Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu, Trung tâm Ứng dụng Tiến bộ Khoa Học, Công Nghệ
Lời nói đầu Theo chương trình đào tạo trường Đại học An Giang sinh viên năm thứ ngành công nghệ sinh học, khoa Nông nghiệp – Tài nguyên thiên nhiên có chuyến thực tập sở Nhằm mục đích giúp sinh viên có thể hiểu rõ về những ứng dụng công nghệ sinh học đời sống thực tiễn, nắm vững số kiến thức học Đồng thời giúp cho sinh viên làm quen với mơi trường làm việc, để có thể thích nghi tốt với môi trường làm việc sau này Tôi thực tập sở tại Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa Học và Công Nghệ Thời gian thực tập từ 25/01/2010 – 28/02/2010 Được giúp đỡ và dạy tận tình anh chị phịng phân tích thí nghiệm giúp nắm vững thao tác kỹ thuật tạo meo giống nấm, hiểu rõ những lý thuyết học, học hỏi nhiều kinh nghiệm từ anh chị và nhiều kiến thức bổ ích khác Tôi xin chân thành cám ơn nhà trường, khoa, đặc biệt là thầy cô môn, giáo viên hướng dẫn, anh chị trung tâm tạo đủ điều kiện giúp hoàn thành chuyến thực tập sở thời gian qua Chương Giới thiệu chung 1.1 Giới thiệu Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa Học Công Nghệ Địa chỉ: 17 Lê Lai, phường Mỹ Bình, thành phố Long Xuyên, An Giang Điện thoại: (076) 954306 – 954304 Fax: (076) 954305 Trung tâm Ứng dụng và chuyển giao Khoa Học Công Nghệ tỉnh An Giang thành lập theo định số 5805/QĐ.UB.TC ngày 25/7/1997 Ủy ban nhân dân tỉnh An Giang Nay là Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa học và Công nghệ hoạt động với chức và nhiệm vụ chủ yếu sau: - Nghiên cứu ứng dụng, chuyển giao và sản xuất thử nghiệm lĩnh vực khoa học công nghệ - Thực hiện dịch vụ khoa học công nghệ và môi trường: + Lập báo cáo đánh giá tác động môi trường + Tư vấn về giám sát môi trường; thiết kế, lắp đặc hệ thống xứ lý nước thải, khí thải, nước sinh hoạt + Phân tích mẫu về tiêu môi trường (nước, không khí) + Tư vấn và lắp đặt hệ thống thu lôi chống sét + Tư vấn về sở hữu công nghệ và ISO 9000 + Đánh giá công nghệ và chuyển giao công nghệ + Cung ứng loại giớng bằng kỹ thuật cấy mơ + Cung ứng hóa chất, vật tư, thiết bị phục vụ họat động khoa học công nghệ và môi trường + Đào tạo nghiệp vụ về quản lí khoa học công nghệ và môi trường + Sản xuất kinh doanh: sản phảm, thiết bị phục vụ nhu cầu sản xuất, sinh hoạt và bảo vệ mơi trường từ nhựa Composite bình lọc nước uống (nến lọc làm từ nguyên liệu Diatomite), ngọc thạch thất sơn, gốm mỹ nghệ, gốm đen, gốm đỏ, chế phẩm sinh học EM, cung cấp meo giống, bịch phôi nấm mèo và bào ngư, bột xử lí nước sinh hoạt Hình 1: Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa học Công nghệ 1.2 Đặt vấn đề Nấm ăn là thực phẩm giàu chất dinh dưỡng, chứa nhiều protein, axit amin, khoáng, vitamin…Ngoài ra, nấm ăn cịn dùng để chữa trị sớ bệnh như: giảm cholesterrol máu, điều hòa huyết áp, thiếu máu, ung thư…, khơng có độc tớ.Vì nấm ăn xem là loại rau cao cấp, “rau sạch”, sử dụng ngày càng rộng rãi và phổ biến bữa ăn gia đình Ngoài những đặc điểm ưu việt nấm ăn về dinh dưỡng, việc trồng nấm mang lại những hiệu cao về kinh tế, là những hướng phát triển công nghệ sinh học Do vậy, nghề trồng nấm hình thành, phát triển và lan rộng khắp toàn cầu từ lâu Nghề trồng nấm trở thành nghề với trình độ ngày cao và sản xuất theo qui mô công nghiệp nhiều nước giới Ở Việt Nam, lợi nghề trồng nấm ăn là lớn, khai thác hiệu tiềm dồi dào về lao động nông nghiệp, rơm, rạ, nguyên vật liệu nông thơn và cơng nghệ sinh học (Trần Đình Đằng, 2007) Tuy nhiên nghề trồng nấm nước ta quan niệm là nghề phụ nên phát triển yếu so với nước khác giới Sản xuất chủ yếu loài nấm quen thuộc nấm rơm, nấm mèo, nấm bào ngư…, loài nấm có giá trị kinh tế chưa trồng phổ biến như: nấm mỡ, nấm hầu thủ, nấm thái dương Vì cần ý đầu tư sở vật chất kỹ thuật, xây dựng qui trình sản xuất nấm nhằm thúc đẩy phát triển nghề trồng nấm nước Nấm rơm lụa bạc là những loại nấm mới, là loài nấm dại, ăn ngon Người ta tìm thấy Trung Quốc và số nơi khác giới có Việt Nam Hiện chưa có tài liệu nào nói rõ qui trình trồng nấm rơm lụa bạc Năm 2002, GS-TS Phạm Thành Hổ nghiên cứu số đặt tính sinh học và hệ thống chọn dòng nấm rơm lụa bạc Volvariella bombicina phân lập tại Việt Nam, đồng thời nghiên cứu nuôi trồng dòng đơn bào tử nấm này, bước đầu ứng dụng vào chọn giống Nấm rơm lụa bạc sống từ vùng ôn đới đến cận nhiệt đới, nấm này cho thể bơng gịn thải, mạt cưa, đặt biệt là mạt cưa qua sử dụng (mạt cưa sử dụng trồng nấm mèo nấm bào ngư) Từ cho thấy nấm rơm lụa bạc hoàn toàn có khả ni trồng nước ta Đề tài “Qui trình sản xuất meo nấm rơm lụa bạc môi trường lúa” với mục đích khảo sát tốc độ và điều kiện lan tơ nấm rơm lụa bạc mơi trường lúa Hoàn thiện qui trình sản xuất meo là hoàn thiện bước đầu qui trình trồng nấm rơm lụa bạc Chương Lược khảo tài liệu 2.1 Sơ lược lịch sử trồng nấm Nấm ăn sử dụng loại thực phẩm ngon cách hai ngàn năm Loài người biết dùng nấm làm thức ăn và làm thuốc từ thời hoàng đế La Mã Lúc đầu, nấm thu hái ngoài tự nhiên trở thành mối quan tâm người Từ kỉ thứ VI, người ta biết trồng loại nấm để ăn kĩ thuật cịn thơ sơ Người Trung Q́c biết trồng nấm hương cách hai ngàn năm Nhiều tài liệu tham khảo Chang và Miles (1987) cho thấy nấm mèo trồng Trung Quốc, nấm kim châm trồng vào khoảng năm 800 - 900 dương lịch, nấm hương, nấm rơm, nấm bạch mộc nhĩ trồng theo thứ tự vào những năm 1000, 1700, 1800 (Trần Thị Kim Dung, 2009) Sự đời nghề trồng nấm xem phát sinh Pháp cách ba kỷ Năm 1650, nhận thấy nấm trắng (Agaricus Bisporus) mọc ĺng bón phân ngựa, những người trồng dưa bở Pháp lấy chổ có nấm mọc hịa vào nước, tưới cho những luống khác, kết thu nhiều Đến cuối kỷ XVII, nấm trắng trồng để cung cấp cho những bữa ăn và tiệc vua Louis XIV Nghề trồng nấm phát triển mạnh thời Napoleon và sau lan nhanh qua nước khác (Lê Duy Thắng, 2006) Với những tiến vài thập kỷ qua, nghề trồng nấm lan nhanh khắp giới và mang tính khoa học thật Bảng sau cho thấy người biết nuôi trồng nhiều loại nấm dùng làm thực phẩm và dược liệu từ sớm Thời gian lần Loài nấm đầu ni Thời gian lần Lồi nấm cấy Auricularia auricula (nấm mèo) Flammulina velutipes (nấm kim châm) Lentinula edodes (nấm hương) Poria cocos (nấm phục linh) Agaricus bisporus (nấm mỡ) Ganoderma spp (linh chi) Volvariella volvacea (nấm rơm) Tremella fuciformis (nấm ngân nhĩ) Pleurotus ostreatus (bào ngư xám) 600 800 1000 1232 1600 1621 1700 1894 1900 cấy Pleurotus eryngii Hericium erinaceus (hầu thủ) Agaricus blazei (thái dương) Trametes vesicolor (vân chi) Morchella spp Lyophyllum ulmarium Lentinus tigrius Giaesiereum incarnatum Tricholoma labayense 1977 1960 1970 1981 1986 1987 1988 1989 1990 Tricholoma Pleurotus ferulea, Pholiota nameko (trân đầu nuôi 1958 châu) monolicum; Tricholoma 1991 gambosum Bảng 1: Lịch sử nuôi trồng số loại nấm (Huỳnh Kim Hà, 2002) Nhìn chung, cơng việc thăm dị và nghiên cứu cách trồng nấm thực phát triển mạnh và rộng khắp những thập kỉ qua, là 20 năm trở lại Lúc đầu, người ta trồng gỗ mục, rơm rạ và dần dần, với tiến khoa học kĩ thuật, là kĩ thuật vô trùng, người ta bắt đầu nghĩ đến việc sử dụng vật liệu phế thải mùn cưa, bã mía, phế thải… để trồng nấm, và đem lại hiệu kinh tế đáng kể 2.2 Tình hình sản xuất nấm giới, Việt Nam An Giang 2.2.1 Tình hình sản xuất nấm giới Vấn đề nghiên cứu và sản xuất nấm ăn giới ngày càng phát triển mạnh mẽ, trở thành ngành công nghiệp thực phẩm thực thụ Các nước giới hiện tập trung nghiên cứu và sản xuất nấm mỡ, nấm hương, nấm sò, nấm rơm là chủ yếu Khu vực Bắc Mỹ và châu Âu trồng nấm theo phương pháp công nghiệp lớn giới hóa toàn nên suất và sản lượng cao Từ khâu xử lý nguyên liệu đến thu hái chế biến đều máy móc thực hiện Năng suất nấm trung bình đạt từ 40 – 60% so với nguyên liệu ban đầu (nấm mỡ) Năm 1983 Pháp sản xuất 200.000 nấm mỡ tươi, cần 6000 người (Đinh Xuân Linh và ctv, 2008) Các nơi khu vực châu Á (Nhật Bản, vùng lãnh thổ Đài Loan, Hàn Quốc, Trung Quốc…) triển khai sản xuất nấm theo mơ hình trang trại vừa và nhỏ, cịn mang tính chất thủ cơng, suất khơng cao sản xuất gia đình, trang trại với số đông nên tổng sản lượng lớn Một số loại nấm ăn trồng phổ biến là nấm mỡ, nấm hương, nấm rơm, mộc nhĩ Sản xuất nấm mỡ, nấm hương Trung Quốc lớn giới Năm 1990, tổng sản lượng nấm ăn toàn giới là 3763000 tấn, nấm mỡ 1424000 tấn, nấm hương 393000 Năm 1994, tổng sản lượng nấm giới lên 4909000 tấn, nấm mỡ 1846000 (37,6%), nấm hương 826200 (16,8%), nấm rơm 798800 (6,1%), nấm kim vàng 229800 (4,7%), mộc nhĩ trắng 156200 (3,2%), nấm chân 54800 (1,1%), nấm trơn 27000 (0,6%), nấm hoa xám 14200 (0,3%), loại nấm khác 238800 (4,8%) (Nguyễn Hữu Đống và ctv, 2005) So sánh năm 1994 với 1990 nấm mỡ, nấm hương, nấm rơm, nấm kim vàng, nấm hoa xám đều tăng mạnh Các nước sản xuất nấm chủ yếu năm 1994 là: Trung Quốc 2850000 (trong vùng lãnh thổ Đài Loan 71800 tấn), chiếm 53,79% tổng sản lượng, Hoa Kỳ 393400 (7,61%), Nhật Bản 360100 (7,34%), Pháp 185000 tấn, Hà Lan 88500 tấn, Italia 71000 tấn, Canada 46000 tấn, Anh 28500 tấn, Idonesia 118800 tấn, Hàn Quốc 92000 Sản lượng nấm nước chủ yếu là nấm mỡ, cịn nấm hương Trung Q́c, Nhật Bản và Hàn Quốc sản xuất là chính (Nguyễn Hữu Đống và ctv, 2005) Đến năm 2005 tổng sản lượng nấm giới đạt khoảng 20 triệu Riêng Trung Quốc chiếm sản lượng 50% so với toàn giới Tốc độ tăng trưởng về sản lượng nấm năm sau cao năm trước 5% (Nguyễn Hữu Đống và ctv, 2005) Nhìn chung nghề trồng nấm phát triển đáng kể và rộng khắp, là 20 năm gần 2.2.2 Tình hình sản xuất nấm ăn Việt Nam Ở Việt Nam, nấm ăn biết từ lâu Tuy nhiên, 10 năm trở lại đây, trồng nấm xem là nghề mang lại hiệu kinh tế Vấn đề nghiên cứu và phát triển nấm ăn Việt Nam những năm 70 Năm 1984 thành lập Trung Tâm Nghiên cứu Nấm ăn thuộc Đại học Tổng hợp Hà Nội Năm 1985 tổ chức FAO tài trợ và Ủy ban nhân dân Thành phố Hà Nội định thành lập Trung tâm Sản xuất Giống nấm Tương Mai Hà Nội (sau đổi tên thành Công ty Sản xuất giống, chế biến và xuất Nấm Hà Nội) Năm 1986 tổ chức FAO tài trợ thành lập Xí nghiệp Nấm Thành phố Hồ Chí Minh Các đơn vị tham gia sản xuất và xuất nhập nấm như: Tổng Công ty Rau (Vegetexco), Tổng Công ty Xuất nhập máy (Technoimport), Unimex Hà Nội, Liên hiệp xí nghiệp thực phẩm vi sinh Hà Nội (Công ty Nấm Hà Nội), Xí nghiệp Nấm Thành phố Hồ Chí Minh, Công ty liên doanh chế biến thực phẩm Meko (Cần Thơ)… Năm 1991 – 1993 Bộ Khoa học – Công nghệ và môi trường triển khai dự án sản xuất nấm theo công nghệ Đài Loan (Nguyễn Hữu Đống và ctv, 2005) Tổng sản lượng loại nấm nuôi trồng những năm qua tỉnh phía Bắc chủ yếu tiêu thụ dạng tươi, sấy khô, muối Năm 1988 sản lượng nấm đạt khoảng 30 tấn, tới năm 1993 sản lượng nấm lên tới khoảng 250 Nhưng đến năm 1995 sản lượng nấm khoảng 50 tấn, việc tổ chức sản xuất nấm đơn vị chuyên doanh về nấm nhiều yếu kém, thiết bị , công nghệ trồng nấm nhập nước ngoài không phù hợp với Việt Nam về điều kiện tự nhiên, kinh tế, xã hội và nhiều nguyên nhân khác Từ năm 1997 sản lượng nấm tăng lên lại khoảng 120 tấn, đến năm 2005 sản lượng nấm tăng lên tới khoảng 50000 (Nguyễn Hữu Đống và ctv, 2005) Các loại nấm trồng nhiều tỉnh phía bắc là: nấm sò, nấm mỡ, nấm rơm, mộc nhĩ, linh chi, Trân châu và nấm hương Ở tỉnh phía Nam và đồng bằng sông Cửu Long nghề trồng nấm phát triển nhanh Sản lượng tăng theo cấp số nhân: năm 1990 đạt vài tấn/năm đến đạt 100000 tấn/năm Trồng chủ yếu là nấm rơm, nấm mèo 2.2.3 Tình hình sản xuất nấm An Giang Loại nấm trồng phổ biến tronh tỉnh An Giang là nấm rơm, An Giang là tỉnh có diện tích trồng lúa lớn nên nguồn nguyên liệu rơm rạ dồi dào Nấm rơm Việt Nam bắt đầu xuất từ cuối những năm 80 kỷ trước, sản lượng ban đầu 2.500 tấn/năm Đến năm 2002 xuất tăng lên 40.000 tấn, đạt kim ngạch 40 triệu USD Hiện nhu cầu tiêu dùng giới cần 20 triệu nấm/năm, tốc độ tăng 3,5% Thị trường tiêu thụ cao là Mỹ, Nhật, Đài Loan và nước EU Dự kiến vào năm 2010 nước ta có sản lượng triệu nấm loại với mức tổng doanh thu 7.000 tỉ đồng, nấm chế biến XK chiếm 50% và kim ngạch khoảng 200 triệu USD/năm (Theo báo nông nghiệp, 2009) Tỉnh An Giang xây dựng đề án “Phát triển nghề trồng nấm rơm phương án hỗ trợ tín dụng phát triển trồng nấm rơm giai đoạn 2006 – 2010 tỉnh An Giang” Năm 2006, Chi cục Hợp tác xã và Phát triển nông thôn tỉnh doanh nghiệp đầu tư xây dựng 11 sở sơ chế và tiêu thụ nấm Diện tích trồng nấm rơm tỉnh năm 2006 tăng nhanh, đạt 914 ha; tăng gấp lần so năm 2005, suất bình quân đạt 11,50 tấn/ha, sản lượng thu 10.509 Giá bán nấm tươi bình quân là 8.000 đồng/kg, đạt giá trị sản xuất gần 84 tỷ đồng, lợi nhuận thu 50,4 tỷ đồng, giải việc làm thường xuyên cho gần 7.000 lao động và 45.000 lao động theo thời vụ Năm 2007, An Giang có kế hoạch tiếp tục mở rộng diện tích sản xuất nấm rơm 4.500 ha, tăng lần so năm 2006 Tính đến cuối năm 2009, toàn tỉnh có 3.651 tăng 539 so với năm 2008 và đạt 73,02% kế hoạch tỉnh, sản lượng thu là 47.398 nấm tươi, đạt giá trị sản xuất gần 710 tỷ đồng, lợi nhuận thu bình quân là 426 tỷ đồng (cao gần lần so với trồng lúa), theo chuyên ngành tính tốn việc trồng 1000 nấm tương đương 10.000 trồng lúa Mặt khác việc trồng nấm rơm giải việc làm thường xuyên cho 13.315 lao động và 178.050 lao động theo thời vụ năm 2009 Để đạt kết trên, ngành nông nghiệp và ngành có liên quan mở 72 lớp tập huấn kỹ thuật trồng nấm rơm, tổ chức 21 điểm trình diễn, tổ chức 53 buổi hội thảo với 2.700 lượt người tham dự; thực hiện 14 lần thời phát động trồng nấm rơm, 04 phóng về số việc cần lưu ý nuôi trồng và chăm sóc nấm rơm; xây dựng 16 sở chế biến và tiêu thụ nấm Thành lập 93 tổ sản xuất nấm rơm (tính đến năm 2009), cho tổ vay vớn gần tỷ đồng Bên cạnh nấm rơm, ngành Nông nghiệp tổ chức cho nông dân sản xuất nấm bào ngư 610 ngàn bịch thu lợi nhuận 2,4 tỷ đồng; sản xuất 10 ngàn bịch nấm mèo thu lợi nhuận là 30 triệu đồng Trong năm 2010, ngành Nông nghiệp có kế hoạch sản xuất nấm với diện tích 5.000 (tăng gần 1350 so với năm 2009), và tổ chức 100 lớp tập huấn trồng nấm rơm có đầy và khơng đậy rơm áo, xây dựng 48 điểm trình diễn và tổ chức 37 hội thảo 2.3 Tổng quát qui trình sản xuất meo giống nấm Trong sản xuất nấm, meo giống giữ vai trò quan trọng hàng đầu Dù chế biến nguyên liệu tớt, chăm sóc kĩ càng giớng nấm xấu suất khơng cao tệ khơng có nấm mọc Khoa học xác định rằng nấm tai nấm nào phát triển từ hệ sợi tơ nấm Đớng rơm rạ ẩm có nấm mọc có sẵn hệ sợi tơ nấm bào tử nảy mầm tạo hệ sợi tơ Chỗ nào khơng có hệ sợi tơ bào tử khơng có nấm mọc lên Meo giớng nấm sản xuất để cung cấp cho người trồng thực chất là hệ sợi tơ nấm chủng nuôi bằng môi trường tự nhiên khử trùng (rơm rạ cắt ngắn, trấu trộn bột bắp, mùn cưa, hạt ngũ cốc…) Trong sản xuất qui mô lớn giống nấm là yếu tố định thành bại Meo giống cần đạt yêu cầu sau (Lê Duy Thắng, 2006): - Thuần (không lẫn giống khác) - Không có mầm bệnh (do nhiễm tạp, sâu bệnh…) - Hiệu kinh tế ( suất, khả kháng bệnh, giá trị thương phẩm…) Giống nấm tốt là giống nấm có mùi thơm dễ chịu, khơng có mùi chua; khơng già non Sử dụng giống nấm tốt giống ăn kín hết đáy chai (hoặc túi) sau – ngày Muốn để lâu phải bảo quản nhiệt độ lạnh, đới với giớng nấm sị, nấm mỡ, nấm hương, nấm Trân châu, linh chi bảo quản nhiệt độ từ – oC, kéo dài 30 – 45 ngày; giống nấm rơm, mộc nhĩ bảo quản nhiệt độ từ 15 – 20oC, kéo dài 15 – 30 ngày (Nguyễn Hữu Đống và ctv, 2005) Các nguồn để tạo hệ sợi tơ nấm có thể là: sưu tập giớng, giớng từ đơn đa bào tử, giống từ mô thịt nấm, giống từ giá thể nấm Mô thịt nấm dùng phổ biến nhất, thao tác dễ làm và có đặc tính ít bị biến dị, hạn chế lẫn nhiễm tạp vi sinh khác Việc phân lập thành công môi trường nuôi cấy mọc loại tơ nấm định làm giớng 10 Quy trình sản xuất giớng có thể tóm tắt sau: Quả thể Bộ sưu tập giống Giữ giống Bào tử Tơ nấm Giống gốc Môi trường thạch Giống sản xuất (giống thạch) Môi trường hạt: lúa… Giống hạt Môi trường cọng: rơm, khoai mì Giớng cọng Mơi trường giá mơi: rơm, trấu, mạt cưa… Meo giớng (meo giá mơi) Hình 2: Sơ đồ tóm tắt quy trình sản xuất giống nấm (Lê Duy Thắng, 2006) Môi trường nuôi cấy phải trùng nghiêm ngặt Trong khâu làm giống gồm loại môi trường như: môi trường thạch, hạt, cọng, giá mơi…có đặc điểm sau: - Cung cấp dinh dưỡng cần thiết cho nấm - Không ảnh hưởng đến sinh lý và biến dưỡng nấm, pH môi trường, tích luỹ chất độc… - Không làm thay đổi đặc tính nấm như: mau già (lão hoá), thoái hoá… - Dễ thực hiện và tiện dụng như: + Giống thạch để quan sát chọn lựa + Meo hạt giúp phân bố nhanh nguồn giống + Meo cọng thao tác nhanh cấy chuyền và phát triển tơ + Meo giá môi giúp nấm làm quen với nguyên liệu điều kiện nuôi tự nhiên Môi trường thạch, tùy loại nấm mà dùng môi trường nuôi cấy thích hợp, có thể dùng mơi trường sau: - Môi trường thạch khoai tây (PDA): khoai tây 200g, dextrose 20g, agar 20g, nước cất vừa đủ 1000ml 11 - Môi trường gạo lức: gạo lức 1kg, nước cất vừa đủ Môi trường hạt là môi trường xốp với nguyên liệu chính là ngủ cốc - Môi trường lúa: lúa 1kg, 2g thạch cao, nước cất vừa đủ - Môi trường trấu có bổ sung: 700g trấu, cám 200g, bắp 100g, nước vừa đủ - Môi trường gạo lức: gạo lức 1kg, nước cất vừa đủ Môi trường cọng là dạng nhân giống trung gian Môi trường cọng có thể dùng thân khoai mì, thân so đũa, hay thân điên điển - Môi trường điên điển: điên điển chẻ nhỏ, vôi bột vừa đủ, nước vừa đủ - Mơi trường khoai mì: khoai mì chẻ nhỏ, vơi bột vừa đủ, nước vừa đủ Môi trường giá môi dùng rơm, trấu, mạt cưa hay nguyên liệu hỗn hợp dùng để trồng nấm thương phẩm, với mục đích là làm cho tơ nấm phát triển quen với nguyên liệu đem trồng tự nhiên Q trình sản xuất meo giớng qua nhiều khâu Từ sưu tập giống đến meo giá môi đưa đến người trồng phải thực hiện nhiều lần cấy chùn Mỗi lần cấy chùn sớ lượng lại tăng lên nên gọi là q trình nhân giớng Trong thao tác và trình thực hiện phải đặc biệt ý đền vấn đề vô trùng Đồng thời giai đoạn, thường xuyên kiểm tra giống mọc không bị nhiễm tạp 2.4 Tổng quan nấm rơm lụa bạc 2.4.1 Vị trí phân loại nấm rơm lụa bạc Volvariella bombicina phân loại sau : - Giới tản thực vật : Thallophyta - Ngành nấm : Mycota - Ngành phụ nấm thật : Eumycophyta (Eumycotine) - Lớp đảm khuẩn : Bacidiomycetes - Lớp phụ đồng đảm khuẩn : Homobasidiomycetes (Holobasidiomycetidae) - Bộ nấm tán : Agaricales - Họ : Pluteaceae - Tên khoa học : Volvariella bombicina 12 Hình 3: Nấm rơm lụa bạc Volvariella bombicina (Trần Thị Kim Dung, 2009) 2.4.2 Hình thái nấm rơm lụa bạc Volvariella bombicina là loại nấm đa bào, có mũ nấm Mũ nấm màu trắng đơi màu vàng nhạt, đặc biệt trung tâm có vảy sợi nhỏ đẹp, đều khắp Tai nấm hình dù Khi nấm cịn nhỏ, nấm có hình trứng cụt đầu, sau dần hình chng, nấm già, mũ nấm x thành dạng bán cầu Ở giữa thường có gị phẳng kích thước - 15 cm chiều rộng, chặt thịt dày, mặt mũ dạng sợi thô dường vảy mảnh, chạm vào trở nên nhẵn và khô Phiến nấm lúc đầu màu trắng, sau màu hồng thịt, xếp xít nhau, khoảng 1cm chiều rộng (Trần Thị Kim Dung, 2009) Nấm có nón với ćng giữa dễ tách khỏi mũ, phiến rời, bào tử màu hồng Cuống nấm màu trắng, nhẵn, trơ trụi, khỏe, đặc, thót dần về phía trên, kích thước 8-15cm x 1-1,5cm, gốc bao bao gốc màu trắng hay vàng, thịt màu trắng mềm dịu thơm ngon, mùi vị mùi củ cải (Trần Thị Kim Dung, 2009) Nấm có bao gớc, thể non, bao chung nấm bao phủ toàn nấm Lúc nấm tr ưởng thành để lại gốc cuống túi nhỏ gọi là bao gốc Trên cuống khơng có vịng mũ Nấm sinh sản bằng đảm bào tử Bào tử màu hồng, kính hiển vi có màu hồng vàng sáng, hình êlip rộng 8-10 x µm Bụi bào tử màu hồng đỏ Hậu bào tử lớn khoảng 40 - 70 x 15 - 25 µm (Trần Thị Kim Dung, 2009) 13 Hình 4: Bào tử nấm Volvariella bombicina nhìn kính hiển vi (Trần Thị Kim Dung, 2009) Đặc điểm phân bố tự nhiên: volvariella bombicina sống từ vùng ôn đới đến cận nhiệt đới, có quan hệ với nấm rơm thường Nó mọc gỗ rộng chặt hạ, mùn cưa, đặc biệt là sồi giẻ Hình 5: Hệ sợi nấm Volvariella bombicina nhìn kính hiển vi (Trần Thị Kim Dung, 2009) 2.4.3 Nhu cầu dinh dưỡng nấm rơm lụa bạc Nấm nuôi trồng là những loại dị dưỡng lấy thức ăn từ nguồn hữu Nhiều loài nấm có hệ enzim phân giải tương đới mạnh giúp chúng có thể sử dụng dạng thức ăn phức tạp xellulôzơ, protein, polysaccharit, lignin…Với cấu trúc sợi, tơ nấm len lỏi sâu vào chất (rơm rạ, mạt cưa, gỗ…) rút lấy thức ăn đem nuôi toàn thể nấm Nguồn cacbon chủ yếu là hợp chất xellulôzơ sợi bông, rơm rạ, vải vụn, mạt cưa… Các loại đường glucôzơ, fructôzơ, manitol và sucrose cung cấp nguồn cacbon tốt cho phát triển nấm Nhưng với đường ribose, arabinose, xylose, galactose, inulin hệ sợi ít khơng phát triển Với nấm rơm lụa bạc, xếp vào họ nấm rơm nay, nghiên cứu cho thấy khơng thể sử dụng chất rơm rạ (đây là nguồn carbon tốt cho V.volvacea) làm 14 nguồn cacbon cho phát triển Nấm này cho thể bơng gịn thải, mạt cưa, đặc biệt là MCĐQD(đã sử dụng trồng nấm mèo nấm bào ngư) (Phạm Thành Hổ, 2002) Hệ sợi nấm không thể phát triển môi trường thiếu nitrogen môi trường đầy đủ nguồn cacbon, khoáng và vitamin Nitrogen chứa hợp chất hữu phức tạp, xem là nguồn dinh dưỡng cho phát triển tơ nấm và hình thành thể Glutamat, acid aspartic và valin giúp cho phát triển và hình thành thể cao, cao urê, alanine, arginine Riêng với nấm rơm lụa bạc cần môi trường dinh dưỡng giàu đạm Môi trường agar-lúa mì-ngũ cớc xem là mơi trường chất đặc trưng cho phát triển hệ sợi nấm V.bombicina Và sau nhiều nghiên cứu cho thấy môi trường raper thích hợp cho nuôi dưỡng hệ tơ (Trần Thị Kim Dung, 2009) Trong giai đoạn thể nhu cầu về đạm cần thiết cho nấm rơm lụa bạc Các nghiên cứu cho thấy có bổ sung urê 2‰ thể hình thành sớm 2-3 ngày và suất cao với lơ khơng bón (Phạm Thành Hổ, 2002) Một sớ vitamin có tác dụng đới với phát triển nấm p-aminobenzonic acid, ascobic acid, biotin, pyridoxin, rivofolavin, thiamin,… Các chất khống đóng vai trị quan trọng phát triển nấm nói chung bao gồm nguyên tố đa lượng như: P; K; S; Ca; Mg … và nguyên tố vi lượng Ma; Zn; Mo; Bo; … dù với hàm lượng nhỏ không thể thiếu phát triển nấm Nhiều nghiên cứu cho thấy thiếu phospho dẫn đến kìm hãm hấp thụ glucogen q trình hơ hấp nấm, thiếu Kali đưa đến kìm hãm trao đổi chất hydratcarbon (Trịnh Tam Kiệt và ctv, 1986) 2.4.4 Nhu cầu cho tăng trưởng tơ hình thành thể Nhiệt độ cần thiết cho phát triển tơ nấm từ 15 - 40oC và nhiệt độ tối ưu cho giai đoạn ủ tơ là 35±2oC Nhiệt độ cần cho hình thành thể là 26 - 35 oC và tối ưu là 35 ± 2oC Sau để tai nấm phát triển tiếp tục, nhiệt độ nên dao động khoảng từ 28 - 35oC Trên là những khoảng nhiệt độ định cho ủ tơ và kết thể Volvariella bombicina Người ta tìm thấy nấm này mọc Đà Lạt những nghiên cứu về nhiệt độ nuôi trồng nấm này vùng lạnh chưa biết (Trần Thị Kim Dung, 2009) Nấm tương tự thực vật, lấy thức ăn qua màng tế bào hệ sợi nấm Để vận chuyển thức ăn cần có nước và nước chiếm 90 % trọng lượng thể nấm, ẩm độ ban đầu thêm vào nguyên liệu để nuôi tơ cần đạt 70±5 % 15 Khi thể hình thành và phát triển ẩm độ không khí cần cao 80-95%, ẩm độ xung quanh mô nấm cần đạt 80-90% Đây là những ẩm độ thích hợp cho việc nuôi trồng nấm Volvariella volvacea (Trần Thị Kim Dung, 2009) Đối với nấm rơm lụa bạc những giá trị ẩm độ này thích hợp Đối với nấm rơm lụa bạc (Volvariella bombicina) nấm rơm nói chung ánh sáng quan trọng đến lan tơ và hình thành thể Trong tối tơ nấm rơm lụa bạc tăng trưởng tốt ngoài ánh sáng Sự hình thành thể xảy điều kiện chiếu sáng 12/24 với độ sáng 200-300 lux Đây là điều kiện ánh sáng tự nhiên ghi nhận phòng nấm Với nấm rơm lụa bạc khoảng pH thích hợp cho lan tơ và hình thành thể từ 6,5- 16 Chương Vật liệu phương pháp nghiên cứu 3.1 Thời gian địa điểm tiến hành thí nghiệm - Thời gian: từ 25/01/2010 đến 8/02/2010 - Địa điểm: thí nghiệm tiến hành tại phòng phân tích thí nghiệm Trung tâm ứng dụng tiến Khoa học và Công nghệ An Giang 3.2 Vật liệu nghiên cứu 3.2.1 Đối tượng nghiên cứu Chủng nấm rơm lụa bạc Volvariella bombicina trường Đại học Khoa học Tự nhiên, thành phố Hồ Chí Minh cung cấp dạng tơ ống nghiệm 3.2.2 Dụng cụ, thiết bị Ống nghiệm Cốc 1000 Bình tam giác Nhiệt kế Cân điện Bịch nylon Tủ cấy Que cấy Bếp điện Phểu lọc Một số thiết bị và dụng cụ khác cần thiết cho nghiên cứu 3.2.3 Hóa chất Glucose Agar Pepton KH2PO4 K2HPO4 MgSO4.7H2O Nước cất Cám lúa Lúa 17 Vơi bột Các hóa chất và nguyên liệu khác 3.3 Phương pháp tiến hành thí nghiệm 3.3.1 Chuẩn bị mơi trường dinh dưỡng 3.3.1.1 Môi trường thạch nghiêng (môi trường Chang) - Thành phần: Glucose: 20g Agar: 20g Pepton: 2g KH2PO4: 0,46g K2HPO4: 1g MgSO4.7H2O: 0,5g Nước cất thêm vào vừa đủ lít - Cách pha môi trường: Tất thành phần cho vào cốc lít, khuấy đều Sau nấu cho tan agar, vừa nấu vừa khuấy đều Điều chỉnh pH = 6,5 Dùng phễu thuỷ tinh, rót phần 5ml môi trường vào ống nghiệm để làm thạch nghiêng (khoảng 2/3 ống nghiệm), đậy nút đem hấp trùng Môi trường hấp trùng 1atm 30 phút Giữ môi trường ống nghiệm 24 xem có nhiễm hay khơng sử dụng 3.3.1.2 Môi trường lúa - Thành phần: Lúa Nước vôi Vôi bột Cám Nước cất vừa đủ - Cách làm môi trường Lúa ngâm với nước vơi 1% trước nấu Sau thêm nước vừa đủ, nấu lúa vừa nở vớt để cho nước Trộn thêm vơi bột 1%, cám 2% Trộn đều, cho vào bình tam giác 250ml chai và bịch PP, làm cổ, nút bơng Mỗi bịch lúa có trọng lượng khoảng 300g Sau đem hấp trùng atm, 30 phút Để mơi trường qua 24 xem có nhiễm hay không sử dụng 18 3.3.2 Tiến hành thí nghiệm Ống giớng cấy chùn qua mơi trường Chang để nhân giớng Sau đó, cấy chùn qua bình tam giác (mơi trường lúa), quan sát tớc độ lan tơ tơ nấm bình tam giác Meo giớng từ bình tam giác cấy chùn qua 10 bịch lúa bịch ủ điều kiện tối, bịch ủ điều kiện ánh sáng khuếch tán Nơi ủ tơ phải sạch, thống mát, khơng có ánh sáng chiếu trực tiếp Theo dõi lan tơ, ghi nhận thời gian lan đầy bịch So sánh tốc độ lan tơ bịch tối và ngoài ánh sáng khuếch tán Quy trình tạo meo nấm rơm lụa bạc: Lúa Ống giống (môi trường thạch) Ống thạch giữ giống Cấy chuyền Cấy chuyền Môi trường Chang Nấu, trộn vôi 1%, cám 2% Cho vào bình tam giác Hấp khử trùng 1atm, 30phút Cấy chùn Mơi trường hạt (Bình tam giác) Cấy chuyền Đóng bịch PP Hấp khử trùng 1atm, 30phút Mơi trường hạt (Bịch PP) Hình 6: Sơ đồ qui trình tạo meo giống nấm rơm lụa bạc 19 Chương Kết thí nghiệm Giớng nấm rơm lụa bạc từ ống giống cấy sang ống thạch (môi trường Chang) lan tơ tốt, thời gian tơ nấm lan đầy ớng nghiệm là ngày Hình 7: Tơ nấm lan đầy ống nghiệm Giống nấm cấy chuyền sang bình tam giác 250ml (mơi trường lúa), ngày sau cấy tơ nấm bắt đầu lan tơ Thời gian tơ nấm lan đầy bình tam giác là 10 ngày Hình 8: Bình tam giác cấy chuyền 10 ngày sau cấy Tơ nấm từ bình tam giác cấy chuyền sang bịch (môi trường lúa) sau ngày bắt đầu lan tơ Thời gian lan tơ đầy bịch là 10 ngày Hình 9: Các bịch mơi trường lúa (trước cấy) 20 ... Giới thiệu Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa Học Công Nghệ Địa chỉ: 17 Lê Lai, phường Mỹ Bình, thành phớ Long Xuyên, An Giang Điện thoại: (076) 954306 – 954304 Fax: (076) 954305 Trung tâm Ứng dụng... đen, gốm đỏ, chế phẩm sinh học EM, cung cấp meo giống, bịch phôi nấm mèo và bào ngư, bột xử lí nước sinh hoạt Hình 1: Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa học Công nghệ 1.2 Đặt vấn đề Nấm ăn là... chuyển giao Khoa Học Công Nghệ tỉnh An Giang thành lập theo định số 5805/QĐ.UB.TC ngày 25/7/1997 Ủy ban nhân dân tỉnh An Giang Nay là Trung tâm Ứng dụng Tiến Khoa học và Công nghệ hoạt