Bảo quản tinh trùng cá basa, cá tra potx

1 I. PHƯƠNG PHÁP BẢO QUẢN TINH TRÙNG CÁ TRA VÀ BA SA DÀI NGÀY BẰNG NITƠ LỎNG a/ Thí nghiệm: Đánh giá sự vận động tinh trùng bảo quản trong Nitơ lỏng. Qui trình bảo quản tinh trùng được trình bày các bước sau. Đ ôn g lạnh ở tốc độ hạ nhiệt 5 - 7 0 Cđatđe á n – 80 0 C Tinh trùn g sau khi được vuốt Dun g dòch cố đ ò nh Pha loãn g tỉ lệ 1: 10 Chất bảo vệ ở nồng độ 5-20% Thời g ian cân bằn g 10 p hút Thả trực tiế p vào bình Nitơ lỏng Sau 3 thán g bảo q uản Đánh g iá chất lượng tinh Cho vào ốn g nhựa 0,5mL 2 Với chất bảo vệ là - Dimethyl sulfoxide (DMSO) (theo Tiersch và ctv., 1994) - Glycerol (G) (Theo Tiersch và ctv., 1994) - Methanol (M) (theo Tiersch và ctv., 1994). Và ở 4 nồng độ: 5%, 10%, 15%, 20%. II. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN A. Kết Quả Cá Tra 1. Phương pháp bảo quản ngắn ngày tinh trùng cá tra Pagasius hypophthalmus Tinh trùng được vuốt ra khỏi cá đực và chỉ hoạt động khi được tiếp xúc với nước. Sự thụ tinh giữa tinh trùng và trứng diễn ra rất nhanh trong vòng vài giây sau khi tinh trùng hoạt động. Để bảo quản tinh trùng sau khi rời khỏi cơ thể, tiến hành trữ tinh trùng trong các dung dòch cố đònh. Chúng tôi sử dụng bốn dung dòch cố đònh tinh trùng. Đó là dung dòch nước muối sinh lý NaCl 0,9%, dung dòch HBSS (dung dòch muối cân bằng Hank), dung dòch CF-HBSS (dung dòch muối câng bằng Hank không chứa Calcium) và dung dòch đệm Tris (gồm NaCl 0,9% và pH=7), với tỷ lệ pha loãng giữa tinh và dung dòch cố đònh tinh trùng là 1:10, trữ ở nhiệt độ 4-10 0 C. Để đánh giá chất lượng tinh trùng bảo quản thay đổi theo thời gian và dung dòch cố đònh, thông qua chỉ tiêu đánh giá phần trăm vận động tinh trùng, thời gian tinh trùng vận động, kiểu tinh trùng vận động cũng như đánh giá qua tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ nở, tỷ lệ sống và tỉ lệ dò hình. 2. Đánh giá sự vận động tinh trùng theo thời gian bảo quản Sự vận động tinh trùng được bảo quản trong các dung dòch cố đònh thay đổi theo thời gian bảo quản từ 12 giờ đến 96 giờ. Kết quả được trình bày ở bảng 1 Theo kết quả bảng 4.1, phần trăm tinh trùng vận động giảm dần theo thời gian bảo quản và cũng thay đổi theo dung dòch cố đònh tinh trùng. Kết quả thí nghiệm cho thấy ở thời gian bảo quản 24 giờ, phần trăm vận động tinh trùng bảo quản trong dung dòch cố đònh Tris so với phần trăm vận động tinh trùng đối chứng (100%) thì không sai khác. Trái lại, các dung dòch cố đònh tinh trùng còn lại cho thấy phần trăm tinh trùng vận động còn lại 63,3- 73,3% so với đối chứng có sự sai khác. Vậy ở thời gian bảo quản 24 giờ thì dung dòch cố đònh Tris giúp tinh trùng vận động tốt nhất. Tinh trùng bảo quản sau thời gian 48 giờ bắt đầu có sự thay đổi khá rõ. Trong dung dòch cố đònh HBSS, phần trăm tinh trùng vận động bằng không, nghóa là sự sống của chúng không còn nữa. Tuy nhiên, đối với dung dòch cố đònh CF-HBSS, Tris và nước muối sinh lý NaCl 0,9% thì kết quả thí nghiệm cho thấy phần trăm vận động tinh trùng bảo quản còn 3 tốt, mặc dù so với đối chứng (100%) thì đã giảm khá nhiều. Cụ thể như dung dòch Tris (43,3%), CF-HBSS (36,7%) và dung dòch NaCl (50,0%). Đến thời gian bảo quản sau 72 giờ, phần trăm vận động tinh trùng bảo quản trong các dung dòch cố đònh giảm rất nhiều. Cụ thể như dung dòch cố đònh Tris(26,7%), dung dòch CF-HBSS và NaCl (13,3%), rồi đến HBSS (bằng không). Thời gian bảo quản tinh trùng càng kéo dài thì phần trăm tinh trùng vận động càng giảm. Đến thời gian bảo quản 96 giờ, chỉ còn khoảng 10% tinh trùng vận động được bảo quản trong dung dòch cố đònh Tris và NaCl 0,9%. Nhận xét thấy rằng, chất lượng tinh trùng thông qua chỉ tiêu đánh giá phần trăm tinh trùng vận động trong điều kiện không cung cấp oxygen và thuốc kháng sinh, 50% tinh trùng còn sống và vận động sau 48 giờ trong dung dòch cố đònh Tris và NaCl 0,9%. Bảng 1 Phần trăm tinh trùng vận động theo thời gian bảo quản và dung dòch cố đònh Dung dòch cố đònh Thời gian Đối chứng HBSS CF-HBSS Tris NaCl 12 giờ 100,0 a 100,0 a 100,0 a 100,0 a 100,0 a 24 giờ 100,0 b 73,3 a 63,3 a 93,3 b 73,3 a 36 giờ 100,0 d 0,0 a 56,7 b 73,3 c 70,0 c 48 giờ 100,0 d 0,0 a 36,7 b 43,3 bc 50,0 c 60 giờ 100,0 d 0,0 a 26,7 b 36,7 c 30,0 b 72 giờ 100,0 d 0,0 a 13,3 b 26,7 c 13,3 b 84 giờ 100,0 d 0,0 a 0,0 a 23,3 c 13,3 b 96 giờ 100,0 c 0,0 a 0,0 a 13,3 b 8,3 b Các giá trò cùng hàng có cùng mẫu tự thì không có sự sai khác ở xác suất 95% (P<0,05) . Ngược lại, các giá trò cùng hàng không cùng mẫu tự thì có sự sai khác. Dung dòch cố đònh HBSS đem lại kết quả là chất lượng tinh trùng kém nhất. Điều này có thể giải thích do áp suất thẩm thấu của dung dòch cố đònh tinh trùng. Nghiên cứu về thành phần tinh dòch, Mongkonpunya và ctv., 1996, cho rằng, dung dòch cố đònh tinh trùng nên điều chỉnh ở khoảng 300 mOsmol/Kg để giữ cho tinh trùng sống lâu. Trong khi đó, dung dòch cố đònh HBSS có áp suất thẩm thấu thấp (286 mOsmol/Kg), có thể là nguyên 4 nhân dẫn đến phần nào chất lượng tinh trùng kém. Ngược lại, áp suất thẩm thấu dung dòch nước muối sinh lý NaCl 0,9% là 300 mOsmol/Kg, CF-HBSS là 320 mOsmol/Kg và Tris là 310 mOsmol/Kg cao hơn dung dòch cố đònh HBSS nên chất lượng tinh trùng được bảo quản mang lại kết quả tốt hơn. Khi so sánh với kết quả của Mongkopunya và ctv., 1996 bảo quản tinh trùng cá tra với các dung dòch cố đònh. Kết quả tinh trùng bảo quản đến thời gian 96 giờ thì kết quả tương tự. Tuy nhiên, theo báo cáo kết quả của Mongkopunya và ctv., 1996 có sử dụng thuốc kháng sinh nên đã kéo dài thời gian sống tinh trùng được 6 ngày. Tuy nhiên, cả hai kết quả này thì thấy rằng phần trăm tinh trùng vận động tốt nhất là 2 ngày. Bảng 2 Thời gian tinh trùng vận động theo thời gian bảo quản và dung dòch cố đònh Dung dòch cố đònh Thời gian Đối chứng HBSS CF-HBSS Tris NaCl 12 giờ 50,3 ab 57,3 b 52,7 ab 55,0 b 43,7 a 24 giờ 50,3 b 42,7 a 43,3 ab 47,7 ab 41,0 a 36 giờ 50,3 d 0,0 a 37,3 b 45,0 cd 42,0 bc 48 giờ 50,3 c 0,0 a 31,0 b 37,3 b 31,7 b 60 giờ 50,3 d 0,0 a 28,0 b 34,0 c 26,7 b 72 giờ 50,3 c 0,0 a 21,3 b 27,3 b 22,0 b 84 giờ 50,3 c 0,0 a 0,0 a 20,0 b 22,0 b 96 giờ 50,3 c 0,0 a 0,0 a 17,7 b 16,3 b Các giá trò cùng hàng có cùng mẫu tự thì không có sự sai khác ở xác suất 95% (P<0,05). Ngược lại, các giá trò cùng hàng không cùng mẫu tự thì có sự sai khác. Qua bảng 2, Theo tác giả nhận thấy thời gian tinh trùng vận động cũng giảm dần theo thời gian bảo quản. Khi tinh trùng đïc trữ trong các dung dòch cố đònh ở nhiệt độ 4 0 C- 6 0 C nhằm làm tinh trùng bất động và giảm khả năng trao đổi chất, mặc dù vậy, tinh trùng vẫn hoạt động hô hấp, nghóa là đã có sự tiêu hao O 2 và năng lượng ATP. Như thế, khi thời gian bảo quản tinh trùng càng kéo dài thì thời gian tinh trùng vận động càng giảm dần, dẫn đến chất lượng tinh trùng cũng giảm dần. Tương tự như kết quả về phần trăm tinh trùng vận động, trong các dung dòch cố đònh thì dung dòch Tris, NaCl 0,9%, CF-HBSS là tốt 5 so với dung dòch cố đònh HBSS (chỉ sau 36 giờ bảo quản, tinh trùng đã không còn sống sót). Đến thời gian 96 giờ bảo quản tinh trùng trong dung dòch cố đònh Tris và NaCl 0,9% thì tinh trùng vẫn còn vận động trung bình từ 16-17 giây so với 50 giây của đối chứng, còn dung dòch cố đònh HBSS và CF-HBSS mang lại kết quả kém nhất. Để đánh giá chất lượng tinh trùng khi qua chỉ tiêu đánh giá sự vận động tinh trùng thì kiểu vận động tinh trùng là yếu tố quan trọng, ảnh hưởng đến khả năng tiếp xúc giữa tinh trùng và trứng. Kiểu vận động tinh trùng giảm dần theo thứ tự từ tinh trùng di động rất nhanh không thể nhìn thấy từng cá thể, rồi đến kiểu di động chậm, di động tại chỗ và bất động. Dựa vào thang đánh giá kiểu vận động tinh trùng của Sanchez- Rodiguez và Billard (1977), để tiến hành đánh giá sự vận động tinh trùng. Kết quả được thể hiện qua bảng 4.3 sau. Bảng 3 Kiểu tinh trùng vận động theo thời gian bảo quản và dung dòch cố đònh Dung dòch cố đònh Thời gian Đối chứng HBSS CF-HBSS Tris NaCl 12 giờ 5,0 a 5,0 a 5,0 a 5,0 a 5,0 a 24 giờ 5,0 b 4,3 a 4,0 a 5,0 b 4,3 a 36 giờ 5,0 c 0,0 a 3,7 b 4,0 b 4,0 b 48 giờ 5,0 d 0,0 a 2,7 b 3,0 bc 3,3 c 60 giờ 5,0 e 0,0 a 1,3 b 2,7 d 2,0 c 72 giờ 5,0 d 0,0 a 1,0 b 1,7 c 1,0 b 84 giờ 5,0 c 0,0 a 0,0 a 1,3 b 1,0 b 96 giờ 5,0 c 0,0 a 0,0 a 1,0 b 1,0 b Các giá trò cùng hàng có cùng mẫu tự thì không có sự sai khác ở xác suất 95% (P<0,05). Ngược lại, các giá trò cùng hàng không cùng mẫu tự thì có sự sai khác. Tương tự như kết quả đánh giá phần trăm tinh trùng vận động, thời gian tinh trùng vận động thì kiểu tinh trùng vận động sau thời gian bảo quản 24 giờ bảo quản trong các dung dòch cố đònh Tris không sai khác so với đối chứng (kiểu 5: tinh trùng vận động thật 6 nhanh mà mắt thường không thể nhìn thấy rõ từng cá thể). Tuy nhiên các dung dòch cố đònh khác cho kết quả tương đối thấp hơn (trung bình từ kiểu 4-5). Khi thời gian tinh trùng bảo quản đến 48 giờ trong các dung dòch cố đònh, kiểu tinh trùng vận động đã có sự thay đổi lớn hơn. Dung dòch cố đònh HBSS cho kết quả tinh trùng bất động (kiểu 0). Đối với dung dòch cố đònh Tris, NaCl 0,9% và dung dòch CF-HBSS thì kiểu tinh trùng vận động giảm xuống (kiểu 3: tinh trùng vận động bao gồm tinh trùng vận động nhanh, vận động chậm và không vận động). Sau thời gian 72 giờ tinh trùng bảo quản trở đi thì kiểu vận động giảm hẳn (từ kiểu 2 giảm xuống đến kiểu 0). Qua việc đánh giá chất lượng tinh trùng thông qua chỉ tiêu đánh giá sự vận động tinh trùng bảo quản trong các dung dòch cố đònh, cho thấy rằng chất lượng tinh trùng bảo quản giảm dần theo thời gian bảo quản và thay đổi theo dung dòch cố đònh tinh trùng. Trong thí nghiệm này, việc đánh giá ban đầu cho thấy dung dòch cố đònh Tris, nước muối sinh lý NaCl 0,9% là tốt nhất, kế đến là dung dòch CF-HBSS và sau cùng là dung dòch cố đònh HBSS. 3. Khả năng thụ tinh của tinh trùng bảo quản Đây là chỉ tiêu đánh giá quan trọng nhất để cho thấy chất lượng tinh trùng được bảo quản trong các dung dòch cố đònh. Chúng tôi tiến hành thí nghiệm cho thụ tinh giữa trứng và tinh trùng bảo quản trong các dung dòch cố đònh theo thời gian bảo quản từ 24-72 giờ. Do kết quả thụ tinh, ngoài việc lệ thuộc vào chất lượng tinh trùng còn lệ thuộc đến chất lượng trứng, cho nên chúng tôi tiến hành thí nghiệm lập lại sự thụ tinh trên ba cá cái. Sau đây là kết quả tỉ lệ thụ tinh, tỉ lệ nở, tỉ lệ dò hình, và chất lượng cá bột theo thời gian bảo quản tinh trùng và dung dòch cố đònh tinh trùng. a/ Đánh giá tỉ lệ thụ tinh Bảng 4 Tỉ lệ thụ tinh sau thời gian bảo quản 24 giờ tinh trùng được bảo quản trong các dung dòch cố đònh Dung dòch cố đònh Đối chứng HBSS CF-HBSS Tris NaCl Cá cái 1 80,7 a 92,8 b 92,4 b 93,5 b 83,6 a Cá cái 2 93,5 c 69,4 a 72,9 ab 87,6 bc 91,2 c Cá cái 3 80,1 bc 68,6 a 72,8 a 86,2 c 79,4 b Trung bình 86,0 a 76,9 a 79,3 a 89,1 a 84,7 a 7 Các giá trò cùng hàng có cùng mẫu tự thì không có sự sai khác ở xác suất 95% (P<0,05). Ngược lại, các giá trò cùng hàng không cùng mẫu tự thì có sự sai khác. Qua bảng 4, theo tac giả nhận thấy tỉ lệ thụ tinh sau thời gian 24 giờ tinh trùng bảo quản trong các dung dòch cố đònh không sai khác so với đối chứng (86,0%), nhất là dung dòch cố đònh Tris (89,1%) và dung dòch NaCl 0,9% (84,7%) cho kết quả rất tốt. Bảng5 Tỉ lệ thụ tinh sau thời gian bảo quản 48 giờ tinh trùng được bảo quản trong các dung dòch cố đònh Dung dòch cố đònh Đối chứng HBSS CF-HBSS Tris NaCl Cá cái 1 94,6 b 50,0 a 52,7 a 88,0 b 51,4 a Cá cái 2 96,8 c 50,8 a 74,4 b 96,8 c 43,5 a Cá cái 3 97,8 c 50,8 a 56,7 a 74,4 b 52,0 a Trung bình 96,4 b 50,5 a 61,2 a 86,4 a 49,0 a Các giá trò cùng hàng có cùng mẫu tự thì không có sự sai khác ở xác suất 95% (P<0,05). Ngược lại, các giá trò cùng hàng không cùng mẫu tự thì có sự sai khác. Khi thời gian bảo quản tinh trùng tăng lên đến 48 giờ thì mang lại kết quả thụ tinh có sự sai khác so với đối chứng (bảng 4.5). Dung dòch cố đònh CF-HBSS, HBSS và nước muối sinh lý NaCl 0,9% thì tỉ lệ thụ tinh giảm xuống khá nhiều từ 49% đến 61,2% so với đối chứng (96,4%). Nhưng riêng với dung dòch cố đònh Tris, tỉ lệ thụ tinh (86,4%)so với đối chứng (96,4%) thì sai khác ít. Tỉ lệ thụ tinh sau thời gian 72 giờ tinh trùng bảo quản trong các dung dòch cố đònh so với đối chứng có sự sai khác rõ rệt (bảng 4.6). Cụ thể như dung dòch cố đònh Tris (56,1%), dung dòch HBSS (46,8%), dung dòch CF-HBSS (44,4%), dung dòch nước muối sinh lý NaCl 0,9% (36,9%) so với đối chứng (91,2%). 8 Bảng 6 Tỉ lệ thụ tinh sau thời gian bảo quản 72 giờ tinh trùng được bảo quản trong các dung dòch cố đònh Dung dòch cố đònh Đối chứng HBSS CF-HBSS Tris NaCl Cá cái 1 93,6 c 38,9 ab 42,5 b 49,5 b 27,7 a Cá cái 2 88,0 c 48,5 b 40,3 ab 45,3 b 32,1 a Cá cái 3 92,0 c 53,0 a 50,4 a 73,5 b 50,9 a Trung bình 91,2 c 46,8 ab 44,4 ab 56,1 b 36,9 a Các giá trò cùng hàng có cùng mẫu tự thì không có sự sai khác ở xác suất 95% (P<0,05). Ngược lại, các giá trò cùng hàng không cùng mẫu tự thì có sự sai khác. Liên hệ với kết quả đánh giá sự vận động tinh trùng cho thấy rằng sự vận động tinh trùng có liên quan đến kết quả thụ tinh. Ở thời gian 24 giờ bảo quản tinh trùng trong các dung dòch cố đònh thì phần trăm tinh trùng vận động (63,3-93,3%) và kiểu tinh trùng vận động (4-5) ứng với tỉ lệ thụ tinh (76,9-89,1%) so với đối chứng vẫn không sai khác. Đến thời gian 48 giờ bảo quản tinh trùng, khả năng tinh trùng vận động giảm xuống (36,7- 50,0% tinh trùng vận động và kiểu tinh trùng vận động là 2- 3) ngoại trừ trường hợp dung dòch cố đònh HBSS. Riêng ở dung dòch cố đònh Tris, kết quả tỉ lệ thụ tinh sau 48 giờ tinh trùng bảo quản đạt tỉ lệ cao (86,4%) so với đối chứng (96,4%) thì sai khác ít. Điều này có thể giải thích do dung dòch cố đònh Tris ngoài việc chứa nước muối sinh lý NaCl 0,9% còn có dung dòch đệm giữ pH trung tính, tạo môi trường ổn đònh giúp cho tinh trùng bảo quản được ổn đònh hơn, ít thay đổi so với các dung dòch cố đònh khác. Với kết quả tỉ lệ thụ tinh cho thấy rằng tỉ lệ thụ tinh của tinh trùng bảo quản trong các dung dòch cố đònh giảm dần theo thời gian bảo quản và thay đổi theo dung dòch cố đònh. Trong các dung dòch cố đònh, thì dung dòch Tris là dung dòch đạt kết quả cao nhất. Và thời gian bảo quản hiệu quả chỉ hai ngày để cho kết quả tương đương với đoiá chứng, nhưng đến thời gian bảo quản sau 72 giờ thì kết quả thụ tinh chỉ còn phân nữa so với đối chứng. b/ Đánh giá tỉ lệ nở Sau khi trứng thụ tinh, chúng tôi tiếp tục đánh giá tỉ lệ nở để xem chất lượng tinh trùng bảo quản trong các dung dòch cố đònh thay đổi theo thời gian bảo quản và dung dòch cố đònh. Kết quả được trình bày sau đây 9 Theo thời gian tinh trùng bảo quản, kết quả thí nghiệm ở bảng 4.7 cho thấy sau 24 giờ tinh trùng bảo quản trong dung dòch cố đònh HBSS và CF-HBSS cho kết quả tỉ lệ nở cá bột (85,7- 89,0%) so với đối chứng (92,6%) có sai khác nhưng rất ít. Đối với hai dung dòch cố đònh Tris và NaCl 0,9% cho kết quả tỉ lệ nở (91,9- 92,0%) không sai khác so với đối chứng (92,6%). Khi thời gian bảo quản tinh trùng đến 48 giờ, tỉ lệ nở có sự sai khác với đối chứng (bảng 4.8). Tinh trùng bảo quản trong dung dòch NaCl 0,9%, HBSS có tỉ lệ nở bằng không, trong khi hai dung dòch cố đònh Tris và CF-HBSS dẫn đến tỉ lệ nở khá cao lần lượt là 82,6% và 61,8%. Như vậy, sau 48 giờ tinh trùng bảo quản, chỉ có dung dòch cố đònh Tris cho kết quả tương đương với đối chứng, kế đến là dung dòch cố đònh CF-HBSS, còn hai dung dòch cố đònh HBSS và NaCl 0,9% cho kết quả kém nhất. Bảng 7 Tỉ lệ nở cá bột sau thời gian 24 giờ bảo quản tinh trùng trong các dung dòch cố đònh Dung dòch cố đònh Đối chứng HBSS CF-HBSS Tris NaCl Cá cái 1 89,0 ab 87,1 a 87,6 ab 88,9 ab 90,6 b Cá cái 2 93,7 a 83,5 a 93,3 a 94,4 a 94,9 a Cá cái 3 94,9 d 86,6 ab 85,9 a 92,7 cd 90,2 bc Trung bình 92,6 b 85,7 a 89,0 ab 92,0 b 91,9 b Các giá trò cùng hàng có cùng mẫu tự thì không có sự sai khác ở xác suất 95% (P<0,05). Ngược lại, các giá trò cùng hàng không cùng mẫu tự thì có sự sai khác. Sau thời gian 72 giờ tinh trùng bảo quản, tỉ lệ nở giảm xuống đang kể (bảng 9). Chỉ có dung dòch cố đònh Tris đạt kết quả cao nhất (42,1%), kế đến là dung dòch CF-HBSS (14,1%) so với đối chứng (92,0%). 10 Bảng .8 Tỉ lệ nở cá bột sau thời gian 48 giờ bảo quản tinh trùng trong các dung dòch cố đònh Dung dòch cố đònh Đối chứng HBSS CF-HBSS Tris NaCl Cá cái 1 94,5 d 0,0 a 71,5 b 86,8 c 0,0 a Cá cái 2 83,7 c 0,0 a 58,5 b 82,9 c 0,0 a Cá cái 3 80,0 c 0,0 a 55,4 b 78,1 c 0,0 a Trung bình 86,1 c 0,0 a 61,8 b 82,6 c 0,0 a Các giá trò cùng hàng có cùng mẫu tự thì không có sự sai khác ở xác suất 95% (P<0,05). Ngược lại, các giá trò cùng hàng không cùng mẫu tự thì có sự sai khác. Bảng 9 Tỉ lệ nở cá bột sau thời gian 72 giờ bảo quản tinh trùng trong các dung dòch cố đònh Dung dòch cố đònh Đối chứng HBSS CF-HBSS Tris NaCl Cá cái 1 83,2 c 0,0 a 6,9 a 34,9 b 0,0 a Cá cái 2 97,4 d 0,0 a 19,3 b 40,0 c 0,0 a Cá cái 3 95,3 d 0,0 a 16,2 b 51,3 c 0,0 a Trung bình 92,0 d 0,0 a 14,1 b 42,1 c 0,0 a Các giá trò cùng hàng có cùng mẫu tự thì không có sự sai khác ở xác suất 95% (P<0,05). Ngược lại, các giá trò cùng hàng không cùng mẫu tự thì có sự sai khác. Như vậy, khi bảo quản tinh trùng ngắn ngày, bốn dung dòch cố đònh Tris, nước muối sinh lý NaCl 0,9%, CF-HBSS, HBSS cho kết quả tỉ lệ nở tương đương với đối chứng chỉ [...]... kết quả thí nghiệm bảo quản tinh trùng ngắn ngày của cá Tra và Cá Basa Chúng tôi chọn hai chỉ tiêu là tỷ lệ thụ tinh và tỷ lệ nở để tiến hành so sánh việc bảo quản tinh trùng ngắn ngày giữa cá Tra và cá Basa a So sánh tỷ lệ thụ tinh của cá Tra và cá Basa trong thí nghiệm bảo quản tinh trùng ngắn ngày Số liệu về đánh gía sự sống và hoạt động tinh trùng cá Tra và cá Basa rất nhiều ở các phần trình bày... tôi không thực hiện thụ tinh được cho tinh trùng cá Basa bảo quản dài ngày Do đó, chúng chỉ sử dụng các chỉ tiêu đánh gía sự vận động tinh trùng là phần trăm tinh trùng, thời gian và kiểu tinh trùng vận động kết quả của thí nghiệm bảo quản tinh trùng cá Tra và cá Basa ngắn ngày chúng tôi có thể đánh giá chất lượng tinh trùng của cá Tra và cá Basa bằng chỉ tiêu là phần trăm tinh trùng vận động có thể... hơn cá Tra là 36,9% và cũng thấp hơn so với dung dòch cố đònh Tris Qua đó cho thấy chất lượng tinh trùng của cá Tra và cá Basa bảo quản trong dung dòch cố đònh Tris tốt hơn dung dòch cố đònh NaCl, chất lượng tinh trùng của cá Tra bảo quản trong dung dòch cố đònh Tris và NaCl tốt hơn cá Basa ở thí nghiệm bảo quản tinh trùng ngắn ngày b So sánh tỷ lệ nở của cá Tra và cá Basa trong thí nghiệm bảo quản tinh. .. đệm thích hợp với tinh trùng hơn các dung dòch khác 2 Phương pháp bảo quản bằng nitơ lỏng cho tinh trùng cá Basa Dựa trên nền tảng thí nghiệm thí nghiệm bảo quản tinh trùng cá tra dài ngày vừa được chúng tôi tiến hành Tác giả chọn ra những nghiệm thức có kết quả chất lượng tinh trùng tốt nhất để tiến hành thí nghiệm bảo quản tinh trùng cá Basa dài ngày Thí nghiệm bảo quản tinh trùng cá Basa dài ngày... thụ tinh tốt hơn so với các dung dòch cố đònh còn lại Với phương pháp bảo quản ngắn ngày cho tinh trùng cá tra (Pangasius hypophthalmus) trong thí nghiệm này, đã cho kết quả bảo quản tinh trùng mang lại hiệu quả nhất là trong hai ngày Trong đó, dung dòch cố đònh Tris là tốt nhất 4 Phương pháp bảo quản bằng nitơ lỏng cho tinh trùng cá tra Pagasius hypophthalmus Để bảo quản dài ngày tinh trùng cá tra. .. theo thời gian bảo quản d Tỉ lệ thụ tinh của tinh trùng Cứ sau mỗi 24 giờ, theo tác giả lấy tinh trùng bảo quản trong các dung dòch cố đònh tinh trùng Tris, NaCl, HBSS, CF-HBSS đem đi thụ tinh với trứng cá cái, thu được kết quả về tỉ lệ thụ tinh ở bảng 20 như sau Bảng 20 Tỉ lệ thụ tinh của trứng với tinh trùng cá Basa bảo quản ngắn ngày (đơn vò %) Thời gian Đối chứng Dung dòch cố đònh tinh trùng HBSS CF-HBSS... và kiểu tinh trùng vận động thí nghiệm bảo quản tinh trùng dài ngày chúng tôi nhận thấy chất lượng tinh trùng tốt nhất ở cá Tra là hai chất bảo vệ DMSO và glycerol, và ở cá Basa là DMSO Mặt khác, theo kết bảo quản tinh trùng ngắn ngày thì số lượng tinh trùng vận động nhỏ hơn hoặc bằng 10% thì không có khả năng thụ tinh Nên chúng tôi tiến hành so sánh phần tinh trùng vận động của cá Tra và cá Basa... gian bảo quản Chất lượng tinh trùng bảo quản trong dung dòch cố đònh Tris và NaCl tốt hơn chất lượng tinh trùng bảo quản trong dung dòch cố đònh tinh trùng HBSS và CF-HBSS Để có thể kết luận được chính xác chất lượng tinh trùng bảo quản trong các dung dòch cố đònh theo thời gian, chúng tôi còn kiểm tra tinh trùng này bằng các chỉ tiêu tiếp theo là tỉ lệ thụ tinh, tỉ lệ nở, tỉ lệ sống và dò hình của cá. .. đònh cố đònh NaCl Vậy ở thí nghiệm bảo quản tinh trùng ngắn ngày, ở cá Basa thì 2 chất bảo vệ đạt yêu cầu là Tris và NaCl Còn ở cá Tra thì chỉ có chất bảo vệ Tris là đạt yêu cầu 2 So sánh kết quả thí nghiệm bảo quản tinh trùng bằng nitơ tơ lỏng của cá Tra và cá Basa theo tác giả cũng chọn ra những nghiệm thức có kết quả tốt nhất trong thí nghiệm bảo quản tinh trùng cá Tra và Basa dài ngày để tiến hành... kiểu tinh trùng vận động, kết qủa thụ tinh với tinh trùng bảo quản không không thể tiến hành do sau khi bảo quản đã cuối mùa vụ nên không có cá cái thành thục Đối với chất bảo vệ DMSO chúng tôi cũng dùng phương pháp đánh gía sự sống và hoạt động của tinh trùng như ở thí nghiệm ngắn ngày và thu được kết quả như sau Bảng 24 Chất lượng tinh trùng với chất bảo vệ DMSO trong thí nghiệm bảo quản tinh trùng cá . PHÁP BẢO QUẢN TINH TRÙNG CÁ TRA VÀ BA SA DÀI NGÀY BẰNG NITƠ LỎNG a/ Thí nghiệm: Đánh giá sự vận động tinh trùng bảo quản trong Nitơ lỏng. Qui trình bảo quản tinh trùng được trình bày các bước. lượng tinh trùng được bảo quản mang lại kết quả tốt hơn. Khi so sánh với kết quả của Mongkopunya và ctv., 1996 bảo quản tinh trùng cá tra với các dung dòch cố đònh. Kết quả tinh trùng bảo quản. Cá Tra 1. Phương pháp bảo quản ngắn ngày tinh trùng cá tra Pagasius hypophthalmus Tinh trùng được vuốt ra khỏi cá đực và chỉ hoạt động khi được tiếp xúc với nước. Sự thụ tinh giữa tinh trùng