các phương pháp nhân giống truyền thống

MỤC LỤC1. Giới thiệu chung:12. Phân loại phương thức nhân giống:12.1 Sinh sản vô tính:12.1.1 Cơ sở sinh học của phương pháp22.1.2 Ưu điểm và nhược điểm của phương pháp giâm và chiết cành22.1.3. Kĩ thuật giâm cành và chiết cành32.1.4. Những điều cần lưu ý trong kĩ thuật giâm và chiết cành:32.2 Sinh sản hữu tính:102.2.1 Phương pháp gieo hạt112.2.2 Gieo hạt ươm cây trong bầu123.Ứng dụng phương pháp gieo hạt invitro:133.1 Mục đích của phương pháp:143.2 Phương pháp tiến hành:153.2.1 Ưu điểm, nhược điểm của phương pháp153.2.2 Các bước tiến hành164. Kết Luận:18

CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT NHÓM 3: ĐỀ TÀI: CÁC PHƯƠNG PHÁP NHÂN GIỐNG TRUYỀN THỐNG MỤC LỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO Giới thiệu chung: Từ xa xưa ông cha ta biết nhân giống trồng phương pháp vơ tính truyền thống giâm cành, chiết cành, ghép cành ; phương pháp hữu tính gieo hạt… Đánh giá, nhận thức vai trò, tầm quan trọng yếu tố giống việc góp phần nâng cao suất, chất lượng, sản lượng hiệu kinh tế trồng mang lại Ngày nay, người ta biết cách giữ lại nhân lên có nhiều đặc tính tốt nhiều phương pháp khác nhau…Từ lương thảo, ăn quả, gỗ quý đến có giá trị thẫm mỹ cao , thảo dược v.v Phân loại phương thức nhân giống: 2.1 Sinh sản vơ tính: Sinh sản vơ tính hình thức sinh sản cần thể gốc Cơ thể gốc tách thành nhiều phần, phần cho cá thể SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT Cơ sở tế bào học sinh sản vơ tính phân bào ngun nhiễm Cơ thể sinh giống hệt bố mẹ Có hình thức sau: *Sinh sản vơ tính tự nhiên:thực vật có khả tạo thể từ phận thân bò (dâu tây, rau má), thân rễ (cỏ gấu), thân củ(khoai tây), (thuốc bỏng), rễ củ (khoailang) *Sinh sản vơ tính nhân tạo gồm: giâm (cành, lá, rễ), chiết (cành), ghép (cành, chồi), nuôi cấy mơ- tế bào Hình thức nhân giống vơ tính nhân tạo: Một số phương pháp nhân giống vơ tính thực vật ứng dụng rộng rãi nông nghiệp - Phương pháp giâm cành chiết cành 2.1.1 Cơ sở sinh học phương pháp[5] Theo viện sĩ Maximop, phận cây, đến tế bào, có tính độc lập mặt sinh lí cao Chúng có khả khơi phục lại quan, phận không đầy đủ trở thành cá thể hoàn chỉnh Trong thể thực vật, nước chất khống hồ tan vận chuyển từ rễ lên theo mạch gỗ, sản phẩm hữu sản xuất chuyển xuống gốc (rễ, củ, … ) theo mạch rây Khi ta cắt đứt đường vận chuyển theo mạch rây, sản phẩm hữu tập trung tế bào vỏ phần bị cắt (phía ) Các chất hữu với chất điều hoà sinh trưởng Axin nội sinh (được tổng hợp chuyển xuống) kích thích hoạt động tượng tầng hình thành mơ sẹo, sau hình thành rễ từ mơ sẹo chỗ bị cắt, gặp điều kiện thuận lợi Quá trình hình thành rễ bất định chia làm ba giai đoạn: - Giai đoạn 1: Tái phân chia tượng tầng (mô phân sinh bên) - Giai đoạn 2: Xuất mầm rễ - Giai đoạn 3: Sinh trưởng kéo dài rễ, rễ đâm qua vỏ 2.1.2 Ưu điểm nhược điểm phương pháp giâm chiết cành[4,5] - Ưu điểm nhược điểm phương pháp giâm cành: + Hệ số nhân cao + Cây giữ nguyên đặc tính di truyền bố mẹ + Cây sớm hoa, kết SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MƠ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT + Cần chăm sóc chu đáo thời gian đưa từ vườn ươm vào sản xuất đại trà - Ưu điểm nhược điểm phương pháp chiết cành + Cây giữ nguyên đặc tính di truyền bố mẹ + Thời gian có giống nhanh, sớm hoa, kết + Cây thấp, tán gọn + Hệ số nhân thấp 2.1.3 Kĩ thuật giâm cành chiết cành[1,4,5] * Kĩ thuật giâm cành gồm bước sau: - Cắt cành: Cắt vát, tránh dập nát đoạn 10 - 15 cm cành bánh tẻ (không non , không già quá) - Giâm cành: Cành cắt cắm trực tiếp, xử lí chất kích thích rễ (nhóm Auxin n), sau cắm vào giâm - Chuyển vào vườn ươm: Khi rễ mọc nhiều đủ dài cành giâm, chuyển vào vườn ươm chăm sóc chu đáo - Đưa vào trồng đại trà: Khi đủ rễ lá, đưa vào trồng đại trà * Kĩ thuật chiết cành gồm bước sau: - Cắt khoanh vỏ: Khoanh vòng vỏ quanh cành chiết (khoảng cách vịng lần đường kính cành chiết) Bóc vỏ cạo lớp tế bào dính lõi gỗ - Bó bầu: Sau khoanh vỏ, để khô nhựa (từ vài đến vài ngày t) bó bầu Trước bó bầu xử lí chất kích thích rễ (nhóm Auxin n) cần thiết Nguyên liệu bó bầu thường dùng rễ bèo Nhật Bản phơi khô + phân chuồng + đất phù sa Sau phủ kín vết cắt, dùng giấy polyetilen bọc ngồi, buộc kín hai đầu, tưới nước để giữ độ ẩm cao suốt trình rễ cành chiết - Cắt cành chiết: Khi thấy xuất nhiều rễ bầu, rễ bắt đầu chuyển sang màu vàng nâu, cắt rời cành khỏi mẹ (chỗ cắt cách bầu khoảng cm phía ) Sau đem trồng vườn ươm tiếp tục chăm sóc 2.1.4 Những điều cần lưu ý kĩ thuật giâm chiết cành: Để cơng việc giâm chiết cành có hiệu cao, cần ý đến nhân tố mơi trường yếu tố nội thích hợp cho việc rễ Đó ánh sáng, nhiệt độ, độ ẩm, chất nền, chất SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT bó bầu, chất chất lượng giống cuối việc sử dụng hợp lí chất kích thích rễ thuộc nhóm Auxin [4,5] a Phương pháp chiết cành[2] Cơ sở khoa học phương pháp sau ta tiến hành khoanh vỏ, ảnh hưởng chất nội sinh tế bào auxin, cytokinin gặp điều kiện nhiệt độ, độ ẩm thích hợp dễ hình thành chọc thủng biểu bì đâm ngồi - Cành chiết lấy giống chọn lọc thời kỳ sinh trưởng khoẻ, có suất cao, ổn định khơng có sâu bệnh nguy hiểm gây hại Chọn cành có đường kính từ - cm tầng tán phơi ngồi ánh sáng, khơng chọn cành na, cành tán cành vượt Sau 60 - 90 ngày, tuỳ thuộc vào thời vụ chiết, cành chiết rễ Khi cành chiết có rễ ngắn chuyển từ màu trắng sang màu vàng ngà cắt cành chiết đưa vào vườn ươm Thời vụ chiết thích hợp cho đa số chủng loại ăn vụ xuân vụ thu b Phương pháp giâm cành.[2] Giâm cành phương pháp nhân giống trồng quan sinh dưỡng Cơ sở khoa học phương pháp tương tự nhân giống phương pháp chiết cành Đối với giống ăn quả, giống kho rễ, sử dụng phương pháp đòi hỏi phải có trang thiết bị cần thiết để khống chế điều kiện nhiệt độ, ẩm độ ánh sáng nhà giâm * Phương pháp tiến hành.[2,4] Đối với ăn dạng gỗ cứng, có rụng mùa đông, thường lấy cành giâm bước vào thời kỳ ngủ nghỉ Đối với ăn gỗ mềm, không rụng thường lấy cành giâm vào mùa sinh trưởng Nền giâm sử dụng cát khô, than bùn, xơ dừa đất tuỳ thuộc vào điều kiện giâm cành, thời vụ giâm, chủng loại giống loại cành giâm khác Sau giâm cần tưới ướt bề mặt thường xuyên dạng phun sương để tránh thoát nước gây rụng Khi cành giâm có đợt lộc ổn định sinh trưởng có đầy đủ rễ tiến hành ngơi chăm sóc đạt tiêu chuẩn xuất vườn SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT Giai đoạn từ giâm có rễ lộc ổn định cần tiến hành nhà giâm, cần chọn thời điểm có điều kiện thời tiết thuận lợi ngơi điều kiện có mái che * u cầu giống gốc ghép:[5] - Giống làm gốc ghép phải sinh trưởng khoẻ có khả thích ứng rộng với điều kiện địa phương - Giống làm gốc ghép phải có khả tiếp hợp tốt với thân cành ghép - Giống làm gốc ghép phải có khả chống chịu sâu bệnh có khả chống chịu với điều kiện ngoại cảnh bất thuận - Giống làm gốc ghép phải sinh trưởng nhanh, dễ gây giống, mọc mầm phụ gốc * Những yêu cầu kỹ thuật để nâng cao tỷ lệ ghép sống tỷ lệ đạt tiêu chuẩn xuất vườn:[4,5] - Chăm sóc trước ghép: sau ngơi cần áp dụng đầy đủ quy trình khác kỹ thuật chăm sóc để gốc ghép sớm đạt tiêu chuẩn ghép Trước ghép tuần cần tiến hành vệ sinh vườn gốc ghép tăng cường chăm sóc để có nhiều nhựa, tượng tầng hoạt động tốt - Chọn cành, mắt ghép tốt: cành ghép lấy từ vườn chuyên lấy cành ghép vườn sản xuất với mang đầy đủ đặc tính giống muốn nhân Cành ghép chọn tầng tán, khơng có đối tượng sâu bệnh nguy hiểm gây hại Tuổi cành ghép chọn phù hợp tuỳ thuộc vào thời vụ ghép khác Trong điều kiện cần vận chuyển xa, cần bảo quản điều kiện đủ ẩm, tránh nhiệt độ cao - Chọn thời vụ ghép tốt: điều kiện khí hậu miền Bắc nước ta, đa số giống ăn tập trung ghép vào vụ xuân vụ thu - Thao tác kỹ thuật ghép: khâu kỹ thuật có tính chất định, phụ thuộc vào thành thạo người ghép Các thao tác ghép cần tiến hành nhanh xác - Chăm sóc sau ghép: tất khâu kỹ thuật từ mở dây sau ghép, xử lý gốc ghép, tỉa mầm dại, tưới nước làm cỏ, bón phân, tạo hình ghép cơng tác phòng trừ sâu bệnh hại cần tuân thủ cách nghiêm ngặt, kỹ thuật * Các phương pháp ghép: SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT Tuỳ thuộc vào mục đích áp dụng, đối tượng ăn mà sử dụng phương pháp khác Một số phương pháp ghép chủ yếu áp dụng để nhân giống ăn chia thành hai nhóm ghép mắt ghép cành + Nhóm phương pháp ghép mắt.[2,5] - Phương pháp ghép mắt cửa sổ Phương pháp ghép mắt cửa sổ thường áp dụng với chủng loại ăn dễ bóc vỏ, có thân cành dễ lấy mắt, mắt ghép lớn Trên gốc ghép, cách mặt đất 25 - 30 cm, chọn vị trí khơng có nhánh mầm ngủ, tiến hành mở vết ghép có dạng cửa sổ bóc bỏ phần vỏ Trên cành ghép, chọn vị trí có mầm ngủ, cắt phần khoanh vỏ có chứa mầm ngủ với kích thước tương tự nhỏ vết mở gốc ghép Đặt mắt ghép vào gốc ghép dùng dây nilon lại, lưu ý kín dây từ lên lượt để tránh nước mưa thấm vào cố định dây ghép Sau ghép 15 - 20 ngày tuỳ thuộc vào chủng loại ăn quả, tiến hành cởi dây ghép Nếu mắt ghép cịn xanh sau - ngày tiến hành cắt gốc ghép, áp dụng biện pháp kỹ thuật chăm sóc sau ghép - Phương pháp ghép mắt nhỏ có gỗ[5] Phương pháp ghép mắt nhỏ có gỗ áp dụng để nhân giống hồng, ăn có múi số chủng loại ăn khác Trên gốc ghép, độ cao cách mặt đất 25 - 30 cm, chọn vị trí khơng có nhánh mầm ngủ, tiến hành mở gốc ghép có dạng hình lưỡi gốc ghép Trên cành ghép, chọn vị trí có mầm ngủ, cắt lấy mắt ghép dạng hình lưỡi có phần gỗ tương tự gốc ghép Đặt mắt ghép vào gốc ghép dùng dây nilon lại, lưu ý kín dây từ lên lượt để tránh nước mưa thấm vào cố định dây ghép Trường hợp mắt ghép nhỏ so với vết mở gốc ghép đặt mắt ghép lệch bên để có phía tượng tầng trùng khớp Sau ghép 20 - 25 ngày tuỳ thuộc vào chủng loại ăn quả, tiến hành cởi dây ghép Nếu mắt ghép cịn xanh sau - ngày tiến hành cắt gốc ghép, áp dụng biện pháp kỹ thuật chăm sóc sau ghép + Nhóm phương pháp ghép cành - Phương pháp ghép áp [1,5] SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT Phương pháp ghép áp áp dụng chủ yếu để nhân giống trồng với số lượng nhỏ áp dụng với ăn khó nhân giống phương pháp khác Trên cành ghép gốc ghép, mở vết cắt có kích thước tương tự nhau, dài từ - 10 cm, áp hai vết cắt vào kín lại dây nilon, dùng dây buộc cố định gốc ghép thân chọn cành ghép Sau ghép khoảng 1,5 - tháng, tiến hành cởi dây ghép cắt gốc ghép Sau khoảng - 10 ngày, cắt tiếp phần gốc cành ghép tạo giống hoàn chỉnh - Phương pháp ghép cành bên[1,4] Phương pháp ghép cành bên sử dụng trường hợp gốc ghép khó bóc vỏ để sử dụng phương pháp ghép khác ghép mùa khô Trên gốc ghép, độ cao cách mặt đất 25 - 30 cm, mở vết cắt tương tự phương pháp ghép mắt nhỏ có gỗ có kích thước từ - cm Trên cành ghép, cắt lát cắt tạo vết cắt dài, có kích thước tương tự vết mở gốc ghép, giữ lại - mầm ngủ Cài cành ghép vào vết mở gốc ghép dùng dây nilon kín lại Cuốn dây nilon từ lên cố định dây lần thứ kín vết cắt, sau tiếp tục dây lượt lên cố định dây ghép Sau ghép 20 - 25 ngày, tiến hành cởi dây ghép đến vị trí cố định dây lần sau - ngày cắt gốc ghép Khi có - đợt lộc ổn định cắt tiếp phần cịn lại dây ghép - Phương pháp ghép đoạn cành[2,4] Phương pháp ghép đoạn cành sử dụng để nhân giống hầu hết đối tượng ăn thân gỗ Trên gốc ghép, độ cao cách mặt đất 25 - 30 cm, tiến hành cắt gốc ghép (có giữ lại vài gốc) Chọn cành ghép có đường kính tương tự với đường kính gốc ghép, cắt lát cắt tạo vết cắt dài - 2,5 cm, có - mầm ngủ Chẻ vết gốc ghép có chiều rộng sâu tương tự với kích thước vết cắt cành ghép Cài cành ghép vào gốc ghép cho có phía tượng tầng trùng khớp dùng dây nilon mỏng lại Trước hết nhiều vòng dây để cố định cành ghép vào gốc ghép, sau trải rộng dây nilon kín lượt xung quanh cành ghép, đưa dây nilon trở lại cố định dây gốc ghép Sau ghép 15 - 20 ngày, mầm ghép bắt đầu mọc xuyên qua dây cuốn, tiến hành biện pháp chăm sóc sau ghép SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT - Phương pháp ghép nêm Phương pháp ghép nêm sử dụng nhân giống vườn ươm ghép cải tạo vườn ăn Trên gốc ghép, cắt bỏ tồn thân tán vị trí phù hợp, chọn cành ghép cắt hai phía tạo thành hình nêm Chẻ đôi gốc ghép cài cành ghép cho phần tượng tầng phía ngồi gốc ghép cành ghép trùng khớp với Dùng dây nilon chặt cố định cành ghép với gốc ghép kín cành ghép để chống nước Sau cành ghép bật lộc, có - đợt lộc ổn định sinh trưởng tiến hành cắt bỏ dây ghép Sau áp dụng biện pháp chăm sóc sau ghép phương pháp ghép khác - Phương pháp ghép sửa chữa thân sửa chữa rễ Các phương pháp ghép sử dụng cần nối phần vỏ bị tổn thương cải tạo rễ bị gây hại Đối với phương pháp ghép sửa chữa thân, sử dụng đoạn cành giống ăn ghép nối lại phần vỏ qua vị trí bị tổn thương Trên cành ghép, cắt tạo vết cắt tương tự mở vết cắt phương pháp ghép cành bên dài từ - cm hai đầu đoạn cành Trên thân cây, bóc vỏ mở vết ghép có kích thước tương tự với vết cắt cành ghép Cài cành ghép vào thân kín lại dây nilon Khi vết ghép gắn liền, tiến hành cởi dây ghép Đối với phương pháp ghép sửa chữa rễ, tiến hành trồng gốc ghép xung quanh gốc cần ghép sửa chữa, cắt gốc ghép tạo vết cắt tương tự đoạn cành phương pháp ghép sửa chữa thân, bóc vỏ mở vết ghép có kích thước tương tự với vết cắt cành ghép Cài vết cắt gốc ghép vào thân kín vết ghép dây nilon vết ghép gắn liền, tiến hành cởi dây ghép.[4,5] 2.2 Sinh sản hữu tính:[7] Là kiểu sinh sản có hợp giao tử đực giao tử tạo nên hợp tử phát triển thành thể Có q trình hình thành hợp giao tử đực giao tử - Có trao đổi tái tổ hợp gen -Ln gắn liền với q trình giảm phân tạo giao tử - Bao gồm : Quá trình hình thành hạt phấn túi phôi, thụ phấn thụ tinh, hình thành hạt, SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT 2.2.1 Phương pháp gieo hạt: [4,5] Muốn nhân giống hạt cần ý: - Chọn giống: loại ngon, to, cùi dày, hạt nhỏ, có hương vị thơm ngon - Chọn để lấy hạt: Trong giống chọn, nên chọn tốt, mang đầy đủ đặc điểm giống cần nhân Cây tuổi vào thời kỳ sung sức, tán dày, sai quả, khơng có tượng cách năm, khơng sâu bệnh - Chọn quả: Quả to, có hình dạng đặc trưng cho giống, mã vỏ đẹp, để thật chín đầu cành ngang tán - Chọn hạt để gieo: Những hạt to, mẩy, cân đối, khơng óc vết sâu bệnh Tùy theo điều kiện cụ thể nơi gieo hạt ươm luống gieo bầu a Gieo hạt ươm luống: (ví dụ nhãn lồng)[1,2,5 ] Đất gieo hạt phải cày bừa kỹ đảm bảo tơi xốp, phẳng, nhặt cỏ, bón phân chừng - kg/m2, cho thêm lân Văn Điển vv Luống cần đảm bảo thoát nước tốt mùa mưa, thuận tiện lại chăm sóc, luống cao 10 - 15cm, chiều dài luống tùy địa vườn Hạt lấy xử lý cần gieo ngay, để lâu sức nảy mầm Để sau tuần tỷ lệ nảy mầm 5% nhiệt độ thích hợp cho hạt nảy mầm 25 độ C, nhiệt độ cao 30 độ C sức nảy mầm cao (>33oC) hạt sức nảy mầm Ngâm hạt nửa ngày, vớt cạo núm ngâm vào nước vôi sau - ủ vào cát ẩm - ngày, hạt nhú mầm hạt đậu tương gieo Khoảng cách gieo 12 x 6cm, khoảng 130 - 140 hạt/1m2 Đặt hạt nằm ngang, tránh phơi mầm lên xuống Độ sâu lấp hạt - 3cm Thường xuyên tưới nước đủ ấm, bảo đảm độ ẩm đất 70 - 80% độ ẩm bão hòa, xới xáo, phá váng, nhổ cỏ dại sau khoảng tháng bón thúc cho nước phân chuồng pha loãng 1: 10 hay phân N với nồng độ 1% Chú ý phòng trừ sâu bệnh kịp thời SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT Cấy (ra ngôi): Sau 2,5 - tháng cao 12 - 15cm đem trồng luống ươm khoảng cách 35x40cm theo nanh sấu Khi cịn nhỏ, nhãn thích bóng râm, làm giàn che gieo xen điền Sau gieo hạt năm chiều cao đạt 70 - 80cm, đường kính thân 1,2 - 1,5cm đánh bầu trồng 2.2.2 Gieo hạt ươm bầu:[1,5] Đây tiến kỹ thuật áp dụng nghề trồng ăn nói chung với nhãn nói riêng Ươm cât bầu có ưu điểm: -Chăm sóc bảo vệ dễ dàng thuận lợi, tiết kiệm công - Tiết kiệm dất vườn ươm: Trên diện tích 1m2 đạt 20 - 24 bầu - Đỡ tốn công cho việc đánh bầu đem trồng Không làm tổn thương rễ, tỷ lệ sống cao, phát triển nhanh khỏe 3.Ứng dụng phương pháp gieo hạt invitro: Có nhiều phương pháp đại ngày phát triển cách mạnh mẽ mà dựa sở phương pháp nhân giống truyền thống Bằng phương pháp gieo hạt ống nghiệm, nhà khoa học thuộc Viện Ứng dụng công nghệ vừa nhân giống thành cơng hai lồi lan hài q: Hài Hằng (đặc hữu Việt Nam) Hài Tam Đảo (đặc hữu Đông Dương), 2010 Tháng năm 2007, ghi nhận bất ngờ Cty Long Đỉnh gây nhiều ý cho nhà nuôi cấy mô thực vật ứng dụng công nghệ sinh học di truyền, lai tạo nhân giống Hiện tượng nhiều phong lan gieo hạt loài Dendrobium delacourri Guill nguồn gốc từ rừng miền Đông Nam Bộ (gieo từ tháng 12 năm 2006 phòng CNSH Cty Long Đỉnh) đến cho hoa in vitro; hoa lớn, hoàn chỉnh nở kéo dài 20 ngày điều kiện nuôi cấy Đây vấn đề đáng quan tâm mặt thực tiễn lý luận.[6] 3.1 Mục đích phương pháp: - Gia tăng lượng hoa lan thị trường - Nhân giống loài lan hiếm, nhân nhanh số lượng loài tự nhiên công tác bảo tồn giống SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang 10 CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT - Cung cấp để bán, giúp hạn chế khai thác hoang dại, kích thích quan tâm cơng chúng tạo nguồn thu ngân sách - Kết hợp với kĩ thuật lai giống nhân tạo lan khỏe mạnh có màu sắc đặc biệt.[3] - Tạo nhiều sản phẩm công nghệ sinh học thực vật độc đáo - Tiết kiệm lớn thời gian, nhân lực, vật lực việc tuyển chọn nhân giống thực vật.[6] 3.2 Phương pháp tiến hành: Trong thiên nhiên muốn làm hạt lan nảy mầm hạt lan phải bị nhiễm loại nấm kí sinh đó,người ta khám phá số loại nấm kí sinh giúp nảy mầm hạt lan,mỗi loài giúp nảy nở số giống lan mà - Rhizoctonia repens giúp nảy mầm loài Cattleya, Laelia, Angraecum, Cypripedium (Paphiopedilum) - Rhizoctonia mucoroides giúp nảy mầm Vanda, Phalaenopsis - Rhizoctonia lanugiosa giúp nảy mầm Oncidium, Odontoglossum Miltonoa.[3] 3.2.1 Ưu điểm, nhược điểm phương pháp: Ưu điểm: - Kết hợp với kĩ thuật lai giống tạo nhiều giống cung cấp cho thị trường Giúp bảo tồn loại lan quý hiếm,và nhân nhanh số lượng giúp cho công tác bảo tồn.[3,6] Nhược điểm: - - Trong thiên nhiên, hạt lan q nhỏ,khơng chứa chất dự trữ, có phơi chưa phân hóa, nên khơng thể phát triển theo cách bình thường việc làm cho hạt lan nảy mầm,phát triển thành trưởng thành vấn đề khó khăn Người ta tìm nhiều cách gieo hạt khơng thành công Đặc điểm hạt lan :hạt lan cần loại nấm để tiêu hóa vật chất hữu chủ đất,chyển hóa thành loại đường đơn giản giúp hạt lan nảy mầm giúp phôi phát triển.[3] 3.2.2 Các bước tiến hành:[3] - Mẫu lấy từ thiên nhiên SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang 11 CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT - Rửa mẫu dòng nước chảy 10 phút - Rửa mẫu xà phịng pha lỗng - Rữa mẫu nhiều lần bẵng nước cất sau cho vào tủ cấy vô trùng - Rửa mẫu cồn 70 độ 1-2 phút - Rửa mẫu nước cất vô trùng 2-3 lần - Ngâm mẫu Ca(OCl)2 thường xuyên lắc mẫu - Lặp lại nhiều lần nước cất vô trùng từ 3-4 lần cho - Nhúng vào cồn 900 hơ nhanh qua lửa đền cồn - Nhanh chóng đặt lan vào đĩa petri đậy nắp lại - Sau lan cắt gọt đầu, dùng dao xẻ dọc lan tách làm Quả lan chín - Dùng dao giữu vỏ quả, dùng kẹp lấy hết hạt đĩa peptri - Gieo hạt vào môi trường - Thí nghiệm lặp lại lần,mỗi lần SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang 12 CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT Kêt quả: Kết Luận: Tuy phương pháp mang lại nhiều kết khả quan nhiều lợi ích, bên cạnh biện pháp ngày bộc lộ nhiều hạn chế : giống nhân nhiều lần bị thối hóa giống, mắc nhiều bệnh hơn, suất giảm, phân ly Từ năm 70 đến nay,ở Việt Nam người ta nhân giống loại trồng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật Các nhà trồng lan khơng ngừng tìm kiếm giống lan để thỏa mãn hiếu kì đem bán Có hai cách để có giống lan - - Một là, sưu tập giống lan hoang dại rừng đem hóa, tạo điều kiện nhân tạo giống tự nhiên để lan hóa Phương pháp gặp nhiều rủi ro điều kiện môi trường không thuận lợi cho lan phát triển Hai là, tạo giốnglan lai mới, lan lai mang đặc tính tốt vựơt trội bố mẹ, thỏa mãn nhu cầu người thưởng thức lan Tuy nhiên hai lan lai với nhauđạt kết tạo trái cần phải kết hợp với phương pháp gieo hạt ống nghiệm để hạt lan nẩy mầm dễ dàng Có kiểm tra kết việc lai hai lan.[3] TÀI LIỆU THAM KHẢO: [1] PGS.TS Nguyễn Duy Minh, Ký hiệu sách: 634.044 V2747, Nhà Xuất Bản: Nông nghiệp, Năm xuất bản: 2003 SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang 13 CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT [2] Nguyễn Hiền, Các phương pháp nhân giống, Nhà xuất Phụ Nữ, 2011 [3] Luận Văn Nhân Giống Lan Bằng Gieo Hạt Invitro, Nguyễn Vũ Thị Hoàng Uyên, 2005, http://doc.edu.vn/tai-lieu/khoa-luan-nhan-giong-lan-dendrobium-bang-phuongphap-gieo-hat-in-vitro-36084/ [4]http://www.cuctrongtrot.gov.vn/Tech_Science.aspx? index=detail&type=a&idtin=217 [5] http://www.thuviensinhhoc.com/day-hoc/day-hoc-sinh-hoc-11/696-nhan-ging-votinh-thc-vt.html?start=2#ixzz2eP4htfN2 [6]http://www.longdinh.com/index.php/cnshxemtin/items/lan_gieo_hat_ra_hoa_invitr o.html [7] http://baigiang.violet.vn/present/show?entry_id=213385 SVTH: Phan Thị Thu Hiền Trang 14 ... vụ thu b Phương pháp giâm cành.[2] Giâm cành phương pháp nhân giống trồng quan sinh dưỡng Cơ sở khoa học phương pháp tương tự nhân giống phương pháp chiết cành Đối với giống ăn quả, giống kho... triển nhanh khỏe 3.Ứng dụng phương pháp gieo hạt invitro: Có nhiều phương pháp đại ngày phát triển cách mạnh mẽ mà dựa sở phương pháp nhân giống truyền thống Bằng phương pháp gieo hạt ống nghiệm,... biện pháp chăm sóc sau ghép phương pháp ghép khác - Phương pháp ghép sửa chữa thân sửa chữa rễ Các phương pháp ghép sử dụng cần nối phần vỏ bị tổn thương cải tạo rễ bị gây hại Đối với phương pháp