PHẦN 1: ĐẶT VẤN ĐỂ. Hội chứnơ tăng lipid máu được khẳng định là một trong nhũng yếu tố nguy cơ quan trọng, tạo điều kiện cho sự hình thành và phát triển của các mủng vữa xơ, nguyên nhân gây ra bệnh nhồi máu cơ tim, tai biến mạch máu não và thường để lại hậu quả nặng nề cho gia đình và xã hội. Bởi vậy về mạt điều trị việc hạ lipid máu có ý nơhĩa hết sức quan trọng để ngăn neừa các tai biến và hạn chế sự phát triển của bệnh. Trong vữa xơ động mạch, hội chứng tăng lipid máu thường kèm theo hội chứnơ tăng đông máu tạo huyết khối nên trong phò ne và điều trị bệnh thường dùng kết hợp thuốc hạ lipid máu và thuốc chống đông máu. Y học hiện đại đã tìm ra nhiều loại thuốc tân dược có tác dụng tốt Irong việc hạ lipid máu, tuy nhiên do đặc điểm của bệnh phải dùng thuốc thường xuyên, lâu dài cho nên các thuốc này thường gây nhiều tác dụng không mong muốn. Xu hướns hiện nay là sử dụng các loại thuốc có nguồn gốc thảo dược để hạn chế nhược điểm mà vẫn đạt được hiệu quả như mong muốn. Đan sâm và bài thuốc Sinh hoá thang là vị thuốc và bài thuốc đông y đã được sử dụng từ lâu với tác dụng lun thônơ huyết mạch, chống huyết ứ. Nhưng tác dụnơ hạ lipid máu chưa được đề cập nhiều. Trên cơ sở đó chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài “Nghiên cứu tác dụng chống đông máu và hạ lipid máu của Đan sâm và bài thuốc sinh hoá thang, mục tiêu của đề tài góp phần làm sáng tỏ tác dụng lưu thông huyết mạch và khảo sát tác dụng hạ lipid máu góp phán mở rộng phạm vi điều trị của thuốc. Các thực nơhiệm được tiến hành invitro trên huyết tương người bình thường và invivo trên chuột cống.Tác dụng của thuốc được đánh giá qua các chí số là: Thời gian Howell Nồng độ Cholesterol toànphần Thời gian tiêu Fibrin. Tỷ lệ ịya lipoprotein Nồng độ lipid toàn phán
BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI ************************ NGUYỄN THỊ MINH HẰNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CHỐNG ĐÔNG MÁU VÀ HẠ LIPID MÁU CỦA ĐAN SÂM VÀ BÀI THUỐC SINH HOÁ THANG (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP Dược s ĩ KHOÁ 1996-2001) Người hướng dẫn: TS N g u y ễn V ăn Đ ồng TS Đ ỗ Q uang M inh N thực hiện: Bộ m ôn H oá sinh Thời gian thực hiện: 5/3-22/5-2001 Hà nội, tháng 5,2001 §JJ0_£± ĩc \ LỜI CẢM ƠN Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc em xin bày tỏ lòng biết ơn đến thầy giáo TS Nsuyễn Văn Đồng, tận tình giúp đỡ em suốt trìiih thực đề tài Em xin bày tỏ lịng cảm ơn đến Phạm Thanh Phương tồn thể thầy tronơ mơn Hố sinh ,các cán khoa huyết học Bệnh Viện Việt Đức - Hà Nội, tạo điều kiện giúp đỡ em hoàn thành khoá luận Hù Nội, ngày 22 tháng năm 2001 Sinh viên Nguyền Thị Minh Hầns MỤC LỤC ■ ■ Trang Phần Đặt vấn đ ề Phần Tổng q u a n 2.1 Đại cương chống đông máu tiêu fibrin 2.1.1 Q trình đơng máu 2.1.2 Quá trình chống đông máu tiêu fibrin 2.1.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến lưu thông huyết mạch 2.1.4 Các thuốc chốnơ đông m áu 2.2 Đại cương lipid 2.2.1 Thành phần vai trò lipid 2.2.2 Lipoprotein vận chuyển lipid ỉ0 2.2.3 Bệnh tănơ lipid m áu 12 2.2.4 Thuốc điều trị tăng lipid m áu 12 Phần Thực nghiệm kết 3.1 Đối tượns nghiên cứu 15 15 3.1.1 15 3.1.2 3.2 Đan sâm Bài thuốc sinh hoá thang 16 Phương pháp thực nghiệm 16 3.2.1 Xử lý chế biến dược liệu 16 3.2.2 Phươn pháp thử in vi tro 17 3.2.3 Phươns pháp thử invivo 18 3.2.4 Kỹ thuật xét nghiệm số 19 3.2.5 Phương pháp xử lý kết 24 3.3 Kết thực nghiệm nhận xét 25 3.3.1 25 3.3.2 Kết thử invivo 28 3.3.3 Phần Kết thử invitro Nhận xét tons quát bàn luận 33 Kết luận đề xuất 35 CHỨ GIẢI CHỮ VIẾT TẮT CH DĐVN HMG - CoA Cholesterol Dược Điển Việt Nam Hydroxy methyl glutaryl coenzym A HDL Lipoprotein tỷ trọng cao IDL Lipoprotein tỷ trọng trung bình LDL Lipoprotein tỷ trọng thấp LPL Lipoprotein lipase Lp SHT Lipoprotein Sinh hoá thang VLDL Lipoprotein tỷ trọng thấp VXĐiM Vữa xơ động mạch TG XNDPTW Trialycerid Xí Nghiệp Dược Pham Trung Ương PHẦN 1: ĐẶT VẤN ĐỂ Hội chứnơ tăng lipid máu khẳng định nhũng yếu tố nguy quan trọng, tạo điều kiện cho hình thành phát triển mủng vữa xơ, nguyên nhân gây bệnh nhồi máu tim, tai biến mạch máu não thường để lại hậu nặng nề cho gia đình xã hội Bởi mạt điều trị việc hạ lipid máu có ý nơhĩa quan trọng để ngăn neừa tai biến hạn chế phát triển bệnh Trong vữa xơ động mạch, hội chứng tăng lipid máu thường kèm theo hội chứnơ tăng đông máu tạo huyết khối nên phò ne điều trị bệnh thường dùng kết hợp thuốc hạ lipid máu thuốc chống đông máu Y học đại tìm nhiều loại thuốc tân dược có tác dụng tốt Irong việc hạ lipid máu, nhiên đặc điểm bệnh phải dùng thuốc thường xuyên, lâu dài thuốc thường gây nhiều tác dụng không mong muốn Xu hướns sử dụng loại thuốc có nguồn gốc thảo dược để hạn chế nhược điểm mà đạt hiệu mong muốn Đan sâm thuốc Sinh hoá thang vị thuốc thuốc đông y sử dụng từ lâu với tác dụng lun thônơ huyết mạch, chống huyết ứ Nhưng tác dụnơ hạ lipid máu chưa đề cập nhiều Trên sở chúng tơi tiến hành thực đề tài “Nghiên cứu tác dụng chống đông máu hạ lipid máu Đan sâm thuốc sinh hố thang", mục tiêu đề tài góp phần làm sáng tỏ tác dụng lưu thông huyết mạch khảo sát tác dụng hạ lipid máu góp phán mở rộng phạm vi điều trị thuốc Các thực nơhiệm tiến hành invitro huyết tương người bình thường invivo chuột cống.Tác dụng thuốc đánh giá qua chí số là: Thời gian Howell Nồng độ Cholesterol toànphần Thời gian tiêu Fibrin Tỷ lệ ịya lipoprotein Nồng độ lipid toàn phán PHẦN 2: TỔNG QUAN 2.1 Đại cương chống đông máu tiêu fibrin [4] 2.1.1 Q trình đơng máu Là chuỗi phản ứng dây chuyền Nhiều sản phẩm phản úng trước trở thành chất xúc tác cho phản ứng sau Phản ứne cuối biến đổi fibrinogen (1 protein hịa tan huyết tương) thành firbin (1 protein khơng hịa tan), có dạng hình sợi, liên kết với thành mạng lưới ôm lấy tế bào máu tạo thành cục máu đơng Q trình đơng máu có tham gia yếu tố đông máu (huyết tương, tiểu cầu tổ chức), hầu hết yếu tố đơng máu có chất protein (trừ yếu tố IV Ca2+) có vai trị enzym Các yếu tố cần thiết cho q trình đơng máu: Yếu tố I : fibrinogen Yếu tố II : prothrombin Yếu tố III : thromboplastin tổ chức Yếu tố IV : Ca2+ Yếu tố V : Proaccelerin Yếu tố VII : Proconvertin Yếu tố VIII : Yếu tố chốns bệnh ưa cháy máu A Yếu tố IX : Yếu tố chốne bệnh ưa cháy máu B Yếu tố X : Yếu tố Stuart Yếu tố XI : Yếu tố Rosenthal Yếu tố XII : Yếu tố Hageman Yếu tố XIII : Yếu tố làm ổn định fibrin Prekallikrein Kininogen có trọng lượng phân tử cao Tên yếu tố đông máu ký hiệu chữ số La mã theo bán danh pháp quốc tế năm 1954, yếu tố VI không công nhận nữa, hai yếu tố Prekallikrein Kininogen có trọng lượng phân tử cao chấp nhận chưa có số la nia yếu tố TI,VII, IX, X, XI, XII, Xĩĩl, preknllikrein nhữnc /ymogen nghĩa protein có hoạt tính men yếu tố V, VIII kininogen có trọng lượng phân tử cao đồng yếu tố có tác đụng làm tăng tốc độ phản ứng , yếu tố I (fibrinogen) chất Cơ chế đơng máu (sơ đồ ) Theo Howell q trình đông máu chia thành giai đoạn Giai đoạn I : Là trình hình thành thromboplastin, chất xúc tác cho trình biến đổi prothrombin thành thrombin Giai đoạn kéo dài khoảng phút máu thể lỏng Trong giai đoạn yếu tố XII, XI, IX, X hoạt hóa theo phản ứng dây chuyền Giai đoạn II : Là giai đoạn chuyển prothrombin thành thrombin tác dụng yếu tố Xa, Va, IV Thời gian Quick kéo dài thiếu yếu tố Giai đoạn III : Là giai đoạn tạo fibrin từ fibrinogen tác dụng thrombin, Ca2+ yếu tố XlIIa Phản ứng fibrinogen hay nhiều peptid để tạo thành fibrin hoạt hoá (fibrin đơn phân), chất trùng họp tức khắc, thuận nshịch thành fibrin đa phân (dạns hồ tan) có phân tử lượng lớn , nhiều so với fibrinogen ban đầu Dưới tác dụng yếu XIII hoạt hoá, fibrin đa phân bền vững dạng sợi đan với thành lưới ôm lấy huyết cầu tạo thành cục máu đông 2.1.2 Quá trình chống đơng máu tiêu fibrin Bình thường thể, q trình đơng máu kiểm sốt chặt chẽ q trình chống đơng máu để khu trú việc đông máu chỗ bị thương tổn phòng ngừa lan rộng dòng máu Các chế chống đông bao ơổm chất chống đông khác hệ thống tiêu fibrin ỉ Sơ đồ Cơ chê q trình đơng máu tiêu fibrin Cơ chế đông máu Tiếp xúc bé mặt X II — X lla ► (Hageman factor) TT XI Hệ thống nộimạch Hệ thống ngoàimạch HMW Kininogen, Prekallikrein -►X ia đoạn IX Ca* Mô Thromboplastin mô ■ (factor III) + VII (proconvertin) (1) - > IXa + VIII + phospholipid Ca’2 ị Ịa*2 Tổn thương mơ ,ị Ngưng kế tiểu cẩu (ẵ X t Antithrombin III (Inhibits) ▼ (3 ) V + Phospholipid ^(yế u tố TC3) Cat2 ỉai đoạn Prothrombin (factor II) —► Thrombin (factor lla) , ► Tiểu cầu (2) ► Hoạt hóa -> • Chuyển dạng đoạn (2) Fibrinogen (factor ) i XIII W' Fibrin (factor la ▼ 02 Ca* @ â Coumarin v dn cht đ Heparin - c chế tạo thành hoạt động Thrombin (3) Heparin liều thấp tăng tác chất ức chế yếu tố X, IX, XI, XII Plasmin @ Ancrod - ngăn cản fibrinogen thành fibrin không bền (5) Thuc c â Thuc thrombolytic - Streptokinase đ Thuc thrombolytic - Urokinase ® Chât kích thích^ tiêu fibrin: Ethyloe (9) Chất chống tiêu fibrin: acid s amino caproic, tranexamin ^ Xác định thờ