công nghệ thụ tinh nhân tạo

A. CÔNG NGHỆ SINH SẢN (REPRODUCTIVE BIOTECH - RB) 1. MỤC ĐÍCH Nhằm nâng cao khả năng sinh sản của gia súc và tăng tốc độ cải thiện tiềm năng di truyền của gia súc, do đó góp phần đáng kể gia tăng sản phẩm chăn nuôi. Đồng thời RB cũng tạo cơ hội lớn cho việc nhân nhanh và rộng khắp các chất liệu di truyền tốt (nhũng gia súc đực, cái có khả năng sinh sản, sản xuất cao). RB cũng là một công cụ hiệu quả trong việc bảo tồn những nguồn gien quý, sắp tuyệt chủng… để phục vụ cho những yêu cầu sử dụng trong tương lai. 2. ỨNG DỤNG RB TRÊN THẾ GIỚI Những kỹ thuật chính trong RB bao gồm: 2.1. Thụ tinh nhân tạo (Artiicial Insemination) Đây là công cụ chính trong các chương trình cải thiện giống bò sữa/thịt, dê, cừu, heo, gà tây… ở các nước chăn nuôi phát triển. Kỹ thuật này chủ yếu gia tăng tối đa khả năng khai thác tiềm năng di truyền tốt của con đực giống. Với các phương pháp thu tinh dịch, đánh giá, pha loãng và bảo quản (dưới dạng tinh tươi hay đông lạnh ở -196 o C), từ 1 lần xuất tinh của đực giống có thể sử dụng phối giống cho hàng chục con cái khác nhau. Ngoài ra, tinh đông lạnh sẽ giúp cho việc phân phối nguồn chất liệu di truyền tốt đến khắp nơi trên thế giới. Ước tính, hàng năm trên toàn thế giới có khoảng 100 triệu lần TTNT trên bò, 40 triệu lầ TTNT trên heo, 3,3 triệu lần TTNT trên cừu và 500.000 lần TTNT trên dê. 2.2. Cấy truyền phôi (Embryo Transfer) Kỹ thuật này cơ bản được dựa trên kỹ thuật gây đa xuất noãn và động dục đồng loạt, từ đó giúp gia tăng tối đa khả năng khai thác tiềm năng di truyền tốt của con cái giống. Đồng thời, việc bảo quản đông lạnh trứng và phôi cũng giúp cho phân phối chất liệu di truyền tốt được thuận lợi và rộng khắp hơn, cũng như giúp bảo tồn những nguồn gien quý. Ước tính, có khoảng 440.000 ET trên bò, 17.000 ET trên cừu, 2.500 ET trên ngựa và 1.200 ET trên dê hàng năm. Ngoài ra, khoảng 80% bò đực giống trên khắp thế giới được sinh ra từ ET. 2.3. Thụ tinh trong vi giọt (Invitro Fertilization) Nhằm sản xuất ra phôi in-vitro từ những con cái giống không có khả năng sinh sản bình thường, phục vụ cho kỹ thuật ET. Chỉ tính riêng ở Nhật, số bê sinh ra bằng kỹ thuật ET năm 2003 đã gấp 16 lần so với 10 năm trước (1.202 bê ET/1993 so với 19.583 bê ET/2003), và số bê sinh ra từ phôi in-vitro hiện nay đã nhiều hơn số bê sinh ra từ phôi in-vivo năm 1993. 2.4. Thu trứng trên buồng trứng (Ovum pick up) Kỹ thuật này cho phép lấy nhiều lần những trứng (oocyte) chưa trưởng thành trên buồng trứng (ovary) của thú sống, vì vậy sẽ tăng số lượng trứng thu được trên 1 thú cái cho trứng. Từ đó, các trứng này được nuôi chín (Invitro Maturation) và là nguồn nguyên liệu tốt cho IVF. Kỹ thuật này không những tăng số lượng trứng khai thác trên 1 thú cái mà còn đẩy nhanh tiến bộ di truyền của thú cái vì nó có thể thực hiện sớm trên những cái hậu bị. 2.5. Xác định giới tính phôi (Embryo Sexing) Kỹ thuật xác định nhanh và chính xác giới tính của phôi (bằng PCR hay LAMP hay Karyotype…) giúp cho người chăn nuôi sản xuất ra những đàn gia súc có giới tính phù hợp với hướng sản xuất Ví dụ: sản xuất ra con cái để cho sữa hay sản xuất ra con đực để cho thịt. Điều này giúp giảm đáng kể số lượng gia súc ban đầu và đẩy nhanh tiến độ di truyền. Ví dụ: muốn có 50 bê cái cần phải có 100 bê sinh ra. Ngày nay, có thể sản xuất ra gia súc có giới tính theo định hướng từ những loại tinh đã được phân tách (Sorted Semen). 2.6. Nhân bản (Cloning) Có 3 phương thức nhân bản là (a) cắt phôi (b) đưa tế bào phôi vào bên trong vòng sáng (Zona) của 1 trứng đã lấy bỏ nhân và (c) đưa nhân của tế bào thân (somatic cell) vào bên trong vòng sáng (Zona) của 1 trứng đã lấy bỏ nhân. Nhân bản thường được sử dụng để nhân nhanh những gia súc đã được chuyển gien. B. QUÁ TRÌNH THỤ TINH 1. KHÁI NIỆM VÀ CÁC HÌNH THỨC GIAO PHỐI 1.1. Khái niệm Thụ tinh là một quá trình sinh lý xảy ra khi tế bào trứng kết hợp với tinh trùng, phát sinh đồng hóa, kết quả tạo thành một tế bào mới mang tính di truyền của bố mẹ. Có hai hình thức thụ tinh: 1.1.1. Hình thức giao phối tự nhiên (thụ tinh trực tiếp) Thụ tinh trực tiếp là quá trình giao phối giữa gia súc đực và gia súc cái, tinh dịch của con đực đi vào đường sinh dục con cái để tế bào trứng và tinh trùng kết hợp với nhau ở 1/3 phía trên ống dẫn trứng, tạo một tế bào mới. Tế bào đó gọi là hợp tử. 2 Quá trình thụ tinh của gia súc gồm 4 giai đoạn: - Tế bào trứng ở giai đoạn chuẩn bị. - Tinh trùng kết hợp với tế bào trứng. - Sự đồng hóa giữa tế bào trứng và tinh trùng. - Sự kết hợp giữa nhân tinh trùng và nhân tế bào trứng  Ưu điểm:  Đúng được thời điểm động dục cao độ (chịu đực) của con cái.  Quá trình thụ thai được đảm bảo chắc chắn.  Hạn chế:  Phẩm chất tinh dịch chưa được kiểm tra trước khi phối giống.  Làm lây lan dịch bệnh từ con đực sang con cái và ngược lại.  Không kinh tế, không kỹ thuật. 1.1.2. Hình thức thụ tinh nhân tạo (TTNT) Thụ tinh nhân tạo là hình thức dùng tinh dịch của con đực đã pha loãng bơm vào đường sinh dục con cái để tinh trùng kết hợp với trứng tạo thành hợp tử. Người ta thấy rằng trong quá trình thụ tinh thì tinh trùng phá vỡ được màng phóng xạ của tế bào trứng chính là nhờ men hyaluronidase ở phần acrosom của đầu tinh trùng, men này không có tính đặc trưng cho loài. Điều đó có nghĩa tinh trùng của một loài gia súc này có thể phá vỡ tế bào màng phóng xạ của một loài gia súc khác. Vì vậy, trong TTNT người ta có thể lầy nhiều loại tinh trùng của gia súc khác loài hỗn hợp với một lượng tinh trùng nhất định của đực giống cùng loài với gia súc cái sẽ nâng cao tỷ lệ thụ thai và tăng năng suất sinh sản của mỗi gia súc đực giống. Ví dụ: Trộn tinh trùng bò và lợn để dẫn tinh cho lợn nhưng chỉ có tinh trùng lợn đi vào được bên trong tế bào trứng lợn. Ngoài ra, người ta có thể bổ sung men hyaluronidase tổng hợp vào tinh dịch nhằm nâng cao kết quả thụ tinh.  Ưu điểm của TTNT:  Trong TTNT người ta có thể dùng tinh dịch của một đực giống tốt thụ tinh cho nhiều gia súc cái mà vẫn đảm bảo tỷ lệ thụ thai cao. 3  Ngăn ngừa được sự lây lan một số bệnh truyền nhiễm, ký sinh trùng giữa con cái và con đực khi gia súc giao phối tự nhiên.  Chất lượng tinh dịch được kiểm tra kỹ càng trước khi thụ tinh. Trong chăn nuôi, phương pháp TTNT đã cải tạo được giống gia súc, tỷ lệ sinh sản tăng cao. Đây là một biện pháp nhân giống, cải tạo giống một cách tốt nhất, nhanh nhất và kinh tế nhất. 2. PHƯƠNG THỨC THỤ TINH 2.1. Sự bắn tinh vào đường sinh dục con cái 2.1.1. Bắn tinh tử cung Các loài gia súc gồm lạc đà, ngựa, lợn, chó là loại gia súc bắn tinh tử cung, nghĩa là trong quá trình giao phối thì tinh dịch của con đực vào trong tử cung con cái.  Ngựa: Thực chất là bắn tinh âm đạo, tuy nhiên vì quy đầu của ngựa đực to, thành âm đạo ngựa cái co bóp mạnh, cổ tử cung mềm, được mở ra hoàn toàn khi động dục nên tinh dịch của ngựa đực được phóng nhanh vào tử cung.  Lợn: Âm đạo lợn ngắn, cổ tử cung lợn cái tròn không có nếp gấp nhiều lần hoa nở như trâu, bò, ranh giới giữa cổ tử cung và âm đạo không rõ ràng. Cổ tử cung mở ra hoàn toàn trong quá trình động dục, dương vật của lợn đực có hình xoắn ốc và đưa sâu vào trong đường sinh dục lợn cái, số lượng tinh dịch phóng ra một lần của lợn đực nhiều, nên tinh dịch của lợn đực vào tử cung lợn cái trong quá trình giao phối.  Chó: Trong quá trình giao phối, bộ phận hải niệu quy đầu của chó đực và tiền đình của chó cái mở to giữ chặt lấy nhau nên tinh dịch của chó đực vào tử cung chó cái 2.1.2. Bắn tinh âm đạo Trâu, bò, dê, cừu là loại gia súc bắn tinh âm đạo do quá trình giao phối của các loài này ngắn, số lượng tinh dịch ít. Niêm mạc cổ tử cung của gia súc cái 4 nhiều nếp gấp, nên cổ tử cung không mở hoàn toàn trong quá trình động dục, chỉ mở hoàn toàn khi tính dục và tính hưng phấn cao độ. Nếu gia súc đực phóng tinh chưa đúng thời kỳ động dục cao độ của gia súc cái thì tinh dịch nằm ở ngoài âm đạo. 2.2. Đặc tính tinh trùng Tinh trùng có đặc tính lội ngược dòng do có đuôi dài và vận động tiến thẳng. Tinh trùng có xu hướng đi về đầu mút ống dẫn trứng do niêm dịch được tiết ra từ ống dẫn trứng đến mút sừng tử cung, sự nhu động, co bóp của ống dẫn trứng giúp cho tinh trùng tiến sâu vào ống dẫn trứng. Do pH của bộ phận sinh dục như tiền đình, âm đạo hơi mang tính toan ức chế hoạt động của tinh trùng, còn pH cổ tử cung, tử cung, ống dẫn trứng có tính kiềm nhẹ là môi trường thích hợp cho tinh trùng sống và vận động mạnh. 2.3. Sự co bóp của đường sinh dục gia súc cái Những cơn co bóp trong đường sinh dục gia súc cái trong thời gian động dục theo thứ tự từ ống dẫn trứng đến mút sừng tư cung, rồi thân tử cung và âm đạo. Sự co bóp đã đẩy tinh dịch vào bên trong cơ quan sinh dục cái được nhanh hơn. Tốc độ di chuyển của tinh trùng vào đường sinh dục gia súc cái là do cách bắn tinh, tính tích cực di chuyển của tinh trùng cùng với sự co bóp của cơ quan sinh dục con cái. Trong công tác TTNT cần nắm vững và chính xác thời gian dẫn tinh cụ thể, thời gian rụng trứng, thời gian duy trì mà trứng có thể thụ thai được, thời gian mà trứng đến 1/3 phía trên ống dẫn trứng để tiến hành thụ tinh cho kết quả cao nhất. 2.4. Nhung mao ở đường sinh dục gia súc cái Do đặc tính các nhung mao ở đường sinh dục con cái luôn luôn rung động để tế bào trứng chuyển động từ mút ống dẫn trứng đến mút sừng tử cung. Nếu tinh trùng di chuyển vào gặp tế bào trứng ở 1/3 phía trên ống dẫn trứng mà cả hai tế bào này đều có khả năng thụ tinh thì hợp tử sẽ được hình thành từ đây và chuyển dần xuống tử cung làm tổ. 3. SỰ DI CHUYỂN CỦA TRỨNG, TINH TRÙNG VÀ THỜI GIAN SỐNG CỦA TINH TRÙNG TRONG CƠ QUAN SINH DỤC CÁI 3.1. Sự di chuyển của trứng Sau khi trứng rụng khỏi buồng trứng thì sẽ được loa kèn hứng lấy, do loa kèn có nhiều tua, nhung mao và nếp nhăn. 5 Tế bào trứng di chuyển được trong ống dẫn trứng là nhờ sự co bóp trong đường sinh dục con cái theo thứ tự từ ống dẫn trứng về sừng tử cung xuống thân tử cung rồi âm đạo, nên dần dần trứng được chuyển xuống. Ngoài ra, còn nhờ sự rung động của các lông nhung biểu mô dày đặc ở vách ống dẫn trứng. Thời gian di chuyển của tế bào trứng đi hết ống dẫn trứng từ 1 – 4 ngày tùy từng loài gia súc: ngựa, bò: 4 ngày; lợn, cừu: 3 ngày. Tuy nhiên, tốc độ di chuyển của trứng trên cả ống dẫn trứng là không giống nhau, tốc độ di chuyển từ khi trứng rụng khỏi buồng trứng tới 1/3 phía trên ống dẫn trứng là nhanh nhất, vì sau khi trứng rụng, noãn bào tố chưa hoàn toàn bị tiêu mất, động dục chưa hoàn toàn kết thúc nên sự nhu động của ống dẫn trứng và lông nhung còn mạnh đẩy trứng đi nhanh sâu vào phía mút sừng tử cung. Thời gian trứng di chuyển đến 1/3 phía trên ống dẫn trứng: ngựa 10 giờ, bò 20 giờ, lợn 8-12 giờ, cừu 5 giờ, thỏ 6 giờ. Thời gian trứng còn khả năng thụ tinh là rất ngắn, tinh trùng phải gặp trứng ở 1/3 phía trên ống dẫn trứng thì mới xảy ra quá trình thụ tinh, nếu trứng đi qua vị trí đó thì không còn khả năng thụ tinh nữa, ta gọi là tế bào trứng ung do trứng được bao bọc bên ngoài bởi một lớp protein do ống dẫn trứng tiết ra do vậy tinh trùng không thể phá vỡ được lớp protein này mà đi vào trứng được. 3.2. Sự di chuyển của tinh trùng Trong quá trình giao phối tự nhiên hay TTNT thì tinh trùng đều được đưa vào đường sinh dục con cái, nó phải di chuyển trong đường sinh dục con cái lên đến vị trí thụ tinh – 1/3 phía trên ống dẫn trứng. Khả năng di chuyển của tinh trùng trong đường sinh dục con cái ngoài dựa vào khả năng tự vận động của nó thì còn nhờ vào các dịch nhầy và nhu động co bóp của các bộ phận trong đường sinh dục con cái. Tốc độ di chuyển của tinh trùng trung bình 12 – 16 mm/phút. Bò và dê sau khi giao phối 4 - 6 giờ, lợn 1,5 - 3 giờ, ngựa 30 – 60 phút tinh trùng lên tới ống dẫn trứng. Khi tính dục, tính hưng phấn cao độ thì dịch nhầy, cũng như nhu động co bóp của bộ phận sinh dục con cái là cao nhất, do đó tốc độ di chuyển của tinh trùng là nhanh nhất. Vì vậy, tinh trùng sau giao phối 1 – 2 giờ đã có thể lên tới ống dẫn trứng, còn khi con cái mới biểu hiện tính dục thì phải sau giao phối 12 – 16 giờ thì tinh trùng mới tới được ống dẫn trứng. 6 3.3. Thời gian sống của tinh trùng trong đường sinh dục gia súc cái Sự sống của tinh trùng trong đường sinh dục con cái rất có ý nghĩa trong thụ tinh vì nó đảm bảo đủ số lượng tinh trùng tham gia vào quá trình thụ tinh. Thời gian sống của tinh trùng trong đường sinh dục con cái không phải là cố định mà có thể thay đổi, trong điều kiện bình thường thời gian đó từ 6 – 48 giờ, tuy nhiên nó chịu ảnh hưởng bởi một số yếu tố sau: - Vị trí mà tinh trùng được đưa vào đường sinh dục con cái là ở chỗ nào: âm đạo hay tử cung. - Trạng thái sinh lý hay bệnh lý của các bộ phận trong đường sinh dục con cái và biểu hiện của cơ thể trong quá trình giao phối. - Chất lượng tinh trùng. Ở âm đạo do chất tiết của màng nhầy trong niêm mạc âm đạo có độ pH mang tính axit nên làm cho tinh trùng chóng chết. Tinh trùng sống trong âm đạo ngựa 4 – 4,5 giờ; âm đạo bò, dê từ 1 – 6 giờ. Ở cổ tử cung, niêm dịch của màng nhầy tiết ra có pH mang tính axit yếu, nên tinh trùng có thể sống ở đây lâu nhất: cổ tử cung bò là 30 giờ, cừu 48 giờ. Trong tử cung và ống dẫn trứng, tinh trùng cũng sống được lâu: trong tử cung ngựa 24 – 48 giờ, lợn 30 giờ. Trong các loài phóng tinh âm đạo thì đa số tinh trùng bị chết ở âm đạo, chỉ 1/30 – 1/20 vào được tử cung. Chất lượng tinh trùng kém thì thời gian sống của tinh trùng trong đường sinh dục con cái ngắn. C. KỸ THUẬT THỤ TINH NHÂN TẠO GIA SÚC 1. CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA KỸ THUẬT TTNT GS 1.1. Học thuyết thụ tinh Về mặt sinh học thì sinh sản của động vật là kết quả của sự gặp gỡ đặc biệt (giao phối) giữa hai cá thể khác giới (đực, cái) đã thành thục về tính ở thời điểm thích hợp (con cái động dục). Tuy nhiên, qua nghiên cứu cho thấy đây chỉ là hình thức, thực chất quá trình sinh sản của động vật là sự đồng hóa rất phức tạp giữa tế bào sinh dục đực 7 (tinh trùng) và tế bào sinh dục cái (trứng) trong vòi Fallop của bộ máy sinh dục cái. Để đạt được kết quả thụ tinh, điều cần thiết và phải có là các tế bào sinh dục đực và cái đã thành thục đang còn khả năng thụ tinh gặp nhau, đồng hóa nhau trong điều kiện thích hợp. Kỹ thuật TTNT có thể thỏa mãn được điều này. Ở thụ tinh in vivo, người ta đưa tinh trùng của con đực vào thân tử cung con cái với dụng cụ thích hợp, trong thời gian thích hợp với kỹ thuật thích hợp, tinh trùng chắc chắn sẽ nhanh chóng đến thụ tinh với trứng. Trong kỹ thuật in vitro, tinh trùng và trứng đã thành thục, qua xử lý “khả năng hóa”, chúng sẽ thụ tinh với nhau trong điều kiện thích hợp và hợp tử mới được tạo thành được phát triển trong tủ nuôi tế bào. Như vậy, để đạt được sự thụ tinh không nhất thiết phải cho con đực và con cái “gặp nhau đặc biệt”. 1.2. Học thuyết thần kinh Các tế bào sinh dục thu được trong kỹ thuật TTNT là kết quả của các biện pháp “kỹ thuật nhân tạo”. Tuy nhiên, đó vẫn là những sản phẩm của phản xạ sinh dục. Học thuyết Pap - lốp chỉ ra rằng: Mọi hoạt động sống của động vật là hoạt động phản xạ. Có hai loại phản xạ: phản xạ không điều kiện và phản xạ có điều kiện. Phản xạ có điều kiện là phản xạ được thành lập từ phản xạ không điều kiện. Tinh dịch thu được trong TTNT tuy không phải là kết quả của sự giao phối tự nhiên nhưng phản xạ nhẩy giá của đực giống là phản xạ có điều kiện mà con người đã thành lập cho con đực trên cơ sở phản xạ sinh dục tự nhiên của nó. Do vậy, tinh dịch thu được là tinh dịch thật, có chất lượng tốt, có khả năng thụ thai cao như phản xạ sinh dục tự nhiên. 1.3. Học thuyết di truyền Trong quá trình TTNT chịu tác động rất nhiều của các yếu tố vật lý, hóa học. Các yếu tố vật lý, hóa học ảnh hưởng sâu sắc đến sức sống của tinh trùng bên ngoài cơ thể, trong điều kiện các yếu tố đó không thích hợp có ảnh hưởng xấu, thậm chí làm chết tinh trùng. Trên cơ sở nghiên cứu nghiêm túc và sâu sắc 8 sinh lý – hóa sinh tinh trùng mà các nhà khoa học đã chỉ được ra các yếu tố lý – hóa có hại, đồng thời họ còn tạo được ra những môi trường mà trong đó có các yếu tố lý – hóa thích hợp cho tinh trùng sống lâu dài ở ngoài cơ thể. Mặt khác, sự di truyền các đặc điểm của thế hệ trước cho thế hệ sau về bản chất là được quy đinh trên các gen (ADN) nằm trên nhiễm sắc thể trong nhân tế bào sinh dục. Chỉ có những tinh trùng sống và hơn nữa rất khỏe mới có khả năng thụ tinh với trứng. Tinh trùng vẫn được giữ nguyên về cấu trúc, nghĩa là cấu trúc ADN vẫn được ổn định. Như vậy sự di truyền các đặc điểm đời trước cho đời sau thông qua tinh trùng trong kỹ thuật TTNT vẫn được ổn định. Do đó, sức sống đời sau không bị ảnh hưởng. 2. LỢI ÍCH KINH TẾ, KỸ THUẬT CỦA CÔNG TÁC TTNT 2.1. Với công tác giống - Tạo điều kiện thuận lợi cho việc truyền giống, lai tạo giống. - Giảm nhẹ chi phí do việc nhập nội đực giống tốt vì đã có thể nhập tinh dịch của đực giống tốt để cải tạo đàn giống địa phương. - Nâng cao hiệu quả sinh sản của đực giống, ở lợn có thể tăng 30-50 lần, ở bò có thể tăng hàng trăm lần. - Thành lập được ngân hàng tinh dịch, nhằm bảo quản lâu dài tinh dịch để có thể trao đổi, vận chuyển dễ dàng tạo điều mở rộng không gian của việc cải tạo giống nhanh chóng. - Đánh giá nhanh phẩm chất đực giống. 2.2. Hiệu quả kinh tế - Giảm số lượng đực giống cần nuôi từ đó tiết kiệm thức ăn, chuồng trại, công lao động, tăng năng suất lao động, hạ giá thành sản phẩm. - Nâng cao phẩm chất đời sau một cách nhanh nhất, do đó góp phần làm tăng nhanh sản phẩm cho xã hội. - Tinh dịch được kiểm tra một cách chặt chẽ nên đảm bảo tỷ lệ sinh sản của đàn nái. 2.3. Về công tác thú y việc dùng dụng cụ chuyên dụng được kiểm tra chặt chẽ nên tránh được sự lây lan của bệnh truyền nhiễm, ký sinh trùng thông qua đường sinh dục. 2.4. Những hạn chế của kỹ thuật thụ tinh nhân tạo - Do làm giảm số lượng đục giống từ đó làm đơn điệu hóa sự biến dị di truyền của đời sau. Những khiếm khuyết cuẩ đục giống về di truyền nhanh chóng lan rộng trong thực tiễn sản xuất. do đo, việc chọn lọc đực giống cũng như quy trình chăm 9 sóc, nuôi dưỡng, khai thác, quản lý, sử dụng đực giống cần phải làm hết sức nghiêm túc và chặt chẽ. - Trang thiết bị và vốn ban đầu đòi hỏi cao hơn, tốn kém hơn. - Thụ tinh nhân tạo sẽ là con dao 2 lưỡi nếu như công tác thú y kém. 3. KỸ THUẬT LẤY TINH GIA SÚC 3.1. Các yêu cầu cơ bản - Lấy được toàn bộ tinh dịch với phẩm chất tốt nhất, thuần khiết nhất. - Phương pháp lấy tinh an toàn, không gây nguy hiểm cho người lấy tinh, cho gia súc được lấy tinh. - Trang thiết bị đơn giản, kỹ thuật không quá phức tạp, dễ áp dụng trong sản xuất. 3.2. Khái quát các phương pháp lấy tinh 3.2.1. Phương pháp hải miên Dùng bông sạch, vật mềm đặt vào âm đạo con cái đang động dục. Sau đó, cho đực nhẩy rồi lấy vật đặt ra, vắt nhẹ sẽ thu được tinh dịch. 3.2.2. Phương pháp âm đạo Cho con đực giao phối với con cái như bình thường. Ngay sau đó, dùng dụng cụ chuyên dùng hút tinh dịch từ âm đạo của con cái. 3.2.3. Phương pháp dùng túi Dùng túi được chế từ bong bóng lợn hoặc cao su mềm bao lấy dương vật con đực. Cho con đực giao phối với con cái, sau đó thu toàn bộ tinh dịch từ túi hứng tinh. 3.2.4. Phương pháp cơ giới (Massage) Dùng tay xoa bóp nhẹ vào vùng tuyến tinh nang (bò đực), quy đầu (lợn đực), vùng quanh huyệt sinh dục (gia cầm, cá)…có thể thu được tinh dịch. Phương pháp này ngày nay được ứng dụng rất phổ biến trên lợn, gia cầm, cá,…vì thiết bị đơn giản, thao tác dễ dàng, có thể lấy tinh phân đoạn, chủ động bỏ đi những phần tinh dịch kém phẩm chất. 3.2.5. Phương pháp dùng điện 10 [...]... keo lơ lửng và tinh thanh Độ vẩn đục thể hiện nồng độ tinh trùng và sức hoạt động của tinh trùng trong tinh dịch Tinh trùng luôn luôn vận động đã kéo theo sự chuyển động của các hạt hữu cơ trong tinh thanh tạo thành hiện tượng vẩn đục như vẩn mây, độ vẩn có quan hệ với nồng độ tinh trùng trong tinh dịch Độ vẩn thường chỉ quan sát được ở tinh dịch của gia súc có lượng tinh nhiều như tinh dịch ngựa,... - Những tinh trùng sống: không bắt màu - Đếm tổng số 300-500 tinh trùng để tính ra tỷ lệ % tinh trùng chết Tinh trùng có chất lượng tốt khi tỷ lệ tinh trùng chết dưới 10%, nếu tỷ lệ tinh trùng chết trên 20% thì bỏ toàn bộ tinh dịch 7.2.2.3 Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình (K) Tinh trùng kỳ hình là tinh trùng có hình thái không bình thường (unnormal) ở đầu, cổ, thân, đuôi Chúng không có khả năng thụ tinh Phương... tròn, lắc lư Chỉ tinh trùng vận động tiến thẳng mới có khả năng tham gia vào quá trình thụ tinh Kiểm tra hoạt lực tinh trùng thông qua ước lượng tỷ lệ % tinh trùng tiến thẳng hoặc mức độ “sóng động” của mặt thoáng vi trường tinh dịch do sức hoạt động của tinh trùng tạo nên Dùng kính hiển vi với độ phóng đại 150-300 lần, ước lượng tỷ lệ % tinh trùng tiến thẳng Cụ thể: - Khi ước lượng 100% tinh trùng tiến... 7.2.2.1 Nồng độ (C) Nồng độ tinh trùng cho thấy số lượng tinh trùng trong một đơn vị thể tích tinh dịch Nồng độ tinh trùng là chỉ tiêu quan trọng đánh giá chất lượng tinh dịch, là chỉ tiêu cơ sở để tính số liều tinh trong sản xuất 24 Do vậy, ở các cơ sở sản xuất tinh dịch công nghiệp (tinh đông lạnh) thì C lại là chỉ tiêu kiểm tra thường xuyên Có nhiều phương pháp xác định nồng độ tinh trùng C:  Phương... dịch lợn, do trong tinh dịch có nhiều hạt keo nên phải lọc qua 4 – 6 lớp vải màn tiêu độc rồi mới định lượng tinh lọc 7.2.1.2 Màu sắc Bình thường tinh dịch gia súc có màu sắc nhất định Màu sắc tinh dịch phụ thuộc vào giống loài động vật, nồng độ tinh trùng, tạp chất có trong tinh dịch - Tinh dịch lợn: trắng sữa, trắng nước cơm Tinh dịch bò: trắng sữa, vàng ngà Tinh dịch trâu: trắng sữa Tinh dịch dê, cừu:... tinh dịch do 1 số hợp chất trong tinh dịch quyết định Mùi của tinh dịch thường là mùi tanh, gây nếu có mùi thối, khai thì phải loại bỏ 7.2.1.5 Độ pH pH tinh dịch biểu thị nồng độ ion H+ có trong tinh dịch, pH tinh dịch có quan hệ tới sức sống và khả năng thụ thai của tinh trùng, vì pH có quan hệ tới quá trình trao đổi chất của tinh trùng thông qua hệ thống enzyme pH tinh dịch là pH trung bình của dịch... ống hút để trộn đều tinh dịch và dịch pha loãng Bỏ 2 – 3 giọt đầu, nạp tinh dịch đã pha loãng vào buồng đếm Lau khô phần tinh dịch trào ra ngoài buồng đếm - Đặt buồng đếm lên khay kính hiển vi với độ phóng đại 200 – 300 lần 25 - Đếm tinh trùng: đếm tinh trùng trong 5 ô vuông lớn Đếm tinh trùng cần tuần tự; đếm theo đầu tinh trùng, đếm tất cả những tinh trùng có trong ô đếm và những tinh trùng có ở vạch... tiêu kiểm tra tinh dịch cho thấy số lượng, chất lượng của tinh dịch và khả năng thụ thai của tinh trùng Các chỉ tiêu kiểm tra gồm có: chỉ tiêu kiểm tra thường xuyên và chỉ tiêu kiểm tra định kỳ 7.2.1 Chỉ tiêu kiểm tra thường xuyên: 7.2.1.1 Lượng tinh (V) Lượng tinh là thể tích tinh dịch của mỗi lần gia súc xuất tinh Dùng các dụng cụ đo thể tích: ống đong, cốc đong, bình đong, để xác định Với tinh dịch... tiến thẳng Khi ước lượng 80% tinh trùng tiến thẳng Khi ước lượng 10% tinh trùng tiến thẳng Khi thấy tinh trùng chỉ còn lắc lư Khi thấy tinh trùng đã chết hết A = 1 A=0.8 A=0.1 L (A=0) H 23 Ở tinh dịch trâu, bò, dê, cừu, vì nồng độ tinh trùng quá lớn, người ta không thể ước lượng được tỷ lệ % tinh trùng tiến thẳng Do đó, người ta đánh giá A bằng mức độ sóng động của mặt thoáng tinh dịch trong vi trường... dùng các ngón tay tác động nhẹ vào quy đầu - Lợn đực sẽ xuất tinh theo từng đợt: • 1 – 1,5 phút đầu lợn xuất keo và tinh loãng Lượng tinh dịch này nên bỏ đi • 2 – 3 phút sau thì tinh dịch đặc, hứng lấy cho tinh dịch chảy theo thành bình • 3 – 4 phút sau đó, lợn xuất tinh loãng dần Lượng tinh dịch này cũng nên bỏ đi - Thấy dấu hiệu lợn đực xuất tinh xong thì nới lỏng ngón tay, lợn tự động thu dương vật . thuật. 1.1.2. Hình thức thụ tinh nhân tạo (TTNT) Thụ tinh nhân tạo là hình thức dùng tinh dịch của con đực đã pha loãng bơm vào đường sinh dục con cái để tinh trùng kết hợp với trứng tạo thành hợp tử. Người. bố mẹ. Có hai hình thức thụ tinh: 1.1.1. Hình thức giao phối tự nhiên (thụ tinh trực tiếp) Thụ tinh trực tiếp là quá trình giao phối giữa gia súc đực và gia súc cái, tinh dịch của con đực đi. còn khả năng thụ tinh là rất ngắn, tinh trùng phải gặp trứng ở 1/3 phía trên ống dẫn trứng thì mới xảy ra quá trình thụ tinh, nếu trứng đi qua vị trí đó thì không còn khả năng thụ tinh nữa, ta