tài liệu về -TẢO KHUÊ

Đối với tảo, hai loài Isochrisys galbana và Pyramimonas grossii đầu tiên được Bruce báo cáo là đã phân lập và nuôi đơn chúng dùng làm thức ăn trong nuôi trồng thủy sản, đặc biệt là dùng

I TỔNG QUAN VỀ TÌNH HÌNH NUÔI TỰ

NHIÊN:

Thức ăn tự nhiên đóng vai trò rất quan trọng, quyết định sự thành công trong ương nuôi nhiều loài động vật thủy sản, đặc biệt là ở giai đoạn ấu trùng Nghiên cứu đặc điểm sinh học, kỹ thuật nuôi một số loại thức ăn tươi sống cho động vật thủy sản

từ lâu đã được nhiều nhà nghiên cứu quan tâm Các đối tượng chủ yếu đang được

quan tâm nghiên cứu như : Vi tảo, luân trùng, giáp xác râu ngành, Artemia, trùng chỉ

Nghề nuôi giáp xác, cá biển và nhuyễn thể đang ngày càng phát triển mạnh, vì thế, nhu cầu con giống đang ngày gia tăng và cần được giải quyết Trong sản xuất giống, thức ăn và kỹ thuật cho ăn khi ương ấu trùng là vấn đề rất quan trọng Ngày nay, mặc dù có nhiều kỹ thuật tiên tiến trong sản xuất thức ăn nhân tạo cho ấu trùng, nhưng những thức ăn tươi sống như tảo, luân trùng, giáp xác râu ngành, Artemia vẫn được xem là thức ăn vô cùng quan trọng và có tiềm năng rất lớn trong sản xuất giống Việc nuôi và sử dụng các sinh vật làm thức ăn này đã có một lịch sử lâu đời ở nhiều nước và ngày nay đang được áp dụng rộng rãi tên toàn thế giới

Đối với tảo, hai loài Isochrisys galbana và Pyramimonas grossii đầu tiên được

Bruce báo cáo là đã phân lập và nuôi đơn chúng dùng làm thức ăn trong nuôi trồng thủy sản, đặc biệt là dùng cho nuôi ấu trùng trai, hầu Tiếp theo đó, là kết quả nuôi thành công tảo khuê cho nhiều loài động vật không xương sống khác nhau của Allen

và Nelson, 1910 Đến năm 1941, khi Matsue tìm ra phương pháp phân lập và nuôi cấy

tảo thuần loài Skeletonema costatum thì loài tảo này đã được Hudinaga dùng làm thức

ăn cho ấu trùng tôm Penaeus japonicus và đã nâng tỉ lệ sống của ấu trùng đến giai

đoạn Megalope lên 30%, thay vì 1% so với các kết quả trước đây (Liao, 1983)

nuôi cùng bể” và sau đó phương pháp này được Loosanoff áp dụng trong ương nuôi

ấu trùng hai mảnh vỏ

Từ những năm 1940, người ta rất quan tâm đến nuôi sinh khối tảo, không phải chỉ dùng cho nghề nuôi thủy sản mà còn vì nhiều mục đích khác, như: cải tạo đất, lọc nước thải, nguồn thực phẩm cho con người hay thức ăn tươi sống Beijerinck đã

nghiên cứu nuôi tảo Chlorella vulgaris lần đầu tiên trong ống nghiệm và đĩa petri

Nhiều nghiên cứu tiếp theo được tiến hành và cho đến năm 1948-1950, một công trình đầu tiên chuyển phương pháp nuôi cấy trong phòng thí nghiệm ra qui mô sản xuất lớn

đã được thực hiện bởi nhà khoa học Litter, của Cambridge (Soeder, 1986) Tuy nhiên,

về sau nuôi đại trà tảo Chlorella phát triển chủ yếu là ở Đông Nam Châu Á, đặc biệt là

ở Nhật, Trung Quốc, Đài Loan (Richmon, 1986)

Ví dụ: Ở Đài Loan, nuôi sản xuất tảo được hình thành vào năm 1964, đến năm 1977,

đã có 30 trại sản xuất với công suất 200 tấn/tháng, sản xuất khoảng 1.000 tấn/năm

Các loài tảo khác như Dunadiella, Scenedesmus, Spirulina cũng được nghiên cứu và

phổ biến ra qui mô sản xuất Số liệu thống kê cho thấy, tổng sản lượng hàng năm của

tảo Spirulina trên thế giới là 850 tấn, trong đó, Mexicô đóng góp 300 tấn, Đài Loan:

300 tấn, Hoa Kỳ: 90 tấn, Thái Lan 60 tấn, Nhật Bản :40 tấn và Israel: 30 tấn (Richmon, 1986)

Để phục vụ cho mục đích nuôi thủy sản, nhiều loài tảo khác cũng được nghiên cứu nuôi trong điều kiện phòng thí nghiệm hoặc ở qui mô sản xuất Wendy và Kevan,

1991, đã tổng kết: ở Hoa kỳ, các loài Thalasiossira pseudomonas, Skeletonema,

Chaaaetoceros calcitrans, Chaetoceros mulleri, Nannochloropsis ocula, Cchlorella minutissima được nuôi để làm thức ăn cho luân trùng, ấu trùng hai mảnh vỏ, ấu

trùng tôm và cá theo phương pháp từng đợt hoặc bán liên tục trong những bể

composite 2.000-25.000 lít Ở Washington, năng suất tảo loài Thalasiossira

Trung Quốc bắt đầu nghiên cứu nuôi tảo từ những năm 1940 Nhưng mãi đến

1980, chỉ có hai loài Phaeodactylum triconutum và Tetraselmis subcordiformis là đối

tượng nuôi dùng trong ương ấu trùng tôm Về sau, có nhiều loài đã được phân lập để

nuôi cấy Song, những loài nuôi chính bao gồm Isochrisys galbana, Pavlova viridi,

Chaetoceros muelleri, Phaeodactylum triconutum, Tetraselmis dùng cho ấu trùng tôm Penaeus chinensis và Argopecten Chúng được nuôi bằng phương pháp thu từng đợt

Năng suất nuôi của Isochrisys galbana có thể đạt 4,8 x 1015 tế bào/năm

Ở Đài Loan, các đối tượng nuôi chính là Nannochloropsis oculata, Tetraselmis,

Chlorella sp., dùng cho ương nuôi ấu trùng họ tôm he (Penaeus), loài Isochrysis galbana

trong ương nghêu Riêng loài Skeletonema costatum, sản lượng nuôi có thể đạt tới 9.000

tấn/năm

Nuôi tảo ở Nhật cũng rất quan trọng với nhiều đối tượng nuôi và bằng phương

pháp thu từng đợt hoặc bán liên tục: Chaetoceros sp., Penaeus japonicus và

Metapenaues ensis, Isochrysis sp và Pavlova lutheri dùng cho hai mảnh vỏ, Tetraselmis sp., Nanochloropsis oculata, Chlammydomonas sp cho luâu trùng Brachionus plicatilis

Nuôi tảo khuê cũng rất phổ biến ở Thái Lan, nhất là loài Skeletonema costatum

và Chaetoceros calcitrans dùng cho ấu trùng tôm Bể nuôi thường là bể fiberglass có

thể tích 1.000 lít hay bể ximăng 4.000 lít Ước đoán năng suất đạt được khoảng 3 x

1012 tb/tháng

II KHÁI QUÁT VỀ TẢO KHUÊ:

¾ Đơn bào hay tập đoàn hình cầu, tế bào được bao vỏ silic dạng hộp petri

¾ Chỉ có tế bào giao tử đực của bộ Centrales có roi

¾ Chloroplast màu vàng nâu( chlorophyll a và c2 + fucoxanthin)

¾ Chất dự trữ: chrysolaminaran và lipid

¾ Tế bào có các cơ quan tương tự eukaryote: nhân, ty thể, thể golgi, mạng lưới nội chất, ribosome và không bào

¾ Sinh sản

 Sự phân chia tế bào

 Sự hình thành bào tử phục hồi:

¾ Gồm 2 bộ: pennales và centrales

¾ Có khoảng 250 giống với 100000 loài, sống cả nước mặn lẫn nước ngọt, trên bờ

đá, bề mặt hay trong đất Chiếm ưu thế trong thành phần phiêu sinh và bám đáy

¾ Một số loài làm thức ăn cho ấu trùng thủy sản và tích lũy vỏ silic dưới đáy Một

số có khả năng tiết chất độc hoặc có gai dài làm nghẽn mang cá, khi nở hoa cạnh tranh O2, gây ô nhiễm môi trường

III NUÔI TRỒNG TẢO KHUÊ:

III.1 Các giống nuôi trồng chủ yếu:

Skeletonema Thalassiosira

Phaeodactylum

Chaetoceros Cyclindrotheca

Bellerochea Actinocysclus

Nitzchia Cyclotella

ML: Ấu trùng tôm nước ngọt

PL: Ấu trùng tôm biển

III.2.Nuôi sinh khối tảo Chaetoceros sp và Skeletonema

(Baciliariophyta) để nuôi sinh khối và làm thức ăn cho ấu trùng tôm:

Chaetoceros sp và Skeletonema costatum

III.2.1 Đặc điểm:

• Dạng chuỗi, kích thước tế bào 4-6 μm, Chaetoceros sp: 10-20 tb/chuỗi,

Skeletonema costatum : 20-50 tb/chuỗi

• Bề mặt tế bào hình chữ nhật hoặc vuông

• Gốc tế bào có các gai hoặc lông-> kết hợp tạo chuỗi

y Là tảo phù du sống ở thủy vực nước lợ, mặn nồng độ muối 0-50 0/00

• Rộng nhiệt, thích hợp ở 25-300 oC

• Chiếu sáng trên 12 h, sau 20-24 h đạt mật độ 500.000-600.000 tb/ml

• Phát triển tốt làm cho nước có màu vàng xanh đến nâu

• Phát triển qua 4 pha:

¾ Pha chậm:

¾ Pha tăng trưởng:

Đặc trưng bởi sự phân chia tế bào liên tục theo công thức:

với X: số tb tham gia sinh sản

III.2.2 Kĩ thuật nuôi cấy:

III.2.2.1 Trang thiết bị:

Hóa chất các loại

III.2.2.2 Môi trường nuôi cấy

• Dùng môi trường Walne để cấy giữ và nuôi sinh khối tảo khuê

• Các dung dịch theo thứ tự:

9 Dung dịch 1( tăng trưởng):

KNO3 (hoặc NaNO3) 116 gr(100gr)

9 Dung dịch 4 ( dung dịch tăng thêm)

KNO3 100 gr

Hòa tan trong 1 lít nước ngọt

9 Dung dịch 5 ( môi trường silicat)

Na2SiO3.5H2O 20 gr ( hoặc 67 ml)

Hòa tan trong 1 lít nước ngọt

• Các môi trường trên khi dùng trong nuôi cấy thì dùng mỗi loại dung dịch (1,3,4,5) theo tỷ lệ 1/1000 (1ml dung dịch mỗi loại cho 1 lít nước) Khi dùng để nuôi sinh khối thì bón các dung dịch trên theo tỷ

lệ 1/10.000

III.2.2.3 Nguồn nước:

Nguồn nước nuôi giữ và nuôi sinh khối tảo cần phải được xử lý

III.2.2.4 Kĩ thuật thu giống, thuần giống, giữ giống:

‰ Kĩ thuật thu giống:

Giống được vớt ở những vùng ven bờ biển vào lúc triều cao, dùng lưới phiêu sinh có kích thước mắt lưới 15-18μm, vớt theo hình số 8 Để có loài cần nuôi ta phải thu mẫu nhiều lần Dưới kính hiển vi ta kiểm tra được tảo Chaetoceros sp và Skeletonema có dạng chuỗi

‰ Kĩ thuật thuần giống:

Tảo vớt tự nhiên thường lẫn nhiều tạp mùn bả hữu cơ và động vật phù

Có thể thực hiện việc thuần giống tảo theo 2 phương pháp sau:

- Dùng ưu thế môi trường để thuần giống một cách tương đối Nghĩa là trong điều kiện môi trường dinh dưỡng đưa vào phù hợp với sinh học phát triển của 2 giống tảo này sẽ giúp cho chúng ưu tiên phát triển hơn Nên trải qua một thời gian 2 giống tảo này sẽ chiếm ưu thế để phát triển quần thể, chúng sẽ trở nên thuần chủng

- Dùng phương pháp phân lập để tách 2 giống tảo này ra để nuôi riêng với môi trường dinh dưỡng thích hợp Sau nhiều lần phần lập chúng sẽ trở nên thuần chủng

- Khi tảo giống đã thuần chủng thì được nuôi giữ và đưa ra nuôi sinh khối

‰ Kĩ thuật giữ giống:

Để chủ động cung cấp tảo cho sản xuất, chúng ta cần phải có phương pháp lưu giữ tảo Việc lưu giữ tảo được thực hiện trong phòng nuôi cấy tảo hoặc ở khu phân bố riêng cho vùng nuôi tảo hoặc trong trại sản xuất tôm giống

Giống được giữ trong bình thủy tinh hay bình tam giác và được nuôi trong môi trường Walne ở nồng độ muối từ 25-30 ‰ Thời gian nuôi tùy thuộc vào mật độ tảo đưa ra ban đầu và sự tăng trưởng của tảo nuôi Thông thường thời gian nuôi giữ tảo từ 16-24h Cách lưu giữ này có thể đảm bảo chất lượng tảo giống trước khi đưa vào nuôi sinh khối

‰ Kĩ thuật nuôi sinh khối:

Trong các trại sản xuất tôm giống, người ta thường bắt đầu nuôi sinh khối tảo khi ấu trùng Nauplius (N) ở giai đoạn N3 hoặc N4 Việc nuôi

- Vệ sinh kỹ bể nuôi bằng xà phòng sau đó rửa lại bằng nước biển đã xử lý

- Bơm nước biển đã xử lý vào bể

- Khi tảo trong bể nuôi sinh khối đạt đến mật độ khoảng 500.000 -

600.000tb/ml hoặc bằng mắt thường ta thấy tảo có màu nâu đậm là có thể tiến hành thu sinh khối

* Cách thu: Dùng dây nhựa Ø 21 hoặc lớn hơn tùy theo dòng chảy, một

đầu được buộc bằng túi lưới thu (kích thước mắt lưới 15 - 20μm ) đầu kia cho vào bể hút nhẹ, nước tảo sẽ chảy liên tục trong khoảng thời gian 15-30 phút, các tế bào tảo được giữ lại, sau đó tháo túi ra và chuyển sinh khối tảo này vào xô, cứ thế lại tiếp tục thu cho đến khi nước trong bể nuôi tảo còn khoảng 1/4-1/5 thì có thể kết thúc

IV Vai trò của tảo khuê trong nuôi trồng thủy sản:

IV.1 Làm thức ăn:

Đến nay, có khoảng trên 40 loài tảo đã được phân lập, nuôi cấy và sử dụng làm thức ăn cho ấu trùng các loài thủy sản Tùy thuộc vào chất lượng và tính có sẵn của các loài tảo mà việc sử dụng chúng cho các đối tượng thủy sản cũng khác nhau giữa các nơi trên thế giới.Về phương thức sử dụng tảo, chúng thường được cho ăn trực tiếp hoặc gián tiếp thông qua sinh vật trung gian khác, ở dạng tươi sống hay chế biến,

cho đối tượng nuôi thủy sản ăn chỉ một loài tảo nào đó, nhưng Liao (1983) cho rằng: không có loài tảo đơn độc nào lại tốt nhất về mọi phương diện cho việc nuôi và sử dụng chúng làm thức ăn cho ấu trùng tôm he Tầm quan trọng của tảo chính là từ giá trị dinh dưỡng của chúng

Tuy nhiên, người ta chú ý đến giá trị dinh dưỡng của tảo không chỉ riêng thành phần protein mà còn là thành phần acid béo, yếu tố dinh dưỡng không thể thiếu được đối với ấu trùng của các loài hải sản Trong nhiều trường hợp, tảo được báo cáo không phải là thành phần thiết yếu trong khẩu phần ăn của các loài sinh vật biển, nhưng thực

tế, chúng có thể là nhân tố thúc đẩy sinh trưởng của đối tượng nuôi hoặc có tác dụng như một vi khuẩn lọc nước (Fujimura và Okamoto, 1972; Barnabe, 1976; Cohen, Finkel và Sussman, 1976; Maddox và Sandifer, 1977; Malecha, 1983 -trích dẫn của Pauv và Persoone, 1991)

Trong lớp tảo khuê, loài Skeletonema costatum từ khi được phân lập lần đầu tiên bởi Masue (1941) đã được dùng rộng rãi và là thức ăn rất quan trọng của ấu trùng tôm biển Hudinaga đã đạt được thành công đầu tiên trong việc sử dụng tảo này làm thức ăn cho ấu trùng tôm, tỉ lệ sống ở giai đoạn Mysis đạt 30% cao hơn rất nhiều so với các kết quả trước đây, chỉ đạt 1% (Liao, 1983) Từ kết quả đó, nhiều loài tảo

khuên khác như: Chaetoceros sp., Thlasiosira, Isochrysis, cũng được nghiên cứu

làm nguồn thức ăn cho ấu trùng tôm Tùy theo từng loài tảo và đạc điểm của chúng

mà mỗi loài đều có những ưu điểm và nhược điểm riêng đối với ấu trùng tôm

Trong quá trình phát triển của lĩnh vực sản xuất tôm giống, người ta đã chế biến

ra nhiều loại thức ăn nhân tạo để thay thế một phần hoặc toàn bộ tảo khuê Tuy nhiên, đến nay tảo khuê vẫn được xem là thức ăn tươi sống rất quan trọng của ấu trùng tôm

Le way và ctv (1993) đã nghiên cứu về ảnh hưởng của các nguồn thức ăn tươi sống

và nhân tạo đến sự tăng trưởng, tỉ lệ sống, hoạt động của enzym tiêu hóa và thành

nhau, nhưng đến giai đoạn Mysis, nếu cho ăn thức ăn nhân tạo thì sẽ dẫn đến trọng lượng khô và hàm lượng protein trong cơ thể của PL1 thấp hơn so với ấu trùng cho ăn

hỗn hợp Chaetoceros và Artemia

Trong thí ngiệm so sánh về sự ảnh hưởng của 9 loại thức ăn nhân tạo dùng thay cho tảo khuê (Chaetoceros) làm thức ăn cho ấu trùng tôm, Utama và ctv (1992) nhận thấy: sự giảm mật độ tảo từ 50.000 xuống còn 5.000 tế bào/ml do việc thay thế tảo bằng thức ăn nhân tạo vẫn cho kết quả tốt, tỉ lệ sống của ấu trùng tôm giữa các nghiệm thức vẫn không khác nhau, nhưng mật đột tảo không thể thấp hơn 5.000 tế bào/ml

Hơn nữa, Chu (1991) cũng nhận thấy: ấu trùng tôm Metapenaeus ensis và Penaeus

chinese cho ăn thức ăn nhân tạo bị chậm lớn và tỉ lệ sống luôn thấp hơn so với tôm

cho ăn Chaetoceros garcilis và Artemia Thêm vào đó, Cao và ctv (1990) khi so sánh

về ảnh hưởng của các loại tảo khác nhau làm thức ăn cho ấu trùng tôm Penaeus

orietalis phát hiện rằng: ấu trùng Zoea không thể sử dụng trực tiếp chỉ một loài tảo Tetraselmis seucica hoặc Dunaliella salina được dùng đơn lẻ cho sự sinh trưởng và

phát triển của chúng Ấu trùng Zoea chỉ được cho ăn tảp Phaeaeodactylum

tricornutum không thể phát triển đến giai đoạn Zoea 3 Hai dòng của loài tảo Chaetoceros muelleri là thức ăn tốt cho ấu trùng Zoea và khi dùng phối hợp chúng với Skeletonema costatum hoặc Dunaliella salina sẽ làm tăng tỉ lệ sống của ấu trùng

Kết quả thí nghiệm của Chu (1989) cho thấy: chỉ dùng một loài tảo

Chaetoceros gracilis có thể cung cấp chế độ ăn đầy đủ dinh dưỡng cho ấu trùng tôm Metapenaeus ensis từ giai đoạn Zoea đến PL6 với tỉ lệ sống đạt 35-63% Việc bổ sung

Artemia không làm cải thiện được tỉ lệ sống của ấu trùng tôm

Khi đánh giá về ảnh hưởng của 3 loại tảo: Bidulphia sinensis, thalaassiosira

rotula và Skeletonema costatum đối với sự phát triển và tỉ lệ sống của 7 nhóm giáp

xác mười chân: Pagurus berhardus, Cancer padurus, Hyas coarctatus, Hyas araneus,

Carcinus maenas, Liocarcinus holsatus và Necora puber, Harm thấy rằng: sự phát

và chúng lột xác ít khi cho ăn Skeletonema costatum, tảo có cỡ nhỏ nhất Trong sản xuất giống cua biển, Portunus trituberculatus, Jo và ctv (1993) thí nghiệm dùng các loài tảo Nanochloropsis oculata và Chaetoceros sp làm thức ăn cho ấu trùng cua, thấy rằng: tảo Chaetoceros cho kết quả tốt nhất Thí nghiệm ương ấu trùng cua Scylla

serrata của Zainodin (1991) cũng cho biết: ấu trùng cua có cho ăn bổ sung tảo Skeletonema và Isochrysis ở giai đoạn sớm sẽ cho kết quả tốt hơn so với không cho ăn

thêm tảo

Bên cạnh đó, tảo khuê còn đóng vai trò qua trọng trong nuôi nhuyễn thể

Okauchi (1990) thí nghiệm tìm hiểu về vai trò của tảo đối với spat của trai (Pintctada

fucata) và ông nêu lên: sức tăng trưởng của spat cho ăn đơn độc chỉ có tảo Isochrysis aff galbana thấp hơn so với spat cho ăn kết hợp Isochrysis galbana và Chaetoceros garcilis Laing và ctv (1990) nghiên cứu về giá trị dinh dưỡng của tảo khô loài Nannochloris sp and Tetraselmis seucica so với lô đối chứng gồm hỗn hợp tảo Chaetoceros calcitral và T-ISO dùng làm thức ăn cho ấu trùng nghêu Manila (Tapes philipinarum), ông thấy rằng: ấu trùng nghêu cho ăn tảo khô có sức tăng trưởng bằng

hoặc cao hơn so với cho ăn dạng tươi sống, nhưng thấp hơn so với lô đối chứng Trong thí nghiệm so sánh về ảnh hưởng của việc sử dụng tảo đơn lẻ và hổn hợp đến

sức tăng trưởng của spat loài Placopecten magellanicus, Gillis và ctv nhận thấy: hổn hợp thức ăn gồm 3 loài tảo Isochrysis galbana, Chaetoceros muelleri và Isochrysis aff

galbana cho sức tăng trưởng của spat cao hơn có ý nghĩa so với hỗn hợp 2 loài

Zhang và ctv đã ương ấu trùng mussel Mytilus edulis với các loại thức ăn khác nhau, bao gồm: Phaeaeodactylum tricornutum, Chaetoceros mulleris, Platymonas

subcordiformis, Nannochloris oculatas, Dicrateria zhanjiangensis, men bia, bột đậu

nành, kết quả là: tảo Phaeaeodactylum có thể sử dụng cho ấu trùng ở các giai đoạn

đầu, sức tăng trưởng của ấu trùng tương đương với các thức ăn khác nhưng tỉ lệ sống