Tiểu luận NHÂN GIỐNG LAN VANDA

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KỸ THUẬT CÔNG NGHỆ TP.HCM KHOA MÔI TRƯỜNG VÀ CÔNG NGHỆ SINH HỌC      LỚP 08DSH4 MÔN: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ CƯƠNG: 1      GIÁO VIÊN HD: Ts. Nguyễn Hoài Hương 2 TÊN ĐỀ TÀI: NHÂN GIỐNG LAN VANDA GVHD: Ts.Nguyễn Hoài Hương Nhóm thực hiện:  Nguyễn Thị Như Yến (MSSV: 0851110308)  Lê Nguyễn Nhật Thanh (MSSV: 0851110226)  Nguyễn Thị Thanh Trang (MSSV: 0851110262)  Cao Tuấn Vũ (MSSV: 0851110303)  Lê Hoàng Thúy Oanh (MSSV: 0851110168)  MỤC LỤC PHẦN I: PHẦN MỞ ĐẦU 1. ĐẶT VẤN ĐỀ. 1.1. Lĩnh vực nghiên cứu 1.2. Vấn đề nghiên cứu 3 1.3. Giải pháp 1.3.1. Mục đích nghiên cứu 1.3.2. Mục tiêu nghiên cứu PHẦN II: TỒNG QUAN TÀI LIỆU 2.1. TỔNG QUAN VỀ LAN VANDA 2.1.1. Nguồn gốc, xuất xứ 2.2. TỔNG QUAN VỀ PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY LAN TRONG ỐNG NGHIỆM 2.2.1. Giới thiệu 2.2.2. Lịch sử nghiên cứu 2.3. TỒNG QUAN VỂ CÁC NGHIÊN CỨU VỀ CÁC ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY LAN TRONG ỐNG NGHIỆM PHẦN III. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1. VẬT LIỆU 4 3.2. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 3.3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.3.1. Mô tả thí nghiệm 3.3.1.1. Thí nghiệm tối ưu hóa môi trường VW 3.3.1.2 Thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng cùa dịch chiết chuối và dịch chiết khoai tây trong môi trường VW trong nuôi cấy lan Vanda coerulea 3.3.1.3. Thí nghiệm tối ưu hóa cường độ ánh sáng 3.3.2. Bố trí thí nghiệm 3.4. CÁC CHỈ TIÊU THEO DÕI, ĐÁNH GIÁ 3.4.1. Các chỉ tiêu 3.4.2. Thông số chỉ tiêu khảo sát 3.5. XỬ LÝ SỐ LIỆU PHẦN IV: DỰ KIẾN KẾT QUẢ PHẦN V: KẾ HOẠCH THỰC HIỆN 5 PHẦN VI: DỰ TRÙ KINH PHÍ TÀI LIỆU THAM KHẢO PHẦN I: PHẦN MỞ ĐẦU 1. ĐẶT VẤN ĐỀ: 1.1. Lĩnh vực nghiên cứu: - Thị trường tiêu thụ hoa phong lan là đầy tiềm năng trong hoàn cảnh nước ta.Việc sản xuất phong lan đã đem lại một nguồn thu nhập khá cao cho các nhà nông.Trong đó, lan Vanda là một loại lan rừng quý hiếm và được người tiêu dùng ưa thích. - Vì vậy, việc tìm ra một phương pháp để có thể sản xuất lan Vanda trên qui mô công nghiệp là điều rất quan trọng đối với các nhà vườn. - So với phương pháp tách chiết thông thường tốc độ phát triển 1 cây/năm thì phương pháp cấy mô sẽ sản xuất một số lượng cây con gần như không tưởng khoảng 4 triệu cây/năm. Phương pháp cấy mô 6 là phương pháp duy nhất hiện nay có thể nhân giống lan trên qui mô công nghiệp - Do đó, muốn sản xuất hoa lan Vanda một cách nhanh chóng và với số lượng lớn thì phải áp dụng phương pháp nuôi cấy mô thực vật trong ống nghiệm và là vấn đề rất được quan tâm cùa các nhà nghiên cứu về nuôi cấy mô thực vật hiện nay. 1.2. Vấn đề nghiên cứu: - Nhiều tác giả dùng các môi trường Vacin và Went, Mu rashige và Skoog, Heller rất tốt cho các loài lan thuộc nhóm đơn thân. - Quá trình lai tạo, nuôi trồng cho ra hoa đối với họ lan là khá dài (tùy theo chủng loài có thể trên dưới 120 tháng). Chúng ta cần chọn môi trường nuôi cấy tối ưu nhất để rút ngắn quá trình sinh trưởng của cây trong ống nghiệm đồng thời cung cấp đầy đủ các chất dinh dưỡng cần thiết để cây phát triển khỏe mạnh. - Cùng được nuôi cấy trong một môi trường dinh dưỡng nhưng với những điều kiện nuôi cấy khác nhau về cường độ ánh sáng,độ pH,nhiệt độ đã cho những sự tăng trưởng rất khác nhau ở các mô cấy. 7 - Vậy việc chọn môi trường dinh dưỡng với những điều kiện nuôi cấy tối ưu để nhân giống lan Vanda là điều đặc biệt rất quan trọng với các nhà sản xuất lan. 1.3. Giải pháp: 1.3.1. Mục đích nghiên cứu: +Áp dụng kỹ thuật nuôi cấy mô thực vật, tiến hành các thí nghiệm để tìm ra điều kiện nuôi cấy tối ưu nhất nhằm nhân giống lan Vanda. 1.3.2. Mục tiêu: + Tối ưu hóa môi trường nuôi cấy mô lan Vanda. + Tối ưu hóa điều kiện nuôi cấy mô lan Vanda. PHẦN II : TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1. TỔNG QUAN VỀ LAN VANDA 2.1.1. Nguồn gốc, xuất xứ: - Vanda là một loại phong lan (epiphyte) thân đơn, lá cứng và xòe sang hai bên. Lá cây chia làm 3 loại: Dẹp (strap leave), lá tròn và cứng (teres), hoặc pha giữa hai loại kể trên (semi teres). 8 - Trong số những loại lan cảnh phổ biến hiện nay, Vanda là một loại lan rất đẹp và quý hiếm.Vanda là một loại lan gồm chừng 60 giống, mọc ở miền Nam Á châu từ Ấn độ, Miến điện Thái lan, Việt Nam, Mã lai, Nam dương, Phi luật tân v.v… 2.2. TỔNG QUAN VỀ PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY LAN TRONG ỐNG NGHIỆM: 2.2.1. Giới thiệu: - Phương pháp cấy mô là phương pháp duy nhất hiện nay có thể nhân giống lan trên qui mô công nghiệp, các cây lan con được sản xuất hoàn toàn giống nhau từ một cây bố mẹ giống tốt được lai tạo và được xem là có giá trị sau lần trổ hoa đầu tiên. - So với phương pháp tách chiết thông thường tốc độ phát triển 1 cây/năm thì phương pháp cấy mô sẽ sản xuất một số lượng cây con gần như không tưởng khoảng 4 triệu cây/năm. - Phương pháp cấy mô có nhiều ưu điểm : + Đây là phương pháp nhân giống vô tính vì thế nó đảm bảo hoàn toàn đặc tính của cây cha mẹ. 9 + Nhờ nuôi cấy mô có thể sán xuất nhanh lượng phong lan lớn trên quy mô công nghiệp. + Cây con không bị nhiễm bệnh, là công cụ hữu hiệu để tạo ra nguồn phong lan sạch bệnh + Mầm để cấy lúc nào cũng có sẵn không mất thời gian chờ đợi trái chín như cây gieo hạt. - Tuy nhiên, việc cấy mô phải được thực hiện với một qui trình thật nghiêm túc và tỉ mỉ, điều kiện về trang thiết bị đầy đủ và mô chỉ phát triển trên một môi trường hoàn toàn nhân tạo và vô trùng. 2.2.2. Lịch sử nghiên cứu: + Knudson(1922, 1924, 1946) nghiên cứu thành công nuôi cấy hạt giống địa lan trong ống nghiệm đã cho nảy mầm thành cây con. + 1966 Hey và Hey sử dụng kỹ thuật nuôi cấy trong ống nghiệm để nhân nhanh các giống lan và đem trồng trong vườn ươm. Theo đó là các nghiên cứu thành công khác trên nhiều loại lan khác nhau (Withner 1943,1955, Vacin và Went 1949, Poddubnaya-Arnoldi 1959, Israel 1963, Valmayor và Sagawa 1967, 1974 Valmayor, 10 [...]... VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 VẬT LIỆU - Trái lan của Vanda coerulea (là một loài lan rừng sống bám trên thân cây to,đơn thân,có mức tăng trưởng chậm,do đó con số của nó trong thiên nhiên đang giảm) - Trái lan của Vanda terres (Roxb.) Lindl.(một loại lan đơn thân, thân tròn) được thu từ các cây trưởng thành phát triển tự nhiên trên cây trong rừng - Trái lan phải vừa mới chín vàng, chưa bị nứt - Hóa... Petri vô trùng 3.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU: + Tối ưu hóa môi trường Vanci và Went (VW) trong nuôi cấy lan Vanda coerulea + Đánh giá ảnh hưởng cùa dịch chiết khoai tây, dịch chiết chuối nghiền trong môi trường Vanci và Went trong nuôi cấy lan Vanda coerulea + Tối ưu hóa cường độ ánh sáng trong nuôi cấy lan Vanda teres 3.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.3.1 Mô tả thí nghiệm: 15 - Môi trường VW chuẩn với thành... 5000lux 3.3.2 Bố trí thí nghiệm: - TN1: Thí nghiệm tối ưu hóa môi trường VW trong nuôi cấy lan Vanda coerulea - TN2: Thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng cùa dịch chiết chuối và dịch chiết khoai tây trong môi trường VW trong nuôi cấy lan Vanda coerulea - TN3: Thí nghiệm tối ưu hóa cường độ ánh sáng đối với nuôi cấy lan Vanda Teres 3.4 CÁC CHỈ TIÊU THEO DÕI, ĐÁNH GIÁ 3.4.1 Các chỉ tiêu: - TN1: Đánh giá ảnh hưởng... sucrose 2% đến sự nảy mầm và tốc độ phát triển của hạt giống lan Vanda coerulea Các chỉ tiêu khảo sát gồm: + Hiệu quả nảy mầm,hiệu quả chồi 19 + Thời gian hạt nảy mầm và thời gian hình thành chồi - TN2: Đánh giá ảnh hưởng của dịch chiết chuối nghiền và dịch chiết khoai tây được thêm vào môi trường VW với các nồng độ khác nhau đến sự tăng trưởng của chồi lan Vanda coerulea Dữ liệu được lấy sau 60 ngày kể từ... PHẦN IV: DỰ KIẾN KẾT QUẢ - Tìm ra được các điều kiện tối ưu:môi trường tối ưu và cường độ chiếu sáng tối ưu để nuôi cấy mô phong lan Vanda trong điều kiện vô trùng - Dự đoán cường độ chiếu sáng tối ưu trong khoảng 3000- 4000 lux - Với những điều kiện tối ưu này, hạt giống lan Vanda sẽ có tỉ lệ nẩy mầm cao, cây phát triển tốt, nhanh chóng,rút ngắn thời gian được phát triển của cây.Cây sinh trưởng tốt và... 1998, Das Gupta và Barda 1998) 2.3 TỒNG QUAN VỂ CÁC NGHIÊN CỨU VỀ CÁC ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY LAN TRONG ỐNG NGHIỆM + Mặc dù yêu cầu đối với hạt giống sự nảy mầm của các loài lan khác nhau là khác nhau (Arditti năm 1967 và Hoque cùng cộng sự 1994), nhưng môi trường VW và KC được xem là tốt cho sự nảy mầm của hầu hết các phong lan (Goh 1990) Tuy nhiên, nhiều nhà nghiên cứu, đã thay đổi thành phần môi trường gốc... Xử lý số liệu thô Kết luận Làm báo cáo PHẦN VI: DỰ TRÙ KINH PHÍ - Mua hóa chất : 4.000.000 - Mua dụng cụ thí nghiệm : 2.000.000 - Thuê phòng thí nghiệm, dụng cụ : 1.000.000 - In tài liệu : 100.000 TỔNG CỘNG: 7.100.000 TÀI LIỆU THAM KHẢO 23 http://www.phonglanviet.com.vn/vn/expdetails.aspx?cat=3&id=13 http://www.phonglanviet.com.vn/vn/expdetails.aspx? cat=5&id=29 http://www.hoalanvietnam.org/Article.asp?ID=20... 3.3.1.1 Thí nghiệm tối ưu hóa môi trường VW: - Mỗi môi trường nuôi cấy lan Vanda coerulea được thí nghiệm lặp lại 3 lần, mỗi lần là 20 mẫu thử.Các thành phần kích thích tố BAP, Kn, IAA và NAA kết hợp với các nồng độ khác nhau trong môi trường VW với succharose 2% Điều kiện nhiệt độ,pH, cường độ chiếu sáng được thực hiện ở mức chuẩn đối với lan đơn thân.Cụ thể như sau: + Cho 2% than hoạt tính (AC) vào môi... IAA NAA Đơn vị mg/l mg/l mg/l mg/l Giá trị 0,5-2,0 0-1,0 0-0,5 0-0,5 3.3.1.2 Thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng cùa dịch chiết chuối và dịch chiết khoai tây trong môi trường VW trong nuôi cấy lan Vanda coerulea: - Hạt giống được cấy vào môi trường VW với các điều kiện ở mức chuẩn thêm sucrose 2%, dung dịch nước dừa 10%, sau 1 tháng nuôi cấy, thêm dịch chiết chuối và dịch chiết khoai tây vào môi trường VW... đổi tham số 17 STT Tham số 1 Hàm lượng dịch chiết chuối 2 Đơn vị g/l Giá trị 0-200 g/l 0-200 nghiền Hàm lượng dịch chiết khoai tây 3.3.1.3 Thí nghiệm tối ưu hóa cường độ ánh sáng: - Mỗi bình là 1 cây lan Vanda Teres con đã được nuôi cấy trong môi trường VW chuẩn và có lá dài 2cm,được thực hiện với thiết kế hoàn toàn ngẫu nhiên Các mẫu cây con được chiếu sáng liên tục 16h/8h ngày/đêmdưới ánh đèn huỳnh . nhằm nhân giống lan Vanda. 1.3.2. Mục tiêu: + Tối ưu hóa môi trường nuôi cấy mô lan Vanda. + Tối ưu hóa điều kiện nuôi cấy mô lan Vanda. PHẦN II : TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1. TỔNG QUAN VỀ LAN VANDA 2.1.1 Trong số những loại lan cảnh phổ biến hiện nay, Vanda là một loại lan rất đẹp và quý hiếm .Vanda là một loại lan gồm chừng 60 giống, mọc ở miền Nam Á châu từ Ấn độ, Miến điện Thái lan, Việt Nam,. LAN TRONG ỐNG NGHIỆM: 2.2.1. Giới thiệu: - Phương pháp cấy mô là phương pháp duy nhất hiện nay có thể nhân giống lan trên qui mô công nghiệp, các cây lan con được sản xuất hoàn toàn giống