Bài thuyết trình Tiêu chuẩn kiểm nghiệm Staphylococcus Aureus

TIÊU CHUẨN KIỂM NGHIỆM STAPHYLOCOCCUS AUREUS Nội dung 1. Giới thiệu chung về S. aureus 2. Kiểm nghiệm S. aureus  Phương pháp đếm khuẩn lạc  Phương pháp MPN Giới thiệu về S. aureus 1. Lịch sử 2. Phân bố 3. Hình dạng tế bào 4. Điều kiện sinh trưởng 5. Đặc điểm sinh hóa 6. Khả năng gây bệnh 1. Lịch sử  Staphylococcus được Ogston phát hiện (1881) trong vết thương có mủ.  1884, Rosenbach tiếp tục nghiên cứu. Phân loại khoa học Domain Bacteria Regnum Eubacteria Phylum Firmicutes Class Bacilli Ordo Bacillales Familia Staphylococcaceae Genus Staphylococcus Species S. aureus Click to edit Master text styles Second level Third level Fourth level Fifth level Những cụm khuẩn lạc S. aureus trong đĩa thạch agar. Chú ý những vùng trống xung quanh các cụm, là do sự phân giải hồng cầu trong thạch. 2. Phân bố  Phân bố rộng rãi  Có nhiều trong sản phẩm động vật như thịt, sữa…  Ở người: da, tóc, khoang mũi.  Bị lây nhiễm từ người chế biến, động vật bị nhiễm bệnh.  Được xếp vào nhóm vi khuẩn cơ hội. 3. Hình dạng tế bào  Gram +  Hình cầu  Không sinh bào tử  Hiếu khí hoặc kỵ khí tuỳ ý.  Trong vết thương và máu thường thấy hình dạng giống chùm nho. Click to edit Master text styles Second level Third level Fourth level Fifth level Thí nghiệm nhuộm gram các tế bào S. aureus. Vách tế bào vi khuẩn gram dương dễ dàng bắt màu tím kết tinh. 4. Điều kiện sinh trưởng  Phát triển tốt ở các môi trường tổng hợp, môi trường thạch máu hoặc huyết thanh.  Nhiệt độ 37 C, pH 7.2.ᵒ On blood agar On TSA agar 5. Đặc điểm sinh hóa  Lên men đường, glycerol, manitol.  Khả năng chịu mặn cao.  Làm đông tụ sữa.  Sinh ß-hemolysis trong MT thạch máu.  Phản ứng indol, NH3.  Thuỷ phân gelantine, đông huyết tương. S. aureus dưới kính hiển vi 50000x [...]... trong phân người bị ngộ độc 6 Khả năng gây bệnh  Đau thắt bụng Tiêu chảy  Nôn mửa kéo dài từ 6 – 8h  Kiệt sức ở mức nghiêm trọng  Đau đầu toát mồ hôi Bủn rủn tay chân  Phục hồi sau 24 – 72h, không chết nhưng rất đau đớn do các phản ứng cực kỳ dữ dội Kiểm nghiệm S aureus 1 Môi trường, hoá chất 2 Định tính S aureus 3 Định lượng S aureus 1 Môi trường, hoá chất  Môi trường canh Mannitol Salt Broth... 24 giờ Thử nghiệm ngưng kết coagulase Thử nghiệm ngưng kết coagulase Tỉ lệ khuẩn lạc đặc trưng, coagulase (+) Tỉ lệ khuẩn lạc không đặc trưng, coagulase (+) Ria lên đĩa thạch BPA, ủ ở 37oC, 48 giờ Chọn khuẩn lạc đặc trưng Cấy vào TSA, ủ ở 37 ± 1oC, 24 giờ Thử nghiệm ngưng kết coagulase Ghi nhận số coagulase (+) ở mỗi độ pha loãng Tra bảng MPN Mật độ S aureus (MPN/g hay MPN/ml) Mật độ S aureus (CFU/g... sodium oxalate và được phân phối 0,3ml vào các ống nghiệm nhỏ 2 Định tính S aureus 3 Định lượng S aureus  Phương pháp đếm khuẩn lạc  Phương pháp MPN a Phương pháp đếm khuẩn lạc  Đồng nhất mẫu và pha loãng  Phân lập môi trường chọn lọc  Khẳng định  Tính kết quả a Phương pháp đếm khuẩn lạc Đồng nhất mẫu và pha loãng:  Đồng nhất mẫu bằng máy dập mẫu  Chuẩn bị dãy pha loãng thập phân thích hợp sao... Ha: tỉ số giữa số khuẩn lạc không đặc trưng cho thử nghiệm khẳng định (+) so với số khuẩn lạc không đặc trưng b Phương pháp MPN  Định lượng S Aureus trong mẫu có mật độ thấp, mật mật độ vi sinh vật cạnh tranh cao  Dung dịch mẫu được pha loãng thập phân với ba độ pha loãng thập phân liên tiếp  Có thể sử dụng phương pháp MPN với hệ thống 9 hay 15 ống nghiệm Đồng nhất mẫu và pha loãng mẫu thành các dãy...  Huyết tương thỏ Mannitol Salt Broth (MSB)  Phân tích định tính S aureus  Phân tích định lượng bằng phương pháp MPN Môi trường thạch máu  Sử dụng là máu cừu hay bê non dưới 5 tháng tuổi đã được loại bỏ các sợi máu hay máu đã được bổ sung chất chống đông citrate  Môi trường cần được pha chế ít nhất 2 ngày trước khi sử dụng để kiểm tra khả năng bị nhiễm Baird Parker Agar (BPA)  Thành phần lòng... thạch TSA  Cấy sinh khối vào các ống nghiệm chứa huyết tương đã rã đông  Kết quả: (+) có khối đông huyết tương được hình thành (–) không có hình thành khối đông a Phương pháp đếm khuẩn lạc  Tính kết quả:  Mật độ (CFU/g hay CFU/ml) = F: độ pha loãng Nt: tổng số khuẩn lạc đặc trưng Na: tổng số khuẩn lạc không đặc trưng Ht: tỉ số giữa số khuẩn lạc đặc trưng cho thử nghiệm khẳng định (+) so với số khuẩn... Cấy vào TSA, ủ ở 37 ± 1oC, 24 giờ Thử nghiệm ngưng kết coagulase Ghi nhận số coagulase (+) ở mỗi độ pha loãng Tra bảng MPN Mật độ S aureus (MPN/g hay MPN/ml) Mật độ S aureus (CFU/g hay CFU/ml) Mật độ S aureus (CFU/g hay CFU/ml) Cám ơn các bạn đã theo dõi . TIÊU CHUẨN KIỂM NGHIỆM STAPHYLOCOCCUS AUREUS Nội dung 1. Giới thiệu chung về S. aureus 2. Kiểm nghiệm S. aureus  Phương pháp đếm khuẩn lạc  Phương pháp MPN Giới thiệu về S. aureus 1 chết nhưng rất đau đớn do các phản ứng cực kỳ dữ dội. Kiểm nghiệm S. aureus 1. Môi trường, hoá chất 2. Định tính S. aureus 3. Định lượng S. aureus 1. Môi trường, hoá chất  Môi trường canh Mannitol. Bacillales Familia Staphylococcaceae Genus Staphylococcus Species S. aureus Click to edit Master text styles Second level Third level Fourth level Fifth level Những cụm khuẩn lạc S. aureus trong đĩa thạch agar.