ổng quan về ngưu tất và các phương pháp xông sinh khác nhau của ngưu tất

Khi thu ho ch ng i ta th ng s ch b ng ph ng pháp xông sinh sau đó đem bán ra th tr ng... 1.2- Thành ph n hoá h c R có ch a các saponin, khi thu phân cho các sapogenin là acid oleanolic.

Ng u t t là m t v thu c đ c dùng khá ph bi n trong Y h c c truy n

v i nhu c u ngày càng t ng, đ c nh p tr ng vào n c ta t nh ng n m 1960

Hi n nay đã thích h p v i đi u ki n n c ta và phát tri n t t, đ c tr ng nhi u

n i nh t là đ ng b ng B c b nh : xã Tân Quang huy n V n Lâm t nh H ng

Yên, thôn Thi t Tr , huy n Khoái Châu t nh H ng Yên, xã Ninh Hi p huy n

Gia Lâm, trung tâm nghiên c u cây tr ng và ch bi n thu c Hà N i và m t s

n i khác Khi thu ho ch ng i ta th ng s ch b ng ph ng pháp xông sinh

sau đó đem bán ra th tr ng V y v n đ đ t ra là: t l l u hu nh dùng đ xông

là bao nhiêu, xông sinh xong c n s y nhi t đ bao nhiêu , b o qu n bao lâu

m i đ c s d ng đ đ m b o không đ c h i đ n s c kho con ng i, đ m b o

đ c ch t l ng c a thu c đ t đ c tiêu chu n d c đi n Viêt Nam và khu v c

Vì v y chúng tôi đ t v n đ M c đích: ánh giá hàm l ng l u hu nh còn t n

d , hàm l ng saponin toàn ph n, hàm l ng đ ng và đ c tính c p c a

d c li u đ c s ch v i các ph ng pháp xông sinh khác nhau”.Trên c s

đó có th đ xu t ph ng pháp xông sinh thích h p cho d c li u ch t l ng t t

và an toàn cho ng i s d ng đ t đ c m c đích trên, đ tài đ c ti n hành

nghiên c u v i m t s n i dung sau:

-Xông sinh ng u t t b ng các ph ng pháp khác nhau: V li u l ng

sinh, th i gian xông, nhi t đ s y

- ánh giá hàm l ng l u hu nh t n d , hàm l ng saponin, đ ng t

do,và đ c tính c p c a các m u d c li u

K IL

O B

O O

K S C O

M

Ph n I: T ng quan

1-T ng quan v ng u t t

1.1- c đi m th c v t, phân b và thu hái

V thu c Ng u t t là r ph i hay s y khô c a cây Ng u t t: Achyranthes

bidentata Blume h rau D n Amaranthaceae

Cây thu c th o cao kho ng 1m Thân m nh, lá m c đ i, hình tr ng,

đ u nh n, mép lá nguyên dài 5-12 cm C m hoa là bông đ u cành hay k lá

Hoa m c h ng lên nh ng khi bi n thành qu s m c qu p xu ng Qu nang, lá

b c còn l i và nh n thành gai cho nên v ng ph i có th m c vào qu n áo

Cây m c Trung qu c, Vi t Nam và các n c ông Nam Á

Tr ng b ng h t, đ ng b ng thì tr ng vào tháng 9-10 thu ho ch vào tháng

2-3 Vùng mi n núi tr ng vào tháng 2-3 thu ho ch vào tháng 9-10 Mu n l y

gi ng thì cây sau khi thu ho ch, c t b t r , c t b t thân và tr ng l i kho ng 4

tháng n a m i l y h t [2]

N ng su t hi n nay vào kho ng 1,2 t n m t hecta

1.2- Thành ph n hoá h c

R có ch a các saponin, khi thu phân cho các sapogenin là acid

oleanolic., ngoài ra còn có ecdysteron và inokosteron, glucose, galactose,

K IL

O B

O O

K S C O

O OH

 Tác d ng h cholesterol trong máu và h huy t áp [2 ]

 Ecdysteron và Inokosteron có tác d ng ch ng viêm,kháng khu n [8]

 L i ti u, h đ ng huy t, c i thi n ch c n ng gan [9]

K IL

O B

O O

K S C O

M

D c li u sau khi thu ho ch v ch t b ph n thân, r s ch đ t, ph i n ng

1-2 ngày, r a s ch b ng n c, đ ráo n c, x p vào xông sinh v i l ng sinh

xông và th i gian xông theo kinh nghi m t ng đ a ph ng.[8, 10]

 Ch bi n c truy n [10]

Khi s d ng làm thu c ng i ta ph i qua khâu ch bi n bào ch , có nhi u

ph ng pháp ch bi n khác nhau, tu theo các m c đích đi u tr ch ng b nh

Ng u t t r a s ch, thái phi n, đ ráo n c Sao cám nóng già, b c khói

tr ng, cho ng u t t phi n vào sao đ u đ n khi có màu vàng L y ra rây b cám

- Ng u t t trích r u

Ng u t t 10 kg

Ru u 2 kg

Ng u t t phi n sao nóng, phun r u vào sao đ n khô Ho c t m r u vào

ng u t t, 30 phút- 1 gi cho ng m r u; sau sao t i khô

- Ng u t t thán

em ng u t t sao đ n khi phía ngoài b đen hoàn toàn, bên trong vàng

đ m; có th trích r u sao đen nh trên

K IL

O B

O O

K S C O

M

- Ho t huy t thông kinh ho t l c: dùng trong các tr ng h p kinh nguy t

b , kinh nguy t không đ u

- Th cân, m nh gân c t, b can th n dùng cho các b nh đau x ng kh p,

đau x ng s ng, đ c bi t đ i v i kh p c a chân; sinh lý y u, ti u không t ch

đ c, làm gi m b c tóc

- Ch huy t: th ng dùng trong các tr ng h p ho đ c b c lên gây nôn ra

máu, ch y máu cam

- L i ni u, tr s i:dùng trong các tr ng h p ti u ti n đau bu t, ti u ti n

Diêm sinh còn g i là sinh, diêm vàng, hoàng nha, l u hoàng, th ch l u

hoàng, o i l u hoàng, tên khoa h c là sulfur Là m t nguyên t có s n trong

thiên nhiên hay do ch t nh ng h p ch t có l u hu nh trong thiên nhiên L u

hu nh có th t n t i d i d ng t do, hay sunphua nh pyrit, sunphua k m, ho c

sunphua các kim lo i khác, sunphua hydro…[6] Tu theo ngu n g c và cách

ch bi n khác nhau, l u hoàng có khi là b t màu vàng, có khi là nh ng c c to

không đ u màu vàng t i, h i có mùi đ c bi t, ít tan trong n c, trong r u và

ete, tan nhi u h n trong d u Khi đ t lên cháy v i ánh l a xanh và to ra mùi

khét khó th [8]

2.2- Thành ph n hoá h c

Thành ph n ch y u c a diêm sinh là ch t sulfur nguyên ch t, tu theo

ngu n g c và cách ch t o, có th có nh ng t p ch t nh : đ t, vôi, asen,

s t [8]

3.3- Công d ng và li u dùng [8]

Diêm sinh đ c dùng trong c đông và tây y.Theo tài li u c , diêm sinh

có v chua, tính ôn, có đ c, vào hai kinh tâm và th n Có tác d ng b ho , tráng

K IL

O B

O O

K S C O

M

d ng, b m nh môn chân ho , l u l i đ i tr ng, sát trùng Dùng trong nh ng

tr ng h p li t d ng, l lâu ngày, ng i già y u, h hàn mà bí đ i ti n, phong

th p Dùng trong còn có tác d ng sát trùng, ch a m n ng a, m n nh t

Ngày dùng 2-3g d i d ng thu c b t hay thu c viên

K IL

O B

O O

K S C O

M

Ph n II:Th c nghi m và k t qu 1- Nguyên li u, ph ng ti n và ph ng pháp nghiên c u

1.1- Nguyên li u, ph ng ti n

 Nguyên li u

- R ng u t t t i thu ho ch trung tâm nghiên c u cây tr ng và ch bi n

cây thu c Hà N i

- Diêm sinh l y m u t i m t s n i dùng đ ch bi n thu c

Xã Ninh Hi p, huy n Gia Lâm Hà N i(Ký hi u m u:S1)

.Thôn Ngh a Trai, xã Tân Quang huy n V n Lâm(Ký hi u m u:S2)

.Thôn Thi t Tr , huy n Khoái Châu t nh H ng Yên(Ký hi u m u:S3)

.Trung tâm nghiên c u cây tr ng và ch bi n thu c Hà N i (Ký hi u

m u:S4)

 Hoá ch t,thu c th

C n tuy t đ i, acid sulphuric 72, dd KOH/c n 0.5N, dd acid HCl

0.5N,ortho.Toluidin, Thioure, ch th Methyl da cam, đ t tiêu chu n do vi n

D c li u cung c p

 ng v t thí nghi m

Chu t nh t tr ng kho m nh,có kh i l ng 20-22g do đ tiêu chu nthí

nghi m mua t i Hà Tây

 Máy móc và trang thi t b

- Máy đo đ m Precisa MA300 Thu S

- Máy quang ph UV-VIS Cary 1E cua hãng Varian(M )

- Máy đo quang ph t ngo i (máy ASIMCO c a Anh)

- Máy quang ph h p th nguyên t ( máy AAS-Shimadza c a Nh t)

1.2- Ph ng pháp th c nghi m

1.2.1- Xông sinh ng u t t

1.2.1.1- Xôn g sinh ng u t t v i l ng sinh khác nhau

Các m u ng u t t cùng kh i l ng đ c xông sinh v i nh ng l ng sinh

khác nhau, trong cùng m t th i gian m t ngày m t đêm.V i kh i l ng sinh nh

K IL

O B

O O

K S C O

M

sau: 0,5kg S/t d c li u; 1kg S/t d c li u; 1.5kg S/t d c li u; 3kg S/t

d c li u S y 60C đ t đ thu ph n <15

1.2.1.2- Xông sinh ng u t t v i th i gian khác nhau

Xông sinh các m u có kh i l ng b ng nhau v i cùng l ng sinh 1.5kg

S/t d c li u nh ng th i gian khác nhau, xông 4h, 12h, 24h

Th c hi n t i Khoa hoá phân tích-Vi n d c li u

Theo ph ng pháp đo quang b c sóng = 538, v i ch t chu n là acid

oleanolic và thu c th t o màu là c n Vanilin trong H2SO4 đ c

Hàm l ng Saponin (tính theo acid oleanolic) đ c tính b ng công th c:

X () =

) 100 (

10000

B Pt

Dc

Pc Dt

Dt: M t đ quang ng th Dc: M t đ quang ng chu n

Pt: L ng d c li u (g) Pc: L ng acid oleanoic(g)

B: m c a d c li u

1.2.2.2- nh l ng đ ng t do (TCCS VDL)

Th c hi n t i t i Khoa hoá phân tích-Vi n d c li u

Theo ph ng pháp đo quang b c sóng =630nm , v i ch t chu n là

glucoza 0.1, thu c th là O.Toluidin và Thioure

Hàm l ng đ ng đ c tính theo công th c:

X () =

) 100 (

1000

B P

K IL

O B

O O

K S C O

1.2.3- Th đ c tính c p c a l u hu nh và ng u t t sau khi xông sinh

Th c hi n t i b môn phân tích - Tr ng đai h c D c Hà N i

- Li u LD50 đ c nghiên c u theo ph ng pháp Karber thí nghi m trên

chu t nh t tr ng có kh i l ng 18-20g Nh ng nhóm chu t 12 con đ c cho

u ng cao ng u t t v i các li u t ng d n; trong đó li u t i đa không gây ch t con

nào, li u t i thi u gây ch t toàn b lô chu t thí nghi m(LD100) và m t s li u

trung gian, mà kho ng cách có th không b ng nhau

Theo dõi và ghi s chu t ch t m i nhóm Th i gian theo dõi là ba

ngày

1.2.4- Xác đ nh hàm l ng l u hu nh trong các m u diêm sinh

Th c hi n t i Khoa hoá phân tích-Vi n d c li u

nh l ng theo ph ng pháp acid-base th a tr , ch th màu là Methyl

da cam

Nguyên t c ph n ng: Cân chính xác Pt gam m u th , thêm V ml (chính

xác) dung d ch KOH 0.5N/c n và n c đun cách thu sôi đ n tan h t l u hu nh

và c n, thêm H202 đ n khi m t màu dung d ch ngu i thêm 2 gi t Methyl

da cam và đ nh l ng KOH d b ng acid HCL 0.5N.Song song ti n hành làm

m u tr ng,

K IL

O B

O O

K S C O

2.1.1 Xông sinh v i l ng sinh khác nhau

Ng u t t sau khi thu ho ch v ch t b ph n thân, r s ch đ t, chia thành 4

lô, m i lô kh i l ng 20 kg, ph i n ng 2 ngày, r a s ch b ng n c, đ ráo

n c, bu c thành các bó nh , x p vào lò xông sinh và xông sinh v i th i gian 1

ngày, m t đêm v i nh ng l ng sinh khác nhau, theo các m u sau:

K IL

O B

O O

K S C O

M

Màu s c c a c 4 lô ng u t t xông sinh v i l ng l u hu nh khác nhau

nh ng đ u gi ng nhau(Xem nh) sau khi s y khô ta không ng i th y mùi l u

hu nh Nh v y b ng c m quan ta khó phát hi n đ c d c li u có xông sinh

hay không

K IL

O B

O O

K S C O

2.1.2 Xông sinh v i th i gian khác nhau

Ng u t t sau khi thu ho ch làm t ng t nh trên, chia thành 4 lô kh i

l ng m i lô 20kg, xông sinh v i l ng sinh nh nhau 1.5kg/t

Lô 1: Xông sinh 4 gi (M5) Lô 2: Xông sinh 12 gi (M6)

Lô 3: Xông sinh 24 gi (M7)

Sau khi xông sinh đem s y 60C đ n đ t đ thu ph n<15, b o qu n

K IL

O B

O O

K S C O

M c dù xông sinh v i th i gian khác nhau nh ng màu s c c a các lô là

nh nhau.Sau khi s y khô ta c ng không ng i th y mùi l u hu nh trong d c

K IL

O B

O O

K S C O

kém

D o kém

D o kém

2.2 nh l ng l u hu nh trong ng u t t sau khi xông

2.2.1 nh l ng l u hu nh trong ng u t t ngay sau khi xông

Ngay sau khi xông xong, các m đ c đem đ nh l ng l u hu nh Ta

- Hàm l ng l u hu nh trong d c li u sau khi xông v i l ng l u

hu nh đem xông t 0.5 kg/t t i 3 kg/t thì hàm l ng l u hu nh trong d c

li u sau khi xông t l thu n v i l ng diêm sinh đem xông (Hình 1 )

Hàm l ng

K IL

O B

O O

K S C O

M

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

M1 M2 M3 M4

Hình 1: Hàm l ng l u hu nh sau khi xông các m u xông v i

- Hàm l ng l u hu nh trong d c li u sau khi xông t l thu n v i th i

gian đem xông (Hình 2)

K IL

O B

O O

K S C O

Hàm lượng

%

M5 M6 M7

Hỡnh 2: Bi u đ bi u di n hàm l ng l u hu nh trong d c li u sau

khi xụng cỏc m u s y v i th i gian khỏc nhau

2.2.2 nh l ng l u hu nh trong ng u t t sau khi s y

Sau khi s y khụ cỏc m u xụng sinh, ta ti n hành đ nh l ng l u hu nh

trong cỏc m u xụng sinh đ c k t qu nh b ng 7, và hỡnh 3

B ng 7: Hàm l ng l u hu nh trong d c li u sau khi s y

11.38

12.40

8.17

13.03

10.66

Hàm

l ng

2.90

3.66

4.09

4.95

3.61

3.94

4.58

K IL

O B

O O

K S C O

M

0 2 4 6 8 10

M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7

Hàm lượng

sau khi xông sau khi sấy

Hỡnh 3:Hàm l ng l u hu nh cỏc m u sau khi xụng và sau khi s y

Nh n xột:

Hàm l ng l u hu nh trong d c li u sau khi s y gi m đi so v i sau khi

xụng L ng l u hu nh trong d c li u sau khi xụng càng cao thỡ sau khi s y

gi m đi càng nhi u (Hỡnh 3)

2.2.3 nh l ng l u hu nh trong cao l ng

Ng u t t th ng đ c s d ng d i d ng n c s c ho c ngõm r u ho c

đ c chi t b ng c n làm cao l ng đ bào ch cỏc d ng thu c khỏc vỡ v y đ

ki m tra chỳng tụi ti n hành đ nh l ng l u hu nh trong d ch chi t b ng c n

80 và n c c a ng u t t đó xụng sinh và s y khụ nh l ng m u d c li u

M4/

n c Hàm l ng l u

0.24



K IL

O B

O O

K S C O

M

Nh n xột: Hàm l ng l u hu nh trong d c li u sau khi s y và l ng l u

hu nh trong cao 1:1 c a d c li u gi m đi hàng ch c l n Và khi chi t b ng c n

Chiết nước Chiết cồn

Hỡnh 4: Hàm l ng l u hu nh trong d ch chi t n c và d ch chi t

c n (m u M1 và M4) 2.3 nh l ng m t s thành ph n hoỏ h c trong ng u t t

2.3.1- nh l ng đ ng t do

Ti n hành

Cõn chớnh xỏc kho ng 1g d c li u cho vào c i s , nghi n k Dựng n c

kộo d n vào bỡnh đ nh m c 100 ml, trỏng k chày c i và thờm n c v a đ

100ml, l c đ u, l c qua gi y l c, b d ch đ u, thu l y d ch trong

Pha m u chu n:

- Cõn chớnh xỏc 1g glucoza đó s y khụ 100-105C đ n kh i l ng

khụng đ i, hoà tan vào n c c t trong bỡnh đ nh m c 100 ml, thờm n c c t đ n

v ch L c đ u L y 5 ml dung d ch này cho vào bỡnh đ nh m c 200 ml, thờm

K IL

O B

O O

K S C O

0

M 1`

1.34

1.25

1.41

1.25

1.40

1.15

.44

1.45

1.46

1.41

1.45

1.44

1.22

1.23

.55

1.33

1.53

1.17

1.61

1.35

1.35

1.29

Trun

g bình

2.54

1.35

1.44

1.28

1.49

1.35

1.32

1.22

K IL

O B

O O

K S C O

M

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3

- M u th : cân chính xác kho ng 1 gam b t ng u t t, cho vào c i s

nghi n k v i c n 80 , t ng ít m t, chuy n vào bình đ nh m c 100ml Tráng

chày c i b ng c n 80, thêm c n đ n v ch, l c đ u, l c l y d ch trong

- M u chu n: cân chính xác kho ng 0.04g acid oleanolic, hoà tan trong

K IL

O B

O O

K S C O

9.12

10.36

10.12

10.04

10.46

9.28

10.02

L n

2

9.48

10.20

9.28

9.76

9.78

9.70

10.46

9.56

L n

3

10.46

10.26

9.96

10.20

10.30

10.06

10.14

10.38

K IL

O B

O O

K S C O

M

Trun

g bình

10.01

9.86

9.87

10.03

10.04

10.07

9.96

9.99

nh l ng saponin trong các m u không xông sinh s y các nhi t đ

- Ti n hành: Pha h n d ch l u hu nh n ng đ 0.032gam/ml, dung môi là

glycerin, ch t gây th m là tween 80

K IL

O B

O O

K S C O

M

( g/kg)

thí nghi

,32

0.32

7,04

Tr ng thái c a chu t ch t: Tim, ph i, gan không có hi n t ng xung

z:Tr s trung bình chu t ch t gây b i hai li u k ti p

n:s chu t trung bình trong m i nhóm

K IL

O B

O O

K S C O

M

Các s n ph m ch bi n đ c ch n đ th là các m u T0, M1, M3, M4

đ c s c, g n 3 l n và đ c cô thành cao v i t l 5 : 1

Th i gian theo dõi là 3 ngày

N u li u t i đa gây ch t 100, thì ta xác đ nh LD50 theo công th c

z: Tr s trung bình chu t ch t gây b i hai li u k ti p

n: s chu t trung bình trong m i nhóm

s: s chu t s ng trung bình gi a 2 nhóm

N u li u t i đa có th cho chu t u ng mà không gây ch t 100 , mà ch

gây ch t  50  thì xác đ nh LD50 theo công th c Benrens-Schrosser:

LD50 =D1+a

Trong đó

a =

A B

A d

z d

A d  z

T trên xu ng D2 d  z+ d  s T D2 xu mg

z d

B d  z T trên xu ng D1

d  z+ d  s T D2 xu ng

d: Hi u gi a 2 li u liên ti p

z: S chu t ch t trung bình gi a 2 li u

K IL

O B

O O

K S C O

Schu t ch t

Tr ng thái c a chu t

ch t

có hi n t ng xung huy t.Co

th t c tr n, thành ru t c ng,

có bi u hi n hút n c vào lòng ru t

Nh n xét:

-Tr ng thái chu t ch t c a m u T0 gi ng v i tr ng thái chu t ch t c a

m u diêm sinh, ch ng t chu t ch t do d l ng l u hu nh

-Vì li u t i đa có th cho chu t u ng đ c không gây ch t t i thi u 50

s chu t thí nghi m nên không tính đ c li u LD50

Schu t ch t

Tr ng thái c a chu t

ch t

hi n t ng xung huy t.Co th t

c tr n, thành ru t c ng, có