Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS

Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS Định lượng đồng thời paracetamol và acid mefenamic trong viên nén pamasic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ UV VIS

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI LÊ THỊ THANH HIỂNÍ ‘ 1 \ 'I ‘ ì/ỊT ìt '} W'- ĐỊNH LƯỢNG ĐỔNG THỜI PARACETAMOL VÀ ACID MEPENAMIC TRONG VIÊN NÉN PAMESIC BẰNG ĐO QUANG PHỔ MCA VÀ THỬ ĐỘ HÒA TAN CỦA PARACETAMOL TRONG CHẾ PHẨM BẰNG ĐO QUANG PHỔ u v - VIS (KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược SỸ KHÓA 2 00 0 - 2005) Người hướng dẫn: ThS. Nguyễn Tường Vy NCS. Trần Việt Hùng Nơi thực hiện: Phòng Hóa lý I - Viện Kiểm nghiệin Bộ môn Hóa dược Phòng Vật lý - Viện Kiểm nghiệm Thời gian thực hiện: 10/2004 - 5/2005 Hà Nội 05/2005 LỜI CẢM ƠN Sau năm năm dưới mái trường Đại học Dược Hà Nội, được sự quan tâm của các thầy cô trong Ban Giám hiệu nhà trường, Phòng Đào tạo, các phòng ban, cùng sự nhiệt tình giảng dạy của thầy cô ở các bộ môn trong trường đã truyền đạt cho em kiến thức chuyên môn phục vụ công việc, cho em nhiều điều quý giá trước khi ra trường, em xin chân thành cảm ơn. Đặc biệt em xin cảm ơn sự hướng dẫn tận tình của thầy cô trong Bộ môn Hoá dược, các cô, các chú cán bộ Phòng Hoá lý I và Phòng Vật lý — Viện Kiểm nghiệm đã giúp đỡ em trong quá trình thực hiện khoá luận. Cho em bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới: ThS. Nguyễn Tường Vy - Bộ môn Hoá dược, NCS. Trần Việt Hùng - Viện Kiểm nghiệm đã dẫn dắt và tạo điều kiện cho em trong suốt quá trình thực nghiệm và hoàn thành khoá luận. Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, tháng 5/2005 Sinh viên: Lê Thị Thanh Hiền CÁC KÝ T ự VIẾT TẮT BP Dược điển Anh (British Phamacopoeia) BYT Bộ y tế DĐVNIII Dược điển Việt Nam xuất bản lần thứ ba. FSQ Định lượng toàn phổ (Full spectrum Quantitation) HPLC sắc ký lỏng hiệu năng cao (High Performance Liquid Chromatography) KN Kiểm nghiệm MCA Phân tích đa cấu tử (Multi component Analysis) ME Acid Mefenamic PA Paracetamol PL Phụ lục PTTT Phương trình tuyến tính SKD Sinh khả dụng TB Trung bình TC Tiêu chuẩn USP 27 Dược điển Mỹ 27 (The United States Phamacopoeia XXVII) UV- Vis Tử ngoại - khả kiến (Ultraviolet - Visible) VKN Viện kiểm nghiệm MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ 1 PHẦN 1. TỔNG QUAN 3 1.1. Đại cương về PA và ME 3 1.1.1. Paracetamol 3 1.1.2. Acid Me/enamic 4 1.1.3. Các phương pháp định lượng PA và ME 5 1.2. Phương pháp phân tích đa cấu tử MCA 6 1.2.1. Sơ lược về MCA 6 ỉ.2.2. Cơ sở lý thuyết của phương pháp phân tích đa cấu tử MCA 7 / .2.3. Một số ứng dụng của phương pháp phân tích đa cấu tử gần đây ở Việt Nam 8 1.3. Độ hoà tan 9 1.3.1. Vài nét về độ hoà tan của thuốc viên 9 1.3.2. Thiết bị và môi trường thử độ hoà tan 10 1.3.3. Tiêu chuẩn đánh giá 11 1.3.4. Ý nghĩa của thử độ hoà tan 13 PHẦN 2. THựC NGHIỆM VÀ KÊT QƯẢ 14 2.1. Nguyên vật liệu và phương pháp thực nghiệm 14 2.1.1. Nguyên vật liệu 14 2.1.2. Phương pháp thực nghiệm 15 2.2. Kết quả thực nghỉệm và nhận xét 29 2.2.1. Kết quả định lượng đồng thời PA và ME bằng phương pháp MCA 29 2.2.2. Kết quả thử độ hoà tan 38 PHẦN 3. KẾT LUẬN - ĐỀ XUẤT 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO 43 PHU LU C 45 Đ Ậ T V Ấ N Đ Ề PA là một dược chất được sử dụng rất phổ biến, không chỉ ở dạng đơn chất mà còn ở dạng hợp chất. Các chất thường được kết hợp với PA là: clorpheniramin maleat, dextromethorphan hydrobromid, quinin sunfat, acid mefenamic, cafein, codein tạo ra nhiều tên biệt dược khác nhau do các nhà sản xuất trong và ngoài nước cung cấp. Trong số các thuốc chứa PA có viên nén bao phim Pamesic, thành phần gồm 500mg PA và 250mg ME do Công ty Dược phẩm & Vật tư Y tế Tiền Giang (Tiphaco) sản xuất. Các thuốc có chứa nhiều thành phần ngày càng được sử dụng rộng rãi với hiệu quả điều trị cao. Nếu xác định hàm lượng các hoạt chất trong viên này bằng phương pháp cổ điển dựa vào các kỹ thuật chiết, tách riêng từng thành phần sẽ rất khó khăn. Vì vậy, các phương pháp định lượng đồng thời nhiều hoạt chất của thuốc ngày càng phổ biến (VD; MCA, HPLC, quang phổ đạo hàm ). Kiểm nghiệm chất lượng thuốc ngày nay không đơn giản chỉ quan tâm tói định tính, định lượng mà còn cần phải quan tâm đến sinh khả dụng của thuốc, cho nên chuyên luận “Thử độ hòa tan” của thuốc đã được đưa vào DĐVN III (2002). Theo tiêu chuẩn cơ sở của viên nén bao phim Pamesic (phụ lục), HPLC được sử dụng định lưcmg hai thành phần PA, ME và để xác định lượng PA hoà tan. Tuy nhiên, HPLC chưa thật phổ biến ở các cơ sở kiểm nghiệm thuốc, trong khi đó máy đo quang phổ lại rất phổ biến. Kỹ thuật MCA trên máy quang phổ u v - Vis có một số ưu điểm như: phân tích nhanh, không phải sử dụng dung môi hữu cơ tinh khiết chất lượng cao và rất tốn kém. Hơn nữa, máy quang phổ có thể kết nối vói thiết bị thử độ hoà tan một cách dễ dàng. Để nghiên cứu xây dựng phương pháp phân tích bổ sung và thay thế cho phương pháp HPLC trong tiêu chuẩn viên nén bao phim Pamesic, áp dụng cho các cơ sở không có thiết bị HPLC, em chọn đề tài: “Định lượng đồng thời Paracetamol và acid Mefenamic trong viên nén Pamesic bằng đo quang phổ MCA và thử độ hòa tan của Paracetamol trong chế phẩm bằng đo quang phổ u v - Vis”, vói mục tiêu cụ thể như sau: - ỵây dựng quy trình định lượng đồng thời PA và ME trong viên nén bao phim Pamesic bằng phương pháp đo quang phổ MCA trên máy GBC Cintra 40. -Thử độ hòa tan của PA trong chế phẩm bằng đo quang phổ ư v - Vis. PH Ầ N l. TỔNG QUAN 1.1. ĐẠI CƯƠNG VỀ PARACETAMOL VÀ ACID MEFENAMIC 1.1.1. Paracetamol • Công thức cấu tạo [3], [10]: NHCOCH3 o OH Q H 9NO2 (M= 156,16) *Tên khoa học: N - acetyl- para- amino phenol hoặc: para- hydroxy - acetanilid [3] * Tên khác: Acetaminophen [23]. * Tính chất [3], [10], [21]: - Tinh thể hoặc bột kết tinh trắng, không mùi, vị đắng nhẹ. - Nhiệt độ nóng chảy: 168 - 172”c. - Độ tan: ít tan trong nước lạnh (1/70), tan nhiều hơn trong nước nóng, tan trong ethanol từ 1/7 đến 1/10. Rất ít tan trong cloroíorm, hoàn toàn không tan trong ether. Dễ tan trong dung dịch kiểm do tạo muối phenolat [3], [10]. - Có khả năng hấp thụ ánh sáng trong vùng tử ngoại, cực đại hấp thụ trong môi trường acid là 245nm, trong môi trường kiềm là 257nm [21]. * Tác dụng dược lý [2], [10]: - PA ức chế prostaglandin synthetase làm giảm tổng hợp prostaglandin, có tác dụng hạ sốt do làm tăng thải nhiệt (giãn mạch ngoại biên, ra mồ hôi), lập lại cân bằng cho trung tâm điều nhiệt ở vùng dưới đổi, không tác dụng đến nguyên nhân gây sốt. - PA tác dụng giảm đau do giảm tổng hợp prostaglandin p2 nên giảm tính cảm thụ của ngọn dây cảm giác với các chất gây đau. - PA không có tác dụng chống viêm và chống ngưng kết tiểu cầu. * Chỉ định: Hạ sốt do mọi nguyên nhân gây sốt (sốt do virus, sốt xuất huyết )- Giảm đau, sử dụng cho đau nhẹ, đau ngoại vi [3]. * Liều dùng: Người lớn: 300 đến 500 mg/lần X 3 - 4 lần/ngày. Trẻ em: 60 - 325 mg/lần x3 - 4 lần/ngày [3]. * Các dạng bào chế: Viên nén, viên nén phân tán, viên nén hoà tan, viên nang, viên đạn, dung dịch uống, hỗn dịch uống, dạng phối hợp [10] 1.1.2. Acid Mefenamic *Công thức cấu tạo [3], [23] : CHs CH 3 QsH.sNOj (M = 241,29) * Tên khoa học: Acid 2 [(2,3 - dimethyl phenyl) amino] benzoic Hoặc: Acid N - (2,3 - xylyl) anthranilic [3], [23]. * Tính chất [3], [21], [23]: - Bột kết tinh trắng đến trắng ngà, không mùi, có vị đắng nhẹ. - Nhiệt độ nóng chảy: 2 3 0 -2 3 l‘*C - Độ tan: Rất khó tan trong nước, ít tan trong cloroform (1/25), ít tan trong ether (1/80). Tan hoàn toàn trong dung dịch kiềm và trong ethanol 96*’ [3], [23]. - Có khả năng hấp thụ ánh sáng trong vùng tử ngoại, cực đại hấp thụ ở môi trường acid/ethanol là 279nm, ở môi trường kiềm là 285nm [21]. '^Tác dụng dược lý [2]: - Tác dụng giảm đau hạ sốt tương tự PA. - Tác dụng chống viêm do ức chế cyclooxygenase, làm giảm prostaglandin E2 và Fịo< là những chất trung gian hóa học của phản ứng viêm. * Chỉ định: Chống viêm, giảm đau trong các bệnh xương khớp, đau sau phẫu thuật, chấn thương, các chứng đau nửa đầu, đau răng, đau khi thấy kinh * Liều dùng: Người lớn: 250 - 500 mg/lần, 2 - 3 lần/ngày, uống sau khi ăn no, tối đa không quá 1,5 g/ngày. Hoặc đặt một viên đạn (250mg) vào buổi tối. Trẻ em trên 6 tháng tuổi: 6,5 mg/kg/ngày, chia 3 lần. * Các dạng bào chế: Viên nang, viên nén, viên đạn 1.1.3. Các phương pháp định lượng PA và ME 1.1.3.1. Các phương pháp đã được áp dụng để định lượng PA - Phương pháp đo quang [3], [4], [5], [10], [16]; Nguyên tắc: PA có khả năng hấp thụ ánh sáng trong vùng tử ngoại, cực đại hấp thụ của PA trong môi trường acid là 245nm, trong môi trưòỉng kiềm là 257nm. Kết quả được tính toán dựa vào giá trị mật độ quang đo được và độ hấp thụ riêng hoặc so sánh vói chuẩn. - Phương pháp chuẩn độ nitrit [3], [4], [5], [10]: Nguyên tắc: Thuỷ phân PA trong môi trường acid (HCl 10%) và nhiệt độ tạo thành amin thơm bậc một. Chuẩn độ bằng dung dịch natri nitrit (NaNOj) trong môi trưòìig acid tạo hợp chất diazoni (phản ứng diazo hoá), nhận biết điểm kết thúc bằng chỉ thị tropeolin hoặc điện thế kế. - Phương pháp chuẩn độ bằng ceri IV [4], [5], [10]: Nguyên tắc: Trong dung dịch acid, PA sau khi tbuỷ phân là một chất khử, ceri IV là một chất oxy hoá sẽ bị khử (nhận thêm 1 electron) chuyển thành ceri III, phát hiện điểm kết thúc bằng feưoin - 00 (phức chất sắt của o-phenatrolin). sắt ở trong phức này có thể là sắt n hoặc sắt III, phức chất sắt II có màu đỏ, phức chất sắt III có màu xanh. Tại điểm tương đương khi bắt đầu thừa ceri IV, phức chất sắt II chuyển thành sắt III, làm dung dịch đổi màu từ đỏ sang xanh. [...]... trình thử độ hòa tan và đo quang đều cho hình dáng phổ đồ như nhau Nó khẳng định ME và các tá dược không làm ảnh hưởng đến độ hấp thụ của PA trong viên Pamesic - Để xác định độ hoà tan của PA trong chế phẩm Pamesic thì chỉ cần dùng phương pháp đo quang bình thường như chuyên mục Thử độ hoà tan của viên nén PA ở DĐVNIII b Kết quả độ hòa tan của PA trong viên Pamesic Bảng 2.11 Kết quả đo độ hoà tan của. .. maleat và phenylpropanolamin hydroclorid bằng phương pháp toàn phổ FSQ [15] - Nghiên cứu áp dụng phương pháp FSQ trên máy quang phổ u v - Vis thế hệ cũ để định lượng đổng thời vitamin BI và vitamin B6 trong các thuốc Trivit B [13] - Định lượng đồng thời PA và quinin Sulfat trong viên nén Antigrip F bằng phương pháp phân tích đa cấu tử (MCA) [16] 1.3 ĐỘ HÒA TAN 1.3.1 Vài nét về độ hoà tan của thuốc viên. .. Dược phẩm và vật tư y tế Tiền Giang, "Tiêu chuẩn cơ sỏ viên bao phim Pamesic 8 Nguyễn Thành Đạt (2002), Nghiên cứu định lượng đồng thời PA và ibuprofen trong thuốc đa thành phần, Khóa luận tốt nghiệp dược sỹ 9 Bùi Thị Hoà (2004), Thiết bị trong phép thử độ hoà tan và phương pháp hiệu chuẩn, Viện kiểm nghiệm, Bộ Y tế 10 Bùi Thu Huê (2004), Định tính và định lượng đồng thời PA và ME trong viên nén bao... được sử dụng trên phần mềm sẵn có của máy quang phổ GBC Cintra 40 cho kết quả khá chính xác và đáng tin cậy 2.2.2 Kết quả thử độ hòa tan a Kết quả khảo sát sự ảnh hưởng của tá dược và ME đến độ hấp thụ của PA * Kết quả thu được sau khi đo dung dịch 1, 2, 4 ở bước sóng 257nm Bảng 2.10 Kết quả đo độ hấp thụ của dung dịch 1, 2, 4 Độ hấp thụ của Độ hấp thụ của Độ hấp thụ của dung dịch 1 dung dịch 2 dung... dịch 3 và dung dịch 4 với mẫu trắng là NaOH 0,1N, được phổ đồ hình 2.12 như sau : * Nhận xét - Từ bảng 2.10 nhận thấy : + ME không tan trong dung dịch đệm phosphat 5,8 trong điều kiện thử độ hoà tan và có độ hấp thụ quang không đáng kể trong điều kiện đo quang (độ hấp thụ của nó chỉ chiếm khoảng 1,46% so với độ hấp thụ của PA với hàm lượng ghi trên nhãn được đem đi hoà tan) + Các tá dược trong viên không... chí phân tích hoá lý và sinh học, tập III, số 3 16 Lê Quang Thảo, Thái Duy Thìn, Trần Việt Hùng, Phùng Ngọc Quang (2004), Định lượng đồng thời Pa và Quinin Sulfat trong viên Antỉgrỉp F bằng phương pháp phân tích đa cấu tử MCA, Tạp chí Kiểm nghiệm , số 2, trang 11 -14 17 Thái Duy Thìn (2003), Định lượng đồng thời PA và ibuprofen trong viên nén hỗn hợp bằng phương pháp phân tích toàn phổ, Tạp chí Dược học,... 102,37%, Kết quả này đạt tiêu chuẩn của nhà sản xuất + Hoàn thành việc sử dụng phương pháp đo quang phổ UV- Vis để khảo sát độ hoà tan của PA trong viên Pamesic giống chuyên luận Thử độ hoà tan của viên nén PA trong DĐVN III Ta có độ hoà tan của PA trong khoảng từ 84,12% đến 93,98% Kết quả này thoả mãn yêu cầu của nhà sản xuất - Ngoài việc đạt được những mục tiêu đã đưa ra, em còn thu được rất nhiều... thể hiện phép thử định tính của Paracetam ol và acid m efenamic 1.3.5 Độ hoà tan: Lượng Paracetamol giải phóng sau 45 phút không được dưới 75% so vói lượng ghi trên nhãn 1.3.6 Định lượng: Viên Pamesic phải chứa: * Paracetamol (C 8H 9NO 2) : 95,0 -105,0% * Acid m efenam ic (CisHịsNOị) : 95,0 - 105,0% so với hàm lượng ghi trên nhãn II PHƯƠNG PH ÁP THỬ: 2.1 Hình thức : Thử bằng cảm quan chế phẩm phải đạt... chuẩn và đo tại tối thiểu n bước sóng Trên thực tế, để giảm sai số trong phân tích chuẩn ta tăng số bước sóng phân tích và sử dụng số lượng các dung dịch hỗn hợp chuẩn nhiều hơn số cấu tử 1.2.3 Một số ứng dụng của phương pháp phân tích đa cấu tử gần đây ở Việt Nam - Định lượng đồng thời PA và ibuprofen trong viên nén hỗn hợp bằng phương pháp phân tích toàn phổ [8 ], [13], [17] - Định lượng đồng thời. .. cho vào bình định mức 25m l, thêm pha động đến vạch, lắc đều * Dung dịch chuẩn: Cân chính xác lượng các chất đối chiếu paracetamol, acid m efenam ic và tiến hành hoà tan như dung dịch thử để có nồng độ các chất trên tương đương với nồng độ trong dung dịch thử Đo HPLC Từ diện tích hoặc chiều cao các pic trong dung dịch thử và dung dịch chuẩn, nồng độ các chất trong dung dịch chuẩn, tính được hàm lượng