1.Ảnh hưởng của nồng độ enzymeTrong điều kiện dư thừa cơ chất ,vận tốc phản ứng phụ thuộc tuyến tính vào E, V=kE Tuy nhiên,trong nhiều trường hợp, môi trường có chứa chất kìm hãm hoặc hoạt hóa thì vận tốc phản ứng do Enzyme xúc tác không phụ thuộc tuyến tính với enzyme đó.Km đặc trưng cho mỗi enzymeKm đặc trưng cho ái lực của E với cơ chấtKm càng nhỏ thì ái lực của E đối với cơ chất càng lớn và ngược lạiChất kìm hãm và cơ chất có sự tương đồng về mặt cấu trúc, hóa học. VD: malic acid có cấu trúc gần giống với succinic acid nên kìm hãm cạnh tranh enzyme succinatdehydrogenase, là enzyme xúc tác cho sự biến đổi succinic acid thành fumaric acid. Nếu nồng độ cơ chất ( S ) rất lớn so với chất ức chế (I),=> có thể loại trừ hoàn toàn tác dụng kìm hãm của chất ức chế I. Nếu nồng độ cơ chất ( S ) rất bé so với chất ức chế (I) => có tác dụng kìm hãm hoàn toàn.
Trường ĐH Công Nghiệp Thực Phẩm TP.HCM Đề tài: CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN TỐC ĐỘ PHẢN ỨNG ENZYME Hóa sinh học thực phẩm Những yếu tố ảnh hưởng đến tốc độ phản ứng enzyme Nhiệt độ Chất kìm hãm Nồng độ cơ chất Nồng độ Enzyme Các chất hoạt hóa Độ pH Các yếu tố khác… ● Trong điều kiện dư thừa cơ chất ,vận tốc phản ứng phụ thuộc tuyến tính vào [E], V=k[E] • Tuy nhiên,trong nhiều trường hợp, môi trường có chứa chất kìm hãm hoặc hoạt hóa thì vận tốc phản ứng do Enzyme xúc tác không phụ thuộc tuyến tính với enzyme đó. 1.Ảnh hưởng của nồng độ enzyme V: vận tốc phản ứng [E]: nồng độ enzyme V 1 : Vận tốc của phản ứng tạo phức chất ES V -1 : Vận tốc của phản ứng tạo phân ly phức ES thành E và S V 2 : Vận tốc của phản ứng tạo thành E và P(sản phẩm) 2.Ảnh hưởng của nồng độ cơ chất với k m gọi là hằng số Michalis Menten Khi đạt cân bằng, ta có: Ý nghĩa của k m - K m đặc trưng cho mỗi enzyme - K m đặc trưng cho ái lực của E với cơ chất - K m càng nhỏ thì ái lực của E đối với cơ chất càng lớn và ngược lại Phương trình Michalis Menten • Đặt E 0 :nồng độ ban đầu của enzyme • Ở trạng thái cân bằng: • • Nhận xét [E] càng cao thì v phản ứng E càng lớn • Phương trình (1) gọi là pt Michalis Menten • Vận tốc tạo thành sản phẩm [ES ● Trường hợp 1 : • Trường hợp 2: Như vậy [S] đã đủ lớn đến mức nào đó,nếu tiếp tục tăng [S],v cũng sẽ không tăng theo Xét 3 trường hợp sau: Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng nồng độ cơ chất đến vận tốc phản ứng,trong đó v là hằng số của [S] có dạng của nhánh hyperbol vuông góc [...]... cơ chất.Nhưng chúng kìm hãm enzyme bằng cách gắn vào enzyme ở vị trí khác vị trí cơ chất, vì vậy chúng chỉ làm giảm tối đa tốc độ của phản ứng chứ không có ảnh hưởng đến sản phẩm phản ứng Ảnh hưởng của kiểu kìm hãm lên Vmax và Km: Trường hợp kìm hãm enzyme bằng nồng độ cao của cơ chất gọi là “kìm hãm cơ chất” như kìm hãm urease khi nồng độ ure cao ● • Ngoài ra còn có các enzyme khác như: lactatdehydrogenase,carbonxypeptidase,lipase,... tính cực đại 7 .Ảnh hưởng của các yếu tố khác • Ánh sáng:có ảnh hưởng khác nhau đến từng loại enzyme, các bước sóng khác nhau có ảnh hưởng khác nhau ● Sự chiếu điện: - Điện chiếu với cường độ càng cao thì tác động phá hủy càng mạnh - Tác động mạnh hơn với các dịch enzyme có nồng độ thấp • Sóng siêu âm:Tác động rất khác nhau đối với từng loại enzyme Cám ơn sự chú ý lắng nghe của cô và các bạn Chúc cho... phản ứng nhất định Cation kim loại có tính đặc hiệu tương đối hay tuyệt đối Cation kim loai có thể có sự đối kháng ion Phụ thuộc nồng độ cation kim loại Cation kim loại làm thay đổi pH tối thích Phụ thuộc bản tính cation kim loại 5 .Ảnh hưởng của nhiệt độ •Một số trường hợp tuân theo định luật Vant - Hoff •Mỗi enzyme có một nhiệt độ tối ưu riêng 6 Ảnh hưởng của pH • Mỗi enzyme có một pH tối thích Ảnh hưởng. ..Sự phụ thuộc của tốc độ phản ứng vào nồng độ cơ chất theo Lineweaver – Burk 3 .Ảnh hưởng của chất kìm hãm(Inhabitior) Chất kìm hãm: là chất có tác dụng làm giảm hoạt độ hay làm enzyme không còn khả năng xúc tác biến cơ chất thành sản phẩm a.Kìm hãm cạnh tranh - Là cơ chất và chất kìm hãm đều tác dụng lên trung tâm hoạt động của enzyme, chất kìm hãm choán chỗ của cơ chất ở enzyme Hình 7.4 Kiểu kìm... của pH lên hoạt độ của enzyme Ảnh hưởng của giá trị pH đến tác dụng có thể do các cơ sở sau: • • • • Enzyme có sự thay đổi không thuận nghịch ở phạm vi pH hẹp Ở hai sườn của pH tối thích có thể xảy ra sự phân ly nhóm prosthetic và coenzyme Làm thay đổi mức ion hóa hay phân ly cơ chất Làm thay đổi mức ion hóa nhóm chức nhất định trên phân tử enzyme dẫn đến làm thay đổi ái lực liên kết của enzyme với cơ... hoạt độ xúc tác của enzyme Các chất này có bản chất hóa học khác nhau, có thể là các anion, các ion kim loại hoặc các chất hữu cơ có cấu tạo phức tạp hơn - Tuy nhiên tác dụng kích hoạt chỉ giới hạn ở nồng độ xác định, vượt quá giới hạn này có thể làm giảm hoạt độ enzyme - cơ chế : + trực tiếp + gián tiếp Tính chất hoạt hóa của các cation kim loại: • • • • • • Mỗi cation kim loại hoạt hóa cho một kiểu phản. .. làm thay đổi cấu trúc không gian của phân tử enzyme theo hướng không có lợi cho hoạt động xúc tác của nó → giảm vận tốc phản ứng xúc tác.Ezyme vẫn có thể kết hợp với cơ chất tạo thành EIS • Chất kìm hãm kiểu này kết hợp với enzyme một cách độc lập với cơ chất mà không làm thay đổi Km → nồng độ cơ chất lớn cũng không loại trừ được tác dụng kìm hãm Ví dụ: các ion Cu 2+, 2+ Hg ,cấu tạo của chúng không... giờ cạnh tranh với S → không thể loại bỏ tác dụng kìm hãm bằng cách tăng nồng độ cơ chất như kìm hãm cạnh tranh được ● •Chất ức chế phi cạnh tranh ít gặp ở phản ứng một cơ chất, nhưng rất quan trọng đối với phản ứng E nhiều cơ chất, có thể giúp làm sáng tỏ cơ chế phản ứng E C Kìm hãm hỗn tạp (Mixed inhibition) •Là chất vừa liên kết với enzyme tự do vừa liên kết với cả phức hợp ES tạo thành phức hợp... phi cạnh tranh Enzyme + cơ chất → thay đổi không gian phân tử Enzyme + chất kìm hãm → cấu trúc không gian bị thay đổi Chất kìm hãm chỉ kiên kết với phức hợp ES không liên kết Chất kìm hãm kết hợp với enzyme tự do khác với trung với enzyme ự do tâm hoạt động Giống nhau: chất kìm hãm và cơ chất không cạnh tranh với nhau → không thể loại bỏ kìm hãm bằng cách tăng nồng độ cơ chất 4 Ảnh hưởng của chất... trung tâm liên kết với cơ chất bằng các ái lực khác nhau • • Cơ chất có thể choán chổ (ngăn cản) một cofactor hay một coenzyme Cơ chất cũng có thể được liên kết nhờ những vị trí đặc biệt của enzyme Cơ chất có thể liên kết với một chất hoạt hóa và bằng cách này nó tách khỏi E Cơ chất có thể ảnh hưởng đến ion lực của môi trường và qua đó làm mất đi tình chuyên hóa của enzyme SO SÁNH SỰ KHÁC NHAU GIỮA KÌM HÃM PHI CẠNH TRANH VÁ KÌM HÃM KHÔNG CẠNH . 2: Như vậy [S] đã đủ lớn đến mức nào đó,nếu tiếp tục tăng [S],v cũng sẽ không tăng theo Xét 3 trường hợp sau: Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng nồng độ cơ chất đến vận tốc phản ứng,trong đó v là. hyperbol vuông góc Sự phụ thuộc của tốc độ phản ứng vào nồng độ cơ chất theo Lineweaver – Burk 3. Ảnhhưởngcủachấtkìmhãm(Inhabior) Chất kìm hãm: là chất có tác dụng làm giảm hoạt độ hay làm