Nghiên cứu tác dụng hạ lipid máu của một số chất xơ

ĐẶT VẤN ĐỂ Bệnh tim mạch là một trong những bệnh có tỉ lệ mắc và tử vong cao nhất trên thế giới. Tai biến do bệnh tim mạch gây ra thường để lại những di chứng khá nặng nề. Trong đó bệnh vữa xơ động mạch (VXĐM) với những tai biến như bệnh mạch vành, nhồi máu cơ tim, đột tử, nhồi máu não... là nguyên nhân tử vong hàng đầu ở các nước công nghiệp. Cho tới nay người ta đã phát hiện được nhiều yếu tố nguy cơ tác động đến sự hình thành và phát triển VXĐM. Rối loạn lipid máu được coi là một trong những nguyên nhân hàng đầu trong bệnh lý VXĐM. Phát hiện sớm, phòng và điều trị kịp thời góp phần làm giảm tỷ lệ mắc và tai biến do bệnh gây ra. ở Việt Nam, những bệnh này trước đây ít gặp, nhưng trong những năm gần đây đang có chiều hướng gia tăng theo nhịp độ phát triển của xã hội. Các nghiên cứu lâm sàng cho thấy làm giảm nồng độ lipid máu sẽ hạn chế và làm giảm đáng kể tỷ lệ bệnh VXĐM. Việc làm giảm lipid máu có nhiều biện pháp trong đó việc điều chỉnh chế độ ăn và dùng thuốc là hoàn toàn cần thiết. Hiện nay có rất nhiều thuốc điều trị rối loạn lipid máu như: dẫn xuất íibrat, dẫn xuất statin, acid nicotinic...tuy nhiên phải dùng thuốc lâu dài, liều dùng tương đối lớn, và thường gây những tác dụng phụ khó chịu cho bệnh nhân như buồn nôn, nôn, tiêu chảy... Chế độ ăn hợp lý là một trong những nguyên tắc phải tuân thủ chặt chẽ trong phác đồ điều trị rối loạn lipid máu. Đã có nhiều nghiên cứu cho rằng chế độ ăn giàu chất xơ có rất nhiều trong củ, trái cây,...có tác dụng hạ lipid máu. Ngày nay chất xơ được quan niệm rộng rãi hơn trong phòng và chữa bệnh. Tuy không có giá trị dinh dưỡng nhưng nó được coi là thành phần không thể thay thế được đối với sức khoẻ con người. Chất xơ có nhiều trong thực phẩm, thuốc. Mỗi nước khác nhau có một thói quen sử dụng những thực phẩm khác

BỘ Y TÊ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THU NGHIÊN CÚÜ Téc DỤNG H6 LIPID MÁÜ cảfl MỘT SỐ CH6T Xơ (KHÓA LUẬN TỐT NG HIỆP DUỢC s ĩ ĐẠI HỌC KHÓA 2001 - 2006) Người hướng dẫn : TS. Nguyễn Văn Đồng Nơi thực hiện : Bộ môn Hóa sinh Trường Đại học Dược Hà Nội Thời gian thực hiện: 2/2006 -512006 HÀ NỘI - 5/2006 LỜI CẢM ƠN Çît'^jiâe. tijèjTL^ tttềL æùi ạử ỉ lề i eảwL đtt sAu iÁe đĨẦL ÇÎS. Qílạuiịễn (ĩỳăiL (^ầtigr ngjj!èi thầụ. đã. hưâ^UỊ. dỗM^L tâẽL tì»ihf đmiụ. lùỉ-TL eML íjw tg. .ịIIfit qitíì tvình Itiitt th ư a níịítỉĩtHy (ỊÌúp itõ ' em tỉúìín tíiíiitli Uhúá lnậii tò t níỊÍtiệp et'íít Iiiìitli. <5 ##t e ũ m / x i ế L h ă ụ . t ồ í ò n t Ị l ù ễ í đ ề t tjêi to i l II thê, (‘ó í ‘ t h ầ ụ . ei) (ỊÌáo^ ehi ettt Uĩị tlm ậ t DÌ ĩ'II ầ Q>f) IIIỎII llí)OÚ sinh đ ã ỈIIÔH ú II (Ị ht) Dí! ỉ (Ị ú itìềií Uìèn nít n h à ỉ (tể etti eẩ ih è tỉm e ítièn Uhf)á Itiậ ii. (¿íỉm ú'n pìtììiK Ị xỂt ttạhiỈML 'JôẫcL s ì nít- p h ììntị Ulỉtìin ítíi utỉúa c^òttíị 'TCà Q íôỉ (tã (fìúp ĩtõ' em hotHị iuêt iítỉíì ífiint títựe h ì fit đ ề tò i. ũuối aìưiụ. ejtềt xiiL ehêuL iítAnh íiảểễL ổn píiầnụ. ta&^ 'lịà ^Oiiọe hị, fini lììêii tvnòHíỊ (ĩỉai, hoe ^Oiù/e 'BÔCL Qflêif ỉtã íịỉúp em hoìm th àn h Ulioá ittận đán (Ị th ề i hạn. Hà Nội, ngày 18/5/2006 Sinh viên Nguyễn Thị Thu KÝ HIỆU VIẾT TẮT AB : Acid béo Apo : Apoprotein CH : Cholesterol CHE : Cholesterol esterase CHO : Cholesterol oxidase GPO Glycerol-3- phosphate oxidase HDL : Lipoprotein tỷ trọng cao HDL-C : Cholesterol trong HDL HMGCoA : Hydroxy methyl glutary CoA IDL : Lipoprotein tỷ trong trung gian KL : Khoai lang LCAT : Lecithin-cholesterol-acyl-transferase LDL : Lipoprotein tỷ trọng thấp LDL-C : Cholesterol trong LDL Lp : Lipoprotein LPL : Lipoprotein lipase POD : Peroxidase SD : Sắn dây TG : Triglycerid VLDL : Lipoprotein tỷ trọng rất thấp VXĐM : Vữa xơ động mạch MỤC LỤC Trang ĐẶT VẤN ĐỂ 1 PHẦNI: TỔNG QUAN 3 1. Tổng quan về lipid máu 3 1.1. Lipid và vai trò của lipid 3 1.2. Lp và vận chuyển Lp 4 1.2.1. Cấu trúc và phân loại Lp 4 1.2.2. Chuyển hoá và vai trò Lp 5 1.3. Hội chứng tăng lipid m áu 9 1.3.1. Định nghĩa và cách phân loại 9 1.3.2. Bệnh căn 10 1.3.3. Điều trị 11 2. Tổng quan về chất x ơ 12 PHẦN I I : THỰC NGHIỆM VÀ KÊT QUẢ 14 1. Nguyên vật liệu và phương pháp thực nghiệm 14 l.i^r^Đếi-ttrợng aghiêrrcứu 14 1.1.1. Củ sắn dây 14 1.1.2. Bột sắn dây 15 1.1.3. Củ khoai lang 15 1.1.4. Chuột nhắt trắng 15 1.1.5. Thuốc đối chứng 16 1.2.2. Mô hình gây tăng cholesterol ngoại sinh 17 1.2.5. Phưcỉng pháp xử lý số liệu 21 2. Kết quả thưc nghiệm và nhận xét 22 2.1. Kết quả hàm lượng CH và TG ở lô thường và lô gây tăngỵí. 22 22. Kết quả hàm lượng CH, TG ở lô dùng thuốc 25 2 .2 .1. Ảnh hưởng của bột và củ sắn dây chín tới các chỉ số lipid trên chuột được gây tăng CH máu 25 2 .2.2. Ảnh hưởng của khoai lang chín và sống tới các chỉ số lipid trên chuột được gây tăng CH máu 28 2.3. Nhận xét chung và bàn luận 30 PHẦN III: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO ĐẶT VẤN ĐỂ Bệnh tim mạch là một trong những bệnh có tỉ lệ mắc và tử vong cao nhất trên thế giới. Tai biến do bệnh tim mạch gây ra thường để lại những di chứng khá nặng nề. Trong đó bệnh vữa xơ động mạch (VXĐM) với những tai biến như bệnh mạch vành, nhồi máu cơ tim, đột tử, nhồi máu não là nguyên nhân tử vong hàng đầu ở các nước công nghiệp. Cho tới nay người ta đã phát hiện được nhiều yếu tố nguy cơ tác động đến sự hình thành và phát triển VXĐM. Rối loạn lipid máu được coi là một trong những nguyên nhân hàng đầu trong bệnh lý VXĐM. Phát hiện sớm, phòng và điều trị kịp thời góp phần làm giảm tỷ lệ mắc và tai biến do bệnh gây ra. ở Việt Nam, những bệnh này trước đây ít gặp, nhưng trong những năm gần đây đang có chiều hướng gia tăng theo nhịp độ phát triển của xã hội. Các nghiên cứu lâm sàng cho thấy làm giảm nồng độ lipid máu sẽ hạn chế và làm giảm đáng kể tỷ lệ bệnh VXĐM. Việc làm giảm lipid máu có nhiều biện pháp trong đó việc điều chỉnh chế độ ăn và dùng thuốc là hoàn toàn cần thiết. Hiện nay có rất nhiều thuốc điều trị rối loạn lipid máu như: dẫn xuất íibrat, dẫn xuất statin, acid nicotinic tuy nhiên phải dùng thuốc lâu dài, liều dùng tương đối lớn, và thường gây những tác dụng phụ khó chịu cho bệnh nhân như buồn nôn, nôn, tiêu chảy Chế độ ăn hợp lý là một trong những nguyên tắc phải tuân thủ chặt chẽ trong phác đồ điều trị rối loạn lipid máu. Đã có nhiều nghiên cứu cho rằng chế độ ăn giàu chất xơ có rất nhiều trong củ, trái cây, có tác dụng hạ lipid máu. Ngày nay chất xơ được quan niệm rộng rãi hơn trong phòng và chữa bệnh. Tuy không có giá trị dinh dưỡng nhưng nó được coi là thành phần không thể thay thế được đối với sức khoẻ con người. Chất xơ có nhiều trong thực phẩm, thuốc. Mỗi nước khác nhau có một thói quen sử dụng những thực phẩm khác nhau. Do vậy chúng tôi đã tiến hành "nghiên cứu thử tác dụng hạ lipid máu của một số chất xơ" với các vị thuốc là bột sắn dây, củ sắn dây chín, khoai lang chín và khoai lang sống trên chuột nhắt trắng được gây tăng cholesterol ngoại sinh theo mô hình của Ruegamen cải tiến. Tác dụng của thuốc được đánh giá theo 2 chỉ số: + Cholesterol máu toàn phần. + Triglycerìd máu. PHẦN I TỔNG QUAN 1. TỔNG QUAN VỂ LIPID MÁU 1.1. Lipid và vai trò của lipid [6],[16]: Lipid là dẫn xuất của acid béo(AB), là một trong ba thành phần quan trọng nhất của cơ thể sống: glucid, lipid, protein. Lượng lipid trong huyết tương toàn phần trong cơ thể khoảng 360 - 820 mg/dl bao gồm CH, CH ester, TG, phospholipid, AB. Theo phân loại của Blood, lipid được chia thành 3 loại: * Lipid đơn giản: là ester của acid béo với các alcol khác nhau (glycerid, sáp ong, sterid). * Lipid phức tạp: khi thuỷ phân giải phóng ngoài alcol và acid béo còn có các thành phần khác (acid phosphoric, các ose ). * Tiền chất của lipid và dẫn xuất của lipid: Vai trò của lipid đối với cơ thể: * Cung cấp và dự trữ năng lượng cho cơ thể: bao gồm năng lượng hoạt động của các cơ quan và năng lượng dự trữ: Ig TG (TG) phân giải đến cùng giải phóng 9,3 Kcal, còn Ig glucid hay protid phân giải chỉ giải phóng 4,1 Kcal. Lipid dự trữ chủ yếu là TG tập chung phần lớn ở mô mỡ, nó thường thay đổi theo chế độ ăn và trạng thái cơ thể. Bình thường lượng lipid dự trữ có thể cung cấp năng lượng cho cơ thể hoạt động nhẹ từ 20-35 ngày. Ngoài vai trò dự trữ năng lượng tổ chức mỡ còn đóng vai trò ngăn nhiệt ở những tổ chức dưới d a. * Tham gia vào cấu tạo tế bào: nhất là tế bào thần kinh và cơ quan nội tiết. Lipid phức tạp có trong thành phần của các tế bào của một số mô quan trọng như: sphingomyelin có ò phổi, lách, não, tế bào thần kinh; gangliosid có ở chất xám của não, lách, hồng cầu, đầu mút các dây thần kinh, lipid không phân cực có tác dụng cách điện cho phép truyền nhanh các sóng khử cực theo trục sợi thần kinh. * Hoà tan và hấp thu các vitamin tan trong dầu (A, D, E, K), do đó ảnh hưởng tới quá trình hấp thu và vận chuyển các chất tan trong dầu. * Cung cấp các sản phẩm chuyển hoá của lipid: chúng được dùng để tổng hợp một số chất khác như glucid. Trong một số trường hợp đặc biệt lipid còn tham gia vào áp lực keo của máu. 1.2. Lp và vận chuyển Lp [13], [23]: 1.2.1. Cấu trúc và phân loại Lp Lipid có khả năng lưu thông được trong huyết tương là do nó liên kết tạo phức với protein, gọi là Lipoprotein (Lp) là dạng vận chuyển lipid trong huyết tương. Phần protein kết hợp với lipid gọi là apolipoproteinp (ApoLp), có nguồn gốc tại ruột hoặc gan. Vai trò của Lp là vận chuyển lipid nội sinh và ngoại sinh. Lp có dạng hình cầu có đường kính từ 100 - 800 Angstron chia làm 2 phần: phần vỏ ngoài chứa ApoLp và các lipid phân cực (phospholipid, CH tự do) đảm bảo tính hoà tan của phân tử Lp trong huyết tương; phần lõi chứa TG và CH ester hoá không phân cực. Lp có tỉ lệ protein Aipid khác nhau thì có tỉ trọng khác nhau và có thể phân biệt được bằng siêu li tâm hoặc điện di (xem bảng 1). Tuy nhiên, cả hai cách phân loại trên mới chỉ quan tâm đến phần lipid của Lp. Ngày nay người ta biết rằng phần ApoLp mới đại diện cho phần “thông minh”. Chúng giữ vai trò chủ chốt trong vận chuyển lipid cả về chất và lượng, trong tương tác Lp - receptor và trong điều hoà hoạt động của các enzym tham gia trong chuyển hoá Lp. Dựa vào acid amin, phân tử lượng, chức năng, ApoLp được xếp thành các nhóm khác nhau và xếp theo thứ tự chữ cái A, B, c cho các ApoLp chính và D, E cho các ApoLp phụ; mỗi nhóm lại được chia thành các nhóm nhỏ hơn; Nhóm A gồm Aị, A2, A4; Nhóm B gồm B48, Bjoo; Nhóm c gồm C|, C2, Các ApoLp khác nhau thì có chức năng khác nhau (xem bảng 2). Bảng 1: Phăn loại các lipoprotein huyết tương người Phân loại + Theo điện di + Theo tỷ trọng Điểm xuất phát Chylomycron (CM) d=0,94 Pre-P VLDL d=0,95-1,006 p IDL+LDL d = 1,007-1,063 a HDL D = 1,006-1,210 Thành phần: Protein (%) 0,5-2 12 25 50 Apo chính B48,C B|00, E B|00, E A|, A2, c, D Lipid (%) 98 - 99,5 88 75 50 Lipid chủ yếu TG TG CH phospholipid, CH Nguồn gốc Ruột non Gan và ruột non Sản phẩm chuyển hoá của VLDL Gan và ruột non Chức năng Vận chuyển TG ngoại sinh Vận chuyển TG nội sinh Vận chuyển CH và phospholipid tới tế bào ngoại vi Vận chuyển CH từ tế bào ngoại vi về gan 1.2.2. Chuyển hoá và vai trò Lp [6], [13], [17]: Lp được tổng hợp tại gan và ruột. Gan tổng hợp các Lp từ các sản phẩm của glucid, lipid và các acid amin (acid amin tạo ceton ). Quá trình tổng hợp xảy ra trên bề mặt của hệ thống lưới trong chất nguyên sinh của tế bào gan. Ruột tổng hợp Lp chính là chylomycron, không bị chuyển hoá ở gan. [...]... ăn Trong cơ thể, chất xơ hầu như không được hấp thu qua đường tiêu hoá và không chịu tác dụng của men tiêu hoá, và bị phân huỷ một phần bởi hệ vi khuẩn đường ruột ở ruột già Chất xơ cố hai loại: chất xơ hoà tan và chất xơ không hoà tan - Chất xơhoà tan: gồm chất nhầy, gôm, các pectin Trong nước, các chất xơ hoà tan sẽ trương nở và hoà tan trong nước tạo thể gel Khi qua ruột, chất xơ hoà tan sẽ tạo... thu một số chất dinh dưỡng và máu, và cũng làm tăng độ xốp, mềm của bã thải tiêu hoá - Chất xơ không hoà tan: gồm cellulose, hemicellulose có trọng lượng phân tử cao, có nhiều trong vỏ hoa quả và rau Loại này không tan trong nước nhưng nó thấm nước trong ruột và thải ra ngoài theo phân Tác dụng chất xơ: - Hạ CH h u y ế t, nhiều nghiên cứu đã chứng minh rằng chất xơ làm chậm quá trình chuyển hoá lipid, ... tăng chylomycron máu hay hội chứng tăng TG máu ngoại sinh Tvp II: tăng Ị3 Lp máu - Typ Ila: tăng CH máu nguyên phát - Typ Ilb: tăng lipid máu hỗn hợp gia đình Tvp III: rối loạn Lp ị3 máu Typ IV: tăng TG máu nội sinh hay tăng VLDL máu Tvp V: tăng TG máu hỗn hợp hay lipid máu hỗn hợp 1.3.2 Bệnh căn: Hội chứng tăng lipid máu có thể do nguyên phát hoặc thứ phát - Hối chứng tăng lipid máu nguyên phát:... cho thấy mô hình gây tăng CH ngoại sinh đạt kết quả tốt, các chỉ số trung bình về lipid máu của lô gây tăng, tăng rõ rệt so với lô thường với độ tin cậy có ý nghĩa thống kê, cho phép chúng tôi có thể áp dụng mô hình này để thử tác dụng hạ CH của thuốc nghiên cứu 2.2 Kết quả hàm lượng CH, TG ở lô dùng thuốc Để khảo sát tác dụng hạ lipid của các thuốc ở lô điều trị, thuốc được trộn cùng với thức ăn ngay... vào cơ thể chất xơ thấm nước trương nở to ra làm tăng khối lượng bã thải, đồng thời nó kích thích nhu động ruột làm tăng quá trình đào thải chất bã 12 - Chống béo phì: chất xơ tạo cảm giác no, rất thích hợp với người muốn giảm cân - Phòng ngừa ung thư kết tràng à bất cứ giai đoạn nào Cơ chế tác dụng hạ CH huyết của chất xơ là không hoàn toàn giống nhau đối với mỗi loại chất xơ - Các chất xơ hoà tan:... "r? Ü I < Q Hình 1: Tác dụng của thuốc tới CH b X Tác dụng của bột sắn dây và củ sắn dây chín với liều 2gỉ con! ngày 7 ngày: Củ sắn dây chín có tác dụng hạ CH mạnh nhất 24% với độ tin cậy trên 99%, hạ TG 16,2% vói độ tin cậy trên 95% Bột sắn dây có tác dụng hạ CH không rõ ràng (14%), giảm TG 16,1% so với lô chứng với độ tin cậy trên 95% Điều này chứQg tỏ củ sắn dây chúi có tác dụng tốt hơn bột sắn... chứQg tỏ củ sắn dây chúi có tác dụng tốt hơn bột sắn dây Hiện nay, chúng tôi cũng chưa tìm thấy tài liệu nghiên cứu về tác dụng của chúng tới chuyển hoá lipid Do hạn chế về thòi gian, chúng tôi chưa có điều kiện nghiên cứu sâu về cơ chế tác dụng của chúng Theo chúng tôi củ sắn dây chín có tác dụng hạ CH tốt hotti bột sắn dây là do: 31 ... lệ vữa xơ động mạch rất thấp Các chỉ số HDL-C hay ApoLpAị cũng có mối tương quan tương tự HDL 1.3 Hội chứng tăng lipid máu [10], [23]; 1.3.1 Định nghĩa và cách phán loại Hội chứng tăng lipid máu là tình trạng TG hoặc CH hoặc cả hai tăng cao trong máu [16] Có 2 cách phân loại hội chứng tăng lipid dựa vào các thành phần lipid máu hay các thành phần Lp máu • Phân loai theo các thành phần lipid máu De... chúng quay trở lại máu Cơ thể luôn có sự điều tiết để sản xuất ra lượng acid mật đã mất đi mỗi ngày, gan sẽ tăng cường sản xuất acid mật từ CH dẫn đến làm giảm CH huyết - Một số chất xơ có tác dụng thông qua acid propylic mà nó sinh ra khi lên men ở kết tràng Khi được hấp thu, acid này ức chế enzym HMG CoA reductase, là một enzym cần thiết cho sự tổng hợp CH [2] Chất xơ hoà tan còn tác dụng giảm nguy cơ... dây và củ sắn dây chín đều có tác dụng làm giảm TG khoảng 16% và sự giảm này có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 - Mức giảm TG ở dạng sắn dây chín thấp hơn mức giảm CH Còn dạng bột sắn dây thì mức giảm TG gần tương đương mức giảm CH 27 2,2.2 Ảnh hưởng của khoai lang chín và sống tới các chỉ sô lipid trên chuột được gây tăng CH máu: Chúng tôi tiến hành nghiên cứu tác dụng của khoai lang với hai dạng dùng . người. Chất xơ có nhiều trong thực phẩm, thuốc. Mỗi nước khác nhau có một thói quen sử dụng những thực phẩm khác nhau. Do vậy chúng tôi đã tiến hành " ;nghiên cứu thử tác dụng hạ lipid máu của. tiến. Tác dụng của thuốc được đánh giá theo 2 chỉ số: + Cholesterol máu toàn phần. + Triglycerìd máu. PHẦN I TỔNG QUAN 1. TỔNG QUAN VỂ LIPID MÁU 1.1. Lipid và vai trò của lipid [6],[16]: Lipid. à bất cứ giai đoạn nào Cơ chế tác dụng hạ CH huyết của chất xơ là không hoàn toàn giống nhau đối với mỗi loại chất xơ. - Các chất xơ hoà tan: làm tăng độ nhớt chất chứa trong dạ dày và ruột,