Bài thuyết trình Tiêu chuẩn hiện hành để kiểm nghiệm Vibrio

Tiêu chu n hi n hành đ ki m nghi m ẩ ệ ể ể ệ Vibrio 1. Gi i thi u chungớ ệ  Vibrio  ộ ọ Vibrionaceae ộ Vibrionales ớ Gammaproteobacteria  Proteobacteria.    ẩ ẩ    !"ộ  # $%&ỵ  #'"ử  ()  *+,-- ./01ể ở ị  23'/'3456-'34* 7 8+3"'3'$  9:    +; ")    :  ẩ ệ ả ủ ở ự ẩ ừ ộ ậ ể Gi ng ố Vibrio g m 4 loàithu c tác nhân gây b nh cho ng i ồ ộ ệ ườ g m:ồ  V. Cholerae  V. Parahaemolyticus  V. Vulnificus  V. Alginolyticus  Vibrio parahaemolyticus:Vibrio cholerae;    ả ệ ườ ộ  Vibrio vulnificus ; :"  <:+  " -" ể ơ ể ươ ở ặ ệ    : =2     6 ướ ể ứ ẩ ệ ứ ễ ẩ ườ ả '+ : +)=ả ạ [...]... trường rốằ ủ 37 C trong 24 – 48 giờ hoặc đêố 7 ngày nêố câằ y i n u n Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm khả năng sinh H2S Kết quả: (+) Môi trường xuất hiện màu đen do H2S tạo tủa đen với sulfide trong môi trường (-)Môi trường không có sự xuất hiện hay chuyển màu đen ĐC (+) Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm Oxidase • Xác định sự hiện diện của enzym oxidase ở VSV Enzym quan trọng nhâố của hệ enzym này là... Na2HPO4 1mM Khử trùng mối trường, câố và ủ 370C trong 24 giờ y Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm ONPG Kết quả: (+) Xuất hiện màu vàng trong dịch cấy do quá trình thủy phân phóng thích o – nitrophenol có màu vàng (-) Không xuất hiện màu vàng ủ qua đêm o 37 C Lactose agar Màu vàng Chủng VSV 2ml ONPG broth Pứ (+) Pứ (-) Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm khả năng oxi hóa – lên men (thử nghi ệm Hugh – Leifson)... vàng thành tím • • • Kiểm nghiệm: ADH, LDC Hâố khử trùng mối trường rốằ câố p i y 0 Bổ sung dâằ khoáng hay parafin rốằ ủ 37 C trong 1 đêố 4 ngày u i n Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm Decarboxylase • • t  Kêố quả: Mối trường đục, màu tím (CO2 sinh ra làm thay đổi pH, đổi màu chỉ thị) Mối trường trong, màu vàng MT trước khi cấy Pứ dương tính Pứ âm tính Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm khả năng sinh Indol... như sao đổi ngối n Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm khả năng lên men đường • • • • • Môi trường: Phenol red broth base pH 7.4 Chỉ thị pH: đỏ phenol, màu đỏ chuyển sang vàng khi pH d ưới 6.8 Kiểm nghiệm khả nằng lên men: lactose, sucrose, mannose Bổ sung đường vào mối trường rốằkhử trùng i Sau đó câố và ủ 370C trong 18 – 20 giờ y Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm khả năng lên men đường •Đánh giá dựa vào... giờ y n i Tiêố tục tiêố hành theo 1 trong 2 cách: p n Nhúng giâố lọc vào tetramethyl – p – phenylenediamine dihydrochloride 1%, dùng que câố dàn y y đêằ sinh khốốlên tâố giâố lọc đó u i m y Nhỏ lên sinh khốốvài giọt p – aminophenylenediamine oxalate 1% và α – napthol 1% trong i ethanol Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm Oxidase Kết quả: (+) Xuất hiện màu xanh dương đậm do có sự hiện diện của cytochrom...  Cho thêm eter để chiêố Indol  Ủ 44.50C trong 24 giờ t  Kêố quả: (+) Bêằ ặt mối trường màu đỏ m (-) Bêằ ặt mối trường có màu vàng của thuốố th ử (đối khi có màu cam do Skatol là tiêằ m c n châố Methyl hóa của Indol tạo ra) t Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm khả năng sinh H2S o 37 C / 24h Thuốc thử Kovac’s Chủng VSV MT canh trypton Pứ dương tính Pứ âm tính Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm khả năng... m n trình lên men tạo mối trường có tính acid cao h ơn quá trình oxi hóa => làm đ ổi màu ch ỉ thị Môi trường: Hugh – Leifson chứa glucose là nguốằ carbon duy nhâố n t Chỉ thị: Bromothymol Blue Câố VSV vào 2 ốố g mối trường, sau đó ch ỉ có 1 ốố g ph ủ lên bêằ ặt l ớp dâằ khoáng parafin y n n m u để cản sự tiêố xúc với oxi khống khí p Ủ 2 ốố g ở 370C trong 24 – 48 giờ n Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm. .. ethanol Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm Oxidase Kết quả: (+) Xuất hiện màu xanh dương đậm do có sự hiện diện của cytochrom khử trong tế bào làm thuốc thử oxy hóa thành indolphenol (-) Không xuất hiện màu xanh dương Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm ONPG • • • Các VK lên men lactose tổng hợp trong têố bào tạo enzym β – galactosidase Enzym này xúc tác thủy phân lactose và permease có vai trò vận chuy ển...Kết luận thử nghiệm sinh hóa của V cholera Thử nghiệm Kếế quả t ONPG + Lactose - ADH - LDC + TDA - Indol + Mannose + Sucrose + Oxidase + 0% 3% Tính ưa muốố i + + 6% - Thử nghiệm sinh hóa: Quan sát tính di động và hình thái của vi khuẩn trên kính hi ển vi • Quan sát dưới kính hiển vi ở vật kính 40X t t • Ghi nhận kêố quả: di động hay bâố động, hình dạng têốbào n • Tiêố hành: i n o Lam kính 1:... tạo thành được bẫy lại trong ốố g Durham) n t •Kêố quả: • Phản ứng (+): mối trường chuyển vàng • Phản ứng (-): mối trường có màu đỏ Thử nghiệm sinh hóa: Thử nghiệm Decarboxylase • Enzyme carboxylase do VK tạo ra loại nhóm carboxyl của acid amin t ạo amin hay diamin và CO2 • • Môi trường: Decarboxylase Basal Medium Chỉ thị: Bromothymol purple pH 6.0, vùng chuyển màu pH 5.2 – 6.8 thay đ ổi từ vàng thành . Tiêu chu n hi n hành đ ki m nghi m ẩ ệ ể ể ệ Vibrio 1. Gi i thi u chungớ ệ   Vibrio   ộ ọ Vibrionaceae ộ Vibrionales ớ Gammaproteobacteria. ộ ậ ể Gi ng ố Vibrio g m 4 loàithu c tác nhân gây b nh cho ng i ồ ộ ệ ườ g m:ồ  V. Cholerae  V. Parahaemolyticus  V. Vulnificus  V. Alginolyticus  Vibrio parahaemolyticus: Vibrio cholerae;. ượ " ườ  +!@1=ứ