PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH hệ GLYCOPROTEIN TRONG HUYẾT THANH xác ĐỊNH BỆNH UNG THƯ máu

Phương pháp phân tích hệ glycoprotein trong huyết thanh xác định bệnh ung thư máu. xác định được 1 tập hợp các peak protein từ các mẫu huyết thanh của bênh nhân ALL. Từ các peak protein cụ thể của các đối tượng chúng tôi xác định các yếu tố tiểu cầu PF4, 1 đoạn của tiền tiểu cầu CTAPIII và C3a là biomarker protein tiềm năng cho phát hiện bệnh ở bện nhân ALL. Bảng số liệu các marker này có thể được giới hạn để phân biệt bệnh nhân ALL từ người khỏe mạnh và từ người AML

I. TỔNG QUAN I.1. Bệnh ung thư máu I.1.1. Khái niệm về huyết thanh người Huyết tương – plasma là một dịch trong, màu vàng nhạt và vị hơi mặn, thu được khi máu chống đông đã được laoij bỏ toàn bộ các thành phần tế bào. Huyết tương là thành phần quan trong của máu, là môi trường sống của các tế bào máu và tất cả tế trong cơ thể, chiếm 55 – 60% thể tích máu. Huyết thanh – serum là phần dịch lỏng trong suốt còn lại của máu sau khi đã loại bỏ các thành phần tế bào và các yếu tố đông máu hay các phần còn lại của huyết tương sau khi đã loại bỏ các yếu tố đông máu. Nó bao gồm nước, muối, lipid, đường, các enzyme, kháng thể và các protein hòa tan khác … Nhue vậy, huyết thanh rất giống huyết tương và các protein của nó thực hiện các vai trò rất đa dạng như đông máu, đáp ứng miễn dịch, cung cấp chất dinh dưỡng và nhieuf hoạt động sinh lý quan trong khác trong cơ thể. Huyết thanh không chỉ là mẫu xét nghiệm lâm sang mà còn thêt hiện rất nhiều đặc tính hữu ích cho các nghiên cứu proteomics. Theo phương diện này, nó là mẫu phân tích tiềm năng cho việc phát hiện ra các chỉ thị sinh học. I.1.2. Đặc điểm, thành phần của hệ protein huyết thanh người Một người trưởng thành chứa khoảng 3,5 – 5 lit huyết thanh vơi khoảng 200 -250 gr protein. Người ta ước lượng có khoảng từ 10.000 đến 20.000 protein khác nhau xuất hiện trong huyết thanh tại một thười điểm nhất định, phần lớn trong số chúng có mặt ở nồng độ rất thấp, cỡ mg/ml. Đây là mẫu rất giầu protein với hàm lượng thay đổi từ 60 -80mg/ml. Các protein có hàm lượng cao trong huyết thanh gồm 22 loại, chiếm đến 99% lượng protein tổng số, trong đó có albumin, immunoglobin, transferring, haptoglobin, lipoprotein, … Ngoài ra còn có rất nhiwwuf protein khác tồn tại với hàm lượng thấp hoặc rất thấp nhưng lại giữ các mô, cơ quan hay các protein giải phóng vào máu do kết quả của sự phá hủy mô, do nhiễm vi sinh vật, … Như vậy, các protein xuất hiện trong huyết thanh do nhiều nguyên nhân khác nhau và nó cũng gợi ý cho việc áp dụng các phương pháp nghiên cứu khác nhau đề phát hiện chúng. Protein trong huyết thanh được coi là một trong những hệ protein phức tạp nhất ở người. Một số protein có hàm lượng cao ( mg/ml) như albumin thông thường thay đổi từ 35 – 50 mg/ml ( chiếm từ 50 – 70%), do sự tổng hợp hang ngày ở gan ( khoảng 12g) và có thời gian bán hủy là 21 ngày nên nó được coi là chỉ thị của bệnh xơ gan hay bệnh suy dinh dưỡng. Immunoglobulin (IgG ) khoảng 5 – 7 mg/ml chiếm từ 8 – 10%. Các protein có hàm lượng thấp (ng/ml) chỉ chiếm khoảng 1% hàm lượng protein tổng số như interleukin 6, hormone, carbonhydrate antigen 125 ( CA – 125), β 2 – microglobulin … thông thường thay đổi từ 0 – 5 pg/ml và được coi là những chất chỉ thị có độ nhạy cao trong chuẩn đoán nhiều quá trình bệnh lý. Các nghiên cứu đã chứng minh rằng các protein huyết thanh có thể là các chỉ thị sinh học đủ tin cậy trong chẩn đoán một số bệnh như: ưng thư buồng trứng ( CA 15 – 3 ), ung thư tuyến tiền liệt (PSA), ung thư gan ( α – fetoprotein ) và các bệnh về tim mạch ( c – reactive protein). Tuy nhiên, trải qua nhiều thập kỷ nghiên cứu mới chỉ có một lượng nhỏ các chỉ thị sinh học này được phát hiện và sử dụng cho mục đích chuẩn đoán. I.1.3. Chức năng của protein trong huyết thanh Huyết thanh đóng vai trò rất quan trọng trong các hoạt động sống của cơ thể, là môi trường trao đổi chất của các mô và cơ quan, đồng thời cũng là môi trường phức tạp, chứ hang nghìn loại protein với hàm lượng rất khác nhau. Dựa theo chức năng, có thể phân chia protein huyết thanh các nhóm sau: Chức năng miễn dịch: bao gồm các Ig ( đó là IgA, IgG, IgM, IgD, IgE) và các bổ thể tham gia vào quá trình bảo vệ cơ thể như: tăng thực bào, phản ứng đạc hiệu với kháng nguyên ( peptide, vi khuẩn, virus, …). Chức năng đông máu: gồm các chất đông máu và các chất chống đông ( AT III, protein C, protein S … ) tham gia vào quá trình đông máu và bảo vệ cơ thể. Duy trì áp suất keo, độ nhớt của máu: trong huyêt thanh, protein tạo thành dung dịch keo để duy trì áp suất thẩm thấu, sức căng bề mặt và tính đệm. Chức năng xúc tác: enzyme có chức năng xúc tác cho các phản ứng của các quá trình sinh học từ đơn gian đến phức tạp nhất. Vận chuyển các chất: vận chuyển chất dinh dưỡng, nước, muối đến các tổ chức và vận chuyển các chất thải, chất bã qua thận, phổi, mồ hôi, hệ tiêu hóa như: transferring vận chuyển sắt, haptoglobin vận chuyển HST tự do; vận chuyển lipid, cholesterol. Vận chuyển các protein cần thiết để tổng hợp các tổ chức tế bào và mô. Chức năng điều hòa: những protein này tuy có hàm lượng rất nhỏ ( mg/ml) nhưng có vai trò rất quan trọng trong mọi hoạt động của cơ thể. Chúng bao gồm các hormone, cytokine, các protein ức chế đặc hiệu enzyme. I.1.4. Phân loại protein trong huyết thanh theo Putnam Dựa trên quan điểm về chức năng, Putnam ( 1975 1987) đã phân loại vá protein trong huyết thanh thành các nhóm chính: Protein tiết ra từ các mô rắn, các immunoglobulin miễn diuchj, các phối tử trung gian, các phối tử địa phương, các chất tạm thời, sản phẩm giải phóng từ các mô, các chất tiết bất thường và các protein ngoại lai. Hệ thống phân laoij này được thừ nhậ rộng rãi và trích dẫ lại trong các nghiên cứu của Abderson ( 2002). I.1.5. Ý nghĩa của việc nghiên cứu hệ protein huyết thanh Huyết thanh là một hệ protein khá toàn diện, là phiên bản lướn nhất và cũng là một mẫu nghiên cứu hấp dẫn. Sựu hấp dẫn của huyết thương đối với việc chuẩn đoán bệnh được quyết định bởi hai đặc trưng: (i) mẫu có thể lấy dễ dàng và an toàn, (ii) mẫu không chỉ phản ánh toàn diện kiểu hình người mà còn cho biết trạng thái cảu cơ thể ở một thời điểm đặc biệt nào đó. Trong khi đó, những mấu khác như nước bọt, nước mắt, nước tiểu, da, tóc chỉ được coi là một tập con nhỏ của huyết tương hoặc mang tính địa phương và phản ánh hoạt động cảu tế bào. Huyết thanh là một thành phần quan trọng trong máu, chứ nhiều protein có nuồn gốc và chức năng khác nhau, tác động lên nhiều cơ quan, nhiều quá trình sinh học khác nhau trong cơ thể. Chính vì vậy phần protein phức tạp của huyết thanh bắt nguồn từ nhiều nguồn gốc mà việc nghiên cứu hệ protein huyết thanh hứa hẹn mang lại nhiều thông tin bổ ích đẻ phát triển các công tác nghiên cứu, chuẩn đoán và chữ trị nhiều bệnh khác nhau, đặc biệt là các bệnh trao đổi chất như đái tháo đường và các bệnh ung thư. Những thay đổi bất thường về thành phần protein huyết thanh chắc chắn có liên quan đến các quá trình bệnh lý ( bảng 1). Nói cách khác, huyết thanh là dạng mẫu đặc biệt, chứa đựng nhiều thông tin cần thiết cho việc nghiên cứu và chẩn đoán bệnh, vì thế việc sử dụng huyết thanh cho mục đích nghiên cứu là cách tiếp cận hợp lý, đã và đang được minh chứng qua những thành tự được trong nhiều thập kỷ qua. Thực tế là nhiều loại protein trong huyết thanh đã được nghiên cứu trước khi chứng ta biết đến sự tồn tại của gen. Năm 2002 Adkins và cộng sự bằng phương pháp sắc ký lỏng khối phổ đã phát hiện được 490 loại protein khác nhau trong huyết thanh. Năm 2004, Chan và cộng sự bằng phương pháp điện di, sắc ký lỏng đa chiều – khối phổ đã phát hiện được 1444 protein và gần đây nhất 2005, theo kết quả xác định và so sánh của 35 phòng thí nghiệm trong dự án proteome huyết tương người của HUPO ( Human Proteome Organization), cin số này đã là 3020. Lượng thông tin phong phú do các nghiên cứu về proteome huyết thanh thu được hoàn toàn bổ trợ cho những thông tin di truyền về các nghiên cứu genome. Với những cải tiến nhanh chóng, cá kỹ thuật phân tích proteomics đang trở thành cơ sở cho sự phát triển của genome. Với những cải tiến nhanh chóng, các kỹ thuật phân tích proteomics đang trở thành cơ sở cho sự phát triển của genomics chức năng. Sự phối hợp giữa proteomics và genomics sẽ đóng vai trò chủ đạo trong những nghiên cứu về sinh – y học, là nền tảng cho sự phát triển các sản phẩm chuẩn đoán và chữa bệnh tương lai. I.2. UNG THƯ MÁU I.2.1. Ung thư máu là gì Ung thư máu như máu trắng, ung thư hạch, đa u tủy đáp ứng thuốc tốt hơn so với các khối u rắn. Đa u tủy (hoặc u tủy) là một loại ung thư máu trong tủy xương cũng có loại thuốc mới nhắm thắng vào khối u và có thể kéo dài thời gian thuyên giảm. Ung thư máu được coi là hiếm, khi nó xếp hạng thứ 9 và 10 trong danh sách của hầu hết các bệnh ung thư phổ biến. Trong số đó, đa u tủy phổ biến thứ 2, tỉ lệ 1/100,000 người mắc bệnh u tủy. Tại Singapore, hàng năm có khoảng 80 đến 100 trường hợp. Tích lũy lại, sẽ có khoảng 500 đến 700 người u tủy tại một thời gian nhất định vì nó có thể được điều trị tầm xoát (không hoàn toàn khỏi bệnh) và giúp bệnh nhân kéo dài tuổi thọ lâu hơn. Trong khi ung thư hạch là một túi hỗn hợp của hơn 40 loại bệnh ung thư máu, u tủy liên quan đến bệnh ung thư của các tế bào huyết tương chiếm khoảng một phần trăm các tế bào trong tủy xương. Chức năng của các tế bào huyết tương giúp sản xuất kháng thể để chống nhiễm trùng. Trong u tủy, cơ thể sản xuất lượng bạch cầu quá mức dẫn đến sự hình thành của khối u trong tủy xương được gọi là myelomas. Nó có thể ăn vào xương gây đau xương hoặc gãy xương và cũng có thể gây suy thận vì protein quá nhiều trong máu và thiếu hồng cầu. Sự phát triển tế bào u tủy thường ảnh hưởng đến những người trong độ tuổi 60 và cao hơn mặc dù bệnh nhân có thể là trẻ ở tuổi 40, có một tỷ lệ thấp trong số các người châu Á tuy nhiên so với người Mỹ da đen thì nguy cơ mắc bệnh cao hơn người da trắng. “Tuy nhiên, u tủy thường phát hiện sớm và trở thành nặng theo quá trình lão hóa. Mặc dù hầu hết các bệnh nhân thường có dấu hiệu đau xương, thiếu máu hoặc suy thận. Đây không phải triệu chứng bình thường được chẩn đoán khi bệnh nhân phát hiện khi kiểm tra sức khỏe tổng quát, và có dấu hiệu bất thường trong máu”: bác sĩ Daryl Tan giải thích. Một bệnh nhân của ông, 56 tuổi là một trường hợp bệnh nhân thiếu máu và lượng protein trong máu cao và có nhiều dấu hiệu bất thường trong máu. Sau đó, ông được gởi cho bác sĩ Daryl Tan làm sinh thiết tủy xương và phát hiện u tủy giai đoạn đầu. Khi chúng tôi nhận bệnh nhân, ở giai đoạn đầu ông đã không phát triển các vấn đề về thận hoặc gãy xương và ông ta đang được hóa trị liệu. I.2.2. Nguyên nhân gây ung thư máu I.3. Proteomic trong ung thư máu Phần này nói về các biomarker Proteomics trong nghiên cứu ưng thư là nghiên cứu hệ protein để tìm kiếm những protein chỉ thị cho các phương pháp chẩn đoán mới, kháng nguyên để tạo vaccine cũng có thể là những yếu tố tác nhân gây độc khác, hay được gọi là biomarker. Phần này các cậu cop lại hộ d với. hix từ bản tl proteomic trong phát hiện ung thư đó được mấy trang đó. II. PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH HỆ GLYCOPROTEIN TRONG HUYẾT THANH XÁC ĐỊNH BỆNH UNG THƯ MÁU Tiến bộ gần dây trong nghiên cứu protein đã cung cáp cơ họi cho việc tìm kiếm các biomarker trong huyết thanh. SELDI-TOP-MS là công cụ mới đã được chứng minh rằng cso khả năng mạnh me trong việc phát hiện các biomarker tiềm năng. Gần đây SELDI- TOP-MS đã được sử dụng thành công để xây dựng các biomarker đối với các bệnh ung thư khác nhau như ung thư tuyến tiền liệt, ung thư bàng quang, ung thư buồng trứng, ung thư phổi, ung thư ruột kết, ung thư vú và ung thư tuyến tụy…. Sử dụng SELDI-TOP-MS để phân tịch các proteome các dòng tế bào bạch cầu, dòng hỗn hợp (MLL) và bệnh bạch cầu cấp dòng tủy. Sự khác biệt trong biểu hiện protein được báo cso trong tất cả các dong MLL, AML, và ALL. Một số protein 8,3kDa đã được tìm thấy thể hiện ở mức độ cao trong ALL và đã được xác định như 1 mẫu đầu C bị cắt ngắn sau khi bị ubiquitin hóa và thủy phân bằng trypsin. Trong nghiên cứu của 1 nhóm tác giả người Trung Quốc gần đây lần đầu tiên sử dụng công nghệ SELDI-TOF MS cho tất cả các mẫu huyết thanh thu thập được sau đó tinh khiết các peak protein của các biomarker tiềm năngn bởi HPLC và cuối cùng xác định chúng bằng LC-MS/MS. II.1. Chuẩn bị mẫu 178 mẫu huyết thanh được thu thập từ 94 bệnh nhân bị bệnh bạch cầu lympho cấp tính (ALL), 30 bệnh nhân bị bệnh bạch cầu u tủy cấp tính (AML) và 54 người khỏe mạnh. Mẫu huyết thanh thu thập được ngay lập tức ly tâm 15.000 vòng/phút ở 4°C trong 10 phút. Sau đó phân phối các mẫu vào các tube (20µl/tube) và được bảo quản ở -80°C để phục vụ cho các phương pháp nghiên cứu tiếp theo. II.2. Phân tích hệ protein trong mẫu huyết thanh bằng phương pháp SELDI-TOF-MS Các loại protein trong mẫu huyết thanh đã được xác định bởi SELDI-TOF-MS bằng cách sử dụng 8 loại đánh dấu định dạng tại chỗ WCX2 (trao đổi cation yếu) trên bản proteinchip arrays. Quy trình được thực hiện như sau: 1. Mẫu huyết thanh được giã đông từ từ trên đá, ly tâm 10.000 vòng/phút ở 4°C trong 5 phút. 2. Lấy 10µl mẫu được biến tính bằng cách bổ sung 20µl dung dịch đệm U9 (9 M urea, 2% CHAPS, 50 mM Tris-HCl, 1% DTT, pH 9.0), votex ở 4°C trong 30 phút. 3. Mẫu pha loãng trong 108µl dung dịch đệm (0.1 M sodium acetate, pH 4.0). 4. Lấy 100µl mẫu huyết thanh đã pha loãng lai với WCX2 trên bản proteinchip. Các mẫu được giữ bởi 1 bioprocessor (Ciphergen Biosystems) và được kích hoạt hai lần với 150µl đệm (0.1 M sodium acetate, pH 4.0) ở nhiệt độ phòng trong 5 phút. Mẫu huyết thanh pha loãng để phản ứng với bề mặt của chip WCX2 trong 60 phút ở nhiệt độ phòng. 5. Sau đó, mỗi điểm được rửa 3 lần với bộ dung dịch đệm ở những PH khác nhau và loại bỏ các loại protein không lai. 6. Làm khô bề mặt mảng chip trong không khí. Bổ sung 1µl giá thể axit bão hòa (SA) trong ACN50% và TFA 0,5%, để khô. 7. Phân tích khối phổ được thực hiện trên PBS II proteinchip đọc (Ciphergen Biosystems). Phát hiện các peak của phổ khối đã được phân tích bằng cách sử dụng phần mềm ProteinChip Biomarker version 3.1 (Ciphergen Biosystems). Các quang phổ khối lượng của các protein được tạo ra bằng cách sử dụng trung bình của 90 bức ảnh tia laser tại một cường độ laser 150-160 đơn vị tùy ý, và độ nhạy phát hiện đã được thiết lập ở mức 8. Đối với thu thập dữ liệu của các protein trọng lượng phân tử thấp, phạm vi phát hiện đã được thiết lập 5-20 kDa cho tất cả các mẫu. M / z của mỗi đỉnh được định lượng (tỷ lệ S / N> 5) đã được xác định theo tiêu chuẩn bên ngoài hiệu chuẩn (Ciphergen Biosystems). M / z đỉnh mẫu với hơn 2000 m / z được bình thường hóa với Biomarker wizard để biên dịch tất cả quang phổ và tự động phát hiện định lượng đỉnh khối lượng. 8. Tin sinh học và thống kê sinh học 9. Mẫu huyết thanh được chia thành hai nhóm, một nhóm thực nghiệm và 1 nhóm thử nghiệm. Bốn mươi lăm mẫu từ bệnh nhân bị bệnh ALL và 34 người khỏe mạnh đã được chọn ngẫu nhiên cho nhóm mẫu thực nghiệm. Để đánh giá tính chính xác và hợp lệ của các cây phân loại, 49 mẫu từ bệnh nhân bị bệnh ALL và 50 mẫu để so sánh (20 mẫu từ người khỏe mạnh và 30 mẫu từ bệnh nhân bị bệnh AML) được lựa chọn cho các thiết lập thử nghiệm. 10. 11. Tập hợp các phổ của các mẫu huyết thanh của mẫu thực nghiệm được đơn giản hóa nhờ phần mềm Ciphergen ProteinChip (phiên bản 3.1). Các peak được thực hiện bởi phần mềm Biomarker Wizard. Hai mẫu thử nghiệm được sử dụng để so sánh cường độ khác nhau của các trường hợp và của các nhóm mẫu. Giá trị tới hạn p=0,05. Cường độ của các peak được lựa chọn được chuyển đến phần mềm Pattern Biomarker (BPS) để xây dựng cây phân loại của bệnh ALL. Căn cứ vào độ cao của các peak, một ngưỡng đã được xác định bởi BPS để phân loại các nút gốc thành 2 nút con. Nếu cường độ đỉnh cao của một mẫu mù thấp hơn hoặc bằng ngưỡng, đỉnh cao này sẽ được dán nhãn là "nút con bên trái." Cường độ cao điểm cao hơn ngưỡng này sẽ được đánh dấu là "nút con bên phải." Sau khi ra quyết định, tập mẫu thực nghiệm đã được tìm thấy sẽ được phân biệt với lỗi ít nhất. 12. Tất cả các cường độ protein cao điểm của các mẫu trong tập mẫu thử nghiệm được đánh giá bởi BPS sử dụng mô hình phân loại. Các mẫu ALL và kiểm soát sau đó được phân biệt dựa trên những đặc điểm cá nhân proteomic của họ. Nhạy cảm đã được định nghĩa là xác suất dự đoán tất cả các trường hợp, và đặc hiệu đã được định nghĩa là xác suất dự đoán các mẫu kiểm soát. Một tiên đoán giá trị tích cực phản ánh xác suất của tất cả các kết quả xét nghiệm là dương tính. II.3. Phân đoạn Protein Mẫu huyết thanh từ người khỏe mạnh và bệnh nhân đã được lựa chọn cho việc tinh sạch của bốn loại protein biomarker. Mẫu huyết thanh được trộn với dung dịch đệm U9 (9 M urea, 2% CHAPS, 50 mM Tris-HCl, 1% DTT, pH 9.0) và ủ trong 30 phút ở nhiệt độ phòng. Mẫu sau đó được pha loãng trong 5ml dung dịch đệm WCX (50 mM NaAc, pH 4.0) và được nạp vào cột CM Ceramic Hyper D WCX SPE (6 × 10 mm, Pall Life science, USA). Sau khi rửa với 2ml dung dịch đệm WCX, cột sẽ được rửa với 5ml dung dịch đệm rủa giải (2 M NaCl, 50 mM NaAc, pH 4.0) với tốc độ dòng chảy là 5 ml/phút. Các phần rửa giải sẽ được tinh chế tiếp bằng phương pháp HPLC. II.4. Tinh sạch các chỉ thị protein bằng phương pháp HPLC HPLC được thực hiện bằng cách sử dụng máy SCL-10AVP (Shimadzu, Japan) với 1 cột C18 Sunchrom (250 x 4,6mm, kích thước hạt 5µm, 300A°) và 1 cột bảo vệ C18 (10 x 3 mm). Giai đoạn di động bao gồm các dung môi A (ACN 5%, TFA 0,1% ) và dung môi B (ACN 90%, TFA 0,1%). Tách HPLC đã đạt được với một gradient dung môi tuyến tính: 100% (0 phút) -15% B (15 phút) 65% B (65 phút) -100% B (100 phút) với tốc độ dòng chảy 0,5 ml /phút. Các chất rửa giải ra ngoài được phát hiện ở nhiều bước song 214, 254 và 280 nm. Mỗi peak được thu thập và tập trung sử dụng SpeedVac, và sau đó phân tích bằng cách sử dụng AXIMA-CFRTM kết hợp với MALDI-TOF-MS (Shimadzu/Kratos, Manchester, UK) trong chế độ tuyến tính để theo dõi các protein chỉ dấu sinh học với α-cyano-4-hydrorycinnamic acid (CHCA). II.5. Xác định các protein biomarker bằng phương pháp LC-MS/MS [...]... CTAP-III và PF4 bị bắt giữ và phát hiện trong huyết thanh người khhoer mạnh nhưng không trong tất các bệnh nhân, và các mảnh của C3a có trong huyết thanh bệnh nhân nhưng không có trong người khỏe mạnh Hình 5 IV THẢO LUẬN Trong nghiên cứu tác giả thu được quang phổ khối của protein huyết thanh từ người bệnh và người thư ng bằng cách sử dụng SELDI-TOP-MS trong suốt quá trình nghiên cứu Chúng tôi đã thử... biomarker có khả năng Mẫu huyết thanh từ các bệnh nhân được sử dụng để tinh sạch 2 biomarker protein trên quy định ( 8137 m/z và 8937 m/z); mẫu huyết thanh từ các đối tượng sức khỏe được kiểm soát được sử dụng để tinh sạch 2 biomarker protein dưới quy định ( 7769 m/z và 9296 m/z) trong huyết thanh của các bệnh nhân ALL sử dụng phần mềm WCX SPE và HPLC C18 Hình 3 chỉ ra kết quả phân tích MALDI-TOP-MS của... trung hòa trung gian chứng viêm của phản ứng miễn dịch bẩm sinh C3a đại diện cho 1 biomarker của chứng viêm C3a được tìm thấy trong các dịch ascetic của bệnh nhân ung thư buồng trứng, Lee cho rằng C3a bị gia tăng ở bệnh nhân viêm gan C, ung thư biểu mô tế bào gan HCV liên quan Mảnh C3a 8,1kDa ddowcj tìm thấy ở lần đầu tiên Tóm lại chúng tôi xác định được 1 tập hợp các peak protein từ các mẫu huyết thanh. .. . proteomic trong phát hiện ung thư đó được mấy trang đó. II. PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH HỆ GLYCOPROTEIN TRONG HUYẾT THANH XÁC ĐỊNH BỆNH UNG THƯ MÁU Tiến bộ gần dây trong nghiên cứu protein đã cung cáp. các bệnh ung thư khác nhau như ung thư tuyến tiền liệt, ung thư bàng quang, ung thư buồng trứng, ung thư phổi, ung thư ruột kết, ung thư vú và ung thư tuyến tụy…. Sử dụng SELDI-TOP-MS để phân. trong những nghiên cứu về sinh – y học, là nền tảng cho sự phát triển các sản phẩm chuẩn đoán và chữa bệnh tương lai. I.2. UNG THƯ MÁU I.2.1. Ung thư máu là gì Ung thư máu như máu trắng, ung