Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội

Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc ngưu bàng căn thu mua trên thị trường hà nội

BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI s o TRẦN THỊ THU TRANG NGHIÊN CŨXl ĐẶC ĐIỂM VI HỌC, THÀNH PHAN HÓA HỌC CỦA VỊ THUỐC NGƯU BÀNG CẢN THU MUA TRÊN THỊ TRƯỜNG HÀ NỘI (Arctium lappa Linn. Asteraceae) (Khóa luận tốt nghiệp Dược s ĩ khóa 2002 - 2007) Ngưcú hướng dẩn: TS. Nguyễn Thái An DS. Bùi Minh Hằng Nơi thực hiện: BM Dược cổ truyền Trường Đại học Dược Hà Nội Thời gian thực hiện: 2/2007 - 5/2007 HÀ NỘI, THÁNG 5/2007 LỜI CẢM ƠN Trong suốt quá trình làm khóa luận tốt nghiệp, tói đã nhận được rất nhiều sự giúp đỡ từ thầy cô, gia đình và bạn bè, Những sự giúp đỡ quý báu ấy đã giúp tôi hoàn thảnh khóa luận này, đồng thời cũng cho tôi hiểu biết thêm nhiều điều về cách tư duy trong nghiên cứu khoa học> Nhân dịp này tôi xỉn bày tỏ lòng biết ơn sáu sắc tới: TS. Nguyễn Thái An, cô đấ tận tinh chỉ bảo, tạo mọi điều kiện, trực tiếp hướng dẫn tôi hoàn thành khóa luận. DS. Bùi Minh Hằng đã giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện khóa luận. Tôi cũng xin chân thành cảm ơn các thầy cô, các kỹ thuật viên trong Bộ môn Được học cổ truyền, Bộ môn Thực vật, các phòng ban trong nhà trường đã giúp đỡ tạo mọi điêu kiện cho tới thực hiện khóa luận này, Cuối cùng, tôi xin cảm ơn gia đình và bạn bè đã động viên, khích lệ tôi rát nhiều để tôi có thêm sự nhiệt tỉnh và say mê trong nghiên cứu khoa học. Hà nội ngày tháng năm 2007 Sinh viên Trần Thị Thu Trang MỤC LỤC ĐẶT VẤN Đ Ề 1 PHẦNI: TỔNG Q U A N 3 1.1. THỤC VẬJ HỌC 3 1.1.1. Vị trí phân loại của chi Arclium L 3 1.1.2. Đặc điểm thực vật của chi Arctium L 3 1.1.3. Đặc điểm thực vật và phân bố của loài Arctium lappa L 3 1.2. THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA RỄ NGUU BÀ NG 4 1.3. TÁC DỤNG VÀ CÔNG DỤNG 7 1.3.1. Tác dụng dược lý 7 1.3.2. Công dụng 8 1.4. MỘT SỐ BÀI THUỐC c ó RỄ NGUU b à n g 9 PHẦN II: NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG TIỆN VÀ PHUƠNG PHÁP NGHIÊN c ú ư 11 2.1, NGUYÊN LIỆU 11 2.2, PHƯƠNG TIỆN NGHIÊN c ú u 11 2.2.1. Thuốc thử, dung môi, hoá chất: 11 2.2.2. Dụng cụ 11 2.2.3. Phưoíng tiện và máy m óc: 11 2.3, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ú u 12 2.3.1. Nghiên cứu về thực vật: 12 2.3.2. Nghiên cứu về hoá học; 12 PHẦN III: THỤC NGHIỆM VÀ KẾT q u ả 13 3.1. KẾT QUẢ NGHIÊN c ú u VÊ THựC VẬT 13 3.1.1. Đạc điểm vị dược liệu 13 3.1.2. Đặc điểm vi học bột rễ Ngưu bàng 13 3.1.3. Đặc điểm vi phẫu rẻ Ngưu bàng 14 3.2. XÁC ĐỊNH ĐỘ ẨM CỦA DƯỢC LIỆU 15 3.3. KẾT QUẢ NGHTÊN c ú u VỀ HOÁ HỌC 16 3.3.1. Kết quả nghiên cứu thành phần hoá học 16 3.3.2. Định lượng tlavonoid, coumarin toàn phần 25 3.3.3. Chiết xuất và phân lập 31 3.4. BÀN LUẬN 44 PHẦN IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ X U Ấ T 46 4.1. KẾT LUẬN 46 4.2. ĐỀ XUẤT 47 DANH MỤC CHỮ VIÊT TẮT CHỮ VIẾT TẮT VIẾT ĐẦY ĐỦ As ánh sáng Dc Dịch chiết Dd Dung dịch EtOAc Ethyl acetat HSQC Heteronuclear Single Quantum Coherence LC Liquid Chromatography MS Mass Spectroscopy n- BuOH n- Buthanol NMR Nuclear Magnetic Resonance Pư Phan ứng SKLM Sắc ký lớp mỏng Tb Trung bình 11 Thuốc thử u v Ultra violet spectroscopy ĐẬT VÂN ĐỂ Với vị trí địa lý và điều kiện thiên nhiên ưu đãi, Việt nam nằm trong vùng khí hâu nhiệt đới gió mùa, nóng và ẩm, thích hợp cho sự phát triển hệ thực vật phong phú và đa dạng, trong đó đặc biệt phải kể đến nhóm tài nguyên cây thuốc. Theo những công bố gần đây, ở Việt nam đã biết tới 3200 loài thực vật bậc cao cũng như bậc thấp được sử dụng làm thuốc. Tuy vậy, hiện mới có khoảng 300 loài cây con và vị thuốc được sử dụng ở mức độ tưcmg đối phổ biến theo kinh nghiệm dán gian hoặc theo Y học cổ truyền, mà chưa được nghiên cứu kỹ và đầy đủ. Nhiều cây vừa được dùng làm “rau ăn” lại vừa được dùng làm thuốc như: ngải cứu, cải cúc, rau diếp, cúc tần và trong đó có rễ Ngưu bàng. Tại Nhật bản, Trung Quốc, Canada, Ẩn Độ, Bắc Mỹ rễ Ngưu bàng được xem như một vị thuốc dùng điều trị đái tháo đường, đau xương khớp, trị bệnh ngoài da, bệnh Gout, có tác dụng làm ra mồ hôi, lọc máu, lợi tiểu, kích thích tiẽu hoá Nguxi bàng được nhập trồng từ Trung Quốc vào Việt nam từ năm 1959 bước đầu được trổng thử ở Lào Cai, Lai Châu. Trong Y học cổ truyền Việt Nam Ngưu bàng chủ yếu dùng quả (Ngưu bàng tử) làm thuốc điều trị cảm cúm, tn viêm phổi, viêm amidal, trị sốt, chữa họng hầu sưng đau, có tác dụng cầm máu giải độc, nhuận tràng Thời gian gần đây, sản phẩm “Canh dưỡng sinh” gồm rễ Ngưu bàng, củ cải trắng, cà rốt, nấm đông cô được nhiều người biết đến như một sản phẩm chức năng hỗ trợ điều trị và phòng bệnh; tiểu đường, ung thư, viêm nhiễm mạn tính, thoái hoá xương khớp, cao huyết áp, suy giảm chức nâng não và đang thu hút sự quan tâm của người dân. Nắm bắt tình hình đó, các công ty kinh doanh duợc liệu, các nhà thuốc đông dược đã tiến hành thu mua và nhập với số lượng lớn Ngưu bàng căn ở cả dạng tươi và khô, đáp ứng nhu cầu sử dụng của người dân. Vì vậy, để góp phần nâng cao giá trị sử dụng của vị thuốc Ngưu bàng căn, đề tài: "Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thuốc Ngưu bàng căn thu mua trên thị trường Hà Nội" được tiến hành với những nội dung sau: > Xác định đặc điểm vi học của rễ Ngưu bàng thu mua trên thị trường Hà nội. > Định tính thành phần hoá học và xác định hàm lượng một số thành phần chính của mẫu nghiên cứu. > Chiết xuất và phân lập một số chất trong rễ Ngưu bàng. PHẨN I: TỔNG QUAN 1.1. THựC VẬT HỌC 1.1.1. Vị trí phân loại của chi Arctium L. Theo [4], [10], tl5J, [16], [18], [20] vị trí của chi Arctium L. trong hệ thống phân loại thực vật được tóm tắt như sau: Ngành Magnoliophyta (Ngọc Lan) Lớp Magnoỉiopsida (Ngọc Lan) Phân lớp Asteridae (Cúc) Bộ Astemỉes (Cúc) Họ Asteraceae (Cúc) Phân họ Tuhiilifiorae (Hoa ống) Chi Aìxtium L. 1.1.2. Đặc điểm thực vật của chi Arctium L. Cây thảo, lá ở gốc xếp hình hoa thị, lá ở thân mọc so ỉe. Cụm hoa đầu có bao chung, gồm nhiều lá bắc kéo dài thành mũi nhọn, có móc ở đỉnh, khi chín sẽ thành móc quặp giúp cho sự phát tán nhờ động vật. Chi Arctium L. gồm 10 loài ở vùng ôn đới cựu lục địa [8], ở nước ta có nhập trồng một loài là Arctium ìappa L. l.ỉ.3 . Đặc điểm thực vật và phân bố của loài Arctium lappa L. ỉ .1.3.1. Đặc điểm thực vật Ngưu bàng có tên khoa học là Arctium ỉappa Linn. Asteraceae. Cây còn có các tên gọi khác như Đại đao, Á thực, Hắc phong tử, Thử niêm tử [7], Cây thảo lớn, sống 2 năm, thân thẳng có khía và phân nhánh, cao l-2m. Lá trái xoan có hình hoa thị ư gốc và mọc so Ic ở trên thân; phiến lá to, rộng tới 50cm, gốc hình tim, đầu tù hay nhọn, mép răng cưa hay lưạn sóng, có nhiều lông trắng ở mặl dưới. Hoa đỏ hay tím nhạt, họp thành đầu to 3-4cm; các lá của bao chung kéo dài thành mũi nhọn, có móc ở chóp. Quả bế, màu xẩm nâu điểm hồng, có nhiều móc quặp, phía trên có một mào lông ngắn màu vàng [7]. Cu tròn và dài [13]. Ra hoa tháng 6-7, quả tháng 8-9 của năm thứ 2 [7]. L ỉ.3.2. Phân hố Ngưu bàng có nguồn gốc ỏf vùng ôn đới ấm thuộc Nam Âu hoậc Tây Á. Hiện nay, cây mọc tự nhiên ờ vùng cận Hymalaỵa thuộc Äi Độ, Nepal và Trung Quốc. Cây còn được trồng nhiều nơi ở Trung Quốc và Nhật Bản [15]. Ngưu bàng ưa ẩm, ưa sáng và thích nghi với vùng khí hậu á nhiệt đới núi cao, nhiệt độ trung bình 15"C [20] Nước ta nhập trổng Ngưu bàng từ năm 1959 làm thuốc ở vùng núi cao Lai Châu, Lào Cai, Nghĩa Lộ [7]. ở vùng cao huyện Bát Xát (Lào Cai) khảo sát thấy có cây Ngưu bàng mọc hoang [15]. Ngưu bàng rất dễ nhân trổng. Tuy nhiên trong nhiều năm gần đây, cây không được chú ý phát triển nên chỉ còn một số cây được duy trì thường xuyên với mục đích giữ giống tại Trại thuốc Sapa - Viện Dược Liệu [20], 1.2. THÀNH PHẨN HÓA HỌC CỦA RỄ NGƯU BÀNG Theo một sổ tài liệu cho thấy trong rễ Ngưu bàng có chứa: Nước: 70% [18], Nhóm nohsaccharid'. Inulin khoảng 50% [20], 57% (có khi tới 70%) [15], 45% [7], Aretose [18], glucose 5-6% fl5j, fructofumaran có trọng lượng phân tử thấp (một dạng inulin) [27], Albumin: 2% [18], Hơd chất acetvlen polỵacetylen [20]; hàm lượng 0,001- 0,002% (tính theo dược liệu khô kiệt), bao gồm chủ yếu 1,11 - tridecacdien - 3,5,7,9 tetraỵne và 1,3,11 - tridecacdien - 5,7,9 triyne, acid artiic (hợp chất acetylen có S) [20]. Các acid: Acid hay hơi được, acid acetic, acid propionic, acid butyric, acid isovaleic [18], [20], acid 3 - hexenoic, acid 3 - octenoic, acid costic [201, acid crotonic [18], Acid không có nhóm OH: acid lauric, acid myristic, acid stearic, acid palmitic [20], Acid polyphenol 3,65% [18], trong đó có: acid cafeic và acid chlorogenic [18], [20], acid isochlorogenic [16 . OH / \ ! 'OH HŨ ncid chloiogemc [...]... PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 2.1 NGUYÊN LIỆU Nguyên liệu là rễ Ngưu bàng được mua tại một số cửa hàng thu c Đông y trên phố Lãn ông, Hà Nội vào tháng 2/2007 Dược liệu được thái thành lát mỏng, sấy ở nhiệt độ 60°c trong tủ sấy có quạt thông gió đến khô, sau đó làm nhỏ, để trong lọ kín, bảo quản nơi khô mát để làm thực nghiêm 2.2 PHƯƠNCx TIỆN NGHIÊN CCnu 2.2.1 Thu c thử, dung môi, hoá chất: Các thu c thử,... MeOD, Phòng Cấu trúc Vi n Hoá học - TTKHTN & CNQG 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứ u 2.3.1 Nghiên cứu về thực vật: - Nghiên cứu đặc điểm vi học rễ Ngưu bàng theo phưorng pháp ghi trong [2] 2.3.2 Nghiên cứu về hoá học: - Định tính các nhóm chất chính bằng phản ứng hoá học theo phưcmg pháp ghi trong [2] và [4' - Định tượng tlavonoid, coumarin toàn phần bằng phương pháp cân - Định tính cắn các phân đoạn chiết bằng... vàng trắng, sát vỏ có vân màu vàng đậm Vị dược liệu có mùi thcfm, vị h d tê lưõi, hcả đắng, h d ngọt (hình 3.2.) * 1 Hình 3.1 Ánh rễ Ngưu bàng tươi ■ ? Hình 3.2 Anh dược ỉỉệu khô 3.1.2 Đặc điểm vi hạc bột rễ Ngưu bàng Bột Ngưu bàng có màu vàng đậm, mùi thcfm, vị hơi tê lưỡi, hcfi đắng, ngọt Quan sát dưới kính hiển vi thấy: Hạt tinh bột (1) Mảnh mô mềm gồm các tế bào thành mỏng (2); Mảnh mạch xoắn (4);... bột 2 Mảnh mô mềm 3,6 Mảnh mạch mạng 4 Mảnh mạch xoắn 5 Tinh thể canxioxalat 7 Khối Inulin 8 Sí.íi Hỉnh 3.3 Ảnh đặc điểm vi học hột rễ Ngưu hàng 3,1.3, Đặc điểm vi phẫu rễ Ngưu bàng Mạt cắt của dược liệu hình tròn Tù ngoài vào trong cỏ: LtVp bần gồm 1-2 hàng tế bào hình chữ nhật xếp đều đặn thành hình đổng tâm và dãy xuyên tâm, htíi rách (1) Mô mềm vỏ cấu tạo b('íi các tế bào hình đa giác (2) Các tế... chưa vi m thận và lao da [5], Y học hiện đại dùng rễ Ngưu bàng làm thu c lợi tiểu, ra mồ hôi, lọc máu; dùng trong bệnh thấp khớp, trị đau và sưng khớp; bệnh ngoài da (hắc lào, trứng cá, mụn nhọn, lở loét) Rễ, cuống lá và thân cây dùng điều trị bệnh đái tháo đường Dạng cao thu c hoặc thu c bột có tác dụng hạ glucose máu và tăng lượng glycogen trong gan [20], ở cháu Âu, rễ Ngưu bàng được dùng làm thu c. .. 3.3* KẾT QUẢ NGHIÊN c ứ u VỂ HOÁ HỌC 3.3.1 K ết quả nghiên cứu thành phần hoá học Tiến hành định tính các nhóm chất thường có trong dược liệu bằng các phản ứng hoá học: 3.3.1.1 Định tính các thành phần trong dịch chiết ether dầu hoả: Cân 20 g dược liệu đã được làm nhỏ cho vào bình Soxhlet rồi chiết với ether dầu hoả cho đến khi dung môi trong bình chiết không màu Lọc dịch chiết qua bông, cất thu hồi bớt... này [20] Tác dụng trên gan vò chống vi m: Cao toàn phần rễ Ngưu bàng có tác dụng bảo vệ gan trên mô hình gây tổn thương gan bằng tetra cloruacarbon [25], [25] và có tác dụng chống vi m trên mô hình gây phù chân chuột bằng carragenin [25] Tác dụng giảm ho: Fructan trong rễ Ngưu bàng có biểu hiện tác dụng giảm ho trên mèo tương đương tác dụng của các chế phẩm tổng hợp giảm ho khổng gây nghiên khác [23],... tiêu khát, trúng nhiệt, trục thu Ngoài ra, rễ cắt vụn đảo với miến ăii chữa đầy bụng Dùng rễ, lá với chút muối giã đắp để loại mụn nhọt lA, MỘT SỐ BÀI THU C c ó RỄ N G Ut BÀNG Trì nhiêt đốc, đau răng, răng lơi sưng đau: Ngưu bàng căn 1 đồng cân, giã nước, cho chút muối, nấu thành cao, mỗi lần dùng bôi lên răng lợi Ngày bôi 2 - 3 lẩn [18] Chữa ung thư đai tràng: Ngưu bàng căn: 20g Xích tiểu đậu: 8g Đưcmgquy:... tia ruột có các tế i bào thành mỏng (5) (hình 3.4.) 1 Bần 4 Tầng phát sinh libe-gỗ 2 Mô mềm vỏ 5 Gỗ 3 Libe 6 Tia ruột Hình 3.4 Đặc điểm vi phẫu rễ Ngưu bàng 3.2 XÁC ĐỊNH ĐỘ Ẩ m c ủ a d ư ợ c l iệ u Lấy khoảng 5g bột dược liệu cần xác định độ ẩm, cho vào đĩa nhôm của máy xác định độ ẩm Precisa, tiến hành đo thu được kết quả thể hiện trên bảng 3.1 Bdng 3.ỉ: Kết quả xác định độ ẩm của dược liệu STT 1 2 3... các vị thu c khác để điều trị vi m họng, vi m amidal, cảm lạnh, sởi Rễ chứa hàm lượng lớn chất nhầy có tác dụng bảo vệ niêm mạc dạ dày [29] ở Ẩ i Độ, rễ Ngưu bàng được coi có tác dụng lợi tiểu, làm ra mổ hôi và phục hổi sức khoẻ [20] ở Nhật Bản và một sổ nơi khác, rễ Ngưu bàng được sử dụng như một loại thức ăn và ngày càng trở nên thông dụng trong một loại chè để chữa ung thư [29] Rễ dưới dạng thu c . " ;Nghiên cứu đặc điểm vi học, thành phần hóa học của vị thu c Ngưu bàng căn thu mua trên thị trường Hà Nội& quot; được tiến hành với những nội dung sau: > Xác định đặc điểm vi học của rễ Ngưu. BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI s o TRẦN THỊ THU TRANG NGHIÊN CŨXl ĐẶC ĐIỂM VI HỌC, THÀNH PHAN HÓA HỌC CỦA VỊ THU C NGƯU BÀNG CẢN THU MUA TRÊN THỊ TRƯỜNG HÀ NỘI (Arctium lappa. Ngưu bàng thu mua trên thị trường Hà nội. > Định tính thành phần hoá học và xác định hàm lượng một số thành phần chính của mẫu nghiên cứu. > Chiết xuất và phân lập một số chất trong rễ Ngưu