DNA của HBV là một phân tử DNA dạng vòng có khoảng 3.200 nucleotide (3,2 kb). Đây là một chuỗi xoắn kép không hoàn toàn, gồm hai chuỗi đơn có chiều dài khác nhau: + Sợi dài (sợi L) nằm ngoài, có cực tính âm, tạo thành một vòng tròn liên tục chiều dài cố định là 3,2 kb. +Sợi ngắn (sợi S) nằm trong, có cực tính dương, chiều dài thay đổi từ 50100% chiều dài bộ gen. HBV có genenome chồng lớp gồm 4 khung đọc mở kí hiệu là S, C, P, X. Đây là các vùng mã hoá để tổng hợp các protein của virus
Trang 1GIỚI THIỆU VỀ HBV
• Virus viêm gan B là DNA virus, sợi đôi, có vỏ thuộc họ Hepadnaviridae
• Viêm gan virus được mô tả
đầu tiên vào thế kỷ thứ 5
Trang 2Tính chất của virus HBV
Khả năng gây bệnh và dịch tễ
Phòng bệnh
Chuẩn đoán khi mắc bệnh
Điều trị khi mắc virus HBV
NỘI DUNG
Trang 4Cấu trúc bộ gen HBV
Bộ gen HBV được cấu tạo từ DNA
vòng có khoảng 3200
nucleotide.DNA này gồm 2 chuỗi:
Sợi dài (sợi L) nằm ngoài, mã hóa
cho các thông tin di truyền virut
Sợi ngắn (sợi S) nằm trong cực
tính dương, bao gồm 4 gen (4
khung đọc mở) mã hóa cho các
polypeptide
Gen pre-S1,pre-S2,S
Gen pre-C,C
Gen X, P
Trang 5Protein bề mặt của HBV (HBsAg)
HBsAg gồm 3 loại protein:
Protein S (small) quy định
typ của virut HBV.
Protein M (medium) 281 aa,
có vai trò trong bám dính
vào tế bào gan.
Protein L (large) 400 aa,
đóng vai trò quan trọng
trong việc gắn vào thụ thể
và xâm nhập vào tế bào gan
Trang 6Các loại kháng nguyên của HBV
1 HbsAg (Hepatitis B surface
thanh sau khi nhiễm HBV
Trang 7Các loại kháng nguyên của HBV
2 HbcAg (Hepatitis B core Antigen)
huyết thanh người nhiễm HBV
3 HBeAg (Hepatitis B e Antigen)
Trang 8Quá trình xâm nhiễm và nhân
lên của HBV
Trang 9CON ĐƯỜNG LÂY NHIỄM
Trang 10KHẢ NĂNG GÂY BỆNH
Trang 11DỊCH TỄ HỌC
Trang 13PHÒNG BỆNH KHÔNG ĐẶC HIỆU
Trang 141 • Vắc xin thế hệ đầu tiên
Trang 15Phương pháp tạo vaccine tái tổ hợp
Trang 16• Được điều chế từ huyết tương người bệnh
• 10-18% protein (80% globulin) + dịch vô khuẩn
• Làm chậm sự phát triền của virus
• Thay đổi cải thiện tình trạng bệnh
• Mới bị nhiễm bệnh, trẻ sơ sinh nhiễm từ
mẹ, sau ghép gan
Ứng dụng
PHƯƠNG PHÁP THỤ ĐỘNG
SỬ DỤNG GLOBUMIN (HBIG)
Trang 17CHUẨN ĐOÁN
HBV
XÉT NGHIỆM HUYẾT THANH
HỌC
CÁC XÉT NGHIỆM CẦN THIẾT:
Kháng nguyên bề mặt viêm gan B (HbsAg) Kháng thể kháng kháng nguyên bề mặt viêm gan B (Anti- HBc, Anti-HBs)
XÉT NGHIỆM GIÚP CHUẨN ĐOÁN CHÍNH XÁC:
Xét nghiệm kháng nguyên E( HBeAg, anti-HBe) Các xét nghiệm gan
Xét nghiệm Alpha-fetoprotein (AFP) Sinh thiết gan
SINH HỌC PHÂN TỬ
real-time PCR ELISA
PP Sản xuất giống lai
Các phương pháp chuẩn đoán bệnh viêm gan B
Trang 181 XÉT NGHIỆM HUYẾT THANH HỌC
KẾT QUẢ XÉT NGHIỆM
HBsAg Anti-HBs Anti-HBc
+ - - Nhiễm HBV cấp giai đoạn sớm để khẳng định cần làm
thêm các xét nghiệm không đặc hiệu khác
+ +- + Nhiễm HBV cấp hoặc mãn Phân biệt nhờ IgM anti-HBc
Xác định mức độ nhiễm nhờ HBeAg hoặc HBV-DNA
- - + Nhiễm HBV trước đó và có tính miễn dịch với viêm gan B
Có các khả năng sau đây: nhiễm HBV đã lâu; người lành mang HBV “mức độ thấp”; giai đoạn “ cửa sổ” từ khi biến mất HBsAg cho đến khi xuất hiện anti-HBs; phản ứng dương giả hoặc không đặc hiệu đã chích ngừa vaccine HBsAg, anti-HBe(+) khẳng định giá trị phản ứng anti-HBc
- - - Do tác nhân gây nhiễm khác, chất độc cho gan, rối loạn
miễn dịch, bệnh gan di truyền hoặc bệnh đường mật
- + - Đáp ứng với vaccin
Trang 192 PHƯƠNG PHÁP TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ
Kỹ thuật real-time PCR định lượng chính xác HBV- DNA.
- Một cặp mồi được thiết kế trong vùng gene S của bộ gene HBV để nhân bản một trình tự mục tiêu có kích thước 118 cặp base, sử dụng mẫu
dò TaqMan đặc hiệu cho HBV
- Mỗi bản sao của trình tự mục tiêu được nhân bản sẽ tương ứng với một tín hiệu huỳnh quang.
Kết quả real-time PCR định lượng
HBV trên các nồng độ standard HBV, mẫu dương tính và mẫu
âm tính với HBV.
Đường trơn màu đen:
Standard HBV với các nồng độ
E2, E4, E6 và E8
Đường chấm vuông, màu đỏ:
mẫu huyết thanh dương tính
-
Trang 20
-Phác đồ điều trị viêm gan B mạn tính
1/Đối với bệnh nhân viêm gan virus B mạn tính có HBeAg dương tính và HBV - DNA cao (> 105 copies/ ml)
-Dùng đến khi chuyển đổi
huyết thanh HBeAg âm tính và
anti HBe dương tính, tiếp tục
duy trì thuốc tối thiểu 6 tháng
Trang 21Phác đồ điều trị viêm gan B mạn tính
2/Đối với bệnh nhân viêm gan virus B mạn tính có HBeAg âm tính:
HBV DNA giảm < 102 copie/ml,
thêm thuốc hoặc thay đổi thuốc
-Dùng đến khi nào mất HBsAg