Nghiên cứu sự hấp thụ Acid Salicylic, thỏ được gây bỏng thực nghiệm , sử dụng thuốc mỡ Acid Salicylic 40%
Bộ quốc phòng Bộ quốc phòng Học viện quân y Học viện quân y ********* ********* Hoàng việt dũng Hoàng việt dũng Nghiên cứu sự hấp thu acid salicylic Nghiên cứu sự hấp thu acid salicylic trên Thỏ được gây bỏng thực nghiệm trên Thỏ được gây bỏng thực nghiệm Có sử dụng thuốc mỡ acid salicylic 40% Có sử dụng thuốc mỡ acid salicylic 40% ( khoá luận tốt nghiệp dược sĩ đại học khoá 1999 - 2005) ( khoá luận tốt nghiệp dược sĩ đại học khoá 1999 - 2005) Cán bộ hướng dẫn: Cán bộ hướng dẫn: TS TS . . Nguyễn Thị Lộc. Nguyễn Thị Lộc. Nơi thực hiện: Bộ môn Dược Học Quân Sự. Nơi thực hiện: Bộ môn Dược Học Quân Sự. Bộ môn Sinh lý bệnh. Bộ môn Sinh lý bệnh. Thời gian thực hiện: 7 8/2005. Thời gian thực hiện: 7 8/2005. đặt vấn đề đặt vấn đề Acid salicylic là một trong những hoạt chất được người ta tìm ra Acid salicylic là một trong những hoạt chất được người ta tìm ra từ rất sớm. từ rất sớm. Acid salicylic gây kích ứng mạnh niêm mạc đường tiêu hoá và Acid salicylic gây kích ứng mạnh niêm mạc đường tiêu hoá và các mô. các mô. Trong chuyên khoa bỏng, người ta sử dụng chế phẩm thuốc mỡ Trong chuyên khoa bỏng, người ta sử dụng chế phẩm thuốc mỡ acid salicylic 40% để làm bong lớp da hoại tử khô. Tuy nhiên, bệnh acid salicylic 40% để làm bong lớp da hoại tử khô. Tuy nhiên, bệnh nhân sử dụng thuốc mỡ này có thể bị ngộ độc. nhân sử dụng thuốc mỡ này có thể bị ngộ độc. Vì thế, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Vì thế, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu sự hấp thu acid salicylic trên thỏ được gây bỏng Nghiên cứu sự hấp thu acid salicylic trên thỏ được gây bỏng thực nghiệm có sử dụng thuốc mỡ acid salicylic 40% . thực nghiệm có sử dụng thuốc mỡ acid salicylic 40% . nhằm mục tiêu: nhằm mục tiêu: 1. Nghiên cứu phương pháp định lượng acid salicylic trong huyết 1. Nghiên cứu phương pháp định lượng acid salicylic trong huyết thanh thỏ. thanh thỏ. 2. Nghiên cứu sự hấp thu acid salicylic trên thỏ được gây bỏng 2. Nghiên cứu sự hấp thu acid salicylic trên thỏ được gây bỏng thực nghiệm. thực nghiệm. Chương 1. Tổng quan tài liệu Chương 1. Tổng quan tài liệu 1.1. Các yếu tố ảnh hưởng đến sự hấp thu thuốc mỡ. 1.1. Các yếu tố ảnh hưởng đến sự hấp thu thuốc mỡ. a) Yếu tố sinh lý. a) Yếu tố sinh lý. - Loại da: da khô nghèo mỡ và nước; da trơn, nhờn. - Loại da: da khô nghèo mỡ và nước; da trơn, nhờn. - Lứa tuổi: khác nhau về bề dầy lớp sừng, diện tích da. - Lứa tuổi: khác nhau về bề dầy lớp sừng, diện tích da. - Tình trạng da: nguyên vẹn hoặc tổn thương. - Tình trạng da: nguyên vẹn hoặc tổn thương. - Nhiệt độ bề mặt da. - Nhiệt độ bề mặt da. - Mức độ hydrat hoá lớp sừng. - Mức độ hydrat hoá lớp sừng. b) Các yếu tố công thức, kỹ thuật. b) Các yếu tố công thức, kỹ thuật. - Dược chất: độ tan, hệ số phân bố, hệ số khuyếch tán, mức - Dược chất: độ tan, hệ số phân bố, hệ số khuyếch tán, mức độ ion hoá, nồng độ dược chất độ ion hoá, nồng độ dược chất - - T T á dược: tá dược ảnh hưởng đến quá trình hydrat hoá lớp á dược: tá dược ảnh hưởng đến quá trình hydrat hoá lớp sừng, nhiệt độ bề mặt da, độ bám dính thuốc trên da sừng, nhiệt độ bề mặt da, độ bám dính thuốc trên da - Chất làm tăng hấp thu: chất diện hoạt, alkyl methyl - Chất làm tăng hấp thu: chất diện hoạt, alkyl methyl sulfoxid . sulfoxid . - Kỹ thuật bào chế. - Kỹ thuật bào chế. 1.2/ Acid salicylic. 1.2/ Acid salicylic. - C«ng thøc ph©n tö: C - C«ng thøc ph©n tö: C 7 7 H H 6 6 O O 3 3 . . - C«ng thøc cÊu t¹o: - C«ng thøc cÊu t¹o: H×nh 1 H×nh 1 : C«ng thøc cÊu t¹o cña acid salicylic. : C«ng thøc cÊu t¹o cña acid salicylic. Tªn khoa häc: acid 2 - hydroxy benzoic. Tªn khoa häc: acid 2 - hydroxy benzoic. TLPT: 138,12. TLPT: 138,12. COOH OH 1.3/ Thuốc mỡ acid salicylic. 1.3/ Thuốc mỡ acid salicylic. a) Chỉ định: a) Chỉ định: Acid salicylic dùng tại chỗ dưới dạng đơn chất hoặc phối Acid salicylic dùng tại chỗ dưới dạng đơn chất hoặc phối hợp với thuốc khác để điều trị triệu chứng các trường hợp sau: hợp với thuốc khác để điều trị triệu chứng các trường hợp sau: + Các trường hợp bệnh da tróc vẩy. + Các trường hợp bệnh da tróc vẩy. + Loại bỏ các mụn cơm. + Loại bỏ các mụn cơm. + Chứng tăng sừng khu trú ở gan bàn tay hoặc bàn chân. + Chứng tăng sừng khu trú ở gan bàn tay hoặc bàn chân. + Loại bỏ da hoại tử trong chuyên khoa bỏng. + Loại bỏ da hoại tử trong chuyên khoa bỏng. b) Tác dụng không mong muốn. b) Tác dụng không mong muốn. Lú lẫn, chóng mặt, đau đầu, thở nhanh, ù tai, giãn mạch, toát Lú lẫn, chóng mặt, đau đầu, thở nhanh, ù tai, giãn mạch, toát mồ hôi. mồ hôi. 1.4/ Phương pháp định lượng. 1.4/ Phương pháp định lượng. a) Phương pháp trung hoà acid base. a) Phương pháp trung hoà acid base. b) Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). b) Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). c) Phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoại-khả kiến. c) Phương pháp quang phổ hấp thụ tử ngoại-khả kiến. - Nguyên tắc: - Nguyên tắc: Dựa trên cơ sở định luật Lambert Beer: A=D=E= Dựa trên cơ sở định luật Lambert Beer: A=D=E= k.C.l k.C.l ở ở khoảng nồng độ nhất định, mật độ quang tuyến tính khoảng nồng độ nhất định, mật độ quang tuyến tính bậc 1 với nồng độ acid salicylic. bậc 1 với nồng độ acid salicylic. Phần 2. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu Phần 2. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu 2.1/ Đối tượng nghiên cứu. 2.1/ Đối tượng nghiên cứu. - Huyết thanh thỏ. - Huyết thanh thỏ. - Thỏ trưởng thành khoẻ mạnh. - Thỏ trưởng thành khoẻ mạnh. 2.2/ Phương pháp nghiên cứu. 2.2/ Phương pháp nghiên cứu. 50 mg A.S chuẩn Bđm 100 ml dd 500 mcg/ml Bđm 50 ml dd 20 mcg/ml Ghi phổ ở 230-330 nm Xác định cực đại hấp thụ 2.2.1/ Khảo sát cực đại hấp thụ của acid salicylic trong CHCl 3 . Hoà tan / CHCl 3 Lấy cx 2ml + CHCl 3 vđ 2.2.2/ Xác định giá trị của acid salicylic trong CHCl 3 . 50 mg A.S chuẩn Bđm 100 ml dd 500 mcg/ml Bđm 50 ml được các dd 10, 20, 30, 40 mcg/ml Đo mật độ quang Hoà tan/CHCl 3 Lấy cx 1, 2, 3, 4 ml + CHCl 3 vđ 1% 1cm E Xây dựng đường chuẩn Xác định , 1cm 1% E 1cm 1% E [...]... quan giữa E và C là: E = 0,0051.C + 0,0019 2 Kết quả nghiên cứu sự hấp thu hoạt chất từ thuốc mỡ acid salicylic 40% trên thỏ được gây bỏng thực nghiệm như sau: - Acid salicylic hấp thu mạnh qua da thỏ được gây bỏng thực nghiệm - Acid salicylic trong máu thỏ đạt nồng độ đỉnh tại thời điểm 12 giờ sau khi bôi thuốc - ở pha thải trừ, acid salicylic được đào thải nhanh ra khỏi cơ thể ... độ trên HCl 1N (pH=2) 5 ml CHCl3 Lắc 20 Dịch chiết Na2SO4 khan Dịch trong Đo mật độ quang Xây dựng đường chuẩn 2.2.5/ Nghiên cứu sự hấp thu hoạt chất từ thuốc mỡ acid salicylic 40% trên thỏ được gây bỏng thực nghiệm Gây bỏng thực nghiệm cho 5 thỏ Bôi thuốc mỡ A.S 40% Lấy máu tại các thời điểm nghiên cứu Xử lý mẫu máu Đo mật độ quang Vẽ đồ thị Phần 3 Kết quả và bàn luận 3.1/ Khảo sát cực đại hấp thụ. .. 0,0051.C + 0,0019 E E = 0,0051.C + 0,0019 C(mcg/ml) Hình 5: Đồ thị biểu diễn sự tương quan giữa nồng độ acid salicylic trong huyết thanh thỏ và mật độ quang 3.5/ Nghiên cứu sự hấp thu hoạt chất từ thuốc mỡ acid salicylic 40% trên thỏ được gây bỏng thực nghiệm Bảng 4: Nồng độ acid salicylic trong máu thỏ tại các thời điểm nghiên cứu (n=5): t 4h 8h 12h 16h 20h 28h 1 2 0,2517 0,2405 0,3696 0,3738 0,4337... 5,37 7,19 4,49 Thỏ C(mcg/ml) : độ lệch chuẩn t(h) Hình 6: Sự biến đổi nồng độ acid salicylic trong máu thỏ theo thời gian Phần 4 Kết luận 1 Nghiên cứu phương pháp định lượng acid salicylic được kết quả sau: - Trong khoảng bước sóng 230 330 nm, có hai đỉnh cực đại hấp thụ ở 239,6 và 308,3 nm Chọn bước sóng 308 nm để khảo sát nghiên cứu - Giá trị E1% = 279 1cm - ở pH = 2, K và H của acid salicylic giữa... 26,47 44,77 66,54 E K pH Hình 3: ảnh hưởng của pH đến hệ số phân bố của acid salicylic giữa hai pha CHCl3 /H2O H pH Hình 4: ảnh hưởng của pH đến hiệu suất chiết acid salicylic giữa hai pha CHCl3 /H2O 3.4/ Xây dựng đường chuẩn định lượng acid salicylic trong huyết thanh thỏ bằng phương pháp QPHTTNKK Bảng 3:Tương quan giữa nồng độ acid salicylic và mật độ quang (n=5): C(mcg/ml) 30 45 60 75 1 0,1553 0,2260... Đo mật độ quang Vẽ đồ thị Phần 3 Kết quả và bàn luận 3.1/ Khảo sát cực đại hấp thụ của acid salicylic trong CHCl3 2.0 Abs 1.5 239.6 1.0 308.3 0.5 0.0 240.0 260.0 Quang Pho 280.0 300.0 320.0 340.0 Hình 1: Phổ của acid salicylic trong CHCl3 360.0 380.0 400.0 nm 1% acid salicylic trong CHCl3 E1cm 1% E1cm ệm của acid salicylic trong CHCl3 (n=5): C(mcg/ml) 10 20 30 40 1 0,2778 0,5569 0,8307 1,195 2 0,2803... 278,4 280,2 278,1 E 1% E1cm 279 r = 0,9994 ình biểu diễn sự tương quan giữa E và C như sau: E = 0,02786.C + 0,00030 E E = 0,02786.C + 0,00030 C(mcg/ml) Hình 2: Đồ thị biểu diễn sự tương quan giữa nồng độ acid salicylic trong CHCl3 và mật độ quang tại bước sóng 308 nm 3.3/ Nghiên cứu ảnh hưởng của pH đến hệ số phân bố và hiệu suất chiết của acid salicylic giữa hai pha CHCl3 / H2O Bảng 2: pH ảnh hưởng...ghiên cứu ảnh hưởng của pH đến hệ số phân bố suất chiết của acid salicylic giữa hai pha CHCl3 / H2O Pha các dd đệm có pH = 2 6 dd A.S 1000mcg/ml trong nước Cho vào bình nón + CHCl3 vđ 0,3 ml dd A.S 1000mcg/ml 9,7 ml dd đệm có pH = 2 6 10 ml CHCl3 Lắc 20 Dịch chiết Na2SO4 khan Dịch trong Đo mật độ quang Xác định K và H huẩn định lượng acid salicylic trong huyết pháp QPHTTNKK Huyết thanh thỏ dd A.S . dũng Nghiên cứu sự hấp thu acid salicylic Nghiên cứu sự hấp thu acid salicylic trên Thỏ được gây bỏng thực nghiệm trên Thỏ được gây bỏng thực nghiệm Có. 2. Nghiên cứu sự hấp thu acid salicylic trên thỏ được gây bỏng 2. Nghiên cứu sự hấp thu acid salicylic trên thỏ được gây bỏng thực nghiệm. thực nghiệm.