Tổng hợp từ vi sinh vật Định lượng chất sinh trưởng thực vật ứng dụng của gibberellin trong nông nghiệp Lịch sử nghiên cứu... • Nhóm chất kích thích: auxin, gibberellin, cytokinin • Nhó
Trang 2Tổng hợp từ
vi sinh vật
Định lượng chất sinh trưởng thực vật
ứng dụng của gibberellin trong nông nghiệp
Lịch sử nghiên cứu
Trang 3auxin, gibberellin, cytokinin, acid abscisic, ethylen
• Nhóm chất kích thích: auxin, gibberellin, cytokinin
• Nhóm chất kìm hãm: acid abscisic, ethylen
• Gibberellin được nghiên cứu và ứng dụng rộng rãi nhất
Trang 4GIỚI THIỆU
CĐHST Ảnh hưởng lên tính chất sinh lý thực vật
Auxin Kéo dài tế bào, phân chia tế bào, kích thích
phát triển chồi, rễ, quả, kìm hãm sự rụngGibberellin Kéo dài tế bào, thân, lóng; nảy mầm, nảy chồi;
kích thích sự ra hoa quảCytokinin Phân chia tế bào; kìm hãm sự già hóa; phân
hóa cơ quan đặc biệt phân hóa chồi Abscisic Điều chỉnh sự rụng; chống “stress” nước; sự
già hóaEthylene Sự chín trái; lão suy và rụng; cản tăng trưởng
Trang 5Giới thiệu - Gibberellin
• Được tổng hợp trong
phôi đang tăng trưởng, lá
non, rễ non, quả non…
trong tế bào thì được
Trang 6Giới thiệu - gibberellin
• Tính chất hóa học: khối lượng phân tử 346.38 g/mol
điểm sôi 233-2350C, GA3 hòa tan trong các dung môi như metanol, etanol, butanol; hòa tan kém trong nước,
butylacetate, muối của chúng hòa tan hoàn toàn trong
nước
• Tính chất sinh lý:
+ Sự kéo dài tế bào, thân
+ Sự kéo dài lóng và tăng trưởng lá
+ Sự nảy mầm, nảy chồi
+ Sự ra hoa, quả
Trang 7Tổng hợp từ
vi sinh vật
Định lượng chất sinh trưởng thực vật
ứng dụng của gibberellin trong nông nghiệp
Lịch sử nghiên cứu
Trang 8Lịch sử nghiên cứu
• Lần đầu được tìm ra năm 1926 bởi Kurosawa khi
nghiên cứu bệnh bakanae (lúa von)
• Kết tinh lần đầu vào năm 1935 từ chủng nấm
Gibberella fujikuroi, có tên là gibberellin A và B
• Tìm được công thức của gibberellin năm 1950
• Có hơn 136 loại gibberellin được xác định ở thực vật, nấm và vi khuẩn
Trang 9Thu nhận từ thực vật
• Ly trích – khuếch tán
Mô
Mặt cắt của mô được đặt trên
Đĩa agar chứa BHTChất điều hòa sinh trưởng Khuếch tán vào môi trường bão hòa ẩm
Trang 11Thu nhận từ thực vật
Tinh lọc dịch trích
• Phân đoạn bằng dung môi: dung môi diethyl
ether
• Cho dịch trích và dung môi diethyl ether (1:1)
vào bình chiết lắc nhẹ để yên vài phút
• Có thể bổ sung CaCl2 hay Na2SO4 để loại nhũ
tương hoặc đặt bình trong máy lạnh
• Loại bỏ pha chứa nước, pha chứa diethyl
ether được làm khô trong chân không
Trang 12Tổng hợp từ vi sinh vật
Một số vi sinh vật có khả năng tổng hợp chất điều hòa sinh trưởng:
• Nấm: Fusarium, Pythium, Rhizoctonia…
• Vi khuẩn: Azorhizobium caulinodans,
Azospirillum amazonense, Azospirillum
halopraeferens, Azospirillum irakense,
Azspirillum lipoferum, Azspirillum brasilense, Azotobacter chroococcum, Bacillus cereus, Bacillus coagulans, Bacillus licheniformis,
Bacillus macerans
Trang 13Bảng 2.1 : Một số chủng nấm thuộc loài G fujikuroi sản xuất gibberellin
Trang 14• Đồng hóa tốt các đường glucose,
saccharose, tinh bột, dầu thực vật
• Nguồn dinh dưỡng nitơ: muối
Trang 16Tổng hợp từ vi sinh vật
Lên men bề mặt
• Môi trường cám, bổ sung 0,5% cao ngô; 0,01% hỗn hợp
vi lượng phối trộn, điều chỉnh độ ẩm đến 55 – 60%, phân phối vào các bình tam giác 1 – 2l, lượng môi
trường cho vào 80 – 100 g
• Tiệt trùng môi trường ở 1 atm, 1210C, 30 phút Trộn
giống với tỷ lệ 0,3 – 0,5%, nuôi ở 280C, pH 5,5 trong 3 –
4 ngày, sau đó chúng chuyển ra các khay với môi trường tương tự
Trang 17Tổng hợp từ vi sinh vật
Lên men bề sâu
• Môi trường Rolen – Tom
• pH 5 – 5,5; nhiệt độ 26 –
280C, thời gian lên men 160 –
190 h
• Thiết bị lên men có cánh
khuấy và thổi khí liên tục
• Quá trình lên men 2 pha
• Không nên cho đường vào
giai đoạn đầu nhiều nên bổ
sung 1- 4% ngày 1 – 2 lần
saccharose 40 – 60 g/l
Tactarat amon 7 g/l
Trang 18Tổng hợp từ vi sinh vật
Thu nhận và tinh sạch
Dịch lọcTrích lyKết tủa
Ly tâmHòa tan
Lọc
Xử lý than hoạt tính
Ly tâmChiết suất
Trang 19Định lượng chất sinh trưởng thực vật
Sinh trắc nghiệm gibberellin: khảo sát ảnh hưởng của
những mẫu bibberellin ở nồng độ xác định khác nhau lên sinh lý của cây nồng độ của mẫu chưa biết
Trang 20Định lượng chất sinh trưởng thực vật
Hóa lý trắc nghiệm: phổ biến HPLC
• HPLC: nhạy và đặc trưng, yêu cầu mẫu phải được lọc thật sạch trước khi phân tích
Trang 21Tổng hợp từ
vi sinh vật
Định lượng chất sinh trưởng thực vật
Ứng dụng của gibberellin trong nông nghiệp
Lịch sử nghiên cứu
Trang 22Tăng chiều cao, tăng năng suất
• Kích thích kéo dài thân, vươn dài của lóng kích thích lên pha giãn của tế bào theo chiều dọc tăng sinh
trưởng tăng sinh khối
• Sử dụng gibberellin thích hợp với cây lấy sợi, lấy thân, lá
Trang 23Tăng sự đậu quả và tạo quả không hạt
• Kích thích giãn nhanh tế bào trong bầu noãn quả tăng kích thước và thể tích
• Xử lý GA3 cho hoa trước khi thụ phấn, thụ tinh quả
được hình thành mà không cần thụ tinh quả không hạt
Trang 24Điều chỉnh thời gian ngủ của các loại củ, hạt
• Xâm nhập vào cơ quan đang ngủ, làm lệch cân bằng hormone thuận lợi cho sự nảy mầm muốn hạt nảy mầm thì tăng hàm lượng gibberellin
• Gibberellin phá ngủ củ khoai tây, khoai lang mới thu
hoạch
Trang 25Điều chỉnh sự ra hoa của cây
và điều chỉnh giới tính hoa
• Nhà sinh lý học thực vật Chailakhyan đã đề xướng học thuyết hormone ra hoa
• Tham gia vào thành phần hormone kích thích ra hoa
• Gibberellin kích thích ra hoa đực
Trang 27Kết luận
• Gibberellin: hormone thực vật điều chỉnh sự phát triển của thực vật và ảnh hưởng tới các quá trình sinh lý cuả thực vật
• Ứng dụng rộng rãi trong nông nghiệp, trong nuôi cấy in
vitro và có tầm quan trọng thương mại ngày càng rõ nét.
• Hướng nghiên cứu: Ảnh hưởng của gibberellin đối với cây trồng, nồng độ thích hợp sử dụng và kết hợp với các chất khác để đạt hiệu quả cao nhất
Trang 28CẢM ƠN CÔ VÀ CÁC BẠN ĐÃ
LẮNG NGHE