khảo sát thu nhận chế phẩm enzyme protease

GVHD : PGS-TS Đ ng Th Thanh Thuồ ị SVTH : Phan Tr ng H ng Th oươ ươ ả 1. KH O SÁT HI U SU T THU NH N CH PH M ENZYMEẢ Ệ Ấ Ậ Ế Ẩ PROTEASE T CANH TR NG VI KHU N Ừ ƯỜ Ẩ BACILLUS SUBTILIS V I CÁC LO I TÁC NHÂN T A KHÁC NHAU .Ớ Ạ Ủ B ng 1.1:ả L ng ch ph m enzyme protease thu đ c và hi u su t thuượ ế ẩ ượ ệ ấ nh n v i các lo i tác nhân t a khác nhau.ậ ớ ạ ủ Tác nhân t aủ enzyme Kh iố l ngượ canh tr ngườ (g) Kh i l ng t a (g)ố ượ ủ Kh iố l ng t aượ ủ trung bình (g) Hi u su tệ ấ thu nh n ậ (%) 1 2 3 C nồ 50 2,59 2,74 2,68 2,67 5,34 Acetone 50 1,84 1,87 1,83 1,85 3,70 Amoni sulfat 50 1,16 0,96 1,09 1,07 2,14 Nh n xétậ : L ng ch ph m enzyme thu đ c và hi u su t thu nh nượ ế ẩ ượ ệ ấ ậ enzyme cao nh t là trong tr ng h p tác nhân t a là ấ ườ ợ ủ c nồ . 2. KH O SÁT HO T Đ PROTEASE .Ả Ạ Ộ 2.1 Đ ng chu n Tyrosin :ườ ẩ B ng 2.1:ả Đ ng chu n Tyrosin .ườ ẩ L ngượ Tyrosin(µmol) 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 OD (750 nm) 0 0,181 0,355 0,529 0,704 0,878 Lu n văn t t nghi pậ ố ệ GVHD : PGS-TS Đ ng Th Thanh Thuồ ị SVTH : Phan Tr ng H ng Th oươ ươ ả 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 NOÀNG ÑOÄ TYROSIN (µmol) MAÄT ÑOÄ QUANG OD (750 nm) Hình 2.1 : Đ ng chu n Tyrosin.ườ ẩ 2.2 Kh o sát ho t đ protease trong canh tr ng vi khu n ả ạ ộ ườ ẩ Bacillus subtilis: Cân 20 g canh tr ng vi khu n ườ ẩ Bacillus subtilis, ti n hành nh m c II.3.1, ph nế ư ụ ầ d ch thu đ c 200 ml, pha loãng 2 l n, đem 0,5ml ti n hành xác đ nh ho t đ theoị ượ ầ ế ị ạ ộ ph ng pháp Anson c i ti n nh m c II.3.2ươ ả ế ư ụ B ng 2.2:ả Ho t đ protease c a canh tr ng vi khu n ạ ộ ủ ườ ẩ Bacillus subtilis. L nầ OD M OD ĐC ∆OD = OD M - OD ĐC µmol Tyrosin Ho t đạ ộ (UI/g CT) Ho t đạ ộ trungbình (UI/g CT) 1 0,998 0,915 0,083 0,091 1,46 1,63 2 1,012 0,915 0,097 0,107 1,71 3 1,013 0,915 0,098 0,108 1,73 Nh n xétậ : Ho t đ protease c a canh tr ng vi khu n là 1,63 UI/g CT (giáạ ộ ủ ườ ẩ tr trung bình) .ị Lu n văn t t nghi pậ ố ệ GVHD : PGS-TS Đ ng Th Thanh Thuồ ị SVTH : Phan Tr ng H ng Th oươ ươ ả 2.3 Kh o sát ho t đ protease c a ch ph m enzyme đ c t a b ng c nả ạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ ồ 96 0 : Cân 1g ch ph m enzym protease hòa tan trong 100ml n c c t, sau đó phaế ẩ ướ ấ loãng 2 l n, l y 0,5ml ti n hành xác đ nh ho t đ theo ph ng pháp Anson c iầ ấ ế ị ạ ộ ươ ả ti n nh m c II.3.2ế ư ụ B ng 2.3:ả Ho t đ protease c a ch ph m enzyme đ c t a b ng c n 96ạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ ồ 0 . L nầ OD M OD ĐC ∆OD = OD M - OD ĐC µmol Tyrosin Ho t đạ ộ (UI/g CPE) Ho t đạ ộ trung bình (UI/g CPE) 1 0,425 0,300 0,125 0,139 22,24 22,61 2 0,427 0,310 0,117 0,130 20,80 3 0,429 0,290 0,139 0,155 24,80 Nh n xétậ : Ho t đ c a ch ph m enzyme protease đ c t a b ng c n 96ạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ ồ 0 là 22,61 UI/g CPE (giá tr trung bình) .ị 2.4 Kh o sát ho t đ protease c a ch ph m enzyme đ c t a b ng aceton :ả ạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ Cân 1g ch ph m enzym protease hòa tan trong 100ml n c c t, sau đó phaế ẩ ướ ấ loãng 2 l n, l y 0,5ml ti n hành xác đ nh ho t đ theo ph ng pháp Anson c iầ ấ ế ị ạ ộ ươ ả ti n nh m c II.3.2ế ư ụ B ng 2.4:ả Ho t đ protease c a ch ph m enzyme đ c t a b ng acetone.ạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ L nầ OD M OD ĐC ∆OD = OD M - OD ĐC µmol Tyrosin Ho t đạ ộ (UI/g CPE) Ho t đạ ộ trung bình (UI/g CPE) 1 0,493 0,410 0,083 0,091 14,56 14,29 2 0,492 0,402 0,090 0,099 15,84 3 0,495 0,424 0,071 0,078 12,48 Nh n xétậ : Ho t đ c a ch ph m enzyme protease đ c t a b ng aceton làạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ 14,29 UI/g CPE (giá tr trung bình) .ị 2.5 Kh o sát ho t đ protease c a ch ph m enzyme đ c t a b ng ả ạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ amoni sulfat: Cân 1g ch ph m enzym protease hòa tan trong 100ml n c c t, sau đó phaế ẩ ướ ấ loãng 2 l n, l y 0,5ml ti n hành xác đ nh ho t đ theo ph ng pháp Anson c iầ ấ ế ị ạ ộ ươ ả ti n nh m c II.3.2ế ư ụ Lu n văn t t nghi pậ ố ệ GVHD : PGS-TS Đ ng Th Thanh Thuồ ị SVTH : Phan Tr ng H ng Th oươ ươ ả B ng 2.5:ả Ho t đ protease c a ch ph m enzyme đ c t a b ng Amoni sulfat.ạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ L nầ OD M OD ĐC ∆OD = OD M - OD ĐC µmol Tyrosin Ho t đạ ộ (UI/g CPE) Ho t đạ ộ trung bình (UI/g CPE) 1 0,517 0,458 0,059 0,064 10,24 6,93 2 0,489 0,462 0,027 0,027 4,32 3 0,524 0,487 0,037 0,039 6,24 Nh n xétậ : Ho t đ c a ch ph m enzyme protease đ c t a b ng mu iạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ ố amoni sulfat là 6,93 UI/g CPE (giá tr trung bình) .ị 2.6 S so sánh ho t đ các CPE protease t a b i các tác nhân khác nhau: ự ạ ộ ủ ở B ng 2.6:ả So sánh ho t đ c a các CPE protease v i tác nhân t a khác nhau.ạ ộ ủ ớ ủ Tác nhân t aủ Ho t đ (UI/g CPE)ạ ộ Ho t đ trung bình (UI/g CPE)ạ ộ C n 96ồ 0 22,24 22,61 20,80 24,80 Acetone 14,56 14,2915,84 12,48 Amoni sulfat 10,24 6,93 4,32 6,24 Nh n xétậ : Trong các lo i ch ph m protease, ch ph m có ho t đ cao nh tạ ế ẩ ế ẩ ạ ộ ấ là ch ph m enzyme đ c t a b ng c n (22,61 UI/g CPE).ế ẩ ượ ủ ằ ồ 3. KH O SÁT HÀM L NG PROTEIN THEO PH NG PHÁPẢ ƯỢ ƯƠ LOWRY . 3.1 Đ ng chu n Albumin :ườ ẩ B ng 3.1:ả Đ ng chu n Albuminườ ẩ N ng đồ ộ protein (µg/ml) 0 50 100 150 200 250 OD (750 nm) 0 0,208 0,404 0,598 0,795 0,988 Lu n văn t t nghi pậ ố ệ GVHD : PGS-TS Đ ng Th Thanh Thuồ ị SVTH : Phan Tr ng H ng Th oươ ươ ả 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 0 50 100 150 200 250 300 NOÀNG ÑOÄ ALBUMIN (µg/ml) MAÄT ÑOÄ QUANG OD (750 nm) Hình 3.1: Đ ng chu n Albuminườ ẩ 3.2 Kh o sát hàm l ng protein trong canh tr ng vi khu n ả ượ ườ ẩ Bacillus subtilis : Cân 20 g canh tr ng vi khu n ườ ẩ Bacillus subtilis, ti n hành nh m c II.3.1,ế ư ụ ph n d ch thu đ c 200 ml, pha loãng 50 l n, đem1ml ti n hành thí nghi m theoầ ị ượ ầ ế ệ ph ng pháp Lowry nh m c II.3.3ươ ư ụ Lu n văn t t nghi pậ ố ệ GVHD : PGS-TS Đ ng Th Thanh Thuồ ị SVTH : Phan Tr ng H ng Th oươ ươ ả B ng 3.2:ả Hàm l ng protein c a canh tr ng vi khu n ượ ủ ườ ẩ Bacillus subtilis : L nầ OD M OD ĐC ∆OD = OD M - OD ĐC N ng đồ ộ protein t ng ngươ ứ (µg/ml) Hàm l ngượ protein (mg/g CT) Hàm l ngượ protein trung bình (mg/g CT) 1 0,774 0,035 0,739 187,872 93,94 94,92 2 0,783 0,035 0,748 190,179 95,09 3 0,788 0,035 0,753 191,462 95,73 Nh n xétậ : Hàm l ng protein c a canh tr ng vi khu n ượ ủ ườ ẩ Bacillus subtilis là 94,92 mg/g CT (giá tr trung bình) .ị 3.3 Kh o sát hàm l ng protein c a CPE protease đ c t a b ng c n 96ả ượ ủ ượ ủ ằ ồ 0 : Cân 1g ch ph m enzyme protease hòa tan trong 100ml n c c t, sau đó phaế ẩ ướ ấ loãng 20 l n, l y 1ml xác đ nh hàm l ng protein theo ph ng pháp Lowry nhầ ấ ị ượ ươ ư m c II.3.3ụ B ng 3.3:ả Hàm l ng protein c a ch ph m enzyme đ c t a b ng c nượ ủ ế ẩ ượ ủ ằ ồ 96 0 . L nầ OD M OD ĐC ∆OD =OD M -OD ĐC N ng đồ ộ protein t ng ngươ ứ (µg/ml) Hàm l ngượ protein (mg/g CPE) Hàm l ngượ protein trung bình (mg/g CPE) 1 0,631 0,035 0,666 169,154 338,31 318,60 2 0,639 0,035 0,604 153,256 306,51 3 0,645 0,035 0,610 155,487 310,97 Nh n xétậ : Hàm l ng protein c a ch ph m enzyme protease đ c t aượ ủ ế ẩ ượ ủ b ng c n 96ằ ồ 0 là 318,60 mg/g CPE (giá tr trung bình) .ị 3.4 Kh o sát hàm l ng protein c a CPE protease đ c t a b ng aceton:ả ượ ủ ượ ủ ằ Cân 1g ch ph m enzyme protease hòa tan trong 100ml n c c t, sau đó phaế ẩ ướ ấ loãng 20 l n, l y 1ml xác đ nh hàm l ng protein theo ph ng pháp Lowry nhầ ấ ị ượ ươ ư m c II.3.3ụ B ng 3.4:ả Hàm l ng protein c a ch ph m enzyme đ c t a b ng c n Acetone.ượ ủ ế ẩ ượ ủ ằ ồ Lu n văn t t nghi pậ ố ệ GVHD : PGS-TS Đ ng Th Thanh Thuồ ị SVTH : Phan Tr ng H ng Th oươ ươ ả L nầ OD M OD ĐC ∆OD = OD M - OD ĐC N ng đồ ộ protein t ng ngươ ứ (µg/ml) Hàm l ngượ protein (mg/ g CPE) Hàm l ngượ protein trung bình (mg/g CPE) 1 0,598 0,035 0,563 142,744 285,49 284,63 2 0,594 0,035 0,559 141,718 283,44 3 0,597 0,035 0,562 142,478 284,97 Nh n xétậ : Hàm l ng protein c a ch ph m enzyme protease đ c t aượ ủ ế ẩ ượ ủ b ng aceton là 284,63 mg/g CPE (giá tr trung bình) .ằ ị 3.5 Kh o sát hàm l ng protein c a CPE protease đ c t a b ngả ượ ủ ượ ủ ằ mu i amoni sulfat :ố Cân 1g ch ph m enzyme protease hòa tan trong 100ml n c c t, sau đó phaế ẩ ướ ấ loãng 20 l n, l y 1ml xác đ nh hàm l ng protein theo ph ng pháp Lowry nhầ ấ ị ượ ươ ư m c II.3.3ụ Lu n văn t t nghi pậ ố ệ GVHD : PGS-TS Đ ng Th Thanh Thuồ ị SVTH : Phan Tr ng H ng Th oươ ươ ả B ng 3.5:ả Hàm l ng protein c a ch ph m enzyme đ c t a b ng amoni sulfat.ượ ủ ế ẩ ượ ủ ằ L nầ OD M OD ĐC ∆OD = OD M - OD ĐC N ng đồ ộ protein t ngươ ng (µg/ứ ml) Hàm l ngượ protein (mg/ g CPE) Hàm l ngượ protein trung bình (mg/g CPE) 1 0,456 0,035 0,421 106,333 212,67 203,44 2 0,414 0,035 0,379 95,564 191,13 3 0,444 0,035 0,409 103,256 206,51 Nh n xétậ : Hàm l ng protein c a ch ph m enzyme protease đ c t aượ ủ ế ẩ ượ ủ b ng aceton là 203,44 mg/g CPE (giá tr trung bình) .ằ ị 3.6 S so sánh hàm l ng protein c a ch ph m protease t a b i các tácự ượ ủ ế ẩ ủ ở nhân khác nhau : B ng 3.6:ả So sánh hàm l ng protein c a các lo i ch ph m enzymeượ ủ ạ ế ẩ protease v i tác nhân t a khác nhau.ớ ủ Tác nhân t aủ Hàm l ng proteinượ (mg/g CPE) Hàm l ng protein trung bìnhượ (mg/g CPE) C n 96ồ 0 338,31 318,60 306,51 310,97 Aceton 285,49 284,63 283,44 284,97 Amoni sulfat 212,67 203,44 191,13 206,51 Nh n xétậ : Hàm l ng protein cao nh t ch ph m enzyme protease đ cượ ấ ở ế ẩ ượ t a b ng c n 96ủ ằ ồ 0 là 307,85 mg/g CPE (giá tr trung bình )ị 4. HO T Đ RIÊNG C A PROTEASE .Ạ Ộ Ủ B ng 4.1:ả Ho t đ riêng c a canh tr ng vi khu n.ạ ộ ủ ườ ẩ Ho t đ proteaseạ ộ (UI/g CT) Hàm l ng proteinượ (mg protein/g CT) Ho t đ riêngạ ộ (UI/mg Pr) 1,63 94,92 0,017 Lu n văn t t nghi pậ ố ệ GVHD : PGS-TS Đ ng Th Thanh Thuồ ị SVTH : Phan Tr ng H ng Th oươ ươ ả B ng 4.2:ả So sánh ho t đ riêng c a t ng lo i ch ph m enzyme proteaseạ ộ ủ ừ ạ ế ẩ v i tác nhân t a khác nhau.ớ ủ Tác nhân t aủ Ho t đ proteaseạ ộ (UI/g CPE) Hàm l ng proteinượ (mg Pr/g CPE) Ho t đ riêngạ ộ (UI/mg Pr) C n 96ồ 0 22,61 318,60 0,072 Acetone 14,29 284,63 0,050 Amoni sulfat 6,93 203,44 0,034 Nh n xétậ : Ho t đ riêng c a ch ph m enzyme protease đ c t a b ng c nạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ ồ là cao nh t 0,072 UI/mg CPE (giá tr trung bình)ấ ị 5. KH O SÁT S PH THU C HO T Đ C A CÁC CHẢ Ự Ụ Ộ Ạ Ộ Ủ Ế PH M ENZYME PROTEASE VÀO NHI T Đ .Ẩ Ệ Ộ 5.1 Kh o sát s ph thu c ho t đ c a CPE protease (t a b ng c n)ả ự ụ ộ ạ ộ ủ ủ ằ ồ theo nhi t đ :ệ ộ Cân 1g ch ph m enzym hòa tan trong 100ml n c c t, sau đó pha loãng 2 l n,ế ẩ ướ ấ ầ m i nhi t đ kh o sát t 30ở ỗ ệ ộ ả ừ 0 C đ n 80ế 0 C, l y 0,5ml ti n hành xác đ nh ho t đấ ế ị ạ ộ theo Anson c i ti n nh m c II.3.2ả ế ư ụ Lu n văn t t nghi pậ ố ệ GVHD : PGS-TS Đ ng Th Thanh Thuồ ị SVTH : Phan Tr ng H ng Th oươ ươ ả B ng 5.1:ả Kh o sát s ph thu c ho t đ protease c a CPE (t a b ng c n)ả ự ụ ộ ạ ộ ủ ủ ằ ồ theo nhi t đ .ệ ộ Nhiệ t độ ( o C) L n ầ OD M OD ĐC ∆OD = OD M - OD ĐC µmol Tyrosin Ho t đạ ộ (UI/g CPE) Ho t đạ ộ trung bình (UI/g CPE) 30 1 0,425 0,300 0,125 0,139 22,24 22,61 2 0,427 0,310 0,117 0,130 20,80 3 0,429 0,290 0,139 0,155 24,80 40 1 0,484 0,320 0,164 0,184 29,44 28,59 2 0,487 0.324 0,163 0,183 29,28 3 0,480 0.329 0,151 0,169 27,04 50 1 0,563 0,332 0,231 0,260 41,60 41,71 2 0,565 0,329 0,236 0,266 42,56 3 0,564 0,337 0,227 0,256 40,96 55 1 0,707 0,365 0,342 0,387 61,92 63,40 2 0,730 0,359 0,371 0,420 67,20 3 0,705 0,367 0,338 0,382 61,12 60 1 0,705 0,367 0,338 0,382 61,12 61,55 2 0,698 0,365 0,333 0,377 60,32 3 0,708 0,359 0,349 0,395 63,20 70 1 0,532 0,441 0,091 0,100 16,00 13,55 2 0,526 0,445 0,081 0,089 14,24 3 0,498 0,438 0,060 0,065 10,40 80 1 0,480 0,463 0,017 0,016 2,56 2,99 2 0,482 0,460 0,022 0,022 3,52 3 0,484 0,465 0,019 0,018 2,88 Nh n xétậ : 55Ở 0 C, ch ph m enzyme protease đ c t a b ng c n 96ế ẩ ượ ủ ằ ồ 0 có ho t đ cao nh t là 63,40 UI/g CPE (giá tr trung bình).ạ ộ ấ ị Lu n văn t t nghi pậ ố ệ [...]... Thị Thanh Thu SVTH : Phan Trương Hương Thảo 70 60 50 40 HOẠ ĐỘ T (UI/g CPE) 30 20 10 0 0 20 40 60 NHIỆ ĐỘ T (ĐỘ C) 80 100 Hình 5.1: Sự phụ thu c của hoạt độ chế phẩm protease (tủa bằng cồn) theo nhiệt độ 5.2 Khảo sát sự phụ thu c hoạt độ enzyme vào nhiệt độ đối với CPE (tủa bằng aceton) : Cân 1g chế phẩm enzym protease hòa tan trong 100ml nước cất, sau đó pha lỗng 2 lần, ở mỗi nhiệt độ khảo sát từ 300... 1,87 0,69 Nhận xét : Ở 550C, chế phẩm enzyme protease được tủa bằng aceton có hoạt độ cao nhất là 42,88 UI/g CPE (giá trị trung bình) 50 40 30 HOẠ ĐỘ T 20 (UI/g CPE) 10 0 -10 0 20 40 60 80 100 NHIỆ ĐỘ T (ĐỘ C) Hình 5.2: Sự phụ thu c của hoạt độ chế phẩm protease (tủa bằng aceton) theo nhiệt độ Luận văn tốt nghiệp GVHD : PGS-TS Đồng Thị Thanh Thu SVTH : Phan Trương Hương Thảo 5.3 Khảo sát sự phụ thu c hoạt... 0,18 Nhận xét : ở pH = 6,0; chế phẩm enzyme protease được tủa bằng cồn 960 có hoạt độ cao nhất là 78,45 UI/g CPE (giá trị trung bình ) Luận văn tốt nghiệp GVHD : PGS-TS Đồng Thị Thanh Thu SVTH : Phan Trương Hương Thảo 90 80 70 60 HOẠ ĐỘ T 50 (UI/g CPE) 40 30 20 10 0 0 2 4 6 8 10 12 pH Hình 6.1: Sự phụ thu c hoạt độ của chế phẩm protease (tủa bằng cồn) theo pH 7 KHẢO SÁT Q TRÌNH THỦY PHÂN PROTID CỦA CHẾ... 0,96 Nhận xét : Ở 550C, chế phẩm enzyme protease được tủa bằng muối amoni sulfat có hoạt độ cao nhất là 37,33 UI/g CPE (giá trị trung bình) Luận văn tốt nghiệp GVHD : PGS-TS Đồng Thị Thanh Thu SVTH : Phan Trương Hương Thảo 40 35 30 25 HOẠ ĐỘ T 20 (UI/g CPE) 15 10 5 0 0 20 40 60 80 100 NHIỆ ĐỘ T (ĐỘ C) Hình 5.3: Sự phụ thu c của hoạt độ chế phẩm protease (tủa bằng amoni sulfat) theo nhiệt độ 6 KHẢO SÁT... hoạt độ enzyme vào nhiệt độ đối với CPE (tủa bằng amoni sulfat) : Cân 1g chế phẩm enzym protease hòa tan trong 100ml nước cất, sau đó pha lỗng 2 lần, ở mỗi nhiệt độ khảo sát từ 300 C đến 800 C, lấy 0,5ml tiến hành xác định hoạt độ theo Anson cải tiến như mục II.3.2 Luận văn tốt nghiệp GVHD : PGS-TS Đồng Thị Thanh Thu SVTH : Phan Trương Hương Thảo Bảng 5.3: Khảo sát sự phụ thu c hoạt độ của CPE protease. .. BIẾN ĐỔI HOẠT ĐỘ CỦA CHẾ PHẨM PROTEASE TỪ BACILLUS SUBTILIS THEO pH Cân 1g chế phẩm enzym hòa tan trong 100ml nước cất, sau đó pha lỗng 2 lần, ở nhiệt độ 550C, mỗi pH khảo sát từ 3 đến 10, lấy 0,5ml tiến hành xác định hoạt độ theo Anson cải tiến như mục II.3.2 Luận văn tốt nghiệp GVHD : PGS-TS Đồng Thị Thanh Thu SVTH : Phan Trương Hương Thảo Bảng 6.1: Sự biến đổi hoạt độ của CPE protease theo pH pH... protease (tủa bằng cồn) theo pH 7 KHẢO SÁT Q TRÌNH THỦY PHÂN PROTID CỦA CHẾ PHẨM PROTEASE 7.1 Khảo sát q trình thủy phân albumin : Với điều kiện nhiệt độ 550C ; pH = 6,0 Luận văn tốt nghiệp GVHD : PGS-TS Đồng Thị Thanh Thu SVTH : Phan Trương Hương Thảo Bảng 7.1: Sự biến đổi lượng NF theo thời gian thủy phân albumin bởi CPE protease Cơ chất Thời V NaOH 0,1N (ml) x=1 Lượng N-formol tương Trung gian... lấy 0,5ml tiến hành xác định hoạt độ theo Anson cải tiến như mục II.3.2 Bảng 5.2: Khảo sát sự phụ thu c hoạt độ enzyme vào nhiệt độ đối với CPE (tủa bằng aceton) : Nhiệ Lần ODM t độ (oC) Luận văn tốt nghiệp ODĐC ∆OD = ODM - ODĐC µmol Hoạt độ Hoạt độ Tyrosin (UI/g CPE) trung bình (UI/g CPE) GVHD : PGS-TS Đồng Thị Thanh Thu SVTH : Phan Trương Hương Thảo 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 40 50 55... Thanh Thu SVTH : Phan Trương Hương Thảo Nhận xét : Với cơ chất là nấm rơm, q trình thủy phân có vận tốc tăng nhanh trong khoảng từ 0 – 10 giờ Giờ thứ 11 và thứ 12, lượng N-formol có tăng nhưng lượng có chiều hướng giảm Từ giờ thứ 13, q trình thủy phân gần như ổn định 7.5 Khảo sát q trình thủy phân thịt heo nạc : Với điều kiện nhiệt độ 550C và pH = 6,0 Luận văn tốt nghiệp GVHD : PGS-TS Đồng Thị Thanh Thu. .. 0,281 0,287 0,291 0,293 0,293 0,293 0,293 GVHD : PGS-TS Đồng Thị Thanh Thu SVTH : Phan Trương Hương Thảo Nhận xét : Với cơ chất là casein, q trình thủy phân có vận tốc tăng nhanh trong khoảng từ 0 – 9 giờ Giờ thứ 10 và thứ 11, lượng N-formol có tăng nhưng lượng có chiều hướng giảm Từ giờ thứ 12, q trình thủy phân gần như ổn định 7.3 Khảo sát q trình thủy phân protid đậu nành hạt : Với điều kiện nhiệt độ . a ch ph m enzyme protease đ c t a b ng c nạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ ồ là cao nh t 0,072 UI/mg CPE (giá tr trung bình)ấ ị 5. KH O SÁT S PH THU C HO T Đ C A CÁC CHẢ Ự Ụ Ộ Ạ Ộ Ủ Ế PH M ENZYME PROTEASE VÀO. NHAU .Ớ Ạ Ủ B ng 1.1:ả L ng ch ph m enzyme protease thu đ c và hi u su t thu ợ ế ẩ ượ ệ ấ nh n v i các lo i tác nhân t a khác nhau.ậ ớ ạ ủ Tác nhân t aủ enzyme Kh iố l ngượ canh tr ngườ . xétậ : Ho t đ c a ch ph m enzyme protease đ c t a b ng c n 96ạ ộ ủ ế ẩ ượ ủ ằ ồ 0 là 22,61 UI/g CPE (giá tr trung bình) .ị 2.4 Kh o sát ho t đ protease c a ch ph m enzyme đ c t a b ng aceton