Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học cây ngoi phần 1

Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học cây ngoi phần 1 Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học cây ngoi phần 1 Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học cây ngoi phần 1 Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học cây ngoi phần 1 Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học cây ngoi phần 1 Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học cây ngoi phần 1 Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học cây ngoi phần 1

BỘYTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI • • • • NGUYỄN THỊ BÍCH NGỌC G Ó P P H ầ a r K canÊST c ủ k l THÀỈHH PH Ẩ K H O Á H Ọ C CỈẰr BTGOI {.Solanum verbasci£oUum\j.^ Solanaceae) (KHOÁ LUẬN TÓT NGHIỆP DƯỢC sĩ ĐẠI HỌC KHOÁ 2002-2007) Người hướng dẫn iThS.NGUYẼN HOÀNG TUẤN Ncd thực hiện : Bộ môn Dược liệu trường Đại học Dược Hà Nội Viện Dược liệu Hà nmyỴX, ỉ Thời gian thực hiện : 02/2007-05/2007 HÀ NỘI, THÁNG 05-2007 LỜI CẢM ƠN Đề tài này được thực hiện tại bộ môn Dược liệu- trường đại học Dược Hà Nội, viện Dược liệu. Với sự kính trọng và lòng biết ơn sâu sắc, tôi xin gửi lcd cảm 0fn chân thành tói: ThS. Nguyễn Hoàng Tuấn, ngưòi thầy đã trực tiếp hướng dẫn động viên và tận tình chỉ bảo cho tôi trong suốt thòi gian làm khóa luận tốt nghiệp. Nhân dịp này tôi cũng xin gửi lời cảm ơn tới: Các thầy cô viện Dược liệu. Các thầy cô và các anh chị kỹ thuật viên trong bộ môn Dược liệu đã nhiệt tình giúp đỡ, đóng góp ý kiến, tạo điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt thòi gian làm ở bộ môn. Ban giám hiệu, Đảng uỷ, các Bộ môn cùng đoàn thể các thầy cô giáo Trường Đại học Dược Hà Nội đã tạo điều kiện giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và làm việc tại trưcíng. Cuối cùng tôi xin gửi lời cảm ơn tói những ngưòi thân yêu trong gia đình, bạn bè, những người luôn chăm sóc, động viên, giúp đỡ tôi trưởng thành trong cuộc sống và sự nghiệp. Hà Nội, 05-2007 Sinh viên Nguyễn Thị Bích Ngọc MỤC LỤC Trang ĐẶT VẨN Đ Ề 1 PHẦN 1: TỔNG QUAN 2 1.1. Tài nguyên họ Cà 2 1.2. Chi Solanum 3 1.2.1. Đặc điểm thực vật chi Solanum 3 1.2.2. Phân bố của chi Solanum 4 1.2.3. Số lượng loài thuộc chi Solanum 4 1.2.4. Thành phần hoá học của chi Solanum 5 1.2.5. Tác dụng sinh học của các loài Solanum 8 1.2.6. ứig dụng trong Y học 11 1.3. Cây Ngoi 11 1.3.1. Đặc điểm thực vật cây Ngoi 11 1.3.2. Phân bố và sinh thái 12 1.3.3. Các kết quả đã nghiên cứu về cây Ngoi 13 PHẦN 2: THỰC NGHIỆM VÀ KÊT QUẢ 17 2.1. Nguyên vật liệu và phương pháp thực nghiệm 17 2.1.1. Nguyên vật liệu 17 2.1.2. Phương pháp nghiên cứu 19 2.2. Kết quả thực nghiệm và nhận xét 20 2.2.1. Kết quả định tính các nhóm hợp chất hữu cơ có trong các bộ phận của cây Ngoi bằng phản ứng hoá học 20 2.2.2. Định lượng và phân tích thành phần tinh dầu trong lá và quả Ngoi 28 2.2.3. Nghiên cứu Flavonoid trong lá Ngoi 31 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC MỘT SỐ CHỮ VIẾT TẮT VÀ CÁC KÍ HIỆU DM : Dung môi EtOAc : Ethyl acetat MS : Mass spectrometry MeOH : Methanol TP : Toàn phần s. : Solatium SKLM : Sắc kí lớp mỏng uv : Ultraviolet spectroscopy DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ sơ Đổ Trang Bảng 1: Kết quả định tmh các nhóm chất trong lá, vỏ thân và quả Ngoi bằng phản ứng hoá học. 27 Bảng 2: Kết quả định lượng tinh dầu lá, quả. 29 Bảng 3: Kết quả phân tích tinh dầu bằng phương pháp GCMS. 30 Bảng 4: Kết quả SKLM một chiều dịch chiết Flavonoidtp trong các hệ dung môi khác nhau. 35 Bảng 5: Kết quả xác định hàm lượng cắn trong phân đoạn Ethylacetat. 36 Sơ đồ: Qui trình chiết Flavonoid trong lá Ngoi. 32 Trong Y học các chi có nhiều ứng dụng là Atropa, Daruta, Scopolia, Hyoscyamus và Solanum. Trong cuốn “Từ điển cây thuốc Việt Nam” của Võ Văn Chi (1997) có mô tả 30 loài dùng làm thuốc [3]. Nhân dân Việt Nam và nhiều nước khác trên thế giới đã dùng lá và hạt s. nigrum (Lulu đực) điều trị bệnh viêm khớp, gut, các bệnh của da, giảm đau (nhất là đau do ung thư, vết bỏng và đau do thần kinh), giải nhiệt, tán máu ứ, giải nhiệt, viêm họng, ở Việt Nam, Cà dại hoa trắng được dùng ngoài, giã nát bôi ngoài da chỗ chân tay nứt nẻ. ở Ấi Độ dùng nước ép Cà dái dê tím dùng chữa bệnh đau răng, bột rễ chữa bệnh viêm loét ở mũi, toàn cây sắc uống chữa đau bụng. Cà độc dược {Datura metel L.) làm thuốc chữa ho hen, đau bụng đau dạ dày; dùng cây Khủ khỏi {Lycium sinense Mill.) dùng làm thuốc chữa bệnh ho lao, viêm phổi và làm thuốc bổ [21], [22]. Ngày nay, các cây họ Cà không chỉ được sử dụng theo kinh nghiệm dân gian mà còn được chiết ra nhiều hoạt chất có vai trò quan trọng trong y học như: Atropin, Scopolamin (từ Solanum lurida Dun., Solanum japónica L.), Solasodin (từ Solanum aviculare Forst, Solanum laciniatum L.) đang được sử dụng để bán tổng hợp các thuốc Steroid [11], [16]. 1.2. Chi Solanum 1.2.1. Đặc điểm thực vật chi Solanum ơii Solanum được c. Linné định loài từ năm 1735, càng về sau số loài càng được bổ sung thêm. Oii Solanum theo hệ thống phân loại mới của Takhtajan (1987) [37]. Ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta). Lớp Ngọc Lan {Magnoliosida). Phân lớp Hoa Môi (Lamiaceae). Họ Cà (Solanaceae). Chi Solanum. • Đặc điểm thực vật của chi Solanum: Cây thân cỏ, bụi hiếm khi là cây thân gỗ. Lá thường đơn (trừ Solanum tuberosum), mọc so le, mép lá nguyên hay xẻ thuỳ, thường có lông che chở. Trên gân lá và thân thường có gai. Cụm hoa xim hay chùm mọc ở gần ngọn hay kẽ lá, có hiện tượng lôi cuốn. Đài có tai cao, thường 5 hoặc 10, có lông ở mặt ngoài. Tràng hoa dạng ống ngắn, xẻ thành 5 hoặc 10 cánh. Nhị có chỉ nhị rất ngắn, đính trên tràng, bao phấn thuôn nhọn đầu, dính thành một ống bao quanh nhụy, mở ở đỉnh hay gần đỉnh, mở theo đường nứt dọc. Vòi nhụy ngắn và nhỏ. Bầu trên thưòfng có 2 ô (có thể hơn là do có vách giả). Quả mọng, hạt nhiều, dẹt, phôi hướng ra ngoài. Về giải phẫu có vòng libe quanh tuỷ ờ cuống lá và thân là một đặc điểm đặc biệt của chi này. Biểu bì mang lông che chở và lông tiết [2], [4], [10]. 1.2.2 Phân bố của chi Solanum Các loài thuộc chi Solanum phân bố chủ yếu ở các vùng nhiệt đới, cận nhiệt đói và ôn đói ấm. Vùng nhiệt đói Trung và Nam Mỹ có số lượng loài thuộc chi Solanum nhiều nhất đa dạng nhất, sau đó đến châu úc, châu Phi, châu Á và nhiệt đới trong đó có Việt Nam [1], [2], [10], [17]. ở Việt Nam chi Solanum phân bố khắp cả nước. 1.2.3. Số lượng loài thuộc chi Solanum Theo K.P.Kirtika và B.D.Basu trên thế giói có khoảng 1225 loài Solanum, còn theo Mohd Zain Hasan và P.C.M.Jansen (1994) có 1500 loài [17]. Trong cuốn “Tài nguyên và cây thuốc Việt Nam” của Viện Dược Liệu (1993) ghi chi Solanum có khoảng 2000 loài [24]. Trong cuốn “Thực vật học” của Trường Đại học Dược Hà Nội giới thiệu khoảng 1400 loài [2]. Tuy số liệu còn chưa được biết chính xác nhưng các tác giả đều khẳng định chi Solanum là chi lớn nhất họ Cà. lệ % của Solasodin là 0,02-0,35 trong vỏ thân, 0,03-0,20% trong lá và 0,35- 1,60% trong quả và 0,02 % trong rễ của loài s. nigrum [36]. Tomatidin (5. dulcamara, Lycopersium pimpenellifolia). Tomatidenol (5. dulcamra, s. paludosum, s. havannense). Soladulcidin (5. dulcamra). > Nhóm Solanidan: nhân Steroid giống như các chất nhóm Spirosolan nhưng mạch nhánh thay đổi: vòng E và vòng F chung nhau IC và IN (Nhóm Indolizidin). Các Alcaloid trong nhóm này gồm: Solanidin (5. tuberosum, s. chacoense ). Demessidin ịS. demessum ). Leptinidin (S. chacoense). > Nhóm Aminofurostan: Có hoặc không có dị tố N nhưng vẫn được xếp vào Alcaloid vì có -NH2 ở vị trí C3 thay cho nhóm hydroxyl ở hai nhóm chất trên. Các Aglycol thuộc nhóm này gồm: Jurubidin (5. paniculatum). Paniculidin (5. paniculatum). Solanocapsin (5. pseudocapsicum, s. capsicastrum ). > Nhóm 22,26- epimio cholestan: vòng E nối vòng D bởi 1 c, không có vòng F. C22và C26 nối nhau qua cầu nối epimio (=N-). Các Glycol nhóm này gồm: Tomalitidin (5. tomatillo). Solafrolidin (S. congestiflorum). Solacongestidin (S. congestiflorum). Phần đường: thường là các đường đơn như D-glucose, D-galatose, D-frutose, D- xylose, L- rhamnose .gắn vào C3 bằng liên kết osid. ■ Saponin steroid Ngoài Glycoalcaloid, các cây thuộc chi Solamm còn có Saponin steroid nhóm Spirostan và nhóm Furostan [11], [15], [16]. Diosgenin: CÓ Ở các loài s. aviculare, s. laciniatum, s. xanthocarpum. Anosmagenin {S. vespertilio). Bahamgenin (S. bahamense). Isonuatigenin (5. sisymbriofolium). Laxogenin {S. meridense). Hispidogenin (S. hispidum). Hispigenin (S. hispidum). Solapigenin (5. hispidum). Neosolaspigenin (S. hispidum). Brisbagenin {S. polyadenium). Polygenin {S. polyadenium). Chlorogenin (5. paniculatum, s. torvum). Epitigogenin (S. paniculatum). \soc2ic\à%Qvân{S. jamaicense). Paniculagenin (5. paniculatum). Laxumin (S. laxum, s. vespertilio). Các Saponin steroid nhóm Furostan tồn tại chủ yếu ở dạng Glycosid. Aglycol chủ yếu là Nuatigenin và các dẫn chất của Furostan 3,22,26- triol gồm Melongosid (N,0 ,P) trừ s. melongena và Uttrosid (A,B) từ s. nigrum [28]. • Flavonoid Flavonoid trong các cây thuộc chi Solanum không nhiều, thường là dẫn chất Flavon và Anthocyanidin [28]: ■ Các dẫn chất Flavon: Các Saponin steroid nhóm Spirostan trong chi Solanum [15], [16], [28], [30]. [...]... sử dụng để bán tổng hợp các thuốc Steroid 1. 3 Cây Ngoi Cây Ngoi còn được biết đến vói một số tên gọi khác như: Cà hôi, La rừng, La, Toong muốc (Tày) Tên khoa học cây Ngoi là Solanum verbascifolium L (hay Solanum erianthum Don., Solanum pubescens Roxb.) thuộc họ Cà, Solanaceae [13 ] 1. 3 .1 Đặc điểm thực vật cây Ngoi Theo giáo sư Đỗ Tất Lợi [13 ] cây được mô tả: Cây nhỏ hoặc nhỡ cao 2,5-5 m, lá phủ một lớp... dụng sinh học của cây để có thể kết hợp giữa Y học dân gian và Y học hiện đại, phát triển loài cây sấn có ở nước ta để góp phần cung cấp nguồn dược liệu cho điều trị bệnh cũng như cung cấp nguyên liệu để sản xuất thuốc 16 7 Hình 2: Cụm hoa Hình 1: Anh toàn cây ■ vv ■ * ' ♦ 1* ' > I^ ^ 4 ^^'Ịf J Hình 4: Cành mang cụm hoa quả Hình 3: Cành mang cụm quả 18 2.2 Kết quả thực nghiệm và nhận xét 2.2 .1 Kết quả... là thức ăn cho động vật gặm nhấm Hạt giống theo phân của chúng phân tán khắp mọi noi Cây con mọc từ hạt thường thấy vào tháng 4-5 hàng năm Cây được trồng dễ dàng bằng hạt [22 ] 1. 3.3 Các kết quả đã nghiên cứu về cây Ngoi I.3.3.I Thành phần hoá học Ngay từ năm 18 25 Payer và Chevalier đã công bố tìm thấy “vết Solanin” ở cây 5 verbascifolium L Sau đó Haynes et al., Perez-mediria et al và Schreiber et al... phân biệt (ống 1, ống 2): ■Cho vào ống 1: 5 ml dung dịch NaOH 0 ,1 N (PH =13 ) ■Cho vào ống 2; 5 ml dung dịch H ơ 0,1N (PH =1) Thêm vào mỗi ống 1 ml dịch chiết, lắc mạnh hai ống theo chiều dọc 21 trong 30 giây Để yên 15 phút thấy cột bọt trong ống 1 cao hơn trong ống 2, chứng tỏ Saponin trong bột lá là Saponin steroid Kết quả: Các phản ứng đều dương tính Làm tưofng tự với vỏ thân và quả cây Ngoi đều cho... Người dân Đài Loan dùng Ngoi chữa lỵ, viêm ruột, sốt Người Indonexia lấy nước sắc rễ Ngoi với Gừng và Hành chữa tiểu tiện ra máu, lá Ngoi chữa khí hư ở phụ nữ, vò nát với muối dùng cho phụ nữ khi đẻ ở Philippin, lá Ngoi hơ nóng đắp lên trán chữa đau đầu, nước sắc lá Ngoi chữa kiết lỵ và tiêu chảy [19 ] Tuy nhiên trong Y học hiện đại vẫn chưa có ứng dụng gì từ các thành phần của cây Ngoi để nâng cao hiệu... Alcaloid và hợp chất Steroid của lá cây Ngoi là: Solasodin 57%, Solasodien 3,0%, Solafloridin 8,0%, Tomatidenol 23,0%, Diosgenin 8,5 %, Vespertilin và A-5 ,16 -pregnenolon Trong thân chứa: Solasodin 71, 0%, Solasodien 3,5%, Solafloridin 11 ,0% Diosgenin 25,0% Trong quả chứa: Solasodin 50,0%, Solasodien 3,5%, Solafloridin 11 ,0%, Diosgenin 10 ,0%, Vespertilin 10 ,0% và A -10 -5a-pregnenolone Quả chín chứa ít... nhựa lá và 1, 42 g/lOOOg trong nhựa vỏ thân [29] Dầu hạt của Artobotrys odoratissimus, Lagascea mollis Mimosa púdica, Solanum trilobatum và Solanum verbascifolium được nghiên bằng sắc ký cột pha đảo vói dầu béo Thành phần của acid Linoleic là 42,2-60 ,1% và acid Oleic 10 ,9-27,8%, acid Palmitic 12 ,9 -17 ,6%, acid Stearic 3,2 -11 ,9% [27] Theo Trần Anh Dũng (2006), hàm lượng Solasodin trong lá Ngoi thu hái... hoặc quả cây Ngoi 10 g, lá dâm bụt 10 g, vỏ rễ hoặc vỏ thân cây gạo (cạo sạch vỏ ngoài) 20 g Tất cả giã nát để ngập xâm xấp nước vo gạo đặc, đun sôi nhỏ lửa đến khi sền sệt Để nguội đắp vào chỗ bị tràng nhạc, băng lại, ngày thay 1 lần Kinh nghiệm cho thấy có thể chữa tràng nhạc chưa mưng mủ hoặc đã có mủ 15 ■Chữa hắc lào: Lá Ngoi tươi giã nát, vắt lấy nước đặc bôi, ngày làm 1 lần ở Trung Quốc, Ngoi còn... các nhóm hợp chất hữu cơ có trong các bộ phận của cây Ngoi bằng phản ứng hoá học 2.2 .1. 1 Định tính Alcaloid Tiến hành : Lấy 10 g bột lá cho vào bình nón dung tích 10 0 ml, dùng dung dịch acid H2SO4 3% thấm ẩm dược liệu, đun cách thuỷ khoảng 1 giờ, Lọc lấy dịch chiết nước acid để làm các phản ứng định tính vói các thuốc thử Alcaloid Lấy 4 ống nghiệm: • Ống 1: Cho vào Iml dịch chiết, thêm vào 3 giọt thuốc... liệu khô là 0 ,12 % [5] 1. 3.3.2 Tác dụng dược lý và những ứng dụng của cây Ngoi trong Y học • Tác duns dươc lý [22]: ■ Tác dụng đối vód cơ trơn và cơ vân: Dịch chiết từ lá Ngoi và toàn cây vói nồng độ tương đương 0, 013 g dược liệu/ ml có tác dụng gây co bóp hồi trường cô lập chuột lang Cường độ co bóp tưoíng đương khoảng 65% co bóp tối đa do Acetylcholin gây nên Atropin có thể ức chế một phần tác dụng . trong Y học 11 1. 3. Cây Ngoi 11 1. 3 .1. Đặc điểm thực vật cây Ngoi 11 1. 3.2. Phân bố và sinh thái 12 1. 3.3. Các kết quả đã nghiên cứu về cây Ngoi 13 PHẦN 2: THỰC NGHIỆM VÀ KÊT QUẢ 17 2 .1. Nguyên. nghiệm 17 2 .1. 1. Nguyên vật liệu 17 2 .1. 2. Phương pháp nghiên cứu 19 2.2. Kết quả thực nghiệm và nhận xét 20 2.2 .1. Kết quả định tính các nhóm hợp chất hữu cơ có trong các bộ phận của cây Ngoi. năm. Cây được trồng dễ dàng bằng hạt [22]. 1. 3.3. Các kết quả đã nghiên cứu về cây Ngoi I.3.3.I. Thành phần hoá học Ngay từ năm 18 25 Payer và Chevalier đã công bố tìm thấy “vết Solanin” ở cây