công nghệ thụ tinh nhân tạo

Hình thức giao phối tự nhiên thụ tinh trực tiếp Thụ tinh trực tiếp là quá trình giao phối giữa gia súc đực và gia súc cái, tinh dịch của con đực đi vào đường sinh dục con cái để tế bào t

A CÔNG NGHỆ SINH SẢN (REPRODUCTIVE BIOTECH - RB)

Những kỹ thuật chính trong RB bao gồm:

2.1 Thụ tinh nhân tạo (Artiicial Insemination)

Đây là công cụ chính trong các chương trình cải thiện giống bò sữa/thịt, dê,cừu, heo, gà tây… ở các nước chăn nuôi phát triển

Kỹ thuật này chủ yếu gia tăng tối đa khả năng khai thác tiềm năng di truyềntốt của con đực giống Với các phương pháp thu tinh dịch, đánh giá, pha loãng và bảo quản (dưới dạng tinh tươi hay đông lạnh ở -196oC), từ 1 lần xuất tinh của đựcgiống có thể sử dụng phối giống cho hàng chục con cái khác nhau

Ngoài ra, tinh đông lạnh sẽ giúp cho việc phân phối nguồn chất liệu di truyền tốt đến khắp nơi trên thế giới

Ước tính, hàng năm trên toàn thế giới có khoảng 100 triệu lần TTNT trên

bò, 40 triệu lầ TTNT trên heo, 3,3 triệu lần TTNT trên cừu và 500.000 lần TTNT trên dê

2.2 Cấy truyền phôi (Embryo Transfer)

Kỹ thuật này cơ bản được dựa trên kỹ thuật gây đa xuất noãn và động dục đồng loạt, từ đó giúp gia tăng tối đa khả năng khai thác tiềm năng di truyền tốt của con cái giống

Đồng thời, việc bảo quản đông lạnh trứng và phôi cũng giúp cho phân phốichất liệu di truyền tốt được thuận lợi và rộng khắp hơn, cũng như giúp bảo tồn những nguồn gien quý

Ước tính, có khoảng 440.000 ET trên bò, 17.000 ET trên cừu, 2.500 ET trên ngựa và 1.200 ET trên dê hàng năm Ngoài ra, khoảng 80% bò đực giống trên khắp thế giới được sinh ra từ ET

2.3 Thụ tinh trong vi giọt (Invitro Fertilization)

Nhằm sản xuất ra phôi in-vitro từ những con cái giống không có khả năng sinh sản bình thường, phục vụ cho kỹ thuật ET.

Chỉ tính riêng ở Nhật, số bê sinh ra bằng kỹ thuật ET năm 2003 đã gấp 16 lần so với 10 năm trước (1.202 bê ET/1993 so với 19.583 bê ET/2003), và số bê sinh ra từ phôi in-vitro hiện nay đã nhiều hơn số bê sinh ra từ phôi in-vivo năm 1993

2.4 Thu trứng trên buồng trứng (Ovum pick up)

Kỹ thuật này cho phép lấy nhiều lần những trứng (oocyte) chưa trưởng thành trên buồng trứng (ovary) của thú sống, vì vậy sẽ tăng số lượng trứng thu được trên 1 thú cái cho trứng Từ đó, các trứng này được nuôi chín (Invitro

Maturation) và là nguồn nguyên liệu tốt cho IVF

Kỹ thuật này không những tăng số lượng trứng khai thác trên 1 thú cái mà còn đẩy nhanh tiến bộ di truyền của thú cái vì nó có thể thực hiện sớm trên nhữngcái hậu bị

2.5 Xác định giới tính phôi (Embryo Sexing)

Kỹ thuật xác định nhanh và chính xác giới tính của phôi (bằng PCR hay LAMP hay Karyotype…) giúp cho người chăn nuôi sản xuất ra những đàn gia súc

có giới tính phù hợp với hướng sản xuất

Ví dụ: sản xuất ra con cái để cho sữa hay sản xuất ra con đực để cho thịt.

Điều này giúp giảm đáng kể số lượng gia súc ban đầu và đẩy nhanh tiến độ

di truyền

Ví dụ: muốn có 50 bê cái cần phải có 100 bê sinh ra.

Ngày nay, có thể sản xuất ra gia súc có giới tính theo định hướng từ những loại tinh đã được phân tách (Sorted Semen)

2.6 Nhân bản (Cloning)

Có 3 phương thức nhân bản là (a) cắt phôi (b) đưa tế bào phôi vào bên trong vòng sáng (Zona) của 1 trứng đã lấy bỏ nhân và (c) đưa nhân của tế bào thân (somatic cell) vào bên trong vòng sáng (Zona) của 1 trứng đã lấy bỏ nhân

Nhân bản thường được sử dụng để nhân nhanh những gia súc đã được chuyển gien

B QUÁ TRÌNH THỤ TINH

1 KHÁI NIỆM VÀ CÁC HÌNH THỨC GIAO PHỐI

1.1 Khái niệm

Thụ tinh là một quá trình sinh lý xảy ra khi tế bào trứng kết hợp với tinh trùng, phát sinh đồng hóa, kết quả tạo thành một tế bào mới mang tính di truyền của bố mẹ.

Có hai hình thức thụ tinh:

1.1.1 Hình thức giao phối tự nhiên (thụ tinh trực tiếp)

Thụ tinh trực tiếp là quá trình giao phối giữa gia súc đực và gia súc cái, tinh dịch của con đực đi vào đường sinh dục con cái để tế bào trứng và tinh trùng kết hợp với nhau ở 1/3 phía trên ống dẫn trứng, tạo một tế bào mới Tế bào đó gọi

là hợp tử

Quá trình thụ tinh của gia súc gồm 4 giai đoạn:

- Tế bào trứng ở giai đoạn chuẩn bị

- Tinh trùng kết hợp với tế bào trứng

- Sự đồng hóa giữa tế bào trứng và tinh trùng

- Sự kết hợp giữa nhân tinh trùng và nhân tế bào trứng

 Ưu điểm:

 Đúng được thời điểm động dục cao độ (chịu đực) của con cái.

 Quá trình thụ thai được đảm bảo chắc chắn

 Hạn chế:

 Phẩm chất tinh dịch chưa được kiểm tra trước khi phối giống

 Làm lây lan dịch bệnh từ con đực sang con cái và ngược lại

 Không kinh tế, không kỹ thuật

1.1.2 Hình thức thụ tinh nhân tạo (TTNT)

Thụ tinh nhân tạo là hình thức dùng tinh dịch của con đực đã pha loãng bơm vào đường sinh dục con cái để tinh trùng kết hợp với trứng tạo thành hợp tử

Người ta thấy rằng trong quá trình thụ tinh thì tinh trùng phá vỡ được màngphóng xạ của tế bào trứng chính là nhờ men hyaluronidase ở phần acrosom của đầu tinh trùng, men này không có tính đặc trưng cho loài Điều đó có nghĩa tinh trùng của một loài gia súc này có thể phá vỡ tế bào màng phóng xạ của một loài gia súc khác.

Vì vậy, trong TTNT người ta có thể lầy nhiều loại tinh trùng của gia súc khác loài hỗn hợp với một lượng tinh trùng nhất định của đực giống cùng loài vớigia súc cái sẽ nâng cao tỷ lệ thụ thai và tăng năng suất sinh sản của mỗi gia súc đực giống

Ví dụ: Trộn tinh trùng bò và lợn để dẫn tinh cho lợn nhưng chỉ có tinh

trùng lợn đi vào được bên trong tế bào trứng lợn

Ngoài ra, người ta có thể bổ sung men hyaluronidase tổng hợp vào tinh dịch nhằm nâng cao kết quả thụ tinh

 Ưu điểm của TTNT:

 Trong TTNT người ta có thể dùng tinh dịch của một đực giống tốt thụ tinh cho nhiều gia súc cái mà vẫn đảm bảo tỷ lệ thụ thai cao

 Ngăn ngừa được sự lây lan một số bệnh truyền nhiễm, ký sinh trùng giữa con cái và con đực khi gia súc giao phối tự nhiên

 Chất lượng tinh dịch được kiểm tra kỹ càng trước khi thụ tinh

Trong chăn nuôi, phương pháp TTNT đã cải tạo được giống gia súc, tỷ lệ sinh sản tăng cao Đây là một biện pháp nhân giống, cải tạo giống một cách tốt nhất, nhanh nhất và kinh tế nhất

2 PHƯƠNG THỨC THỤ TINH

2.1 Sự bắn tinh vào đường sinh dục con cái

2.1.1 Bắn tinh tử cung

Các loài gia súc gồm lạc đà, ngựa, lợn, chó là loại gia súc bắn tinh tử cung, nghĩa

là trong quá trình giao phối thì tinh dịch của con đực vào trong tử cung con cái

 Ngựa:

Thực chất là bắn tinh âm đạo, tuy nhiên vì quy đầu của ngựa đực to, thành âm đạongựa cái co bóp mạnh, cổ tử cung mềm, được mở ra hoàn toàn khi động dục nên tinh dịch của ngựa đực được phóng nhanh vào tử cung

 Lợn:

Âm đạo lợn ngắn, cổ tử cung lợn cái tròn không có nếp gấp nhiều lần hoa nở như trâu, bò, ranh giới giữa cổ tử cung và âm đạo không rõ ràng Cổ tử cung mở ra hoàn toàn trong quá trình động dục, dương vật của lợn đực có hình xoắn ốc và đưa sâu vào trong đường sinh dục lợn cái, số lượng tinh dịch phóng ra một lần của lợn đực nhiều, nên tinh dịch của lợn đực vào tử cung lợn cái trong quá trình giao phối

 Chó:

Trong quá trình giao phối, bộ phận hải niệu quy đầu của chó đực và tiền đình của chó cái mở to giữ chặt lấy nhau nên tinh dịch của chó đực vào tử cung chó cái

2.1.2 Bắn tinh âm đạo

Trâu, bò, dê, cừu là loại gia súc bắn tinh âm đạo do quá trình giao phối của các loài này ngắn, số lượng tinh dịch ít Niêm mạc cổ tử cung của gia súc cái nhiều nếp gấp, nên cổ tử cung không mở hoàn toàn trong quá trình động dục, chỉ

mở hoàn toàn khi tính dục và tính hưng phấn cao độ Nếu gia súc đực phóng tinh chưa đúng thời kỳ động dục cao độ của gia súc cái thì tinh dịch nằm ở ngoài âm đạo

2.2 Đặc tính tinh trùng

Tinh trùng có đặc tính lội ngược dòng do có đuôi dài và vận động tiến thẳng Tinh trùng có xu hướng đi về đầu mút ống dẫn trứng do niêm dịch được tiết ra từ ống dẫn trứng đến mút sừng tử cung, sự nhu động, co bóp của ống dẫn trứng giúp cho tinh trùng tiến sâu vào ống dẫn trứng

Do pH của bộ phận sinh dục như tiền đình, âm đạo hơi mang tính toan ức chế hoạt động của tinh trùng, còn pH cổ tử cung, tử cung, ống dẫn trứng có tính kiềm nhẹ là môi trường thích hợp cho tinh trùng sống và vận động mạnh.

2.3 Sự co bóp của đường sinh dục gia súc cái

Những cơn co bóp trong đường sinh dục gia súc cái trong thời gian động dục theo thứ tự từ ống dẫn trứng đến mút sừng tư cung, rồi thân tử cung và âm đạo Sự co bóp đã đẩy tinh dịch vào bên trong cơ quan sinh dục cái được nhanh hơn Tốc độ di chuyển của tinh trùng vào đường sinh dục gia súc cái là do cách bắn tinh, tính tích cực di chuyển của tinh trùng cùng với sự co bóp của cơ quan sinh dục con cái

Trong công tác TTNT cần nắm vững và chính xác thời gian dẫn tinh cụ thể,thời gian rụng trứng, thời gian duy trì mà trứng có thể thụ thai được, thời gian mà trứng đến 1/3 phía trên ống dẫn trứng để tiến hành thụ tinh cho kết quả cao nhất

2.4 Nhung mao ở đường sinh dục gia súc cái

Do đặc tính các nhung mao ở đường sinh dục con cái luôn luôn rung động

để tế bào trứng chuyển động từ mút ống dẫn trứng đến mút sừng tử cung

Nếu tinh trùng di chuyển vào gặp tế bào trứng ở 1/3 phía trên ống dẫn trứng mà cả hai tế bào này đều có khả năng thụ tinh thì hợp tử sẽ được hình thành

từ đây và chuyển dần xuống tử cung làm tổ

3 SỰ DI CHUYỂN CỦA TRỨNG, TINH TRÙNG VÀ THỜI GIAN SỐNG CỦA TINH TRÙNG TRONG CƠ QUAN SINH DỤC CÁI

Thời gian di chuyển của tế bào trứng đi hết ống dẫn trứng từ 1 – 4 ngày tùytừng loài gia súc: ngựa, bò: 4 ngày; lợn, cừu: 3 ngày Tuy nhiên, tốc độ di chuyển của trứng trên cả ống dẫn trứng là không giống nhau, tốc độ di chuyển từ khi trứng rụng khỏi buồng trứng tới 1/3 phía trên ống dẫn trứng là nhanh nhất, vì sau khi trứng rụng, noãn bào tố chưa hoàn toàn bị tiêu mất, động dục chưa hoàn toàn kết thúc nên sự nhu động của ống dẫn trứng và lông nhung còn mạnh đẩy trứng đinhanh sâu vào phía mút sừng tử cung Thời gian trứng di chuyển đến 1/3 phía trênống dẫn trứng: ngựa 10 giờ, bò 20 giờ, lợn 8-12 giờ, cừu 5 giờ, thỏ 6 giờ.

Thời gian trứng còn khả năng thụ tinh là rất ngắn, tinh trùng phải gặp trứng

ở 1/3 phía trên ống dẫn trứng thì mới xảy ra quá trình thụ tinh, nếu trứng đi qua vịtrí đó thì không còn khả năng thụ tinh nữa, ta gọi là tế bào trứng ung do trứng được bao bọc bên ngoài bởi một lớp protein do ống dẫn trứng tiết ra do vậy tinh trùng không thể phá vỡ được lớp protein này mà đi vào trứng được

3.2 Sự di chuyển của tinh trùng

Trong quá trình giao phối tự nhiên hay TTNT thì tinh trùng đều được đưa vào đường sinh dục con cái, nó phải di chuyển trong đường sinh dục con cái lên đến vị trí thụ tinh – 1/3 phía trên ống dẫn trứng

Khả năng di chuyển của tinh trùng trong đường sinh dục con cái ngoài dựa vào khả năng tự vận động của nó thì còn nhờ vào các dịch nhầy và nhu động co bóp của các bộ phận trong đường sinh dục con cái Tốc độ di chuyển của tinh trùng trung bình 12 – 16 mm/phút Bò và dê sau khi giao phối 4 - 6 giờ, lợn 1,5 -

3 giờ, ngựa 30 – 60 phút tinh trùng lên tới ống dẫn trứng

Khi tính dục, tính hưng phấn cao độ thì dịch nhầy, cũng như nhu động co bóp của bộ phận sinh dục con cái là cao nhất, do đó tốc độ di chuyển của tinh trùng là nhanh nhất Vì vậy, tinh trùng sau giao phối 1 – 2 giờ đã có thể lên tới ống dẫn trứng, còn khi con cái mới biểu hiện tính dục thì phải sau giao phối 12 –

16 giờ thì tinh trùng mới tới được ống dẫn trứng

3.3 Thời gian sống của tinh trùng trong đường sinh dục gia súc cái

Sự sống của tinh trùng trong đường sinh dục con cái rất có ý nghĩa trong thụ tinh vì nó đảm bảo đủ số lượng tinh trùng tham gia vào quá trình thụ tinh

Thời gian sống của tinh trùng trong đường sinh dục con cái không phải là

cố định mà có thể thay đổi, trong điều kiện bình thường thời gian đó từ 6 – 48 giờ, tuy nhiên nó chịu ảnh hưởng bởi một số yếu tố sau:

- Vị trí mà tinh trùng được đưa vào đường sinh dục con cái là ở chỗ nào: âm đạo hay tử cung

- Trạng thái sinh lý hay bệnh lý của các bộ phận trong đường sinh dục con cái và biểu hiện của cơ thể trong quá trình giao phối

- Chất lượng tinh trùng

Ở âm đạo do chất tiết của màng nhầy trong niêm mạc âm đạo có độ pH mang tính axit nên làm cho tinh trùng chóng chết Tinh trùng sống trong âm đạo ngựa 4 – 4,5 giờ; âm đạo bò, dê từ 1 – 6 giờ

Ở cổ tử cung, niêm dịch của màng nhầy tiết ra có pH mang tính axit yếu, nên tinh trùng có thể sống ở đây lâu nhất: cổ tử cung bò là 30 giờ, cừu 48 giờ

Trong tử cung và ống dẫn trứng, tinh trùng cũng sống được lâu: trong tử cung ngựa 24 – 48 giờ, lợn 30 giờ

Trong các loài phóng tinh âm đạo thì đa số tinh trùng bị chết ở âm đạo, chỉ 1/30 – 1/20 vào được tử cung Chất lượng tinh trùng kém thì thời gian sống của tinh trùng trong đường sinh dục con cái ngắn

C KỸ THUẬT THỤ TINH NHÂN TẠO GIA SÚC

1 CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA KỸ THUẬT TTNT GS

1.1 Học thuyết thụ tinh

Về mặt sinh học thì sinh sản của động vật là kết quả của sự gặp gỡ đặc biệt (giao phối) giữa hai cá thể khác giới (đực, cái) đã thành thục về tính ở thời điểm thích hợp (con cái động dục)

Tuy nhiên, qua nghiên cứu cho thấy đây chỉ là hình thức, thực chất quá trình sinh sản của động vật là sự đồng hóa rất phức tạp giữa tế bào sinh dục đực

(tinh trùng) và tế bào sinh dục cái (trứng) trong vòi Fallop của bộ máy sinh dục cái.

Để đạt được kết quả thụ tinh, điều cần thiết và phải có là các tế bào sinh dục đực và cái đã thành thục đang còn khả năng thụ tinh gặp nhau, đồng hóa nhautrong điều kiện thích hợp

Kỹ thuật TTNT có thể thỏa mãn được điều này Ở thụ tinh in vivo, người ta

đưa tinh trùng của con đực vào thân tử cung con cái với dụng cụ thích hợp, trong thời gian thích hợp với kỹ thuật thích hợp, tinh trùng chắc chắn sẽ nhanh chóng đến thụ tinh với trứng

Trong kỹ thuật in vitro, tinh trùng và trứng đã thành thục, qua xử lý “khả

năng hóa”, chúng sẽ thụ tinh với nhau trong điều kiện thích hợp và hợp tử mới được tạo thành được phát triển trong tủ nuôi tế bào Như vậy, để đạt được sự thụ

tinh không nhất thiết phải cho con đực và con cái “gặp nhau đặc biệt”.

1.2 Học thuyết thần kinh

Các tế bào sinh dục thu được trong kỹ thuật TTNT là kết quả của các biện pháp “kỹ thuật nhân tạo” Tuy nhiên, đó vẫn là những sản phẩm của phản xạ sinh dục Học thuyết Pap - lốp chỉ ra rằng: Mọi hoạt động sống của động vật là hoạt động phản xạ Có hai loại phản xạ: phản xạ không điều kiện và phản xạ có điều kiện Phản xạ có điều kiện là phản xạ được thành lập từ phản xạ không điều kiện

Tinh dịch thu được trong TTNT tuy không phải là kết quả của sự giao phối

tự nhiên nhưng phản xạ nhẩy giá của đực giống là phản xạ có điều kiện mà con người đã thành lập cho con đực trên cơ sở phản xạ sinh dục tự nhiên của nó Do vậy, tinh dịch thu được là tinh dịch thật, có chất lượng tốt, có khả năng thụ thai cao như phản xạ sinh dục tự nhiên

1.3 Học thuyết di truyền

Trong quá trình TTNT chịu tác động rất nhiều của các yếu tố vật lý, hóa học Các yếu tố vật lý, hóa học ảnh hưởng sâu sắc đến sức sống của tinh trùng bên ngoài cơ thể, trong điều kiện các yếu tố đó không thích hợp có ảnh hưởng xấu, thậm chí làm chết tinh trùng Trên cơ sở nghiên cứu nghiêm túc và sâu sắc

sinh lý – hóa sinh tinh trùng mà các nhà khoa học đã chỉ được ra các yếu tố lý – hóa có hại, đồng thời họ còn tạo được ra những môi trường mà trong đó có các yếu tố lý – hóa thích hợp cho tinh trùng sống lâu dài ở ngoài cơ thể Mặt khác, sự

di truyền các đặc điểm của thế hệ trước cho thế hệ sau về bản chất là được quy đinh trên các gen (ADN) nằm trên nhiễm sắc thể trong nhân tế bào sinh dục Chỉ

có những tinh trùng sống và hơn nữa rất khỏe mới có khả năng thụ tinh với trứng.Tinh trùng vẫn được giữ nguyên về cấu trúc, nghĩa là cấu trúc ADN vẫn được ổn định Như vậy sự di truyền các đặc điểm đời trước cho đời sau thông qua tinh trùng trong kỹ thuật TTNT vẫn được ổn định Do đó, sức sống đời sau không bị ảnh hưởng

2 LỢI ÍCH KINH TẾ, KỸ THUẬT CỦA CÔNG TÁC TTNT

2.1 Với công tác giống

- Tạo điều kiện thuận lợi cho việc truyền giống, lai tạo giống

- Giảm nhẹ chi phí do việc nhập nội đực giống tốt vì đã có thể nhập tinh dịchcủa đực giống tốt để cải tạo đàn giống địa phương

- Nâng cao hiệu quả sinh sản của đực giống, ở lợn có thể tăng 30-50 lần, ở

bò có thể tăng hàng trăm lần

- Thành lập được ngân hàng tinh dịch, nhằm bảo quản lâu dài tinh dịch để cóthể trao đổi, vận chuyển dễ dàng tạo điều mở rộng không gian của việc cải tạo giống nhanh chóng

- Đánh giá nhanh phẩm chất đực giống

2.2 Hiệu quả kinh tế

- Giảm số lượng đực giống cần nuôi từ đó tiết kiệm thức ăn, chuồng trại, công lao động, tăng năng suất lao động, hạ giá thành sản phẩm

- Nâng cao phẩm chất đời sau một cách nhanh nhất, do đó góp phần làm tăngnhanh sản phẩm cho xã hội

- Tinh dịch được kiểm tra một cách chặt chẽ nên đảm bảo tỷ lệ sinh sản của đàn nái.

2.3 Về công tác thú y

việc dùng dụng cụ chuyên dụng được kiểm tra chặt chẽ nên tránh được sự lây lan của bệnh truyền nhiễm, ký sinh trùng thông qua đường sinh dục

2.4 Những hạn chế của kỹ thuật thụ tinh nhân tạo

- Do làm giảm số lượng đục giống từ đó làm đơn điệu hóa sự biến dị di truyền của đời sau Những khiếm khuyết cuẩ đục giống về di truyền nhanh chóng lan rộng trong thực tiễn sản xuất do đo, việc chọn lọc đực giống cũng như quy trình chăm sóc, nuôi dưỡng, khai thác, quản lý, sử dụng đực giống cần phải làm hết sức nghiêm túc và chặt chẽ

- Trang thiết bị và vốn ban đầu đòi hỏi cao hơn, tốn kém hơn

- Thụ tinh nhân tạo sẽ là con dao 2 lưỡi nếu như công tác thú y kém

3 KỸ THUẬT LẤY TINH GIA SÚC

3.1 Các yêu cầu cơ bản

- Lấy được toàn bộ tinh dịch với phẩm chất tốt nhất, thuần khiết nhất

- Phương pháp lấy tinh an toàn, không gây nguy hiểm cho người lấy tinh, cho gia súc được lấy tinh

- Trang thiết bị đơn giản, kỹ thuật không quá phức tạp, dễ áp dụng trong sản xuất

3.2 Khái quát các phương pháp lấy tinh

3.2.1 Phương pháp hải miên

Dùng bông sạch, vật mềm đặt vào âm đạo con cái đang động dục Sau đó, cho đực nhẩy rồi lấy vật đặt ra, vắt nhẹ sẽ thu được tinh dịch

3.2.2 Phương pháp âm đạo

Cho con đực giao phối với con cái như bình thường Ngay sau đó, dùng dụng cụ chuyên dùng hút tinh dịch từ âm đạo của con cái.

3.2.3 Phương pháp dùng túi

Dùng túi được chế từ bong bóng lợn hoặc cao su mềm bao lấy dương vật con đực Cho con đực giao phối với con cái, sau đó thu toàn bộ tinh dịch từ túi hứng tinh

3.2.4 Phương pháp cơ giới (Massage)

Dùng tay xoa bóp nhẹ vào vùng tuyến tinh nang (bò đực), quy đầu (lợn đực), vùng quanh huyệt sinh dục (gia cầm, cá)…có thể thu được tinh dịch

Phương pháp này ngày nay được ứng dụng rất phổ biến trên lợn, gia cầm, cá,…vì thiết bị đơn giản, thao tác dễ dàng, có thể lấy tinh phân đoạn, chủ động bỏ đi những phần tinh dịch kém phẩm chất

3.2.5 Phương pháp dùng điện

Dùng một nguồn điện có cường độ và điện thế thích hợp kích thích vào thần kinh hông – khum có thể gây ra một hưng phấn sinh dục cưỡng bức dẫn tới xuất tinh

3.2.6 Phương pháp dùng âm đạo giả (AĐG)

Người ta thiết kế một dụng cụ (bằng chất dẻo và cao su) đạt các yêu cầu về nhiệt độ (38 – 390C), về áp lực, độ nhờn,…giống như âm đạo của con cái gọi là

âm đạo giả Sau đó, lắp AĐG vào mô hình con cái (Manequin) hoặc dùng người

cầm AĐG đứng cạnh giá nhẩy có con vật làm giá đứng trong Qua tập luyện, con đực sẽ nhẩy lên giá nhẩy, giao phối với Manequin,…và người ta thu được tinh dịch trong AĐG

4 PHƯƠNG PHÁP LẤY TINH BẰNG AĐG

4.1 Cấu tạo âm đạo giả

4.1.1 Vỏ AĐG

Vỏ AĐG làm bằng chất dẻo, hình ống dầy Kích thước và hình dáng có khác nhau đôi chút để thích hợp với các loài gia súc Trên vỏ AĐG có 1 hố để bơm nước nóng vào.

4.1.2 Ruột AĐG

Ruột AĐG bằng cao su mềm, đàn hồi tốt, hình ống, dài hơn vỏ từ 10-15cm

Kích thước AĐG của một số giống gia súc

Dài

(cm)

Đường kính trong (cm)

Dài

(cm)

Đường kính trong (cm)

Dụng cụ hứng tinh thường bằng thủy tinh nhưng tùy theo từng loài gia súc

và điều kiện ngoại cảnh khác nhau mà có hình dáng khác nhau cho phù hợp

- Với dê, cừu, bò ở các nước lạnh phải có cốc hứng tinh hai tầng, nhưng ở các nước nhiệt đới thì chỉ là 1 cái lọ nhỏ hoặc ống nghiệm dày, có chia độ

- Với lợn đực vì lượng tinh dịch nhiều nên thường phải dùng bình, chai có chia độ để hứng tinh

4.1.5 Đai cố định

Dùng để cố định ruột AĐG và phễu hứng tinh vào vỏ AĐG

4.2 Lắp AĐG:

- Lắp ruột AĐG vào vỏ

- Lắp phễu hứng tinh vào AĐG

- Lắp các đai cố định

- Tiệt trùng ruột AĐG bằng cồn

Khi dùng đổ nước nóng có nhiệt độ 50 – 600C tùy theo mùa vào van trên vỏAĐG sao cho nhiệt độ trong lòng AĐG thích hợp với từng đực giống: 38 – 400 C với lợn; 40 – 410C với ngựa; 40 – 42,50C với bò; 42 – 450C với cừu,

Lượng nước nóng đổ đủ vào xoang vỏ - ruột AĐG khác nhau tùy từng loài gia súc, tuy nhiên yêu cầu chung là lượng nước chiếm 2/3 thể tích xoang ADG.

- Bơm hơi vào xoang AĐG với áp lực thích hợp

- Bôi trơn lòng AĐG bằng vaselin đã tiêu độc hoặc dùng dung dịch bôi trơn Chiều dài bôi trơn trong lòng AĐG từ 1/3 – 1/2

- Lắp AĐG vào giá nhảy

AĐG phải đạt các yêu cầu kỹ thuật sau:

 Nhiệt độ trong lòng AĐG phải thích hợp với từng loài gia súc

- Với lợn, giá nhảy để lấy tinh bằng AĐG rất phong phú, có thể làm bằng sắthoặc gỗ có phủ lót thích hợp

4.4 Huấn luyện đực giống nhảy giá

Huấn luyện đực giống nhảy giá là thành lập phản xạ sinh dục có điều kiện trên cơ sở phản xạ sinh dục không điều kiện Để đạt được hiệu quả huấn luyện cao cần chú ý những vấn đề sau:

4.4.1 Tuổi huấn luyện

Đực giống non, sau thành thục về tính và chưa qua giao phối cần được huấn luyện ngay Như thế con vật sẽ hăng, dễ huấn luyện hơn Lợn đực: 5-7 tháng

tuổi; trâu 24 – 30 tháng tuổi; bò 18 – 24 tháng tuổi; dê – cừu 6 – 9 tháng tuổi; ngựa 24 – 30 tháng tuổi.

4.4.2 Phương pháp huấn luyện

Có hai phương pháp huấn luyện chủ yếu:

4.4.2.1 Phương pháp sinh vật

Là phương pháp dùng con cái đang động dục cố định vào giá nhảy rồi cho con đực cần huấn luyện nhảy lên giá nhảy Khi con đực nhẩy lên giá, người huấn luyện phải kịp thời, chính xác, khéo léo đưa dương vật của con đực vào AĐG

Dưới tác động kích thích của AĐG, con đực sẽ xuất tinh Sau đó, không cần dùng con cái nữa

Ở những lần đầu, con đực thường không thực hiện phản xạ giao phối, cần kiên trì tập luyện, cho tập nhiều lượt trong một lần tập luyện, mỗi tuần tập 2 – 3 ngày

Tùy theo từng loại đực giống mà sau từ 2 – 4 tuần có thể thành lập được phản xạ nhảy giá Sau đó là giai đoạn củng cố phản xạ, nhịp huấn luyện thưa dần 3-5 ngày

4.4.2.2 Phương pháp tham quan

Cho đực giống tập sự quan sát một đực giống khác đã nhảy giá thành thục Sau đó, cho đực giống tập sự bắt chước, như vậy con đực tập sự sẽ nhanh chóng tiếp thu kinh nghiệm

Ngoài ra, có thể kết hợp cả hai phương pháp để rút ngắn thời gian tập luyện Ở lợn có thể dùng phương pháp cưỡng bức lợn đực ôm giá, kích thích cưỡng bức phản xạ cương cứng dương vật và xuất tinh

Để huấn luyện đực giống nhảy giá thành công cần chú ý những điểm sau:

- Ổn định người huấn luyện, thời gian và địa điểm huấn luyện

- Nên huấn luyện vào lúc trời mát, yên tĩnh

- Người huấn luyện cần ôn hòa, kiên trì và khéo léo.

Nếu lấy tinh quá thưa, không những giảm hiệu suất sinh sản của đực tốt, giảm hiệu quả kinh tế mà tinh trùng thu được có tỷ lệ kỳ hình cao

- Ngựa (trong mùa sinh sản): 1 (ngày/lần) (cho nghỉ chủ nhật)

- Dê, Cừu (trong mùa sinh sản): 2-4-6 (lần/ngày).

5 LẤY TINH CHO CÁC LOÀI GIA SÚC

5.1 Lấy tinh trâu, bò

Có thể lấy tinh bằng hai phương pháp: dùng điện hoặc dùng AĐG, nhưng chủ yếu là dùng AĐG

Phương pháp lấy tinh cho bò bằng AĐG:

5.1.1 Chuẩn bị

- Chuẩn bị giá nhảy: vệ sinh, đưa gia súc làm giá vào giá cố định; vệ sinh nửa thân sau con vật làm giá.

- Cho những đực giống sẽ khai thác vào chờ, cách xa giá nhảy 20 – 25 m, đầu hướng về phía giá nhảy

- Hoàn chỉnh AĐG đạt yêu cầu kỹ thuật và thích hợp với đực giống sắp lấy tinh về các thông số: nhiệt độ, áp lực, độ nhờn,

- Đưa đực giống khai thác vào vị trí “xuất phát”, vệ sinh quanh vùng bao quyđầu bằng dung dịch thuốc tím 0,1%; dùng khăn tẩm nước ấm 400C kích thích dương vật cho dương vật cương cứng và thò ra

- Người lấy tinh bước lên, chao AĐG xuống, khéo léo, nhanh chóng, chính xác đưa dương vật con đực vào AĐG Hướng của AĐG chếch lên 20 – 300 Con vật rướn lên, thúc mạnh dương vật, đây là lúc xuất tinh nên cho AĐG chúc xuống

20 - 300

- Xuất tinh xong con vật sẽ tự nhảy xuống Người giúp việc dắt con đực đi vòng quanh giá nhảy và cho nhảy tiếp lần hai Trong nhiều trường hợp thì lần hai

có số lượng và chất lượng tinh dịch tốt hơn lần 1

- Trường hợp con đực không chịu nhảy, dắt con vật đi vòng quanh giá 1-3 vòng và tăng cường kích thích cơ giới vào dương vật thì con đực sẽ nhảy Tinh dịch lấy được cần ghi ngay ký hiệu tên đực giống và đưa vào phòng kiểm nghiệm

- Sau đó, đưa đực giống trở về chuồng, cho ăn trứng tươi, cỏ non, thức ăn tinh, để bồi dưỡng Vệ sinh giá nhảy

Chú ý:

 Lấy tinh vào buổi sáng.

 Nơi lấy tinh cần yên tĩnh, thoáng mát, sạch sẽ

 Ổn định thời gian, người lấy tinh, con vật làm giá, quần áo người lấy tinh,

 Con vật làm giá cần khỏe mạnh, hiền lành, có vóc dáng và màu sắc hấp dẫn, sạch sẽ,

 Hai người lấy tinh cần hòa hợp, kiên trì,

5.2 Lấy tinh ngựa bằng AĐG

Về cơ bản, tương tự như lấy tinh trâu bò Tuy nhiên có một số điểm khác như sau:

- Điểm xuất phát cần xa hơn: 25 – 30 – 50 m

- Phải có 2 người giúp việc

- Ngựa đực lấy tinh cần có hai dây cương về hai bên, hai người giúp việc mỗi người cầm một dây cương cùng “phi” với ngựa để kìm tốc độ và hướng ngựa

về đúng giá nhảy

- Ngựa thường nhảy lên ngay, người lấy tinh cần nhanh nhẹn, dũng cảm, chính xác đưa dương vật vào AĐG

- Cần chú ý cảnh giác với ngựa để giữ an toàn lao động

- Cần ổn định người lấy tinh với ngựa Người, ngựa quen nhau sẽ an toàn và kết quả hơn

5.3 Lấy tinh dê, cừu

Có thể dùng 2 phương pháp: dùng AĐG và dùng điện Nhưng thông

thường dùng phương pháp AĐG Các bước tiến hành tương tự như lấy tinh trâu,

bò Tuy nhiên, có một số điểm khác:

- Giá lấy tinh dê, cừu thường di động được Do đó, có thể lấy tinh ở hành lang của chuồng, thậm chí ngoài sân chuồng, bãi chăn.

- Dê, cừu không có thừng để dắt, do vậy để dắt chúng vào giá có thể dắt bằng tai hoặc cưỡi lên lưng chúng rồi nắm tai, sừng để “lái” chúng về giá nhảy

- Dê, cừu nhỏ, do đó người lấy tinh không thể đứng mà phải “quỳ xổm” bên giá để lấy tinh

- Phản xạ của dê, cừu nhất là dê rất nhanh cho nên người lấy tinh phải rất nhanh nhẹn và chính xác

- Có thể lặp lại vòng hai

- Cần chú ý đề phòng chúng húc

5.4 Lấy tinh lợn

5.4.1 Lấy tinh lợn bằng AĐG

- Chuẩn bị: Giống như của trâu, bò

- Lấy tinh:

 Lắp AĐG vào giá nhẩy, cho AĐG chếch lên

 Cho lợn đực vào phòng lấy tinh Vệ sinh vùng bụng và dùng khăn tẩm nước ấm 40 – 420C kích thích cho dương vật lợn cương cứng

 Dụ dỗ cho lợn đực nhảy lên giá

 Khéo léo đưa dương vật lợn đực vào lòng AĐG, giữ nguyên chếch

15-200 để cho lợn xông Lợn đực thường xông khoảng 2 – 3 phút, sau đó lợn nằm lịm trên giá, mắt lim dim, miệng sàu bọt, hậu môn phập phồng Đây là thời điểm lợn đực xuất tinh Lúc này cần tức khắc hạ AĐG cho dốc xuống 15 – 200, bóp nhẹ quả cầu thứ hai của bơm song liên cầu để tạo thành nhu động trong lòng AĐG giống như nhu động của âm đạo con cái

 Khi xuất tinh xong thì lợn đực tự nhảy xuống giá

 Thu dọn: giống như ở trâu bò.

5.4.2 Lấy tinh lợn bằng phương pháp cơ giới (Massage)

Phương pháp này rất đơn giản về thiết bị, chỉ cần găng tay cao su sản khoa,

lọ hứng tinh vô trùng Các bước tiến hành:

- Vệ sinh bao quy đầu, kích thích dương vật lợn đực

- Khi dương vật của lợn đã cương cứng và thò ra thì dùng tay đeo găng tay cao su đã được bôi một chút dầu Paraphin nắm lấy quy đầu, nắm nhẹ vừa phải để cho lợn giao phối với lòng bàn tay Sau đó, lợn đực hưng phấn cao độ, dương vật thò dài ra và có dấu hiệu xuất tinh

- Khéo léo lái dương vật ra ngoài và dùng các ngón tay tác động nhẹ vào quyđầu

- Lợn đực sẽ xuất tinh theo từng đợt:

 1 – 1,5 phút đầu lợn xuất keo và tinh loãng Lượng tinh dịch này nên bỏ đi

 2 – 3 phút sau thì tinh dịch đặc, hứng lấy cho tinh dịch chảy theo thành bình

 3 – 4 phút sau đó, lợn xuất tinh loãng dần Lượng tinh dịch này cũng nên bỏ đi

- Thấy dấu hiệu lợn đực xuất tinh xong thì nới lỏng ngón tay, lợn tự động thudương vật lại và xuống giá

- Thu dọn: giống như ở trâu, bò

Chú ý:

 Vệ sinh phòng bệnh để tránh sự lây bệnh giữa người và lợn

 Tránh sự tiếp xúc giữa dương vật lợn vào giá nhẩy, miệng lọ,

 Lực tác động của tay người vào dương vật lợn cần thích hợp, tránh thô bạo gây “phản ứng” cho lợn.

6 MỘT SỐ NHÂN TỐ CHỦ YẾU ẢNH HƯỞNG TỚI SỐ LƯỢNG VÀ CHẤT LƯỢNG TINH DỊCH

6.1 Dinh dưỡng, nuôi dưỡng, chăm sóc, quản lý

6.1.1 Dinh dưỡng

Dinh dưỡng cần đầy đủ và cân bằng Đặc biệt các yêu cầu về chất đạm, khoáng đa, vi lượng và vitamin Vì đạm là nguyên liệu quan trọng để sản xuất tinh dịch, nên bổ sung đạm chất lượng tốt, dễ hấp thu Cần bổ sung đầy đủ

khoáng đa lượng như Ca, P và vi lượng như Fe, Ca, Zn, Mn, Mg, Về vitamin, cần chú ý bổ sung các vitamin: A, D, E, B1, C, PP,

- Chú ý thường xuyên tắm, chải cho đực giống

- Đặc biệt cần chú ý giữ sạch vùng hạ nang và vùng bao quy đầu của đực giống

- Rất cần chú ý cho đực giống vận động để con đực có phản xạ sinh dục mạnh mẽ, có thân thể săn chắc

Có 2 hình thức vận động:

 Vận động tự do: Cho đi lại tự do trong sân vận động (1 con/ 1 ô sân)

 Vận động cưỡng bức: Cho con đực vận động với tốc độ nhất định trên đoạnđường nhất định tùy từng loại gia súc:

 Lợn đực nội: Chạy + đi 1,5 – 2 km/lần Tuần 2 lần.

 Lợn đực ngoại: Chạy + đi 2 – 2,5 km/lần Tuần 2 lần

 Trâu, bò: Đi nhanh+ lồng 10 – 15 km/lần Tuần 2 lần

 Ngựa đực: Đi kiệu + phi 50-60 km/lần Tuần 2 – 3 lần

6.2.2 Tuổi tác

Đực giống non tinh dịch ít nhưng chất lượng tinh dịch tốt Sau đó đến giai đoạn ổn định về số lượng và chất lượng Cuối cùng, khi gia súc già thì số lượng tinh dịch vẫn cao song chất lượng thì giảm dần Ở mỗi nước có quy định về tuổi

sử dụng đực giống cụ thể Ở Việt Nam thì quy định:

- Lợn nội: 1-3 (tuổi)

- Lợn ngoại: 1-5 (tuổi)

- Bò đực: 4 – 12 (tuổi)

6.2.3 Mùa vụ

Ở những gia súc sinh sản theo mùa thì chỉ vào mùa sinh sản thì đực giống mới sản xuất tinh dịch (như ngựa đực mùa sinh sản từ tháng 4 – tháng 10 trong năm, những tháng khác không có hoặc chất lượng tinh dịch kém) Những động vật sinh sản không theo mùa có số lượng và chất lượng cao ở mùa xuân và mùa thu và kém hơn ở mùa đông và mùa hè.

7 KIỂM TRA TINH DỊCH GIA SÚC

- Đánh giá tình trạng sức khỏe của đực giống

- Qua đánh giá phẩm chất tinh dịch có thể đưa ra chế độ sử dụng hợp lý tinh dịch để vừa đảm bảo sức sinh sản cao nhất cho con cái, vừa nâng cao hiệu quả kinh tế - kỹ thuật cao nhất của kỹ thuật TTNT

Ví dụ:

 Tinh dịch kém quá: bỏ đi, tìm nguyên nhân

 Tinh dịch bình thường: sản xuất tinh lỏng

 Tinh dịch có phẩm chất tốt: sản xuất tinh đông lạnh

 Từ chỉ tiêu VAC (tổng số tinh trùng tiến thẳng trong 1 lần xuất tinh) người ta có thể sản xuất ra một số lượng liều tinh lớn nhất mà vẫn đảm bảo sinh sản cho con cái và thu được hiệu quả kinh tế - kỹ thuật cao nhất

n = VAC/ N.

Trong đó: n – Số liều tinh sản xuất; N – Số tinh trùng cần có trong liều phối để

có tỷ lệ thụ thai tốt

7.1.2 Yêu cầu

- Nghiêm túc, chính xác, trung thực

- Dụng cụ, thiết bị kiểm tra có chất lượng tốt, sạch sẽ, vô trùng

7.2 Nội dung kiểm tra

Các chỉ tiêu kiểm tra tinh dịch cho thấy số lượng, chất lượng của tinh dịch

và khả năng thụ thai của tinh trùng Các chỉ tiêu kiểm tra gồm có: chỉ tiêu kiểm tra thường xuyên và chỉ tiêu kiểm tra định kỳ

7.2.1 Chỉ tiêu kiểm tra thường xuyên:

7.2.1.1 Lượng tinh (V)

Lượng tinh là thể tích tinh dịch của mỗi lần gia súc xuất tinh Dùng các dụng cụ đo thể tích: ống đong, cốc đong, bình đong, để xác định Với tinh dịch lợn, do trong tinh dịch có nhiều hạt keo nên phải lọc qua 4 – 6 lớp vải màn tiêu độc rồi mới định lượng tinh lọc

- Tinh dịch trâu: trắng sữa

- Tinh dịch dê, cừu: vàng ngà hoặc ghi

- Tinh dịch gia cầm: màu ghi, ghi xám

Khi tinh dịch có màu không bình thường:

 Màu đỏ, nâu: lẫn máu, đường sinh dục con đực bị sây sát, viêm nhiễm Do vậy, phải bỏ tinh dịch đi, cho gia súc đực nghỉ và điều trị bệnh ngay.

 Tinh dịch phân lớp: có thể lẫn nước Bỏ tinh dịch đi, xem xét kỹ chế

độ lấy tinh, chế độ nuôi dưỡng,

7.2.1.3 Độ vẩn

Trong tinh dịch có các vật thể hữu hình: tinh trùng, các hạt keo lơ lửng và tinh thanh Độ vẩn đục thể hiện nồng độ tinh trùng và sức hoạt động của tinh trùng trong tinh dịch Tinh trùng luôn luôn vận động đã kéo theo sự chuyển động của các hạt hữu cơ trong tinh thanh tạo thành hiện tượng vẩn đục như vẩn mây,

độ vẩn có quan hệ với nồng độ tinh trùng trong tinh dịch Độ vẩn thường chỉ quansát được ở tinh dịch của gia súc có lượng tinh nhiều như tinh dịch ngựa, lợn Vì vậy, khi kiểm tra tinh dịch trâu, bò, dê, cừu, gia cầm không cần kiểm tra chỉ tiêu này Tùy theo mức độ vẩn mây nhiều hay ít mà đánh giá được độ vẩn cao hay thấp, cụ thể:

pH tinh dịch biểu thị nồng độ ion H+ có trong tinh dịch, pH tinh dịch có quan hệ tới sức sống và khả năng thụ thai của tinh trùng, vì pH có quan hệ tới quátrình trao đổi chất của tinh trùng thông qua hệ thống enzyme pH tinh dịch là pH trung bình của dịch tiết từ phụ dịch hoàn và các tuyến sinh dục phụ pH được kiểm tra bằng pH mettre, hộp so màu hoặc giấy đo pH ngay sau khi lấy tinh.

Độ pH tinh dịch của một số loài gia súc

Giống loài pH trung bình Phạm vi

Chỉ tinh trùng vận động tiến thẳng mới có khả năng tham gia vào quá trình thụ tinh Kiểm tra hoạt lực tinh trùng thông qua ước lượng tỷ lệ % tinh trùng tiến thẳng hoặc mức độ “sóng động” của mặt thoáng vi trường tinh dịch do sức hoạt động của tinh trùng tạo nên

Dùng kính hiển vi với độ phóng đại 150-300 lần, ước lượng tỷ lệ % tinh trùng tiến thẳng

Cụ thể:

- Khi ước lượng 100% tinh trùng tiến thẳng A = 1

- Khi ước lượng 80% tinh trùng tiến thẳng A=0.8

- Khi ước lượng 10% tinh trùng tiến thẳng A=0.1

- Khi thấy tinh trùng chỉ còn lắc lư L (A=0)

- Khi thấy tinh trùng đã chết hết H

Ở tinh dịch trâu, bò, dê, cừu, vì nồng độ tinh trùng quá lớn, người ta không thể ước lượng được tỷ lệ % tinh trùng tiến thẳng Do đó, người ta đánh giá

A bằng mức độ sóng động của mặt thoáng tinh dịch trong vi trường kính hiển vi

và cho điểm:

- Thấy có hiện tượng cuộn sóng sống động 5 điểm

- Thấy có sóng tinh hoạt động mạnh 4 điểm

- Thấy có sóng tinh hoạt động chậm 2 điểm

- Không thấy sóng tinh, thấy tinh trùng hoạt động riêng lẻ 1 điểm

- Không thấy hoạt động 0 điểm

Chú ý: Để có kết quả chính xác cần:

 Kiểm tra ngay A sau khi lấy tinh, càng sớm càng tốt

 Chú ý đến nhiệt độ khi kiểm tra, nhiệt độ tiêu bản phải đạt 35-370 C

 Việc đánh giá cho điểm này rất chủ quan Do vậy, cần phải làm nhiều lần để có một “mực mắt” chuẩn

7.2.1.7 Mật độ

Mật độ tinh trùng là số tinh trùng/ đơn vị diện tích, nó cho thấy một cách khái quát về nồng độ tinh trùng Tuy nhiên, trên thực tế điều này không xác định được.

Do vậy, để xác định mật độ tinh trùng người ta ước lượng so sánh một cáchtương đối giữa chiều dài đầu L (tinh trùng trâu, bò, dê, cừu, gia cầm) hoặc chiều dài L tinh trùng (tinh trùng lợn, ngựa) với khoảng cách d giữa chúng:

là chỉ tiêu cơ sở để tính số liều tinh trong sản xuất

Do vậy, ở các cơ sở sản xuất tinh dịch công nghiệp (tinh đông lạnh) thì C lại là chỉ tiêu kiểm tra thường xuyên

Có nhiều phương pháp xác định nồng độ tinh trùng C:

 Phương pháp xác định C trực tiếp bằng buồng đếm hồng – bạch cầ u:

Đếm trực tiếp số lượng tinh trùng trong buồng đếm hồng – bạch cầu

Đây là phương pháp chính xác nhất, nó làm cơ sở cho các phương pháp xácđịnh C gián tiếp khác

Có thể dùng các loại buồng đếm Thermoss, Newbower, Goriaep

Gia súc ống hút Vạch hút Độ Số ô tế Công thức