Mean 4.816 6.231 82.227 84.809 SE Mean 1.514 1.514 1.514 1.514 54.603 49.033 29.926 1.311 1.311 1.311 4.848 5.338 4.263 2.623 2.623 2.623 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 ĐC VL2 ĐC VL2 ĐC VL2 K13 K13 K13 VL2 VL2 VL2 LG LH T LG LH T LG LH T 7.006 7.204 4.482 94.155 99.228 53.298 112.404 84.363 57.660 Trường ĐHCT 2.623 2.623 2.623 2.623 2.623 2.623 2.623 2.623 2.623 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Vi khuẩn VL2 K13 ĐC VL2 ĐC K13 N 9 9 Mean 84.8 82.2 6.2 4.8 Grouping A A B B Means that not share a letter are significantly different. Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Cơ chất LG LH T N 12 12 12 Mean 54.6 49.0 29.9 Grouping A B C Means that not share a letter are significantly different. Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Vi khuẩn VL2 K13 K13 VL2 VL2 K13 ĐC VL2 ĐC VL2 ĐC K13 ĐC K13 ĐC VL2 ĐC K13 Cơ chất LG LH LG LH T T LH LG LH LG T T N 3 3 3 3 3 3 Mean 112.4 99.2 94.2 84.4 57.7 53.3 7.2 7.0 5.3 4.8 4.5 4.3 Grouping A A B B C C D D E E E E E E Means that not share a letter are significantly different. Phụ lục 3.2. Kết thống kê khảo sát khả hồi phục tóc hƣ tổn bổ sung keratin thủy phân. a. Kết phân tích ảnh hƣởng tƣơng tác mẫu tóc keratin thủy phân đến độ ẩm tóc General Linear Model: độ ẩm versus Keratin thủy phân, Mẫu tóc Factor Keratin thủy phân Mẫu tóc Type fixed fixed Levels Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Values ĐC, thương mại, từ enzyme, từ Vi khuẩn Bình thường, Cháy, Duỗi, Nhuộm, Uốn Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT Analysis of Variance for độ ẩm, using Adjusted SS for Tests Source Keratin thủy phân Mẫu tóc Keratin thủy phân*Mẫu tóc Error Total S = 0.478492 DF 12 40 59 R-Sq = 96.76% Seq SS 114.697 146.446 12.319 9.158 282.621 Adj SS 114.697 146.446 12.319 9.158 Adj MS 38.232 36.612 1.027 0.229 F 166.99 159.91 4.48 P 0.000 0.000 0.000 R-Sq(adj) = 95.22% Least Squares Means for độ ẩm Keratin thủy ĐC thương mại từ enzyme từ Vi khuẩn Mẫu tóc Bình thường Cháy Duỗi Nhuộm Uốn Keratin thủy*Mẫu tóc ĐC Bình thường ĐC Cháy ĐC Duỗi ĐC Nhuộm ĐC Uốn thương mại Bình thường thương mại Cháy thương mại Duỗi thương mại Nhuộm thương mại Uốn từ enzyme Bình thường từ enzyme Cháy từ enzyme Duỗi từ enzyme Nhuộm từ enzyme Uốn từ Vi khuẩn Bình thường từ Vi khuẩn Cháy từ Vi khuẩn Duỗi từ Vi khuẩn Nhuộm từ Vi khuẩn Uốn Mean 4.767 7.591 4.550 7.223 SE Mean 0.1235 0.1235 0.1235 0.1235 9.033 5.316 5.481 5.833 4.503 0.1381 0.1381 0.1381 0.1381 0.1381 8.557 3.903 3.823 4.063 3.490 9.967 7.083 7.653 7.703 5.550 7.783 3.743 3.583 3.890 3.750 9.827 6.533 6.863 7.673 5.220 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 0.2763 Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Keratin thủy phân thương mại từ Vi khuẩn ĐC từ enzyme N 15 15 15 15 Mean 7.6 7.2 4.8 4.6 Grouping A A B B Means that not share a letter are significantly different. Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Mẫu tóc Bình thường Nhuộm Duỗi Cháy Uốn N 12 12 12 12 12 Mean 9.0 5.8 5.5 5.3 4.5 Grouping A B B B C Means that not share a letter are significantly different. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 – 2014 Trường ĐHCT Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Keratin thủy phân thương mại từ Vi khuẩn ĐC từ enzyme thương mại từ Vi khuẩn thương mại thương mại từ Vi khuẩn từ Vi khuẩn thương mại từ Vi khuẩn ĐC ĐC từ enzyme ĐC từ enzyme từ enzyme từ enzyme ĐC Mẫu tóc Bình thường Bình thường Bình thường Bình thường Nhuộm Nhuộm Duỗi Cháy Duỗi Cháy Uốn Uốn Nhuộm Cháy Nhuộm Duỗi Uốn Cháy Duỗi Uốn N 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Mean 10.0 9.8 8.6 7.8 7.7 7.7 7.7 7.1 6.9 6.5 5.5 5.2 4.1 3.9 3.9 3.8 3.8 3.7 3.6 3.5 Grouping A A A B B C B C B C B C B C C D C D E D E E F F F F F F F G G G G G G G G Means that not share a letter are significantly different. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến Viện NC&PT Công Nghệ Sinh Học [...]... kinh tế Vì vậy, đề tài So sánh phương pháp điều chế và ảnh hư ng của keratin thủy phân lên các dạng tóc hư tổn được thực hiện góp phần làm phong phú và tạo triển vọng cho việc ứng dụng sản phẩm này vào thực tiễn 1.2 Mục tiêu đề tài Đề tài được thực hiện với mục tiêu so sánh phương pháp điều chế và ảnh hư ng của keratin thủy phân lên các dạng tóc hư tổn Chuyên ngành Công nghệ Sinh học tiên tiến 1 Viện... phục của tóc hƣ tổn khi bổ sung keratin thủy phân Mục đích Khảo sát và so sánh khả năng hồi phục của các mẫu tóc sau khi được bổ sung keratin thủy phân Bố trí thí nghiệm Thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên (CRD) với 2 nhân tố: 5 loại tóc (tóc duỗi bị hư tổn, tóc nhuộm bị hư tổn, tóc uốn bị hư tổn, tóc bị cháy nắng và tóc bình thường) và 3 loại sản phẩm (keratin thủy phân thô thu được bằng phương. .. sung keratin thủy phân thô thu được từ vi khuẩn phân giải keratin và 1 mẫu bổ sung keratin thủy phân thương mại Cân khoảng 3 g tóc ở mỗi mẫu nhỏ để ngâm trong dung dịch keratin thủy phân Keratin thủy phân được bổ sung cho tóc trong 5 – 6 tuần Chỉ tiêu theo dõi: độ bóng, màu sắc và độ mềm mượt của tóc bằng phương pháp đánh giá cảm quan; độ ẩm của tóc bằng phương pháp đo độ ẩm và cấu trúc của tóc bằng phương. .. loại tóc bình thường được chia thành năm phần bằng nhau và được xử lý thành năm mẫu tóc gồm tóc duỗi bị hư tổn, tóc nhuộm bị hư tổn, tóc uốn bị hư tổn, tóc bị hư tổn do cháy nắng và tóc bình thường - Tóc duỗi bị hư tổn: sử dụng thuốc duỗi Lavox 3 trong 1 để duỗi tóc Mẫu được duỗi 3 lần/tháng đến khi đạt đến mức độ hư tổn nhất định (tóc bị khô, dễ gãy rụng, mất độ bóng, dễ bị rối và khó chải tóc, tóc. .. định và khó phân hủy thậm chí đến hàng ngàn năm sau khi chết 2.5 Sơ lƣợc về keratin thủy phân dƣỡng tóc Keratin thủy phân là protein phục hồi hiệu quả trong quá trình chăm sóc tóc Những phân tử keratin nhỏ (phần đã thủy phân) là các oligopeptide có khối lượng phân tử < 1000 Dalton có thể xâm nhập vào vỏ của tóc Nó thẩm thấu vào trong tủy của tóc và khôi phục cấu trúc sâu bên trong của tóc Các keratin. .. được thủy phân thành những protein ngắn hoặc các amino acid thiết yếu để bổ sung, chăm sóc và phục hồi tóc hư tổn Hầu hết các keratin dùng trong mỹ phẩm được thông qua quá trình thủy phân hóa học và phương pháp thủy nhiệt Vi sinh vật cũng có thể phân hủy keratin để tạo nguồn protein có giá trị, đồng thời giảm ô nhiễm môi trường và mang lại hiệu quả kinh tế Vì vậy, đề tài So sánh phương pháp điều chế và. .. kiềm và sau đó, ở giai đoạn hai, lông cừu được thủy phân thông qua các hoạt động của enzyme thủy phân protein Các yếu tố được nghiên cứu là ảnh hư ng của thời gian giai đoạn thủy phân đầu tiên (6 – 24 giờ), thời gian thủy phân giai đoạn thứ hai (6 – 24 giờ) và số lượng thêm vào enzyme phân giải protein (1 – 5%) trên số lượng của lông cừu bị phân hủy Hiệu suất keratin thủy phân đạt cao nhất khi thủy phân. .. rối và khó chải tóc, tóc bị đổi màu từ màu đen sang màu vàng cháy) - Tóc bị hư tổn do cháy nắng: Mẫu được làm ướt rồi phơi nắng đến khi đạt đến mức độ hư tổn nhất định (tóc bị khô, chẻ ngọn, mất độ bóng, dễ bị rối và khó chải tóc, tóc bị đổi màu từ màu đen sang màu vàng cháy) * Bổ sung các sản phẩm cho tóc Mỗi mẫu tóc chia thành ba mẫu nhỏ: 1 mẫu bổ sung keratin thủy phân thô thu được bằng phương pháp. .. chủ yếu trong các tấm beta Tuy nhiên, các tấm beta cũng được tìm thấy trong α -keratin) (Kreplak et al., 2004) Các beta keratin là sự sắp xếp phản song song và song song của các chuỗi liên kết thông qua liên kết hydro Các β -keratin của loài bò sát và các loài chim có tấm β nếp gấp xoắn lại với nhau, sau đó ổn định và làm cứng bằng cầu disulfide Hình 2 Mô hình của α -keratin, β -keratin và cầu nối disulfide... tích lũy trong tự nhiên và có thể được thủy phân của một số vi sinh vật Keratinase là enzyme thủy phân keratin được sản xuất từ nấm, xạ khuẩn và vi khuẩn được phân lập từ đất có chứa keratin (Kaul và Sumbali, 1997; Riffel và Brandelli, 2006) Trong số các loại nấm sản xuất keratinase, dermathophytes được đặc biệt mô tả và được phân lập từ vết thương của con người và động vật Keratinase sản xuất từ Microsporum, . sóc da, tóc cũng đang được quan tâm nghiên cứu. Đề tài ” So sánh phương pháp điều chế và ảnh hư ng của keratin thủy phân lên các dạng tóc hư tổn được nghiên cứu để so sánh khả năng phân hủy. đề tài So sánh phương pháp điều chế và ảnh hư ng của keratin thủy phân lên các dạng tóc hư tổn được thực hiện góp phần làm phong phú và tạo triển vọng cho việc ứng dụng sản phẩm này vào thực. 1.2. Mục tiêu đề tài Đề tài được thực hiện với mục tiêu so sánh phương pháp điều chế và ảnh hư ng của keratin thủy phân lên các dạng tóc hư tổn. Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36