BÀI GIẢNG CHỌN GIỐNG CÂY TRỒNG CHUYÊN KHOA 1 pdf

thành công là chọn lọc nhằ m cố định các biến dị di truyền.Có một số phương pháp chọn lọc thường áp dụng cho cải tiến giống lúa là: - Chọn lọc cá thể hay chọn lọc phả hệ pedigree được bắ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM HUẾ

DỰ ÁN HỢP TÁC VIỆT NAM – HÀ LAN

BÀI GIẢNG

CHỌN GIỐNG CÂY TRỒNG CHUYÊN KHOA 1

Người biên soạn: TS Lê Tiến Dũng

Huế, 08/2009

Bài 1 CHỌN TẠO GIỐNG LÚA

1- CHỌN TẠO GIỐNG LÚA

1.1 Mục tiê u chọn tạo giống lúa

Muốn thực hiện thành công việc chọn tạo giống lúa, nhiệ m vụ đầu tiên là phải xác định được mục tiêu cho từng chương trình cụ thể Công tác cải tạo giống thường bao gồm 4 mục tiêu sau đây:

- Tạo ra giố ng mới có năng suất cao hơn giố ng cũ trong cùng điều kiên, mùa vụ, đất đai và chế độ canh tác

- Giống mới phải có chất lượng tốt hơn giống cũ, được mọ i người ưa chuộng, có giá trị dinh dưỡng cao hơn, chất lượng nấu nướng ngon hơn

- Giống mới có khả năng chống chịu tốt với các loại sâu bệnh hại chính của từng vùng, từng vụ mà giống đó gieo trồng

- Giống mới phải thíc h ứng tốt hơn với điều kiện khí hậu, đất đai, tập quán canh tác, hệ thống luân canh của nhữ ng vùng nhất định

Các mục tiêu nê u trên còn được cụ thể hoá cho từng gia i đoạn của các đề tài chọn giống

1.2 Lựa chọn phương pháp thích hợp để giải quyế t các mục tiê u:

Công tác cải tiến giống lúa được thực hiện bằng một số phương pháp kinh điển

và một số phương pháp mới hỗ trợ cho các phương pháp cũ đạt hiệu qủ nha nh hơn Mỗi chương trình cải tiế n giống, tuỳ theo mục tiêu và nhiệ m vụ mà lựa chọn phương pháp thích hợp Trong quá trình lựa chọn phương pháp, ngoài việc tính đến khả năng vật chất còn phải tính đến kinh phí hoạt động thường xuyên và nguồn nhân lực trong

đó quan trọng nhất là trình độ hiểu biết sâu của các nhà khoa học chủ trì từng lĩnh vực

cụ thể

Các phương pháp cải tiến giố ng bao gồ m:

1.2.1 Các phương pháp gây tạo biến dị

- Nhập nội và chọn lọc thuần hoá

- Lai và chọn lọc các thế hệ bằng đột biến vật lí hoá học và chọn lọc

- Tạo các dòng bat dục đực tế bào chất, bất dục đực nhân và các công cụ di truyền khác để tạo giố ng ưu thế lai

- Lai xa và ứng dụng công nghệ sinh học để chuyển nạp những ge n chống chịu đặc hiệu vào các giống có năng suất cao, chất lượng tốt

1.2.2 Các phương pháp chọn lọc

Sau quá trình thu thập đánh giá vật liệ u và tiến hà nh gây tạo các biến dị theo định hướng cảu các nhà chọn giống thì công việc quan trọng hơn cả và quyết định

thành công là chọn lọc nhằ m cố định các biến dị di truyền.Có một số phương pháp chọn lọc thường áp dụng cho cải tiến giống lúa là:

- Chọn lọc cá thể hay chọn lọc phả hệ (pedigree) được bắt đầu ngay ở thế hệ mới phân li của quần thể ( F2 ở lai đơn, F1 ở lai ba, M1 và M2 ở quần thể gây đột biến nhâ n tạo )

1.2.3 Phương pháp đánh giá dòng và so sánh giống mới

Trong quá trình chọn lọc biế n dị, nhà chọn giống phải vận dụng các kiến thức khoa học về di truyền, phải ghi nhớ các tính trạng của vật liệ u khởi đầu, vận dụng mong muốn Sau khi gieo, cá thể đó lạ i tiếp tục được theo dõi kiể m tra những biểu hiện

ở thế hệ sau Đến khi có được dòng thuầ n cần tiến hà nh đánh giá khách quan, tiến tới các khảo nghiệ m sinh tái, khảo nghiệ m kĩ thuật và phổ biến giố ng mới trong sản xuất Các phương pháp được sử dụng để đánh giá trong giai đoạn này là :

- Phương pháp khảo nghiệ m năng suất (Khảo nghiệm cơ bản)

- Phương pháp khảo nghiệ m sinh thái

- Phương pháp khảo nghiệ m kĩ thuật

Để tiế n hành khảo nghiệ m nă ng suất người ta thường chia là m ha i bước : quan sát năng suất và so sánh nă ng suất

+ Quan sát năng suất : năng suất là một hà m số của tiề m năng năng suất, khả năng chống chịu sâu bệnh, khả năng thíc h ứng với điều kiện mô i trường, kĩ thuật trồng trọt và các ảnh hưởng khác

Nhà chọn giống lúa có thể dễ dàng đánh giá tiề m năng năng suất giống do mình

đã cải tiến trong vườn chọn lọc Nhưng điều quan trọng ở đây là cần có số liệu về năng suất thực ở những điều kiện gieo trồng nhất định Do vậy phải bố trí các thí nghiệ m so sánh năng suất sơ bộ hay thí nghiệm quan sát Các quan sát có thể sớm ở các thế hệ lai

F3 - F4 khi các dòng còn chưa thật ổn định Nhờ các kết quả quan sát sớm người ta có thể loại khá nhiều dòng không đạt yêu cầu mà chỉ giữ lại một số ít để vừa chọn thuần vừa quan sát

+ So sánh năng suất : thường bắt đàu từ hạ F5 hoặc F6: đây là các thí nghiệ m so sánh sơ bộ kết hợp với chọn lọc Cách là m cụ thể là: các dòng được tuyển chọn trong vườn quan sát thu được 30 bông, chọn các bông từ các cá thể đồng dạng đem về phòng quan sát lạ i các tính trạng về hạt, loại bỏ những bông không đúng dạng rồi tuốt hỗn

hợp để gieo so sánh không nhắc lại hoặc nhắc lại ba lần Ở mỗi ô so sánh chọn tiếp 3 cá thể đúng dạng mong muốn để trồng ở vườn chọn lọc vụ sau Xác định năng suất của ô thí nghiệ m nhưng hạt không dùng là m giống mà dùng để đánh giá chất lượng gạo Nếu dòng đó có năg suất cao, chất lượng đạt yêu cầu thì thu hạt của 3 cá thể hoặc 1 trong 3

cá thể trong vườn chọn lọc để là m thí nghiệm ở vụ sau Cách đánh giá sớm kết hợp với chọn lọc cá thể sẽ chọn được các dòng thuần có năng suất cao và sớm ổn định

2 Kĩ thuật chọn tạo giống lúa

2.1 Kĩ thuật chọn giống lúa lai ( sử sụng ưu thế lai )

a) Chọn giố ng lúa lai theo phương pháp "3 dòng"

Hệ thống lai 3 dòng được đặc trưng bởi việc sử dụng 3 dòng có bản chất di truyền đặc biệt để sản xuất hạt la i thương phẩ m đó là các dòng : bất dục đực di truyền

tế bào chất (dòng A), dòng duy trì bất dục (dòng B), dòng phục hồ i phấn (dòng R) Các dòng bố mẹ phải đồng bộ mới tạo được một tổ hợp lai hoàn chỉnh theo sơ đồ sau:

A x B R

Duy trì dòng bất dục A x R

F1 Sản xuất hạt lai Nếu thiếu bất kì dòng nào trong 3 dòng trên đây đều không có được tổ hợp lai mong muốn

- Dòng bất dục đực di truyền tế bào chất tìm đươc đầu tiên là dạng lúa dại ở đảo Hải Nam ( Trung Quốc ) Các nhà chọn giố ng đã tiến hành la i dạng dại bất dục với nhiề u giố ng lúa bất dục, có những giống, khi lai với dạng bất dục cho con lai bán bất dục và những giống khác nhau khi lai lại thu được con la i hữu dục hoàn toàn

Căn cứ vào những đặc điể m kể trên người ta đặt tên cho chúng là : dòng duy trì bất dục, dòng trung gian và dòng phục hồi phấn Bản chất di truyền của các dòng trên được mô hình hoá với cấu trúc di truyền

Tính bất dục đực của dòng A di truyền nhờ hoạt động của gen trong tế bào chất

là chủ yếu Vật liệu di truyề n trong tế bào chất luô n di truyền theo dòng mẹ không qua quá trình phân chia như gen trong nhâ n Vì vậy tính bất dục của dòng mẹ di truyền ổn

Hiệ n nay người ta đã xác địh được ha i kiể u bất dục đực tế bào chất ở lúa là bất dục đực bào tử thể (Sporophytic) và bất dục đực giao tử thể (Gametophytic) Hai kiểu này khác nha u cơ bản về di truyền có thể xác định bằng phương pháp kiểm tra hình thái và độ nhuộm mà u của hạt phấn trên kính hiển vi quang học hoặc kiể m tra thông qua gieo hạt F2 và thống kê tỉ lệ cây bất dục Nếu dòng mẹ thuộc kiểu bất dục đực bào

tử thì quần thể F2 sẽ có 1/4 số cá thể bất dục, nếu dòng mẹ thuộc kiểu bất dục giao tử thể thì quần thể F2 khồn có cây có cấu trúc di truyề n kiểu S(rr) ở quần thể F2

Những cây lúa bất dục đực vẫn sinh trưởng phát triển bình thường, các cơ quan sinh sản phát triển bình thường chỉ có hạt phấn bị thoái hoá Khi nhận được phấn của giống khác cùng loài thì quá trình thụ phấn thụ tinh được thực hiện bình thường, tỉ lệ kết hạt cao

Có thể tạo dòng bất dục đực tế bào chất bằng lai nhiều lầ n với dòng giống nào

có khả năng duy trì bất dục để tạo ra một cặp dòng A và B mới đồng tế bào chất với dòng mẹ khởi đầu Cũng có thể tạp bằng phương pháp lai xa hoặc gây đột bién nhân tạo

- Dòng duy trì bất dục (dòng B): gen duy trì tính bất dục đực là gen lặn (rr) nằm trong nhân tế bào của giống có tế bào chất ma ng gen bình thường (N) không chứa gen bất dục Vì vậy lúa có hạt phấn phát triển, bao phấn mẩy và mở khi hoa nở Khi lai với dòng CMS thì cây lai F2 bất dục phấn, vì vậy người ta thường kí hiệu là A/B A ( cây con giống cây mẹ về mọ i tính trạng)

- Dòng phục hồ i tính hữu dục (dòng R): ge n phục hồ i tính hữu tính hữu dục là gen trội trong nhân tế bào (RR) Có giống chứa cặp gen trội, có giống chứa 2 cặp gen trội Giố ng chứa 2 cặp gen trội R1R1, R2R2 thwòng có khả năng phục hồi mạ nh hơn giống chứa một cặp gen phục hồi

Các dòng phục hồi thường chỉ thể hiện khả năng phục hồi khi la i với các dòng bất dục đực cùng loài phụ mà khoio ng có khả năg phục hồi cho các dòng bất dục khác loài

Tạo dòng phục hồi bằng 3 phương pháp : lai thử với dòng bất dục, lai các dòng phục hồi với các dòng giống khác ,gây đột biến để tạo dòng phục hồi

b) Chọn giố ng lúa lai theo phương pháp "2 dòng"

Trong các dạng lúa bất dục, ngoài các dạng CMS người ta còn tìm được nhiều dạng bất dục đực nhân Các dạng bất dục đực "chức năng" được sử dụng đầu tiên để sản xuất hạt lai theo phương pháp "2 dòng"

Bất dục "chức năng" có cơ chế di truyền đặc biệt, thường gọi là dòng bất dục đực cảm ứng với điều kiện môi trường (Environment - sensitive Genic male Sterile : EGMS) Có ha i loại được sử dụng phổ biến là dòng bất dục đực di truyề n nhân cảm ứng nhiệt độ (The mo sensitive Genic ma le Sterile : TGMS) và dòng bất dục đực di truyền nhân cả m ứng quang chu kì (Photoperiod - sensitive Genic male Sterile : PGMS)

Dòng TGMS bất dục phấn khi gặp nhiệt độ cao >27oC và hữu dục nhiệt độ thấp

<24oC Khi nhiệt độ từ 24oC - 26oC thường quan sát thấ y hiện twọng hạt phấn chuyển hoá., hạt bất dục và hữu dục xen kẽ nhau, kích thước hạt phấn nhỏ hơn vf khồn đều

Dòng PGMS bất dục phấn khi gặp thời gia n chiế u sáng dài >14 giờ/ngày và hữu dục khi thời gia n chiếu sáng ngắ n <13g45'/ngà y

Gen kiể m tra tính bất dục "chức năng" là một cặp gen lặn trong nhân tế bào Cặp gen này hoạt động khi gặp điều kiện thíc h hợp trong gia i đoạn thíc h hợp, cụ thể là những dòng TGMS hoặc PGMS được sử dụng hiệ n nay thì cặp gen lặn kiể m tra tính bất dục "c hức năng" hoạt động gây bất dục phấn khi nhiệt độ cao hoặc ánh sáng dài vào thời kì cây lúa đang phâ n hoá đòng ở bước 3 đến bước 6 (18 - 12 ngày trước khi trổ) Cặp gen này hoạt động gây ra hạt phấn hữu dục khi vào thời kì trên, nhiệt độ giảm thấp <24oC hoặc thời gia n chiếu sáng ngắ n dưới 13g45'

Lợi dụng tính ha i mặt của các dòng bất dục kể trên để bố trí nhân dòng bất dục điều khiển khi lúa phân hoá đòng (bước 3 đến 6) gặp nhiệt độ mát (20-24oC) hoặc thời gian chiếu ngắn (< 13g45') và bố trí sản xuất hạt lai vào mùa nóng (nhiệt độ >27oC) hoặc ở vùng vĩ độ cao có thời gian chiếu sáng > 14h/ngày

Nước ta nằm ở vĩ độ 8 - 22o bắc nên không đủ điề u kiện để sử dụng các dòng PGMS hiện có, nhưng nwóc ta lại có đủ điều kiện để sử dụng các dòng TGMS Có thể sản xuất hạt dòng mẹ ở các vùng núi cao như Sapa, Đà lạt, Ta m Đảo Sản xuất hạt lai được tiến hành vào mùa hè (vụ mùa) ở các tỉnh phía Bắc hoặc vào các vụ khác ở Nam Trung Bộ hay Nam bộ

Sử dụng hệ thống "2dòng" có thể giả m giá thành hạt lai so với hệ "3dòng" Ngoài ra còn tránh hiệ n twọng đồng tế bào chất, mở rộng phạm vi tìm k iế m các dòng phục hồi cho ưu thế lai cao và cải tiến phẩm chất dễ thành công hơn so với cải tiến phẩ m chất cho hệ thống 3 dòng lai cao và cải tiến phẩ m chất dễ thành công hơn so với cải tiế n phẩm chất cho hệ thống 3 dòng

c) Chọn giố ng lúa lai theo phương pháp "một dòng"

Là ý tưởng của các nhà chọn giố ng nhiều nước trên thế giới được thảo luậ n và thống nhất tại hội thảo Quốc tế về “Lúa lai một dòng” tổ chức tại Trung Quốc năm

1992 Lúa la i “một dòng” là phương pháp sản xuất “hạt lai thuầ n” nhờ sử dụng một công cụ di truyền mới là thể vô phối Hiệ n nay ở nhiề u phò ng thí nghiệ m di truyề n và sinh học, nhiều trung tâ m kĩ thuật cao nghiên cứu thể vô phố i ở lúa bằng công nghệ gen, tạo ra hạt vô phối Từ các dạng vô phối này có thê tìm ra các tổ hợp lai vô phối có

ưu thế lai cao, không phân li và có thể cố định ưu thế lai qua nhiều thế hệ

2.2 Kĩ thuật chọn giống lúa thuần

a) Chọn giố ng lúa bằng phương pháp nhập nội: thủ tục chọn lọc giống nhập nội đơn giản: sau khi nhập, vào sổ gốc, chia lô hạt nhập và gieo vào một hoặc một số thời

chứng thích hợp Cấy 1 dảnh/khóm Ở ô quan sát tập đoàn vụ đầu tiên có thể cấy ít không cần bố trí nhắc lại nế u là các giống nhập để quan sát năng suất, thời gian sinh trưởng, chất lượng Đối với những giống nhập có các tính trạng đặc biệt như chống sâu, rầy, chống bệnh, chịu mặn, hạn, úng cần gieo cấy trong những điều kiện có thể quan sát được các tính trạng trên

Theo dõi định kì về các chỉ tiêu sinh trưởng từ khi gieo đến thu hoạch Đánh giá khả năng chống chịu tự nhiê n trên đồng ruộng Đánh giá độ thuần, đặc điểm phân li, tính thíc h ứng, biểu hiệ n về hình thái, mà u sắc thân lá, kiể u bông, kiể u hạt và dự đoán năng suất Lấy mẫu để đo đế m các tính trạng số lượng và năng suất Trên cơ sở của số liệu quan sát và đo đếm để quyết định sử dụng giố ng nhập theo hướng nào

b) Kĩ thuật chọn tạo giống lúa bằng phương pháp lai

Để tiến hành chọn giống bằng phương pháp lai cần phả i thực hiệ n tuần tự các bước sau:

- Tổ chức gieo cấy tập đoàn công tác: số lượng giố ng gieo cấy trong vườn tập đoàn càng nhiều càng tốt Sự đa dạng về kiể u hình, thời gian sinh trưởng, tiề m năng năng suất, khả năng chống chịu sâu bệnh và điề u kiệ n ngoại cảnh bất thuận sẽ là nguồn vật liệu quý để chọn lọc bố mẹ

- Tiến hành lai giữa các cá thể được chọn lọc: để thực hiện lai giữa các giố ng đã

dự định cần thực hiện một số việc theo trình tự sau:

+ Trồng cây mẹ vào chậu, ô xây hoặc gần bờ ruộng ở vị trí có thể ngồi làm việc được

+ Khử đực: khi cây mẹ trổ bông (trên 2/3 bông nhô khỏi bẹ lá đòng), tiến hà nh khử đực vào buổi chiề u trước ngày la i Trên bông lúa định lai, cắt bỏ hết những gié quá non, những hoa đã nở trước và tỉa thưa hoa trên gié Để thao tác dễ dàng, giữ 25 – 30 hoa có độ thành thục vừa phải trên một bông để khử đực Có thể khử đực bằng một số biện pháp như : cắt mở vỏ trấu rồi dùng panh gắp 6 bao phấ n bỏ đi Dùng nước nóng hoặc hơi nóng từ 43 – 450C để bông lúa trong đó 7 – 10’ Sau thời gian gặp nóng đa số hạt phấn chết, các hoa đều mở và chỉ nhị vươn dài đẩy bao phấn ra ngoài, dùng panh nhặt bỏ hết các bao phấn Sau khi khử xo ng bao cách li từng bông

+ Thụ phấn: sáng hô m sau (từ 6 – 7h) đi thu bông của giống dự định là m cây bố (thu 3 – 5 bông cho một tổ hợp) Các bông bố trổ 2/3 là thích hợp Các bông thu để lấy phấn cắt bỏ hết phần lá và cắm vào cốc nước, để nơi kín gió, có ánh nắ ng mặt trời và nhiệt độ từ 28 – 320C Khoảng 9 – 10h sáng, các hoa đều nở Rút từng bông đang

nở hoa, đưa vào bao cách li bông cây mẹ đã khử đực và rũ phấn Thao tác rũ phấn cần lặp lại 3 – 4 lần để các hoa cây mẹ đều có thể nhận phấ n

- Ghi thẻ đánh dấu tổ hợp, ngày la i và đeo thẻ vào bông lai

- Sau 25 – 30 ngà y thu hạt lai phơi khô và cất giữ chờ thời vụ để gieo

+ Khi đến vụ gieo cần kiể m tra hạt, khử trùng hạt cẩn thận, nếu khử đực bằng cách cắt mở vỏ trấu thì khi gieo nên bóc vỏ trấu, sát trùng hạt gạo rồi gieo vào giấ y lọc

trong đĩa petry, nếu khử đực bằng phương pháp không gây tổn thương vỏ trấu thì ngâm

ủ và gieo bình thường

+ Các cây la i mọc, được cấy ra chậu, vại trong nhà lưới, sau khi mạ khoẻ (4 – 5 lá) cấy ra ruộng Theo dõi sinh trưởng phát triển và đánh giá các hiệ u ứng sau khi lai Khử bỏ các cá thể tự thụ phấn hoặc cá thể quá xấu trong tổ hợp Thu hạt F1 có thể giữ riêng từng cây hoặc hỗn hợp chung cả tổ hợp để phơi và bảo quản đến vụ sau

+ Gieo hạt F2 mỗi tổ hợp từ 2.000 – 5.000 cá thể Nếu chọn lọc theo phương pháp phả hệ (pedigree) thì cấy F2 ra ruộng: cấy thưa 1 dảnh/khó m, cách 10 – 12 hàng

để 1 hàng rộng để tiện đi vào khi chọn cá thể Mỗi tổ hợp chọn từ 50 – 100 cá thể tốt để lập dòng F3

Nếu chọn hỗn hợp thì có thể giữ cả ô gieo mạ không cần cấy vì nếu cấy, lúa đẻ nhá nh nhiều và hệ số nhân tăng nhiề u không cần thiết

+ F3 và các thế hệ sau: gieo cá thể để chọn lọc và đánh giá cho đến khi chọn được dòng thuần mong muốn Các dòng đưa sang vườn quan sát và khảo nghiệ m cơ bản

c) Kĩ thuật chọn tạo giống lúa bằng gâ y đột biến nhân tạo:

Đối với lúa xử lí đột biến thường tiến hành trên hạt khô và hạt ở thời kì bắt đầu nảy mầm

Khi gây đột biến bằng tác nhâ n hoá học thường ha y xử lí hạt khô:

Ngâm hạt vào hoá chất với những nồ ng độ và thời gia n nhất định sau đó rửa sạch, ngâ m tiếp tục trong nước sạch đến khi no nước thì vớt lên và ủ cho nảy mầ m rồi gieo

Lô hạt xử lí mọc thành cây: đa số cá thể bị chết hay dị hình, thiếu diệp lục, một

số ít cá thể biế n dị có ích như thân ngắn, thay đổi thời gian sinh trưởng, thay đổi màu sắc hình dạng hạt, kiểu đẻ nhánh, độ cứng thân, chiều dài, chiều rộng, độ dày lá, tính phản ứng quang chu kì, khả năng chố ng chịu bệnh và điều kiện ngoại cảnh

Những biến dị kể trên có thể phát hiện được ở thế hệ M1 và M2

Các biến dị có íc h, gieo lại đến M3 hoặc M4 có thể đã đạt được độ thuần cao Nếu những tính trạng biến đổi được chọn lọc và ổn định thì có thể coi chúng là những đột biến, còn nếu sau 2 – 3 thế hệ những tính trạng chọn lọc bị mất đi, đó là biến dị thường biến, hoặc bị cơ chế phản đột biế n làm phục hồi lại những tính trạng sẵn có ban đầu của vật liệu

Gây đột biến bằng tác nhân vật lí đối với lúa có thể tiến hành trên hạt khô và hạt bắt đầu nảy mầm ở những pha phân chia tế bào đầu tiên Các biế n dị sinh ra cũng tương tự như khi gây đột biến bằng tác nhâ n hoá học

Các nhà chọn giố ng thường hay gây đột biến rồi tiến hành lai các thể đột biến hữu íc h với các giống để cố định những đột biến trong một tổ hợp gen mới Có thể tiến hành lai trước rồi xử lí ngay lô hạt lai nhằ m tăng tần số biến dị để chọ n lọc được nhiều

Khi vận dụng phương pháp nào đó đều cần có kĩ năng thành thạo và tiến hành theo trình tự nhất định để đạt kết quả mong muốn

Bài 2 CHỌN TẠO GIỐNG NGÔ

1 VẬT LIỆU KHỞI ĐẦU VÀ PHƯƠNG PHÁP CHỌN TẠO GIỐNG

1.1 Vật liệ u quầ n thể địa phương

1.1.1 Các giống quần thể địa phương

Ở nước ta trong quá trình trồng ngô tương đối lâu đời dưới ảnh hưởng của chọn lọc tự nhiê n và chọn lọc nhâ n tạo, ở những vùng nhất định đã hình thành các giố ng 3 quần thể thích nghi với các điều kiện địa phương : các giống gié, xiê m, nếp vàng, nếp trằng

Các giống địa phương có thể dùng làm vật liệ u khởi đầu để chọn tạo các dòng tự phối

1.1.2 Các giống quần thể nhập nội từ các trung tâm phát sinh

Các giống - quần thể địa phương từ Nam, Trung Mỹ có nhiều giá trị Chúng có những tính trạng tốt như chống chịu sâu ( các dạng từ Mehico và Achentina), sinh trưởng nha nh trong gia i đoạn phát triển đầu(các dạng từ Mehicô), lõ i mỏng(các dạng từ Pêru), bắp dài (các dạng từ mêhicô), hạt to ( các dạng từ Mêhicô và Pêru)

1.1.3 Các giống ngô chọn tạo trong nước và nước ngoài

Trước đây một số giố ng nước ngoài đã được trực tiếp vào sản xuất (xiê m, Trịnh Tây, vàng Phương Tây (Westerrn yellow), ganga 5 )

Các giống chọn tạo lại dùng là m vật liệu khởi đầu để tạo các dòng tự phối

1.1.4 Các dòng tự phối

Trong công tác chọn tạo giống ngô hiện nay người ta sử dụng nhiều dòng tự phối Các dòng tự phối tạo ra bằng cách tự thụ phấn cưỡng bức các cây Thô ng thường quá trình tự thụ phấn các cây tiến hà nh trong khoảng 5,6 thế hệ hoặc hơn

Các quan sát và tính toán chỉ ra rằng khi tự phối cây ngô nhanh chóng đạt được

độ đồng hợp tử ở phần lớn các locut

Qua 7 thế hệ tự phối chỉ còn 1/1000 số cây dị hợp tử về một locut nào đó

Trong quá trình tự phối, các dạng dị dạng, không có sức sống, các dạng bị bệnh,

bị đổ loại thải

Về sau thế hệ của một cây tự phối hoàn toàn đồng nhất về tất cả các tính trạng

và có thể nhâ n lên ở các khi cách li Đó là các dòng tự phối

Các cây của dòng tự phố i thấp, bắp nhỏ

Năng suất của các dòng tự phối bình quâ n bằng 10-20% năg suất của giống khởi đầu hoặc giống la i Hiệ n nay các dòng tự phối được sử dụng rộng rãi trong các kiểu lai khác nha u để tạo ra các giống la i ưu thế lai cao

Cũng đã xác định rằng không phải tất cả các dòng tự phối khi la i đều cho các giống năng suất cao Từ hàng vạn các dòng ngô tự phố i, hiệ n nay để sản xuất giống lai chỉ sử dụng khoảng 0,1%, để tạo các giố ng la i cần lựa chọn các dòng có khả năng kết hợp cao

Điề u đó rất phức tạp vì không có mối liên hệ (tương quan) giữa các tính trạng hình thái (bên ngoài) của dòng với giá trị tổ hợp (khả năng kết hợp) của chúng

Khả năng kết hợp chung của các dòng được xác định bằng la i đỉnh (top crossing) Người ta đe m tất cả các dòng lai với vật thử chung (tester) Vật thử có thể là giống lai đơn, quần thể ta đlai Khi la i đỉnh số lượng cấc tổ hợp lai ứng với số lượng các dòng tự phối lúc ta dùng một vật thử, hoặc tăng lên 2-3 lần khi dùng 2-3 vật thử

Khi tiến hà nh la i đỉnh việc lựa chọn vật thử có vai trò quan trọng Có thể dùng vật thử là các giống thụ phấn tự do hoặc là giống la i kép có cơ sở di truyề n rộng

Để đánh giá xác hơn, các nhà chọn giống thường sử dụng 2-3 vật thử

Các dòng được chọn lựa theo tính trạng có khả năng kết hợp chung cao, sau đó đem lai giữa chúng với nhau trong tất cả các tổ hợp có thể để nghiên cứu khả năng kêt hợp riêng và tìm ra những tổ hợp lai năng suất cao nhất

* Khả năng kết hợp chung của dòng biểu thị đại lượng trung bình về ưu thế lai trong tất cả các tổ hợp lai mà dòng đó tham gia (thử nghiệ m), còn khả năng kết hợp riêng - trong một cặp lai cụ thể Một số số liệ u chứng tỏ về sự tương quan giữa năng suất của các dòng tự phố i và khả năng kết hợp của chúng

Vì vậ y để thử nghiệ m về khả năng kết hợp nên chọn các dòng tự phối có năng suất khá hơn

Hiệ n nay người ta sử dụng các dòng tự phối để:

- Tạo các giống lai đơn giữa các dòng (nghĩa là các giố ng lai giữa hai dòng tự phối)

- Tạo các giống lai dòng - giống: giống la i giữa giống và dòng tự phối hoặc giống lai giữa giống la i đơn với giống thường (các gioóng lai không quy ước)

- Tạo các giố ng la i ba dòng: giố ng lai giữa la i đơn với dòng ự phối

- Tạo các giố ng la i kép: các giố ng lai tạo do lai giữa hai giố ng lai đơn với nha u

Số lượng các giống la i kép thu đựơc khi có n dòng tự phối có thể tính theo công thức

3n(n - 1) (n - 2) (n - 3)

* Sử dụng các tổ tiên hoang dại gần ngô

Tộc (Tribus) Maydeae trong đó có ngô (Zea mays) gồ m 7 chi (genus), trong đó gần ngô nhất là Euchaen - teoxinte (2n = 20,40) và Tripsacum (2n = 36,72)

Ngô dễ lai với Teoxinte nhưng khó lai với Tripsacum

Hiệ n nay người ta lai ngô nhiều với hai chi trên nhằ m chứng minh nguồn gốc cây ngô bằng tế bào học

Giả thuyết của Mangelsdorf và Reeves gồm các luận điểm sau:

- Ngô đầu tiên phát triển như một cây lương thực ở tây bắc Nam Châu Mỹ (Anđơ) từ đây đưa vào miền Trung Châu Mỹ

- Teoxinte xuất hiện do kết quả lai tự nhiên giữa ngô và Tripsacum ở trung châu

2 Các phưong pháp chọn tạo giống

Công tác chọn tạo giố ng ngô đã trải qua quá trình phát triển lâu dài, rong từng thời kì người ta sử dụng những vật liệu khác nhau và áp dụng các phương pháp chọn tạo khác nhau

Nó gắn liền với sự tiến hoá của việc chọn tạo giống như một khoa học hàng năm phong phú hơn nhờ những tư liệ u và phương pháp mới

Sơ đồ : Tiế n trình các giai đoạn chọn tạo giống ngô (the o G.F Sprague )

2.1 Phương pháp chọn lọc hỗn hợp (chọn lọc hàng loạt) Đây là phương pháp

cổ nhất trong tất cả các phương pháp dùng để cải lương các giố ng ngô Phương pháp

này dựa trên cơ sở chọn các bắp tốt nhất, chúng được dùng để tái sản sinh các thế hệ sau

Ở đay có sự giao phấn giữa các cây và như vậy chỉ cải tiến được các trị số trung bình nhưng không cố định được kiểu cây tốt

Trước đây bằng phương pháp này cũng đã tạo ra được giố ng ngô tốt

Ở Mỹ, giống ngô Red Yellow dent nổi tiếng phổ biến rộng rãi hơn 100 nă m ở các vùng trồng ngô được tạo ra bằng phương pháp này Hiên nay ở Mỹ từ giống này đã tạo ra dòng tự phối WF9 tha m gia vào nhiều giống lai đơn năng suất cao (WF9 x 38 -11) và (WF9 x Hy)

2.2 Lai giữa các giống :

Người ta sử dụng cách lai giữa các giống như là phương pháp tạo các giố ng mới, cũng như để sử dụng ưu thế lai F1

Hiệ n nay cách lai này ít được dùng vì các giống lai quy ước (các giống la i giữa các dòng tự phối) cũng như các giống lai dòng - giống có năng suất cao hơn

2.3 Phương pháp chọn lọc bắp-hàng Phương pháp này lần đầu tiên được nhà

khoa học Mỹ Hopkins sử dụng nă m 1896 ở trại thí nghiệ m Illinois

Cơ sở của nó là chọn các bắp tốt, nghiên cứu chúng và sau đó tách ra những thế

Nă m thứ 4 hạt cũng gieo như vậy, những hệ chọn được song song với tự phối, ta tiến hành lai với vật thử (tester)

Nă m thứ 5 tiến hành chọn lọc trong các hệ tự phối, và tiến hành tự phối, thử nghiệ m các giố ng la i thu được và lại la i với vật thử

Nă m thứ 6 tiến hành chọn lọc trong các hệ, tự phối chúng và thử nghiệm các

Nă m thứ 7 tiến hành chọn lọc và tự phối trong các hệ và la i luâ n phiê n (luân giao)

Nă m thứ 8 chọn lọc và tự phối trong những dòng cho kết quả tốt nhất khi luân giao

Nă m thú 9 – 10 nhân các dòng tự phối tốt

2.6 Phương pháp hốc

Phương pháp này do Jones và Singleton đề xuất nă m 1934, đơn giản hơn là phương pháp chuẩn

Nă m đầu tiên: từ các quần thể khởi đầu chọn các cây và tiến hành tự phố i

Nă m thứ 2 từ mỗi bắp thu được do tự phối chọn 3 hạt gieo thành hốc Trong 3 cây chọn cây tốt nhất, tự phối nó và lai với vật thử

Nă m thứ 3 lặp lạ i những khâu trên và tiến hành thử nghiệ m các F1do la i với vật thử Loại bỏ những hệ kém Các năm 4,5,6 lặp lại những khâu trên Năm thứ 7 gieo các dòng thu được trên các ô (hàng) và tiến hành luân giao

Phương pháp này cho phép tiến hành thử nghiệ m một số lượng lớn các dòng hệ, tăng cường quá trình chọn lọc giữa chúng, nhưng khả năng chọn lọc trong phạ m vi từng dòng hệ lại giả m

2.8 Phương pháp chọn lọc giao tử Phương pháp này do Stadler đề nghị và

dựa trên cơ sở là tần số gặp các giao tử có giá trị kết hợp cần thiết trong quần thể cao hơn là tần số hợp tử Vì thế nắ m bắt trong quần thể những giao tử cần thiết dễ hơn là cách tự phối tách tạo các dòng có cùng khả năng kết hợp như vậy

Thực tế công việc được tiến hành theo trình tự sau:

Một dòng tốt (dòng A) từ lai kép (A x B) (C x D) đem thụ bằng phấn của các cây chọn từ giố ng hoặc giố ng la i mà từ đó ta muốn tách các giao tử có giá trị kết hợp cao và bằng cách đó ta cải tiến dòng A Các F1 phân hoá là do phấn các cây của giống

bố Các cây tốt của F1 đem tự phối và lai với vật thử (lai đơn) (C x D) Đe m dòng A cũng lai với vật thử này Năm sau các hệ do tự phối gieo trên các ô riêng, thử nghiệm các giống lai F1 x (C x D) so sánh với A x (C x D)

Nă m sau chọn để gieo các cây từ các ô cho giố ng la i với (C x D) tốt hơn là A x (C x D)

Tiế n hành tự phố i những cây này (S1*) và lại lai S* x (C x D) và A x (C x D)

Nă m thứ 6 nhân dòng cải lương A1

2.9 Phương pháp chọn tạo song song

Nhờ phương pháp lai lui cải lương 4 dòng tham gia vào thành phần của một lai kép

Nă m 1 Lai các dòng A, B, C, D với các dòng E, F, G, H mà từ các dòng sau ta muố n truyền cho các dòng đầu vài tính trạng có lợi

Nă m 2 – 3 Lai trở lại với A, B, C, D

Nă m 4 – 8 Tách chọn các cây có những tính trạng cần và tự phối

Nă m 9 Tạo lai đơn

Nă m 10 Tạo la i kép

2.10 Chọn lọc chu kì

Phương pháp này dựa trên thực trạng khi chọn tạo các dòng tự phối là sự tăng nha nh tính đồng hợp của các đời tự phối hạn chế sự sử dụng nhiều gen có giá trị thực tiễn đặc biệt là những gen xác định sự biến dị liên tục (các tính trạng số lượng) Đã đề

ra một số sơ đồ sau:

a) Chọn lọc chu kì (chọn lọc lặp lại) theo các tính trạng hình thái

Nă m đầu tiên trên ruộng giống chọn các cây và tiến hà nh tự phối chúng

Nă m thứ 2 Hạt mỗ i cây tự phối gieo thành dòng, để giao phấn lẫn nhau giữa các dòng chọn được theo các tính trạng mong muốn

Nă m thứ 3 Gieo các hạt của quần thể tạo ra và bắt đầu chu kì chọn lọc mới và

Sơ đồ này cũng gồm các chu kì riêng, mỗi chu kì kéo dài 3 nă m

Nă m đầu: chọn các cây, tự phối chúng và lai với vật thử

Nă m thứ 2: thử nghiệ m các giống lai

Nă m thứ 3: gieo các dòng cho kết quả tốt khi la i với vật thử và la i các dòng đó với nhau Trộn các hạt thu được

Nă m thứ 4: gieo quần thể và bắt đầu chu kì mới

Do Co mstok, Robins và Harvey đề ra năm 1949 Lai thuận nghịc h giữa các cây

từ các quần thể A và B, tự phối chúng và tiến hà nh chọn lọc theo khả năng kết hợp

Công việc tiến hà nh vài chu kì, mỗ i chu kì 3 nă m

- Năm đầu: các cây tốt từ quần thể A tiến hà nh tự phối và la i với các cây từ quần thể B

Cũng là m như vậy với các cây từ quần thể B

- Năm thứ 2: thử nghiệm 2 nhó m các giống lai tạo ra

- Năm thứ 3: gieo các hệ tự phối nă m đầu của các cây mà khi lai cho các kết quả tốt nhất

Cũng trong nă m này lai các tổ hợp khác nhau giữa các dòng từ quần thể A và giữa các dòng từ quần thể B

Các hạt lai thu được trộn lại (trộn riêng theo từng nhó m các dòng của quần thể

A và quần thể B) và nă m sau gieo tạo các quần thể A1 và B1 Trên cơ sở đó lạ i tiếp tục chu kì chọn lọc mới

Khi sử dụng các phương pháp chọn lọc chu kì, ở mỗi thế hệ hệ số cây chọn nên nhiề u để dẫn tới sự tự phối ít nhất

d) Phương pháp chọn tạo đồng quy

Đây là phương pháp cải lương các dòng đã có sẵn nhờ thê m vào mỗi dòng các gen trội có ở dòng khác mà bản thân dòng đó không có

Phương pháp này gồ m các bước:

Các nhà di truyền Mỹ D.Jones và N.Everst từ nă m 1949 đã đề ra phương pháp sản xuất các hạt ngô lai không cần phải ngắt cờ đực trên cơ sở sử dụng bất dục đực tế bào chất

Muốn vậ y cần có:

x L

Ở sơ đồ này Xbdđ - dạng bất kì có đặc tính bất dục đực tế bào chất

L – dòng (hoặc giống) thường mà ta định tạo thành dòng bất dục đực tế bào chất Thực nghiệ m xác định rằng kết quả sau 4 – 5 lần la i lại (lai bão hoà) và chọn lọc, có thể thu được các dòng tự phối bất dục đực (các đồng đẳng bất dục đực) Nhân dòng bất dục đực này ở khu cách li bằng cách dùng phấn của chính dòng tự phối đồng đẳng thường, thụ cho nó

Dòng khi dùng phấn của nó thụ cho cây bất dục đực, tính bất dục đực được bảo tồn gọ i là dòng duy trì, dòng cố định bất dục đực

Trong giống la i kép giữa các dòng, dòng bất dục đực được dùng là m dạng mẹ của giống lai đơn mẹ, nhưng dòng bố của lai đơn mẹ phải không có khả năng phục hồi phấn (hoặc dòng cố định, duy trì bất dục đực), khi đó các cây la i đơn mẹ sẽ có các cờ bất dục

Ở Mỹ và Canada việc sử dụng các giống ngô lai giữa các dòng tạo ra trên cơ sở

1 dạng bất dục đực tế bào chất (kiểu T) đã gây nên sự lan truyền rộng rãi nòi nấm Helminthosporium ma ydis, do đó làm giả m đáng kể năng suất hạt Vì thế trong chọn tạo giống ngô lai vấ n đề cấp bách là cần phải sử dụng đa dạng các nguồn bất dục đực tế bào chất

3.2 Tạo các dòng phục hồi phấn (phục hồi sự hữu thụ)

Khi sản xuất hạt lai kép dòng bố của lai đơn mẹ không được có khả năng phục hồi phấn

Nhưng trong giố ng la i đơn bố cả 2 dòng hoặc ít nhất là 1 dòng cần phả i có khả năng phục hồi phấn Một số dòng tự phối khi lai với các dạng bất dục đực đã phục hồi

sự hữu thụ của chúng Những dòng này gọi là các dòng phục hồi sự hữu thụ - phục hồi phấn

Nếu dòng (hoặc giống) không có khả năng phục hồi, dùng cách lai bão hoà ta có thể truyề n cho chúng đặc tính này

Để làm được việc này ta đem dòng bất dục (hoặc giống) mà ta chọ n cho chúng dòng phục hồi, đe m lai với một dạng phục hồi nào đó

Dạng phục hồi này có thể là 1 dòng (hoặc giố ng), bất kì có đặc tính này

Giố ng la i thu được do cách la i này đe m thụ bằng phấ n của dạng mà ta cần biến

nó thành dòng phục hồi Sau đó lặp lại việc thụ phấn các cây có khả năng phục hồi trong khoảng 5 nă m, khi dạng được thụ phấn trở nên hoàn toàn giống dạng thụ phấn Cuối cùng, đem tự thụ phấn các dòng tốt nhất

Công việc tạo các dòng phục hồi phấn có thể trình bày ở sơ đồ sau:

thành khác nhau Trong một số trường hợp đã sử dụng phối hợp các tác nhâ n vật lí và hoá học Trong tài liệu cũng đã mô tả nhiều đột biến có những tính trạng quý: chống bệnh thán sưng (Ustiago ma ydis), nâng cao hà m lượng các axit amin không thay thế, nâng cao khả năng kết hợp

Các đột biến này được sử dụng là m vật liệu khởi đầu để tạo giống trong các cơ quan nghiên cứu khác nhau

Một hướng triển vọng khác trong chọn tạo giống ngô là thu nhận và sử dụng các thể tứ bội (4x) Người ta cho rằng các dặc điể m biểu hiện ưu thế lai khi lai các dạng tứ bội cho phép duy trì sức mạnh la i trong hàng loạt thế hệ Ở các dạng ngô đa bội tăng kích thước tế bào, cây, bắp và hạt

Khi thu nhậ n các dạng ngô đa bội cần lưu ý rằng độ kết hạt của bắp (% trung bình độ kết hạt) liê n quan chặt chẽ với mức độ dị hợp thể của các dạng khởi đầu

Thô ng thường người ta thu được các dạng ngô tứ bội bằng cách tác động colchichine (consisin) 0,1 – 0,2% dung dịch nước lên các mầm và các cây non

Người ta cũng định sử dụng các thể đơn bội để tạo các dòng tự phố i thuần đồng hợp tử, vì để có thể thu được độ đồng hợp hoàn toàn về tất cả các gen bằng phương pháp tự phối đòi hỏi thời gian rất dài

Để nhận biết các thể đơn bội trên các giai đoạn phát triển khác nha u của cây người ta sử dụng phương pháp di truyền đánh dấu do Chase đề xuất nă m 1947

Đe m lai dạng mẹ lặn về các tính trạng màu sắc với dạng đánh dấu (EPM) mang gen trội (R) xác định màu sắc phôi và lớp alơro n trên đỉnh hạt Từ các hạt thu được do lai, trong phòng thí nghiệm có thể tách chọn các hạt có phôi trắng và đỉnh hạt có màu Những hạt này nội nhũ tam bội, còn phôi đơn bội

Tất cả công việc phải kiể m tra bằng phương pháp tế bào để tránh những sai lầm

có thể xuất hiện do đột biế n, sự hiện diện các gen ức chế mà u sắc, các bệnh

Khó khăn là ở chỗ tần số các đơn bội tự nhiên rất ít – 1 đơn bội: 1.349 nhị bội Nghiêng về đơn bội là 1 tính trạng di truyền Quá trình lưỡng bội hoá (nhị bội hoá) các cây đơn bội để thu được các dòng đồng hợp là rất quan trọng Mặc dù có khả năng lưỡng bội hoá tự nhiên ở ngô (5%) phương pháp chắc chắn nhất là xử lý các mầm ngô bằng colchichine

5 PHƯƠNG PHÁP VÀ KĨ THUẬT CỦA QUÁ TRÌNH CHỌN TẠO GIỐNG

5.1 Kĩ thuật lai và tự phối

Người ta cách li các bắp ngô bằng cách dùng bao cách li bắp chụp lên chúng trước khi bắp phun râu Các cờ ngô cũng được cách li bằng bao giấ y bóng mờ vào lúc bắt đầu nở hoa (tung phấn) và không muộn hơn 24h trước khi thụ phấn Nhẹ nhà ng rung các phấn vào bao cách li cờ, sau đó rắc lên các vòi nhuỵ (râu ngô)

5.2 Các tính trạ ng chọn lọc và đánh giá chung

Việc sử dụng trong sản xuất các kiểu ngô lai khác nhau không là m giả m vai trò của chọn lọc vì chúng đảm bảo cho việc tạo ra các dòng tự phối có nhữ ng tính trạng cần thiết

Khi tiến hành chọn lọc, thành công của người chọn tạo giống sẽ càng cao khi có sự tương ứng giữa các kiểu hình và kiểu gen Điề u này gắn chặt với độ di truyền của tính trạng và tương ứng với các quan hệ tương quan giữa các tính trạng Đặc biệt quan trọng

là các tương quan giữa các tính trạng của các dòng tự phối và sản lượng của các giố ng lai do chúng tạo ra Người ta dễ dàng nhận được các tương qua n này khi dùng phương pháp lai đỉnh

Cũng cần nhớ rằng những tương quan thu được thường đặc trưng cho địa điểm thử nghiệ m các dòng và các giống lai

Đã xác lập sự tương quan dương cao giữa sản lượng của giống la i (do lai giữa dòng tự phối x giống) và các tính trạng sau đây của dòng tự phối: ngày ra hoa (r=0,47) thể tíc h hệ thống rễ (r=0,54) đường kính thân (r=0,41)

Khi tạo các giố ng la i đơn cần đặc biệt quan tâm đến sản lượng của các dòng tự phối dùng làm các dạng mẹ

Khi sản lượng của các dòng tự phối thấp việc phổ cập các giố ng la i đơn vào sản xuất không có lợi do giá thành các hạt lai cao Đã chứng minh có mối tương qua n tin cậy giữa cường độ quang hợp của các dòng tự phối và năng suất hạt của các giống lai,

nó cho phép lựa chọn các dòng tự phối theo tính trạng này Khi tạo các dòng có hàm lượng lizin cao bằng phương pháp lai lui (back cross) việc chọn các dạng mà ở chúng không giả m khối lượng 1.000 hạt, cũng như các dạng có hà m lượng các axit a min không thay thế cao có ý nghĩa lớn Chọn lọc dựa theo kiể u hình của nội nhũ (đục do gen O2 gây nê n) không phải bao giờ cũng cho kết quả Vì thế phải xác định hà m lượng lizin, triptophan và ze in trong nộ i nhũ bằng phương pháp điện di trên gel polycr yla mid Cũng đã đề ra phương pháp phát hiệ n chúng trong phầ n nội nhũ nhằm giữ hạt để gieo

Khi tạo các giống ngô có lượng dầu (lip it) cao trong hạt cần chú ý: có mối tương quan dương cao giữa hàm lượng dầu và kích thước phôi Cũng cần lưu ý rằng khi nâng cao lượng dầu thực vật hơn 8 – 10% thì năng suất giảm

Nguyên nhân là do để tổng hợp 1 kcal dầu thực vật cần 2kcal năng lượng quang hợp, trong khi để tổng hợp 1kcal tinh bột chỉ cần 1kcal năng lượng

Chọn lọc để tăng cao hà m lượng dầu trong phôi có thể kết hợp với chọn lọc về hàm lượng các axit amin không thay thế trong nội nhũ

Khi chọn tạo giống ngô lai hướng silô (chất xanh) cần chú ý chọn tạo các dòng tự phối

có hàm lượng lignin thấp trong lá nhằ m tăng cao độ tiêu hoá khối chất xanh cho động vật

Để tạo các giống ngô lai chịu hạn cần nghiên cứu kĩ các dòng tự phối về tính trạng nà y trong các điề u kiện đồng ruộng và đánh giá độ kết hạt trên bắp của chúng

Chỉ khi lai các dòng chịu hạn với nhau mới hy vọng tạo hiệu quả ưu thế lai về tính trạng này ở các giống lai

Khi chọn lọc về tính chín sớm, khó khăn lớn xuất hiệ n do độ dài thời gian sinh trưởng biến động nhiều phụ thuộc vào các điều kiện thời tiết Vì thế để xác định tính chín sớm của các vật liệ u cần sử dụng chỉ tiêu như số lá trên thân chính (ở các dạng chín sớm số

lá ít hơn các dạng chín sớm)

Đã xác định hệ số tương quan cao về tính trạng này: r = +0,846

- Để đánh giá tính chịu lạ nh phương pháp tương đối chính xác là gieo các mẫu ngô (dòng, giố ng lai ) trong điề u kiện đồng ruộng vùng lạnh (gieo vào mùa đông hoặc gieo sớm vào mùa xuân vùng núi)

Cũng đã đề ra phương pháp gieo lạnh hạt trong đất ở nhiệt độ 8 – 100C Phương pháp cho kết quả tốt và có thể dùng đánh giá sơ bộ: các dạng chịu lạ nh có độ nảy mầm

85 – 100% chịu lạ nh trung bình 75 – 84% Không chịu lạnh < 74%

- Người ta chọn lọc các dòng ngô chịu mặn khi gieo hạt trong các dung dịch muố i (muối ăn) có nồng độ khác nhau

Đối chứng là các hạt gieo ở nước thường tiến hành tính toán sau khi gieo 6 – 7 ngà y

Bài 3

CHỌN TẠO GIỐNG LẠC (Arachis hypogaea L.)

1.1.2 Đặc tính dạng cây và tán lá

Về màu sắc lá, Bada mi cho rằng màu xanh xẫm mang gen trội so với màu nhạt Các cặp la i dưới loài thường cho cây lai ở thời kì cây con có thể bạch tạng chiếm tỉ lệ tương đối cao

1.1.3 Sắc tố thân

Patel dùng phương pháp la i nhiều lần ( multicross), đã phát hiện ra mối liên quan giữa sắc tố thân và mà u sắc vỏ hạt, các sắc tố thẫ m màu thường mang tính trội so với sắc tố nhạt màu hơn

+ Các đặc tính sau của vỏ quả là mang tính trội: kíc h thước lớn của vỏ quả; tính

có gân vỏ quả rõ; tính dạng quả có eo nông

+ Số lượng hạt/ quả: tính mang quả 2 hạt là trội hơn so với quả 3 – 4 hạt

1.2 Di truyền các tính trạng số lượng

Nhiều tác giả cho rằng việc đánh giá về khả năng tổ hợp và di truyền của lạc còn

ít được nghiê n cứu Stokes và Hull khi nghiên cứu 11 tổ hợp lai cho rằng ít tính trội mạnh ở F1 Nhưng một số tác giả cho rằng các tổ hợp lai giữa dạng Spanis h và Valencia (cùng trong loài phụ Fastigiata ) thường cho F1 có sức sinh trưởng mạ nh và năng suất cao Các tổ hợp lai giữa loài phụ Hypogaea (dạng Virginia) với loài phụ Fastigiata (dạng Valenc ia) thường cho con la i F1 có khả năng sinh trưởng sinh dưỡng cao

Ở nước ta, một số giống lai có năng suất cao như “Sen lai – 23/75” là kết quả của tổ hợp lai giữa 2 giống thuộc dạng Spanis h (trắng Mộc Châu x Trạm Xuyên) Giố ng lai cho những tính trạng di truyền ổn định sau 6 thế hệ chọn lọc Từ F7, dòng lai được đưa ra, màng lưới khảo nghiệm

2 Phương pháp chọn tạo lạc

2.1 Xây dựng tập đoàn giống và cải tiến quần thể

Bước đầu tiê n trong công tác chọn tạo giống là xây dựng tập đoàn giố ng nhằm thu thập nguồn gen làm vật liệu khởi đầu cho công tác chọn tạo sau này

Nguồn giống của tập đoàn gồ m:

+ Các tạp chủng ở các địa phương: nguồn giống địa phương thường lẫn tạp và

nhiề u khi trùng lặp do tên gọi địa phương Vì vậy phả i tiến hà nh chọn thuần các mẫu giống thu thập được sau đó chỉnh lí giống, loại bỏ trùng lặp

+ Nhập nội giống: công tác nhập nội giố ng là hết sức quan trọng nhằm làm

phong phú nguồn gen Nhập nội giống chủ yế u từ nguồn hợp tác Quốc tế với các trung tâm nghiê n cứu Quốc tế, Việ n khoa học Nông nghiệp các nước như viện ICRISAT (Ấn Độ),Viện KHNN Trung Quốc thông qua trao đổi giố ng hoặc tham gia các mạ ng lưới thử nghiệ m giống Quốc tế

Từ nguồn giống nhập nội, có thể tiến hành các thí nghiệ m so sánh, khảo nghiệm

để xác định giống tốt cho sản xuất, các giống khác để dùng là m tài liệu lai hoặc xử lí đột biến

Các giống ưu tú được bình chọn thông qua các thí nghiệ m giống được tiếp tục nhâ n và tiến hành công tác chọn lọc và cải tiến theo phương pháp chọn lọc quần thể (Maseslection)

Thô ng qua theo dõi tập đoàn giố ng lạc nhập nộ i, các cơ quan nghiê n cứu lạc trong thời kì 1970 – 1980 đã bình tuyể n, chọn được các giống Sư tuyể n 64, Trạm Xuyên (nguồn gốc từ Trung Quốc), có năng suất cao, thích hợp với điều kiện sản xuất

ở các tỉnh phía Bắc Các giố ng này đã được phổ biến rộng rãi trong các vùng trồng lạc trong một thời gian dài

Hiệ n nay, Trung tâm Đậu đỗ (Viện KHNN VN) đang theo dõi tập đoàn giố ng lạc gồ m hàng trăm giống thuộc các bộ giống của Viện ICRISAT (Ấn Độ): bộ giố ng chịu hạn, bộ giống chống bệnh đốm lá, bộ giố ng ngắn ngày, trung ngày và bộ dài ngà y trong đó có nhiều giống có triể n vọng đang được khảo nghiệm

2.2 Chọn tạo giống lạc bằng phương pháp lai hữu tính

Lai hữu tính kết hợp với chọn lọc đúng kĩ thuật là phương pháp chọn tạo giống lạc nhanh và có hiệ u quả cao

a) Đặc điểm ra hoa của lạc

Lạc bắt đầu nở hoa vào khoảng ngày thứ 20 – 45 sau khi mọc Thời gian này thay đổi phụ thuộc vào giống và thời vụ gieo

Thời kì ra hoa của lạc thường kéo dài, khi thu hoạch có thể vẫn có hoa Nhưng thời kì hoa có ích chỉ khoảng 10 – 15 ngà y ở thời kì đầu ra hoa, còn gọi là thời kì hoa

rộ Trong thời kì nà y, số hoa nở hàng ngà y thường 3 – 10, có khi hơn Nên tiế n hành lai vào thời kì hoa rộ, sẽ đạt hiệ u quả cao hơn

Hoa lạc nở vào buổi sáng, từ 7 – 10 giờ Ngày nắng, hoa nở sớm và ngược lại, ngà y mưa hoặc không nắng, hoa nở muộn hơn

Lạc là cây tự thụ, quá trình thụ phấn tiến hành trước khi hoa nở 7 – 10 giờ tức là khoảng 1 giờ sáng Như vậy, thời gia n khử đực thường được tiến hành vào khoảng 4 –

6 giờ chiề u hô m trước là thuậ n lợi

Ống nhụy dài 50 – 70 mm, tốc độ nảy mầm của tế bào hạt phấn trong bầu nhụy khoảng 4 – 5mm/giờ, như vậ y quá trình thụ tinh tiến hành sau khi thụ phấn khoảng 10 – 12 giờ, tức là sau khi hoa nở 2 – 4 giờ Tia xuất hiện sau thụ tinh 4 – 6 ngày trong điều kiện bình thường

b) Chọn bố - mẹ

Là bước đầu tiê n và có tính quyết định trong công tác lai tạo Tiêu chuẩn chọn

bố - mẹ tùy thuộc ở mục đích la i tạo Thô ng thường người ta chọn cặp lai tạo gồ m:

+ Một giố ng đang được trồng phổ biến trong sản xuất, có những đặc tính cần được cải tiến (năng suất thấp, tính chịu hạn, khả năng chống bệnh)

+ Một giống có những đặc tính tốt cần được sử dụng trong con lai

Dùng phương pháp lai thuậ n nghịch để kiể m tra con la i

c) Gieo trồng giống bố mẹ

Bố , mẹ của các tổ hợp lai được gieo thành luố ng, mối luống gieo 1 tổ hợp (2 giống), mỗ i giố ng gieo một hàng với khoảng cách 40 – 45c m, khoảng cách cây 20cm Vườn lai nên tiến hành trong nhà kính, nhà lưới hoặc là m giàn che (giàn che bớt 50% ánh nắng) Các thí nghiệ m của trường ĐHNN – I đã chỉ rõ: tỉ lệ đậu quả ở luố ng, được che giàn có thể đạt 67 – 85%, so với đối chứng không che là : 45 – 57%

Kĩ thuật trồng trọt áp dụng trong vườm ươm như trong sản xuất bình thường chỉ cần chú ý bón phân đầy đủ cho lạc tạo quả tốt hơn

d) Khử đực

Thời gian khử đực tiến hà nh vào khoảng 4 – 6 giờ chiều hô m trước Có thể dùng panh tách 2 cánh bên của hoa rồi gắp cả cụm bao phấn chưa mở hoặc gắp từng bao phấn Cần lưu ý phải gắp hết số bao phấn trong hoa Nếu nụ hoa còn quá non, có thể dùng panh cắt môi dưới của đài hoa để dễ gắp phấn hoa Đánh dấu hoa đã khử đực bằng chỉ mầ u có đính biển bằng nilon Dùng panh ngắt bỏ những hoa khác trong cùng cụm hoa đã khử đực

Lấy phấn hoa của bố

Thời gian lấy phấn hoa khoảng 5 – 8 giờ sáng

Dùng panh đã sát khuẩn bằng cồn 900 cẩn thận gắp phấn hoa của cây bố ra đĩa thủy tinh, phấn chưa dùng phải được bảo quản cẩn thận trong đĩa thủy tinh hoặc nơi mát Khi chuyển sang lấ y phấn của giống bố khác phải sát khuẩn panh gắp phấn

Cuối cùng buộc bao cách li (bằng giấy hoặc bao nilo n có đục lỗ)

Sau khi lai 3 – 5 ngày cần kiể m tra lại hoa lai Nếu thấy có tia quả xuất hiện, rút

bỏ bao cách li, kiể m tra chỉ đánh dấu, có thể thay chỉ bằng sợi dây kim loại nhỏ

f) Chăm sóc quả lai

Khi tia đâ m xuố ng đất, phải tiến hà nh vun đất cẩn thận, kiểm tra thường xuyên quả lai để có biện pháp giúp cho quả phát triển bình thường Thu hoạch khi quả chín đầy đủ Phơi quả la i riêng, tránh nhầ m lẫn

methyl ure ) nồng độ 0,01 – 0,025% Phương pháp vật lí dùng tia  Co60 liều lượng xử

lí 5.000r – 20.000r So sánh các phương pháp trên thấy rằng phương pháp vật lí cho hệ

số biế n dị lớn hơn phương pháp hóa chất

Xử lí hóa chất thường dùng phương pháp ngâm hạt, thời gian ngâ m 5 – 30 phút

Bằng phương pháp xử lí đột biến phóng xạ (dùng tia Co60) Trường ĐHNN – I

và Việ n KHNN VN đã tạo được một số giống lạc có năng suất cao, chịu hạn và có tính

thíc h ứng tốt, như: B.5000 và V.79 được tạo bằng phương pháp xử lí tia  Co60 liều lượng xử lí 5.000r Các giống D332, 4329 cũng là kết quả xử lí đột biến bằng tia 

Trồng lạc vụ thu có thời gian sinh trưởng ngắn hơn vụ xuâ n, ít sâu bệnh hơn Nhưng do thời kì cây con bị rút ngắn nhiề u nên năng suất thường thấp Vụ lạc thu rút ngắ n thời gian bảo quản giống nên đảm bảo sức sống của hạt, đóng vai trò quan trọng trong việc bảo quản và sản xuất giống

3.2 Mật độ trồng

+ Vụ xuân: mật độ 30 – 35cây/m2 Khoảng cách hàng 35 – 40c m

+ Vụ thu: mật độ 35 – 40cây/m2 Khoảng cách hàng 25 – 30cm

Lượng giố ng cho 1 ha ở vụ xuâ n là 140 – 150kg/ha; vụ thu: 160 – 180kg/ha

Các loại sâu xá m, bệnh mốc đen (Phythium sp.), thối rễ (Fusarium sp), bệnh

chết ẻo lạc là m chết cây, giả m số cây thu hoạch Các loại sâu hại tia, quả và bệnh thối

tia (nấ m Rhizopus sp), làm giảm số lượng quả Bệnh đốm lá (Cercospora arachidicola,

Cercospora personata), là m giả m số lượng, trọng lượng quả và hạt cần có các biện

pháp phòng trị kịp thời để đảm bảo năng suất lạc giố ng

3.7 Thu hoạch bảo quản giống

Hạt lạc có hà m lượng dầu rất cao Trong thời gia n bảo quản, dầu rất dễ bị phân hủy là m giảm chất lượng hạt và là m hạt mất sức nảy mầm Các nguyên tắc bảo quản lạc giống:

+ Thu hoạch phải phơi nga y Độ ẩm hạt còn 8 – 10% mới đưa vào bảo quản + Bảo quản kín, bảo quản cả quả Nơi cất giữ giố ng phải thoáng, mát, khô ráo + Thời gia n bảo quản càng ngắn càng tốt Không cất giữ lạc giống qua 1 năm

Tiêu chuẩn hạt giống lạc: giống lạc được sử dụng trong sản xuất phải đạt các

tiêu chuẩ n sau:

+ Tỉ lệ hạt nảy mầm (điều kiện trong phòng) : 90 – 95%

+ Độ thuần: 98% (không được lẫn giống khác)

Bài 4 CHỌN TẠO GIỐNG CÀ CHUA

1 VẬT LIỆU KHỞI ĐẦU CHO CHỌN GIỐNG CÀ CHUA

Kết quả của chọn giống cà chua phụ thuộc vào nhiều yếu tố, trong đó có việc đánh giá, và sử dụng nguồn vật liệu khởi đầu

Các loài cà chua hoang dại và bán hoang dại là nguồ n vật liệu rất quý cho chọn tạo giống cà chua

L.peruvianum sinh trưởng tốt ở điề u kiện nhiệt độ thấp, chứa hàm lượng

vita min C rất cao, kháng virus khảm thuốc lá, tuyế n trùng…

L.hirsutum chịu lạnh, chịu hạn tốt, sống được ở nhiều chân đất, kháng nhiều

bệnh như Septoria, bệnh vir us

L escule ntum var pimp ine llpolium có nhiều đặc tính quý như: chín sớm, hàm lượng đường, vita min C, -caroten cao, chống nứt quả, kháng nhiều loại bệnh như

Cladosporium, Fusarium, Phytophthora inpestans,…

Các dạng cà chua bán hoang dại thuộc loài L.esculentum Mill như var.cerasiforme, pyriforme, pruniforme, elongatum,… là nguồn vật liệu quý cho chọn

giống Theo thống kê về các phân tích hoá sinh của nhiề u tác giả cho thấy, hà m lượng đường của các dạng bán hoang dại lớn hơn ở các loài hoang dại Nhiều mẫu trong nhó m hoang dại có hàm lượng vita min C đạt tới 138mg%, ở nhóm bán hoang dại đạt tới 114mg%, các giống cà chua trồng hà m lượng vita min C dao động từ 12 – 36mg% (theo Balasho va, Samovol,1988) Dùng phương pháp lai trở lạ i, nhiều tác giả đã thu được các dòng có hàm lượng vita min C đạt tới 32 – 66mg%

Sử dụng nguồn gen từ cà chua hoang dại và bán hoang dại đã thu được kết quả

về cải tiến hà m lượng caroten ở cà chua trồng Glusenco (1979) la i cà chua trồng với S pennelli, đã thu được một số dòng có hàm lượng caroten tăng hơn giống trồng 9 – 10 lần Bên cạnh đó, sử dụng nguồ n gen cà chua hoang dại còn cho phép giải quyết vấn đề tạo giống có hà m lượng  -caroten (tiền vita min A) cao, được phối hợp với các hàm

Chỉ số đặc biệt quan trọng trong tạo giống cà chua chế biến là hà m lượng chất khô cao (độ brix cao) Hàm lượng chất khô cao, về cơ bản liê n quan tới hà m lượng các chất pectin trong quả Sử dụng nguồn gen cà chua hoang dại đã cải tiến tính trạng này

ở cà chua trồng Vấn đề này được thực hiện nhiều ở Mỹ, khi la i L.esculentum Mill với

L.peruvianum đã thu được nhiều dòng có hà m lượng các chất pectin cao, có thịt quả

chắc hơn và hà m lượng chất khô tăng Có thể khai thác nguồn gen cà chua

L.chemielewskii về hà m lượng đường và độ chắc của quả cao

Các loài hoang dại và bán hoang dại cũng là nguồn vật liệu quý và phong phú cho tạo giống chống chịu các bệnh ở cà chua Các gen kháng bệnh mốc sương

(Phytophthora infestans) tìm thấy ở nhiều mẫu thuộc L.escubentum var.pimpinellifolium, ở các dạng dại như L.escubentum var racemigenum var cerasiforeme và ở một số mẫu giống cà chua trồng khác

Khả năng chiu bệnh vir us khảm thuốc lá (các gen Tm – 1, Tm – 2, Tm - 22)

quan sát thấy ở L.peruvianum, L.hirsutum, L escubentum var pimpinellfolium,

L.chilense,…cà chua L.chilense còn có khả năng kháng cao tới virus gây biến vàng lá

(gemini v irus) Từ các loài cà chua trên đã đưa ra rất nhiề u mẫu giống kháng bệnh virus

phục vụ cho tạo giống

Bệnh nấ m gây héo ở cà chua rất nguy hiể m Ở một số mẫ u cà chua L

esculentum v ar pimpinellifolium đa phát hiện ra gen I – kháng bệnh héo do nấm Fusarium ox ysporum f.lycopersisi, và gen Ve – kháng bệnh héo do nấ m Verticilum albo – attaum, V.dahliae nă m 1941 đã đưa ra giố ng kháng Fusarium đầu tiên Từ 1952

đã đưa ra nhiều giống khá ng Verticilum (nhó m giống VF) Trong tạo giống kháng

Fussarium còn sử dụng các giống như Ro ma.Marglobe, Campblle 146…, ở chúng có

gen I (kháng Fusarum) giống Anaxy ngoài kháng Fusarium còn mang gen Mi – kháng tuyế n trùng Ở nấ m Fusarium oxysporum f.lycopersisi đã phân lập ra 3 chủng 1, 2, 3

Các gen kháng I đã phân lập ra I, I2, I3

Bệnh héo xanh do vi khuẩn Pseudomonas solanacearum gây hạ i nhiề u ở các

nước nhiệt đới Loài vi khuẩn này đã phân lập ra 5 chủng (chúng gây bệnh ở nhiều đối tượng) Nguồn gen kháng bệnh nà y có thể tìm thấy ở các mẫu giống Hawa ii 7996,

Hawaii 7997 (chúng có nguồn gốc từ L.esculentum var Pimp ine llifolium mẫu

PI127805A), và giống Ontario 7710

Một số mẫu cà chua thuộc L.esculentum v ar cerasiforme cung cấp nguồn gen kháng bệnh thá n thư gây thố i quả (collitotriclum sp)

Nguồn gen chịu nóng được tìm thấy ở L Esculentum var cerasiforme Nhiều

mẫu giống khác có khả năng chịu nóng cao như UG – 6512, Farthest North, Delta –

10, Otoba – 33, Starfire, Bereks 29 Nhiều mẫu giống chịu nóng đã được phân lập ở vùng nhiệt đới Các mẫu giố ng chịu nóng của trung tâm rau Châu Á AVRDC (Cl.5915 – 93D4 – 1 – 0 – 3, CL 735, CLN 130 DC4- 20-0, ).Ở Việt Na m đã chọn lọc được các

giống chịu nóng như CS 1 (trung tâm rau hoa quả Hà Nội), MV1 và một số dòng khác (Bộ môn Di truyền - chọn giố ng cây trồng, ĐHNN1 Hà Nội)

Cà chua L Esculentum var pimpinellifolium và L.esc var cerasiforme là

nguồn vật liệ u tốt cho tạo giống chin sớm Ở cà chua trồng, tính chín sớm, qủa tập trung có thể tìm thấ y ở nhiề u giống như: Lada, Rannii – 83, Bodinski, Bebi, Bonita, Rocket, Ở Việt Nam đã đưa ra giống chín sớm điển hình như MV1 và một số mẫu giống khác

Các loài L.peruvianum, L.chessmanii, L.pennellii có khả năng chịu mặn tốt Chịu hạn tốt còn tìm thấ y ở L.pennelli

2 QUÁ TRÌNH TẠO GIỐNG CÀ CHUA

2.1 M ục tiêu và phương hướng chọn giống

Một giống mới đưa ra phải có tiề m năng nă ng suất cao, chất lượng quả đáp ứng cho các nhu cầu sử dụng tươi hay các dạng chế biến Bên cạnh đó, giống cần có khả năng thích ứng rộng Năng suất của giống trong điều kiện mô i trường biế n động là kết quả phối hợp giữa tiềm năng năng suất của chúng với chống chịu sinh thá i, đó cũng

là vấn đề phức tạp nhất của chọn giống Với mỗ i mục tiêu sử dụng sản phẩm, ở mỗ i địa bàn cụ thể, các mùa vụ và đặc điểm canh tác mà mỗi chương trình tạo giố ng cần có phương hướng và nhiệ m vụ xác định nhằ m đạt được mục tiêu cuối cùng đề ra

2.2 Nguồn đa dạng di truyề n cho chọn lọc

Việc tạo ra nguồn đa dạng di truyề n và phương thức sử dụng chúng quyết định kết quả của chương trình tạo giống Nguồn đa dạng di truyền có thể thu được từ:

- Tập đoàn các mẫ u giố ng nhập nội, địa phương, từ các loài trồng trọt, hoang dại và bán hoang dại

- Quần thể tạo thành từ la i trong loài, lai khác loài

Trong chọn giống cà chua, phương pháp la i hữu tính vẫn là phương pháp chủ yếu và có hiệ u quả nhất

Cần tiến hành chọn bố mẹ để đưa vào các quá trình lai nhằ m thu nạp các tính trạng mới, tạo các tổ hợp gen mới, hoặc tạo các biến dị tăng tiến

Lai cà chua

Ở cà chua, hoa cấu tạo thành chùm (h.4) Hoa cà chua thuộc dạng lưỡng tính Nhị đực bao gồm các bao phấn liên kết nhau tạo thành hình nón bao quanh nhuỵ cái Khi cánh hoa mở 1 – 2 ngà y (bao phấn mở theo chiều dọc ở phía trong) sẽ xảy ra tự thụ phấn Khử đực ở cây mẹ cần thực hiện trước khi bao phấn mở Quan sát hoa ở trạng thái nụ, khi cánh hoa chuyển màu chuẩn bị mở, hoặc mới hé mở là thời điểm khử đực Dùng panh gạt các cánh hoa, tách bỏ các bao phấn Chú ý vòi nhuỵ cái còn nguyên vẹn Sau khi khử đực dùng bông bao hoa lại để cách li

Phấn của cây bố được thu từ bao phấn khi cánh hoa đã mở toàn bộ, màu vàng tươi Chú ý lấ y phấn ở các hoa mới mở, vào buổi sáng Sau khi khử đực ở cây mẹ 1

ngà y, tiến hành thụ phấn Tháo bông cách li, dùng đầu panh, que, hay đầu chổi lông nhỏ lấ y phấn đưa lên đầu vòi nhuỵ cái, sau đó hoa được bọc bông cách li trở lại

Sau khi lai, cây mẹ được đeo thẻ, ghi rõ tổ hợp lai Khi hoa đã thụ phấn khoảng 4 – 5 ngày, bầu nhuỵ cái bắt đầu nở phình ra, báo hiệu hoa lai đậu quả Các hoa

ở chùm không phát triển đều nha u, vì thế chúng có thể được lai một vài lần Các hoa không lai cần ngắt bỏ Mỗi cây có thể lai tới 20 – 25 hoa

Cũng như ở các đối tượng khác, ở cà chua lựa chọn bố mẹ đưa vào các tổ hợp lai theo kế hoạch vạch ra: lai đơn (P1 P2), la i ba (P1 P2) P3, lai kép (P1 P2) (P3

P4) lai trở lạ i (lai hồi quy, lai bão hoà) Sau đây là một số sơ đồ la i

Phương pháp lai trở lại thường dùng để chuyển một số gen giá trị từ dạng cho (DP) tới dạng nhân (RCP) nhằm cải tiến, bổ sung thêm gen mới, theo sơ đồ như sau:

1) Chọn lọc phả hệ (Pedigree method) Phương pháp này có hiệu quả tốt, tập trung chọn lọc ra các kiểu gen cần thiết, được phâ n lập chi tiết ngay từ quần thể phân li

F2 Ở kết quả có thể thu được các dòng giá trị, chúng được đánh giá khá chuẩn xác trước khi đưa thử nghiệ m Cần chú ý tới điều kiện môi trường, ở đó các gen quan trọng phải được thể hiện để có thể chọn lọc ở nhiều thế hệ Công việc chọn lọc, đòi hỏi tinh

tế, quan sát từng cá thể, đòi hỏi công sức tốn ké m và thời gia n tiến hành khá lâu dài

Ở nhiều trường hợp, để giả m bớt khối lượng công việc và thời gian chọn giống, có thể áp dụng chọn lọc pedigree gián đoạn Thu hoạch F3 theo phân lập các dòng Ở F4 bắt đầu tiến hà nh các công việc đánh giá, so sánh, thử nghiệ m các dòng trong một số thế hệ Ở một số thế hệ chỉ tiế n hành chọn lọc quần thể dương tính (hay

âm tính) Sau khi tuyể n chọn ra một số dòng có thể đáp ứng cho thử nghiệm sản xuất (số dòng này đã ở đời F6, F7) chúng tiếp tục được chọn lọc để thu dòng cho thử nghiệm sản xuất

Ở cà chua mỗi tổ hợp la i trồng khoảng 15 cây F1, F2 của mỗi tổ hợp nghiên cứu khoảng 200 – 400cây (tuỳ thuộc vào các trường hợp cụ thể) Ở các dòng chọn lọc (từ F3 và các thế hệ) trồng khoảng 30 – 60cây

2) Bulk Method (phương pháp chọn lọc hỗn hợp cải tiến)

Ở đây không tiến hành phân lập dòng từ quần thể F2 Sau một số thế hệ cho tự thụ, tới đời chọn lọc quần thể đã có mức đồng hợp tử khá cao