Tài liệu Luận văn Thử nghiệm nuôi vỗ thành thục và kích thích sinh sản nhân tạo vọp (Geloina coaxans).pdf

Tài liệu Luận văn Thử nghiệm nuôi vỗ thành thục và kích thích sinh sản nhân tạo vọp (Geloina coaxans).

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

KHOA THỦY SẢN

NGUYỄN THẾ HIỂN

THỬ NGHIỆM NUÔI VỖ THÀNH THỤC VÀ KÍCH THÍCH

SINH SẢN VỌP(Geloina coaxans)

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN

07/2009

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ

KHOA THỦY SẢN

NGUYỄN THẾ HIỂN

THỬ NGHIỆM NUÔI VỖ THÀNH THỤC VÀ KÍCH THÍCH

SINH SẢN VỌP(Geloina coaxans)

LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN

CÁN BỘ HƯỚNG DẪN

TS NGÔ THỊ THU THẢO ThS HUỲNH HÀN CHÂU

07/2009

LỜI CẢM TẠ

Xin gởi lời cảm ơn chân thành đến cô Ngô Thị Thu Thảo, cán bộ hướng dẫn luận văn Cảm ơn sự chỉ dạy nhiệt tình và những lời khuyên quý báo của cô trong thời gian thực hiện đề tài

Xin gởi lời cảm ơn đến các anh, chị và các bạn trong trại động vật thân mềm đã giúp đỡ để đề tài được hoàn thành đúng tiến độ

XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN!

TÓM TẮT

Vọp được nuôi vỗ trong 5 nghiệm thức với 3 lần lặp lại/ nghiệm thức, mật độ

20-25 con / bể sau thời gian nuôi vỗ 30-45 ngày thí tiến hành kích thích sinh sản với

4 phương pháp khác nhau Sau thời gian nuôi 2 đợt và kích thích sinh sản cho thấy bố trí vọp nuôi treo trong rổ không cần nền đáy đạt kết quả cao nhất về tỷ lệ sống (98%), chỉ số thể trạng (260 mg/g) cũng như là tỷ lệ cá thể tham gia sinh sản (25%) với phương pháp kích thích tốt nhất là phương pháp để vọp trong tủ lạnh 5-6h ở nhiệt độ 8-120C sau đó phơi nóng ở nhiệt độ 400C trong thời gian từ 45-60 phút rồi cho vào bể có nước chảy

Đề tài đã thu được một số kết quả bước đầu về nuôi vỗ và kích thích sinh sản vọp

Geloina coaxans, một đối tượng mới của nghề nuôi trồng thuỷ sản trong rừng

ngập mặn

MỤC LỤC

LỜI CẢM TẠ i

TÓM TẮT ii

MỤC LỤC Error! Bookmark not defined Danh sách bảng Error! Bookmark not defined Danh sách hình Error! Bookmark not defined CHƯƠNG 1:GIỚI THIỆU 1

CHƯƠNG 2: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 3

2.1 Đặc điểm sinh học của vọp (Geloina coaxans) 3

2.1.1 Vị trí phân loại 3

2.1.2 Phân bố 3

2.2 Đặc điểm dinh dưỡng 4

2.3 Đặc điểm sinh trưởng 4

2.3.1 Độ mặn 4

2.3.2 Nhiệt độ 4

2.3.3 Oxy 5

2.4 Đặc điểm sinh sản 5

2.4.1 Đặc điểm giới tính 5

2.4.2 Phương thức sinh sản 5

2.4.3 Các giai đoạn phát triển của ấu trùng 6

CHƯƠNG 3:VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 8

3.1 Vật liệu nghiên cứu 8

3.2 Phương pháp nghiên cứu 8

3.2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 8

3.2.2 Thử nghiệm nuôi vỗ Vọp (Geloina coaxans) 8

3.2.3.Kích thích sinh sản bằng các biện pháp khác nhau 9

3.3 Phương pháp thu nhập số liệu 10

3.3.1 Phương pháp xác định chỉ số thể trạng (CI) 10

3.3.2 Phương pháp phân tích mô học 10

3.3.3 Theo dõi các yếu tốmôi trường trong thời gian thí nghiệm .13

3.3.4 Theo dõi tăng trọng, tỉ lệ sống của vọp 13

3.3.5 Các chỉ tiêu sinh sản của vọp 13

3.4 Phương pháp xử lý số liệu 13

CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 14

4.1 Đợt 1 14

4.1.1 Các yếu tố môi trường 14

4.1.2 Kết quả thí nghiệm nuôi vỗ 17

4.2 Đợt 2 19

4.2.1 Các yếu tố môi trường 19

4.2.2 Kết quả thí nghiệm nuôi vỗ 22

4.2.3 Các chỉ tiêu sinh sản ……….… 22

CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 27

5.1 Kết luận 27

5.2 Đề xuất 27

TÀI LIỆU THAM KHẢO 28 PHỤ LỤC

Danh sách bảng

Bảng 3.1: Các bước xử lý mẫu 11

Bảng 3.2: Các bước nhuộm mẫu 12

Bảng 4.1: Trung bình nhiệt độ và oxy trong các nghiệm thức 14

Bảng 4.2: Trung bình hàm lượng NH4+, NO2-, NO3- trong các nghiệm thức 15

Bảng 4.3: Trung bình hàm lượng độ kiềm, pH trong các nghiệm thức 16

Bảng 4.4: Kết quả tỷ lệ sống, chỉ số thể trạng và chỉ số thành thục của vọp nuôi vỗ trong các nghiệm thức 17

Bảng 4.5: Các phương pháp kích thích sinh sản 18

Bảng 4.6: Trung bình nhiệt độ và oxy trong các nghiệm thức 19

Bảng 4.7: Trung bình hàm lượng NH4+, NO2-, NO3- trong các nghiệm thức 20

Bảng 4.8: Trung bình hàm lượng độ kiềm, pH trong các nghiệm thức 21

Bảng 4.9: Kết quả tỷ lệ sống, chỉ số thể trạng và chỉ số thành thục của vọp nuôi vỗ trong các nghiệm thức 22

Bảng 4.10: Trung bình các chỉ tiêu về sinh sản 24

Bảng 4.11: Đánh giá hiệu quả các biện pháp nuôi vỗ 25

Danh sách hình

Hình 2.1: Vọp (Geloina coaxans) 3

Hình 3.1: Hệ thống thí nghiệm 8

Hình 4.1: Biến động oxy hoà tan buổi sáng và buổi chiều trong thí nghiệm 14

Hình 4.2: Biến động hàm lượng NH4+ trong các nghiệm thức 15

Hình 4.3: Biến động pH trong các nghiệm thức 16

Hình 4.4: Biến động oxy hoà tan buổi sáng và buổi chiều trong thí nghiệm 18

Hình 4.5: Biến động hàm lượng NH4 + trong các nghiệm thức 19

Hình 4.6: Biến động pH trong các nghiệm thức 20

Hình 4.7: Biến động độ kiềm trong các nghiệm thức 21

Hình 4.9: Hệ thống kích thích sinh sản vọp 24

Hình 4.10: Các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục đực của vọp 26

Hình 4.11: Các giai đoạn phát triển tuyến sinh dục cái của vọp 26

CHƯƠNG 1

GIỚI THIỆU

Vọp có tên khoa học là Geloina coaxans, tên tiếng Anh là “mud clam”nghêu bùn

hay “ mangrove clam”- ngêu rừng đước Vọp là loài hải sản ngày càng được ưa chuộng trên thị trường, ngoài ra là loại thức ăn tươi sống không thể thiếu trong nuôi vỗ tôm sú và cua biển

Có rất ít nghiên cứu về vọp được công bố ở Việt Nam trong thập niên vừa qua Nguyễn Chính (1996) mô tả 88 loài động vật thân mềm ở biển Việt Nam Trong

đó vọp suma (Cyrena sumatrensis) được tìm thấy ở vùng Năm Căn (tỉnh Minh

Hải cũ, nay là Cà Mau) Tác giả quan sát thấy vọp suma sống ở vùng cao triều, nơi có chất đáy là bùn cát, có nồng độ muối thấp; nhất là nơi có rừng đước,sú, vẹt Là loài có sản lượng tương đối lớn, nên là món ăn rất quen thuộc của ngư dân ven biển Hylleberg và Kiburn (2003) hiệu đính tên khoa học của vọp chính xác

là Geloina coaxans (Gmelin,1791) tên thường gọi trong các tài liệu trước là

Polymesoda coaxans

Tan và Chou (2000) mô tả các loài thuộc giống Geloina là một trong những loài

hai mảnh vỏ có kích thước lớn nhất phân bố ở vùng rừng đước của Singapore với

chiều dài vỏ có thể lên đến 8cm Theo Gimin et al.(2004) có loài Geloina erosa là

một loài vọp lớn và có nhiều thịt đạt chiều dài đến 11cm Quần thể sống trong khu vực ven biển của Bắc Australia được khai thác như là một nguồn thực phẩm quan trọng cho cộng đồng dân cư địa phương (Meehan 1982) Loài này dễ nuôi

và là đối tượng cho nuôi động vật thân mềm ven biển

Các nghiên cứu trên thế giới, đặc biệt là khu vực Châu Á- Thái Bình Dương thường tập trung vào đặc điểm sinh sản, phân bố và đặc điểm hình thái của

Geloina erosa Morton (1985) nghiên cứu đặc điểm sinh sản và Gimin et al

(2004) nghiên cứu mối tương quan giữa kích thước vỏ và thể tích vỏ vọp với khối lượng tổng cộng và khối lượng mô cơ thể Trên thế giới nói chung và khu vực Châu Á- Thái Bình Dương nói riêng chưa có công bố nghiên cứu về sinh sản vọp

Geloina coaxans

Chính vì lẽ đó việc nuôi vỗ và sinh sản nhân tạo vọp Geloina coaxans nhằm đa

dạng hoá đối tượng nuôi cũng như bảo tồn đa dạng sinh vật trong rừng ngập mặn

Do vậy đề tài “Thử nghiệm nuôi vỗ thành thục và kích thích sinh sản nhân tạo

vọp (Geloina coaxans)” được thực hiện

Mục tiêu đề tài

Nuôi vỗ và kích thích sinh sản vọp nhằm xác định được điều kiện nuôi vỗ và kích thích sinh sản đạt hiệu quả cao phục vụ sản xuất giống

Nội dung đề tài

Theo dõi chỉ số thể trạng và sự phát triển của tuyến sinh dục của vọp trong các nghiệm thức khác nhau

Đánh giá hiệu quả các biện pháp khác nhau trong việc kích thích vọp sinh sản đồng loạt

Corbicula và Pisidium Giống Geloina trong họ này sống ở nền đáy bùn Chúng

có khả năng chịu được khô hạn trong vài ngày Còn loài Geloina erosa có chiều

dài 72,6mm, đây là loài có môi trường sống rộng, vì vậy sự xuất hiện và phát

triển của đa dạng hơn loài Geloina expansa

2.1.2.2 Ở Việt Nam

Vọp phân bố ở các vùng bãi bồi ven biển, đặc biệt là khu vực rừng đước các tỉnh Đồng Bằng Sông Cửu Long như Bến Tre, Trà Vinh, Bạc Liêu, Cà Mau Địa điểm loài hai mảnh vỏ này sinh sống thường có nền đáy là bùn cát (70-90% bùn) Chúng thường vùi mình ở độ sâu 4-6cm dưới lớp mặt đáy, độ mặn nơi cư trú thường tương đối biến động (10-30%)

2.1.2.3 Đặc điểm hình thái

Vỏ có dạng hình tròn trứng, lớn, ở cá thể trưởng thành vỏ cao 75 mm, dài 60mm, rộng 40mm Mặt ngoài của vỏ đường sinh trưởng mịn sắp xếp khít nhau, da vỏ có màu rêu phát triển thành phiến Ở cá thể già da vỏ thường mất đi để lộ tầng sừng màu xanh đen bóng, mặt trong của vỏ màu trắng Mặt khớp vỏ phải và vỏ trái đều

có 3 răng giữa, 2 răng giữa sau đều chẻ đôi răng giữa trước nhỏ, mỏng Răng bên phía trước của vỏ phải nhô cao, răng trên phía trước vỏ trái thô Vết cơ

Hình 2.1 Vọp (Geloina coaxans)

khép vỏ sau lớn hình chữ nhật, vết mép màng áo không rõ ràng (Nguyễn Chính, 1996)

2.2 Đặc điểm dinh dưỡng

Bachok và ctv (2003) nghiên cứu khẩu phần ăn của Geloina coaxans và cho rằng

loài động vật thân mềm này tiêu thụ cá sản phẩm mùn bã hữu cơ từ rừng đước đồng thời với các loại tảo khuê khác

2.3 Đặc điểm sinh trưởng

Theo Nguyễn Đình Hùng et al,(2003) trên đối tượng nghêu Meretrix lyrata: Tốc

độ sinh trưởng cao ở giai đoạn phù du (10,52%) và spat (11,89%); giai đoạn giống tốc độ sinh trưởng giảm, tương ứng 2,8% ở giai đoạn giống nhỏ và 1,69% ở giai đoạn giống lớn

Một số yếu tố ảnh hưỏng đến sinh trưởng của vọp

2.3.1 Độ mặn

Độ mặn là một yếu tố quan trọng quy định giới hạn phân bố của thuỷ sinh vật Mỗi loài có phạm vi độ mặn khác nhau

Bayne (1973) nghiên cứu phản ứng của 3 loài động vật thân mềm (Geloina

ceylonica, Anadara granosa, Mytilus) đối với căng thẳng về oxy hoà tan trong

điều kiện độ mặn thấp và nhận thấy rằng Geloina ceylonica và Anadaga granosa

có thể thích nghi với điều kiện giảm oxy và có thể điều hoà việc tiêu thụ oxy trong điều kiện độ mặn thấp

2.3.2 Nhiệt độ

Theo (Nguyễn Đình Hùng et al, 2003) thí nghiệm trên nghêu thì:

-Đối với ấu trùng nghêu: Khoảng nhiệt dộ từ 25-31OC thích hợp cho sự phát triển

và biến thái của ấu trùng với tỷ lệ sống đạt từ 35,7-39,7% sau 9 ngày nuôi Tuy nhiên ở nhiệt độ cao (29-31OC) tỷ lệ chết của ấu trùng (38.1%) cao hơn nhiều so với nhiệt độ thấp (tỷ lệ chết 29.8% ở nhiệt độ 25-27OC) Ở nhiệt độ 33-35OC ấu trùng không biến sang ấu trùng chữ D và gần như chết hoàn toàn

Đối với nghêu trưởng thành: Khoảng nhiệt độ 20-30OC nghêu họat động bình thường Nhiệt độ từ 15-190C và 33-350C nghêu hoạt động yếu Nhiệt độ gây chết được xác định ở 14OC và 36OC

2.3.3 Oxy

Deaton (1991) nghiên cứu về khả năng hấp thu oxy và nhịp tim của vọp

Polymesoda caroliniana trong không khí và trong nước biển Tác giả nhận định

rằng vọp không có khả năng hấp thu khí trời như những loài động vật thân mềm khác

2.4 Đặc điểm sinh sản

2.4.1 Đặc điểm giới tính

Hiện tượng lưỡng tính thường xuất hiện ở những loài hai mảnh vỏ là đều khẳng định, tuyến sinh dục với nhiều phần khác nhau và ở mỗi phần là các giai đoạn khác nhau của cùng một giai đoạn phát triển tế bào sinh dục

Broom(1998) phát hiện rằng 1/300 mẫu nghiên cứu ở sò huyết Anadara granosa

có hiện tượng lưỡng tính Trong khi Quayle và Newkirk (1998) phát biểu rằng đối

với hàu Crassostrea giới tính thay đổi giữa các mùa sinh sản hoăc giống Ostrea

giới tính chỉ thay đổi 1 vài lần trong mùa sinh sản chủ yếu do điều kiện nhiệt độ

và thức ăn chi phối Braley (1984) đưa ra một phát hiện độc đáo rằng trai

Tridacnid đồng thời là lưỡng tính đực trước, đầu tiên trai thành thục sinh dục như

là con đực, sau đó buồng trứng phát triển có chức năng đồng thời với tinh sào Mỗi cá thể trai bắt đầu phóng tinh trùng và sau 30-60 phút trứng sẽ được phóng thích Hiện nay ở Việt Nam chưa có nghiên cứu nào đề cập đến đặc điểm giới

tính của vọp thuộc giống Geloina Tuy nhiên Rueda và Urban (1998) nghiên cứu cho thấy rằng Polymesoda solida là loài lưỡng tính với đặc điểm là cơ quan sinh

dục cái thành thục trước

2.4.2 Phương thức sinh sản

Quan sát hoạt động sinh sản của nghêu, hoạt động đẻ của cá thể đực và cá thể cái tương tự nhau và diễn ra nhờ sự co giãn của cơ khép vỏ, vỏ mở ra và khép lại nhanh, mạnh, tạo thành lực ép đẩy tinh trùng hoặc trứng thoát ra ngoài, thông thường con đực phóng tinh trùng sớm hơn con cái ở cùng một thời gian kích thích (con đực thường đẻ 1-10 phút, con cái đẻ từ 10-20 phút sau khi kích thích) Trong mỗi đợt đẻ mỗi cá thể đực và cá thể cái có thể đẻ từ 4-6 lần trong thời gian

từ 20-30 phút Rueda và Urban (1998) nhận thấy chu kỳ sinh sản Polymesoda

solida không ổn định với một vài đỉnh sinh sản trong năm và liên quan đến biến

động độ muối

2.4.3 Các giai đoạn phát triển của ấu trùng

Theo Nguyễn Đình Hùng et al, sự phát triển ấu trùng của nghêu Meretrix lyrata

trải qua các giai đoạn sau:

Ấu trùng quay

Xuất hiện 5-7 giờ sau khi thụ tinh Ấu trùng có dạng hình tròn hoặc hơi bầu dục Tiêm mao bao phủ kín Ấu trùng hoạt động tăng dần từ chậm đến nhanh và hoạt động xoay tròn xoắn ốc thường là ngược chiều kim đồng hồ

Ấu trùng chữ D

Ấu trùng có dạng hình chữ D, có nắp vỏ và vành tiêm mao nằm giữa hai nắp vỏ

Ấu trùng vận động nhanh nhờ sự vận động của vành tiêm mao quanh miệng

Ấu trùng Đỉnh vỏ

Giai đoạn tiềm Umbo xuất hiện mầm cơ khép vỏ, trên kính hiển vi có thể quan sát thấy cơ quan tiêu hoá

Giai đoạn giữa Umbo, sau 4 ngày sinh xuất hiện đỉnh vỏ

Giai đoạn cuối Umbo 8-9 ngày sau khi thụ tinh Chân bò hình thành ngày thứ 9 Đây cũng là dấu hiệu kết thúc giai đoạn bơi chuyển sang giai đoạn sống đáy của

ấu trùng

Ấu trùng Sống đáy

Ngày thứ 9-11 sau khi thụ tinh, vành tiêm mao thoái hoá dần, hoạt động bơi của

ấu trùng giảm, ấu trùng chuyến sang giai đoạn sống bò dưới đáy Đặc trưng của giai đoạn này là sự hình thành của chân mang màng áo có cơ khép vỏ Ấu trùng chuyển hoàn toàn từ đời sống bơi lội chuyển sang sống đáy

Con giống

Khi ấu trùng hoàn thành biến thái trở thành nghêu giống với hình dạng tương tự nghêu trưởng thành

CHƯƠNG 3

VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1 Vật liệu nghiên cứu

Trong phòng thí nghiệm: Cân điện tử, kính hiển vi, thước đo điện tử, găng tay, nhiệt kế, thuốc và hóa chất

Dụng cụ nuôi vỗ: Bể nhựa, nước ót, nước 25‰, máy sục khí, cát, sình, lưới mùng, tảo khuê, men bánh mì

Vật liệu theo dõi môi trường: bộ test kiểm tra các yếu tố, NH4+/NH3, NO2-, NO3-, pH, nhiệt kế

3.2 Phương pháp nghiên cứu

3.2.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu

Thời gian: Từ tháng 01/2009 đến tháng 07/2009

Địa điểm: Khoa Thủy Sản-Trường Đại học Cần Thơ

3.2.2 Thử nghiệm nuôi vỗ Vọp (Geloina coaxans)

Thí nghiệm được bố trí trong bể nhựa 300 lít, mật độ 25-50 con/bể, mực nước trong bể khoảng 40cm, có hệ thống sục khí, các bể được nuôi trong nhà có mái che Độ mặn duy trì ở 25‰ trong suốt quá trình thí nghiệm.Có dòng chảy liên tục trong bể nuôi vỗ

Hình 3.1: Hệ thống thí nghiệm

Thí nghiệm gồm 5 nghiệm thức, mỗi nghiệm thức với 3 lần lặp lại

-Nghiệm thức 1 : Đáy bể không có bùn hoặc cát, chỉ có nước, vọp được đặt vào các rổ treo trong bể

-Nghiệm thức 2: Bố trí nền đáy bể là cát , cho vọp vùi mình vào nền đáy bể

-Nghiệm thức 3: Bố trí nền đáy bể là cát, treo vọp trong rổ cách mặt nước bể khoảng 5cm

-Nghiệm thức 4: Bố trí nền đáy bể là bùn, cho vọp vùi mình vào nền đáy bể

-Nghiệm thức 5: Bố trí nền đáy bể là bùn, treo vọp trong rổ cách mặt nước bể khoảng 5cm

Thời gian nuôi vỗ là 30-45 ngày sau đó tiến hành kích thích sinh sản

*Cho ăn: Thức ăn trong quá trình nuôi vỗ là tảo lấy từ nước xanh cá rô phi, tảo khuê (Chaetoceros) bổ sung thêm tảo khô(Spirulina) và men bánh mì Mật độ tảo 20000tb/ml (50% tảo lục + 50% tảo khuê)

Lượng tảo khô và men bánh mì:(0.5g tảo+0.5g men bánh mì)/kg bố mẹ

Cho ăn ngày 2 lần.Thay 30% lượng nước sau 3 ngày

*Các chỉ tiêu theo dõi của quá trình nuôi vỗ:Tỷ lệ thành thục của mỗi nghiệm thức, tỷ lệ giới tính và mức độ phát triển của tuyến sinh dục

3.2.3.Kích thích sinh sản bằng các biện pháp khác nhau

Sử dụng 4 phương pháp để kích thích sinh sản:

Phương pháp 1: Vọp được thấm khô bằng gạc và đặt trên khay trong tủ lạnh ở nhiệt độ 10-15 oC trong thời gian 60 phút, rồi đem ngâm vọp trong dung dịch Ammonium hydroxyde (NH4OH) nồng độ 1% Sau đó lại đưa về nhiệt độ ban đầu 26-28oC Lặp lại 1- 2 lần quá trình hạ nhiệt

Phương pháp 2: Vọp được thấm khô bằng gạc và đặt trên khay phơi trong bóng râm 60 phút Sau đó cho trở lại vào bể có nước chảy liên tục

Phương pháp 3: Vọp được thấm khô bằng gạc và đặt trên khay trong tủ lạnh ở nhiệt độ 10-15 oC trong thời gian 60 phút Sau đó cho vọp trở

nhiệt độ ban đầu 26-28 oC, tạo dòng chảy liên tục trong bể Lặp lại 1- 2 lần quá trình hạ nhiệt

Phương pháp 4: Vọp được thấm khô bằng gạc và đặt trên khay trong tủ lạnh ở nhiệt độ 8-12 oC trong thời gian 5-6giờ kế đó nâng nhiệt độ lên 400C trong thời gian 45-60 phút Sau đó cho vọp trở lại bể và đưa về nhiệt độ ban đầu 26-28 oC, tạo dòng chảy liên tục trong bể Lặp lại 1- 2 lần quá tình kích thích

*Các chỉ tiêu theo dõi trong quá trình sinh sản: Thời gian hiệu ứng, số con tham gia sinh sản, số lượng trứng sinh sản, tỷ lệ nở ấu trùng, chất lượng của ấu trùng

3.3 Phương pháp thu nhập số liệu

3.3.1 Phương pháp xác định chỉ số thể trạng (CI)

Xác định chỉ số thể trạng

Số lượng: 5 con vọp/bể, thu ở tất cả các nghiệm thức lúc bắt đầu và kết thúc đề tài

để xác định chỉ số thể trạng (Condition Index, CI) theo công thức:

)/(mg g

DWm DWs

Trong đó: DWs : khối lượng thịt được sấy khô ở 60°C sau 24 giờ (g)

DWm : khối lượng thịt tươi (g)

3.3.2 Phương pháp phân tích mô học

Vọp tách bỏ vỏ lấy phần thịt và cố định formol 10%, sau 24-48 giờ lấy mẫu bảo quản trong dung dịch cồn 70% đến khi xử lý

Quy trình xử lý mẫu (Theo Howard et al., 2004)

Đúc khối

Mẫu sau khi xử lý dung kẹp gắp ra đặt trong khung Inox, sau khi đã được tráng một lớp paraffin nóng chảy (57-60°C), đồng thời làm lạnh khuôn để mẫu được cố định, đổ paraffin vào đầy khuôn

Đặt khuôn mẫu trong tủ lạnh cho đông lại

Lấy mẫu ra khỏi khuôn và đem trữ lạnh cho mẫu rắn lại

Cắt mẫu

Mẫu đem cắt phải rắn và lạnh, mẫu được cắt thành từng lát mỏng bằng máy cắt

mô (microtome) với độ dày 2-4µm, dùng kim mũi giáo tách lấy lát mẫu có đầy dủ hình dạng và không bị vỡ đặt vào lam đã nhỏ sẵn một ít nước, lam đặt trên bàn sấy 45-50°C cho mẫu căng ra

Lam mẫu dặt trên bàn sấy trong thời gian 12-24 giờ cho paraffin tan ra và mẫu được khô

Nhuộm và dán mẫu (Theo Howard et al., 2004)

Mẫu sau khi nhuộm theo Bảng 3.3, dán lamelle vào vùng có mẫu trên lam bằng keo Canada balsam hoặc Entarlan, làm khô mẫu

Bảng 3.2: Các bước nhuộm mẫu

Đọc kết quả

Quan sát mẫu dưới kính hiển vi để xác định giai đoạn phát triển thành thục của vọp

3.3.3 Theo dõi các yếu tố môi trường trong thời gian thí nghiệm

Nhiệt đô,oxy được đo bằng máy 2 lần/ngày: Sáng 8 giờ, chiều 2 giờ

Định kỳ thu mẫu nước 7 ngày/lần để phân tích các chỉ tiêu: NH4+/NH3, NO2-,

NO3-, KH, pH bằng bộ test (Germany)

Định kỳ kiểm tra độ mặn 5 ngày/lần để điều chỉnh độ mặn kịp thời

Hóa chất Thời gian (phút)

3.3.4 Theo dõi tăng trọng, tỉ lệ sống của vọp

Mẫu vọp thu định kỳ để kiểm tra:

Chiều dài (L), chiều rộng (R), chiều cao (H) lúc bắt đầu và kết thúc thí nghiệm

Tỷ lệ sống 10 ngày/ lần

Lúc bắt đầu thí nghiệm thu 20 con vọp và lúc kết thúc (thu 5con/bể) để xác định chỉ số thể trạng CI và thực hiện tiêu bản mô học để xác định mức độ phát triển

của cơ quan sinh sản theo phương pháp của Howard et al (2004)

3.3.5 Các chỉ tiêu sinh sản của vọp

Theo dõi sự phát triển của tuyến sinh dục của vọp lúc bắt đầu thí nghiệm và kết thúc thí nghiệm Cân trọng lượng tổng cộng, lấy tuyến sinh dục và cố định bằng formol 10% Xác định các giai đoạn phát triển của tuyến sinh dục của vọp theo

Ngô Thị Thu Thảo et al (2002)

3.4 Phương pháp xử lý số liệu

Sử dụng phần mềm Excel và SPSS để tính các giá trị trung bình, độ lệch chuẩn và

so sánh thống kê các giá trị trung bình giữa các nghiệm thức thí nghiệm

Những giá trị có chữ cái giống nhau trong cùng một hàng biểu thị khác biệt không có ý nghĩa thống kê (P>0,05)

Trong quá trình thí nghiệm nhiệt độ trung bình giữa các nghiệm thức không có sự khác biệt Nhiệt độ biến động theo thời gian thí nghiệm từ 26,9-28,8 0C Nhiệt độ buổi sáng và chiều chênh lệch nhau khoảng 2oC

Hàm lượng oxy hòa tan trung bình giữa các nghiệm thức trong quá trình thí nghiệm không có sự khác biệt Oxy buổi sáng biến động từ 4,8– 4,9 mg/L (Bảng 4.1) Oxy buổi chiều biến động từ 4,8 –5 mg/L, trung bình khoảng 4,9 mg/L Theo Swingle (1969), hàm lượng oxy hòa tan trong nước lý tưởng cho động vật thủy sản là trên 5mg/L nhưng không vượt quá mức bảo hòa (trích dẫn bởi Trương Quốc Phú, 2006).Chênh lệch giữa hàm lượng oxy hòa tan giữa sáng và chiều cũng như giữa các nghiệm thức là không đáng kể

Hình 4.1:Biến động oxy hoà tan buổi sáng và buổi chiều trong thí nghiệm