Nghiên cứu một số yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất thu sản phẩm magnesi lactat từ lactobacillus acidophilus

ĐẶT VẤN ĐỀ Trong bào chế thuốc nhãn khoa, các chế phẩm quy ước thường có sinh khả dụng thấp do ảnh hưởng của nhiều yếu tố như: khả năng thấm hạn chế của giác mạc, phản xạ chớp mắt, tăng tiết nước mắt làm rửa trôi và pha loãng thuốc. Từ giữa thế kỉ 20, công nghệ nano ra đời đã đánh dấu một bước ngoặt lớn trong trong nền công nghệ dược phẩm, tạo ra nhiều dạng thuốc mới với ưu điểm vượt trội. Đặc biệt đối với các thuốc tác dụng tại chỗ ở mắt, công nghệ nano được coi là giải pháp hiệu quả giúp cải thiện đáng kể sinh khả dụng của thuốc do nhiều đặc tính riêng của tiểu phân nano. Piroxicam là một dược chất thuộc nhóm NSAIDs, điều trị chống viêm rất tốt trên mắt nhưng do độ tan thấp và dễ bị rửa trôi ở mắt nên sinh khả dụng kém. Một số nghiên cứu trên thế giới và trong nước đã công bố rằng hệ tiểu phân nano tinh thể có nhiều ưu điểm về bào chế, khả năng hòa tan và tính thấm nhưng dễ bị rửa trôi hơn một số dạng tiểu phân khác như nano polyme, nano lipid rắn, nano liposome. Vì vậy với mong muốn làm tăng sinh khả dụng của piroxicam chúng tôi thực hiện đề tài “ Nghiên cứu bào chế gel tra mắt chứa piroxicam nano 0,3%” với các mục tiêu: 1. Nghiên cứu xây dựng công thức gel tra mắt chứa 0,3% piroxicam nano tinh thể. 2. Đánh giá một số tính chất của gel tra mắt chứa 0,3% piroxicam nano tinh thể.

B Y T I HC HÀ NI LÊ TH HÀ NGHIÊN CU MT S YU T NH N HIU SUT THU SN PHM MAGNESI LACTAT T Lactobacillus acidophilus KHÓA LUN TT NGHI HÀ NI  2015 B Y T I HC HÀ NI LÊ TH HÀ NGHIÊN CU MT S YU T NH N HIU SUT THU SN PHM MAGNESI LACTAT T Lactobacillus acidophilus KHÓA LUN TT NGHI ng dn:  2. DS. Nguyn Minh Ngc c hin: BM. Công nghic HÀ NI  2015 LI C Vi tt c s kính trng và lòng bic, em xin chân thành gi li cn cô giáo   và DS. Nguyn Minh Ngc, nhng i c ting d em trong sut quá trình hc tp và nghiên cu khoa hc. i li ci thy TS. Nguyi, thy DS. Lê Ngc Khánh, thy ThS. Nguyn Khc Tip cùng toàn th thy cô giáo và các anh ch k thut viên b môn Công Nghing d và tu kin thun li cho em trong sut quá trình làm khóa lun. Do thi gian làm thc nghin thc ca bn thân còn có hn, khóa lun này còn có nhiu thiu sót. Em rt mong nhc nhng ý ki góp ca thy cô và các b có th hoàn thiu ca mình. Em xin chân thành c Hà N Sinh viên Lê Th Hà MC LC T V 1 NG QUAN 3 1.1. Magnesi lactat 3 1.1.1. m [35] 3 1.1.2. Công dng 3 1.1.3. Mt s sn ph ng 5 1.2. n xut Magnesi lactat 5 1.2.1. ng hp hóa hc 5 1.2.2. t 6 1.3. Vi khun sinh acid lactic 7 1.3.1. m nhóm vi khun sinh acid lactic 7 1.3.2. Chi Lactobacillus 7 1.3.3. Loài Lactobacillus acidophilus 8 1.4. Các nghiên c 10 T LIU 12 2.1. Nguyên vt liu, thit b 12 2.1.1. Nguyên vt liu 12 2.1.2. Thit b s dng 14 2.2. Ni dung nghiên cu 15 2.2.1. Nghiên cu ng cu kin kt tinh thu sn phm 15 2.2.3. Kho sát nh hng c  ng nuôi c n hiu sut sn phm Magnesi lactat 15 2.3. u 15 2.3.1. ng và nuôi cy 15 2.3.1.1. ng 15 2.3.1.2. ng hp Magnesi lactat 15 2.3.2.  dch lên men 16 2.3.3. nh cu trúc Magnesi lactat 16 2.3.5.  nh m t bào vi sinh vt. 17 2.3.6. ng Magnesi lactat theo ion Magnesi 18 2.3.7. u sut tiêu th ng ca vi khun 18 2.3.8.  18 C NGHIM, KT QU VÀ BÀN LUN 19 3.1. Kho sát ng ca mt s yu t n hiu sut thu tinh th Magnesi lactat. 19 3.1.1. ng cn hiu sut thu sn phm. . 19 3.1.2. ng ca nhi kn hiu sut thu sn phm. 22 3.1.3. ng ca thi gian kn hiu sut thu sn phm. 23 3.2. Kim nghim sn phm theo tiêu chun Anh (BP 2010) 27 3.3. Kho sát các yu t cng lên men n hiu sut thu sn phm Magnesi lactat 28 3.3.1. Kho sát nh hng cng nuôi cn hiu sut thu sn phm 28 3.3.2. Kho sát ng ca các ngun hydratcacbon ti quá trình lên men 30 3.3.3. Kho sát  ng ca n  glucose ti hiu sut sinh sn phm 32 KT LU XUT 36 DANH MC CÁC CH VIT TT ATCC Trung tâm gi ging quc gia M (American Type Culture Collection) BP Bristish Pharmacopoeia  n Vit Nam IV EP European Pharmacopoeia h Gi 1 H-NMR Ph cng t ht nhân proton ( 1 H - Nuclear Magnetic Resonance spectroscopy) IR Ph hng ngoi (Infrared Radiation) kl Khng MRS ng nuôi cy vi khun (de Man, Rogosa, Sharpe) L.acidophilus Lactobacillus acidophilus ATCC 4356 MS Ph khng (Mass spectrometry) OD M quang (Optical density) tt Th tích USP United States Pharmacopoeia PLA Polylactid DANH MC CÁC BNG 1.1. Mt sng .5 Bng 2.1. Các nguyên liu và hóa cht12 ng nhân ging13 ng lên men 13 Bng MRS lng13 Bng 2.5. Các thit b s dng 14 Bng 3.1. Bng kt qu u kin k20 Bng 3.2. Bng kt qu so sánh các thí nghim  nhi 22 Bng 3.3. Bng kt qu so sánh các thí nghim  th24 Bng 3.4. Kt qu phân tích ph hng ngoi ca sn phm25 Bng 3.5. Kt qu phân tích ph khng ca sn phm25 Bng 3.6. Kt qu phân tích ph cng t ca sn phm  26 Bng 3.7. Kt qu kim nghi 27 Bng 3.8. Hiu sut thu Magnesi lactat khi lên men  các pH khác nhau29 Bng 3.9. Hiu sut thu Magnesi lactat khi lên men dùng các loi hydratcacbon khác nhau 31 Bng 3.10. Kt qu lên men lactic vi các n glucose khác nhau 33 DANH MC CÁC HÌNH Hình 1.1. Cu trúc không gian ca Magnesi (L-) lactat Hình 1.2. L. acidophilus i kính hin vi quang hc Hình 1.3. L. acidophilus i kính hin t Hình 3.1. Hình dng tinh th  các thí nghim Hình 3.2. OD 600 ca dch nuôi cy L.acidophilus sau 24 gi tng nuôi cy có pH khác nhau Hình 3.3. Bi so sánh hiu sut to Magnesi lactat  các pH khác nhau Hình 3.4. Bi  so sánh hiu sut sinh Magnesi lactat khi s dng các ngun hydratcacbon khác nhau Hình 3.5. Bi so sánh hiu sut to Magnesi lactat  các n ng 1 T V Trong thi công ngh sinh hc lên ngôi, các sn phm lên men t vi sinh vt c ng dng ph bic ci sc bit là c phm vu th giu thuc v các thuc sinh hc. Trong các sn phm ca công ngh lên men vi sinh vt, acid lactic và mui lactat là nhng sn phi t rt sm và ng dng rng rãi, vì th Lactobacillus acidophilus, mi din hình ca nhóm vi sinh vt sinh lactic c quan tâm nghiên cu nhiu [2], [9]. Tuy nhiên  c ta hin nay, loi mui c nghiên cu tng hp ch yu mi ch dng  dng mu   n mt dn cht khác ca acid lactic có tính ng dng cao, li ích kinh t ln mà quy trình sn xun, hiu sut cao và tinh khit là mui Magnesi lactat. Magnesi là mt trong bn khoáng cht ph bin cn thit cho s phát trin ca  i [36], [57], [60], [66]. Thiu Magnesi có th d n nh  i nghiêm trng [28], [40], [54], [68]. Hin nay vic cung cp Magnesi t th  hng ngày  gim nhiu [31], [58], [61]. T các loc góp phn ci thing Magnesi,  vic hp thu Magnesi s b hn ch khi  suy yu [23],[45]. Hiu qu ca các dng thuc còn ph thuc nhiu vào sinh kh dng ca dng mui và bào ch cha Magnesi [19], [50]. Các mui Magnesi  có sinh kh dng thng mui Magnesi h [29], [46], [56], mui Magnesi lactat sinh kh dng cao (41%) [52]. Ngoài tác dng cha bnh, Magnesi lactat còn là nguyên liu sn xut calci lactat, acid lactic, polylactid (PLA, nha sinh hc) là nhng sn phm thông dng không ch s dc mà còn trong các ngành công nghip thc phm, công ngh cht do [27], [47]. Bi tính ng dng cao ca Magnesi lactat và tip ni nghiên cu c, chúng tôi la ch tài: Kho sát mt s yu t n hiu sut thu sn phm Magnesi lactat t Lactobacillus acidophilus 2 Vi nhng mc tiêu sau: - nh cu trúc Magnesi u ch bng hp s dng chng ging Lactobacillus acidophilus và la chu kin kt tinh sn pht tiêu chun Anh 2010. - La chc mt s thông s ng nuôi c nâng cao hiu sut thu sn phm Magnesi lactat. [...]... Khảo sát ảnh hƣởng của một số yếu tố đến hiệu suất thu tinh thể 3.1 Magnesi lactat Phương pháp kết tinh quyết định hiệu suất và độ tinh khiết của sản phẩm, vì vậy nghiên cứu khảo sát ảnh hưởng của yếu tố trên nhằm nâng cao hiệu suất và chất lượng sản phẩm 3.1.1 Ảnh hưởng của phương pháp kết tinh đến hiệu suất thu sản phẩm Mục tiêu: Lựa chọn được phương pháp kết tinh cho tinh thể tốt và hiệu suất thu tinh... đường đó [34] Do vậy, nghiên cứu tiến hành khảo sát ảnh hưởng của các yếu tố trên tới hiệu suất thu sản phẩm Magnesi lactat 3.3.1 Khảo sát ảnh hưởng của pH môi trường nuôi cấy đến hiệu suất thu sản phẩm Mục tiêu: Tìm pH môi trường nuôi cấy thích hợp để nâng cao hiệu suất lên men Tiến hành: Nuôi cấy L acidophillus trong môi trường MRS có bổ sung 2,6% (kl/tt) sữa với pH thay đổi từ 3,5 đến 8,0 (Chỉnh pH... 18 24 Lượng sản phẩm thu được (g) 4,22 6,20 6,52 5,59 6,45 Hiệu suất (%) 45,59 70,58 69,88 71,40 69,69 Các tiêu chí Thời gian kết tinh (giờ) 48 Nhận xét: Từ bảng 3.3 nhận thấy, hiệu suất thu sản phẩm kết tinh ở thời gian 1 giờ là thấp nhất (45,59%), còn từ sau 6 giờ đến 48 giờ thì hiệu suất thu sản phẩm hầu như không thay đổi, vào khoảng 70% Bàn luận: Thời gian kết tinh thường ảnh hưởng đến quá trình... Quốc 15 2.2 Nội dung nghiên cứu 2.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng của các điều kiện kết tinh thu sản phẩm  Phương pháp kết tinh  Nhiệt độ kết tinh  Thời gian kết tinh  Đo phổ H1 – NMR, IR, MS, xác định công thức muối ngậm nước 2.2.2 Kiểm nghiệm theo tiêu chuẩn Dược Điển Anh 2010 2.2.3 Khảo sát ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến hiệu suất sản phẩm Magnesi lactat  Khảo sát ảnh hưởng của pH môi trường... muối Magnesi (không tốn công nghiền, cải thiện độ hòa tan…), do đó chọn phương pháp gãi kết tinh 2 – 5 phút để thu tinh thể Magnesi lactat Kết luận: Lựa chọn phương pháp gãi kết tinh Magnesi lactat từ 2 – 5 phút áp dụng cho các thí nghiệm tiếp theo 3.1.2 Ảnh hưởng của nhiệt độ kết tinh đến hiệu suất thu sản phẩm Mục tiêu: Lựa chọn được nhiệt độ thích hợp nhất cho quá trình kết tinh thu hồi Magnesi lactat. .. Lan hợp muối calci Magnesi lactat và SERP, Monaco glycin Magnesi lactat, Magnesi citrat Các phƣơng pháp sản uất Magnesi lactat 1.2 1.2.1 Phương pháp tổng hợp hóa học Bằng các phương pháp tổng hợp hóa học, các nhà khoa học đã nghiên cứu tổng hợp được Magnesi lactat từ các nguồn nguyên liệu khác nhau như trong sản xuất acid lactic [13], [22]  Ưu điểm [6]: - Dễ thu được Magnesi lactat từ nhiều nguồn khác... độ từ 20 – 950C, đặc biệt là từ 50 – 900C Ở nhiệt độ cao, các tạp sẽ nằm lại trong pha lỏng, tránh đồng kết tinh với nhau và đồng kết tinh với Magnesi lactat [52] Kết luận: Nghiên cứu lựa chọn điều kiện kết tinh Magnesi lactat ở nhiệt độ 25 – 300C cho các thí nghiệm sau 3.1.3 Ảnh hưởng của thời gian kết tinh đến hiệu suất thu sản phẩm Mục tiêu: Lựa chọn được thời gian kết tinh phù hợp cho quá trình thu. .. thấy sản phẩm đạt tiêu chuẩn Dược điển Anh 2010 28 Khảo sát các yếu tố của môi trƣờng lên men ảnh hƣởng đến hiệu suất 3.3 thu sản phẩm Magnesi lactat Chủng L .acidophilus có thể lên men ở các môi trường pH khác nhau, chịu được pH tương đối thấp (5 – 6) [2], [3], [7] và có khả năng chuyển hóa nhiều loại hydratcarbon: fructose, galactose, glucose, lactose, maltose, mannose, sucrose và trehalose cho sản phẩm. .. trong sản phẩm mỹ phẩm: sản phẩm chăm sóc da, chăm sóc răng miệng… [47]  Trong công nghiệp: - Magnesi lactat là tiền sản phẩm trong công nghiệp lên men sản xuất acid lactic, các muối lactat khác, tiêu biểu như calci lactat Acid lactic và các dẫn xuất 5 của nó được dùng rộng rãi trong công nghiệp dược phẩm, thực phẩm, công nghiệp dệt, tổng hợp vecni, chất dẻo, nhựa gia công bằng nhiệt - Magnesi lactat. .. cho kết quả hiệu suất thấp khi kết tinh ở nhiệt độ 30 – 500C, tuy nhiên hiệu suất thu sản phẩm ở nhiệt độ phòng và nhiệt độ lạnh khác biệt là không đáng kể, lại tiết kiệm được năng lượng, thiết bị nên nghiên cứu chọn nhiệt độ 25 – 300C để thực hiện kết tinh Magnesi lactat Điều này phù hợp với nghiên cứu trước của Peter Johannes Marie Baets, với nguồn hydratcacbon thô, nhiều tạp, Magnesi lactat có thể . dng cao ca Magnesi lactat và tip ni nghiên cu c, chúng tôi la ch tài: Kho sát mt s yu t n hiu sut thu sn phm Magnesi lactat t Lactobacillus acidophilus . Pharma, Vit Nam 10 Magnerot Magnesi lactat, Acid orotic Wörwag Pharma, Nga 11 Magnesium recip Magnesi lactat, Magnesi citrat Recip, Thn 12 Magnesium NYCOMED, Romania 13. 15 Wamag Magnesi lactat, hn hp mui calci Hasco, Ba Lan 16 Magnesium Glycocolle Lafarge Magnesi lactat và glycin SERP, Monaco 1.2. t Magnesi lactat 1.2.1.